專利名稱：一種具有抗炎和抗感染作用的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種具有抗炎和抗感染作用的藥物組合物，該組合物由含一定比例的穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的組成。
背景技術(shù)：
穿心蓮為常用中藥，具有清熱解毒、涼血消腫等功效，臨床上多用于上呼吸道感染、急性菌痢、胃腸炎、感冒發(fā)熱及高血壓等心血管疾病的治療。實(shí)驗(yàn)表明，穿心蓮灌服對角叉菜膠、蛋清所致大鼠足跖腫脹兩種致炎模型均有明顯抗炎作用穿心蓮膠囊的抗炎作用研究．陳國祥等．現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2001，6(10)。其主要有效成分為一組內(nèi)酯類化合物，稱為穿心蓮總內(nèi)酯，包括如下單體成分，穿心蓮內(nèi)酯(Andrographolide，又稱穿心蓮乙素)、去氧穿心蓮內(nèi)酯(Deoxyandrographolide，又稱穿心蓮甲素)、新穿心蓮內(nèi)酯(Neoandrographolide，又稱穿心蓮丙素)、高穿心蓮內(nèi)酯(Homoandrographolide)、14-去氧-11-氧化穿心蓮內(nèi)酯(14-Deoxy-11-oxoandrographolide)、脫水穿心蓮內(nèi)酯(14-Deoxy-11，12-didehydro-andrographolide，又稱穿心蓮丁素)、穿心蓮苷(Andrographoside，又稱穿心蓮內(nèi)酯苷)、14-去氧穿心蓮苷(14-Deoxyan2drographoside)等。其中穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯均具有一定抗炎作用，但二者在一定比例下的協(xié)同作用未見報(bào)道。
粉碎后的穿心蓮全草以10倍量的65％乙醇60℃下浸提兩次，每次2小時，合并浸提液，回收乙醇后以69-90℃的石油醚萃取以去除葉綠素等脂溶性雜質(zhì)。最后加入等體積的20％乙醇，過濾后上大孔吸附樹脂，以95％的乙醇洗脫，得穿心蓮總內(nèi)酯。穿心蓮總內(nèi)酯經(jīng)硅膠柱層析、重結(jié)晶后可得穿心蓮內(nèi)酯及脫水穿心蓮內(nèi)酯純品。
我們的藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)證明穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯均具有一定抗炎作用，二者具協(xié)同作用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種用于具有抗炎抗感染作用的藥用組合物，其特征是含有重量比為1∶0.2~1∶0.5的穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯，穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的含量之和大于50％，優(yōu)選大于80％。
本發(fā)明的另一目的是提供該組合物可以與藥學(xué)上可接受的藥用輔料混合，制成臨床上可使用的各種制劑，如口服制劑、注射用制劑、外用制劑等。
為了探討穿心蓮所含成分的抗炎作用，發(fā)明人對其進(jìn)行了有效部位的提取、單體成分的分離及藥效學(xué)篩選工作。
本發(fā)明以10倍量的65％乙醇60℃下浸提粉碎后的穿心蓮全草兩次，每次2小時，合并浸提液，回收乙醇后以69-90℃的石油醚萃取回收液，去除葉綠素等脂溶性雜質(zhì)。余液加入等體積的20％乙醇，過濾后上大孔吸附樹脂，以95％的乙醇洗脫，得穿心蓮總內(nèi)酯。穿心蓮總內(nèi)酯經(jīng)硅膠柱層析、重結(jié)晶后可得穿心蓮內(nèi)酯及脫水穿心蓮內(nèi)酯純品。
藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)表明穿心蓮內(nèi)酯、脫水穿心蓮內(nèi)酯對角叉萊膠致大鼠足跖腫脹，對二甲苯致小鼠耳廓腫脹、對醋酸所致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性的升高均有顯著的抑制作用，并且二者具協(xié)同作用。
下面給出具體的實(shí)施例和藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)對本發(fā)明作出進(jìn)一步說明。
具體實(shí)施例方式
制備例1穿心蓮總內(nèi)酯的制備100g穿心蓮全草，粉碎后加入1000ml60％的乙醇溶液浸提2次，每次2小時。合并浸提液，回收乙醇后以等體積69-90℃的石油醚萃取兩次，余液加入等體積20％的乙醇溶液，過濾，濾液上大孔吸附樹脂，以水沖洗3個柱床體積后，以95％乙醇洗脫，回收洗脫液，真空干燥，即得穿心蓮總內(nèi)酯制備例2脫水穿心蓮內(nèi)酯的制備取上述制備例1所述穿心蓮總內(nèi)酯10g，溶于無水乙醇，100～120目柱層析硅膠1∶1拌樣。取200-300目柱層析硅膠200g，濕法裝柱；以氯仿-甲醇(50∶1)洗脫，TLC檢測，收集含有脫水穿心蓮內(nèi)酯的部分，回收溶劑，所得粉末以氯仿重結(jié)晶得脫水穿心蓮內(nèi)酯0.5g，HPLC外標(biāo)法測得含量98.2％。制備例3穿心蓮內(nèi)酯的制備取上述制備例1所述穿心蓮總內(nèi)酯10g，溶于無水乙醇，100～120目柱層析硅膠1∶1拌樣。取200-300目柱層析硅膠200g，濕法裝柱；以氯仿-甲醇(50∶1)洗脫，TLC檢測，收集含有穿心蓮內(nèi)酯的部分，回收溶劑，所得粉末以氯仿重結(jié)晶得脫水穿心蓮內(nèi)酯1.1g，HPLC外標(biāo)法測得含量98.7％。
實(shí)驗(yàn)例1穿心蓮內(nèi)酯、脫水穿心蓮內(nèi)酯對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響取健康昆明種小鼠80只，體重20±2g，隨機(jī)分為脫水穿心蓮內(nèi)酯低劑量組(20mg/kg)、中劑量組(60mg/kg)、高劑量組(180mg/kg)，穿心蓮內(nèi)酯低劑量組(20mg/kg)、中劑量組(60mg/kg)、高劑量組(180mg/kg)，模型對照組，陽性對照組(地塞米松2mg/kg)，每組10只。每組動物灌胃給藥三天，末次給藥后40min，將50μl二甲苯涂于小鼠右耳廓兩面致炎，左耳作為對照，致炎后1h斷頸處死動力，沿耳廓基線剪下兩耳，用直徑9mm的打孔器分別在同一部位打下耳片，即時稱重，計(jì)算各組腫脹度。結(jié)果如表1。
表1 穿心蓮內(nèi)酯、脫水穿心蓮內(nèi)酯對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響


與模型組比較*p＜0.05，**p＜0.01實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明脫水穿心蓮內(nèi)酯和穿心蓮內(nèi)酯的中、高劑量組對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹有顯著性抑制作用，且呈量效依賴關(guān)系。
實(shí)驗(yàn)例2不同比例的穿心蓮內(nèi)酯、脫水穿心蓮內(nèi)酯對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響取健康昆明種小鼠60只，體重20±2g，隨機(jī)分為脫水穿心蓮內(nèi)酯組(60mg/kg)、穿心蓮內(nèi)酯組(60mg/kg)、藥物組合物A組(60mg/kg，脫水穿心蓮內(nèi)酯∶穿心蓮內(nèi)酯1∶2)、藥物組合物B組(60mg/kg，脫水穿心蓮內(nèi)酯∶穿心蓮內(nèi)酯1∶5)、模型對照組，陽性對照組(地塞米松2mg/kg)，每組動物灌胃給藥三天，末次給藥后40min，將50μl二甲苯涂于小鼠右耳廓兩面致炎，左耳作為對照，致炎后1h斷頸處死動力，沿耳廓基線剪下兩耳，用直徑9mm的打孔器分別在同一部位打下耳片，即時稱重，計(jì)算各組腫脹度。結(jié)果如表2。
表2 不同比例的穿心蓮內(nèi)酯、脫水穿心蓮內(nèi)酯組合物對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響

與模型組比較*p＜0.05，**p＜0.01；與脫水穿心蓮內(nèi)酯、或與穿心蓮內(nèi)酯組比較△p＜0.01實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明不同配比的脫水穿心蓮內(nèi)酯和穿心蓮內(nèi)酯(60mg/kg)對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹有顯著性抑制作用，在劑量相等的情況下，作用明顯優(yōu)于單用脫水穿心蓮內(nèi)酯或穿心蓮內(nèi)酯，提示組合物中脫水穿心蓮內(nèi)酯和穿心蓮內(nèi)酯具有協(xié)同作用。
實(shí)驗(yàn)例3對酵母所致發(fā)熱大鼠的解熱作用大鼠于實(shí)驗(yàn)室[室溫為(22±1)℃]適應(yīng)5天，每日適應(yīng)性測肛溫2次，連續(xù)2天。正式實(shí)驗(yàn)前禁食12天，自由飲水，次晨測肛溫2次，間隔1h，取平均值為正常體溫。選取2次溫差不超過0.3℃，平均體溫在36.6～38.3℃的大鼠，于背部皮下注射20％酵母懸液10mL/kg。致熱6h后，取體溫升高0.8℃以上的大鼠40只，隨機(jī)分為4組，分別為溶媒對照組、陽性對照組(2％阿司匹林)、藥物組合物A組(脫水穿心蓮內(nèi)酯∶穿心蓮內(nèi)酯1∶2)、藥物組合物B組(脫水穿心蓮內(nèi)酯∶穿心蓮內(nèi)酯1∶5)，藥液經(jīng)37.5℃水浴溫化后，各組大鼠以10mL/kg等容積灌胃給藥。藥后1、2、3、4、5h各測肛溫1次。以正常體溫為基數(shù)，計(jì)算各時間點(diǎn)體溫變化值。結(jié)果見表3。
表3 各試驗(yàn)藥物對酵母所致發(fā)熱大鼠解熱作用的影響

注與溶媒組比較，*P＜0.05，**P＜0.01；實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，脫水穿心蓮內(nèi)酯和穿心蓮內(nèi)酯的組合物對干酵母引起的大鼠發(fā)熱有顯著解熱作用。
綜上，脫水穿心蓮內(nèi)酯和穿心蓮內(nèi)酯的組合物在解熱、抗炎等方面較單一成份用藥具有顯著的協(xié)同作用。
權(quán)利要求
1.一種用于制備抗炎與抗感染藥物的藥物組合物，其特征在于含有治療劑量的穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯及藥學(xué)上可接受的載體，脫水穿心蓮內(nèi)酯和穿心蓮內(nèi)酯的重量比為1∶2～1∶5 。
2.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的含量之和大于50％。
3.如權(quán)利要求2所述的藥物組合物，其特征在于穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的含量之和大于80％。
4.如權(quán)利要求1所述的抗炎藥物，可用于治療各種感染性疾病，具體如上呼吸道感染、肺炎、細(xì)菌性痢疾等。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種具有抗炎和抗感染作用的藥物組合物，該組合物由含一定比例的穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的組成。該組合物與藥用載體組合經(jīng)相應(yīng)的制劑工藝可以制成各種臨床適用的劑型。該組合物有效成分清楚，含量高，療效確切，安全性好，較穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯單一應(yīng)用具有更好的抗感染與抗炎效果。
文檔編號A61P31/04GK101028262SQ20061003409
公開日2007年9月5日 申請日期2006年3月2日 優(yōu)先權(quán)日2006年3月2日
發(fā)明者劉軍鋒, 吳巍, 邵萌, 滕厚雷, 翟大偉, 于翠翠, 韓飛 申請人:海南盛科天然藥物研究院有限公司