專利名稱：含紫杉醇的天然植物提取物的復(fù)方藥物及其抗癌應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種用于抗癌的口服藥物組合物及其用途，更具體地 講，本發(fā)明涉及一種包括含紫杉醇成分的天然植物提取物和含抑制 P-糖蛋白活性的成分的天然植物提取物的復(fù)方藥物及其用途。技術(shù)背景癌癥是當(dāng)前對(duì)人類健康和生命危害最大的疾病之一。據(jù)統(tǒng)計(jì)，癌癥導(dǎo)致死亡人數(shù)全球每年超過(guò)600萬(wàn)人，而且呈上升趨勢(shì)。高效抗癌 藥物的開發(fā)是當(dāng)前藥物研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)課題。紫杉醇(Paclitaxel,商品名Taxol)具有廣語(yǔ)抗癌活性，對(duì)卵巢 癌、乳腺癌、非小細(xì)胞性肺癌有明顯療效，是近二十年來(lái)發(fā)現(xiàn)的臨床 治療效果最好的一種抗癌藥物。1992年紫杉醇被美國(guó)FDA正式批準(zhǔn)為 抗癌新藥，是治療卵巢癌、乳腺癌的首選藥物，對(duì)肺癌、鼻咽癌、頭 頸癌亦有顯著療效。紫杉醇可從紅豆杉(拉丁名為7"ajn/s始cf/a)植物中提取。目前， 紫杉醇主要依賴從天然紅豆杉樹皮中提取，因紅豆杉生長(zhǎng)慢，樹皮中 紫杉醇含量低，藥源奇缺，價(jià)格昂貴。近年來(lái)，世界各地野生紅豆杉 資源己遭到嚴(yán)重破壞，造成了嚴(yán)重的環(huán)境破壞。進(jìn)行紅豆杉的規(guī)?；?br> 種植，從紅豆杉樹的枝葉中提取紫杉醇，是一個(gè)可行的辦法。但通過(guò)進(jìn)行紅豆杉的規(guī)^莫化種植解決紫杉醇藥源，存在兩個(gè)問題 一是紅豆 杉樹的枝葉中紫杉醇的含量。據(jù)報(bào)道，許多地區(qū)生長(zhǎng)的紅豆杉樹的枝 葉中，主要是含有紫杉醇前體物質(zhì)，紫杉醇本身含量很低。二是從紅 豆杉樹的枝葉中提取純紫杉醇工藝復(fù)雜，成本高。目前，臨床用的紫杉醇制劑中，基本上為注射制劑。對(duì)患者來(lái)說(shuō)， 注射制劑在很多場(chǎng)合下是不方便的。如果將紫杉醇制成為口服制劑， 可以極大地方便患者。但紫杉醇通過(guò)口服吸收進(jìn)入細(xì)胞后，由于細(xì)胞 內(nèi)存在一種特殊的P-糖蛋白，能夠?qū)⒏咧苄宰仙即寂懦黾?xì)胞外， 造成紫杉醇生物利用度低和藥效低。而中藥淫羊藿提取物和火把花根提取物具有良好的抑制P-糖蛋 白(P-gp)活性功能(參考文獻(xiàn)Denis Barron, et al., Isoprenoid f lavonoids are new leads in the modulation of chemoresistance, 戶A^ocAe肌'Wr/ZfeWe將，2002， 1， 325—332;姚逸等，昆明山海裳 的研究相克況，/^，庫(kù)秀資屋，2001, 12， 1129-1131)。因而，有必要提供一種生物利用度高的紫杉醇口服制劑，在不降 低藥效的前提下，盡可能地方便患者。發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種生物利用度高的紫杉醇口服制劑，作為 抗癌藥物。 為實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明提供了 一種用于抗癌的口服藥物組 合物，該藥物組合物含有抑制癌細(xì)胞的成分紫杉醇、抑制P-糖蛋白 活性的成分以及藥學(xué)上可接受的輔助劑。其中，抑制P-糖蛋白活性 的成分的主要作用是提高紫杉醇的生物利用度。本發(fā)明中，所使用的紫杉醇以及抑制P-糖蛋白活性的成分可以 是化學(xué)合成的化合物或物質(zhì)，也可以是天然植物的提取物，優(yōu)選為天 然植物的提取物。其中，紫杉醇與抑制P-糖蛋白活性的成分的比例在10: 1-1: IO之間，優(yōu)選在5: 1-1: 5之間；而且以重量百分含量 計(jì)，紫杉醇占整個(gè)藥物組合物總重量的0. 05-10%,優(yōu)選為0.1-5%; 抑制P-糖蛋白活性的成分占整個(gè)藥物組合物總重量的0.05-10%，優(yōu) 選為0. 1-5%。本發(fā)明中，紫杉醇是紫杉醇口服抗癌藥物的主要有效成分，而抑 制P-糖蛋白活性的成分是紫杉醇口服抗癌藥物的主要輔助成分，其 作用是抑制癌細(xì)胞對(duì)紫杉醇藥物的外排功能，提高紫杉醇的口服生物 利用度和抗癌效果。優(yōu)選地，本發(fā)明中所使用的紫杉醇是一種含紫杉醇成分的天然植 物提取物，例如紅豆杉提取物。發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，中國(guó)廣東梅州丘陵山地 種植的紅豆杉的枝葉中紫杉醇含量較高(含量平均在2/10000以上), 采用這種紅豆杉的枝葉為原料，可以提取得到含紫杉醇1-6%的提取 物，可作為紫杉醇口服制劑的優(yōu)良原料。因而，本發(fā)明中所使用的紫 杉醇更優(yōu)選為紅豆杉枝葉的提取物。優(yōu)選地,本發(fā)明中所使用的抑制P-糖蛋白活性的成分是從淫羊愛 中提取的淫羊藿甙或從火把花根中提取的生物堿。其中，淫羊藿發(fā)拉丁名稱為丑Ei A4五尸7MED//，可以是但不限于小檗科植物淫羊蓑 (E/^me力'w/w 6revZcor"ww A/aw'm )、箭葉淫羊霍(五/ /附a^Y/m sag/"a似m 廣S/e6.Zmcc /Wox/w )、柔毛淫羊藿(￡p/;wefi /Mm/ t/6esce"s A/ow>w )、巫山淫羊藿(￡/7/me^/m wM^wwe似e Z S. Kwg)、或朝鮮淫羊藿 (五; /附e力'ww Aoreflt/m iVaA^n')等；火把花的4立丁名為Z^o"to/ od/w附本發(fā)明中，紅豆杉枝葉提取物中紫杉醇的含量可以達(dá)到1-6%， 淫羊藿提取物中淫羊藿甙的含量可以達(dá)到10-40%,火把花根提取物 中總生物堿的含量可以達(dá)到2-15%。本發(fā)明的口服紫杉醇復(fù)方植物藥物，可以制成片劑、顆粒劑、膠 囊劑、滴丸劑、混懸劑或乳劑的形式使用，其給藥途徑為口服。另一方面，本發(fā)明還提供了上述藥物組合物在治療癌癥方面的用 途，例如治療卵巢癌、乳腺癌肺癌、鼻咽癌或頭頸癌等。特別地，本 發(fā)明提供了是由紅豆杉樹的枝葉提取物與淫羊藿提取物、或紅豆杉樹 的枝葉提取物與火把花根提取物以及藥學(xué)上可接受的輔助劑組合而 成的復(fù)方藥物在治療癌癥發(fā)明的用途。本發(fā)明的紫杉醇口服藥物可以是由紅豆杉樹的枝葉提取物和淫 羊藿提取物或火把花根提取物為主要原料制備的復(fù)方天然植物藥，具 有良好的口服生物利用度和抗癌藥效，而且副作用小。通過(guò)藥代學(xué)試 驗(yàn)表明，本發(fā)明的口服紫杉醇復(fù)方植物藥物，具有良好的口服生物利
用度，達(dá)到了 口月l抗癌藥物要求，而且副作用小，具有作為新型口服 抗癌藥物應(yīng)用的廣闊前景。通過(guò)動(dòng)物試驗(yàn)表明，本發(fā)明的口服復(fù)方紫杉醇藥物，具有顯著的 抑制體內(nèi)癌腫瘤發(fā)展的作用，具有顯著的抗癌效果。以下通過(guò)實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明，但本發(fā)明并不限于以下 的具體實(shí)施方式
；任何在本發(fā)明技術(shù)方案基礎(chǔ)上的改變或改進(jìn)，仍屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例1紅豆杉的枝葉提取物的制備干凈和干燥的紅豆杉枝葉，粉碎至60目，用80-95%的乙醇在室 溫條件下提取，攪拌l-5小時(shí)，過(guò)濾。此提取過(guò)程重復(fù)3次，合并濾 液，減壓脫除溶劑后，得到提取物浸青。浸青用硅膠層析柱分離，先 用石油醚除去色素及高脂溶性部分，再用丙酮-石油醚混合溶劑洗脫， 洗脫液經(jīng)脫溶后，得到含紫杉醇1_6%提取物。該提取物中，還含有 約O. 8%的三尖杉寧，0. 3%，的巴卡亭111和0. 7%的IO-DAB等紫杉醇 前體物或類似物。實(shí)施例2淫羊愛提取物和火把花根提取物的制備 淫羊藿提取物將干凈的淫羊藿莖和葉，粉碎至50目，用70%的
乙醇回流提取，脫除溶劑后，得到提取物浸膏。提取物浸骨用曱醇溶解，除去不溶解雜質(zhì)，可以得到淫羊藿戒含量為10-40%的提取物?；鸢鸦ǜ崛∥飳⒏蓛舻幕鸢鸦ǖ母テぃ鬯橹?0目，分別 用50%和95%的乙醇回流提取，合并提取液，脫除溶劑后，得到提取 物浸膏。提取物浸青用甲醇溶解，除去不溶解雜質(zhì)，可以得到總生物 堿含量為2-15%的火把花根提取物。實(shí)施例3紅豆杉提取物與淫羊藿提取物為主要原料制備復(fù)方片劑原料紅豆杉枝葉提取物(含紫杉醇1-6%)、淫羊藿提取物(含 淫羊藿甙10_40%)、淀粉和滑石粉。取處方量紅豆杉提取物、淫羊藿 提取物和淀粉，混勻，過(guò)80目篩。加水制軟材，過(guò)20目篩制粒，于 55-60。C溫度下干燥，20目篩整粒，加入處方量滑石粉，混勻，壓片。 制得的復(fù)方片劑中，其每片的片重為0.5-1. 5克；每片片劑中含紫杉 醇l-5mg、含淫羊藿甙0. 5-5mg。實(shí)施例4紅豆杉提取物與火把花根提取物為主要原料制備復(fù)方滴丸劑原料紅豆杉枝葉提取物、火把花根提取物和PEG400。取處方 量紅豆杉提取物和火把花根提取物，混合粉碎，過(guò)80目篩。再與 PEG400混合，加熱熔融，置滴丸制備裝置中，保溫9(TC,滴入0°C 二曱基硅油中，收集，除盡冷凝劑，選粒，即得。制得的復(fù)方片劑中， 其每片的片重為0.5-1.5克；每片片劑中含紫杉醇0.5-2.5mg、含火
把花根總生物堿0. 25-2. 25mg。實(shí)施例5紫杉醇口服復(fù)方藥物體內(nèi)生物利用度試驗(yàn)選SD大鼠，設(shè)紅豆杉提取物組，紅豆杉提取物+淫羊泰提取物復(fù)方 組，紅豆杉提取物+火把花根提取物復(fù)方組。將待試藥物制成混懸液 后以灌胃方式口服給藥。給藥劑量分別為紅豆杉提取物組，30 mg (紫杉醇)/天；紅豆杉提取物+淫羊藿提取物復(fù)方組，30mg(紫杉 醇)+ 15mg(淫羊愛甙)/天；紅豆杉提取物+火把花根提取物復(fù)方組， 30 mg (紫杉醇)+ 10mg(火把花根總生物堿)/天。按實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)時(shí)間點(diǎn) 在大鼠右頸靜脈a，應(yīng)用高效液相色鐠法檢測(cè)血漿中紫杉醇濃度。結(jié)果與單獨(dú)口服紅豆杉提取物組比較，在紅豆杉提取物+淫羊藿 提取物復(fù)方組中，紫杉醇在大鼠體內(nèi)的血藥濃度顯著提高，藥時(shí)曲線 下面積也有顯著提高。紫杉醇的相對(duì)生物利用度(RB%)為單用紅豆 杉提取物組的12. l倍。與單獨(dú)口服紅豆杉提取物組比較，在紅豆杉提取物+火把花4艮提取 物復(fù)方組中，紫杉醇在大鼠體內(nèi)的血藥濃度顯著提高，藥時(shí)曲線下面 積也有顯著提高。紫杉醇的相對(duì)生物利用度(RB%)為單用紫杉醇對(duì) 照組的8. 5倍。結(jié)論紅豆杉提取物+淫羊藿提取物組成的復(fù)方藥和紅豆杉提取物 +火把花根提取物組成的復(fù)方藥，能顯著提高紫杉醇的口服生物利用度。
實(shí)施例6紫杉醇口服復(fù)方藥物抗癌作用試驗(yàn)選昆明小鼠(n級(jí)-清潔級(jí))iio只，隨機(jī)分為ii組，用艾氏腹水 瘤的實(shí)體型(ESC)瘤抹處理，建立小鼠移植性肺瘤模型。藥物抗癌 試驗(yàn)時(shí)間為io天連續(xù)給藥，通過(guò)測(cè)定各組受試肺瘤模型小鼠平均瘤重，計(jì)算出抑瘤率。第l組為對(duì)照組，不給藥；第2組為陽(yáng)性對(duì)照組， 環(huán)磷酰胺注射，劑量為60 mg/天；第3組-第5組為紅豆杉提取物組， 口服，劑量分別為lmg/天、2. 5mg/天、5 mg/天；第6組-第8組為紅 豆杉提取物+淫羊藿提取物復(fù)方組，口服，劑量分別為l mg/天、2. 5 mg/ 天、5 mg/天；第9組-第ll組為紅豆杉提取物+火把花根提取物復(fù)方 組，口服，劑量分別為l mg/天、2.5 mg/天、5 mg/天。紫杉醇口服復(fù)方藥物的抗癌(EAC)作用(ig,qdxlOd) 組別 劑量(mg/kg/天)抑瘤率％對(duì)照組 0 0環(huán)磷酰胺(陽(yáng)性對(duì)照，注射)60.0 50.6紫杉醇提取物組(口服) 1.0 6.52.5 12.05.0 20.7紫杉醇+淫羊藿復(fù)方(口服) i.o 36.62.5 47.45. 0 60. 8紫杉醇+火把花根復(fù)方(口服)1.0 28.52.5 41.35. 0 52.權(quán)利要求
1、一種用于抗癌的口服藥物組合物，該藥物組合物含有抑制癌細(xì)胞的成分紫杉醇、抑制P-糖蛋白活性的成分以及藥學(xué)上可接受的輔助劑。。
2、 如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于，所述的藥物 組合物包括含紫杉醇成分的天然植物提取物；以及 含抑制P-糖蛋白活性的成分的天然植物提取物， 其中，所述的紫杉醇與所述抑制P-糖蛋白活性的成分的比例在 10: 1-1: IO之間；以重量百分含量計(jì)，所述的紫杉醇占所述藥物組 合物總重量的0.1-10%，所述抑制P-糖蛋白活性的成分占所述藥物組 合物總重量的0. 05-10%。
3、 如權(quán)利要求2所述的藥物組合物，其特征在于，所述的抑制 P-糖蛋白活性的成分是淫羊藿戒和/或火把花根中提取的生物堿。
4、 如權(quán)利要求2所述的藥物組合物，其特征在于，含紫杉醇成 分的天然植物提取物是紅豆杉枝葉提取物。
5、 如權(quán)利要求2所述的藥物組合物，其特征在于，所述的含抑 制P-糖蛋白活性的成分的天然植物提取物是淫羊藿提取物和/或火把 花根提取物。
6、 如權(quán)利要求4所述的藥物組合物，其特征在于，所述的紅豆 杉枝葉提取物中紫杉醇的含量為1-6%。
7、 如權(quán)利要求5所述的藥物組合物，其特征在于，所述的淫羊 藿提取物中淫羊藿戒的含量為10-40%。
8、 如權(quán)利要求5所述的藥物組合物，其特征在于，所述的火把 花根提取物中總生物堿的含量為2-15%。
9、 如權(quán)利要求1-8之一所述的藥物組合物在制備治療癌癥的口 服藥物方面的用途。
10、 如權(quán)利要求9所述的用途，其特征在于，所述的癌癥是卵巢 癌、乳腺癌肺癌、鼻咽癌或頭頸癌。
全文摘要
本發(fā)明涉及應(yīng)用紅豆杉枝葉提取物制備含紫杉醇成分的天然植物復(fù)方藥物及其作為口服抗癌藥物的應(yīng)用。本發(fā)明為口服紫杉醇天然植物復(fù)方藥物，主要組分為紅豆杉枝葉提取物(含紫杉醇1-6％)、淫羊藿提取物(含淫羊藿甙10-40％)或火把花根提取物(含總生物堿2-15％)；其中，紅豆杉枝葉提取物為抗癌主體成分，淫羊藿提取物和火把花根提取物通過(guò)抑制細(xì)胞的藥物外排功能，提高紫杉醇的口服生物利用度和抗癌效果。實(shí)驗(yàn)證明，本發(fā)明的口服紫杉醇復(fù)方藥物，對(duì)試驗(yàn)動(dòng)物的卵巢癌、乳腺癌、肺癌等具有明顯的抑制作用。
文檔編號(hào)A61K36/37GK101134057SQ20061003741
公開日2008年3月5日 申請(qǐng)日期2006年9月1日 優(yōu)先權(quán)日2006年9月1日
發(fā)明者嵐 何, 劉培慶, 古練權(quán), 張京維, 李志良, 王國(guó)亮, 趙春順, 民 黃, 黃志紓 申請(qǐng)人:中山大學(xué);廣東杉維生物醫(yī)藥集團(tuán)有限公司