專利名稱：牛乳鐵蛋白在治療胃病和減少胃酸分泌藥品中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及牛乳鐵蛋白在制備治療幽門螺旋桿菌及幽門螺桿菌耐藥菌株感染性胃炎、胃潰瘍，修復(fù)胃粘膜，減少胃酸分泌病藥品，保健食品，功能性食品中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
急性胃炎，慢性胃炎，消化道潰瘍及胃粘膜脫垂都涉及到粘膜受損的情況，急性胃炎包括急性腐蝕性胃炎，急性單純性胃炎，急性感染性胃炎，急性化膿性胃炎及急性出血糜爛性胃炎，大都是由細(xì)菌，病毒，幽門螺旋桿菌感染，精神因素，物理及精神因素，化學(xué)因素，食物刺激及藥物刺激所引起，其病理表現(xiàn)都涉及到胃粘膜損傷。消化性潰瘍包括胃潰瘍，十二指腸潰瘍，可能是神經(jīng)緊張，因環(huán)境所造成的精神緊張，飲食不調(diào)，長(zhǎng)期進(jìn)食刺激性食物，藥物刺激等引起的胃粘膜損傷，胃酸分泌增多及胃蛋白酶分泌失常，也有人認(rèn)為因?yàn)橛拈T螺旋桿菌感染有關(guān)，治療藥物中要加保護(hù)胃粘膜藥物。慢性胃炎包括胃體胃炎，胃竇胃炎及慢性糜爛性胃炎，其起因可能胃酸分泌過(guò)多，幽門螺旋桿菌感染，免疫因素，煙，酒等食物刺激及膽汁反流有關(guān)。目前治療尚無(wú)特效療法。
胃粘膜脫垂可能是胃粘膜的慢性炎癥以及精神因素，食物刺激等引起。
上面的幾種消化道的疾病以目前的治療過(guò)程都需抗幽門螺旋桿菌感染，保護(hù)胃粘膜以使其能夠修復(fù)，減少胃酸分泌使胃液分泌恢復(fù)正常，對(duì)幽門螺旋桿菌感染者，目前可用枸櫞酸鉍鉀，紅霉素，慶大霉素，阿莫西林(羥氨芐青霉素)及甲硝唑聯(lián)合治療，另一種治療方案是鉍劑或質(zhì)子泵抑制劑聯(lián)合抗生素的三聯(lián)或四聯(lián)療法，但由于藥物的副作用及用藥時(shí)會(huì)導(dǎo)致幽門螺旋桿菌菌株變異成為有耐藥性菌株從而使治療失敗。
在治療中，胃粘膜的保護(hù)劑主要是采用硫酸鋁及氫氧化鋁，但其沒(méi)有對(duì)胃粘膜有修復(fù)作用，只是保護(hù)粘膜不受刺激，讓其自然恢復(fù)，而沒(méi)有主動(dòng)修復(fù)胃粘膜的功能。
在治療中，對(duì)胃酸過(guò)多的患者則是給予服用胃舒平，雷尼替丁，甲氰咪胍及氫氧化鋁凝膠，這些藥物特別是胃舒平及氫氧化鋁主要是起中和胃酸的作用。
從上面的這些眾多的治療藥物來(lái)看，沒(méi)有一個(gè)是既具有抑制幽門螺旋桿菌感染及抑制耐藥幽門螺旋桿菌感染，又能修復(fù)胃粘膜，減少胃酸分泌的藥物，都只具一個(gè)治療功能，同時(shí)這些藥物都有副作用，特別是鉍制劑屬重金屬藥物副作用很強(qiáng)，此外，使用抗生素引起的耐藥性更是使治療失敗。

發(fā)明內(nèi)容
為解決上述問(wèn)題，本發(fā)明提供的是一種從牛奶中分離出有抑制耐藥菌株，能修復(fù)胃粘膜及抑制胃酸過(guò)多的，而且安全無(wú)副作用的天然生物蛋白牛乳鐵蛋白的新應(yīng)用。牛乳鐵蛋白可以單獨(dú)使用，也可以與其它藥物，保健食品，食品共同使用以增強(qiáng)治療上述所列胃疾病效果，牛乳鐵蛋白可以作為藥物，保健食品，功能性食品，特殊食品及食品去治療上述所列的胃疾病及胃損傷。
本發(fā)明一種牛乳鐵蛋白在制備治療幽門螺旋桿菌及幽門螺桿菌耐藥菌株感染的胃炎藥品，保健食品，功能性食品中的應(yīng)用。
本發(fā)明也可以在制備治療幽門螺旋桿菌及幽門螺桿菌耐藥菌株感染的胃潰瘍病及修復(fù)胃粘膜的藥品，保健食品，功能性食品中的應(yīng)用。
本發(fā)明也可以在制備治療幽門螺旋桿菌及幽門螺桿菌耐藥菌株感染性胃病及修復(fù)胃粘膜、減少胃酸分泌的藥品，保健食品，功能性食品中的應(yīng)用。
本發(fā)明也可以在制備治療幽門螺旋桿菌及幽門螺桿菌耐藥菌株感染的胃炎、胃潰瘍及修復(fù)胃粘膜、減少胃酸分泌中與抗菌藥、胃酸分泌抑制劑、抗生素藥的聯(lián)合應(yīng)用。
一種牛乳鐵蛋白在制備治療因感染所造成的胃粘膜損傷，因化學(xué)因素所造成的胃粘膜損傷，因物理及精神因素所造成的胃粘膜損傷藥品，保健食品，功能性食品中的應(yīng)用。
牛乳鐵蛋白是指從牛奶，牛初乳，牛乳清中提取出來(lái)的或采用基因重組菌經(jīng)發(fā)酵生產(chǎn)的牛乳鐵蛋白。服用量可從每人每天10毫克到8克之間，服用可經(jīng)由口腔或鼻腔進(jìn)入胃。
牛乳鐵蛋白是牛奶中的一種含鐵的糖蛋白，除了在奶中存在外，在唾液，血清，粘膜及生殖器的分泌物中均有存在。牛乳鐵蛋白是牛奶中的一種蛋白，從數(shù)千年來(lái)人類飲服牛奶蛋白的歷史來(lái)看，牛奶蛋白是安全無(wú)副作用的。而且牛乳鐵蛋白的最大服用量可達(dá)26克每天。國(guó)外已有報(bào)導(dǎo)牛乳鐵蛋白有抑菌及抗菌作用，并認(rèn)為其抑菌及抗菌的作用是由于其與鐵離子有極高的親和力而阻止微生物利用鐵離子。國(guó)外及國(guó)內(nèi)至今均沒(méi)有發(fā)現(xiàn)及報(bào)導(dǎo)牛乳鐵蛋白能夠?qū)ξ刚衬び行迯?fù)作用，抑制胃酸過(guò)多及對(duì)耐藥的HP菌株有抑制作用，還應(yīng)該指出，耐藥的HP菌株應(yīng)與非耐藥的HP菌株視為不同的菌株，盡管在形態(tài)上是一樣的，但生理生化都已經(jīng)不一樣。
本發(fā)明介紹的是牛乳鐵蛋白有能夠修復(fù)因感染，化學(xué)因素，物理及精神因素所造成的胃粘膜損傷的作用，有抑制幽門螺旋桿菌(HP)和臨床耐藥幽門螺旋桿菌的作用，有抑制胃酸度過(guò)高的作用，因此可以作為治療急性胃炎，慢性胃炎，消化性潰瘍，胄粘膜脫落和胃酸度過(guò)高的藥物，輔助用藥及保健食品而無(wú)任何副作用。其服用量可從每天20毫克到8克之間。
經(jīng)實(shí)驗(yàn)證實(shí)牛乳鐵蛋白對(duì)幽門螺旋桿菌和其臨床耐藥菌株有抑制作用，有修復(fù)胃粘膜及抑制胃酸度過(guò)高的三重功效，對(duì)約占全球人口50％的胃幽門螺旋桿菌感染者來(lái)說(shuō)具有特殊意義。
從我們的整體動(dòng)物(大鼠，蒙古沙鼠，C57小鼠)實(shí)驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)牛乳鐵蛋白的新功能及新應(yīng)用。更重要的是6個(gè)新的發(fā)現(xiàn)，詳細(xì)實(shí)驗(yàn)過(guò)程及總結(jié)如下。


圖1為牛乳鐵蛋白主必劑對(duì)HP的殺菌曲線。
具體實(shí)施例方式
本發(fā)明牛乳鐵蛋白在治療急性胃炎，慢性胃炎，消化性潰瘍，胃酸度過(guò)高和修復(fù)胃粘膜藥物品中的應(yīng)用；將從牛奶，牛初乳，牛乳清中分離提取出來(lái)的或采用基因重組菌經(jīng)發(fā)酵生產(chǎn)的牛乳鐵蛋白，以單獨(dú)或者與其它藥物，保健食品，食品一起將其輸送到胃中使其發(fā)揮作用治療因感染幽門螺旋桿菌和其臨床耐藥菌株等急性胃炎，慢性胃炎，消化性潰瘍，及胃酸度過(guò)高癥，修復(fù)因感染，化學(xué)因素，物理及精神因素所造成的胃粘膜損傷，胃粘膜脫落與潰瘍面等。按照《新藥<西藥>臨床前研究指導(dǎo)原則匯編(藥學(xué)藥理學(xué)毒理學(xué))》中“新藥(西藥)藥理毒理學(xué)研究指導(dǎo)原則”，分別進(jìn)行了如下試驗(yàn)1、牛乳鐵蛋白對(duì)耐藥幽門螺旋桿菌(HP)的體外抗菌試驗(yàn)。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，牛乳鐵蛋白對(duì)30株HP菌其中包括6株耐藥HP菌的MIC范圍在0.625mg/ml至20mg/ml之間，MIC50為2.5mg/ml，證明牛乳L(zhǎng)F對(duì)HP確實(shí)具有較明顯的抑菌作用。同時(shí)，牛乳鐵蛋白對(duì)臨床耐藥菌株的MIC范圍在0.625mg/ml至5mg/ml之間，說(shuō)明牛乳L(zhǎng)F對(duì)耐藥HP也有較明顯的抑菌作用。
2、牛乳鐵蛋白對(duì)耐藥幽門螺旋桿菌感染動(dòng)物的治療實(shí)驗(yàn)；實(shí)驗(yàn)表明(鼠胃粘膜電鏡觀察)高劑量組(0.71g/ml)電鏡下可見(jiàn)粘膜上皮結(jié)構(gòu)完整，微絨毛可見(jiàn)，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)清晰、豐富，分泌顆粒豐富。中劑量組(0.11g/ml)電鏡下可見(jiàn)粘膜上皮結(jié)構(gòu)基本完整，微絨毛可見(jiàn)，分泌顆粒較多。低劑量組(0.01g/ml)電鏡下可見(jiàn)大部分粘膜上皮結(jié)構(gòu)完整，微絨毛可見(jiàn)，分泌顆粒較少。
陽(yáng)性對(duì)照組電鏡下可見(jiàn)表層粘膜上皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整，微絨毛可見(jiàn)，充滿分泌顆粒。
模型組電鏡下可見(jiàn)大部分表層粘膜上皮細(xì)胞壞死，不完整，微絨毛較少，分泌顆粒少。
實(shí)驗(yàn)結(jié)論牛乳鐵蛋白對(duì)HP有一定的抑制作用，同時(shí)對(duì)由HP引起的胃粘膜損傷有修復(fù)作用。
3、牛乳鐵蛋白對(duì)感染耐藥幽門螺旋桿菌小鼠的治療研究；實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明牛乳鐵蛋白對(duì)C57BL/6小鼠感染的HP有一定的抑制作用。其中的細(xì)菌學(xué)檢(查陽(yáng)性率)和尿素酶陽(yáng)性率結(jié)果與麗珠得樂(lè)(麗珠集團(tuán)麗珠制藥廠生產(chǎn)的麗珠得樂(lè)鉍劑)結(jié)果還低10個(gè)百分點(diǎn)，4、牛乳鐵蛋白對(duì)水浸應(yīng)激性胃潰瘍動(dòng)物模型的影響；本試驗(yàn)采用水浸應(yīng)激致大鼠急性胃粘膜損傷，以胃粘膜損傷長(zhǎng)度為指標(biāo)，研究牛乳鐵蛋白對(duì)水浸應(yīng)激致大鼠胃粘膜損傷的影響。結(jié)果表明，牛乳鐵蛋白能降低大鼠的潰瘍指數(shù)(降低78％，比麗珠得樂(lè)高48％，)，抑制率在28-78％之間，比麗珠得樂(lè)的抑制率多高出20個(gè)百分點(diǎn)，牛乳鐵蛋白能降低大鼠胃粘膜損傷長(zhǎng)度，對(duì)水浸應(yīng)激致大鼠急性胃粘膜損傷有一定的保護(hù)作用。
5、牛乳鐵蛋白對(duì)乙酸灼燒致大鼠胃潰瘍的影響；本試驗(yàn)采用乙酸灼燒致大鼠胃粘膜損傷，以潰瘍面積為指標(biāo)，研究牛乳鐵蛋白對(duì)乙酸灼燒致大鼠胃粘膜損傷的影響。結(jié)果表明，牛乳鐵蛋白能降低大鼠的潰瘍指數(shù)(降低65％，比麗珠得樂(lè)高52％，)，抑制率在13-66％之間，比麗珠得樂(lè)的抑制率多高出37個(gè)百分點(diǎn)，對(duì)乙酸灼燒致大鼠胃粘膜損傷有一定的保護(hù)作用，6、牛乳鐵蛋白對(duì)幽門結(jié)扎致大鼠急性胃粘膜損傷的影響；本試驗(yàn)采用幽門結(jié)扎致大鼠急性胃粘膜損傷，以潰瘍指數(shù)為指標(biāo)，研究牛乳鐵蛋白對(duì)幽門結(jié)扎致大鼠胃粘膜損傷的影響。結(jié)果表明，牛乳鐵蛋白能降低大鼠的潰瘍指數(shù)，抑制率在31-51％之間，比麗珠得樂(lè)的抑制率多高出12個(gè)百分點(diǎn)，對(duì)幽門結(jié)扎致大鼠急性胃粘膜損傷有一定的保護(hù)作用。
7、牛乳鐵蛋白對(duì)乙醇致大鼠胃黏膜損傷的影響；本試驗(yàn)用乙醇致大鼠急性胃粘膜損傷，以潰瘍指數(shù)為指標(biāo)，研究牛乳鐵蛋白對(duì)乙醇致大鼠胃粘膜損傷的影響。結(jié)果表明，牛乳鐵蛋白能降低大鼠的潰瘍指數(shù)，比麗珠得樂(lè)降低大鼠的潰瘍指數(shù)還多15％，比麗珠得樂(lè)的抑制率多高出10個(gè)百分點(diǎn)，對(duì)乙醇致大鼠急性胃粘膜損傷有一定的保護(hù)作用。
8、牛乳鐵蛋白對(duì)大鼠胃液分泌的影響試驗(yàn)。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明1.4g/kg牛乳鐵蛋白能抑制大鼠胃液分泌，減少胃液酸度。其中低劑量組(0.23g/kg)與空白對(duì)照組相比，能降低胃液36％，降低胃總酸度12％。
以上試驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，牛乳鐵蛋白對(duì)30株其中包括6株耐藥HP菌的MIC范圍在0.625mg/ml至20mg/ml之間，MIC50為2.5mg/ml，證明牛乳L(zhǎng)F對(duì)HP確實(shí)具有較明顯的抑菌作用；對(duì)HP有一定的抑制作用，同時(shí)對(duì)由HP引起的胃粘膜損傷有修復(fù)作用；對(duì)C57BL/6小鼠感染的HP有一定的抑制作用；能降低大鼠胃粘膜損傷度，對(duì)水浸應(yīng)激致大鼠急性胃粘膜損傷有一定的保護(hù)作用；能降低大鼠的潰瘍指數(shù)，對(duì)乙酸灼燒致大鼠胃粘膜損傷、幽門結(jié)扎致大鼠急性胃粘膜損傷、乙醇致大鼠急性胃粘膜損傷有一定的保護(hù)作用；能抑制大鼠胃液分泌，減少胃液酸度。
一、牛乳鐵蛋白對(duì)耐藥幽門螺桿菌(HP)的體外抗菌試驗(yàn)(一)試驗(yàn)?zāi)康谋緦?shí)驗(yàn)旨在對(duì)牛乳鐵蛋白進(jìn)行體外抗耐藥幽門螺桿菌活性評(píng)價(jià)，并與麗珠集團(tuán)麗珠制藥廠生產(chǎn)的麗珠得樂(lè)(鉍劑)進(jìn)行比較，以正確評(píng)價(jià)和開(kāi)發(fā)利用牛乳鐵蛋白的抗菌功效。
(二)受試藥品1、試驗(yàn)品牛乳鐵蛋白(LF)，總蛋白含量97％，LF純度95％，批號(hào)20010102由杭州英維康生物技術(shù)有限公司提供。
2、對(duì)照品鉍劑(麗珠得樂(lè))，批號(hào)0101002，由麗珠集團(tuán)麗珠制藥廠生產(chǎn)，每克藥含鉍劑110mg。
(三)細(xì)菌所試細(xì)菌為30株幽門螺桿菌臨床分離株，均為近年來(lái)(1997-2001)由浙二醫(yī)院胃鏡室從患者新鮮胃黏膜檢材中分離獲得，并經(jīng)尿素酶試驗(yàn)，革蘭染色鏡檢等方法鑒定證實(shí)。6株幽門螺桿菌為臨床耐藥株，由北大第一醫(yī)院消化內(nèi)科提供。
(四)培養(yǎng)基采用浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院微生物學(xué)教研室研制的HP專用培養(yǎng)基和布氏肉湯。
(五)藥物配制1、牛乳鐵蛋白的配制將牛乳鐵蛋白直接用無(wú)菌HP專用培養(yǎng)基配制成一系列不同濃度的含藥平皿。
2、鉍劑先用蒸餾水將鉍劑溶解，再用滅菌的培養(yǎng)基作一系列倍比稀釋使制成含不同濃度的藥物平皿。
(六)試驗(yàn)方法1、最小抑菌濃度(MIC)LF和乳蛋白的HP培養(yǎng)基平板(濃度為32μg/mg～0.125μg/mg)。將30株幽門螺桿菌(其中包括6株臨床耐藥性HP菌株)培養(yǎng)物分成A、B兩批(每批15株)，各用布氏肉湯配制成濃度為1×106/ml的菌液。以內(nèi)徑為2mm的接種環(huán)挑取1環(huán)菌液劃線接種到不同濃度藥物平板的表面，同時(shí)接種不含藥物的平板上作為對(duì)照，劃線長(zhǎng)度為1cm左右。于37℃微需氧環(huán)境中培養(yǎng)48h后觀察細(xì)菌生長(zhǎng)情況。以無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)平皿中所含藥物最小的濃度作為最小抑菌濃度(MIC)。結(jié)果見(jiàn)表1、表2表1 牛乳鐵蛋白、鉍劑對(duì)HP菌株的MIC

表2 牛乳鐵蛋白對(duì)臨床耐藥HP菌株的MIC

2、殺菌曲線(1)將0.1ml濃度為106/ml的HP菌液，分別加入不同牛乳鐵蛋白濃度(2.5mg/ml，5mg/ml，10mg/ml)的溶液中，混勻，于37℃的搖床中培養(yǎng)，分別于0.5h、1h、1.5h和2h時(shí)吸取0.1ml樣品涂布于HP專用培養(yǎng)基平板表面，37℃微氧環(huán)境中孵育48h后計(jì)數(shù)活菌數(shù)，并繪制出時(shí)間一殺菌曲線。
(2)將0.1ml濃度為106/ml的HP菌液加入0.9ml含4μg的鉍劑溶液中，按上法同樣繪制出鉍劑的時(shí)間-殺菌曲線作為已知藥物的對(duì)照試驗(yàn)，如圖1所示。
(3)同時(shí)設(shè)置不含藥物的空白對(duì)照管。
不同藥物在各時(shí)間計(jì)數(shù)活菌數(shù)的對(duì)數(shù)值見(jiàn)表3表3 不同藥物在各時(shí)間計(jì)數(shù)活菌數(shù)的對(duì)數(shù)值

3、培養(yǎng)條件對(duì)MIC的影響(1)pH值對(duì)MIC的影響將各濃度的含藥培養(yǎng)基的HP分別調(diào)整至5、7、9三種狀態(tài)，測(cè)定該藥物平板對(duì)2株HP試驗(yàn)菌株的MIC變化，結(jié)果見(jiàn)表4。
表4 不同PH值對(duì)MIC的影響

(2)細(xì)菌接種量對(duì)MIC的影響在其他條件不變的前提下，改變細(xì)菌接種量(103、106、109/ml)比較不同菌量對(duì)MIC的影響，結(jié)果見(jiàn)表5。
表5 細(xì)菌接種量對(duì)MIC的影響

(七)討論實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，牛乳鐵蛋白對(duì)30株HP菌的MIC范圍在0.625mg/ml至20mg/ml之間，MIC50為2.5mg/ml，證明牛乳L(zhǎng)F對(duì)HP確實(shí)具有較明顯的抑菌作用。同時(shí)，牛乳鐵蛋白對(duì)臨床耐藥菌株的MIC范圍在0.625mg/ml至5mg/ml之間，說(shuō)明牛乳L(zhǎng)F對(duì)耐藥HP也有較明顯的抑菌作用。
二、牛乳鐵蛋白對(duì)幽門螺桿菌感染動(dòng)物的治療實(shí)驗(yàn)(一)材料與方法1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物Wistar大鼠，體重160±10g，月齡2～3與雌雄兼用，健康無(wú)腹瀉，分籠普通飼料喂養(yǎng)。
2、實(shí)驗(yàn)藥物(1)牛乳鐵蛋白，由杭州英維康生物技術(shù)有限公司提供。批號(hào)20010102。
(2)食醋，恒順牌鎮(zhèn)江陳醋，瓶裝500ml，PH4～5。
(3)麗珠得樂(lè)(鉍劑)批號(hào)0101002，由麗珠集團(tuán)麗珠制藥廠生產(chǎn)，每克藥含鉍劑110mg。
(4)安必仙，批號(hào)0101088，香港聯(lián)邦制藥廠生產(chǎn)。
3、實(shí)驗(yàn)方法(1)脾虛大鼠幽門螺桿菌感染模型的復(fù)制參考彭氏法加以改良，造模大鼠每天空腹灌胃食醋2ml/100g，形成嗜酸偏食，共10天，單日禁食，雙日不限食，自由飲水，形成饑飽失常，以致飲食不節(jié)。第11天采用空腹束縛水浴(溫室29±15℃，水溫23±0.5℃)6小時(shí)形成倦冷刺激，使大鼠在上述因素共同作用下產(chǎn)生脾虛證侯。第12天起空腹灌胃1×109cfu/ml的HP混懸液，劑量1.5ml/隔日一次，共三次，并繼續(xù)隔日禁食飼。
(2)實(shí)驗(yàn)分組大鼠隨機(jī)分為10組①不用藥脾虛感染組，每日冷開(kāi)水4ml灌胃。
②陽(yáng)性用藥對(duì)照I組用麗朱得樂(lè)治療10天，陽(yáng)性II組用安必仙治療3天。
③Lf治療分A組、B組、C組、D組、E組、F組、G組共七組。
(3)方法第17天予以治療用藥，脾虛感染組喂蒸餾水。陽(yáng)性對(duì)照I組喂麗珠得樂(lè)0.35g/kg，陽(yáng)性II組用安必仙0.53g/kg，牛乳鐵蛋白大劑量A組2.8g/kg鼠，中劑量B組0.55g/kg鼠，小劑量C組0.09g/kg，連續(xù)用藥10天。D組0.55g/kg鼠，用藥3天，E組0.55g/kg鼠，用藥5天，F(xiàn)組0.55g/kg，用藥7天，G組0.55g/kg，用藥10天，陽(yáng)性對(duì)照II組治療3天后處死，取胃粘膜組織作檢查。
(4)檢測(cè)指標(biāo)1、HP培養(yǎng)大鼠胃粘膜活檢標(biāo)本45份，分別取自大鼠胃竇部，將大鼠胃粘膜組織放入20％GS運(yùn)用液中，4℃3h內(nèi)送至實(shí)驗(yàn)室，將滅菌組織粘膜研成勻漿，涂布于ECY培養(yǎng)基，在微需氧環(huán)境中37℃培養(yǎng)3-6天，3日后逐日觀察菌落。其可疑菌落作涂片染色、鏡檢，并作快速尿素酶試驗(yàn)，如具有典型的菌、菌體形態(tài)和染色特征，快速尿素酶試驗(yàn)陽(yáng)性者鑒定為HP。
2、快速尿素酶試驗(yàn)。
3、常規(guī)HE染色觀察組織形態(tài)學(xué)變化。
4、W-S銀染觀察HP感染程度，HP檢查按Marshall標(biāo)準(zhǔn)分級(jí)。
5、電鏡觀察胃粘膜修復(fù)及HP感染情況。
(二)結(jié)果1、各檢測(cè)方法對(duì)幽門螺桿菌的檢出情況，見(jiàn)表6。
表6 各組HP檢出情況

2、常規(guī)HE染色觀察組織形態(tài)學(xué)變化。
主要觀察胃粘膜炎癥反應(yīng)。炎癥細(xì)胞以淋巴細(xì)胞及嗜酸性細(xì)胞為主，多分布于胃粘膜的底部及胃粘膜下層結(jié)締組織中，以炎癥細(xì)胞的數(shù)量為標(biāo)準(zhǔn)，將炎癥分為四級(jí)，“0”，為基本無(wú)炎癥細(xì)胞出現(xiàn)，“1”可見(jiàn)少量炎癥細(xì)胞，“2”為中等炎癥細(xì)胞，“3”可見(jiàn)大量炎癥細(xì)胞。結(jié)果見(jiàn)表7表7 HE染色觀察炎癥情況表

**P＜0,01，*P＜0,053、鼠胃粘膜電鏡觀察高劑量組(0.71g/ml)電鏡下可見(jiàn)粘膜上皮結(jié)構(gòu)完整，微絨毛可見(jiàn)，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)清晰、豐富，分泌顆粒豐富。
中劑量組(0.11g/ml)電鏡下可見(jiàn)粘膜上皮結(jié)構(gòu)基本完整，微絨毛可見(jiàn)，分泌顆粒較多。
低劑量組(0.01g/ml)電鏡下可見(jiàn)大部分粘膜上皮結(jié)構(gòu)完整，微絨毛可見(jiàn)，分泌顆粒較少。
陽(yáng)性對(duì)照組電鏡下可見(jiàn)表層粘膜上皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整，微絨毛可見(jiàn)，充滿分泌顆粒。
模型組電鏡下可見(jiàn)大部分表層粘膜上皮細(xì)胞壞死，不完整，微絨毛較少，分泌顆粒少。
(三)、結(jié)論牛乳鐵蛋白對(duì)HP有一定的抑制作用，同時(shí)對(duì)由HP引起的胃粘膜損傷有修復(fù)作用。
三、牛乳鐵蛋白對(duì)感染幽門螺旋桿菌小鼠的治療研究(一)材料與方法1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物C57BL/6小鼠，體重17±20g，7周齡，均為雌性，健康無(wú)腹瀉，分籠普通飼料喂養(yǎng)。
2、實(shí)驗(yàn)藥物(1)牛乳鐵蛋白，由杭州英維康生物技術(shù)有限公司提供。批號(hào)20010102。
(2)麗珠得樂(lè)(鉍劑)批號(hào)0101002，由麗珠集團(tuán)麗珠制藥廠生產(chǎn)，每克藥含鉍劑110mg。
(3)菌株HP菌株由浙大醫(yī)學(xué)院提供。
3、實(shí)驗(yàn)方法所有動(dòng)物灌胃前禁食12小時(shí)，將用布氏肉湯洗脫的HP菌灌喂小鼠，0.4ml/只(約109/ml)，連續(xù)5次，1周完成；從最后一次灌胃HP液計(jì)算4周以后喂乳鐵蛋白，小鼠分大劑量組(0.1875g/kg體重)，中劑量組(0.0938g/kg體重)、低劑量(0.0469g/kg體重)，麗珠得樂(lè)對(duì)照組(0.148g/kg體重)，模型組，每組10只。共給藥10天。末次給藥后一天，處死小鼠，取胃粘膜組織，HE染色和W-S銀染觀察HP感染程度，同時(shí)進(jìn)行尿素酶試驗(yàn)及HP培養(yǎng)(取小鼠胃黏膜標(biāo)本，置于標(biāo)本保存液中-70℃保存。取標(biāo)本于研磨器中，滴加約0.2ml的標(biāo)本研磨液進(jìn)行研磨，將研磨液涂布在ECY選擇性培養(yǎng)基上，5％ O2，15％ CO2，80％ N2微需氧培養(yǎng)5天，觀察菌落形態(tài)，典型的HP菌落形態(tài)為針尖樣大小，無(wú)色透明，表面光滑，濕潤(rùn)，有光澤，挑取部分細(xì)菌進(jìn)行快速尿素酶實(shí)驗(yàn)和革蘭氏染色鏡檢，典型HP應(yīng)為快速尿素酶實(shí)驗(yàn)強(qiáng)陽(yáng)性，鏡檢為革蘭氏陰性，形態(tài)呈飛鳥(niǎo)狀或螺桿狀)。
(二)結(jié)果1、各檢測(cè)方法對(duì)幽門螺桿菌的檢出情況，見(jiàn)表8表8 各檢測(cè)方法對(duì)幽門螺桿菌的檢出情況

(三)結(jié)論牛乳鐵蛋白對(duì)C57BL/6小鼠感染的HP有一定的抑制作用。其中的細(xì)菌學(xué)檢(查陽(yáng)性率)和尿素酶陽(yáng)性率結(jié)果與麗珠得樂(lè)的結(jié)果還低10個(gè)百分點(diǎn)。
四、牛乳鐵蛋白對(duì)水浸應(yīng)激性胃潰瘍動(dòng)物模型的影響(一)試驗(yàn)?zāi)康难芯颗Ｈ殍F蛋白對(duì)水浸大鼠應(yīng)激性胃潰瘍的影響。
(二)藥物和實(shí)驗(yàn)方法1、牛乳鐵蛋白由杭州英維康生物技術(shù)有限公司提供，批號(hào)20010102。
2、麗珠得樂(lè)(鉍劑)批號(hào)0101002，由麗珠集團(tuán)麗珠制藥廠生產(chǎn)，每克藥含鉍劑110mg。
3、動(dòng)物SD大鼠，體重(200～250g)，雌雄各半，由浙江省中醫(yī)藥研究院動(dòng)物房提供，合格證號(hào)醫(yī)動(dòng)字第220810017號(hào)。
4、試驗(yàn)方法取SD大鼠50只，體重(200～250g)，雌雄各半，隨機(jī)分為5組，10只/組，設(shè)立空白對(duì)照，三個(gè)劑量的牛乳鐵蛋白組(1.4g/kg，0.7g/kg，0.28g/kg)和麗珠得樂(lè)陽(yáng)性對(duì)照組(0.8g/kg)，喂藥十天后，禁食24h，自由飲水，然后將動(dòng)物裝入特制籠內(nèi)，垂直浸入23±0.5℃水中。浸入深度平動(dòng)物劍突水平，24h后取出，頸椎脫位處死。打開(kāi)腹腔，結(jié)扎胃賁門和幽門并經(jīng)胃壁向胃腔內(nèi)注入1％的甲醛溶液8ml，將胃取出浸入甲醛溶液中，30分鐘后沿胃大彎剖開(kāi)，計(jì)數(shù)腺胃部出現(xiàn)的潰瘍點(diǎn)數(shù)及潰瘍指數(shù)。解剖顯微鏡下測(cè)量胃粘膜損傷長(zhǎng)度(mm)，以其總和作為潰瘍指數(shù)，在組間進(jìn)行比較。
5、統(tǒng)計(jì)方法實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表示為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(FF＝±s)，組間差異的顯著性用t-檢驗(yàn)進(jìn)行。
(三)、試驗(yàn)結(jié)果結(jié)果表明，牛乳鐵蛋白0.7g/kg、2.8g/kg能明顯降低大鼠的潰瘍指數(shù)。與空白組比較，有顯著差異(P＜0.05或P＜0.01)。結(jié)果見(jiàn)表9。
表9 牛乳鐵蛋白對(duì)水浴應(yīng)激致大鼠急性胃粘膜損傷的影響(VF±Ls，N＝10)

**P＜0,01，*P＜0,05，與空白對(duì)照組比較(四)、結(jié)論本試驗(yàn)采用水浸應(yīng)激致大鼠急性胃粘膜損傷，以胃粘膜損傷長(zhǎng)度為指標(biāo)，研究牛乳鐵蛋白對(duì)水浸應(yīng)激致大鼠胃粘膜損傷的影響。結(jié)果表明，牛乳鐵蛋白能降低大鼠的潰瘍指數(shù)(降低78％，比麗珠得樂(lè)高48％，)，抑制率在28-78％之間，比麗珠得樂(lè)的抑制率多高出20個(gè)百分點(diǎn)，牛乳鐵蛋白能降低大鼠胃粘膜損傷長(zhǎng)度，對(duì)水浸應(yīng)激致大鼠急性胃粘膜損傷有一定的保護(hù)作用。
五、牛乳鐵蛋白對(duì)乙酸灼燒致大鼠胃潰瘍的影響(一)試驗(yàn)?zāi)康难芯颗Ｈ殍F蛋白對(duì)乙酸灼燒致大鼠胃潰瘍的影響(二)藥物1、牛乳鐵蛋白，批號(hào)20010102，由杭州英維康生物技術(shù)有限公司提供。
2、麗珠得樂(lè)(鉍劑)批號(hào)0101002，由麗珠集團(tuán)麗珠制藥廠生產(chǎn)，每克藥含鉍劑110mg3、胃動(dòng)素(MTL)試劑盒由蘇州大學(xué)醫(yī)學(xué)院血栓研究室提供。
4、前列腺素(PEG2)試劑盒由北京福瑞公司提供。
(三)動(dòng)物SD大鼠，體重(200～250g)，雌雄各半，由浙江省中醫(yī)藥研究院動(dòng)物房提供，合格證號(hào)醫(yī)動(dòng)字第220810017號(hào)(四)試驗(yàn)方法取SD大鼠50只，體重(200～250g)，雌雄各半，試驗(yàn)前禁食24h，自由飲水，在乙醚麻醉下打開(kāi)腹腔，將內(nèi)徑5mm長(zhǎng)30mm的玻璃管垂直放置于胃體部漿膜面上，向管腔內(nèi)加入冰乙酸0.2ml，1.5分鐘后用棉簽蘸出冰乙酸，縫合手術(shù)切口。術(shù)后正常飲食，第二天隨機(jī)分為5組，10只/組，設(shè)立空白對(duì)照，三個(gè)劑量的牛乳鐵蛋白組(1.4g/kg，0.7g/kg，0.28g/kg)和麗珠得樂(lè)陽(yáng)性對(duì)照組(0.8g/kg)，連續(xù)喂藥十天。解剖取出胃，并用甲醛固定，測(cè)量潰瘍面積(mm2)，各組間進(jìn)行比較。同時(shí)取血，分離血清，測(cè)胃動(dòng)素(MTL)及前列腺素(PGE2)。
(五)、統(tǒng)計(jì)方法實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表示為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(X±s)，組間差異的顯著性用t-檢驗(yàn)進(jìn)行。
(六)、試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表10、表11表10 牛乳鐵蛋白對(duì)乙酸灼燒型潰瘍的影響

**P＜0,01，*P＜0,05，與空白對(duì)照組比較表11 牛乳鐵蛋白對(duì)乙酸灼燒型大鼠胃動(dòng)素(MTL)及前列腺素(PGE2)的影響

*P＜0,05，與空白對(duì)照組比較(七)結(jié)論本試驗(yàn)采用乙酸灼燒致大鼠胃粘膜損傷，以潰瘍面積為指標(biāo)，研究牛乳鐵蛋白對(duì)乙酸灼燒致大鼠胃粘膜損傷的影響。結(jié)果表明，牛乳鐵蛋白能降低大鼠的潰瘍指數(shù)(降低65％，比麗珠得樂(lè)高52％)，抑制率在13-66％之間，比麗珠得樂(lè)的抑制率多高出37個(gè)百分點(diǎn)，對(duì)乙酸灼燒致大鼠胃粘膜損傷有一定的保護(hù)作用。
六、牛乳鐵蛋白對(duì)幽門結(jié)扎致大鼠急性胃粘膜損傷的影響(一)試驗(yàn)?zāi)康挠^察牛乳鐵蛋白對(duì)幽門結(jié)扎致大鼠急性胃粘膜損傷的影響(二)藥物1、牛乳鐵蛋白，批號(hào)20010102，由杭州英維康生物技術(shù)有限公司提供。
2、麗珠得樂(lè)(鉍劑)批號(hào)0101002，由麗珠集團(tuán)麗珠制藥廠生產(chǎn)，每克藥含鉍劑110mg。
(三)動(dòng)物SD大鼠，體重(200～250g)，雌雄各半，由浙江省中醫(yī)藥研究院動(dòng)物房提供，合格證號(hào)醫(yī)動(dòng)字第220810017號(hào)。
(四)試驗(yàn)方法取SD大鼠50只，體重(200～250g)，雌雄各半，隨機(jī)分為5組，10只/組，設(shè)立空白對(duì)照，三個(gè)劑量的牛乳鐵蛋白組(1.4g/kg，0.7g/kg，0.28g/kg)和麗珠得樂(lè)陽(yáng)性對(duì)照組(0.8g/kg)，喂藥十天。禁食36小時(shí)，自由飲水，在乙醚麻醉下固定大鼠，沿腹中線剪開(kāi)一小口，找出胃并結(jié)扎幽門。術(shù)后18小時(shí)解剖胃，向胃腔內(nèi)注入1％甲醛溶液8ml。將胃浸入1％福爾馬林溶液中，10min后，沿胃大彎剪開(kāi)胃，觀察前胃部潰瘍的發(fā)生情況。潰瘍程度的評(píng)價(jià)，可以計(jì)數(shù)前胃部潰瘍的面積，以其總和作為潰瘍指數(shù)。也常用okabe法，在解剖顯微鏡下測(cè)量潰瘍面積，將每只鼠潰瘍面積的總和分為5個(gè)等級(jí)，作為潰瘍指數(shù)，見(jiàn)表12。
表12

根據(jù)潰瘍指數(shù)可進(jìn)一步計(jì)算

(五)統(tǒng)計(jì)方法實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表示為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(X±s)，組間差異的顯著性用t-檢驗(yàn)進(jìn)行。
(六)試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表13表13 牛乳鐵蛋白對(duì)幽門結(jié)扎潰瘍的影響

**P＜0,01，*P＜0,05，與空白對(duì)照組比較
(七)結(jié)論本試驗(yàn)采用幽門結(jié)扎致大鼠急性胃粘膜損傷，以潰瘍指數(shù)為指標(biāo)，研究牛乳鐵蛋白對(duì)幽門結(jié)扎致大鼠胃粘膜損傷的影響。結(jié)果表明，牛乳鐵蛋白能降低大鼠的潰瘍指數(shù)，抑制率在31-51％之間，比麗珠得樂(lè)的抑制率多高出12個(gè)百分點(diǎn)，對(duì)幽門結(jié)扎致大鼠急性胃粘膜損傷有一定的保護(hù)作用。
七、牛乳鐵蛋白對(duì)乙醇致大鼠胃黏膜損傷的影響。
(一)實(shí)驗(yàn)?zāi)康难芯颗Ｈ殍F蛋白對(duì)乙醇致大鼠急性胃黏膜損傷的影響。
(二)藥物1、牛乳鐵蛋白批號(hào)20010102，由杭州英維康生物技術(shù)有限公司提供，臨用前將牛乳鐵蛋白用蒸餾水配成0.14g/ml，0.07g/ml，0.028g/ml的濃度，大鼠(灌胃)上述溶液1ml/100g。相當(dāng)于人臨床用藥15g，7.5g，3g。
2、麗珠得樂(lè)批號(hào)0101002，由麗株集團(tuán)麗株制藥廠生產(chǎn)，臨用前用蒸餾水配制，2包加水25ml，每100g大鼠灌胃1ml。
(三)動(dòng)物SD大鼠，體重(200±20)g，♀♂兼用，由浙江省中醫(yī)藥研究院動(dòng)物房提供，合格證號(hào)醫(yī)動(dòng)字第220810017號(hào)。
(四)實(shí)驗(yàn)方法取SD大鼠50只，體重(200±20)g，雌雄兼用，隨機(jī)分成5組，10只/組，設(shè)立空白對(duì)照組，三個(gè)劑量的牛乳鐵蛋白組(1.4g，0.7g，0.28g)和麗珠得樂(lè)組陽(yáng)性對(duì)照組(0.8g/kg)連續(xù)喂藥10天，末次給藥后，禁食48小時(shí)，自由飲水，實(shí)驗(yàn)時(shí)灌服無(wú)水乙醇(1ml/只)，一小時(shí)后解剖取胃，以1％的甲醛溶液固定。損傷程度以潰瘍指數(shù)表示。條索狀損傷的長(zhǎng)度大余1mm者測(cè)量其長(zhǎng)度，每mm計(jì)1分，若其寬度大于1mm者將其分加倍，計(jì)分總數(shù)為該動(dòng)物的潰瘍指數(shù)，各組間進(jìn)行比較。
(五)統(tǒng)計(jì)方法實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表示為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(X±s)，組間差異的顯著性用t-檢驗(yàn)進(jìn)行。
(六)試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表14
表14 牛乳鐵蛋白對(duì)乙醇型潰瘍的影響

**P＜0,01，*P＜0,05，與空白對(duì)照組比較(七)結(jié)論本試驗(yàn)用乙醇致大鼠急性胃粘膜損傷，以潰瘍指數(shù)為指標(biāo)，研究牛乳鐵蛋白對(duì)乙醇致大鼠胃粘膜損傷的影響。結(jié)果表明，牛乳鐵蛋白能降低大鼠的潰瘍指數(shù)，比麗珠得樂(lè)降低大鼠的潰瘍指數(shù)還多15％，比麗珠得樂(lè)的抑制率多高出10個(gè)百分點(diǎn)，對(duì)乙醇致大鼠急性胃粘膜損傷有一定的保護(hù)作用。
八、牛乳鐵蛋白對(duì)大鼠胃液分泌的影響(一)實(shí)驗(yàn)?zāi)康挠^察牛乳鐵蛋白對(duì)大鼠胃液量、胃液酸度和胃蛋白的影響。
(二)藥物牛乳鐵蛋白，批號(hào)20010102，由杭州英維康生物技術(shù)有限公司提供。
陽(yáng)性對(duì)照藥麗珠得樂(lè)(鉍劑)批號(hào)0101002，由麗珠集團(tuán)麗珠制藥廠生產(chǎn)，每克藥含鉍劑110mg。
(三)動(dòng)物SD大鼠，體重(200±20)g，雌雄兼用，由浙江省中醫(yī)藥研究院動(dòng)物房提供，合格證號(hào)醫(yī)動(dòng)字第220810017號(hào)。
(四)試驗(yàn)方法把SD大鼠隨機(jī)分為5組，每組10只，分別設(shè)立高劑量組(LF 0,28g/200g大鼠)、中劑量組(LF為0.134g/200g大鼠)、低劑量(LF為0.056g/200g大鼠)，空白對(duì)照組(LF為0.053g/200g大鼠)、陽(yáng)性對(duì)照(折合人劑量，每日4包)、空白對(duì)照組(喂蒸餾水)，連續(xù)喂藥10天，末次給藥后均禁食24小時(shí)，不禁水。在乙醚麻醉下，沿腹正中線剪開(kāi)小口，輕輕找出胃，結(jié)扎幽門，縫合腹壁切口，4～6小時(shí)后拆線找開(kāi)腹腔結(jié)扎賁門，摘取全胃，用濾紙擦凈血跡，沿大彎側(cè)剪開(kāi)胃腔，傾出胃內(nèi)容物收集于刻度離心管中，記錄胃液量，再以1.000～2.000g離心約5分鐘，去除食物殘?jiān)任竷?nèi)容物(以酸度計(jì)測(cè)胃液的酸度)用酸堿滴定法測(cè)胃液總酸度。利用胃蛋白酶分解血紅蛋白生成酪氨酸，再用酚紅試劑的顯色反應(yīng)測(cè)定酪氨酸的量，從而間接計(jì)算胃蛋白酶的活性。
(1)胃液總酸度的測(cè)定取上清胃液1ml，加酚紅指示劑1滴，用0.01mol/L的NaoH滴定，直至胃液先呈黃色后轉(zhuǎn)為紅色2秒內(nèi)不消失為終點(diǎn)，記錄用去NaoH溶液量。
總酸度mmol/L＝耗去的NaoH溶液量。
(2)胃蛋白酶活性測(cè)定取上清胃液0.1ml，加入1％牛血清白蛋白(0.1N HCL配制)1ml37℃溫孵20分鐘，加入2％三氯乙酸，并在沸水中加熱5分鐘，冷卻后過(guò)濾。取濾出液0.2ml，加入0.8ml 0.125N Na2CO3溶液，同時(shí)加入Folin-Ciocalte試劑(5ml甲液和0.5ml乙液)，混勻后靜置30分鐘后比色(700mn)。以酪氨酸標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算胃蛋白酶活性。以mmol/h酪氨酸表示胃蛋白酶排出量。
(五)、結(jié)果結(jié)果表明，牛乳鐵蛋白能抑制大鼠胃液分泌，抑制胃液酸度。結(jié)果見(jiàn)表15。
表15 牛乳鐵蛋白對(duì)胃液的影響

(六)、結(jié)論結(jié)果顯示，1.4g/kg牛乳鐵蛋白能抑制大鼠胃液分泌，減少胃液酸度。其中低劑量組(0.23g/kg)與空白對(duì)照組相比，能降低胃液36％，降低胃總酸度12％。
權(quán)利要求
1.一種牛乳鐵蛋白在制備治療幽門螺旋桿菌及幽門螺桿菌耐藥菌株感染的胃炎藥品，保健食品，功能性食品中的應(yīng)用。
2.一種牛乳鐵蛋白在制備治療幽門螺旋桿菌及幽門螺桿菌耐藥菌株感染的胃潰瘍病及修復(fù)胃粘膜中的藥品，保健食品，功能性食品中的應(yīng)用。
3.一種牛乳鐵蛋白在制備治療幽門螺旋桿菌及幽門螺桿菌耐藥菌株感染性胃病及修復(fù)胃粘膜、減少胃酸分泌的藥品，保健食品，功能性食品中的應(yīng)用；
4.一種牛乳鐵蛋白在制備治療幽門螺旋桿菌及幽門螺桿菌耐藥菌株感染的胃炎、胃潰瘍及修復(fù)胃粘膜、減少胃酸分泌中與抗菌藥、胃酸分泌抑制劑、抗生素藥的聯(lián)合應(yīng)用。
5.一種牛乳鐵蛋白在制備治療因感染所造成的胃粘膜損傷，因化學(xué)因素所造成的胃粘膜損傷，因物理及精神因素所造成的胃粘膜損傷藥品，保健食品，功能性食品中的應(yīng)用。
6.根據(jù)權(quán)利要求1、2、3、4或者5所述的應(yīng)用，其特征是牛乳鐵蛋白是指從牛奶，牛初乳，牛乳清中提取出來(lái)的或采用基因重組菌經(jīng)發(fā)酵生產(chǎn)的牛乳鐵蛋白。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征是服用量為每人每天10毫克到8克之間，服用可經(jīng)由口腔或鼻腔進(jìn)入胃。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了牛乳鐵蛋白在治療急性胃炎，慢性胃炎，消化性潰瘍，胃酸度過(guò)高和修復(fù)胃粘膜藥品，保健食品，功能性食品，特殊食品及食品中的應(yīng)用。它能與抗菌藥、胃酸分泌抑制劑、抗生素藥的聯(lián)合應(yīng)用。牛乳鐵蛋白是指從牛奶，牛初乳，牛乳清中提取出來(lái)的或采用基因重組菌經(jīng)發(fā)酵生產(chǎn)的牛乳鐵蛋白。服用量可從每人每天10毫克到8克之間，服用可經(jīng)由口腔或鼻腔進(jìn)入胃。使用無(wú)副作用。
文檔編號(hào)A61P31/04GK1840180SQ20061003798
公開(kāi)日2006年10月4日 申請(qǐng)日期2006年1月19日 優(yōu)先權(quán)日2006年1月19日
發(fā)明者孔繁智, 朱婉萍, 方存林, 方雅憫 申請(qǐng)人:方雅憫