專利名稱：槭樹提取物及在制備自由基清除劑或抗氧化劑中的應用的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及槭樹提取物及在制備自由基清除劑和抗氧化劑中的應用。
背景技術：
槭樹(Acer sp.)的植物學分類為槭樹科(Aceraceae)槭樹屬(Acer)的落葉喬木；該屬在安徽常見的有十余種，全國有幾十種。其特點是葉對生，葉不裂或掌狀分裂，具葉柄；花單性、雜性或兩性，成傘房、穗狀或聚傘花序；小堅果有翅果，花期4到5月，果期8到10月。廣泛分布在亞熱帶和溫帶地區(qū)。
該屬樹種過去主要用作觀賞綠化樹種、用材樹種；種子含油脂可食用或工業(yè)用；有些種的皮、葉可提栲膠；有些種嫩葉能作茶，但到目前沒有以之制備天然自由基清除劑和抗氧化劑的報道。
自由基(free radical)，從化學結構上看是指含未配對電子的基團、原子或分子。自由基具有高度化學活性。對于生命體來說，自由基是生命活動中多種生化反應的中間產(chǎn)物。在正常情況下，人體內(nèi)的自由基是處于產(chǎn)生與清除的動態(tài)平衡之中。自由基是機體有效的防御系統(tǒng)，如不能維持一定水平的自由基則會對機體生命活動帶來不利影響。但自由基產(chǎn)生過多或清除過慢，它通過攻擊生命大分子物質及各種細胞器，會造成機體分子水平、細胞水平及組織器官水平的各種損傷，加速機體的衰老進程并誘發(fā)各種疾病。最新的研究表明，人類的衰老及許多疾病都與自由基損傷有關。由于自由基清除劑的獨特作用，其研究近年來受到越來越多的重視。
自由基清除劑指能與自由基反應并使之還原成非自由基化合物的物質，能夠清除機體代謝過程中產(chǎn)生的過多的自由基，是一種可增進人體健康的重要活性物質。目前普遍應用的非酶類自由基清除劑主要有維生素E、維生素C、β-胡蘿卜素和還原型谷胱甘肽等。酶類自由基清除劑主要有超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)等。其中維生素E雖然有一定的清除自由基活性但有促進早熟的副作用；維生素C、β-胡蘿卜素的活性較差；酶類自由基清除劑則應用范圍過于狹窄。因此，人們在不斷地努力尋找新型高效自由基清除劑。
對于非生命體中產(chǎn)生的自由基來說，自由基的產(chǎn)生與物質分子受外界的光、熱、氧或其他化學物質的誘導有關。自由基清除劑在非生命體系中主要是指抗氧化劑。它能夠有效地阻止物質的氧化敗壞，對于延長物品的保質期，有著重要作用被廣泛用于食品、藥品、日用化學品等中。目前，應用的抗氧化劑主要是一些人工合成產(chǎn)品，有些近年來被發(fā)現(xiàn)有致癌作用，如丁基茴香醚(Butyl bydroxy Amsol)等，正因如此，近年來天然抗氧化劑的研究越來越受到重視。目前發(fā)現(xiàn)的天然抗氧化劑主要有茶多酚、芝麻酚、米糠素、櫟精、胚芽油提取物、蕓香苷等。由于目前發(fā)現(xiàn)的天然抗氧化劑，有些生產(chǎn)成本較高，有些性質不夠不穩(wěn)定，如茶多酚很易自身被氧化，因此，其應用受到一定的限制。正因如此，人們不斷地在尋找新型天然高效抗氧化劑。

發(fā)明內(nèi)容
為尋找新型天然高效天然自由基清除劑和抗氧化劑，通過對中國亞熱帶常見的600余種植物進行了活性研究，發(fā)現(xiàn)了槭樹的提取物具有很強的清除自由基和抗氧化活性。本發(fā)明旨在，提供一種槭樹提取物。
本發(fā)明的另一目的是，提供一種槭樹提取物及在制備自由基清除劑或抗氧化劑中的應用。
具體的技術方案如下一種槭樹提取物，其特征在于2，6-2沒食子酸槭糖酯含量20-95％；同時含沒食子酸甲酯1-5％；鼠李糖黃酮甙1-10％；少量的類胡蘿卜素、糖類和葉綠素；2，6-2沒食子酸槭糖酯的化學結構式、沒食子酸甲酯的化學結構式、鼠李糖黃酮甙的化學結構式如下
2，6-2沒食子酸槭糖酯的化學結構式 鼠李糖黃酮甙 沒食子酸甲酯的化學結構式械樹提取物性狀白色到淺黃綠色無定形粉末；干燥樣品在空氣中較穩(wěn)定；略吸潮；略有澀味；在中性、酸性條件下穩(wěn)定。
槭樹提取物采用槭樹的芽、葉或皮為原料提取。
一處槭樹提取物及在制備自由基清除劑或抗氧化劑中的應用。
一種槭樹提取物的制備工藝方法，其特征在于包括下列步驟A、將槭樹(Acer sp.)的芽、葉或皮干燥，并將干燥原料粉碎，細度為20目以上；B、在粉碎的原料中按1∶6-20加入提取劑，在20℃溫度以上條件下，間歇或連續(xù)提取10分鐘以上，過濾得提取液；C、將提取液真空濃縮，濃縮溫度為40-100℃，得濃縮液；D、將濃縮液干燥，干燥溫度為-30到170℃；或結晶后分離出結晶再干燥；得干燥粗提取物，粗提取物中2，6-2沒食子酸槭糖酯含量20-80％；同時含沒食子酸甲酯1-5％；鼠李糖黃酮甙1-10％；少量的類胡蘿卜素、糖類和葉綠素；粗提取物性狀白色到淺黃綠色無定形粉末；干燥樣品在空氣中較穩(wěn)定；略吸潮；在中性、酸性條件下穩(wěn)定；E、再將粗提取物精提，精提方法是重結晶法(也可用色譜法)，得精提取物，其中2，6-2沒食子酸槭糖酯含量70-95％。
上述槭樹提取物的制備工藝方法中所述提取液為水或乙醇或水和乙醇的混合物；所述水和乙醇混合物的比例為1-0∶0-4。
上述的槭樹(Acer sp.)為青榨槭(Acer davidii)或元寶槭(Acer truncatum)或苦茶槭(Acer ginnala)或色木槭(Acer mono)或三葉槭(Acer henryi)或雞爪槭(Acer palmatum)或三角槭(Acer buergerianum)或紫果槭(Acer cordatum)。
研究發(fā)現(xiàn)槭樹(Acer sp.)提取物有以下活性A、具有清除自由基活性配制提取物樣品濃度為0.05、0.1、0.15mg/ml甲醇溶液，于517nm下測定其對1mmol/L的DPPH自由基的清除活性，經(jīng)計算得出其DPPH自由基的半數(shù)清除濃度小于0.1mg/ml；B、抗氧化作用(1)取0.5％新鮮綠茶提取物分裝于24個25mL瓶中，分別按0.0、0.05、0.1、0.15mg/ml加入本發(fā)明提取物、維生素C和茶多酚，殺菌后于37℃下孵育。實驗觀察表明在各個試驗濃度下添加本發(fā)明提取物的飲料氧化變紅的速度明顯小于維生素C和茶多酚。(2)將本發(fā)明提取物、生素E和茶多酚按0.1mg/ml加入精練菜籽油中，于37℃下處理30天其POV AV值，結果表明本發(fā)明提取物的POV AV值分別是8.7meq/kg和2.9mgKOH/g，小于加維生素E和茶多酚的樣品，說明本發(fā)明提取物對油脂的抗氧化作用優(yōu)于維生素E和茶多酚。
本發(fā)明的有益技術效果體現(xiàn)在下述幾個方面1、采用本發(fā)明原料及工藝方法生產(chǎn)的自由基清除劑或抗氧化劑，開拓了槭樹及槭樹提取物一個新的應用領域。其清除自由基和抗氧化活性強，強于目前常用的天然自由基清除劑和抗氧化劑，它對DPPH自由基的ID50小于0.1mg/ml。
2、本發(fā)明槭樹提取物即自由基清除劑和抗氧化劑用途廣，可作為食品添加劑、日用品添加劑，起抗氧化、抗老化、保鮮、增白、殺菌、消炎等作用，以本發(fā)明為基礎可進行進一步的新藥研究開發(fā)。
3、本發(fā)明工藝方法生產(chǎn)的產(chǎn)品成本低。
4、本發(fā)明生產(chǎn)工藝簡便、工藝穩(wěn)定、易調控、成功率高。
5、本發(fā)明生產(chǎn)設備投資少，占地小、無三廢問題，尤其適于中小企業(yè)采用。
具體實施例方式
下面結合實施例，對本發(fā)明作進一步地描述。
實施例11、原料采收于4月到5月采集青榨槭(Acer davidii)的芽；或于4月到10月采集槭樹的葉和芽。
青榨槭(Acer davidii)為槭樹科(Aceraceae)槭樹屬(Acer)的落葉喬木；樹皮褐色，常縱裂，小枝細瘦；葉不分裂，葉柄長2到8厘米；花黃綠色，雜性，雄花與兩性花同株，常成下垂總狀花序；翅果嫩時淡綠色，成熟時黃褐色；花期4月，果期9月。該樹廣泛分布在北亞熱帶地區(qū)；為一種用材樹種；樹皮、樹葉為提取栲膠原料，嫩葉能作茶。
2、原料預處理將采收的原料，在130℃溫度下氣流懸浮干燥5分鐘，儲藏備用。也可按一般綠茶的加工方法進行，但溫度要盡量低，以免褐變。
3、有效成分提取將原料粉碎到40目，接著按1∶8加入水和乙醇(水與醇的比例為0∶1)提取兩次，在30℃溫度條件下，逆流浸提；同時進行渣液分離；提取液經(jīng)50℃真空濃縮、低溫結晶、離心分離、-30℃(起始)到20℃(結束)冷凍干燥、粉碎后得到具清除自由基和抗氧化活性的提取物。
粗提的提取物的主要成分包括2，6-2沒食子酸槭糖酯含量50％；沒食子酸甲酯1％；鼠李糖黃酮甙8％；少量的類胡蘿卜素、糖類和葉綠素。
粗提的提取物性狀為白色到淺黃綠色無定形粉末；干燥樣品在空氣中較穩(wěn)定；略吸潮；略有澀味；在中性、酸性條件下穩(wěn)定。
再將粗提取物精提，精提方法是重結晶法，得精提取物，其主要成分為2，6-2沒食子酸槭糖酯，含量為90％。
2，6-2沒食子酸槭糖酯的化學結構式 鼠李糖黃酮甙 沒食子酸甲酯的化學結構式實施例21、原料采收于4月到5月采集元寶槭(Acer truncatum)的芽；或于4月到10月采集槭樹的葉和芽。
元寶槭(Acer truncatum)為槭樹科(Aceraceae)槭樹屬(Acer)的落葉喬木；樹冠闊圓形，樹皮深縱裂，小枝對生；葉常5裂，對生，葉柄長3到5厘米；花黃綠色，雜性，雄花與兩性花同株，常成無毛傘房花序；翅果嫩時淡綠色，成熟時淡黃或淡褐色；花期4月，果期8月。該樹廣泛分布在北亞熱帶地區(qū)；為一種蜜源植物；嫩葉可食，亦能作茶，有降血壓作用，還可做飼料等。
2、原料預處理將采收的原料，在90℃溫度下烘15分鐘，然后在50-60℃溫度條件下烘干；儲藏備用。
3、有效成分提取將原料粉碎到120目，接著按1∶10加入水和乙醇(水與醇的比例為1∶0)，在130℃溫度條件下，進行加壓浸提；浸提后用過濾或壓濾或離心或多級過濾進行渣液分離；渣可按1∶3-6進行多次浸提；提取液經(jīng)40℃減壓濃縮，160℃噴霧干燥、粉碎后得到具清除自由基和抗氧化活性的提取物。
粗提的提取物的主要成分包括2，6-2沒食子酸槭糖酯含量80％；沒食子酸甲酯5％；鼠李糖黃酮甙3％；少量的類胡蘿卜素、糖類和葉綠素。
粗提的提取物性狀為白色到淺黃綠色無定形粉末；干燥樣品在空氣中較穩(wěn)定；略吸潮；略有澀味；在中性、酸性條件下穩(wěn)定。
再將粗提取物精提，精提方法是重結晶法，得精提取物，其主要成分為2，6-2沒食子酸槭糖酯，含量95％。
實施例31、原料采收于4月到5月采集苦茶槭(Acer ginnala)的芽；或于4月到10月采集槭樹的葉和芽。
苦茶槭(Acer ginnala)為槭樹科(Aceraceae)槭樹屬(Acer)的落葉喬木；樹冠圓形，樹皮微縱裂，小枝細瘦；葉不明顯3到5裂或不裂，對生，葉柄長約4厘米；花雜性，雄花與兩性花同株，傘房花序長3厘米；翅果黃綠或黃褐色；花期5月，果期10月。該樹廣泛分布在亞熱帶地區(qū)；是一種蜜源植物；樹皮、樹葉為提取栲膠原料，嫩葉能作茶，有降血壓作用，還可做飼料等。
2、原料預處理將采收的原料，在100℃溫度下烘10分鐘，然后在50-60℃溫度條件下烘干；儲藏備用。也可按一般綠茶的加工方法進行，但溫度要盡量低，以免褐變。
3、有效成分提取將原料粉碎到120目，接著按1∶20加入水和乙醇(水與醇的比例為1∶4)，在80-100℃溫度條件下，進行加熱回流浸提；浸提后用過濾或壓濾或離心或多級過濾進行渣液分離；提取液經(jīng)50℃真空濃縮、低溫結晶、離心分離、干燥、粉碎后得到具清除自由基和抗氧化活性的提取物。
粗提的提取物的主要成分包括2，6-2沒食子酸槭糖酯含量40％；沒食子酸甲酯1％；鼠李糖黃酮甙1％；少量的類胡蘿卜素、糖類和葉綠素。
粗提的提取物性狀為白色到淺黃綠色無定形粉末；干燥樣品在空氣中較穩(wěn)定；略吸潮；略有澀味；在中性、酸性條件下穩(wěn)定。
再將粗提取物精提，精提方法是重結晶法，得精提取物，其主要成分為2，6-2沒食子酸槭糖酯，含量75％。
實施例41、原料采收于4月到5月采集色木槭(Acer mono)的芽；或于4月到10月采集槭樹的葉和芽、皮。
色木槭(Acer mono)為槭樹科(Aceraceae)槭樹屬(Acer)的落葉喬木；樹冠圓形，樹皮?？v裂，小枝細瘦，葉常5裂，有時3到7裂葉生于同一樹上，對生，葉柄長4到6厘米，細瘦；花葉同時開放，花雜性，雄花中子房不發(fā)育，花柱很短，翅果嫩時紫綠色，成熟時淡黃色；花期5月，果期9月。該樹廣泛分布在北亞熱帶及溫帶地區(qū)；為一種蜜源植物；枝、葉入藥，主治風濕骨痛、骨折、跌打損傷。
2、原料預處理同實施例3；3、有效成分提取同實施例2。
實施例51、原料采收于4月到5月采集三葉槭(Acer henryi)的芽；或于4月到10月采集槭樹的葉和芽。
三葉槭(Acer henryi)為槭樹科(Aceraceae)槭樹屬(Acer)的落葉喬木；樹冠圓形，樹皮淡褐色，小枝紫綠色，三小葉組成復葉，小葉橢圓形或長橢圓形，頂生小葉葉柄長約1厘米，側生小葉葉柄長約3厘米；總狀花序下垂，花單性，雌雄異株；花淡綠色；翅果嫩時紫綠色，成熟時黃褐色；花期4月，果期9月。該樹廣泛分布在北亞熱帶及溫帶地區(qū)；樹皮、葉、果含鞣質，可提取栲膠；樹根可治風濕關節(jié)痛。
2、原料預處理同實施例1；3、有效成分提取同實施例1。
實施例61、原料采收于4月到5月采集雞爪槭(Acer palmatum)的芽；或于4月到10月采集槭樹的葉和芽。
雞爪槭(Acer palmatum)為槭樹科(Aceraceae)槭樹屬(Acer)的落葉小喬木；樹皮深灰色；小枝細瘦；葉5到9掌狀分裂，對生，葉柄長約4-6厘米；花紫色，雜性，雄花與兩性花同株，常成無毛的傘房花序；翅果嫩時紫紅色，成熟時淡棕黃色；花期5月，果期9月。該樹廣泛分布在亞熱帶地區(qū)；是一種觀賞樹種；根入藥可以治療關節(jié)痛。
2、原料預處理同實施例1；3、有效成分提取同實施例1。
實施例71、原料采收于4月到5月采集三角槭(Acer buergerianum)的芽；或于4月到10月采集槭樹的葉和芽、皮。
三角槭(Acer buergerianum)為槭樹科(Aceraceae)槭樹屬(Acer)的落葉喬木；樹冠圓形，樹皮褐色，長條狀薄片剝落；葉頂端常3裂，葉背被白粉，葉對生，葉柄長約3厘米，細瘦，無毛；頂生傘房花序，兩性花，淡黃色翅果棕黃色，翅與小堅果同長；花期4月，果期9月。該樹廣泛分布在亞熱帶及溫帶地區(qū)；為一種用材樹種；樹皮、樹葉為提取栲膠原料。
2、原料預處理同實施例2；
3、有效成分提取同實施例2。
實施例81、原料采收于4月到5月采集紫果槭(Acer cordatum)的芽；或于4月到10月采集槭樹的葉和芽、皮。
紫果槭(Acer cordatum)為槭樹科(Aceraceae)槭樹屬(Acer)的常綠喬木；樹皮平滑，灰色或黑灰色；小枝細瘦；葉常5裂，背面光滑無毛，葉對生，葉柄長約1厘米；花3-5朵成傘房花序；花淡白色翅果著生下垂傘房果序上，小堅果突起；花期5月，果期9月。該樹廣泛分布在中國亞熱帶地區(qū)；為一種蜜源、觀賞、用材樹種；樹皮、樹葉為提取栲膠原料。
2、原料預處理同實例1；3、有效成分提取同實例1。
權利要求
1.一種槭樹提取物，其特征在于2，6-2沒食子酸槭糖酯含量20-95％；同時含沒食子酸甲酯1-5％；鼠李糖黃酮甙1-10％；少量的類胡蘿卜素、糖類和葉綠素；2，6-2沒食子酸槭糖酯的化學結構式、沒食子酸甲酯的化學結構式、鼠李糖黃酮甙的化學結構式如下 2，6-2沒食子酸槭糖酯的化學結構式?jīng)]食子酸甲酯的化學結構式槭樹提取物性狀白色到淺黃綠色無定形粉末；干燥樣品在空氣中較穩(wěn)定；略吸潮；略有澀味；在中性、酸性條件下穩(wěn)定；槭樹提取物采用槭樹的芽、葉或皮為原料提取。
2.一種槭樹提取物在制備自由基清除劑或抗氧化劑中的應用。
3.一種槭樹提取物的制備工藝方法，其特征在于包括下列步驟A、將槭樹(Acer sp.)的芽、葉或皮干燥，并將干燥原料粉碎，細度為20目以上；B、在粉碎的原料中按1∶6-20加入提取劑，在20℃溫度以上條件下，間歇或連續(xù)提取10分鐘以上，過濾得提取液；C、將提取液真空濃縮，濃縮溫度為40-100℃，得濃縮液；D、將濃縮液干燥，干燥溫度為-30到170℃；或結晶后分離出結晶再干燥；得干燥粗提取物，粗提取物中2，6-2沒食子酸槭糖酯含量20-80％；同時含沒食子酸甲酯1-5％；鼠李糖黃酮甙1-10％；少量的類胡蘿卜素、糖類和葉綠素；粗提取物性狀白色到淺黃綠色無定形粉末；干燥樣品在空氣中較穩(wěn)定；略吸潮；在中性、酸性條件下穩(wěn)定；E、再將粗提取物精提，精提方法是重結晶法(也可用色譜法)，得精提取物，其中2，6-2沒食子酸槭糖酯含量70-95％。
4.根據(jù)權利要求3所述的一種槭樹提取物的制備工藝方法，其特征在于所述提取液為水或乙醇或水和乙醇的混合物；所述水和乙醇混合物的比例為1-0∶0-4。
5.根據(jù)權利要求1或2或3所述的一種槭樹提取物，其特征在于所述的槭樹(Acersp.)為青榨槭(Acer davidii)或元寶槭(Acer truncatum)或苦茶槭(Acer ginnala)或色木槭(Acer mono)或三葉槭(Acer henryi)或雞爪槭(Acer palmatum)或三角槭(Acer buergerianum)或紫果槭(Acer cordatum)。
全文摘要
本發(fā)明涉及槭樹提取物及在制備自由基清除劑和抗氧化劑中的應用。特點是槭樹提取物中2，6－2沒食子酸槭糖酯含量20－95％；同時含沒食子酸甲酯1－5％；鼠李糖黃酮甙1－10％；少量的類胡蘿卜素、糖類和葉綠素。本發(fā)明槭樹提取物清除自由基和抗氧化活性強，強于目前常用的天然自由基清除劑和抗氧化劑，它對DPPH自由基的ID
文檔編號A61K31/216GK1844130SQ20061003970
公開日2006年10月11日 申請日期2006年4月13日 優(yōu)先權日2006年4月13日
發(fā)明者胡豐林, 樊美珍, 李增智, 陸瑞利 申請人:安徽農(nóng)業(yè)大學