專利名稱：全蠶粉中降血糖活性物質(zhì)的分離方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種活性物質(zhì)的分離方法，特指一種全蠶粉中降血糖活性物質(zhì)的分離方法。
背景技術：
用家蠶制成的全蠶粉具有降血糖作用。如專利“含有蠶粉末為有效成分的降血糖劑及其制造方法(CN95115559.8)”，“含乳鐵蛋白全蠶粉的生產(chǎn)方法(CN03115855.2)”，“一種全蠶粉保健食品制備方法(CN03116235.5)”，“桑蠶粉的制備方法及其應用(CN200410017227.3)”。但家蠶是真核生物，具有完整生命特征的有機體，用其制備的全蠶粉成分復雜，特別是蠶體內(nèi)含有一些大分子物質(zhì)如糖、脂等，對某些人群可能是過敏原；家蠶在飼養(yǎng)過程中有可能受到來自多方面的污染等有可能對人(特別是病人)造成損害。分離全蠶粉中降血糖活性物質(zhì)，對全蠶粉的有效成分和藥效學的檢測指標提供規(guī)范科學的標準，有利于實現(xiàn)產(chǎn)品質(zhì)量的有效控制等。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種全蠶粉中降血糖活性物質(zhì)的分離方法，其保持了家蠶體內(nèi)的原有活性物質(zhì)，產(chǎn)出量高。
實現(xiàn)上述目的的技術方案，其特征是1、全蠶粉降血糖有效成分的提取將全蠶粉與浸提緩沖液按1∶1的比例混勻，置4～8℃環(huán)境下浸提、過濾、分離等。
2、上離子交換柱層析將全蠶粉浸提液上離子交換柱層析，進行陽離子交換柱或陰離子交換柱層析，并調(diào)整pH值大于3.0。
3、洗脫分別用水和NH4OH洗脫。
4、樣品收集收集樣品每管10ml，用測麥芽糖糖苷酶抑制劑活性的方法，檢測并收集有葡萄糖苷酶抑制劑活性部分。
5、濃縮、干燥將有葡萄糖苷酶抑制劑活性部分，進行超低溫冷凍干燥，保存?zhèn)溆谩?br> 本發(fā)明的優(yōu)點(1)保持家蠶體內(nèi)的原有生物活性物質(zhì)整個全蠶粉的制備過程，都是在低溫環(huán)境下完成的，有利于家蠶體內(nèi)原有活性物質(zhì)的保存。
(2)降血糖活性成分單一通過離子交換柱層析，分離出的活性成分單一，降血糖效果上佳。
(3)分離物產(chǎn)出率高使用本分離方法，最終得率可達2.7％。降血糖效果顯著。
具體實施例方式
本發(fā)明的分離步驟如下1、全蠶粉降血糖有效成分的提取按1∶1的比例將全蠶粉與浸提緩沖液混勻，置4～8℃環(huán)境下浸提24小時；然后，過濾、分離浸提液。
2、上離子交換柱層析將全蠶粉浸提液上離子交換柱層析，進行陽離子交換柱柱層析，并調(diào)整pH值大于3.0。
3、洗脫分別用水和NH4OH洗脫3-4次。
4、樣品收集收集樣品每管10ml，用測麥芽糖糖苷酶抑制劑活性的方法，檢測并收集有葡萄糖苷酶抑制劑活性部分。
5、濃縮、干燥將有葡萄糖苷酶抑制劑活性部分，進行超低溫冷凍干燥，保存?zhèn)溆谩?br> 將上述分離的降血糖有效成分溶于水，進行實驗小鼠的罐胃實驗，服用該分離物有效成分0.045mg/天·克體重劑量，30天后空腹和餐后2小時的血糖值分別比模型對照組降低25％和16％；服用相同劑量的“拜糖平”，30天后空腹和餐后2小時的血糖值分別比模型對照組降低31％和18％。而添食15mg/天·克體重劑量的全蠶粉，30天后實驗鼠空腹和餐后2小時的血糖值分別降低了18.81％和11.07％。總之，全蠶粉的使用劑量為該分離有效成分的330倍，而降血糖效果僅為分離有效成分的70％-75％。
當全蠶粉與浸提緩沖液在4～8℃環(huán)境下浸提時間低于12小時，最終分離物的得率不足1％，降血糖效果為浸提24小時的78.6％，效果明顯降低。但當浸提時間超過24小時，最終分離物的得率及其降血糖效果，與浸提24小時相比較沒有顯著差異。
綜上所述，本發(fā)明的制備工藝流程全蠶粉——降血糖有效成分的提取——上離子交換柱層析——洗脫——樣品收集——濃縮干燥。
權利要求
1.全蠶粉中降血糖活性物質(zhì)的分離方法，其特征是(1)全蠶粉降血糖有效成分的提取將全蠶粉與浸提緩沖液按1∶1的比例混勻，置4～8℃環(huán)境下浸提、過濾、分離；(2)上離子交換柱層析將全蠶粉浸提液上離子交換柱層析，進行陽離子交換柱層析，并調(diào)整pH值大于3.0；(3)洗脫分別用水和NH4OH洗脫；(4)樣品收集收集樣品每管10ml，用測麥芽糖糖苷酶抑制劑活性的方法，檢測并收集有葡萄糖苷酶抑制劑活性部分；(5)濃縮、干燥將有葡萄糖苷酶抑制劑活性部分，進行超低溫冷凍干燥，保存?zhèn)溆谩?br> 全文摘要
本發(fā)明涉及一種全蠶粉中降血糖活性物質(zhì)的分離方法。其分離步驟為首先將全蠶粉與浸提緩沖液按1∶1的比例混勻，置4～8℃環(huán)境下浸提、過濾、分離，進行全蠶粉降血糖有效成分的提??；然后將全蠶粉浸提液上離子交換柱層析，進行陽離子交換柱層析，并調(diào)整pH值；再洗脫、樣品收集、濃縮與干燥。本發(fā)明保持了家蠶體內(nèi)的原有活性物質(zhì)，降血糖活性成分單一；產(chǎn)出量高，獲得率為2.7％。
文檔編號A61P3/10GK1883513SQ20061004072
公開日2006年12月27日 申請日期2006年5月30日 優(yōu)先權日2006年5月30日
發(fā)明者桂仲爭, 傅志強, 侯成香 申請人:江蘇科技大學