專利名稱：一種治療糖尿病腎病的藥物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種治療糖尿病腎病的藥物，具體地說是一種以中藥為原料藥制備的中成藥，本發(fā)明還涉及到藥物的制備方法。
背景技術(shù)：
據(jù)WHO最新權(quán)威數(shù)據(jù)顯示，全球糖尿病患者的人數(shù)已超過1.77億，糖尿病已成為威脅人類健康的最大兇手之一，并且有擴大化的趨勢。糖尿病腎病(DN)作為糖尿病患者的一個重要并發(fā)癥，近年來已成日趨嚴(yán)重之勢。文獻報道，糖尿病患者5％-10％因腎病致死。由于2型糖尿病占糖尿病的90％左右，故糖尿病患ESRD(末期腎功能衰竭)的患者大多數(shù)為2型糖尿病。據(jù)美國、日本和大多數(shù)發(fā)達國家報告，糖尿病已成為全球ESRD需透析或腎移植單個最主要的原因。70年代慢性腎功能衰竭(CRF)最主要的病因是慢性腎炎，而到90年代，在美國CRF病人中糖尿病患者已占40％，成為第一位的原因。在我國，目前雖然慢性腎炎還在腎衰患者中占多數(shù)，但隨著糖尿病患者的不斷增加，糖尿病腎病的發(fā)病率也將越來越高，其導(dǎo)致CRF的危機性將顯著增加。
糖尿病腎病是糖尿病主要的微血管病變，主要指毛細血管間質(zhì)腎小球硬化癥，一般由糖尿病并發(fā)的腎小動脈硬化、腎小球硬化及腎盂腎炎，統(tǒng)稱為糖尿病性腎臟病變，其中由糖尿病小血管病變引起的腎小球硬化(即腎小球K-W結(jié)節(jié))更能代表糖尿病腎病。DN是糖尿病最常見的并發(fā)癥，也是糖尿病致死、致殘的主要原因。據(jù)報道，糖尿病史10年～20年的患者DN發(fā)病率可達47.66％，且病變呈進行性發(fā)展，5年～10年后即可出現(xiàn)終末期腎功能衰竭。DN臨床以大量蛋白尿，面目浮腫，腎功能下降，高血壓為主要表現(xiàn)。Mogensen按照DN腎臟病理改變和功能改變，結(jié)合實驗檢查將DN分為五期。其中前3期為DN早期，采用中藥制劑適時的治療可控制病情進展，即逆轉(zhuǎn)病機；4期和5期分別為DN的中期和晚期，如病情進入這兩期，不管臨床如何治療都不能阻止病變的進一步發(fā)展，最終進入尿毒癥階段，需要血液透析或腎移植。因此，有效預(yù)防DN發(fā)生，阻斷病情發(fā)展，延緩慢性腎衰進程，已成為當(dāng)今醫(yī)學(xué)界迫在眉睫的攻關(guān)課題。
目前，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對糖尿病腎病的病因，病理機制還未完全認(rèn)識清楚。病因方面，主要為進食高熱量飲食過多，活動量減少，長期糖脂代謝紊亂，加之遺傳因素、吸煙過多、感染、應(yīng)激、高血壓等所致以腎血管為主的腎小球結(jié)構(gòu)和功能受損，腎小球硬化性病理改變。病理方面1、腎血流動力學(xué)改變；2、生化代謝異常；3、細胞因素及體液因素；4、氧化應(yīng)激學(xué)說；5、腎小球濾過屏障改變；6、血液流變學(xué)異常等?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)治療該病缺乏有效地治療手段，對于早期的DN主要采取飲食治療，控制血糖、控制血壓等基礎(chǔ)治療，而對于中晚期患者，除基礎(chǔ)治療以外，只能依靠血液透析、腎移植等手段。藥物治療方面，盡管現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對于DN的認(rèn)識與治療已經(jīng)發(fā)展到了分子水平，但仍存在諸多問題，如1、血糖控制藥不良反應(yīng)較多，稍有不慎，即發(fā)生低血糖反應(yīng)，嚴(yán)重者危及生命；2、現(xiàn)代醫(yī)學(xué)治療DN，皆需終生用藥，為防止其大幅上下波動，需定期監(jiān)測血糖，根據(jù)血糖水平調(diào)整藥量，給患者的生活帶來了極大不便；3、血糖控制穩(wěn)定后，機體對胰島素的敏感性增強，胰島B細胞功能改善，仍容易出現(xiàn)低血糖反應(yīng)。治療中存在的諸多局限性和不良反應(yīng)，使目前的治療難以取得良好的效果。
三、發(fā)明的目的本發(fā)明的目是提供一種治療糖尿病腎病的藥物。本發(fā)明所提供的藥物具有降血糖、降血脂、為臨床治療糖尿病腎病氣陰兩虛、瘀濁阻滯證提供一種新的藥物選擇。
本發(fā)明的另一目的是提供治療糖尿病腎病的藥物的制備方法。本發(fā)明的目的是這樣來實現(xiàn)的它由下述重量(份)配比的原料藥制成的藥劑
丹參15----600 黃芪20----800 益母草10----400女貞子9----360墨旱蓮6----240茯苓7.5----300豬苓6----240 芡實7.5----300地龍4.5----180本發(fā)明藥物的優(yōu)選的各原料藥物重量(份)配比為丹參30----450 黃芪40----600 益母草20----300女貞子18----270 墨旱蓮12----180 茯苓15----225豬苓12----180 芡實15----225 地龍9----135本發(fā)明藥物的最佳的各原料藥物重量(份)配比為丹參50----360 黃芪66.67----480 益母草33.33----240女貞子30----216 墨旱蓮20----114 茯苓25----180豬苓20----114 芡實25----180 地龍15----108本發(fā)明的最佳實施方案其各原料藥物重量(份)配比為方案一丹參300 黃芪400 益母草200女貞子180墨旱蓮120茯苓150豬苓120 芡實150 地龍90方案二丹參270 黃芪360 益母草180女貞子162墨旱蓮108茯苓135豬苓108 芡實135 地龍81方案三丹參330 黃芪440 益母草220女貞子198墨旱蓮132茯苓165豬苓198 芡實165 地龍99本發(fā)明的一種治療糖尿病腎病的藥物的制備方法是1、取芡實粉碎成細粉，過100目篩，備用；2、取丹參、黃芪、益母草、女貞子、墨旱蓮、茯苓、豬苓、地龍加10倍量水煎煮提取三次，每次2小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.20-1.25(60℃測)，加入乙醇使醇含量達60％，充分混合均勻，靜置12小時，取上清液，回收乙醇至無醇味，加入上述細粉，攪拌均勻，干燥，粉碎成細粉，用90％乙醇制成顆粒，共制成1000份。
本發(fā)明提供的一種治療糖尿病腎病的藥物，具有益氣養(yǎng)陰，健脾補腎，化瘀瀉濁。用于氣陰兩虛、瘀濁阻滯所致的糖尿病腎病，癥見困倦乏力，口渴多飲，尿頻混濁，消瘦，腹脹水腫，心悸胸悶，五心煩熱，舌體胖大，舌質(zhì)紫暗或瘀斑，苔薄白或少苔，脈弦細或沉澀。本發(fā)明提供的一種治療糖尿病腎病的藥物，其黃芪味甘，性微溫。歸睥、肺經(jīng)，功擅補氣固表，利尿托毒，排膿，斂瘡生肌。甘能補，大量黃芪取其健脾補中之功，脾旺則氣血生化有源，五臟之氣得補。黃芪一藥而兼具補氣、祛瘀、利尿之功，與糖尿病腎病脾腎氣虛、瘀濁阻滯之機的對，故為君藥。女貞子味甘、苦，性涼。歸肝、腎經(jīng)，功擅補肝腎陰，烏須明目。為清補之品，補而不膩。且能除虛熱，“蓋腎本寒，陰虛則熱而軟，此藥氣味俱陰，正入腎除熱補精之要品”(《本草經(jīng)疏》)。旱蓮草味甘、酸，性寒。歸肝、腎經(jīng)，功擅補肝腎陰，涼血止血。同為臣藥。兩藥相合，不僅能補DN肝腎之陰虛，且除虛熱而涼血。
丹參味苦，性微寒。歸心、肝經(jīng)，具有活血通經(jīng)、祛瘀止痛、涼血消癰、清心除煩作用。與黃芪合用可加強黃芪的祛瘀之功，且本品重在活血祛瘀，養(yǎng)血安神，且藥性寒涼，具有清熱涼血之功?，F(xiàn)代藥理研究本品制劑對心血管、血液、血脂、肝脾、抗肝纖維化、促進組織和再生系統(tǒng)具有一定作用，如對微循環(huán)的影響，有增強微循環(huán)障礙的改善，血流速度加快，對糖尿病腎病微循環(huán)的改善及抗K-W結(jié)節(jié)的形成有一定的藥理作用，是為佐藥。益母草味苦、辛，性微寒。辛能行能散，苦能瀉泄，歸肝、心、膀胱經(jīng)，功能活血調(diào)經(jīng)，利水消腫。糖尿病腎病者均以此品與丹參、黃芪同用，以加強二者活血化瘀、利尿消腫之功。益母草祛邪而不傷正，具有補益之功，現(xiàn)代藥理研究顯示，益母草能降低血液及血漿粘度，降低紅細胞聚集指數(shù)及TK值，延長復(fù)鈣時間及抑制血小板聚集作用，同為佐藥。
茯苓味甘淡，性平。歸心、脾、腎經(jīng)，功擅利水滲濕，健脾安神。甘淡平性之品，能利水滲濕，茯苓主“口焦舌干，利小便”，為利水滲濕要藥，茯苓尚能健脾，助黃芪加強益氣之力，兩者合用，水濕通利，水去則脾自健運。豬苓味甘淡，性平。歸腎、膀胱經(jīng)，長于利水滲濕。豬苓主“利水道”“豬苓引水之功多，久服必?fù)p腎氣，昏人目?！薄伴_腠理，治淋腫腳氣，百濁帶下，妊娠子淋胎腫，小便不利。”并謂“開腠理，利小便，與茯苓同功，但入補藥不如茯苓也?！蓖瑸樽羲帯?br> 芡實味甘澀，性平。歸脾、腎經(jīng)，能補脾祛濕，助黃芪、茯苓補氣利濕，又能益腎固精，防止DN患者精微外漏，正如《本草求真》云“味甘補脾，故能利濕，而使瀉泄腹痛可治，……味澀固腎，而遺帶使小便不禁皆愈?！笔菫槭顾帯５佚垶橄毯?，寒能清熱，咸能入血，且其性下行，入血能通經(jīng)活絡(luò)，入膀胱則可通利水濕，久病入絡(luò)，DN瘀濁阻絡(luò)，地龍能利小便而助泄?jié)?、通?jīng)絡(luò)而助祛瘀，瘀濁內(nèi)蘊，久易化熱，地龍咸寒又可清熱解毒。現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，地龍煎劑可明顯使體外血栓長度、濕重、干重減少，抑制紅細胞聚集，降低血漿纖維蛋白原含量，降低各切變率下的全血粘度，改善紅細胞的變形能力；地龍類藥材熱浸劑均有明顯的降壓，平喘和利尿作用，同為使藥。
本發(fā)明提供的藥物，其組方合理，配伍得當(dāng)，以黃芪配女貞子、旱蓮草益氣養(yǎng)陰，以黃芪配以茯苓、豬苓以健脾益腎，尚可利水消腫，兼用芡實雙補脾腎，增強君臣藥物之功，且味澀，有收澀之功效；丹參、益母草活血化瘀、疏通血脈，改善機體整體功能，益母草尚可利水消腫，對于化瘀排濁，緩解癥狀不無益處。配以地龍，通絡(luò)之力強，性下行，利尿排濁。諸藥合用，針對主機，攻補兼施，益氣養(yǎng)陰而不留邪，祛瘀化濁而不傷正。全方共奏健脾補氣，滋腎養(yǎng)陰，活血祛瘀，利水滲濕之功，切中病機，行之有效，是治療氣陰兩虛、瘀濁阻滯所致的糖尿病腎病的有效良藥。
本發(fā)明提供的藥物經(jīng)其藥理毒理研究試驗一、試驗?zāi)康母鶕?jù)參芪糖腎安膠囊的功能主治，選用疾病模型動物及正常動物，評價參芪糖腎安膠囊在益氣養(yǎng)陰，健脾補腎，化瘀瀉濁等方面的藥理作用，依據(jù)實驗結(jié)果，結(jié)合相關(guān)中醫(yī)理論，確定參芪糖腎安膠囊對糖尿病腎病氣陰兩虛、瘀濁阻滯者的藥效學(xué)作用，以及其作用特點，為臨床研究提供依據(jù)。
二、主要用途益氣養(yǎng)陰，健脾補腎，化瘀瀉濁。用于糖尿病腎病，癥見困倦乏力，口渴多飲，尿頻混濁，消瘦，腹脹水腫，心悸胸悶，五心煩熱等屬氣陰兩虛、瘀濁阻滯證者。
三、對鏈脲佐菌素誘導(dǎo)大鼠糖尿病模型血糖及腎臟功能保護作用的試驗研究實驗材料藥物供試品參芪糖腎安膠囊，陜西天祿堂制藥有限責(zé)任公司提供。
陽性對照品益腎消渴膠囊。
劑量設(shè)置及其依據(jù)參芪糖腎安膠囊人臨床擬用劑量為15.39g生藥/人/日(即0.2565g生藥/kg/日)，按體表面折算，大鼠用藥劑量為1.5g生藥/kg，以此劑量為中劑量，其1/2為低劑量，其2倍為高劑量，臨用前用0.5％的羧甲基纖維素鈉分別配成濃度為0.075g生藥/ml、0.15g生藥/ml、0.3g生藥/ml，按1ml/100g灌胃給藥，1次/d。
益腎消渴膠囊按人(60kg/人)體表面積將臨床使用劑量換算成大鼠等效劑量1.0g/kg。模型對照組灌服等體積5％CMC-Na。
給藥途徑及給藥體積灌胃給藥，1ml/100g。
試驗動物品系SD大鼠等級一級數(shù)量90只重量180-200g性別雌雄各半試劑戊巴比妥鈉，配制濃度注射用水配制成3mg/ml。
鏈脲佐菌素(STZ)；血糖Glucose生化試劑；丙二醛(MDA)測定試劑盒；超氧化物歧化酶(SOD)測定試劑盒；尿白蛋白試劑盒；羧甲基纖維素鈉；儀器血糖儀、血糖試紙、全自動生化儀、尿分析儀、紫外分光光度劑、生物顯微鏡、手動輪轉(zhuǎn)式切片機、組織冷凍包埋機、生物組織全自動脫水機、攤片烤片機。
實驗方法選取檢疫合格的SD大鼠90只，按性別、體重完全隨機法抽取12只大鼠(♀6♂6)設(shè)置為正常對照組，剩下的78只大鼠為擬造模動物。造模前各大鼠禁食12h，擬造模動物按60mg/kg體重的劑量，一次性腹腔注射鏈脲佐菌素(STZ)檸檬酸溶液，正常對照組則注射等量的檸檬酸緩沖液。大鼠自由飲水進食72h后，尾靜脈采血，測血糖≥16.7mmol/L作為糖尿病模型造模成功的標(biāo)準(zhǔn)。將糖尿病大鼠按性別體重完全隨機分為參芪糖腎安膠囊低、中、高三個劑量組，益腎消渴膠囊對照組及模型對照組，每組12只(♀6、♂6)。加上空白對照組共6個劑量組。試驗研究給藥方案參見表1。
表1對糖尿病大鼠模型血糖影響的試驗研究給藥方案


各組大鼠均采用灌胃給藥途徑，按表1所示給予相應(yīng)劑量的受試物。每天1次，連續(xù)給藥35天。最后一次給藥后，將大鼠放入代謝籠中，收集24小時的尿液，測量尿白蛋白。動物處死前禁食不禁飲12h，以30mg/kg的戊巴比妥鈉大鼠腹腔注射，麻醉大鼠后，腹主動脈取血，用于測定血糖及血清肌酐、尿素氮、血清丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)。取雙側(cè)腎臟迅速稱重后以10％的福爾馬林固定，進行病理組織學(xué)檢測。
試驗結(jié)果試驗大鼠一般狀態(tài)觀察見造模組動物活動明顯下降，機體消瘦，豎毛，飲水量及尿量明顯增多，有3只動物造模后死亡；各用藥組大鼠較模型組一般狀態(tài)均有一定程度的改善，陽性對照及中劑量組各有1只動物死亡，低劑量組有2只動物死亡。
表2參芪糖腎安膠囊對大鼠體重及血糖的影響(x±sd)

表3參芪糖腎安膠囊對大鼠腎體重比的影響(x±sd)


表4參芪糖腎安膠囊對大鼠24h尿蛋白、血清肌酐、血清尿素氮的影響(x±sd)

表5參芪糖腎安膠囊對大鼠血清丙二醛、超氧化物歧化酶的影響(x±sd)

由本次試驗結(jié)果分析可知，參芪糖腎安膠囊可明顯提高STZ所引起的糖尿病大鼠模型的體重，降低血糖，減輕腎臟的腫大，減小腎與體重的比值，減少24h尿中蛋白量，降低血清中肌酐、尿素氮水平及減少血清中的氧化產(chǎn)物，提高SOD的含量。
四、對四氧嘧啶誘導(dǎo)家兔糖尿病模型血糖及相關(guān)生化指標(biāo)的影響實驗材料藥物供試品參芪糖腎安膠囊，陜西天祿堂制藥有限責(zé)任公司提供。
陽性對照品鹽酸二甲雙胍，規(guī)格0.5g/片；益腎消渴膠囊；劑量設(shè)置參芪糖腎安膠囊人臨床擬用劑量為15.39g生藥/人/日，按體表面積折算，兔用藥劑量為0.75g生藥/kg，以此劑量為中劑量，其1/2為低劑量，其2倍為高劑量，臨用前用0.5％的羧甲基纖維素鈉分別配成濃度為0.075g生藥/ml、0.15g生藥/ml、0.3g生藥/ml，按5ml/kg灌胃給藥，1次/d。
鹽酸二甲雙胍按人體表面積將臨床使用劑量換算成兔等效劑量50mg/kg。
益腎消渴膠囊按人體表面積將臨床使用劑量換算成大鼠等效劑量0.5g/kg。
給藥途徑及給藥體積灌胃給藥，5ml/kg。
試劑四氧嘧啶，精確稱取0.8g，臨用前2分鐘用注射用生理鹽水16ml配成0.05g/ml四氧嘧啶生理鹽水溶液。
戊巴比妥鈉，配制濃度注射用水配制成3mg/ml。
動物品系日本大耳白兔等級一級數(shù)量58只重量2.0-2.5kg性別雌雄各半儀器血糖儀、血糖試紙、血液粘度計。
實驗方法選取檢疫合格的日本大耳白兔58只，按性別、體重完全隨機法抽取6只兔設(shè)置為正常對照組，剩下的52只兔為擬造模動物。造模前各兔禁食12h，擬造模動物按125mg/kg體重的劑量，一次性靜脈注射四氧嘧啶溶液，正常對照組則注射等量的生理鹽水溶液。造模后，兔自由飲水進食72h后，耳緣靜脈采血，測血糖≥16.7mmol/L作為糖尿病模型造模成功的標(biāo)準(zhǔn)。將糖尿病兔按性別體重完全隨機分為參芪糖腎安膠囊低、中、高三個劑量組，鹽酸二甲雙胍、益腎消渴膠囊對照組及模型對照組，每組6只。加上空白對照組共7個劑量組。
表6參芪糖腎安膠囊對糖尿病兔模型血糖影響的試驗研究給藥方案


給藥方法各組兔均采用灌胃給藥途徑，按表6所示給予相應(yīng)劑量的受試物。每天1次，連續(xù)給藥30天。動物處死前，禁食不禁飲12h，最后一次給藥后30min，以30mg/kg的戊巴比妥鈉兔靜脈注射，麻醉后，腹主動脈取血，用于測定血糖及血清肌酐、尿素氮、血清谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)。
實驗結(jié)果表7參芪糖腎安膠囊對家兔體重及血糖的影響(x±sd)


表8 參芪糖腎安膠囊對家兔腎體重比的影響(x±sd)

表9 參芪糖腎安膠囊對家兔24h尿蛋白的影響(x±sd)


表10 參芪糖腎安膠囊對家兔血清谷胱甘肽、超氧化物歧化酶的影響(x±sd)

由試驗結(jié)果分析可知，參芪糖腎安膠囊可明顯提高四氧嘧啶所引起的糖尿病家兔模型的體重，降低血糖，減輕腎臟的腫大，減小腎與體重的比值，減少24h尿中蛋白量，提高血清中谷胱甘肽(GSH)及SOD的含量。
五、參芪糖腎安膠囊對血瘀大鼠模型血液流變學(xué)的影響試驗實驗材料藥物；供試品參芪糖腎安膠囊，批號20050302，陜西天祿堂制藥有限責(zé)任公司提供，0.5％CMC-Na懸浮配制.
陽性對照品復(fù)方丹參片，規(guī)格0.25g/片，劑量設(shè)置
參芪糖腎安膠囊人臨床擬用劑量為15.39g生藥/人/日，按體表面折算，大鼠用藥劑量為1.5g生藥/kg，以此劑量為中劑量，其1/2為低劑量，其2倍為高劑量，臨用前用0.5％的羧甲基纖維素鈉分別配成濃度為0.075g生藥/ml、0.15g生藥/ml、0.3g生藥/ml，按1ml/100g灌胃給藥，1次/d。
復(fù)方丹參片按人體表面積將臨床使用劑量換算成大鼠等效劑量0.22g/kg。
給藥途徑及給藥體積灌胃給藥，1ml/100g。
試劑高分子右旋糖酐，Sigma公司生產(chǎn)。
動物品系SD大鼠等級一級數(shù)量60只重量180-200g性別雌雄各半儀器血液粘度計，型號YDA-IV。
實驗方法選取檢疫合格的SD大鼠60只，按性別、體重完全隨機法分組，分別為正常對照組、模型對照組及丹參片對照組、參芪糖腎安膠囊低、中、高三個劑量組，每組10只，雌雄各半(♀5、♂5)。
表11 參芪糖腎安膠囊對糖尿病大鼠模型血流變影響的試驗研究給藥方案


大鼠在本實驗室喂養(yǎng)1周后，按性別、體重隨機分為6組。灌胃給藥，每日一次，連續(xù)給藥10天，給藥容積為1ml/100g，模型組與對照組灌服等容積5％CMC-Na。末次給藥后1小時，除空白對照組外其余各組自尾靜脈快速推注10％高分子右旋糖酐6ml/kg，1小時后各組大鼠(包括空白對照組)股動脈取血于干素抗凝管中，用血液流變儀測定血液流變學(xué)分項指標(biāo)。
觀察指標(biāo)全血高、中、低切變率，血漿切變率、血沉等指標(biāo)。
實驗結(jié)果表12參芪糖腎安膠囊對血瘀大鼠血液流變性的影響(x±sd)


表13參芪糖腎安膠囊對血瘀大鼠血液流變性的影響(x±sd)


參芪糖腎安膠囊高、中劑量組能明顯降低血瘀模型大鼠高切、中切、低切全血粘度和血漿粘度(P＜0.01)，低劑量組能明顯降低血瘀模型大鼠高切全血粘度(P＜0.01)。
表14參芪糖腎安膠囊對血瘀大鼠血液流變性的影響(x±sd)

從表結(jié)果說明，參芪糖腎安膠囊高、中劑量組能明顯降低纖維蛋白原，參芪糖腎安膠囊高、中、低劑量組能明顯減緩血沉速度，與模型對照組比較有顯著性差異。
本實驗結(jié)果表明參芪糖腎安膠囊能明顯改善高分子右旋糖酐造成的大鼠血瘀模型，使血液粘度明顯減輕，起效劑量為0.75mg/kg，提示參芪糖腎安膠囊具有較強的活血化瘀作用。
六、參芪糖腎安膠囊對小鼠微循環(huán)的影響試驗實驗材料藥物供試品參芪糖腎安膠囊，陜西天祿堂制藥有限責(zé)任公司提供。
陽性對照品復(fù)方丹參片，規(guī)格0.25g/片。
劑量設(shè)置參芪糖腎安膠囊人臨床擬用劑量為15.39g生藥/人/日(即0.2565g生藥/kg/日)，按體表面折算，小鼠用藥劑量為3.0g生藥/kg，以此劑量為中劑量，其1/2為低劑量，其2倍為高劑量，臨用前用0.5％的羧甲基纖維素鈉分別配成濃度為0.075g生藥/ml、0.15g生藥/ml、0.3g生藥/ml，按0.2ml/10g灌胃給藥，1次/d。
復(fù)方丹參片按人(60kg/人)體表面積將臨床使用劑量換算成小鼠等效劑量0.5g/kg。
給藥途徑及給藥體積灌胃給藥，0.2ml/10g。
試劑氯化鈉注射液，規(guī)格250ml/瓶。
戊巴比妥鈉，AR級，25g/瓶。用生理鹽水配成3％溶液。鹽酸腎上腺素，動物品系昆明種小鼠等級一級 數(shù)量50只重量18-22g性別雌雄各半儀器WX-6多部位微循環(huán)顯微儀。
實驗方法取檢疫合格的昆明種小鼠50只，鼠齡8周，體重20±2g，隨機分為5組，每組10只，雌雄各半。見表15。
表15參芪糖腎安膠囊對小鼠微循環(huán)影響的試驗研究給藥方案


按表所列藥物與劑量給藥，1次/日，連續(xù)10天，對照組同法給等體積0.5％CMC-Na(10ml/kg)。各組末次給藥后30min(禁食不禁水18小時)，i.p50mg/kg戊巴比妥鈉實施麻醉，麻醉動物仰位固定于手術(shù)板上，于腹壁正中作1cm切口，輕輕拉出一段空腸袢，肉眼觀察腸系膜血管分布情況，選擇細小血管走行，脂肪少的部位作為觀測區(qū)域，將腸袢平鋪于特制的有機玻璃灌流小池上，并固定，用微循環(huán)顯微鏡進行觀察及錄象測定，試驗過程中不斷給腸系膜滴加37℃生理鹽水。先觀察正常狀態(tài)腸系膜微循環(huán)的微血管(第三級動脈和第三級靜脈)管徑、血液流態(tài)及毛細血管網(wǎng)交點計數(shù)的情況。然后在觀察部位滴加稀釋為1/100000鹽酸腎上腺素(Adr)注射液15微升，并繼續(xù)觀察滴加Adr后上述指標(biāo)的變化情況。其中血液流態(tài)評分標(biāo)準(zhǔn)如下血液流態(tài)評分標(biāo)準(zhǔn)

表16參芪糖腎安膠囊對小鼠腸系膜毛細血管網(wǎng)交點開放數(shù)的影響(x±sd)

表16顯示，參芪糖腎安膠囊能顯著促進滴加鹽酸腎上腺素后小鼠腸系膜毛細血管網(wǎng)交點開放數(shù)(P＜0.05)。
表17參芪糖腎安膠囊對小鼠腸系膜微循環(huán)血液流態(tài)的影響(x±sd)


表17顯示，參芪糖腎安膠囊高劑量組能明顯改善腎上腺素所致小鼠腸系膜微循環(huán)血流速度減慢或停滯(P＜0.05或P＜0.01)。
表18參芪糖腎安膠囊對小鼠腸系膜微循環(huán)第三級動脈血管管徑的影響(x±sd)


表18顯示，參芪糖腎安膠囊高、中劑量組能明顯對抗腎上腺素所致小鼠腸系膜微動脈血管收縮(P＜0.05或P＜0.01)。
表19參芪糖腎安膠囊對小鼠腸系膜微循環(huán)第三級靜脈血管管徑的影響(x±sd)


表19顯示，參芪糖腎安膠囊高、中劑量組能明顯對抗腎上腺素所致小鼠腸系膜微靜脈血管收縮(P＜0.05或P＜0.01)。
本實驗結(jié)果表明參芪糖腎安膠囊能明顯改善小鼠腸系膜微循環(huán)狀態(tài)，起效劑量小鼠為0.375g生藥/kg，提示參芪糖腎安膠囊具有較強的活血化瘀，改病善微循環(huán)的作用。
參芪糖腎安膠囊脾虛小鼠冷水游泳時間的影響供試品參芪糖腎安膠囊，陜西天祿堂制藥有限責(zé)任公司提供。
陽性對照品名稱補脾益腸丸。主要用途補中益氣，健脾和胃，澀腸止瀉。臨床擬用劑量18g/人/日。
劑量設(shè)置參芪糖腎安膠囊人臨床擬用劑量為15.39g生藥/人/日(即0.2565g生藥/kg/日)，按體表面折算，大鼠用藥劑量為1.5g生藥/kg，以此劑量為中劑量，其1/2為低劑量，其2倍為高劑量，臨用前用0.5％的羧甲基纖維素鈉分別配成濃度為0.075g生藥/ml、0.15g生藥/ml、0.3g生藥/ml，按1ml/100g灌胃給藥，1次/d。試驗給藥方案參見表20。
補脾益腸丸按人(60kg/人)體表面積將臨床日用量(18g/人/日)折算成小鼠用量3.5g/kg，配制濃度為0.175g/ml。
表20參芪糖腎安膠囊對脾虛小鼠冷水游泳時間的影響研究給藥方案

給藥途徑及給藥體積灌胃給藥，0.2ml/10g。
試劑利血平注射液。
動物品系昆明種小鼠 等級一級 數(shù)量60只 性別雌雄各半儀器小鼠游泳池長30cm，寬30cm，高30cm。
實驗方法經(jīng)檢疫合格的小鼠在實驗前禁食不禁水12小時，稱取每只小鼠體重，按體重隨機法抽取10只小鼠(雌雄各半)為正常對照組，余下的小鼠用利血平0.25mg/kg每日皮下注射1次，連續(xù)7d；第8天完全隨機法將造模動物分成5組，分別為模型對照組、陽性對照組、參芪糖腎安膠囊低、中、高劑量組，并于當(dāng)天開始灌胃給予對應(yīng)劑量的對照品和供試物，空白對照組灌胃等體積的0.5％CMC-Na，每天1次，連續(xù)7天，記錄動物的體重變化，末次給藥后1h，將小鼠放入冷水游泳池(5℃-8℃)進行負(fù)荷游泳實驗，負(fù)荷重為體重的7％，用秒表記錄自落水開始至鼻孔沉入水面以下10s的時間作為小鼠冰水游泳時間，反映小鼠體力與應(yīng)激反應(yīng)的綜合指標(biāo)。
實驗結(jié)果表21參芪糖腎安膠囊脾虛動物模型小鼠體重變化情況(x±sd，體重g)

表22參芪糖腎安膠囊脾虛動物模型小鼠力竭游泳時間結(jié)果


由以上試驗結(jié)果分析可知，參芪糖腎安膠囊能促進脾虛小鼠模型的體重增長，延長模型動物冰水中的力竭游泳時間。具有益氣補脾的功能。
結(jié)論通過本次實驗研究證明，參芪糖腎安膠囊按療程使用，能明顯降低由鏈脲佐菌素誘導(dǎo)大鼠糖尿病模型及四氧嘧啶誘導(dǎo)的家兔糖尿病模型的血糖值，保護模型動物病程后期腎臟功能，延緩因糖尿病造成腎臟功能下降后而致尿素氮、肌酐的上升，減小尿蛋白的含量，降低血清蛋白的丟失，同時還具有減少血清氧化產(chǎn)物的聚集，增強氧化還原酶活性的作用，消除對腎臟功能造成損害的直接因素。
在對大鼠血瘀模型的試驗研究中，參芪糖腎安膠囊表現(xiàn)出較強的降低血液粘度的作用，對全血粘度及血漿粘度均有明顯的降低作用。在小鼠腸系膜微循環(huán)試驗中，該品種能增加局布毛細血管網(wǎng)的開放程度，加快血流的速度，擴微循環(huán)張三級動靜脈的管徑，增加血流量，這也間接證明參芪糖腎安膠囊可能對腎臟微循環(huán)功能也有一定的改善作用，增加腎臟血流量，保證局部營養(yǎng)及氧氣的供應(yīng)，進而達到保護腎臟功能的作用。小鼠益氣試驗證明參芪糖腎安膠囊能促進脾虛小鼠模型的體重增長，延長模型動物冰水中的力竭游泳時間。具有益氣補脾的功能。
本次研究證明參芪糖腎安膠囊具有降血糖，降血液粘度，保護腎功，減少尿蛋白，改善微循環(huán)等藥理作用；在中醫(yī)學(xué)方面具有化瘀祛濁，益氣補虛降糖等作用，適用于糖尿病腎病氣陰兩虛、瘀濁阻滯證者。
權(quán)利要求
1.一種治療糖尿病腎病的藥物，其特征在于它由下述重量(份)配比的原料藥制成的藥劑丹參15----600 黃芪20----800 益母草10----400女貞子9----360墨旱蓮6----240茯苓7.5----300豬苓6----240 芡實7.5----300地龍4.5----180。
2.如權(quán)利要求1所述的一種治療糖尿病腎病的藥物，其特征在于其中各原料藥物重量(份)配比為丹參30----450 黃芪40----600 益母草20----300女貞子18----270墨旱蓮12----180茯苓15----225豬苓12----180 芡實15----225 地龍9----135。
3.如權(quán)利要求1所述的一種治療糖尿病腎病的藥物，其特征在于其中各原料藥物重量(份)配比為丹參50----360 黃芪66.67----480益母草33.33----240女貞子30----216墨旱蓮20----114 茯苓25----180豬苓20----114 芡實25----180 地龍15----108。
4.如權(quán)利要求1所述的一種治療糖尿病腎病的藥物，其特征在于其中各原料藥物重量(份)配比為丹參300 黃芪400 益母草200女貞子180墨旱蓮120茯苓150豬苓120 芡實150 地龍90。
5.如權(quán)利要求1所述的一種治療糖尿病腎病的藥物，其特征在于其中各原料藥物重量(份)配比為丹參270 黃芪360 益母草180女貞子162墨旱蓮108茯苓135豬苓108 芡實135 地龍81。
6.如權(quán)利要求1所述的一種治療糖尿病腎病的藥物，其特征在于其中各原料藥物重量(份)配比為丹參330 黃芪440 益母草220女貞子198墨旱蓮132茯苓165豬苓198 芡實165 地龍99。
7.如權(quán)利要求1、2、3或4、5、6所述的一種治療糖尿病腎病的藥物，其特征在于所說的藥劑是任何藥劑學(xué)上所述的劑型。
8.如利要求7所述的一種治療糖尿病腎病的藥物，其特征在于所說的藥劑是散劑或塊劑。
9.如利要求8所述的一種治療糖尿病、腎病的藥物的制備方法，其制備方法是(1)、取芡實粉碎成細粉，過100目篩，備用；(2)、取丹參、黃芪、益母草、女貞子、墨旱蓮、茯苓、豬苓、地龍加10倍量水煎煮提取三次，每次2小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.20-1.25(60℃測)，加入乙醇使醇含量達60％，充分混合均勻，靜置12小時，取上清液，回收乙醇至無醇味，加入上述細粉，攪拌均勻，干燥，粉碎成細粉，用90％乙醇制成顆粒，共制成1000份，即得。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種治療糖尿病腎病的藥物及其制備方法，具體地說是一種以中藥為原料藥制備的中成藥。它由丹參、黃芪、益母草、女貞子、墨旱蓮、茯苓、豬苓、芡實、地龍原料藥制成的藥劑。本發(fā)明提供的一種治療糖尿病腎病的藥物，具有益氣養(yǎng)陰，健脾補腎，化淤瀉濁。本發(fā)明經(jīng)藥理學(xué)研究及動物毒性實驗證明其具有降血糖，降血液粘度，保護腎功，減少尿蛋白，改善微循環(huán)等藥理作用；在中醫(yī)學(xué)方面具有化淤祛濁，益氣補虛降糖等作用，適用于糖尿病腎病氣陰兩虛、淤濁阻滯證者。
文檔編號A61P3/10GK1899380SQ200610043070
公開日2007年1月24日 申請日期2006年6月30日 優(yōu)先權(quán)日2006年6月30日
發(fā)明者郝朝軍 申請人:陜西天祿堂制藥有限責(zé)任公司