專利名稱：一種由銀杏葉與葛根素制成的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種主要由銀杏葉與葛根素制成的藥物組合物，以及含有該藥物組合物的制劑及其制備方法和應(yīng)用，屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
醫(yī)學(xué)上，心腦血管疾病是指心臟和動脈血管發(fā)生硬化而引起的心臟缺血或出血的疾病，包括冠心病、心絞痛、高血壓、心律失常、心肌梗塞、腦梗死等。心腦血管疾病一直號稱威脅人類健康的頭號殺手，高血壓、高血脂、冠心病、糖尿病已成為“時代的瘟疫”。據(jù)有關(guān)調(diào)查報告顯示，我國每年死于心腦血管疾病的人有300多萬，占我國每年總死亡人數(shù)的50％，而幸存下來的人75％不同程度喪失勞動能力，4％重殘。近年來，心腦血管疾病發(fā)病率呈逐年上升的趨勢，特別是其發(fā)病和死亡的年齡日益呈年輕化趨勢，如何有效防治也就引起人們的高度重視。迄今為止，本領(lǐng)域?qū)＜乙严群笱芯苛硕喾N具有不同作用機制的用于心腦血管疾病的藥物，雖然取得了一些進展，但由于大多數(shù)藥物在藥效及選擇性上仍有許多難以克服的不足，故目前治療心腦血管疾病的理想藥物不多。許多專家把目標(biāo)定位于對中藥或中藥藥用有效部位的開發(fā)研究上。
銀杏葉為銀杏科植物銀杏(Ginkgo biloba L.)的干燥葉。銀杏葉成分復(fù)雜，主要為黃酮類、萜類內(nèi)酯化合物、多糖類等。對治療心腦血管疾病、老年性癡呆、哮喘、癌癥等有特殊療效，臨床主要用于冠心病、腦缺血、腦功能障礙、腦傷后遺癥等。目前銀杏葉的醫(yī)用價值已引起國內(nèi)外的廣泛關(guān)注，70年代以來，國內(nèi)外學(xué)者對銀杏葉的化學(xué)、藥理、制劑等進行了全方位的研究，并在此基礎(chǔ)上開發(fā)了一系列制劑用于臨床。
銀杏葉提取物為銀杏葉經(jīng)加工制成的提取物，是一種作用廣泛、不良反應(yīng)較少的天然藥物，其有效成分主要為黃酮類和萜類，具有拮抗血小板活化因子、清除氧自由基、降血脂、增強中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能、調(diào)節(jié)神經(jīng)遞質(zhì)和激素水平、改善血液流變學(xué)狀態(tài)、抗炎、抗過敏等作用。進口注射用銀杏葉提取物，商品名為金納多，主要用于各種腦部、周邊等血液循環(huán)障礙，主治急慢性腦機能不全及其后遺癥、耳部血流及神經(jīng)障礙、眼部血流及神經(jīng)障礙、末梢循環(huán)障礙等。國產(chǎn)舒血寧注射液(銀杏葉提取物注射液)，主要用于缺血性心腦血管疾病、冠心病、心絞痛、腦栓塞、腦血管痙攣等。銀杏葉提取物已有國家標(biāo)準(zhǔn)，見中國藥典2000年版2002年增補本第6頁，或中國藥典2005年版一部第281頁。標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，本品按干燥品計，含總黃酮醇苷，不得少于24.0％；含萜類內(nèi)酯以白果內(nèi)酯(C15H18O8)、銀杏內(nèi)酯A(C20H24O9)、銀杏內(nèi)酯B(C20H24O10)和銀杏內(nèi)酯C(C20H24O11)的總量計，不得少于6.0％；本品含總銀杏酸不得過百萬分之十。
銀杏葉總黃酮為銀杏葉經(jīng)提取加工制成的總黃酮類提取物。銀杏葉總黃酮是銀杏葉的主要有效成分，包括銀杏雙黃酮(Gilobetin)、異銀杏雙黃酮(Isoginkgetin)、白果素(Bilobetin)、蕓香甙(Rutin)、槲皮素(Ouercetin)、山奈酚(Kaempferol)、異鼠李素(Isorhamnetin)等。銀杏葉總黃酮作為銀杏葉的一個有效部位，可以將其制備成不同的臨床藥物劑型。大量的試驗研究表明，銀杏葉總黃酮具有擴血管、降血脂、抗凝血、清除自由基、抗白血病、抗炎、鎮(zhèn)痛、抗腫瘤、抗輻射等作用，對于心腦血管疾病等有良好的治療作用。
銀杏內(nèi)酯為銀杏葉經(jīng)提取加工制成的萜類內(nèi)酯提取物。銀杏內(nèi)酯也是銀杏葉的主要有效成分，包括銀杏內(nèi)酯A(Ginkgo lide A)、銀杏內(nèi)酯B(Ginkgo lide B)、銀杏內(nèi)酯C(Ginkgo lide C)以及新銀杏內(nèi)酯A(BilobalideA，白果內(nèi)酯)等。藥理和臨床研究表明，銀杏內(nèi)酯可有效的防止血小板聚集和血栓的形成，其中以銀杏內(nèi)酯B的選擇性和活性最強。銀杏內(nèi)酯對中樞神經(jīng)系統(tǒng)作用主要表現(xiàn)為能降低腦血管阻力，增加腦血流量，促進腦血循環(huán)；能阻止腦缺血后引起的損傷，明顯改善腦缺血狀態(tài)，顯著抑制缺血引起的腦水腫、電解質(zhì)紊亂、炎性細胞浸潤。銀杏內(nèi)酯對血液循環(huán)系統(tǒng)的作用主要表現(xiàn)為可以抑制血小板聚集，降低血液粘度，改善缺血病人的微循環(huán)，減少血栓形成。另外，銀杏內(nèi)酯還能穩(wěn)定細胞膜，減少血管緊張素的滲透作用；具有抗過敏、抗炎、抗休克等作用；對器官移植的排斥反應(yīng)有保護作用；提高過氧化物岐化酶(SOD)活性，消除自由基、延緩衰老。臨床上用于預(yù)防和治療腦血栓等腦血管疾病、保護腦細胞免受缺血損傷、清除有害的氧化自由基、提高免疫功能，還用于敗血癥休克、器官移植、腦動脈硬化、頑固性哮喘等疾病的治療。
葛根素系由豆科植物野葛的干燥根中提取，分離得到的8-β-D-葡萄吡喃糖-4′，7-二羥基異黃酮，已收載入國家藥典2000年版2002年增補本二部(新增)第1冊77頁和國家藥典2005年版第二冊688頁，其中規(guī)定含C21H20O9不得少于97.0％。葛根素目前已有多家生產(chǎn)上市。用葛根治療一般疾病，早在我國古代的醫(yī)學(xué)著作《本經(jīng)》、《傷寒雜病記》和《醫(yī)學(xué)大辭典》中就有記載。葛根素在心血管系統(tǒng)具有增加心肌血流量，改善心肌供應(yīng)，降低血小板聚集及血液粘度，改變心肌細胞自律性，延長不應(yīng)期，使失常的心率得到改善等重要作用。廣泛用于冠心病、肺心病、腦梗塞等治療。作為改善心腦血管循環(huán)的新藥，葛根素毒性小、安全范圍廣、療效好而極具臨床應(yīng)用價值。葛根素結(jié)構(gòu)式如下所示
葛根素 目前利用銀杏葉與葛根素的相互作用配伍組方，用于制備治療心腦血管疾病等方面的藥物，尚未見報道。

發(fā)明內(nèi)容
為了滿足臨床需要，更好的治療心腦血管疾病等，提高人民的健康水平，本發(fā)明提供了一種新的藥物組合物，以及含有該藥物組合物的制劑及其制備方法和應(yīng)用，其特征在于它主要是由銀杏葉與葛根素制成的。且合并用藥后具有協(xié)同作用，療效顯著提高，產(chǎn)生了意想不到的效果。
上述藥物組合物，其原料藥的重量份數(shù)為銀杏葉200～6000份、葛根素40～1000份；優(yōu)選份數(shù)為銀杏葉600～2400份、葛根素100～500份；進一步優(yōu)選為銀杏葉1200份、葛根素200份。
本發(fā)明藥物組合物的制備方法為，銀杏葉可以用適宜的溶劑和方法制得銀杏葉提取物或銀杏葉總黃酮或銀杏內(nèi)酯，提取溶劑優(yōu)選水或乙醇，提取方法可以為浸漬法、滲漉法、煎煮法、回流提取法或連續(xù)提取法。然后銀杏葉提取物或銀杏葉總黃酮或銀杏內(nèi)酯再與葛根素及藥學(xué)上可接受的輔料混合制成任一制劑；其中制得的銀杏葉提取物的主要有效成分為總黃酮醇苷和萜類內(nèi)酯，其主要有效成分含量的和不低于15％；制得的銀杏葉總黃酮含總黃酮醇苷以槲皮素、山奈酚和異鼠李素的含量之和計不低于20％；制得的銀杏內(nèi)酯含萜類內(nèi)酯以銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B和銀杏內(nèi)酯C的含量之和計不低于40％。
本發(fā)明提供了銀杏葉的優(yōu)選提取工藝，具體過程如下 取銀杏葉，粉碎，用40％乙醇加熱回流提取三次，每次2小時，合并提取液，回收乙醇并濃縮至相對密度為1.10～1.13，加于已處理好的D101大孔吸附樹脂柱上，依次用水及85％的乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，回收乙醇濃縮至相對密度為1.21～1.25，噴霧干燥，即得。通過本工藝制備的銀杏葉提取物中含總黃酮醇苷不低于24.0％、萜類內(nèi)酯不低于6.0％、總銀杏酸不超過百萬分之十，提取物得率為0.5～2％。
銀杏葉提取物還可通過下述工藝制得，但不僅限于下述工藝 方法一取銀杏葉，粉碎，用30％乙醇加熱回流提取二次，每次3小時，合并提取液，回收乙醇并濃縮至相對密度為1.10～1.13，加于已處理好的聚酰胺柱上，依次用10％、95％的乙醇洗脫，收集95％乙醇洗脫液，回收乙醇濃縮至相對密度為1.21～1.25，噴霧干燥，即得。通過本工藝制備的銀杏葉提取物中總黃酮醇苷含量不低于15％、萜類內(nèi)酯不低于3％、總銀杏酸不超過百萬分之十五，提取物得率為2～4％。
方法二取銀杏葉，粉碎，加70％乙醇浸提過夜，過濾，回收乙醇，減壓濃縮至相對密度為1.12～1.17，將所得濃縮液加入用酸將濃度為20％的乙醇調(diào)節(jié)至pH值為2～5的酸性乙醇溶液，靜置，使其充分沉淀，過濾，濾液和沉淀分開備用。將濾液過已處理好的D101大孔樹脂柱，用70％乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇得濃縮液。所得沉淀物用乙酸乙酯提取二次，減壓回收乙酸乙酯，得濃縮液。合并上述兩種濃縮液噴霧干燥，即得。通過本工藝制備的銀杏葉提取物中含總黃酮醇苷不低于18％、萜類內(nèi)酯不低于3.5％、總銀杏酸不超過百萬分之十八，提取物得率為1～3％。
本發(fā)明提供了銀杏葉總黃酮的優(yōu)選制備工藝，具體過程如下 取銀杏葉，切碎，加70％乙醇80℃溫浸提取二次，每次2小時，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，加水適量得每1ml相當(dāng)于原藥材1g的混懸液，冷藏12小時，離心，取上清液，加于已處理好的聚酰胺柱(100g，30～60目，乙醇濕法裝柱，先用2倍柱體積的乙醇沖柱，再改用水洗至近無醇味，備用)上，先用3倍柱體積的水沖洗，再用2倍柱體積的10％的乙醇沖洗，棄去洗脫液，改用4倍柱體積的80％乙醇進行洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，減壓濃縮至相對密度1.08～1.10，噴霧干燥，即得。通過本工藝制備的銀杏葉總黃酮含總黃酮醇苷以槲皮素、山奈酚和異鼠李素的含量之和計不低于50％，得率為1～2％。
銀杏葉總黃酮還可通過下述工藝制得，但不僅限于下述工藝 方法一取銀杏葉，切碎，加85％乙醇提取三次，每次2小時，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，加于已處理好的大孔樹脂上，先用2倍柱體積的水沖洗，再用4倍柱體積的80％乙醇進行洗脫，收集乙醇洗脫液，回收乙醇，減壓濃縮至相對密度1.12～1.19，噴霧干燥，即得。通過本工藝制備的銀杏葉總黃酮中總黃酮醇苷以槲皮素、山奈酚和異鼠李素的含量之和不低于20％，得率為2～5％。
方法二取銀杏葉，切碎，加5倍量水后，用3倍量的乙醚充分振搖提取，收集水層。水溶液加適量水邊加熱邊攪拌至完全溶解后，加入適量的氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值為12左右，充分攪拌至反應(yīng)完全，減壓抽率，水洗至無色，濾液棄去。加適量乙醇，將沉淀混懸于95％乙醇中，充分攪拌，加入適量稀硫酸調(diào)節(jié)pH值至5，充分攪拌，靜置過濾，再加入適量氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值至7，靜置過濾。將上述濾液，減壓回收乙醇，噴霧干燥即得。通過本工藝制備的銀杏葉總黃酮中總黃酮醇苷以槲皮素、山奈酚和異鼠李素的含量之和不低于25％，得率為2～4％。
本發(fā)明提供了銀杏葉內(nèi)酯的優(yōu)選制備工藝，具體過程如下 取銀杏葉，切碎，加70％乙醇80℃溫浸提取二次，每次2小時，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，加水適量得每1ml相當(dāng)于原藥材1g的混懸液；加1/2量的石油醚振搖提取4次，棄去石油醚提取液；再用1/2量的乙酸乙酯振搖提取4次，合并乙酸乙酯液，減壓回收溶劑，蒸干，殘渣加30％乙醇加熱使溶解，放置析晶，結(jié)晶再用30％乙醇重結(jié)晶一次，即得。通過本工藝制備的銀杏內(nèi)酯中含萜類內(nèi)酯以銀杏內(nèi)酯A(C20H24O9)、銀杏內(nèi)酯B(C20H24O10)和銀杏內(nèi)酯C(C20H24O11)的含量之和計不低于90％，得率為0.1～0.5％。
銀杏葉總黃酮還可通過下述工藝制得，但不僅限于下述工藝 方法一取銀杏葉，切碎，加20倍量的水，煮沸濾過，濾液濃縮至相對密度為1.03～1.06，濃縮液加于已處理好的大孔樹脂上，過濾，依次用水及90％的乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，濃縮液靜置，析出晶體用有機溶劑溶解，過濾，靜置，析出的晶粒與80℃下干燥，即得。通過本工藝制備的銀杏內(nèi)酯中含萜類內(nèi)酯以銀杏內(nèi)酯A(C20H24O9)、銀杏內(nèi)酯B(C20H24O10)和銀杏內(nèi)酯C(C20H24O11)的含量之和計不低于45％，得率為0.5～2％。
方法二取銀杏葉，切碎，加20倍量的水，煮沸濾過，濾液用1/5重量的活性炭吸附48小時，過濾，濾液用重量為15倍的乙醇脫附8小時，過濾，濾液濃縮，回收乙醇，殘液靜置，析出粗晶粒，粗晶粒用乙醇溶解后，過濾分離出不溶性雜質(zhì)，濾液靜置析出晶粒，晶粒洗凈與70℃下干燥，即得。通過本工藝制備的銀杏內(nèi)酯中含萜類內(nèi)酯以銀杏內(nèi)酯A(C20H24O9)、銀杏內(nèi)酯B(C20H24O10)和銀杏內(nèi)酯C(C20H24O11)的含量之和計不低于40％，得率為1～3％。
本發(fā)明藥物組合物除可用銀杏葉藥材直接投料制得外，還可以銀杏葉提取物代替銀杏葉投料制成，其中提取物中含總黃酮醇苷不低于15％、萜類內(nèi)酯不低于3％、總銀杏酸不超過百萬分之十五，其重量份數(shù)為銀杏葉提取物1～200份，葛根素40～1000份；優(yōu)選份數(shù)為銀杏葉提取物5～100份，葛根素100～500份；最佳份數(shù)為銀杏葉提取物20份，葛根素200份。
本發(fā)明藥物組合物，也可由銀杏葉總黃酮代替銀杏葉直接投料制成，其中銀杏葉總黃酮含總黃酮醇苷以槲皮素、山奈酚和異鼠李素的含量之和計不低于20％，其重量份數(shù)為銀杏葉總黃酮1～100份，葛根素40～1000份；優(yōu)選為銀杏葉總黃酮2～50份，葛根素100～500份；進一步優(yōu)選為銀杏葉總黃酮10份，葛根素200份。
本發(fā)明藥物組合物，也可由銀杏內(nèi)酯代替銀杏葉直接投料制成，其中銀杏內(nèi)酯含萜類內(nèi)酯以銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B和銀杏內(nèi)酯C的含量之和計不低于40％，其重量份數(shù)為銀杏內(nèi)酯0.2～50份，葛根素40～1000份；優(yōu)選為銀杏內(nèi)酯0.5～10份，葛根素100～500份；進一步優(yōu)選為銀杏內(nèi)酯1份，葛根素200份。
上文所述的銀杏葉提取物、銀杏葉總黃酮、銀杏內(nèi)酯也可由市購獲得。市購的銀杏葉提取物含總黃酮醇苷不低于24.0％、萜類內(nèi)酯不低于6.0％、總銀杏酸不超過百萬分之十，進一步精制所得銀杏葉提取物含總黃酮醇苷不低于24.0％、萜類內(nèi)酯不低于6.0％、總銀杏酸不超過百萬分之三；市購的銀杏葉總黃酮含總黃酮醇苷以槲皮素、山奈酚和異鼠李素的含量之和計不低于20％；市購的銀杏內(nèi)酯含萜類內(nèi)酯以銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B和銀杏內(nèi)酯C的含量之和計不低于40％。
本發(fā)明藥物組分的用量是經(jīng)過發(fā)明人進行大量摸索總結(jié)得出的，各組分用量在上述重量份范圍內(nèi)都具有較好療效。以上組成，若以克為單位，可以制成100～1000次用量的制劑，如作為注射劑，可制成500～1000支，每次用量1～10支。如作為片劑，可制成1000片，每次服用1～10片。以上組成是按重量份作為配比的，如大規(guī)模生產(chǎn)可以以千克為原料，或以噸為單位，小規(guī)模生產(chǎn)也可以以克為單位。以上重量份數(shù)對于特殊病人，可以相應(yīng)調(diào)整組成的比例，增加或者減少不超過100％。
上述藥物組合物，可以制成任一臨床上或藥學(xué)上可接受的劑型，如注射劑、口服常釋劑型、緩釋控釋劑型、顆粒劑、丸劑、口服液體劑、滴眼劑、滴鼻劑、滴耳劑、吸入劑、栓劑、軟膏劑等。本發(fā)明藥物組合物優(yōu)選劑型為注射劑或口服制劑。
本發(fā)明的藥物組合物可采用現(xiàn)有制藥領(lǐng)域中的常規(guī)方法生產(chǎn)，需要的時候可以添加各種藥學(xué)上可接受的載體。所述的載體包括藥學(xué)領(lǐng)域常規(guī)的稀釋劑、賦形劑、粘合劑、崩解劑、吸收促進劑、表面活性劑、吸附載體、潤滑劑等。
本發(fā)明藥物組合物在制成注射劑時，為了增加其溶解度，可以加入聚山梨酯-80等增溶劑。輸液中可以加入用于調(diào)節(jié)滲透壓的等滲調(diào)節(jié)劑，例如氯化鈉、氯化鉀、氯化鎂、氯化鈣、乳酸納、葡萄糖、木糖醇、山梨醇和右旋糖苷等，優(yōu)選氯化鈉或葡萄糖。粉針中可加入賦形劑，例如甘露醇、葡萄糖等。
上述由銀杏葉或其提取物與葛根素組成的藥物組合物，具有抑制血小板凝集及抗血栓形成、改善血流動力學(xué)、增加冠脈和腦血流量、改善心肌供血功能、提高心肌耐缺氧能力、清除體內(nèi)過多的自由基、調(diào)節(jié)機體免疫功能等多種藥理作用。
上述由銀杏葉總黃酮與葛根素組成的藥物組合物，具有擴血管、抗心律失常、降血壓、抑制血小板聚集和抗體外血栓形成、降低心肌耗氧量和耗氧指數(shù)、保護腦血管阻塞引起的腦缺氧、降血脂、抗疲勞、抗缺氧、抗輻射、抗衰老、抗腫瘤、抗炎、鎮(zhèn)痛、機體免疫雙向調(diào)節(jié)等多種藥理作用。
上述由銀杏內(nèi)酯與葛根素組成的藥物組合物，具有降低腦血管阻力、增加腦血流量、促進腦血循環(huán)，抑制血小板聚集和抗血栓形成、降低血液粘度、改善微循環(huán)，保護缺血及缺氧引起的腦損傷和心肌損傷、降低冠狀動脈阻力、降低血壓和減慢心跳速率、抗心律失常，消除自由基，調(diào)節(jié)免疫，抗衰老等多種藥理作用?？捎糜陬A(yù)防和治療缺血性和缺氧性心腦血管疾病、血栓性心腦血管疾病、動脈硬化，降血壓，降血脂等多種藥理作用。
本發(fā)明組合物的優(yōu)點在于 1、提供了一種新的用于治療心腦血管疾病的藥物組合物，滿足了臨床的需要。
2、對銀杏葉提取物、銀杏葉總黃酮、銀杏內(nèi)酯與葛根素的相互作用和配伍組方進行了藥理學(xué)研究，結(jié)果表明本發(fā)明組合物可顯著抑制血小板凝集；能顯著減小因結(jié)扎冠狀動脈所致的心電和生化指標(biāo)的異常改變；顯著減小心肌缺血范圍；可明顯降低飲食性高血脂大鼠的血清膽固醇和甘油三酯水平；可顯著降低神經(jīng)行為學(xué)評分，可明顯降低腦組織含水量，可明顯縮小缺血側(cè)腦組織梗塞體積；可通過降低PLA2活性，改善腦循環(huán)，減輕腦缺血再灌注損傷，而發(fā)揮腦保護作用。其結(jié)果是本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員所意想不到的。
3、本發(fā)明藥物組合物中的銀杏葉提取物、銀杏葉總黃酮、銀杏內(nèi)酯可由市購或自行制備制得，滿足了大生產(chǎn)的需要。
4、對本發(fā)明藥物組合物進行的穩(wěn)定性試驗結(jié)果表明各項指標(biāo)均比較穩(wěn)定，保證了臨床用藥的安全。
5、銀杏葉或其提取物或銀杏葉總黃酮或銀杏內(nèi)酯和葛根素臨床配伍用藥療效確切，且用藥后用藥量減少，具有廣闊的應(yīng)用前景。
以下通過試驗例來進一步闡述本發(fā)明所述藥物組合物的有益效果，這些試驗例包括本發(fā)明藥物組合物的藥效學(xué)試驗及穩(wěn)定性試驗。以下試驗例中用YTG代替銀杏葉提取物與葛根素的組合物，用YHG代替銀杏葉總黃酮與葛根素的組合物，用YNG代替銀杏內(nèi)酯與葛根素的組合物。其中銀杏葉提取物根據(jù)實施例1制備，銀杏葉總黃酮根據(jù)實施例2制備，銀杏內(nèi)酯根據(jù)實施例3制備。以下試驗例中本發(fā)明藥物組合物簡稱本發(fā)明組合物。
試驗例1 本發(fā)明組合物對大鼠血小板凝集作用的影響 受試動物 雄性大鼠，140只，體重200～220g，隨機分為14組，每組10只。
供試品 銀杏葉提取物組銀杏葉提取物注射液，自制，2ml:20mg(相當(dāng)于原藥材1200mg)； 銀杏葉總黃酮組銀杏葉總黃酮注射液，自制，2ml:10mg； 銀杏內(nèi)酯組銀杏內(nèi)酯注射液，自制，2ml:lmg； 葛根素注射液自制，2ml:200mg； 生理鹽水對照組氯化鈉注射液，250ml:2.25g，山東長富潔晶藥業(yè)有限公司； YTG組合物組自制(參見實施例4水針劑處方1的制備)，分為低、中、高三個劑量組； YHG組合物組自制(參見實施例4水針劑處方2的制備)，分為低、中、高三個劑量組； YNG組合物組自制(參見實施例4水針劑處方3的制備)，分為低、中、高三個劑量組。
試驗方法 各組動物按表1給藥劑量尾靜脈注射給藥，每日1次，連續(xù)給藥7天，末次給藥1小時后，以30％戊巴比妥鈉30mg/kg腹腔注射麻醉，自腹主動脈取血，用3.28％枸櫞酸鈉抗凝(與全血以1∶9混合)。將抗凝全血在20℃條件下1500rpm離心5min獲得富血小板血漿(PPR)。留取定量PPR后，將剩余PPR再次以3000rpm離心10min，獲得自身對照貧血小板血漿(PPP)。以PPP調(diào)節(jié)PPR濃度，使各PPR濃度相同。將PPR在37℃的恒溫孔中預(yù)熱后，加入二磷酸腺苷(ADP，終濃度為3μmol·L-1)誘導(dǎo)血小板聚集，記錄最大聚集率，并計算血小板聚集抑制率＝(對照組聚集率-藥物組聚集率)/對照組聚集率×100％。
試驗結(jié)果及結(jié)論 試驗結(jié)果見表1。
(1)與生理鹽水對照組相比較，銀杏葉提取物組、銀杏葉總黃酮組、銀杏內(nèi)酯組與葛根素組均可顯著抑制血小板凝集(p＜0.01)，低、中、高劑量組的YTG注射液、YHG注射液與YNG注射液均極顯著的抑制血小板凝集(p＜0.001)。
(2)與銀杏葉提取物組相比，低、中、高劑量組的YTG注射液均極顯著抑制血小板凝集(p＜0.01)。
(3)與銀杏葉總黃酮組相比，低、中、高劑量組的YHG注射液均極顯著的抑制血小板凝集(p＜0.01)。
(4)與銀杏內(nèi)酯組相比，低、中、高劑量組的YNG注射液均極顯著抑制血小板凝集(p＜0.01)。
(5)與葛根素組相比，低、中、高劑量組的YTG注射液、YHG注射液與YNG注射液均極顯著的抑制血小板凝集(p＜0.01)。
試驗結(jié)果表明，低、中、高劑量組YTG注射液、YHG注射液、YNG注射液的療效均分別優(yōu)于單用銀杏葉提取物、銀杏葉總黃酮、銀杏內(nèi)酯或葛根素，提示銀杏葉提取物與葛根素、銀杏葉總黃酮與葛根素、銀杏內(nèi)酯與葛根素合并用藥均具有協(xié)同增效作用。在抑制血小板凝集、抗血栓形成以及治療血栓性疾病方面有顯著療效。
表1 本發(fā)明組合物對大鼠血小板凝集作用的影響(平均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差，n＝10) 與生理鹽水對照組相比，*p＜0.01，**p＜0.001；與銀杏葉提取物組相比，ap＜0.01；與銀杏葉總黃酮相比，bp＜0.01；與銀杏內(nèi)酯組相比，cp＜0.01；與葛根素組相比，dp＜0.01。
試驗例2 本發(fā)明組合物對結(jié)扎大鼠冠狀動脈所致心肌缺血的影響 受試動物大鼠，140只，體重200～220g，雌雄兼用，隨機分為14組，每組10只。
供試品 銀杏葉提取物組銀杏葉提取物注射液，自制，2ml:20mg(相當(dāng)于原藥材1200mg) 銀杏葉總黃酮組銀杏葉總黃酮注射液，自制，2ml:10mg； 銀杏內(nèi)酯組銀杏內(nèi)酯注射液，自制，2ml:1mg； 葛根素注射液自制，2ml:200mg； 生理鹽水對照組氯化鈉注射液，250ml:2.25g，山東長富潔晶藥業(yè)有限公司； YTG組合物組自制(參見實施例4水針劑處方1的制備)，分為低、中、高三個劑量組； YHG組合物組自制(參見實施例4水針劑處方2的制備)，分為低、中、高三個劑量組； YNG組合物組自制(參見實施例4水針劑處方3的制備)，分為低、中、高三個劑量組。
試驗方法 大鼠用烏拉坦1g/kg腹腔注射麻醉，背位固定，記錄心電，接人工呼吸機進行人工呼吸，打開胸腔，剪開心包，各組動物按各自藥物靜脈注射給藥，3min后結(jié)扎左側(cè)冠狀動脈前降枝，全程記錄心電30min，結(jié)扎后1h取血，檢測磷酸肌酸激酶(CK)和乳酸脫氫酶(LDH)。取出大鼠心臟，沿結(jié)扎線將心室肌均勻橫切4片，0.5％氯化硝基四氮唑蘭染色，用求積儀測每片心肌兩面的缺血面積，計算心肌缺血面積占心室面積的百分比。
表2 本發(fā)明組合物對結(jié)扎大鼠冠狀動脈所致心肌缺血的影響(平均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差，n＝10) 與生理鹽水對照組相比較，*p＜0.01，**p＜0.001；與銀杏葉提取物組相比較，ap＜0.01；與銀杏葉總黃酮組相比較，bp＜0.01；與銀杏內(nèi)酯組相比較，cp＜0.01；與葛根素組相比較，dp＜0.01。
試驗結(jié)果及結(jié)論 試驗結(jié)果見表2。結(jié)扎后，生理鹽水對照組大鼠心電的QRS波均突然異常增高、加寬，心肌大范圍缺血，生化檢測表現(xiàn)為CK和LDH均異常增高。
(1)與生理鹽水對照組相比較，銀杏葉提取物組、銀杏葉總黃酮組、銀杏內(nèi)酯組、葛根素組及低、中、高劑量組的YTG注射液、YHG注射液、YNG注射液均能顯著減小因結(jié)扎冠狀動脈所致的心電和生化指標(biāo)的異常改變(p＜0.01，p＜0.001)，顯著減小心肌缺血范圍(p＜0.01，p＜0.001)。
(2)與銀杏葉提取物組相比，低、中、高劑量組的YTG注射液均能顯著減小因結(jié)扎冠狀動脈所致的心電和生化指標(biāo)的異常改變(p＜0.01)，顯著減小心肌缺血范圍(p＜0.01)。
(3)與銀杏葉總黃酮組相比，低、中、高劑量組的YHG注射液均能顯著減小因結(jié)扎冠狀動脈所致的心電和生化指標(biāo)的異常改變(p＜0.01)，顯著減小心肌缺血范圍(p＜0.01)。
(4)與銀杏內(nèi)酯相比，低、中、高劑量組的YNG注射液均能顯著減小因結(jié)扎冠狀動脈所致的心電和生化指標(biāo)的異常改變(p＜0.01)，顯著減小心肌缺血范圍(p＜0.01)。
(5)與葛根素組相比，低、中、高劑量組的YTG注射液、YHG注射液、YNG注射液均能顯著減小因結(jié)扎冠狀動脈所致的心電和生化指標(biāo)的異常改變(p＜0.01)，顯著減小心肌缺血范圍(p＜0.01)。
試驗結(jié)果表明，低、中、高劑量組的YTG注射液、YHG注射液、YNG注射液的療效均分別優(yōu)于單用銀杏葉提取物、銀杏葉總黃酮、銀杏內(nèi)酯、葛根素的效果，提示銀杏葉提取物、銀杏葉總黃酮、銀杏內(nèi)酯分別與葛根素組成的組合物具有協(xié)同增效作用，在治療缺血性心腦血管疾病方面將有顯著療效。
試驗例3 本發(fā)明組合物對大鼠實驗性高血脂癥的影響 受試動物 健康雄性大鼠，150只，體重200～240g，隨機分為15組，每組10只。
供試品 銀杏葉提取物組銀杏葉提取物注射液，自制，2ml:20mg(相當(dāng)于原藥材1200mg)； 銀杏葉總黃酮組銀杏葉總黃酮注射液，自制，2ml:10mg； 銀杏內(nèi)酯組銀杏內(nèi)酯注射液，自制，2ml:1mg； 葛根素注射液自制，2ml:200mg； 生理鹽水對照組氯化鈉注射液，250ml:2.25g，山東長富潔晶藥業(yè)有限公司； YTG組合物組自制(參見實施例4水針劑處方1的制備)，分為低、中、高三個劑量組； YHG組合物組自制(參見實施例4水針劑處方2的制備)，分為低、中、高三個劑量組； YNG組合物組自制(參見實施例4水針劑處方3的制備)，分為低、中、高三個劑量組。
試驗方法 各組大鼠測藥前膽固醇及甘油三酯水平后，建高脂模型。除生理鹽水對照組給予普通飼料外，其余各組均給予高脂飼料(配方為普通飼料86.8％、膽固醇3％、豬油10％、丙硫氧嘧淀0.2％)，連續(xù)喂飼10天后，測血清膽固醇及甘油三酯水平，確定高脂模型建成。模型建成后繼續(xù)飼高脂飼料，其中三組分別按照各自的劑量腹腔注射液給藥本發(fā)明組合物，每日給藥1次，連續(xù)給藥20天后，再取血測膽固醇及甘油三酯水平。
表3 本發(fā)明在組合物對飲食性高血脂大鼠血清膽固醇的影響(平均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差，n＝10) 與生理鹽水對照組相比，#p＜0.01；與高脂模型組相比，*p＜0.05，**p＜0.01；與銀杏葉提取物組相比較，ap＜0.05；與銀杏葉總黃酮組相比較，bp＜0.05；與銀杏內(nèi)酯組相比較，cp＜0.05；與葛根素組相比較，dp＜0.05。
表4 本發(fā)明組合物對飲食性高血脂大鼠血清甘油三酯的影響(平均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差，n＝10) 與生理鹽水對照組相比，#p＜0.01；與高脂模型組相比，*p＜0.05，**p＜0.01；與銀杏葉提取物組相比較，ap＜0.05；與銀杏葉總黃酮組相比較，bp＜0.05；與銀杏內(nèi)酯組相比較，cp＜0.05；與葛根素組相比較，dp＜0.05。
試驗結(jié)果及結(jié)論 試驗結(jié)果見表3和表4。
(1)與生理鹽水對照組相比，高脂模型組大鼠血清膽固醇和甘油三酯均極顯著升高(p＜0.01)，說明造模成功。
(2)與高脂模型組相比較，銀杏葉提取物組、銀杏葉總黃酮組、銀杏內(nèi)酯組、葛根素組及低、中、高劑量組的YTG注射液、YHG注射液、YNG注射液可明顯降低飲食性高血脂大鼠的血清膽固醇和甘油三酯水平(p＜0.05，p＜0.01)。
(3)分別與銀杏葉提取物組、銀杏葉總黃酮組、銀杏內(nèi)酯組、葛根素組，低、中、高劑量組的YTG注射液、YHG注射液、YNG注射液可明顯降低飲食性高血脂大鼠的血清膽固醇和甘油三酯水平(p＜0.05)。
試驗結(jié)果表明，本發(fā)明組合物有良好的降血脂功能，且療效優(yōu)于單用銀杏葉提取物、銀杏葉總黃酮、銀杏內(nèi)酯和葛根素的效果，提示本發(fā)明組合物有協(xié)同作用，在治療高血脂癥方面將有顯著療效。
試驗例4 本發(fā)明組合物對大鼠腦缺血再灌注損傷的保護作用 受試動物 大鼠，140只，雌雄兼用，體重200～220g，分為14組，每組10只。
供試品 銀杏葉提取物組銀杏葉提取物注射液，自制，2ml:20mg(相當(dāng)于原藥材1200mg)； 銀杏葉總黃酮組銀杏葉總黃酮注射液，自制，2ml:10mg； 銀杏內(nèi)酯組銀杏內(nèi)酯注射液，自制，2ml:1mg； 葛根素注射液自制，2ml:200mg； 生理鹽水對照組氯化鈉注射液，250ml:2.25g，山東長富潔晶藥業(yè)有限公司； YTG組合物組自制(參見實施例4水針劑處方1的制備)，分為低、中、高三個劑量組； YHG組合物組自制(參見實施例4水針劑處方2的制備)，分為低、中、高三個劑量組； YNG組合物組自制(參見實施例4水針劑處方3的制備)，分為低、中、高三個劑量組。
試驗方法 大鼠用10％水合氯醛3ml/kg腹腔注射麻醉，頸正中切口，分離、結(jié)扎右側(cè)頸總動脈近心端、頸外動脈及其分支動脈。分離右側(cè)頸內(nèi)動脈，沿頸內(nèi)動脈向下分離翼顎動脈，根部結(jié)扎該分支。在頸內(nèi)動脈近端備線、遠端放置動脈夾，頸總動脈分叉處切口，插入尼龍線(深度為17～20mm)，拴線進入頸內(nèi)動脈，入顱至大腦前動脈，阻斷大腦中動脈所有血流來源。撤掉動脈夾，扎緊備線，外留1cm長線頭，縫合皮膚。缺血1h后灌胃給藥或氯化鈉注射液，繼續(xù)缺血1h后再灌注，勿需再次麻醉和切開皮膚，輕輕提拉所留線頭至有阻力時提示尼龍線頭端已至頸總動脈切口處，血流再通。假手術(shù)組除不插線外，其余步驟同上。存活鼠再灌注24h后，觀察大鼠行為變化，進行行為評分。參考zea Longa的5分制評分標(biāo)準(zhǔn)0分，正常，無神經(jīng)損傷癥狀；1分，不能完全伸展對側(cè)前爪；2分，向外側(cè)轉(zhuǎn)圈；3分，向?qū)?cè)傾倒；4分，不能自發(fā)行走，意識喪失。然后快速斷頭取鼠大腦。一部分(每組10只)分別稱左右腦半球濕重，置160℃烤箱內(nèi)24h后稱干重，按以下公式計算腦組織含水量腦組織含水量(％)＝(濕重-干重)/濕重×100％；一部分(每組10只)在前連合平面切下厚約2mm冠狀腦片，立刻置于2％TIE溶液中，37℃孵育30min。梗塞區(qū)呈現(xiàn)白色，非梗塞區(qū)呈現(xiàn)紅色。用求積儀(C63圖像分析系統(tǒng))測出各區(qū)面積，并計算梗塞區(qū)占全腦的百分比(％)。 表5 本發(fā)明組合物對大鼠腦缺血再灌注損傷的保護作用(平均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差，n＝10) 與生理鹽水對照組相比較，*p＜0.01，**p＜0.001；與銀杏葉提取物組相比，ap＜0.01，ep＜0.05；與銀杏總黃酮相比，bp＜0.01，fp＜0.05；與銀杏內(nèi)酯組相比，cp＜0.01，gp＜0.05；與葛根素組相比，dp＜0.01，hp＜0.05。
試驗結(jié)果及結(jié)論 試驗結(jié)果見表5。
(1)對行為的影響生理鹽水對照組出現(xiàn)不能完全伸展對側(cè)前爪或向外側(cè)轉(zhuǎn)圈或向?qū)?cè)傾倒的神經(jīng)損傷癥狀，行為評分為1.9±0.8。與生理鹽水對照組相比，銀杏葉提取物組、銀杏葉總黃酮組、銀杏內(nèi)酯組可顯著降低神經(jīng)行為學(xué)評分(p＜0.01)，低、中、高劑量組的YTG注射液、YHG注射液、YNG注射液均可極顯著降低神經(jīng)行為學(xué)評分(p＜0.001)；與銀杏葉提取物組、銀杏葉總黃酮組、銀杏內(nèi)酯組、葛根素組分別比較，低、中、高劑量組的YTG注射液、YHG注射液、YNG注射液均可顯著降低神經(jīng)行為學(xué)評分(p＜0.01)。
(2)對腦組織含水量的影響低、中、高劑量組的YTG注射液、YHG注射液、YNG注射液的腦組織含水量顯著低于與生理鹽水對照組(p＜0.01)，明顯低于銀杏葉提取物組、銀杏葉總黃酮組、銀杏內(nèi)酯組、葛根素組(p＜0.05)；銀杏葉提取物組、銀杏葉總黃酮組、銀杏內(nèi)酯組、葛根素組腦組織含水量也低于氯化鈉注射液對照組，但無顯著性差異。
(3)對梗死面積的影響與生理鹽水對照組相比較，銀杏葉提取物組、銀杏葉總黃酮組、銀杏內(nèi)酯組、葛根素組及低、中、高劑量組的YTG注射液、YHG注射液、YNG注射液均可顯著縮小缺血側(cè)腦組織梗塞體積(p＜0.01、p＜0.001)；分別與銀杏葉提取物組、銀杏葉總黃酮組、銀杏內(nèi)酯組、葛根素組相比，低劑量組的YTG注射液、YHG注射液、YNG注射液分別可明顯縮小缺血側(cè)腦組織梗塞體積(p＜0.05)，中、高劑量組的YTG注射液、YHG注射液、YNG注射液分別可顯著縮小缺血側(cè)腦組織梗塞體積(p＜0.01)。
上述試驗結(jié)果表明，銀杏葉提取物、銀杏葉總黃酮、銀杏內(nèi)酯分別與葛根素合并用藥可顯著改善局灶性腦缺血再灌注損傷的神經(jīng)損傷癥狀，降低缺血再灌注損傷腦組織含水量，減輕缺血側(cè)腦半球水腫程度縮小腦梗塞體積，作用強度有劑量依賴關(guān)系。且組合物在各項指標(biāo)中的療效均優(yōu)于銀杏葉提取物、銀杏葉總黃酮、銀杏內(nèi)酯、葛根素單獨用藥的效果，本發(fā)明組合物具有協(xié)同增效作用。
試驗例5 本發(fā)明組合物對兔腦缺血再灌注損傷的保護作用 受試動物 家兔，150只，體重2.2～2.5kg，隨機分為9組。
供試品 銀杏葉提取物組銀杏葉提取物注射液，自制，2ml:20mg(相當(dāng)于原藥材1200mg)； 銀杏葉總黃酮組銀杏葉總黃酮注射液，自制，2ml:10mg； 銀杏內(nèi)酯組銀杏內(nèi)酯注射液，自制，2ml:1mg； 葛根素注射液自制，2ml:200mg； 氯化鈉注射液250ml:2.25g，山東長富潔晶藥業(yè)有限公司； YTG組合物組自制(參見實施例4水針劑處方1的制備)； YHG組合物組自制(參見實施例4水針劑處方2的制備)； YNG組合物組自制(參見實施例4水針劑處方3的制備)。
試驗方法 將兔隨機分為缺血再灌注組(I/R組)、YTG注射液治療組、YHG注射液治療組、YNG注射液治療組、銀杏葉提取物組、銀杏葉總黃酮組、銀杏內(nèi)酯組、葛根素組和假手術(shù)對照組(SOC組)。(1)缺血再灌注組(I/R組)18只，用25％的氨基甲酸乙脂溶液1g/kg體重耳緣靜脈麻醉，頸部正中切口分離氣管插入氣管套管，暴露兩側(cè)頸總動脈，以動脈夾兩側(cè)夾閉20min，造成腦缺血，松夾分別再灌注1h、6h和12h，三個時間點各6只。分別在松夾10min后，耳緣靜脈推注生理鹽水5ml/kg體重。(2)YTG、YHG、YNG組合物組54只，手術(shù)方法同I/R組，三個時間點各6只，分別在松夾10min后，耳緣靜脈推注組合物注射液5mg/kg。(3)銀杏葉提取物組18只，手術(shù)方法同I/R組，三個時間點各6只，分別在松夾10min后，耳緣靜脈推注銀杏葉注射液200mg/kg。(4)銀杏葉總黃酮組18只，手術(shù)方法同I/R組，三個時間點各6只，分別在松夾10min后，耳緣靜脈推注銀杏葉總黃酮供試液2mg/kg。(5)銀杏內(nèi)酯組18只，手術(shù)方法同I/R組，三個時間點各6只，分別在松夾10min后，耳緣靜脈推注銀杏葉總黃酮供試液0.2mg/kg。(6)葛根素組18只，手術(shù)方法同I/R組，三個時間點各6只，分別在松夾10min后，耳緣靜脈推注銀杏葉總黃酮供試液30mg/kg。(7)假手術(shù)對照組(SOC組)6只，動物僅行麻醉和動脈分離術(shù)而不夾閉，1h后處死。上述各組實驗結(jié)束后即斷頭，在冰浴中剝出大腦，冰盤上解剖出雙側(cè)海馬區(qū)組織，用錫紙包裹放在4℃冰箱中儲存，備用。應(yīng)用pH酸度計檢測海馬組織PLA2的活性；采用于濕重法、TTC染色法測定皮層腦組織含水量、梗死面積；光鏡下觀察腦組織病理變化。
試驗結(jié)果與結(jié)論 (1)對海馬組織PLA2活性的影響I/R組再灌注1h、6h和12h后，海馬組織PLA2活性較SOC明顯增高(p＜0.01)，且隨灌注時間延長，PLA2活性呈遞減趨勢，但各時間點間比較差異不顯著(p＞0.05)；YTG、YHG、YNG組合物組(1h、6h、12h)PLA2活性明顯降低，與SOC組和I/R各相應(yīng)時間點比較具有顯著性差異(p＜0.01，p＜0.001)，且隨再灌時間延長，PLA2活性逐漸向正常水平恢復(fù)；銀杏葉提取物、銀杏葉總黃酮、銀杏內(nèi)酯與葛根素組(1h、6h、12h)PLA2活性降低，與SOC組和I/R各相應(yīng)時間點比較具有明顯差異(p＜0.05，p＜0.01)。
(2)對皮層組織含水量(％)和梗死面積(％)的影響I/R組各時間點腦含水量均增高；YTG、YHG、YNG組合物組各時間點腦水含量與I/R組相比明顯減輕(p＜0.001)，腦梗死面積與I/R組相比明顯縮小(p＜0.01)；銀杏葉提取物、銀杏葉總黃酮、銀杏內(nèi)酯與葛根素組各時間點腦水含量與I/R組相比均減輕(p＜0.01)，腦梗死面積與I/R組相比均縮小(p＜0.05，p＜0.01)。
(3)腦組織病理改變SOC組無梗死灶，神經(jīng)元結(jié)構(gòu)形態(tài)正常，無間質(zhì)水腫；I/R組有梗死灶，梗死灶周神經(jīng)元腫脹，細胞輪廓不清，間質(zhì)水腫明顯；YTG、YHG、YNG組合物組，銀杏葉提取物、銀杏葉總黃酮、銀杏內(nèi)酯與葛根素組梗死灶面積均縮小，梗死灶周神經(jīng)元腫脹不明顯，間質(zhì)水腫明顯減輕；但本發(fā)明藥物組合物組作用更明顯。
上述試驗結(jié)果表明，YTG、YHG、YNG組合物組均可通過降低PLA2活性，改善腦循環(huán)，減輕腦缺血再灌注損傷，而發(fā)揮腦保護作用。且本發(fā)明組合物注射液在各項指標(biāo)中均優(yōu)于單用銀杏葉提取物、銀杏葉總黃酮、銀杏內(nèi)酯、葛根素的效果，提示本發(fā)明組合物具有協(xié)同增效作用。
試驗例6 本發(fā)明組合物注射液的穩(wěn)定性試驗 供試品 YTG組合物組自制(參見實施例4水針劑處方1的制備)； YHG組合物組自制(參見實施例4水針劑處方2的制備)； YNG組合物組自制(參見實施例4水針劑處方3的制備)。
考察項目性狀、pH值、澄明度、有關(guān)物質(zhì)、標(biāo)示含量，并在長期試驗期末增加無菌和熱原檢查 試驗方法 置溫度25℃±2℃、相對濕度60％±10％的條件下放置12個月。分別于第3個月、6個月、9個月、12個月，比較外觀后，測試各項指標(biāo)，將結(jié)果與0個月比較；在12個月末增加無菌和熱原檢查。
試驗結(jié)果 溫度25℃±2℃、相對濕度60％±10％的條件下放置12個月，各項指標(biāo)均無明顯變化；12個月末，熱原、無菌檢查均符合規(guī)定。
結(jié)論 由上述考察結(jié)果得出結(jié)論，YTG注射液、YHG注射液、YNG注射液均比較穩(wěn)定，可以長期放置，適應(yīng)于放大生產(chǎn)。
具體實施例方式 以下通過實施例形式的具體實施方式
，進一步闡述本發(fā)明藥物組合物的制備方法。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實施例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。以下實施例中各劑型制備工藝中的輔料可以用藥學(xué)上可接受的輔料替換，或者減少、增加。以下實施例中銀杏葉提取物、銀杏葉總黃酮、銀杏內(nèi)酯分來源于實施例1、實施例2、實施例3中的第二批。
實施例1 銀杏葉提取物的制備 銀杏葉提取物的制備 取銀杏葉，粉碎，用40％乙醇加熱回流提取三次，每次2小時，合并提取液，回收乙醇并濃縮至相對密度為1.10～1.13，加于已處理好的D101大孔吸附樹脂柱上，依次用水及70％的乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，回收乙醇濃縮至相對密度為1.21～1.25，噴霧干燥，即得。
銀杏葉提取物的鑒別 取銀杏葉提取物0.2g，加正丁醇15ml，置水浴中溫浸15分鐘并時時振搖，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取銀杏葉對照提取物0.2g，同法制成對照提取物溶液。吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一含有0.4％醋酸鈉的羧甲基纖維素鈉溶液為粘合劑的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲醇-水(5∶3∶1∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以3％三氯化鋁乙醇溶液，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照提取物色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
銀杏葉提取物含量測定 總黃酮醇苷 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-0.4％磷酸溶液(50∶50)為流動相；檢測波長為360nm。理論板數(shù)按槲皮素峰計算應(yīng)不低于2500。
對照品溶液的制備 分別精密稱取槲皮素對照品、山奈素對照品、異鼠李素對照品，加甲醇制成每1ml分別含30μg、30μg、20μg的混合溶液，作為對照品溶液。
供試品溶液的制備 取銀杏葉提取物35mg，精密稱定，加甲醇-25％鹽酸溶液(4∶1)的混合溶液25ml，置水浴中加熱回流30分鐘，迅速冷卻酯室溫。轉(zhuǎn)移至50量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。
測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，按下式換算成總黃酮醇苷的含量。
總黃酮醇苷含量＝(槲皮素含量+山奈素含量+異鼠李素含量)×2.51 萜類內(nèi)酯 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以正丙醇-四氫呋喃-水(1∶15∶84)為流動相；用蒸發(fā)光散射檢測器檢測。理論板數(shù)按白果內(nèi)酯峰計算應(yīng)不低于2500。
對照品溶液的制備 分別精密稱取白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B和銀杏內(nèi)酯C對照品適量，加甲醇制成每1ml各含2mg、1mg、1mg、1mg的混合溶液，作為對照品溶液。
供試品溶液的制備 取銀杏葉提取物0.15g，精密稱定，加水10ml，置水浴中溫?zé)崾谷苌?，?％鹽酸溶液2滴，用醋酸乙酯振搖提取4次(15ml、10ml、10ml、10ml)，合并提取液，用5％醋酸鈉溶液20ml洗滌，分取醋酸鈉溶液，再用乙酸乙酯10ml洗滌。合并乙酸乙酯提取液及洗液，用水洗滌2次，每次20ml，分取水洗液，用乙酸乙酯10ml洗滌，合并乙酸乙酯液，回收乙酸乙酯至干，殘渣用甲醇溶解并轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。
測定法 分別精密吸取對照品溶液5μl、10μl，供試品溶液10μl，注入液相色譜儀，測定，用外標(biāo)兩點法對數(shù)方程分別計算白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B和銀杏內(nèi)酯C的含量，即得。
按上述工藝制得三批銀杏葉提取物，其得率和含量測定結(jié)果見表6。表6 銀杏葉提取物得率和含量測定結(jié)果 實施例2 銀杏葉總黃酮的制備 銀杏葉總黃酮的制備 取銀杏葉，切碎，加70％乙醇80℃溫浸提取二次，每次2小時，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，加水適量得每1ml相當(dāng)于原藥材1g的混懸液，冷藏12小時，離心，取上清液，加于已處理好的聚酰胺柱(100g，30～60目，乙醇濕法裝柱，先用2倍柱體積的乙醇沖柱，再改用水洗至近無醇味，備用)上，先用3倍柱體積的水沖洗，再用2倍柱體積的10％的乙醇沖洗，棄去洗脫液，改用4倍柱體積的80％乙醇進行洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，減壓濃縮至相對密度1.08～1.10，噴霧干燥，即得。
銀杏葉總黃酮的鑒別 取銀杏葉總黃酮0.1g，加正丁醇15ml，置水浴中溫浸15分鐘并時時振搖，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取銀杏葉對照提取物0.1g，同法制成對照提取物溶液。吸取上述兩種溶液各3μl，分別點于同一含有4％醋酸鈉的羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑的硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯-丁酮-甲醇-水(5∶3∶1∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以3％三氯化鋁乙醇溶液，分別置日光及紫外光燈(254nm或365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照提取物色譜相應(yīng)的位置上，日光下顯相同顏色的斑點，紫外光燈下顯相同顏色的熒光斑點。
銀杏葉總黃酮的含量測定 總黃酮醇苷 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-0.4％磷酸溶液(50∶50)為流動相；檢測波長為360nm。理論板數(shù)按槲皮素峰計算應(yīng)不低于2500。山奈素峰與異鼠李素峰的分離度應(yīng)大于1.5。
對照品溶液的制備 分別精密稱取經(jīng)五氧化二磷干燥過夜的槲皮素、山奈素、異鼠李素對照品，各加甲醇制成每1ml分別含0.03mg、0.03mg、0.02mg的溶液，即得。
供試品溶液的制備 精密稱取銀杏葉總黃酮0.1g，加甲醇-25％鹽酸(4∶1)的混合液25ml，置水浴中加熱回流30分鐘，迅速冷卻至室溫，轉(zhuǎn)移至50ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.5μm)濾過，取濾液，即得。
測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，分別計算槲皮素、山奈素和異鼠李素的含量，按下式換算成總黃酮醇苷的含量。
總黃酮醇苷含量＝(槲皮素含量+山奈素含量+異鼠李素含量)×2.51 按照上述工藝制的三批銀杏葉總黃酮，其含量和得率見表7。
表7 銀杏葉總黃酮的含量測定結(jié)果和得率 實施例3 銀杏內(nèi)酯的制備 銀杏內(nèi)酯的制備 取銀杏葉，切碎，加70％乙醇80℃溫浸提取二次，每次2小時，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，加水適量得每1ml相當(dāng)于原藥材1g的混懸液。加1/2量的石油醚振搖提取4次，棄去石油醚提取液；再用1/2量的乙酸乙酯振搖提取4次，合并乙酸乙酯液，減壓回收溶劑，蒸干，殘渣加30％乙醇加熱使溶解，放置析晶，結(jié)晶再用30％乙醇重結(jié)晶一次，即得。
銀杏內(nèi)酯的鑒別 取銀杏內(nèi)酯0.1g，加水10ml，置水浴中溫?zé)崾谷苌?，?％鹽酸溶液2滴，用醋酸乙酯振搖提取4次(15ml、10ml、10ml、10ml)，合并提取液，用5％醋酸鈉溶液20ml洗滌，分取醋酸鈉溶液，再用醋酸乙酯10ml洗滌，合并醋酸乙酯提取液及洗液，用水洗滌2次，每次20ml，分取水洗液，用醋酸乙酯10ml洗滌，合并醋酸乙酯液，回收醋酸乙酯至干，殘渣用丙酮溶解并轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加丙酮至刻度，搖勻，即得供試品溶液。另外，分別取白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B和銀杏內(nèi)酯C對照品適量，加甲醇制成每1ml各含2mg、1mg、1mg、1mg的混合溶液，即得對照品溶液。吸取上述兩種溶液各15μl，分別點于同一含0.4％醋酸鈉的羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑的硅膠G薄層板上，以甲苯-醋酸乙酯-丙酮-甲醇(10∶5∶5∶0.6)為展開劑，在15℃以下展開，取出，晾干，用醋酐蒸氣熏15分鐘，在140～160℃加熱30分鐘，放冷，置紫外光燈(365nm)下檢視，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
銀杏內(nèi)酯的含量測定 用高效液相色譜法測定。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以正丙醇-四氫呋喃-水(1∶15∶84)為流動相；用蒸發(fā)光散射檢測器檢測。理論板數(shù)按白果內(nèi)酯峰計算應(yīng)不低于2500。白果內(nèi)酯峰與銀杏內(nèi)酯C峰的分離度應(yīng)大于1.5。
對照品溶液的制備 分別精密稱取白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B和銀杏內(nèi)酯C對照品適量，加甲醇制成每1ml各含2mg、1mg、1mg、1mg的混合溶液，即得。
供試品溶液的制備 精密稱取銀杏內(nèi)酯0.1g，加水10ml，置水浴中溫?zé)崾谷苌?，?％鹽酸溶液2滴，用醋酸乙酯振搖提取4次(15ml、10ml、10ml、10ml)，合并提取液，用5％醋酸鈉溶液20ml洗滌，分取醋酸鈉溶液，再用醋酸乙酯10ml洗滌。合并醋酸乙酯提取液及洗液，用水洗滌2次，每次20ml，分取水洗液，用醋酸乙酯10ml洗滌，合并醋酸乙酯液，回收醋酸乙酯至干，殘渣用丙酮溶解并轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加丙酮至刻度，搖勻，即得。
測定法 分別精密吸取對照品溶液10μl、15μl，供試品溶液10μl，注入液相色譜儀，測定，用外標(biāo)兩點法對數(shù)方程分別計算白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B和銀杏內(nèi)酯C的含量，即得。
按照上述工藝制得三批銀杏內(nèi)酯，其含量和得率結(jié)果見表8。
表8 銀杏內(nèi)酯的含量測定結(jié)果和得率 實施例4 本發(fā)明組合物水針劑的制備 1、處方 處方1YTG注射液 銀杏葉提取物 20g(相當(dāng)于原藥材1200g) 葛根素 200g 丙二醇 700ml 無菌注射用水 加至2000ml 共制備 1000支 處方2YHG注射液 銀杏葉總黃酮 10g 葛根素 200g 丙二醇 700ml 無菌注射用水 加至2000ml 共制備 1000支 處方3YNG注射液 銀杏內(nèi)酯 1g 葛根素 200g 丙二醇 700ml 無菌注射用水 加至2000ml 共制備 1000支 2、具體步驟 (1)提前一天處理配液用的管道及容器等，臨用前再用新鮮的注射用水沖洗； (2)將聚山梨酯80制成20％的水溶液，加入處方量的銀杏葉提取物(或為銀杏葉總黃酮、銀杏內(nèi)酯)，加熱攪拌溶解完全；葛根素加入丙二醇中加熱攪拌溶解完全； (3)合并上述兩溶液，補加注射用水至全量； (4)加入配液量0.05％的針用活性炭，加熱攪拌15分鐘； (5)經(jīng)砂濾棒過濾脫炭，測定并調(diào)節(jié)溶液的pH值； (6)經(jīng)0.45μm的微孔濾膜精濾； (7)檢查溶液的澄明度，半成品化驗； (8)將溶液熔封于玻璃安瓿中； (9)100℃流通蒸汽滅菌30分鐘； (10)趁熱將樣品放入0.01％的亞甲藍溶液中檢漏； (11)燈檢；成品全檢，包裝入庫。
實施例5 本發(fā)明組合物粉針劑的制備 1、處方 處方1注射用YTG 銀杏葉提取物20g(相當(dāng)于原藥材1200g) 葛根素 200g 聚山梨酯80 100g 甘露醇 300g 無菌注射用水加至2000ml 共制備 1000支 處方2注射用YHG 銀杏葉總黃酮10g 葛根素 200g 聚山梨酯80 100g 甘露醇 300g 無菌注射用水加至2000ml 共制備 1000支 處方3注射用YNG 銀杏內(nèi)酯1g 葛根素 200g 聚山梨酯80 100g 甘露醇 300g 無菌注射用水加至2000ml 共制備 1000支 2、具體步驟 (1)首先將配液用的容器具及抗生素玻璃瓶，膠塞等進行無菌處理； (2)按照處方量稱取原輔料； (3)將聚山梨酯80制成20％的水溶液，加入處方量的銀杏葉提取物(或為銀杏葉總黃酮、銀杏內(nèi)酯)和葛根素，加熱攪拌溶解完全；再加入甘露醇加熱攪拌溶解完全，補加無菌注射用水至全量。
(4)加入配液量0.05％的針用活性炭，加熱攪拌15分鐘； (5)經(jīng)砂濾棒過濾脫炭。測定并調(diào)節(jié)溶液的pH值； (6)經(jīng)0.22μm的微孔濾膜精濾； (7)檢查溶液的澄明度，半成品化驗； (8)分裝于抗生素玻璃瓶中，半壓塞；將樣品放入凍干機中冷凍干燥；-40℃預(yù)凍5小時，低溫真空干燥-45℃～0℃25小時，然后升溫至25℃真空干燥4小時； (9)凍干結(jié)束，壓塞，軋蓋； (10)成品全檢，包裝入庫。
實施例6 本發(fā)明組合物氯化鈉注射液的制備 1、處方 處方1YTG氯化鈉注射液 銀杏葉提取物20g(相當(dāng)于原藥材1200g) 葛根素 200g 聚山梨酯80 100g 氯化鈉 900g 注射用水加至100000ml 共制備 1000瓶 處方2YHG氯化鈉注射液 銀杏葉總黃酮10g 葛根素 200g 聚山梨酯80 100g 氯化鈉 900g 注射用水加至100000ml 共制備 1000瓶 處方3YNG氯化鈉注射液 銀杏內(nèi)酯1g 葛根素 200g 聚山梨酯80 100g 氯化鈉 900g 注射用水加至100000ml 共制備 1000瓶 2、具體步驟 (1)前一天處理配液用的管道及容器等，臨用前再用新鮮的注射用水沖洗； (2)將聚山梨酯80配制成20％的水溶液，加入處方量的銀杏葉提取物(或為銀杏總黃酮、銀杏內(nèi)酯)與葛根素，加熱攪拌溶解完全；將氯化鈉用配液量40％的注射用水溶解完全； (3)合并兩溶液，補加注射用水至全量； (4)加入配液量0.05％的針用活性炭，加熱攪拌15分鐘； (5)過濾脫炭。測定并調(diào)節(jié)溶液的pH值； (6)經(jīng)0.45μm的微孔濾膜精濾； (7)檢查溶液的澄明度，半成品化驗； (8)灌裝于100ml的輸液瓶中； (9)115℃熱壓滅菌30分鐘； (10)燈檢；成品全檢，包裝入庫。
實施例7 本發(fā)明組合物葡萄糖注射液的制備 1、處方 處方1YTG葡萄糖注射液 銀杏葉提取物20g(相當(dāng)于原藥材1200g) 葛根素 200g 聚山梨酯80 100g 葡萄糖 5000g 注射用水加至100000ml 共制備 1000瓶 處方2YHG葡萄糖注射液 銀杏葉總黃酮10g 葛根素 200g 聚山梨酯80 100g 葡萄糖 5000g 注射用水加至100000ml 共制備 1000瓶 處方3YNG葡萄糖注射液 銀杏內(nèi)酯1g 葛根素 200g 聚山梨酯80 100g 葡萄糖 5000g 注射用水加至100000ml 共制備 1000瓶 2、具體步驟 (1)提前一天處理配液用的管道及容器等，臨用前再用新鮮的注射用水沖洗； (2)將聚山梨酯80配制成20％的水溶液，加入處方量的銀杏葉提取物(或為銀杏葉總黃酮、銀杏內(nèi)酯)與葛根素，加熱攪拌溶解完全；將葡萄糖用配液量40％的注射用水溶解完全； (3)合并兩溶液，補加注射用水至全量； (4)加入配液量0.05％的針用活性炭，加熱攪拌15分鐘； (5)經(jīng)砂濾棒過濾脫炭。測定并調(diào)節(jié)溶液的pH值； (6)經(jīng)0.45μm的微孔濾膜精濾； (7)檢查溶液的澄明度，半成品化驗； (8)灌裝于100ml的輸液瓶中； (9)115℃熱壓滅菌30分鐘； (10)燈檢；成品全檢，包裝入庫。
實施例8 本發(fā)明組合物片劑的制備 1、處方 處方1YTG片 銀杏葉提取物20g(相當(dāng)于原藥材1200g) 葛根素 200g 預(yù)膠化淀粉 200g 微晶纖維素 60g 2％HPMC水溶液 適量 硬脂酸鎂2.0g 羧甲淀粉鈉 16g 共制備 1000片 處方2YHG片 銀杏葉總黃酮10g 葛根素 200g 預(yù)膠化淀粉 200g 微晶纖維素 60g 2％HPMC水溶液 適量 硬脂酸鎂2.0g 羧甲淀粉鈉 16g 共制備 1000片 處方3YNG片 銀杏內(nèi)酯1g 葛根素 200g 預(yù)膠化淀粉 200g 微晶纖維素 60g 2％HPMC水溶液 適量 硬脂酸鎂2.0g 羧甲淀粉鈉 16g 共制備 1000片 2、具體步驟 (1)將銀杏葉提取物(或銀杏葉總黃酮、銀杏內(nèi)酯)和葛根素粉碎過100目篩備用； (2)按照處方量稱取原輔料； (3)將羥丙甲纖維素溶于水中制成2％的水溶液備用； (4)將銀杏葉提取物(或為銀杏葉總黃酮、銀杏內(nèi)酯)與葛根素、預(yù)膠化淀粉、微晶纖維素混合均勻，加入2％HPMC水溶液適量，攪拌均勻，制成適宜軟材； (5)過20目篩制顆粒； (6)顆粒在60℃的條件下烘干； (7)干燥好的顆粒加入硬脂酸鎂和羧甲淀粉鈉，過18目篩整粒，混合均勻； (8)取樣，半成品化驗； (9)按照化驗確定的片重壓片； (10)成品全檢，包裝入庫。
實施例9本發(fā)明組合物膠囊的制備 1、處方 處方1YTG膠囊 銀杏葉提取物20g(相當(dāng)于原藥材1200g) 葛根素 200g 預(yù)膠化淀粉 120g 微晶纖維素 20.0g 2％HPMC水溶液 適量 硬脂酸鎂2.0g 共制備 1000粒 處方2YHG膠囊 銀杏葉總黃酮10g 葛根素 200g 預(yù)膠化淀粉 120g 微晶纖維素 20.0g 2％HPMC水溶液 適量 硬脂酸鎂2.0g 共制備 1000粒 處方3YNG膠囊 銀杏內(nèi)酯1g 葛根素 200g 預(yù)膠化淀粉 120g 微晶纖維素 20.0g 2％HPMC水溶液 適量 硬脂酸鎂2.0g 共制備 1000粒 2、具體步驟 (1)將銀杏葉提取物(或銀杏總黃酮、銀杏內(nèi)酯)和葛根素粉碎過100目篩備用； (2)按照處方量稱取原、輔料； (3)將羥丙甲纖維素溶于水中制成2％的水溶液備用； (4)將銀杏葉提取物(或為銀杏葉總黃酮、銀杏內(nèi)酯)、葛根素、預(yù)膠化淀粉、微晶纖維素混合均勻，加入2％HPMC水溶液適量，攪拌均勻，制成適宜軟材； (5)過20目篩制顆粒； (6)顆粒在60℃的條件下烘干； (7)干燥好的顆粒加入硬脂酸鎂，過18目篩整粒，混合均勻； (8)取樣，半成品化驗； (9)按照化驗確定的裝量裝入膠囊； (10)成品全檢，包裝入庫。
權(quán)利要求
1、一種新的藥物組合物，其特征在于，該組合物主要是由以下重量份的原料藥制成銀杏葉200～6000份、葛根素40～1000份。
2、如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于，其原料藥的重量份數(shù)為銀杏葉600～2400份、葛根素100～500份。
3、如權(quán)利要求2所述的藥物組合物，其特征在于，其原料藥的重量份數(shù)為銀杏葉1200份、葛根素200份。
4、如權(quán)利要求1～3所述的任一藥物組合物的制備方法，其特征在于，所述的銀杏葉可以用適宜的溶劑和方法制得銀杏葉提取物或銀杏葉總黃酮或銀杏內(nèi)酯，然后銀杏葉提取物或銀杏葉總黃酮或銀杏內(nèi)酯再與葛根素以及藥學(xué)上可接受的輔料混合制成任一制劑。
5、如權(quán)利要求4所述的藥物組合物的制備方法，其特征在于，制得的銀杏葉提取物主要有效成分為總黃酮醇苷和萜類內(nèi)酯，其主要有效成分含量的和不低于15％；制得的銀杏葉總黃酮含總黃酮醇苷以槲皮素、山奈酚和異鼠李素的含量之和計不低于20％；制得的銀杏內(nèi)酯含萜類內(nèi)酯以銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B和銀杏內(nèi)酯C的含量之和計不低于40％。
6、如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于，該藥物組合物還可以由下列原料藥制成銀杏葉提取物1～200份、葛根素40～1000份，其中銀杏葉提取物中含總黃酮醇苷不低于15％、萜類內(nèi)酯不低于3％、總銀杏酸不超過百萬分之十五。
7、如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于，該藥物組合物還可以由下列原料藥制成銀杏葉總黃酮1～100份、葛根素40～1000份，其中銀杏葉總黃酮含總黃酮醇苷以槲皮素、山奈酚和異鼠李素的含量之和計不低于20％。
8、如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于，該藥物組合物還可以由下列原料藥制成銀杏內(nèi)酯0.2～50份、葛根素40～1000份，其中銀杏內(nèi)酯含萜類內(nèi)酯以銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B和銀杏內(nèi)酯C的含量之和計不低于40％。
9、如權(quán)利要求1～3、6～8所述的任一藥物組合物，其特征在于該藥物組合物可制成任一臨床上或藥學(xué)上可接受的劑型。
10、如權(quán)利要求9所述的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物可制成注射劑和口服制劑。
全文摘要
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，公開了一種新的用于治療心腦血管方面疾病的藥物組合物及其制備方法和用途，主要由下列重量份的原料藥制成銀杏葉200～6000份、葛根素40～1000份，或者為銀杏葉提取物1～200份、葛根素40～1000份，或者為銀杏葉總黃酮1～100份、葛根素40～1000份，或者為銀杏內(nèi)酯0.2～50份、葛根素40～1000份。本發(fā)明藥物組合物可制成臨床上或藥學(xué)上可接受的任一劑型，制備方法簡便，制劑穩(wěn)定性高，適應(yīng)于大生產(chǎn)；且具有協(xié)同增效的作用，療效顯著，產(chǎn)生了意想不到的效果。
文檔編號A61P9/00GK101049324SQ20061004350
公開日2007年10月10日 申請日期2006年4月7日 優(yōu)先權(quán)日2006年4月7日
發(fā)明者黃振華 申請人:黃振華