專利名稱：蜂花粉降脂活性組分的提取方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及蜂花粉降脂活性組分的提取方法。
背景技術(shù)：
蜂花粉是由蜜蜂采集蜜粉源植物的花粉經(jīng)加工而形成的團(tuán)狀物，蜂花粉的營養(yǎng)成分十分豐富，幾乎含有全部營養(yǎng)素，是一種高質(zhì)量的營養(yǎng)源，不僅含有豐富的蛋白質(zhì)、糖類、脂類、維生素、有機(jī)酸、礦物質(zhì)、核酸，還含有酶和其他生物活性物質(zhì)，被譽(yù)為“微型營養(yǎng)庫”。早在2000多年前中國、希臘等國，人們就采取食用，并作為藥用，隨著科學(xué)技術(shù)的不斷進(jìn)步和研究的不斷深入，發(fā)現(xiàn)花粉具有防止心血管疾病、治療前列腺炎、高血壓、貧血、糖尿病等多種醫(yī)療保健功能。然后，蜂花粉含有復(fù)雜的大分子物質(zhì)和不明成分，可能對部分人群造成不良影響，因此，從蜂花粉中提取功能明確的活性組分具有重要的科學(xué)意義和應(yīng)用前景。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供蜂花粉降脂活性組分的提取方法。
本發(fā)明的蜂花粉降脂活性組分的提取方法，其步驟如下1)對蜂花粉原料進(jìn)行破壁、滅菌；2)將70％-95％的食用酒精與破壁、滅菌的蜂花粉均勻混合，酒精∶蜂花粉的質(zhì)量比為5∶1，在室溫下不斷攪拌，讓酒精與蜂花粉充分接觸，提取18-20小時，靜置10-12個小時，取上清液；3)把上清液放入減壓濃縮設(shè)備，在45-50℃、氣壓0.094-0.098MPa條件下濃縮2-4小時，得到濃縮膠狀物即為花粉降脂活性組分。
本發(fā)明中，對蜂花粉原料的破壁可采用中國專利ZL 00 1 05084.2公開的花粉破壁、滅菌方法。
制備得到的花粉降脂活性組分可按常規(guī)方法直接制成軟膠囊產(chǎn)品，也可作為原料添加到其他保健品或藥品中。
本發(fā)明的有益的效果是1)采用食用酒精作為溶劑萃取蜂花粉中的降脂活性組分，采用成熟的減壓濃縮工藝，制備方法簡單，且食用酒精提取的活性組分安全性好。
2)本發(fā)明從破壁蜂花粉中提取降脂活性組分，產(chǎn)品富集了蜂花粉中的降脂活性組分，提高了產(chǎn)品的降脂效果。
3)獲得的降脂活性組分為花粉中醇溶性的組分，剔除了花粉中的大分子過敏源，避免直接食用花粉對過敏人群造成的不良影響。
具體實(shí)施例方式
以下結(jié)合實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明。
實(shí)施例1蜂花粉降脂活性組分的提取方法由杭州浙大蜂業(yè)科技有限公司提供的商品茶蜂花粉20千克，采用中國專利ZL 00 1 05084.2公開的花粉破壁、滅菌方法對茶蜂花粉進(jìn)行破壁、滅菌。然后用95％的食用酒精按5∶1的比例與蜂花粉混合均勻，在室溫下不斷攪拌，讓酒精充分與蜂花粉接觸，提取20小時，靜置10個小時，把上清液與下層花粉殘余物分開。把上清液放入減壓濃縮設(shè)備，在48℃、氣壓0.098MPa條件下進(jìn)行濃縮，濃縮3小時后獲得濃縮膠狀物，即為蜂花粉降脂活性組分。
實(shí)施例2降血脂動物試驗(yàn)材料蜂花粉降脂活性組分500克。用于檢測試驗(yàn)動物血脂指標(biāo)的標(biāo)樣、試劑及儀器膽固醇(Cholesterol)，BR，上海政翔化學(xué)試劑研究所生產(chǎn)，批號2001109；膽鹽(Pig Bile salt)，BR，北京奧博星生物技術(shù)責(zé)任有限公司，批號20010112；全自動生化分析儀；病理檢驗(yàn)設(shè)備等。試驗(yàn)動物健康S.D大鼠50只，體重200±25g?；A(chǔ)顆粒飼料面粉20％、米粉10％、玉米20％、麩皮25％、豆料20％、骨粉2％、魚粉3％；高脂顆粒飼料93.8％基礎(chǔ)顆粒飼料、1％膽固醇、5％豬油、0.2％膽堿，混勻后加工成顆粒狀。
方法1.高脂血癥動物模型制作大鼠用基礎(chǔ)顆粒飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)，自由進(jìn)食飲水。1周后，大鼠眶靜脈取血，測定甘油三脂(TG)、血清總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)基礎(chǔ)值。然后40只大鼠給予高脂顆粒飼料喂飼，給予高脂顆粒飼料喂飼后第10天大鼠眶靜脈取血，測定造模后大鼠甘油三脂(TG)、血清總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)值。
2.實(shí)驗(yàn)分組根據(jù)造模后大鼠TC值隨機(jī)分為四組，每組10只。設(shè)模型組(不飼喂降脂活性組分)、高劑量組(800mg/kg.bw相當(dāng)于人體推薦量十倍)、中劑量組(400mg/kg.bw相當(dāng)于人體推薦量五倍)、低劑量組(80mg/kg.bw相當(dāng)于人體推薦量)。
3.給藥及動物處理造模分組后開始灌胃給藥，連續(xù)給藥28天。給藥期間，各組大鼠繼續(xù)給予高脂顆粒喂飼。高脂顆粒飼料喂飼后第29天(實(shí)驗(yàn)結(jié)束)，斷頭處死大鼠，取血測定甘油三脂(TG)、血清總膽固醇(TC)、密度脂蛋白(HDL-C)及相關(guān)指標(biāo)。
4.觀察指標(biāo)①大鼠一般狀況；②體重變化；③甘油三脂(TG)、血清總膽固醇、密度脂蛋白(HDL-C)④肝重及肝/體比；⑤體脂濕重及脂體比。
5.統(tǒng)計方法SPSS統(tǒng)計軟件統(tǒng)計分析，根據(jù)資料不同，分別采用ONE-WAYANOVA的Dunnett檢驗(yàn)、Paired-Samples T檢驗(yàn)和K-Independent samples test檢驗(yàn)。
結(jié)果1.對大鼠體重影響實(shí)驗(yàn)期間，各劑量組大鼠體重增加，但各組間大鼠體重增重?zé)o顯著意義(P＞0.05)，見表1。
表1對大鼠體重影響(X±SD)，單位克

※一造模后各實(shí)驗(yàn)組與造模前各組比較，P＜0.05。
經(jīng)Paired-Samples T test檢驗(yàn)，各劑量組內(nèi)造模后體重差別有顯著性意義，P＜0.05經(jīng)ONE-WAY ANOVA的Dunnent檢驗(yàn)，各劑量組與模型組比較，三個階段體重差別無顯著性意義，P＜0.05。
2.對大鼠肥胖程度影響各劑量組與模型組比較，肝重及肝/體比、體脂濕重及脂/體比差別無顯著性意義(P＜0.05)，見表2。
表2對大鼠體重及肝/體比、體脂濕重、脂/體比的影響(X±SD)

※與模型組比較有顯著意義，P＜0.05。
3.對大鼠血脂影響造模后，各劑量組大鼠TC值、TG值和HDL值均高于造模前，差別有顯著性意義(P＜0.05)，但各劑量組TC值、TG值和HDL值與模型組比較，差別無顯著性意義(P＜0.05)。但各劑量組在給予受試物后，TC、TG、HDL值呈下降趨勢，其中，中劑量組和高劑量組TC值與模型組TC值比較差別有顯著性意義(P＜0.05)，各劑量組TG、HDL與模型組比較差別有顯著性意義(P＜0.05)。見表3、表4、表5。
表3對大鼠TC影響(X±SD)(mmol/L)

※一造模后各實(shí)驗(yàn)組與造模前各組比較，P＜0.05；★-實(shí)驗(yàn)結(jié)束各劑量與模型組比較，P＜0.05，下表同。
表4對大鼠TG影響(X±SD)(mmol/L)

表5對大鼠HDL-C影響(X±SD)(mmol/L)

經(jīng)Paired-Samples T test檢驗(yàn)，，各劑量組內(nèi)造模前后TC、TG、HDL值差別有顯著性意義，(P＜0.05)；經(jīng)ONE-WAY ANOVA的Dunnent檢驗(yàn)，各劑量組與模型組比較，實(shí)驗(yàn)結(jié)束各計量組與對照組有顯著性差異，P＜0.05。
大鼠經(jīng)9天高脂飼料喂飼后，TC、TG、HDL值升高，與造模前比較差別有顯著性意義(P＜0.05)，證明高脂血癥動物模型造模成功。受試物以80、400、800mg/kg BW的劑量給高脂模型大鼠灌胃后，實(shí)驗(yàn)期間動物生長活動正常，被毛濃密有光澤。實(shí)驗(yàn)第29天，處死動物，進(jìn)行各項(xiàng)指標(biāo)檢測，結(jié)果表明各劑量組動物體重、肝/體比、體脂濕重及脂/體比與模型組比較差異無顯著性意義(P＜0.05)，但劑量組的TC值、TG值和HDL值與模型組比較，差別有顯著性意義(P＜0.05)，表明本發(fā)明提取的蜂花粉降脂活性組分有明顯的降血脂作用。
權(quán)利要求
1.蜂花粉降脂活性組分的提取方法，其步驟如下1)對蜂花粉原料進(jìn)行破壁、滅菌；2)將70％-95％的食用酒精與破壁后的蜂花粉均勻混合，酒精∶蜂花粉的質(zhì)量比為5∶1，在室溫下不斷攪拌，讓酒精與蜂花粉充分接觸，提取18-20小時，靜置10-12個小時，取上清液；3)把上清液放入減壓濃縮設(shè)備，在45-50℃、氣壓0.094-0.098MPa條件下濃縮2-4小時，得到濃縮膠狀物即為花粉降脂活性組分。
全文摘要
本發(fā)明公開的蜂花粉降脂活性組分的提取方法是先對蜂花粉原料進(jìn)行破壁、滅菌，然后采用食用酒精從破壁蜂花粉中分離制備降脂活性組分。采用該方法獲得的降脂活性組分可應(yīng)用于降脂保健食品和藥品，既提高產(chǎn)品的降脂效果，又避免蜂花粉中的大分子物質(zhì)對過敏人群的不良影響。從破壁蜂花粉中提取降脂活性組分可以大大增強(qiáng)產(chǎn)品的保健醫(yī)療功能，提高產(chǎn)品的附加值，提高經(jīng)濟(jì)效益。
文檔編號A61P3/00GK1903226SQ20061005287
公開日2007年1月31日 申請日期2006年8月10日 優(yōu)先權(quán)日2006年8月10日
發(fā)明者蘇松坤, 羅建能, 陳盛祿, 曾志將 申請人:浙江大學(xué)