專利名稱：一種用于治療肝癌的壁虎藤梨根水提取物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥領(lǐng)域，具體地說是涉及一種用于治療肝癌的壁虎藤梨根的水提取物。
背景技術(shù)：
癌癥的侵襲轉(zhuǎn)移是癌癥患者死亡的主要原因，尋找低毒性的天然藥物作為腫瘤細胞增殖、侵襲轉(zhuǎn)移抑制劑和細胞調(diào)亡誘導(dǎo)劑對于臨床應(yīng)用具有重要的意義。在我國民間散落著許多單、驗方，這些藥方在治療癌癥方面常有良好的作用，并且中醫(yī)藥精髓的體現(xiàn)也正是在復(fù)方中藥方面。壁虎粉和藤梨根是兩種比較常見的中草藥，均為祛邪之藥。
據(jù)《本草綱目》記載，壁虎具有攻毒療瘡，補肺腎、養(yǎng)精血、止咳平喘、祛風(fēng)定驚、解毒通絡(luò)、散結(jié)等功效。在近十幾年，壁虎被廣泛應(yīng)用于臨床治療多種疾病，特別是在用于各種惡性腫瘤、結(jié)核病、骨髓病、瘺病、竇道以及外科抗感染等多種疑難雜癥時，均有確切療效(謝爽等，鮮壁虎提取物抑制C6膠質(zhì)瘤細胞增值和誘導(dǎo)調(diào)亡的研究，腫瘤防治研究，2003，30(6)458-461；陳明等，中藥壁虎現(xiàn)代研究進展，世界科學(xué)技術(shù)-中藥現(xiàn)代化，2001，3(4)53-56；宋洪恩等，華虎內(nèi)攻湯及熱敷消癌散治療原發(fā)性肺癌118例，江蘇中醫(yī)，1996，17(7)22-23；吳本端，復(fù)方壁虎粉配合放療治療中晚期食管癌觀察，實用中醫(yī)藥雜志，1999，15(10)16-17)。
藤梨根為獼猴桃科植物獼猴桃(Actinidia chinensis Planch)和軟棗獼猴桃(A.arguta Planch)的根，始載于《開寶本草》，其全株富含獼猴桃堿，根含熊果酸、齊墩果酸、琥珀酸、胡蘿卜甙以及精氨酸、賴氨酸、亮氨酸、丙氨酸、天門冬氨酸等并富含F(xiàn)e、Cu、Mn、Se等元素成分，具有健胃、清熱、利濕的功效(韋金育等，中越獼猴桃根提取物抗腫瘤作用的實驗研究，廣西中醫(yī)藥，2003，26(6)49；姚慶華等，復(fù)方藤梨根制劑上調(diào)PG細胞間隙連接通訊功能的研究，腫瘤研究與臨床，2004，10(16)303-305；鐘振國等，中越獼猴桃根提取物的體外抗腫瘤活性研究，中藥材，2005，28(3)215-218)。
溫州民間流傳用壁虎粉、藤梨根煮紅棗的復(fù)方治療胃癌。但是未見該復(fù)方對于其它腫瘤的報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種用于治療肝癌的壁虎藤梨根的水提取物。
本發(fā)明的目的是通過如下的技術(shù)方案實現(xiàn)的本發(fā)明提供的用于治療肝癌的壁虎藤梨根的水提取物，是將米炒后壁虎干粉體和藤梨根一起進行水提取而得到的，其具體制備方法包括如下步驟1)米炒壁虎粉的制備將市售的壁虎粉和大米按照重量比3～6∶1混合均勻，然后放入砂鍋內(nèi)進行翻炒，直至大米深黃色，去米，取出壁虎粉晾涼；2)壁虎粉和藤梨根水提取物的制備將步驟1)的壁虎粉和藤梨根按重量比1∶3～9混合后，加入蒸餾水，加熱回流進行浸提，得到壁虎藤梨根的水提取液；然后在30～45℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑，直至得到棕色膏狀物，真空干燥24h，得到壁虎藤梨根的水提取物；浸提時加入水的體積與壁虎藤梨根混合物的重量比例為10～15ml∶1g；回流提取時間優(yōu)選3～6小時；回流提取次數(shù)優(yōu)選1～3次。
將本發(fā)明提供的壁虎藤梨根水提取物為有效成分進行抑制腫瘤細胞實驗，結(jié)果表明，壁虎藤梨根水提取物對肝癌細胞株Bel-7402具有抑制效果，在低濃度下抑制率可達到60％，表明其可以用于制備治療肝癌的藥物。本發(fā)明拓寬了壁虎藤梨根該復(fù)方的醫(yī)藥應(yīng)用領(lǐng)域。
具體實施例方式
實施例1、制備壁虎藤梨根的水提取物I將市售的壁虎粉和大米按照質(zhì)量比4∶1混合均勻，然后放入炒鍋內(nèi)進行翻炒，直至大米深黃色，去米，取出壁虎粉晾涼，得到米炒壁虎粉。
分別稱量315克藤梨根和45克壁虎粉，混合均勻。加入4500ml水，回流4小時，進行提??；回流浸提3次，合并浸提液，得到壁虎藤梨根的水浸提液。將該壁虎藤梨根水浸提液在38℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，除去溶劑，直至得到棕色膏狀物，真空干燥24h，得到壁虎藤梨根的水提取物I。
實施例2、制備壁虎藤梨根的水提取物II將市售的壁虎粉和大米按照質(zhì)量比3∶1混合均勻，然后放入炒鍋內(nèi)進行翻炒，直至大米深黃色，去米，取出壁虎粉晾涼，得到米炒壁虎粉。
分別稱量135克藤梨根和45克壁虎粉，混合均勻。加入1800ml水，回流3小時，進行提取；回流浸提2次，合并浸提液，得到壁虎藤梨根的水浸提液。將該壁虎藤梨根水浸提液在30℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，除去溶劑，直至得到棕色膏狀物，真空干燥24h，得到壁虎藤梨根的水提取物II。
實施例3、制備壁虎藤梨根的水提取物III將市售的壁虎粉和大米按照質(zhì)量比6∶1混合均勻，然后放入炒鍋內(nèi)進行翻炒，直至大米深黃色，去米，取出壁虎粉晾涼，得到米炒壁虎粉。
分別稱量405克藤梨根和45克壁虎粉，混合均勻。加入6750ml水，回流6小時，進行提取，得到壁虎藤梨根的水浸提液。將該壁虎藤梨根水浸提液在45℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，除去溶劑，直至得到棕色膏狀物，真空干燥24h，得到壁虎藤梨根的水提取物III。
實施例4、壁虎藤梨根細胞實驗細胞株肝癌細胞株Bel-7402由上海細胞所提供篩選方法磺酰羅丹明B(Sulforhodamine B，SRB)蛋白染色法；作用時間72小時實驗單位國家新藥篩選中心將實施例1得到的壁虎藤梨根水提取物I進行抑制腫瘤的細胞實驗。實驗的方法為取對數(shù)生長期的肝癌細胞株Bel-7402接種于96孔培養(yǎng)板，將細胞置于37℃、5％CO2培養(yǎng)箱中預(yù)貼壁24小時后，棄去上清液，加入不同濃度的壁虎藤梨根水提取物。每個濃度設(shè)有三復(fù)孔。并設(shè)有相應(yīng)濃度的生理鹽水溶媒對照及無細胞凋零孔。腫瘤細胞在37℃，5％CO2條件下培養(yǎng)72小時，傾去培養(yǎng)液，依次加入SRB溶液和三羥甲基氨及甲烷(Tris)溶液，在515nm波長下酶標儀下測定各孔吸光度。并按下式進行計算，結(jié)果列于表1。

表1、壁虎藤梨根水提取物對肝癌細胞株Bel-7402的抑制實驗

上述結(jié)果表明，本發(fā)明提供的壁虎藤梨根水提取物比單獨藤梨根和壁虎粉水提物對肝癌細胞株Bel-7402的抑制效果要好，尤其是在0.063mg/ml的低濃度下具有較高的抑制率。
由此可以看出，復(fù)方藥效的發(fā)揮并非單味藥效成分的簡單相加，而是復(fù)方中成分之間存在的協(xié)同或產(chǎn)生新的藥理等復(fù)雜作用。對于該復(fù)方，可能是由于壁虎粉和藤梨根之間產(chǎn)生的協(xié)同作用使其在很低的濃度下，對于肝癌的抑制效果優(yōu)于單味中藥。該結(jié)果同時也表明該復(fù)方可以用于制備治療肝癌的藥物。本發(fā)明拓寬了壁虎藤梨根的醫(yī)藥應(yīng)用領(lǐng)域。
權(quán)利要求
1.一種用于治療肝癌的壁虎藤梨根的水提取物，是將米炒后壁虎干粉體和藤梨根一起進行水提取而得到的。
2.如權(quán)利要求1所述的用于治療肝癌的壁虎藤梨根的水提取物，其為通過下述方法得到的1)米炒壁虎粉的制備將市售的壁虎粉和大米按照重量比3～6∶1混合均勻，然后放入砂鍋內(nèi)進行翻炒，直至大米深黃色，去米，取出壁虎粉晾涼；2)壁虎粉和藤梨根水提取物的制備將步驟1)米炒后的壁虎粉和藤梨根按重量比1∶3～9混合后，加入蒸餾水，加熱回流進行浸提，得到壁虎藤梨根的水提取液；然后在30～45℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，除去溶劑，直至得到棕色膏狀物，真空干燥24h，得到壁虎藤梨根的水提取物。
3.如權(quán)利要求2所述的用于治療肝癌的壁虎藤梨根的水提取物，其特征在于所述步驟2)浸提時加入水的體積與壁虎藤梨根混合物的重量比例為10～15ml∶1g。
4.如權(quán)利要求2所述的用于治療肝癌的壁虎藤梨根的水提取物，其特征在于所述步驟2)回流提取時間為3～6小時。
5.如權(quán)利要求2所述的用于治療肝癌的壁虎藤梨根的水提取物，其特征在于所述步驟2)回流提取次數(shù)為1～3次。
6.權(quán)利要求1至5之一所述的用于治療肝癌的壁虎藤梨根的水提取物在制備治療肝癌的藥物中的用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種用于治療肝癌的壁虎藤梨根的水提取物，是將米炒后壁虎干粉體和藤梨根一起進行水提取而得到的。以該壁虎藤梨根水提取物為有效成分，可對肝癌細胞株Bel－7402具有抑制效果，在低濃度下抑制率可達到60％，表明其可以用于制備治療肝癌的藥物。本發(fā)明拓寬了壁虎藤梨根該復(fù)方的醫(yī)藥應(yīng)用領(lǐng)域。
文檔編號A61K35/64GK101049326SQ20061006699
公開日2007年10月10日 申請日期2006年4月4日 優(yōu)先權(quán)日2006年4月4日
發(fā)明者張虹, 向俊峰, 陳旭征, 管燁, 唐亞林 申請人:中國科學(xué)院化學(xué)研究所