專利名稱：白藜蘆醇包衣納米脂質(zhì)體及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種抗腫瘤的藥物，具體的說，涉及一種白藜蘆醇包衣納米脂質(zhì)體及其制備方法。
背景技術(shù)：
腫瘤是一種常見病與多發(fā)病，對人民的生命健康威脅很大，在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中是越來越受到重視的研究課題。全世界每年死于癌癥者700萬以上，現(xiàn)在癌癥患者約3700萬。在我國，每年約有130萬人死于腫瘤，估計發(fā)病率在180萬～200萬之間，總的發(fā)病率在不斷上升。在國內(nèi)多個大城市中，惡性腫瘤已超過心腦血管疾病，排在所有疾病死亡原因的第一位，而在35～59歲年齡段，腫瘤一直是第一殺手。由于過去許多嚴(yán)重威脅人民生命健康的烈性傳染病得到了控制，人均壽命逐漸延長，診斷技術(shù)不斷提高，但是人類環(huán)境中的致癌因素日漸增多，因此在很多國家，目前癌癥居死亡原因首位或每二位。
目前腫瘤的治療有手術(shù)、放療和化療，很大程度上以化學(xué)治療為主。手術(shù)與放射治療方法的順應(yīng)性較差，而化學(xué)治療又會給患者帶來較大的毒副作用，在抑制和毒害增生活躍的腫瘤細胞的同時，對骨髓細胞、腸上皮細胞、毛發(fā)細胞、以及生殖細胞也同樣產(chǎn)生抑制作用，同時容易產(chǎn)生耐藥性從而失去治療作用。隨著社會經(jīng)濟的發(fā)展和人民生活的不斷提高，人們對生活、生命質(zhì)量的要求也在不斷提高，高效低毒綠色環(huán)保的抗腫瘤藥物的出現(xiàn)也是眾望所歸。
白藜蘆醇是許多植物中存在的一種活性較強的非黃酮類多酚化合物，白藜蘆醇具有的對心血管疾病和腫瘤的預(yù)防和保健作用已在國際上引起廣泛的關(guān)注及深入研究，并已作為保健品及食品添加劑在歐美市場廣泛銷售。近年來，國內(nèi)外對白藜蘆醇抗腫瘤的活性及具體機制進行大量深入研究，認為是目前可與紫杉醇媲美的最有希望的抗癌成份之一。目前研究證明白藜蘆醇不但具有防治心血管疾病、消炎作用，而且更重要的是它具有廣泛的防癌、抗癌作用。
現(xiàn)代醫(yī)藥技術(shù)與方法應(yīng)用表明，許多中藥活性成分，如葛根素、槲皮素、黃芩苷等均存在嚴(yán)重的體內(nèi)吸收問題，致使其生物利用度低，不能有效地發(fā)揮其治療作用，限制了其臨床應(yīng)用及其相關(guān)的產(chǎn)業(yè)化發(fā)展。
雖然白藜蘆醇為一很有前途的腫瘤預(yù)防和治療藥，但是由于白藜蘆醇難溶于水，并且對光不穩(wěn)定，其自身物理化學(xué)性質(zhì)的局限，導(dǎo)致其在體內(nèi)吸收較差，生物利用度不高，臨床效果不甚理想。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種制備工藝簡單，無毒、無免疫原性、可降解、緩釋，作用時間長的白藜蘆醇包衣納米脂質(zhì)體及其制備方法。
為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案是白藜蘆醇包衣納米脂質(zhì)體，其特征是所述脂質(zhì)體由以下成分組成白藜蘆醇、卵磷脂或大豆磷脂、膽固醇、氯化殼聚糖、輔料。
以下為上述技術(shù)方案的改進所述輔料為以下成分的一種或兩種甘露醇、山梨醇、乳糖、蔗糖。
所述脂質(zhì)體各成分的重量百分比為白藜蘆醇 5～10％卵磷脂或大豆磷脂、膽固醇 50～85％氯化殼聚糖0.5～1％輔料 5～40％。
所述脂質(zhì)體各成分的重量百分比為白藜蘆醇 6～9％卵磷脂或大豆磷脂、膽固醇 60～70％氯化殼聚糖0.6～0.8％輔料 10～30％。
所述脂質(zhì)體各成分的重量百分比為白藜蘆醇 7％卵磷脂或大豆磷脂、膽固醇 62.3％氯化殼聚糖0.7％輔料 30％。
白藜蘆醇包衣納米脂質(zhì)體的制備方法包括以下步驟
a、制備脂質(zhì)體(1)按照1∶1～4∶1的摩爾比精密稱取卵磷脂或大豆磷脂與膽固醇并混合，然后將混合物溶解于氯仿溶液中，得到類脂溶液；(2)按照比例稱取白藜蘆醇，溶解于乙醇，將得到的白藜蘆醇乙醇溶液加入到類脂溶液中，再轉(zhuǎn)移至250mL茄形瓶中，于30～40℃水浴恒溫；(3)用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓蒸餾除去有機溶劑，在瓶壁上形成均勻類脂薄膜，用溫度為30～40℃、溶解有凍干保護劑的水化介質(zhì)水化類脂薄膜，形成粗混懸液，輕輕振搖1～2h，超聲處理1～2min，得到脂質(zhì)體，將其置于4℃的冰箱中保存；b、制備包衣脂質(zhì)體(1)取適量脂質(zhì)體，以1mL/min的速度恒速滴加到氯化殼聚糖溶液中，并攪拌，攪拌速度為250～300r/min，待脂質(zhì)體全部滴加完畢再繼續(xù)攪拌5～10min，即得混懸狀氯化殼聚糖包衣脂質(zhì)體；(2)將混懸狀氯化殼聚糖包衣脂質(zhì)體經(jīng)高壓均質(zhì)機在120～150MPa壓力下經(jīng)50nm膜擠壓乳勻5～6次，得到包衣脂質(zhì)體，然后置4℃的冰箱中保存；c、包衣脂質(zhì)體的凍干(1)在包衣脂質(zhì)體內(nèi)加入輔料，每種輔料占包衣脂質(zhì)體懸浮液的5％～15％，然后取2mL加入輔料后的包衣脂質(zhì)體，裝入青霉素小瓶中，預(yù)凍20～24h，再冷凍干燥24～30h，得包衣脂質(zhì)體的干燥品。
白藜蘆醇的結(jié)構(gòu)式為 白藜蘆醇，英文名稱為Resveratro|，Res，化學(xué)名3，4′，5-三羥基-反-均二苯代乙烯，分子式C14H12O3，分子量228.2。
白藜蘆醇是許多植物中存在的一種活性非黃酮類多酚化合物。白藜蘆醇呈白色針狀晶體，難溶于水，不溶于乙醚，能溶于乙醇，乙酸乙酯，丙酮等溶劑中。1940年首次發(fā)現(xiàn)該成分以來，一直受到醫(yī)藥界的重視。迄今為止的研究表明白藜蘆醇具有抗腫瘤、抗氧化、抗心血管疾病、抗細菌、抗炎，抑制血小板聚集，調(diào)節(jié)免疫等作用。白藜蘆醇被喻為繼紫杉醇之后的又一新的綠色抗癌藥物，已成為科學(xué)家們高度重視的天然活性成分，具有很大的藥用價值和市場前景。
白藜蘆醇是植物在惡劣環(huán)境下或遭到病原體侵害時，植物自身分泌的一種抗毒素，可抵御霉菌的感染。它是因植物受到真菌感染，紫外線照射或病理狀況下而產(chǎn)生的，結(jié)構(gòu)類似于雌激素己烯雌酚。
白藜蘆醇廣泛存在于葡萄科、百合科、蓼科、豆科、傘形科、落草科、棕櫚科、買麻藤科等多種植物中，在花生仁、桑椹、葡萄等70種植物中也含有這種物質(zhì)。在我國的傳統(tǒng)中藥虎杖、何首烏等植物中也發(fā)現(xiàn)了白藜蘆醇的存在。在白藜蘆醇的各項藥理作用中最引人注目的是抗腫瘤作用，據(jù)報道白藜蘆醇可拮抗消化、呼吸、血液、生殖等多個系統(tǒng)來源的多種腫瘤細胞的增殖，對鼻咽癌、肝癌、肺癌、胃癌、乳腺癌、前列腺癌、甲狀腺癌、白血病等都有治療作用。
目前認為，白藜蘆醇主要是通過抑制細胞色素酶、誘導(dǎo)解毒酶、抑制環(huán)氧化酶、抑制蛋白激酶、拮抗雌激素受體、促進腫瘤細胞分化和凋亡等途徑達到抗腫瘤的作用。
有益效果本發(fā)明采用以上技術(shù)方案，脂質(zhì)體在人體內(nèi)具有無毒、無免疫原性、可降解、緩釋等特點，所載藥物廣泛，并且能夠減少藥物的用量，增強在體內(nèi)的穩(wěn)定性和藥理作用，可以降低藥物的毒副作用等特點，脂質(zhì)體對正常細胞和組織無損害和抑制作用，并可以長時間地吸附于靶細胞周圍，使藥物能充分向靶細胞組織滲透，也可以通過靜電的作用與細胞膜接觸融合進入細胞內(nèi)。
殼聚糖具有良好的生物相容性，溶于稀鹽酸后形成氯化殼聚糖。氯化殼聚糖表面帶有高密度的正電荷，在生理條件下，腫瘤細胞表面帶有較多負電荷，因此決定用帶正電荷的親水性氯化殼聚糖溶液包被脂質(zhì)體，并乳勻至納米級。包衣后的納米脂質(zhì)體可以進一步增加藥物對腫瘤細胞的靶向性，并且能夠逃匿網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的捕獲以及延長脂質(zhì)體在血液循環(huán)中的滯留時間，從而達到緩釋、靶向、長效的作用。
本發(fā)明具有無毒、無免疫原性、可降解、緩釋等特點，作用時間長，能夠有效預(yù)防和治療腫瘤疾病，所以具有比較高的經(jīng)濟價值和社會價值。
具體實施例實施例1白藜蘆醇包衣納米脂質(zhì)體，所述脂質(zhì)體由以下成分組成白藜蘆醇、卵磷脂、膽固醇、氯化殼聚糖、甘露醇、山梨醇。
所述脂質(zhì)體各成分的重量百分比為白藜蘆醇5％卵磷脂、膽固醇 55％氯化殼聚糖 0.5％甘露醇、山梨醇 39.5％。
白藜蘆醇包衣納米脂質(zhì)體的制備方法包括以下步驟a、制備脂質(zhì)體(1)按照1∶1的摩爾比精密稱取卵磷脂與膽固醇并混合，然后將混合物溶解于氯仿溶液中，得到類脂溶液；(2)按照比例稱取白藜蘆醇，溶解于乙醇，將得到的白藜蘆醇乙醇溶液加入到類脂溶液中，再轉(zhuǎn)移至250mL茄形瓶，于37℃水浴恒溫；(3)用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓蒸餾除去有機溶劑，在瓶壁上形成均勻類脂薄膜，用溫度為37℃、溶解有凍干保護劑的水化介質(zhì)水化類脂薄膜，形成粗混懸液，輕輕振搖1h，超聲處理1min，得到脂質(zhì)體，將其置于4℃的冰箱中保存；b、制備包衣脂質(zhì)體(1)取適量脂質(zhì)體，以1mL/min的速度恒速滴加到氯化殼聚糖溶液中，并攪拌，攪拌速度為250r/min，待脂質(zhì)體全部滴加完畢再繼續(xù)攪拌5min，即得混懸狀氯化殼聚糖包衣脂質(zhì)體；(2)將混懸狀氯化殼聚糖包衣脂質(zhì)體經(jīng)高壓均質(zhì)機在120MPa壓力下經(jīng)50nm膜擠壓乳勻5次，得到包衣脂質(zhì)體，然后置于4℃的冰箱中保存；c、包衣脂質(zhì)體的凍干在包衣脂質(zhì)體內(nèi)加入輔料，每種輔料占包衣脂質(zhì)體混懸液的5％，然后取2mL加入輔料后的包衣脂質(zhì)體，裝入青霉素小瓶中，預(yù)凍20h，再冷凍干燥24h，得包衣脂質(zhì)體的干燥品。
實施例2白藜蘆醇包衣納米脂質(zhì)體，所述脂質(zhì)體由以下成分組成白藜蘆醇、大豆磷脂、膽固醇、氯化殼聚糖、乳糖、蔗糖。
所述脂質(zhì)體各成分的重量百分比為白藜蘆醇 9％大豆磷脂、膽固醇 70％氯化殼聚糖0.8％乳糖、蔗糖20.2％。
白藜蘆醇包衣納米脂質(zhì)體的制備方法包括以下步驟a、制備脂質(zhì)體(1)按照3∶1的摩爾比精密稱取大豆磷脂與膽固醇并混合，再按照比例稱取混合物溶解于氯仿溶液中，得到類脂溶液；(2)按照比例稱取白藜蘆醇，溶解于乙醇，將得到的白藜蘆醇乙醇溶液加入到類脂溶液中，再轉(zhuǎn)移至250mL茄形瓶，于37℃水浴恒溫；(3)用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓蒸餾除去有機溶劑，在瓶壁上形成均勻類脂薄膜，用溫度為37℃、溶解有凍干保護劑的水化介質(zhì)水化類脂薄膜，形成粗混懸液，輕輕振搖2h，超聲處理2min，得到脂質(zhì)體，置于4℃的冰箱中保存；b、制備包衣脂質(zhì)體(1)取適量脂質(zhì)體，以1mL/min的速度恒速滴加到氯化殼聚糖溶液中，并攪拌，攪拌速度為280r/min，待脂質(zhì)體全部滴加完畢再繼續(xù)攪拌6min，即得混懸狀氯化殼聚糖包衣脂質(zhì)體；(2)將混懸狀氯化殼聚糖包衣脂質(zhì)體經(jīng)高壓均質(zhì)機在140MPa壓力下經(jīng)50nm膜擠壓乳勻6次，得到包衣脂質(zhì)體，然后置于4℃的冰箱中保存；c、包衣脂質(zhì)體的凍干在包衣脂質(zhì)體內(nèi)加入輔料，每種輔料占包衣脂質(zhì)體懸浮液的5％，然后取2mL加入輔料后的包衣脂質(zhì)體，裝入青霉素小瓶中，預(yù)凍22h，再冷凍干燥26h，得包衣脂質(zhì)體的干燥品。
權(quán)利要求
1.白藜蘆醇包衣納米脂質(zhì)體，其特征是所述脂質(zhì)體由以下成分組成白藜蘆醇卵磷脂或大豆磷脂膽固醇氯化殼聚糖輔料。
2.如權(quán)利要求1所述的白藜蘆醇包衣納米脂質(zhì)體，其特征是所述輔料為以下成分的一種或兩種甘露醇山梨醇乳糖蔗糖。
3.如權(quán)利要求1所述的白藜蘆醇包衣納米脂質(zhì)體，其特征是所述脂質(zhì)體各成分的重量百分比為白藜蘆醇5～10％卵磷脂或大豆磷脂、膽固醇50～85％氯化殼聚糖 0.5～1％輔料5～40％。
4.如權(quán)利要求3所述的白藜蘆醇包衣納米脂質(zhì)體，其特征是所述脂質(zhì)體各成分的重量百分比為白藜蘆醇6～9％卵磷脂或大豆磷脂、膽固醇60～75％氯化殼聚糖 0.6～0.8％輔料20～35％。
5.如權(quán)利要求4所述的白藜蘆醇包衣納米脂質(zhì)體，其特征是所述脂質(zhì)體各成分的重量百分比為白藜蘆醇 7％卵磷脂或大豆磷脂、膽固醇 62.3％氯化殼聚糖 0.7％輔料 30％。
6.如權(quán)利要求5所述的白藜蘆醇包衣納米脂質(zhì)體的制備方法，其特征是所述制備方法包括以下步驟a、制備脂質(zhì)體(1)按照1∶1～4∶1的摩爾比精密稱取卵磷脂或大豆磷脂與膽固醇并混合，然后將混合物溶解于氯仿溶液中，得到類脂溶液；(2)按照比例稱取白藜蘆醇，溶解于乙醇，將得到的白藜蘆醇乙醇溶液加入到類脂溶液中，再轉(zhuǎn)移至250mL茄形瓶，于30～40℃水浴恒溫；(3)用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓蒸餾除去有機溶劑，在瓶壁上形成均勻類脂薄膜，用溫度為30～40℃、溶解有凍干保護劑的水化介質(zhì)水化類脂薄膜，形成粗混懸液，輕輕振搖1～2h，超聲處理1～2min，得到脂質(zhì)體，置于4℃的冰箱中保存；b、制備包衣脂質(zhì)體(1)取適量脂質(zhì)體，以1mL/min的速度恒速滴加到氯化殼聚糖溶液中，并攪拌，攪拌速度為250～300r/min，待脂質(zhì)體全部滴加完畢再繼續(xù)攪拌5～10min，即得混懸狀氯化殼聚糖包衣脂質(zhì)體；(2)將混懸狀氯化殼聚糖包衣脂質(zhì)體經(jīng)高壓均質(zhì)機在120～150MPa壓力下經(jīng)50nm膜擠壓乳勻5～6次，得到包衣脂質(zhì)體，然后置于4℃的冰箱中保存；c、包衣脂質(zhì)體的凍干在包衣脂質(zhì)體內(nèi)加入輔料，每種輔料占包衣脂質(zhì)體懸浮液的5％～15％，然后取2mL加入輔料后的包衣脂質(zhì)體，裝入青霉素小瓶中，預(yù)凍20～24h，再冷凍干燥24～30h，得包衣脂質(zhì)體的干燥品。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種白藜蘆醇包衣納米脂質(zhì)體，脂質(zhì)體由白藜蘆醇、卵磷脂或大豆磷脂、膽固醇、氯化殼聚糖、輔料組成，白藜蘆醇5～10％，卵磷脂或大豆磷脂與膽固醇50～85％、氯化殼聚糖0.5～1％、輔料5～40％，制備方法包括脂質(zhì)體的制備，包衣脂質(zhì)體的制備，包衣脂質(zhì)體的凍干，將有抗腫瘤作用的白藜蘆醇包在脂質(zhì)體內(nèi)，從而增加了藥物在靶器官的濃度，同時由于脂質(zhì)體結(jié)構(gòu)的特異性又可以減慢藥物的釋放時間，能夠更長時間的發(fā)揮作用，白藜蘆醇多相脂質(zhì)體系口服制劑，對患者的順應(yīng)性較好，并且RES多相脂質(zhì)體制備工藝簡單，在人體內(nèi)具有無毒、無免疫原性、可降解、緩釋等特點。
文檔編號A61K31/045GK1951369SQ20061007002
公開日2007年4月25日 申請日期2006年11月3日 優(yōu)先權(quán)日2006年11月3日
發(fā)明者李萬忠 申請人:李萬忠