專利名稱：一種含高濃度虎杖苷的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種含高濃度虎杖苷的藥物組合物，具體地說涉及含有藥用活性成分虎杖苷和助溶劑葡甲胺和/或環(huán)糊精的藥物組合物。
背景技術(shù)：
虎杖苷，即3，4’，5-三羥基二苯乙烯-3-β-D-葡萄糖苷(C20H22O8)作為藥用成分可見于文獻(xiàn)及專利報(bào)道，基礎(chǔ)藥理學(xué)研究表明，虎杖苷具有改善微循環(huán)、降血脂、抗腫瘤等藥理活性。
中國專利申請CN 1709269A指出虎杖苷基礎(chǔ)藥理學(xué)研究文獻(xiàn)中，在體試驗(yàn)研究多采用靜脈內(nèi)途徑給予虎杖苷，試驗(yàn)樣品多采用水或生理鹽水配制2～5mg/ml濃度的虎杖苷溶液，但文獻(xiàn)對溶液的可行配制方法均無進(jìn)一步說明；根據(jù)文獻(xiàn)測算，虎杖苷臨床有效劑量(成人)應(yīng)在112mg/次以上，在1～20ml常規(guī)注射劑規(guī)格下，臨床用注射劑中虎杖苷濃度應(yīng)不低于5.6mg/ml；虎杖苷在純水或生理鹽水溶液中的溶解度有限，其常規(guī)水溶液難以達(dá)到文獻(xiàn)所述的藥物濃度室溫下，虎杖苷在水及生理鹽水中的飽和濃度均低于0.5mg/ml，遠(yuǎn)低于上述2～5mg/ml給藥濃度。
調(diào)節(jié)pH值、加熱、添加表面活性劑等方法，都是提高化合物溶解度的常用方法，但是，研究表明，對于制備臨床所需藥效濃度的穩(wěn)定的虎杖苷藥物組合物，這些方法的價(jià)值有限。例如，調(diào)節(jié)溶液pH值可以增加虎杖苷的溶解度，但是，室溫下以NaOH調(diào)節(jié)pH配制虎杖苷水溶液時(shí)，當(dāng)虎杖苷溶解度達(dá)到3mg/ml時(shí)，其水溶液pH值需達(dá)12以上。鑒于注射液之pH值一般應(yīng)在4.0～9.0范圍內(nèi)，因此僅通過pH調(diào)節(jié)難以獲得藥效濃度的虎杖苷水溶液；加熱溶解的方法顯然并不適合制備成藥制劑；采用pH調(diào)節(jié)法和/或添加表面活性劑(吐溫80)制備較高濃度的虎杖苷注射用溶液因難以實(shí)現(xiàn)冷藏保存而存在藥物儲存方面的缺陷。
如中國專利申請CN 1709269A所述，在臨床制劑允許的范圍內(nèi)，通過調(diào)節(jié)pH值、添加吐溫類表面活性劑等常規(guī)制劑方法難以獲得理想的臨床用虎杖苷注射液的制劑方案。
中國專利申請CN 1709269A提出了一種以乙醇和/或丙二醇作為溶劑的含高濃度虎杖苷的注射用溶液及其制備方法，該專利首次實(shí)現(xiàn)了可供臨床使用的注射劑的制備。但該專利所提供的虎杖苷注射液是注射用濃溶液，也就是說，該專利所提供的虎杖苷注射液需經(jīng)注射用水或生理鹽水稀釋至一定程度后方可用于注射給藥，其原因在于，其注射液因含較高濃度的有機(jī)溶劑而不適合直接注射給藥。
毫無疑問，含高濃度虎杖苷的注射用制劑對于實(shí)現(xiàn)虎杖苷的臨床應(yīng)用價(jià)值具有至關(guān)重要的現(xiàn)實(shí)意義。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種含高濃度虎杖苷的藥物組合物，該藥物組合物所含高濃度的虎杖苷可滿足虎杖苷臨床用藥的需要，其組合物中可不含乙醇等有機(jī)助溶劑，因此尤其適合于臨床直接注射給藥使用。
本發(fā)明之含虎杖苷藥用組合物采用葡甲胺和/或環(huán)糊精作為助溶劑，其劑型為水溶液或臨用前用水或生理鹽水配制成水溶液的凍干制品，所述虎杖苷水溶液以及用凍干制品配制的水溶液中，其虎杖苷濃度可達(dá)5mg/ml以上。
本發(fā)明中，所述葡甲胺是1-脫氧-1-(甲氨基)-D-山梨醇；所述環(huán)糊精是指β-環(huán)糊精或其衍生物，特別是β-環(huán)糊精、羥丙基β-環(huán)糊精以及磺丁醚-β-環(huán)糊精等；所述高濃度虎杖苷溶液是指其溶液中的虎杖苷的濃度達(dá)到約5mg/ml或5mg/ml以上。
本發(fā)明首先提供一種以葡甲胺作為增溶劑的高濃度虎杖苷水溶液。該溶液中可以含虎杖苷約5mg/ml～20mg/ml，助溶劑葡甲胺的含量可以為約7.5mg/ml～60mg/ml。
已知pH調(diào)節(jié)劑可用于提高虎杖苷的水溶性，但是，單用常規(guī)酸堿調(diào)節(jié)劑難以在臨床允許的注射劑pH值范圍(4.0～9.0)內(nèi)制備高濃度的虎杖苷溶液。如中國專利申請CN 1709269A所述，虎杖苷在pH 7～10的NaOH水溶液中的溶解度均低于0.5mg/ml。本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，葡甲胺具有良好的增強(qiáng)虎杖苷的溶解作用，例如，室溫下，在10mg/ml的葡甲胺水溶液中，虎杖苷飽和溶解度可達(dá)約5.69mg/ml，其溶液pH值約8.9；在20mg/ml的葡甲胺水溶液中，室溫下虎杖苷飽和溶解度可達(dá)約9.68mg/ml，其溶液pH值約9.5；而以磷酸緩沖液配制含20mg/ml葡甲胺的pH 9.0水溶液，則虎杖苷飽和溶解度可達(dá)約7.2mg/ml。顯然，葡甲胺對虎杖苷的增溶作用并非只是通過調(diào)節(jié)pH值來實(shí)現(xiàn)的。
采用純水以及緩沖溶液作為溶劑保持葡甲胺水溶液之pH值在約7.5～9.0范圍內(nèi)，當(dāng)葡甲胺所用濃度在約7.5mg/ml～60mg/ml范圍內(nèi)時(shí)，可制備虎杖苷濃度約5mg/ml～15mg/ml的水溶液。
另一方面，本發(fā)明提供一種以β-環(huán)糊精作為助溶劑的高濃度虎杖苷水溶液。該水溶液中可以含虎杖苷約5mg/ml～15mg/ml，其中助溶劑β-環(huán)糊精的含量可以為約20mg/ml～60mg/ml。
以純水配制的β-環(huán)糊精溶液中，當(dāng)環(huán)糊精濃度為約25mg/ml時(shí)，其虎杖苷的溶解度即可超過5mg/ml。在以pH 9.0磷酸緩沖液配制的β-環(huán)糊精溶液中，當(dāng)環(huán)糊精濃度為約20mg/ml時(shí)，其虎杖苷溶解度可超過5mg/ml；當(dāng)環(huán)糊精濃度為約60mg/ml時(shí)，則虎杖苷溶解度可超過20mg/ml。
已知β-環(huán)糊精類可用于制備多種化學(xué)成分的包合物。包合物的制備一般都需要經(jīng)干燥制得固形物；并且一般都存在一定的包合率。本發(fā)明采用β-環(huán)糊精等作為助溶劑制備的虎杖苷溶液，其基本物理化學(xué)原理與包合物應(yīng)當(dāng)有相同之處，但本發(fā)明所得虎杖苷溶液均為澄明溶液，無需經(jīng)過固體過程，也不存在包合率問題。本發(fā)明中，虎杖苷的溶解度雖然隨β-環(huán)糊精類濃度的增加而升高，但兩者之間并不呈現(xiàn)明顯的線性關(guān)系，此與包合物的溶解行為有所不同。
本發(fā)明采用β-環(huán)糊精作為增溶劑制備虎杖苷溶液時(shí)還有其它意想不到的效果例如，文獻(xiàn)以及本發(fā)明人實(shí)測結(jié)果均表明，室溫下，β-環(huán)糊精在純水中的溶解度約為18mg/ml；以純水作為溶劑，在虎杖苷存在下，β-環(huán)糊精在室溫中的最大溶解度可以達(dá)到約60mg/ml，即β-環(huán)糊精的自身溶解度可顯著提高約3倍；虎杖苷在18mg/ml β-環(huán)糊精水溶液中的溶解度僅為約2.5mg/ml；而在pH緩沖液配制的含環(huán)糊精約60mg/ml的溶液中，虎杖苷溶解度可接近20mg/ml。
羥丙基-β-環(huán)糊精或磺丁醚-β-環(huán)糊精對虎杖苷具有近似而略強(qiáng)于β-環(huán)糊精的助溶作用。由于羥丙基-β-環(huán)糊精或磺丁醚-β-環(huán)糊精自身具有更好水溶性，因此更適合于制備高濃度的虎杖苷水溶液。由此，本發(fā)明還提供一種以羥丙基-β-環(huán)糊精或磺丁醚-β-環(huán)糊精作為助溶劑的高濃度虎杖苷水溶液。該溶液中可以含虎杖苷約5mg/ml～60mg/ml，所采用的羥丙基-β-環(huán)糊精或磺丁醚-β-環(huán)糊精的濃度可以在約25mg/ml～500mg/ml范圍內(nèi)。
室溫下，在pH約6～9范圍內(nèi)，濃度不低于25mg/ml的羥丙基-β-環(huán)糊精或磺丁醚-β-環(huán)糊精水溶液可以溶解約5mg/ml以上的虎杖苷。
室溫下，在pH 6～9范圍內(nèi)，虎杖苷的溶解度可以隨著羥丙基-β-環(huán)糊精或磺丁醚-β-環(huán)糊精濃度的提高而提高，兩者之間也沒有明顯的線性關(guān)系。以pH 9.0緩沖液配制的溶液中，當(dāng)羥丙基-β-環(huán)糊精或磺丁醚-β-環(huán)糊精為300mg/ml時(shí)，虎杖苷的溶解度可以達(dá)到約60mg/ml。
本發(fā)明還發(fā)現(xiàn)聯(lián)合采用β-環(huán)糊精和葡甲胺作為助溶劑可以對虎杖苷產(chǎn)生意想不到的協(xié)同增溶作用。舉例來說，例如，葡甲胺5mg/ml可使虎杖苷溶解度提高約3.17mg/ml，β-環(huán)糊精15mg/ml可使虎杖苷溶解度提高約2.72mg/ml，其加和為5.89mg/ml；而對應(yīng)濃度的葡甲胺、β-環(huán)糊精混合溶液中，虎杖苷的溶解度增加了7.64mg/ml，此值較簡單加和值提高約30％。顯然，葡甲胺、β-環(huán)糊精對虎杖苷的增溶作用大于兩者單獨(dú)使用時(shí)的增溶作用的簡單加和。
由此本發(fā)明進(jìn)一步提供一種以β-環(huán)糊精以及葡甲胺作為助溶劑的高濃度虎杖苷水溶液。所述溶液中虎杖苷的濃度可以為約5mg/ml～40mg/ml，β-環(huán)糊精的濃度可以在約10mg/ml～60mg/ml范圍內(nèi)，葡甲胺的濃度可以在約2.5mg/ml～45mg/ml范圍內(nèi)。
類似地，聯(lián)合采用羥丙基-β-環(huán)糊精或磺丁醚-β-環(huán)糊精和葡甲胺作為助溶劑亦可對虎杖苷產(chǎn)生協(xié)同增溶作用。因此，本發(fā)明還提供一種以羥丙基-β-環(huán)糊精或磺丁醚-β-環(huán)糊精以及葡甲胺作為助溶劑的高濃度虎杖苷水溶液。所述水溶液中虎杖苷的濃度可以為約5mg/ml～100mg/ml，所述水溶液含羥丙基-β-環(huán)糊精或磺丁醚-β-環(huán)糊精約10mg/ml～300mg/ml，含葡甲胺約為2.5mg/ml～100mg/ml。
本發(fā)明所述之高濃度虎杖苷水溶液可采用純水、生理鹽水或pH 7.0～9.0的緩沖液作為溶劑進(jìn)行配制，例如，0.9％氯化鈉水溶液、5％葡萄糖溶液、碳酸鹽緩沖液、磷酸鹽緩沖液、Tris緩沖液和Hepes緩沖液等。
由于葡甲胺的助溶作用并不等同于一般的酸堿調(diào)節(jié)劑，因此，采用葡甲胺配制的高濃度虎杖苷水溶液時(shí)，當(dāng)其pH值超過9時(shí)，可采用藥學(xué)上可接受的酸堿調(diào)節(jié)劑將其pH回調(diào)至pH 6～9，由此制備可供臨床使用，特別是可供注射給藥的高濃度虎杖苷注射液。
顯而易見，本發(fā)明之高濃度虎杖苷水溶液中，除活性成分虎杖苷以及所述助溶劑外，還可以含有藥學(xué)上可接受的其它藥用輔料，例如抗氧劑、滲透壓調(diào)節(jié)劑、pH調(diào)節(jié)劑等。其中，所述pH調(diào)節(jié)劑可以是堿金屬、堿土金屬的氫氧化物以及碳酸鈉、磷酸鈉等藥學(xué)上可接受的無機(jī)堿，鹽酸、硫酸、磷酸等藥學(xué)上可接受的無機(jī)酸，也可以是堿性氨基酸等藥學(xué)上可接受的有機(jī)堿，檸檬酸、富馬酸等藥學(xué)上可接受的有機(jī)酸。此外，所述高濃度虎杖苷水溶液中也可以含有可以與虎杖苷聯(lián)合用藥的其它活性成分。
本發(fā)明之高濃度杖苷水溶液可作為適合以液體制劑給藥的藥物制劑，顯而易見，這些制劑可以是液體口服制劑，也可以是通過注射給藥、局部給藥的液體制劑。本發(fā)明之高濃度杖苷水溶液優(yōu)選作為適合靜脈注射、肌肉注射、皮下注射等胃腸外途徑給藥的注射劑。
本發(fā)明進(jìn)一步提供本發(fā)明之高濃度虎杖苷水溶液的制備方法，該方法包括采用純水、生理鹽水或緩沖水溶液作為溶劑，以化學(xué)計(jì)量的虎杖苷、葡甲胺和/或環(huán)糊精配制本發(fā)明所述高濃度虎杖苷的混合水溶液，還可以任選含有其它藥用輔料如抗氧化劑等，該溶液經(jīng)本領(lǐng)域熟知的無菌和/或無熱源處理后灌裝于注射液容器如安瓿瓶。舉例來說，其無菌和/或無熱源處理可以是微孔超濾、熱壓滅菌等。
本發(fā)明所提供的滿足臨床應(yīng)用需要的高濃度虎杖苷溶液中可以不含有機(jī)溶劑，因此該溶液可以用于進(jìn)一步制備凍干制品，例如凍干粉針。由此，本發(fā)明進(jìn)一步提供一種在使用前以注射用水或生理鹽水等重新配制成高濃度虎杖苷水溶液的凍干制劑。
顯然，本發(fā)明之凍干制品可以是用助溶劑葡甲胺和/或環(huán)糊精配制的濃度約為5mg/ml～100mg/ml的虎杖苷水溶液經(jīng)冷凍干燥處理所得的藥用制劑，例如凍干粉針。凍干前虎杖苷水溶液可以任選添加藥學(xué)上可接受的填充劑、防凍劑、滲透壓調(diào)節(jié)劑、pH調(diào)節(jié)劑等。
容易理解，本發(fā)明之虎杖苷凍干制品的制備過程中，為使凍干前溶液容易處理，凍干前溶液之溶劑用量可以適當(dāng)高于配制前述高濃度虎杖苷溶液所需的溶劑量，即所配制的凍干前溶液中的虎杖苷濃度可以低于使用前配制水溶液中的虎杖苷濃度。一般地，以本發(fā)明之凍干制品配制的水溶液中，虎杖苷濃度可達(dá)約5mg/ml～100mg/ml；顯而易見，如有必要，本發(fā)明之凍干制品配制的水溶液可以進(jìn)行任選比例的稀釋。
本發(fā)明之虎杖苷凍干制品可以是用葡甲胺作為助溶劑配制的濃度約為5mg/ml～15mg/ml虎杖苷水溶液經(jīng)冷凍干燥所得的藥用制劑。由于所述虎杖苷水溶液中葡甲胺的濃度可以為約7.5mg/ml～60mg/ml，因此其凍干制劑中虎杖苷與葡甲胺的比例可以在約1∶1.5～1∶12之間；本發(fā)明中，該比例可進(jìn)一步優(yōu)選在1∶1.5～1∶3之間。
本發(fā)明之虎杖苷凍干制品還可以是用β-環(huán)糊精作為助溶劑配制的濃度約為5mg/ml～20mg/ml虎杖苷水溶液經(jīng)冷凍干燥處理所得的的藥用制劑。所述虎杖苷水溶液中β-環(huán)糊精的濃度可以約為20mg/ml～60mg/ml，因此其凍干制品中虎杖苷與β-環(huán)糊精的比例可以在約1∶3～1∶12之間；根據(jù)本發(fā)明，該比例還進(jìn)一步優(yōu)選在1∶3～1∶8之間。
本發(fā)明之虎杖苷凍干制品還可以是用羥丙基-β-環(huán)糊精或磺丁醚-β-環(huán)糊精作為助溶劑配制的濃度約5mg/ml～60mg/ml的虎杖苷水溶液經(jīng)冷凍干燥處理所得的藥用制劑。所述虎杖苷水溶液中β-環(huán)糊精的濃度可以約為20mg/ml～300mg/ml，因此其凍干制品中虎杖苷與葡甲胺的比例可以在約1∶4～1∶60之間；根據(jù)本發(fā)明，該比例還進(jìn)一步優(yōu)選在1∶4～1∶8之間。
本發(fā)明之虎杖苷凍干制品還可以是聯(lián)用β-環(huán)糊精和葡甲胺作為助溶劑配制的濃度約5mg/ml～40mg/ml的虎杖苷水溶液經(jīng)冷凍干燥處理所得的藥用制劑。所述凍干前虎杖苷水溶液中，β-環(huán)糊精的濃度可以為約10mg/ml～60mg/ml，葡甲胺的濃度可以為約2.5mg/ml～45mg/ml，因此其凍干制品中，虎杖苷與葡甲胺、β-環(huán)糊精的比例可以在約1∶0.5∶1.5～1∶9∶12之間；根據(jù)本發(fā)明，該比例還進(jìn)一步優(yōu)選在1∶0.5∶4～1∶2∶8之間。
本發(fā)明之虎杖苷凍干制品還可以是用羥丙基-β-環(huán)糊精或磺丁醚-β-環(huán)糊精以及葡甲胺作為助溶劑配制的濃度約5mg/ml～100mg/ml的虎杖苷水溶液經(jīng)冷凍干燥處理所得的藥用制劑。所述凍干前虎杖苷水溶液中羥丙基-β-環(huán)糊精或磺丁醚-β-環(huán)糊精濃度可以為約10mg/ml～300mg/ml，葡甲胺的濃度可以為約2.5mg/ml～100mg/ml，因此其凍干制品中，虎杖苷與葡甲胺、羥丙基-β-環(huán)糊精或磺丁醚-β-環(huán)糊精的比例可以在約1∶0.5∶2～1∶20∶60之間；根據(jù)本發(fā)明，該比例優(yōu)選在1∶0.5∶4～1∶2∶8之間。
本發(fā)明進(jìn)一步提供上述凍干粉針劑的制備方法，該方法包括，采用純水、生理鹽水或緩沖水溶液作為溶劑以化學(xué)計(jì)量的虎杖苷、葡甲胺和/或環(huán)糊精配制本發(fā)明所述高濃度虎杖苷水溶液，可以另含藥學(xué)上可接受的填充劑等藥用輔料，所得溶液經(jīng)超濾法除熱源，無菌分裝于西林瓿，冷干成型后，得到制品，即含虎杖苷的凍干混合物。適當(dāng)?shù)奶畛鋭┛梢杂欣诒景l(fā)明之虎杖苷凍干制品的凍干成型，本發(fā)明優(yōu)選的填充劑包括甘露醇、NaCl等。
本發(fā)明之含高濃度虎杖苷的凍干制品可以是分裝的無菌粉末，也可以是直接凍干成型的凍干粉針，其中優(yōu)選凍干粉針劑。本發(fā)明之含高濃度虎杖苷的凍干制品可以通過靜脈注射、靜脈滴注、肌肉注射、皮下注射以及局部給藥等胃腸外途徑給藥。本發(fā)明所述之含“高濃度”虎杖苷的凍干制品意思是指該凍干制品經(jīng)純水或生理鹽水等配制成水溶液后，該溶液中的虎杖苷濃度可達(dá)5mg/ml以上。
本發(fā)明所提供的含虎杖苷的藥物組合物可以用于制備微循環(huán)障礙相關(guān)性疾病的治療藥物。本發(fā)明之虎杖苷藥物組合物具有顯著的擴(kuò)張和疏通微血管、降低微血管內(nèi)血液黏度、抑制血細(xì)胞黏附作用，因而可以用于治療或預(yù)防休克以及其它與微循環(huán)障礙有關(guān)的疾病如心肌缺血、腦缺血、肢端循環(huán)障礙等。
中國專利申請CN 1709269A提供了一種可通過靜脈滴注提供有效治療劑量虎杖苷的藥用制劑，由于該制劑含較高濃度有機(jī)溶劑而不能用于直接注射給藥，因此，迄今尚無具有臨床實(shí)際應(yīng)用價(jià)值的、可通過直接注射給藥的虎杖苷藥用制劑。本發(fā)明提供了一種可以不含有機(jī)溶劑的高濃度虎杖苷水溶液，該水溶液還可以進(jìn)一步被制備成凍干制品。由于可以不含有機(jī)溶劑，這些虎杖苷水溶液及其凍干制劑可以用于直接注射給藥。
顯然，本發(fā)明之高濃度虎杖苷水溶液可以不含有機(jī)溶劑，但并不排斥使用有機(jī)溶劑，例如在不影響特定給藥方式及制劑成型條件下，其水溶液亦可包括少量乙醇、丙二醇等。
本發(fā)明首次提供了一種具有實(shí)際臨床應(yīng)用價(jià)值的、可以直接注射給藥的虎杖苷制劑，這不僅可以為虎杖苷的臨床應(yīng)用提供了一種更為便捷的使用途徑，又可以為進(jìn)一步拓寬虎杖苷的臨床應(yīng)用范圍提供了條件。與現(xiàn)有的技術(shù)水平相比，本發(fā)明之藥物組合物具有本質(zhì)上的進(jìn)步。
舉例來說，虎杖苷由于其顯著的微循環(huán)改善作用而可以應(yīng)用于創(chuàng)傷性休克等危重疾病的治療，直接注射給藥無疑對于這些危重疾病的搶救治療具有極為重要的意義。
動(dòng)物試驗(yàn)及溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)表明，本發(fā)明提供的虎杖苷藥物組合物安全有效、穩(wěn)定性良好，因此，該溶液具有良好的臨床應(yīng)用前景。
為了更好地理解本發(fā)明的本質(zhì)，下面結(jié)合附圖，通過對部分較佳實(shí)施方式所進(jìn)行的描述，詳細(xì)說明但不限制本發(fā)明。
附圖的簡要說明

圖1表示虎杖苷注射液對失血性休克犬平均動(dòng)脈壓的影響；圖2表示虎杖苷治療對失血性休克犬冠脈血流的影響。
具體實(shí)施例方式
以下實(shí)施例中所采用的材料包括虎杖苷，由深圳海王技術(shù)中心提供，純度99.63％，批號20050819。
葡甲胺，藥用輔料，上海富蔗化工有限公司；β-環(huán)糊精，藥用輔料，永光環(huán)糊精有限公司；羥丙基-β-環(huán)糊精，輔料第一類，西安德立生物化工有限公司；磺丁醚-β-環(huán)糊精，藥用輔料，上海富蔗化工有限公司；氟里昂F12，浙江熒光化工有限公司。注射用水，海王工業(yè)城；0.9％氯化鈉溶液，以注射用水配制；Na2HPO4-NaH2PO4緩沖液，注射用水配制。
本發(fā)明所用其它試驗(yàn)材料，如無特別說明，均為市售購買產(chǎn)品。
虎杖苷注射液的制備實(shí)施例11.處方原料 用量虎杖苷25.0g葡甲胺50.0gpH 8.0 Na2HPO4-NaH2PO4緩沖液至5.0L制成 1000支2.制法 Na2HPO4-NaH2PO4緩沖液4.8L，加入虎杖苷25.0g，葡甲胺50.0g，40℃超聲促溶，加Na2HPO4-NaH2PO4緩沖液定容至5.0L，0.2μm微孔濾膜超濾，灌封于1000支安瓿瓶中。
實(shí)施例21.處方原料 用量虎杖苷50.0gβ-環(huán)糊精 250.0gpH 9.0Na2HPO4-NaH2PO4緩沖液至 5.0L制成 1000支2.制法Na2HPO4-NaH2PO4緩沖液4.8L，加入虎杖苷50.0g，β-環(huán)糊精250.0g，40℃超聲促溶，加Na2HPO4-NaH2PO4緩沖液定容至5.0L，0.2μm微孔濾膜超濾，灌封于1000支安瓿瓶中。
實(shí)施例31.處方原料 用量虎杖苷100.0g羥丙基-β-環(huán)糊精 600.0gpH 7.5 Na2HPO4-NaH2PO4緩沖液至5.0L制成 1000支2.制法 Na2HPO4-NaH2PO4緩沖液4.8L，加入虎杖苷100.0g，羥丙基-β-環(huán)糊精600.0g，40℃超聲促溶，加Na2HPO4-NaH2PO4緩沖液定容至5.0L，0.2μm微孔濾膜超濾，灌封于1000支安瓿瓶中。
實(shí)施例41.處方原料 用量虎杖苷75.0g磺丁醚-β-環(huán)糊精 400.0gpH 8.0 Na2HPO4-NaH2PO4緩沖液至5.0L制成 1000支2.制法 Na2HPO4-NaH2PO4緩沖液4.8L，加入虎杖苷75.0g，磺丁醚-β-環(huán)糊精400.0g，40℃超聲促溶，加Na2HPO4-NaH2PO4緩沖液定容至5.0L，0.2μm微孔濾膜超濾，灌封于1000支安瓿瓶中。
實(shí)施例51.處方原料用量虎杖苷 75.0葡甲胺 75.0β-環(huán)糊精 250.0gpH 8.0 Na2HPO4-NaH2PO4緩沖液至 5.0L制成1000支2.制法 Na2HPO4-NaH2PO4緩沖液4.8L，加入虎杖苷75.0g，葡甲胺100.0g，β-環(huán)糊精200.0g，40℃超聲促溶，加Na2HPO4-NaH2PO4緩沖液定容至5.0L，0.45μm的微孔濾膜粗濾，續(xù)濾液過0.22μm的微孔濾膜，配備1萬截留分子量的PES膜的板框式超濾器除熱原，棕色瓶充氮?dú)夤喾狻?br> 實(shí)施例61.處方原料用量虎杖苷 400.0g葡甲胺 400.0g羥丙基-β-環(huán)糊精1500.0gpH 7.5 Na2HPO4-NaH2PO4緩沖液至 5.0L制成1000支2.制法 Na2HPO4-NaH2PO4緩沖液4.8L，加入虎杖苷400.0g，葡甲胺400.0g，羥丙基-β-環(huán)糊精1250.0g，40℃超聲促溶，加Na2HPO4-NaH2PO4緩沖液定容至5.0L，0.45μm的微孔濾膜粗濾，續(xù)濾液過0.22μm的微孔濾膜，1萬截留分子量的PES膜超濾除熱原，棕色瓶充氮?dú)夤喾狻?br> 虎杖苷凍干粉針的制備實(shí)施例71.處方原料用量虎杖苷 25.0g葡甲胺 50.0g甘露醇 50.0gpH 8.0 Na2HPO4-NaH2PO4緩沖液至 5.0L制成1000支2.制法 凍干前溶液配制Na2HPO4-NaH2PO4緩沖液4.8L，加入虎杖苷25.0g，葡甲胺50.0g，甘露醇50.0g，40℃超聲促溶，加Na2HPO4-NaH2PO4緩沖液定容至5.0L，0.2μm微孔濾膜超濾，分裝到1000支凍干專用西林瓶中。
制劑成型西林瓶放入凍干箱后板溫降至-35℃，品溫降至-30℃冷凍三小時(shí)，冷凝溫度達(dá)-40℃，抽真空，板溫緩慢升至40℃，制品溫度隨之升高、干燥，凍干機(jī)開箱，西林瓶壓塞，軋蓋。
實(shí)施例81.處方原料用量虎杖苷 75.0gβ-環(huán)糊精 400.0g甘露醇 100.0gpH 9.0 Na2HPO4-NaH2PO4緩沖液至 10.0L制成1000支2.制法 凍干前溶液配制Na2HPO4-NaH2PO4緩沖液9.5L，加入虎杖苷75.0g，β-環(huán)糊精400.0g，甘露醇100.0g，40℃超聲促溶，加Na2HPO4-NaH2PO4緩沖液定容至10.0L，0.2μm微孔濾膜超濾，分裝到1000支凍干專用西林瓶中。
制劑成型西林瓶放入凍干箱后板溫降至-35℃，品溫降至-30℃冷凍3小時(shí)，冷凝溫度達(dá)-40℃，抽真空，板溫緩慢升至40℃，制品溫度隨之升高、干燥，凍干機(jī)開箱，西林瓶壓塞，軋蓋。
實(shí)施例91.處方原料 用量虎杖苷75.0g羥丙基-β-環(huán)糊精 500.0g甘露醇50.0gpH 7.5 Na2HPO4-NaH2PO4緩沖液至5.0L制成 1000支2.制法 凍干前溶液配制Na2HPO4-NaH2PO4緩沖液4.8L，加入虎杖苷750.0g，羥丙基-β-環(huán)糊精500.0g，甘露醇50.0g，40℃超聲促溶，加Na2HPO4-NaH2PO4緩沖液定容至5.0L，0.2μm微孔濾膜超濾后分裝到1000支凍干專用西林瓶中。
制劑成型西林瓶放入凍干箱后板溫降至-35℃，品溫降至-30℃冷凍3小時(shí)，冷凝溫度達(dá)-40℃，抽真空，板溫緩慢升至40℃，制品溫度隨之升高、干燥，凍干機(jī)開箱，西林瓶壓塞，軋蓋。
實(shí)施例101.處方原料用量虎杖苷 100.0g磺丁醚-β-環(huán)糊精800.0g甘露醇 100.0gpH 8.0 Na2HPO4-NaH2PO4緩沖液至 10.0L制成1000支2.制法 凍干前溶液配制Na2HPO4-NaH2PO4緩沖液9.5L，加入虎杖苷50.0g，磺丁醚-β-環(huán)糊精400.0g，甘露醇100.0g，40℃超聲促溶，加Na2HPO4-NaH2PO4緩沖液定容至10.0L，0.2μm微孔濾膜超濾后分裝到1000支凍干專用西林瓶中。
制劑成型西林瓶放入凍干箱后板溫降至-35℃，品溫降至-30℃冷凍3小時(shí)，冷凝溫度達(dá)-40℃，抽真空，板溫緩慢升至40℃，制品溫度隨之升高、干燥，凍干機(jī)開箱，西林瓶壓塞，軋蓋。
實(shí)施例111.處方原料用量虎杖苷 50.0g葡甲胺 50.0gβ-環(huán)糊精 200.0g甘露醇 50.0gpH 8.5 Na2HPO4-NaH2PO4緩沖液至 5.0L制成1000支2.制法 凍干前溶液配制Na2HPO4-NaH2PO4緩沖液4.5L，加入虎杖苷50.0g，葡甲胺50.0g，β-環(huán)糊精200.0g，甘露醇100.0g，40℃超聲促溶，加Na2HPO4-NaH2PO4緩沖液定容至5.0L，0.2μm微孔濾膜超濾后分裝到1000支凍干專用西林瓶中。
制劑成型西林瓶放入凍干箱后板溫降至-50℃，品溫降至-45℃冷凍3小時(shí)，冷凝溫度達(dá)-55℃，抽真空，板溫緩慢升至-20℃，之后再冷凍、再升溫，如此3次后，再使板溫緩慢升至40℃，制品由此干燥成型。凍干機(jī)開箱，西林瓶壓塞，軋蓋。
實(shí)施例121.處方原料用量虎杖苷 300.0g葡甲胺 300.0g磺丁醚-β-環(huán)糊精1500.0g甘露醇 50.0gpH 7.5 Na2HPO4-NaH2PO4緩沖液至 5.0L制成1000支2.制法 凍干前溶液配制Na2HPO4-NaH2PO4緩沖液4.5L，加入虎杖苷300.0g，葡甲胺300.0g，磺丁醚-β-環(huán)糊精1000.0g，甘露醇50.0g，40℃超聲促溶，加Na2HPO4-NaH2PO4緩沖液定容至5.0L，0.45μm的微孔濾膜粗濾，續(xù)濾液過0.22μm的微孔濾膜，1萬截留分子量的PES膜超濾除熱原后分裝到1000支凍干專用西林瓶中。
制劑成型西林瓶放入凍干箱后板溫降至-50℃，品溫降至-45℃冷凍3小時(shí)，冷凝溫度達(dá)-55℃，抽真空，板溫緩慢升至-20℃，之后再冷凍、再升溫，如此3次后，再使板溫緩慢升至40℃，制品由此干燥成型。凍干機(jī)開箱，西林瓶壓塞，軋蓋。
虎杖苷口服溶液的制備實(shí)施例131.處方原料用量虎杖苷 100.0g葡甲胺 100.0gβ-環(huán)糊精 450.0gpH 8.5 Na2HPO4-NaH2PO4緩沖液至 10.0L制成1000瓶2.制法 Na2HPO4-NaH2PO4緩沖液9.5L，加入虎杖苷100.0g，葡甲胺100.0g，β-環(huán)糊精450.0g，40℃超聲促溶，加Na2HPO4-NaH2PO4緩沖液定容至10.0L，0.45μm微孔濾膜超濾后分裝到1000支口服液玻璃瓶中。
虎杖苷噴霧劑的制備實(shí)施例141.處方原料用量虎杖苷 500.0g葡甲胺 500.0gβ-環(huán)糊精 3000.0gpH 8.0 Na2HPO4-NaH2PO4緩沖液至 20.0L制成1000支2.制法 Na2HPO4-NaH2PO4緩沖液19L，加入虎杖苷500g，葡甲胺500g，β-環(huán)糊精3000g，40℃超聲促溶，加Na2HPO4-NaH2PO4緩沖液定容至20.0L，0.45μm微孔濾膜粗濾，續(xù)以0.22μm的微孔濾膜過濾后，濾液灌于超聲波霧化器內(nèi)即得虎杖苷噴霧劑。霧粒直徑大部分在5μm以下，可吸入呼吸支氣管和肺泡內(nèi)。
虎杖苷氣霧劑的制備實(shí)施例151.處方原料 用量虎杖苷100.0g羥丙基-β-環(huán)糊精 600.0gpH 7.5 Na2HPO4-NaH2PO43.5L氟利昂F12 至 5000.0g制成 1000瓶2.制法 Na2HPO4-NaH2PO4緩沖液3.5L，加入虎杖苷100g，β-環(huán)糊精600g，40℃超聲促溶，0.45μm微孔濾膜粗濾，濾液續(xù)以0.22μm的微孔濾膜過濾，濾液分劑量灌裝，封接劑量閥門系統(tǒng)，然后再加壓注入F12，搖勻，即得虎杖苷氣霧劑。
葡甲胺及環(huán)糊精對虎杖苷的助溶作用實(shí)施例16葡甲胺對虎杖苷的助溶作用配制濃度為0、2.5、5、10、20、40、80mg/ml的葡甲胺溶液各10ml，每份溶液中分別加入虎杖苷至50ml，40℃超聲促溶30min后，室溫放置3hr，0.20μm微孔濾膜過濾，HPLC法檢測濾液中虎杖苷濃度，檢測結(jié)果如表1所示。
表1 虎杖苷在不同濃度葡甲胺溶液中的飽和溶解度(mg/ml)

當(dāng)葡甲胺濃度高于10mg/ml時(shí)，所配制的虎杖苷飽和溶液pH值可在9～12之間，但是，虎杖苷在葡甲胺溶液中的溶解度比在相同pH值下的NaOH溶液中的溶解度高數(shù)十倍不等(參見中國專利申請CN 1709269A)。
此外，配制濃度7.5mg/ml的葡甲胺溶液，以上述方法制備虎杖苷飽和溶液，經(jīng)檢測，該溶液中虎杖苷溶解度約為5.12mg/ml，其pH值約8.7；以pH7.5磷酸緩沖液配制濃度60mg/ml的葡甲胺溶液，以上述方法制備虎杖苷飽和溶液，經(jīng)檢測，該溶液中虎杖苷溶解度約為14.83mg/ml，其pH值約8.94。
顯然(1)葡甲胺對虎杖苷的增溶作用不能歸因于pH調(diào)節(jié)作用；(2)采用7.5～60mg/ml的葡甲胺溶液可以配制pH在9以下而虎杖苷濃度在5～15mg/ml范圍內(nèi)的虎杖苷水溶液。
實(shí)施例17虎杖苷在β-環(huán)糊精溶液中的溶解度分別取β-環(huán)糊精0、25、50、100、200、300、450mg，加入虎杖苷100mg，加蒸餾水10ml，40℃超聲促溶30min后，室溫放置3hr，0.20μm微孔濾膜過濾，HPLC法檢測濾液中虎杖苷濃度，檢測結(jié)果如表2所示。
表2 虎杖苷在不同濃度β-環(huán)糊精溶液中的飽和溶解度(mg/ml)

結(jié)果表明，當(dāng)溶液中β-環(huán)糊精濃度高于30mg/ml時(shí)，虎杖苷溶解度即可超過5mg/ml。鑒于文獻(xiàn)及實(shí)驗(yàn)室實(shí)測結(jié)果均表明，β-環(huán)糊精在室溫下的純水中的溶解度約為18mg/ml，因此上述操作中，高濃度β-環(huán)糊精溶液配制中，所加入的β-環(huán)糊精可能不完全溶解，也就是說，濾液中β-環(huán)糊精可能達(dá)不到表2所列的β-環(huán)糊精計(jì)算濃度；此外，檢測上述虎杖苷飽和溶液之pH值，結(jié)果其pH均低于7。為檢測虎杖苷存在下的β-環(huán)糊精實(shí)際溶解性以及不同pH值下β-環(huán)糊精對虎杖苷溶解度的影響，試驗(yàn)進(jìn)一步采用pH 9.0磷酸緩沖液配制下列溶液取β-環(huán)糊精200，400，600mg，分別加入虎杖苷50，100，200mg，加磷酸緩沖液10ml，40℃超聲促溶后，室溫放置3hr。經(jīng)檢查，所得溶液未經(jīng)過濾均為澄明溶液，說明β-環(huán)糊精和虎杖苷在配制溶液均可完全溶解，其中β-環(huán)糊精溶解度可在60mg/ml以上。
由上述結(jié)果可見，(1)虎杖苷水溶性可隨β-環(huán)糊精存在量的增加而提高，但兩者濃度沒有明顯的線性關(guān)系；(2)在虎杖苷存在下，β-環(huán)糊精的自身溶解度也可以大幅度升高，這構(gòu)成了利用β-環(huán)糊精制備具有臨床應(yīng)用價(jià)值的高濃度虎杖苷溶液的基礎(chǔ)條件；(3)采用濃度20～60mg/ml的β-環(huán)糊精可以制備濃度可達(dá)5～20mg/ml的pH 9.0以內(nèi)的虎杖苷水溶液。
實(shí)施例18虎杖苷在羥丙基-β-環(huán)糊精溶液中的溶解度分別取羥丙基-β-環(huán)糊精0、25、50、100、200、300、400、500、700、900、1200、1500、2000、3000、5000mg，加入虎杖苷至過飽和，加蒸餾水10ml，40℃超聲促溶30min后，室溫放置3hr，0.20μm微孔濾膜過濾，HPLC法檢測濾液中虎杖苷濃度，檢測結(jié)果如表3所示。
表3 虎杖苷在不同濃度羥丙基-β-環(huán)糊精中的飽和溶解度(mg/ml)


結(jié)果表明，羥丙基-β-環(huán)糊精可產(chǎn)生近似于β-環(huán)糊精的虎杖苷增溶活性，由于其自身水溶性較好而可以形成更高濃度的虎杖苷水溶液?；⒄溶账苄钥呻S羥丙基-β-環(huán)糊精存在量的增加而提高，但兩者濃度增長亦無明顯的線性關(guān)系。當(dāng)羥丙基-β-環(huán)糊精濃度至30mg/ml時(shí)，虎杖苷溶解度即可超過6mg/ml；當(dāng)羥丙基-β-環(huán)糊精濃度至300mg/ml時(shí)，虎杖苷溶解度即可超過50mg/ml。試驗(yàn)進(jìn)一步采用pH 9.0磷酸緩沖液配制下列兩種溶液取羥丙基-β-環(huán)糊精200、4500mg，分別加入虎杖苷50、600mg，加磷酸緩沖液10ml，40℃超聲促溶后，室溫放置3hr。經(jīng)檢查，所得溶液未經(jīng)過濾均為澄明溶液，說明羥丙基-β-環(huán)糊精和虎杖苷在配制溶液均可完全溶解。試驗(yàn)表明，可以采用低至20mg/ml的羥丙基-β-環(huán)糊精溶液配制不低于5mg/ml的虎杖苷溶液；在pH 9.0以內(nèi)可以采用羥丙基-β-環(huán)糊精溶液配制濃度達(dá)60mg/ml的虎杖苷溶液。試驗(yàn)還表明，磺丁醚-β-環(huán)糊精可對虎杖苷產(chǎn)生類似的助溶作用。
實(shí)施例19葡甲胺和β-環(huán)糊精對虎杖苷的協(xié)同增溶作用分別取葡甲胺0、50、100和150mg，分別加入0、150、300和450mg，加入虎杖苷200mg，加蒸餾水10ml，40℃超聲促溶30min后，室溫放置3hr，0.20μm微孔濾膜過濾，HPLC法檢測濾液中虎杖苷濃度，檢測結(jié)果如表4所示。
表4 虎杖苷在不同濃度葡甲胺、β-環(huán)糊精溶液中的溶解度(mg/ml)


顯然，無葡甲胺存在時(shí)，15、30和45mg/ml的β-環(huán)糊精可以使虎杖苷溶解度分別提高2.72、5.48和9.48mg/ml；無β-環(huán)糊精存在時(shí)，5、10和15mg/ml葡甲胺可以使虎杖苷溶解度分別提高3.17、5.44和6.99mg/ml。顯然，不同濃度葡甲胺和β-環(huán)糊精共同存在時(shí)，其對虎杖苷的增溶作用均高于對應(yīng)濃度下單獨(dú)存在的葡甲胺和β-環(huán)糊精對虎杖苷增溶作用的簡單加和。例如，葡甲胺5mg/ml可使虎杖苷溶解度提高約3.17mg/ml，β-環(huán)糊精15mg/ml可使虎杖苷溶解度提高約2.72mg/ml，其加和為5.89mg/ml；而對應(yīng)濃度的葡甲胺、β-環(huán)糊精混合溶液中，虎杖苷的溶解度增加了7.64mg/ml，此值較簡單加和值提高約30％。類似地，羥丙基-β-環(huán)糊精、磺丁醚-β-環(huán)糊精與葡甲胺可對虎杖苷產(chǎn)生更強(qiáng)的協(xié)同增溶作用。
此外，取450mg葡甲胺和600mg β-環(huán)糊精，加400mg虎杖苷后，加10mlpH 8.5磷酸緩沖液溶解，可得澄明的虎杖苷水溶液，說明，聯(lián)用葡甲胺和β-環(huán)糊精可以配制濃度高達(dá)40mg/ml的虎杖苷水溶液(pH低于9)。取1g葡甲胺和3g羥丙基-β-環(huán)糊精，加1g虎杖苷后，再加10ml pH 8.5磷酸緩沖液溶解，亦可獲得澄明的虎杖苷水溶液，說明，聯(lián)用葡甲胺和羥丙基-β-環(huán)糊精可以配制濃度高達(dá)100mg/ml的虎杖苷水溶液(pH低于9)。
虎杖苷藥物組合物的安全性、穩(wěn)定性研究實(shí)施例20虎杖苷注射液及凍干粉針之儲存穩(wěn)定性考察1.試驗(yàn)樣品實(shí)施例1～12制備的虎杖苷注射液及凍干粉針。
2.試驗(yàn)方法存在條件供試樣品分別避光儲存于30℃恒溫箱和4℃冰箱。
澄明度檢查檢查供試樣品于儲存前和儲存三個(gè)月后的溶液澄明度，其中，凍干粉針以設(shè)計(jì)容量(5ml或10ml)生理鹽水稀釋后檢查。
含量檢測高效液相色譜法。色譜條件Agilent 1100高效液相色譜儀；Agilent DAD檢測器；大連依利特YWG C18 10μm4.6×250mm色譜柱；流動(dòng)相為甲醇-6％醋酸溶液(25∶75)；流速為1.0ml/min；檢測波長為306nm；柱溫為30℃；進(jìn)樣量為20μl。
3.結(jié)果考察結(jié)果見表5。結(jié)果表明，虎杖苷注射液以及凍干粉針復(fù)溶的水溶液的澄明度檢查均合格；受試樣品在30℃或4℃下儲存3個(gè)月，其有效成分含量可保持穩(wěn)定(變化不超過±10％)。
表4 虎杖苷注射液及凍干粉針的儲存穩(wěn)定性(mg/ml)

實(shí)施例20虎杖苷注射液及凍干粉針之溶血、過敏及血管刺激性檢查1.供試品樣品1，實(shí)施例3之虎杖苷注射液。
樣品2，實(shí)施例11虎杖苷凍干粉針。臨用前以5ml生理鹽水溶解。
2.方法溶血試驗(yàn)新西蘭兔耳靜脈采血，經(jīng)去纖維蛋白原，生理鹽洗滌后，以生理鹽水稀釋成2％的混懸液供試驗(yàn)用。
分別取虎杖苷注射液或凍干粉針復(fù)溶的水溶液0(對照)、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5ml后，分別加生理鹽水至2.5ml，混勻后加上述2％血細(xì)胞混懸液，輕搖混勻后，置27℃室溫中，觀察、記錄30、60、180min的溶血結(jié)果。
全身過敏試驗(yàn)健康豚鼠24只(250-350g)，隨機(jī)分組，每組6只。各組動(dòng)物隔日分別腹腔注射生理鹽水(陰性對照)、虎杖苷注射液或凍干粉針復(fù)溶的水溶液及雞蛋清(陽性對照)1ml/只，共3次。首次注射后的第14天，每組取3只再次分別對照溶液或供試品溶液2.5ml/只，觀察注射后試驗(yàn)動(dòng)物的反應(yīng)情況。各組余下3只豚鼠于首次注射后的第21天同法分別注射對照溶液或供試品溶液2.5ml/只并觀察動(dòng)物反應(yīng)情況。
血管刺激性試驗(yàn)新西蘭兔6只，♀♂各半，按5mg/kg耳緣靜脈注射虎杖苷注射液或凍干粉針復(fù)溶的水溶液，每天一次，連續(xù)3次，觀察注射后血管及其周圍組織的變化情況，末次注射后30分鐘，頸動(dòng)脈放血處死動(dòng)物，剪下兔耳注射部位固定，對側(cè)兔耳同一部位剪下固定作為正常對照，病理切片檢查兔耳血管病理變化情況。
2.結(jié)果溶血試驗(yàn)虎杖苷注射液及凍干粉針復(fù)溶的水溶液在30、60、180min均未發(fā)生溶血現(xiàn)象，出現(xiàn)紅細(xì)胞凝集反應(yīng)。
全身過敏試驗(yàn)注射虎杖苷注射液及凍干粉針復(fù)溶的水溶液末次給藥后，與陰性對照一樣，僅少數(shù)動(dòng)物出現(xiàn)輕微抓鼻反應(yīng)，未見顫抖、呼吸困難、痙攣等過敏癥狀，陽性對照組則見試驗(yàn)動(dòng)物因強(qiáng)烈過敏反應(yīng)而死亡。
血管刺激試驗(yàn)兔耳靜脈注射虎杖苷注射液及凍干粉針復(fù)溶的水溶液后均未引起靜脈擴(kuò)張、充血，周圍組織未見水腫。病理檢查未見兔耳皮膚破壞或皮下組織充血、水腫，耳緣靜脈未見擴(kuò)張、充血，血管內(nèi)皮細(xì)胞未見改變，血管壁未見附壁血栓及炎性細(xì)胞浸潤，血管周圍未見出血。
結(jié)論(1)供試的虎杖苷注射液及凍干粉針沒有體外溶血作用和凝集反應(yīng)。(2)供試的虎杖苷注射液及凍干粉針兔耳血管無刺激作用。(3)供試的虎杖苷注射液及凍干粉針不引起全身過敏反應(yīng)。
虎杖苷藥物組合物的藥效學(xué)研究實(shí)施例21虎杖苷注射液對失血性休克犬心肌血流量的的影響供試品實(shí)施例5之虎杖苷注射液，深圳海王藥業(yè)有限公司。
動(dòng)物Beagle犬，體重8～12kg。合格證號001321，許可證號SYXK(粵)2003-0007。第一軍醫(yī)大學(xué)動(dòng)物所。
試驗(yàn)方法動(dòng)物用3％戊巴比妥鈉麻醉后，仰臥固定于大動(dòng)物手術(shù)臺。行氣管插管，呼吸機(jī)(E100i型，美國Newport Ven公司產(chǎn)品)維持呼吸(15次/min、300～400ml/min)。雙側(cè)股動(dòng)脈插管，分別用于記錄血壓(美國MarquetteEagle4000生理記錄儀)和放血，行股靜脈插管用于給藥。左側(cè)2～4肋間開胸，暴露心臟，剪開心包膜，超聲血流量計(jì)(T206型，美國transonic systems公司產(chǎn)品)記錄冠脈前降支血流量。通過一側(cè)股動(dòng)脈插管放血并使之流入裝有肝素生理鹽水的無菌輸液瓶內(nèi)，調(diào)節(jié)放血量，使平均動(dòng)脈壓在15min內(nèi)降至40mmHg，使平均動(dòng)脈壓維持在該水平120min，然后給藥，虎杖苷注射液混溶于容量為1/3失血量的生理鹽水并在120min內(nèi)由股靜脈輸入體內(nèi)，給藥劑量5.0mg/kg。記錄給藥前后的冠脈血流量。試驗(yàn)采用生理鹽水作為對照。以正常血流量為100％對血流量數(shù)據(jù)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化處理，采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件包的多因素方差分析(ANOVA)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
試驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)中，犬失血量約占全血量的60％。試驗(yàn)結(jié)果顯示，犬失血性休克期間，冠脈血流量明顯減少。給予虎杖苷注射液進(jìn)行復(fù)蘇搶救后，犬平均動(dòng)脈壓顯著升高(見圖1)，給藥后冠脈血流量得到明顯恢復(fù)，給藥開始60min后冠脈血流達(dá)到了正常的62.92±8.76％；在隨后的觀察時(shí)間內(nèi)，虎杖苷組的冠脈血流量維持在較高水平，給藥開始后120min時(shí)甚至達(dá)到正常水平(正常的101.96±15.87％)。虎杖苷組增加冠脈血流量的程度從給藥60分鐘開始，各時(shí)間點(diǎn)均顯著高于生理鹽水對照組(見表5，圖2)。
表5 虎杖苷治療對失血性休克犬心臟冠脈血流量的影響(％，x±s)

自身比較*與正常時(shí)相比，p＜0.05；^與休克120’相比，p＜0.05。
組間比較#與對照組相比，p＜0.05。
權(quán)利要求
1.一種含高濃度虎杖苷的藥物組合物，所述藥物組合物含有藥用活性成分虎杖苷及助溶劑葡甲胺和/或環(huán)糊精，所述藥物組合物為水溶液或使用前配制成水溶液的凍干制品，在所述水溶液以及用凍干制品配制的水溶液中虎杖苷濃度能夠達(dá)到5mg/ml～100mg/ml。
2.權(quán)利要求1所述的藥物組合物，虎杖苷與助溶劑葡甲胺和/或環(huán)糊精的質(zhì)量比為1∶0.5∶1.5～1∶20∶100。
3.權(quán)利要求2所述的藥物組合物，其特征在于所述組合物為虎杖苷水溶液。
4.權(quán)利要求3所述藥物組合物，其特征在于所述虎杖苷水溶液中含有虎杖苷5mg/ml～15mg/ml以及葡甲胺7.5mg/ml～60mg/ml。
5.權(quán)利要求3所述藥物組合物，其特征在于所述虎杖苷水溶液中含有虎杖苷5mg/ml～20mg/ml以及β-環(huán)糊精20mg/ml～60mg/ml。
6.權(quán)利要求3所述藥物組合物，其特征在于所述虎杖苷水溶液中含有虎杖苷5mg/ml～60mg/ml以及羥丙基β-環(huán)糊精或磺丁醚-β-環(huán)糊精20mg/ml～500mg/ml。
7.權(quán)利要求3所述藥物組合物，其特征在于所述虎杖苷水溶液中含有虎杖苷5mg/ml～40mg/ml、β-環(huán)糊精10mg/ml～60mg/ml以及葡甲胺2.5mg/ml～45mg/ml。
8.權(quán)利要求3所述藥物組合物，其特征在于所述虎杖苷水溶液中含有虎杖苷5mg/ml～100mg/ml、羥丙基β-環(huán)糊精或磺丁醚-β-環(huán)糊精10mg/ml～300mg/ml以及葡甲胺2.5mg/ml～100mg/ml。
9.權(quán)利要求3～8所述藥物組合物，其特征在于所述虎杖苷水溶液采用注射用水、生理鹽水或pH 7.0～9.0的緩沖液作為溶劑配制。
10.權(quán)利要求3所述藥物組合物，其特征在于所述虎杖苷水溶液是虎杖苷注射液。
11.權(quán)利要求3所述藥物組合物的制備方法采用注射用水、生理鹽水或pH 7.0～9.0的緩沖液配制所需濃度的助溶劑葡甲胺和/或環(huán)糊精及所述高濃度虎杖苷的水溶液，所得虎杖苷水溶液經(jīng)無菌和/或無熱源處理后灌裝于安瓿瓶。
12.權(quán)利要求2所述的藥物組合物，其特征在于所述的組合物為凍干藥物制劑，該凍干藥物制劑以注射用水或注射用生理鹽水配制成水溶液后，其水溶液中的虎杖苷的濃度能夠達(dá)到5mg/ml～100mg/ml。
13.權(quán)利要求12所述藥物組合物，其特征在于所述制劑中含有活性成分虎杖苷、助溶劑葡甲胺，虎杖苷與助溶劑葡甲胺的質(zhì)量比為1∶1.5～1∶12；所述凍干藥物制劑以注射用水或注射用生理鹽水配制成水溶液后，其虎杖苷濃度為5mg/ml～15mg/ml。
14.權(quán)利要求13所述的藥物組合物，其特征在于其中虎杖苷與葡甲胺的質(zhì)量比為1∶1.5～1∶3。
15.權(quán)利要求12所述藥物組合物，其特征在于所述凍干藥物制劑中含有虎杖苷、助溶劑β-環(huán)糊精，虎杖苷與助溶劑β-環(huán)糊精的質(zhì)量比為1∶3～1∶12；所述凍干藥物制劑以注射用水或注射用生理鹽水配制成水溶液后，其虎杖苷濃度可達(dá)5mg/ml～20mg/ml。
16.權(quán)利要求15所述藥物組合物，其特征在于其中虎杖苷與助溶劑β-環(huán)糊精的質(zhì)量比為1∶3～1∶8。
17.權(quán)利要求12所述藥物組合物，其特征在于所述凍干藥物制劑中含有虎杖苷、羥丙基-β-環(huán)糊精或磺丁醚-β-環(huán)糊精，虎杖苷與羥丙基-β-環(huán)糊精或磺丁醚-β-環(huán)糊精的質(zhì)量比為1∶4～1∶60；該凍干藥物制劑以注射用水或注射用生理鹽水配制成水溶液后，其虎杖苷濃度可達(dá)5mg/ml～60mg/ml。
18.權(quán)利要求17所述藥物組合物，其特征在于其中虎杖苷與羥丙基-β-環(huán)糊精或磺丁醚-β-環(huán)糊精的質(zhì)量比為1∶4～1∶8。
19.權(quán)利要求12所述藥物組合物，其特征在于所述凍干制品中含有虎杖苷、助溶劑β-環(huán)糊精以及葡甲胺，虎杖苷與葡甲胺、β-環(huán)糊精的質(zhì)量比為1∶0.5∶1.5～1∶9∶12；該凍干藥物制劑以注射用水或注射用生理鹽水配制成水溶液后，其虎杖苷濃度可達(dá)5mg/ml～40mg/ml。
20.權(quán)利要求19所述藥物組合物，其特征在于其中虎杖苷與助溶劑葡甲胺、β-環(huán)糊精的質(zhì)量比為1∶0.5∶3～1∶2∶8。
21.權(quán)利要求12所述藥物組合物，其特征在于所述凍干藥物制劑中含有虎杖苷、羥丙基-β-環(huán)糊精或磺丁醚-β-環(huán)糊精以及葡甲胺，虎杖苷與葡甲胺、羥丙基-β-環(huán)糊精或磺丁醚-β-環(huán)糊精的質(zhì)量比在1∶0.5∶2～1∶20∶60之間；該凍干藥物制劑以注射用水或注射用生理鹽水配制成水溶液后，其虎杖苷的濃度可達(dá)5mg/ml～100mg/ml。
22.權(quán)利要求21所述藥物組合物，其特征在于其中虎杖苷與葡甲胺、羥丙基-β-環(huán)糊精或磺丁醚-β-環(huán)糊精的質(zhì)量比為1∶0.5∶4～1∶2∶8。
23.權(quán)利要求12～22所述藥物組合物，其特征在于所述凍干藥物制劑是注射用凍干粉針。
24.權(quán)利要求12所述藥物組合物，其特征在于所述凍干藥物制劑中進(jìn)一步含有藥學(xué)上可接受的填充劑。
25.權(quán)利要求12所述藥物組合物的制備方法采用注射用水、生理鹽水或pH 7.0～9.0的緩沖液配制所需濃度的助溶劑葡甲胺和/或環(huán)糊精及所述高濃度虎杖苷的水溶液，其中任選加入藥學(xué)上可接受的填充劑，所得溶液經(jīng)超濾法除熱源后，無菌分裝于西林瓿，冷干成型后，封瓶。
26.權(quán)利要求1所述藥物組合物，其特征在于其水溶液以及用凍干制品配制的水溶液可以通過口服或靜脈注射、靜脈滴注、肌肉注射、皮下注射以及局部給藥等胃腸外途徑給藥。
27.權(quán)利要求1所述藥物組合物在制備預(yù)防和/或治療心血管疾病的藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種含高濃度虎杖苷的藥物組合物及其制備方法，該組合物含有虎杖苷、葡甲胺和/或環(huán)糊精，以及其它藥學(xué)上可接受的輔料和載體。所述組合物為虎杖苷水溶液，或者是使用前配制成水溶液的凍干制品；在所述水溶液中，虎杖苷的濃度可不低于5mg/ml。
文檔編號A61P9/00GK101062044SQ20061007617
公開日2007年10月31日 申請日期2006年4月28日 優(yōu)先權(quán)日2006年4月28日
發(fā)明者姚光輝, 趙金華, 康暉, 曲偉, 李勇, 張麗娟, 李靖, 于琳, 趙克森 申請人:深圳海王藥業(yè)有限公司