專利名稱：亞麻根提取物在制備預(yù)防和/或治療肝炎藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及亞麻根提取物，這種提取物的制備方法，含有這種提取物的藥物組合物以及這種提取在制備預(yù)防和/或治療肝炎藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
亞麻(Linum usitatissimum L.)為亞麻科亞麻屬植物，廣布全國各地。該植物為一年生草本，莖光潔平滑，株高0.75～1.20m。頂端有分枝，呈傘形；莖桿橫截面呈圓形，呈灰綠色；亞麻葉灰綠色，互生，邊緣呈線狀披針形，葉密集、表面平坦，長2～3.5cm，寬2～4cm，葉基部漸窄，呈藍綠色；花散生在花梗頂端，花梗直立，長2～7mm，總狀花序或開放聚傘花序；萼片5枚，狹長或長卵形，長5～7mm，全緣，無蜜腺，邊緣呈鋸齒狀，總萼片長為花瓣的1/2；花瓣藍色、白色或淡紅色，長約1cm以上，呈倒卵形；柱頭呈線形，向下延伸至花柱的內(nèi)側(cè)；果實為具有5室的蒴果，卵球形，7～10mm長，由宿存粵包圍，果皮不分裂；每個果實內(nèi)種子不超過10粒，黃色或淺褐色到深褐色，有光澤，大小不等，千粒重3～12g。種子扁平，卵形，一端圓滑，另一端尖銳。
亞麻既是一種優(yōu)良的紡織和油料作物，又具有多種藥用功能。在紡織工業(yè)中，雖然與棉花、羊毛相比，亞麻纖維柔軟性和彈性不足，但強力高，在麻類作物中強力僅次于苧麻。用特殊的紡織技術(shù)可將亞麻纖維紡成高支紗并織成精美的織物。亞麻種子含有20％-30％的蛋白質(zhì)，用它可以榨出亞麻油。80％的亞麻油用于生產(chǎn)油漆。亞麻籽榨出油后，殘留物可壓制成亞麻餅，亞麻餅仍含3％-6％的亞麻油。因為蛋白質(zhì)含量高，亞麻餅被認為是一種極好的牲畜飼料。在藥用方面，主要使用其種子，具有潤腸通便、養(yǎng)血祛風(fēng)之功效，用于治療腸燥便秘、過敏性皮炎、皮膚瘙癢等。
盡管文獻記載亞麻根也可藥用，但是，目前綜合利用亞麻的實際情況仍然是將亞麻根作為廢棄物處理。有關(guān)的科學(xué)研究，特別是有關(guān)亞麻根的具體藥用價值至今未見任何正式研究報道。

發(fā)明內(nèi)容
為了充分利用亞麻的資源，發(fā)明人對亞麻根進行了系統(tǒng)研究，通過廣泛的藥理篩選，證明了亞麻根對急性肝損傷有明顯保護作用。
本發(fā)明要解決的一個技術(shù)問題是提供一種亞麻根提取物。
本發(fā)明要解決的另一個技術(shù)問題是提供這種亞麻根提取物的制備方法。
本發(fā)明要解決的再一個技術(shù)問題是提供含有這種亞麻根提取物的藥物組合物。
本發(fā)明要解決的又一個技術(shù)問題是提供含有這種亞麻根提取物在制備預(yù)防和/或治療肝炎藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明亞麻根提取物的制備方法，包括如下步驟(A)以亞麻(Linum usitatissimum L.)的植株地下部分作為原料，使用溶劑提取，回收溶劑得粗浸膏；(B)粗浸膏用水溶解，然后用低級性的有機溶劑萃取，萃取完成后棄去低級性有機溶劑部分；(C)剩余的水溶液再用有機溶劑萃取，保留有機溶劑層，棄去水層；(D)有機溶劑萃取液先洗滌再濃縮得亞麻根提取物。
具體而言，取亞麻(Linum usitatissimum L.)的植株地下部分作為原料，原料適度干燥。
為提高提取的效率可以適當(dāng)粉碎，以利于增大與溶劑的接觸面積，提高效率。
原藥材的提取溶劑可以使用水和/或有機溶劑及它們的混合物。優(yōu)選的有機溶劑包括丙酮、醇類。優(yōu)選的醇類包括甲醇、乙醇、異丙醇、丁醇等。水和有機溶劑混合物優(yōu)選是水與醇類的混合物，例如含有醇1-(95)％(體積比)的水。
提取時溶劑量為原藥重量的5-14倍。每次加入提取溶劑的量最好沒過藥材原料。提取可以在靜態(tài)或動態(tài)下，優(yōu)選在動態(tài)條件下。為了提高提取的效率，可以使用蒸汽加熱、電加熱等。提取的溫度是從室溫(例如20℃)到溶劑回流溫度的范圍內(nèi)，優(yōu)選在回流的溫度下。提取可連續(xù)或間歇進行，間歇提取時可重復(fù)1-4次，提取結(jié)束后，回收溶劑得粗浸膏。粗浸膏用水溶解。然后用低級性的有機溶劑萃取，優(yōu)選的低級性有機溶劑有氯仿、苯、環(huán)己烷、石油醚、溶劑油、或醋酸乙酯，更優(yōu)選的是醋酸乙酯。所用的低級性有機溶劑可以是粗浸膏醇溶液的1-6倍。萃取的次數(shù)為2-5遍，優(yōu)選是3-4次。萃取完成后棄去低級性有機溶劑部分，以除去粗浸膏中的低級性成分。
水溶液再用有機溶劑萃取，優(yōu)選的有機溶劑是正丁醇。每次萃取使用的有機溶劑的量是水體積的0.1-5倍，優(yōu)選是0.2-1.5倍?？梢暂腿?-6次，優(yōu)選是2-5次，更優(yōu)選是3次。保留有機溶劑層，棄去水層以除去水溶性成分。
合并有機溶劑萃取液并選用NaHCO3水溶液萃取、再用H2O洗滌至中性。最后濃縮蒸干得總提物。
根據(jù)本發(fā)明還涉及含有作為活性成份的本發(fā)明的提取物和常規(guī)藥物賦形劑或輔劑的藥物組合物。通常本發(fā)明藥物組合物含有0.1-95重量％的本發(fā)明提取物。
本發(fā)明的提取物的藥物組合物可根據(jù)本領(lǐng)域公知的方法制備。用于此目的時，如果需要，可將本發(fā)明提取物與一種或多種固體或液體藥物賦形劑和/或輔劑結(jié)合，制成可作為人藥或獸藥使用的適當(dāng)?shù)氖┯眯问交騽┝啃问健?br> 本發(fā)明提取物或含有它的藥物組合物可以單位劑量形式給藥，給藥途徑可為腸道或非腸道，如口服、肌肉、皮下、鼻腔、口腔粘膜、皮膚、腹膜或直腸等，優(yōu)選口服。
本發(fā)明提取物或含有它的藥物組合物的給藥途徑可為注射給藥。注射包括靜脈注射、肌肉注射、皮下注射和皮內(nèi)注射等。
給藥劑型可以是液體劑型、固體劑型。如液體劑型可以是真溶液類、膠體類、微粒劑型、乳劑劑型、混懸劑型。其他劑型例如片劑、膠囊、滴丸、氣霧劑、丸劑、粉劑、溶液劑、混懸劑、乳劑、顆粒劑、栓劑、凍干粉針劑等。
本發(fā)明提取物可以制成普通制劑、也可以是緩釋制劑、控釋制劑、靶向制劑及各種微粒給藥系統(tǒng)。
為了將單位給藥劑型制成片劑，可以廣泛使用本領(lǐng)域公知的各種載體。關(guān)于載體的例子是，例如稀釋劑與吸收劑，如淀粉、糊精、硫酸鈣、乳糖、甘露醇、蔗糖、氯化鈉、葡萄糖、尿素、碳酸鈣、白陶土、微晶纖維素、硅酸鋁等；濕潤劑與粘合劑，如水、甘油、聚乙二醇、乙醇、丙醇、淀粉漿、糊精、糖漿、蜂蜜、葡萄糖溶液、阿拉伯膠漿、明膠漿、羧甲基纖維素鈉、紫膠、甲基纖維素、磷酸鉀、聚乙烯吡咯烷酮等；崩解劑，例如干燥淀粉、海藻酸鹽、瓊脂粉、褐藻淀粉、碳酸氫鈉與枸櫞酸、碳酸鈣、聚氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯、十二烷基磺酸鈉、甲基纖維素、乙基纖維素等；崩解抑制劑，例如蔗糖、三硬脂酸甘油酯、可可脂、氫化油等；吸收促進劑，例如季銨鹽、十二烷基硫酸鈉等；潤滑劑，例如滑石粉、二氧化硅、玉米淀粉、硬脂酸鹽、硼酸、液體石蠟、聚乙二醇等。其它載體如聚丙烯酸樹脂類、脂質(zhì)體，水溶性載體如PEG4000和PEG6000、PVP等。還可以將片劑進一步制成包衣片，例如糖包衣片、薄膜包衣片、腸溶包衣片，或雙層片和多層片。
例如為了將給藥單元制成丸劑，可以廣泛使用本領(lǐng)域公知的各種載體。關(guān)于載體的例子是，例如稀釋劑與吸收劑，如葡萄糖、乳糖、淀粉、可可脂、氫化植物油、聚乙烯吡咯烷酮、Gelucire、高嶺土、滑石粉等；粘合劑，如阿拉伯膠、黃蓍膠、明膠、乙醇、蜂蜜、液糖、米糊或面糊等；崩解劑，如瓊脂粉、干燥淀粉、海藻酸鹽、十二烷基磺酸鈉、甲基纖維素、乙基纖維素等。
例如為了將給藥單元制成膠囊，將有效成分，即本發(fā)明提取物與上述的各種載體混合，并將由此得到的混合物置于硬的明膠膠囊或軟膠囊中。也可將有效成分本發(fā)明提取物制成微囊劑，混懸于水性介質(zhì)中形成混懸劑，亦可裝入硬膠囊中或制成注射劑應(yīng)用。
例如，將本發(fā)明提取物制成注射用制劑，如溶液劑、混懸劑溶液劑、乳劑、凍干粉針劑，這種制劑可以是含水或非水的，可含一種和/或多種藥效學(xué)上可接受的載體、稀釋劑、粘合劑、潤滑劑、防腐劑、表面活性劑或分散劑。如稀釋劑可選自水、乙醇、聚乙二醇、1，3-丙二醇、乙氧基化的異硬脂醇、多氧化的異硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇脂肪酸酯等。另外，為了制備等滲注射液，可以向注射用制劑中添加適量的氯化鈉、葡萄糖或甘油，此外，還可以添加常規(guī)的助溶劑、緩沖劑、pH調(diào)節(jié)劑等。這些輔料是本領(lǐng)域常用的。
此外，如需要，也可以向藥物制劑中添加著色劑、防腐劑、香料、矯味劑、甜味劑或其它材料。
為達到用藥目的，增強治療效果，本發(fā)明的藥物或藥物組合物可用任何公知的給藥方法給藥。
本發(fā)明提取物、藥物組合物的給藥劑量取決于許多因素，例如所要預(yù)防或治療疾病的性質(zhì)和嚴重程度，患者或動物的性別、年齡、體重、性格及個體反應(yīng)，給藥途徑、給藥次數(shù)、治療目的，因此本發(fā)明的治療劑量可以有大范圍的變化。一般來講，本發(fā)明中藥學(xué)成分的使用劑量是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的?？梢愿鶕?jù)本發(fā)明提取物組合物中最后的制劑中所含有的實際藥物數(shù)量，加以適當(dāng)?shù)恼{(diào)整，以達到其治療有效量的要求，完成本發(fā)明的預(yù)防或治療目的。本發(fā)明提取物的每天的合適劑量范圍(本發(fā)明的提取物或提取物的用量)為0.001-150mg/Kg體重，優(yōu)選為0.01-100mg/Kg體重，更優(yōu)選為0.01-60mg/Kg體重，最優(yōu)選為0.1-10mg/Kg體重。上述劑量可以單一劑量形式或分成幾個，例如二、三或四個劑量形式給藥，這受限于給藥醫(yī)生的臨床經(jīng)驗以及包括運用其它治療手段的給藥方案。
具體實施例方式
實施例1亞麻根提取物的制備將200kg亞麻(Linum usitatissimum L.)根用85％乙醇回流提取3次，合并提取液，減壓回收乙醇，得粗提取物。
此粗提取物用水溶解，然后依次用和水同體積的醋酸乙酯萃取3次，棄去醋酸乙酯部分。
水層再用同體積的正丁醇萃取3次；將正丁醇層合并。
將正丁醇提取液先用同體積的5％碳酸氫鈉水溶液萃取3次，再用水萃取至中性。
減壓回收溶劑得正丁醇提取物，即為亞麻根提取物。
實施例2、亞麻根提取物急性毒性研究(1)試驗動物ICR小鼠，雄性，體重18～22克，由維通利華實驗動物技術(shù)有限公司提供，合格證號SCDK(京)2002-0003(2)受試藥物亞麻根提取物，黃白色粉末，2～5℃避光保存，由本所秦海林教授提供，用時以0.5％CMC-Na混懸。
(3)試驗方法10只小鼠，口服亞麻根提取物，濃度為250mg/ml，每只小鼠灌胃體積為0.8ml(即最高濃度、最大灌胃體積)。給藥后7天內(nèi)，觀察小鼠體征及死亡情況。
(4)試驗結(jié)果小鼠口服亞麻根提取物后，體征未出現(xiàn)明顯變化。無死亡情況發(fā)生。
(5)結(jié)論小鼠口服亞麻根提取物10g/kg，未出現(xiàn)任何毒性反應(yīng)。
藥理實驗實驗例3、亞麻根提取物對ConA引起小鼠急性肝損傷的作用(1)試驗動物ICR小鼠，雄性，體重18～22克，由維通利華實驗動物技術(shù)有限公司提供，合格證號SCDK(京)2002-0003(2)受試藥物亞麻根提取物，黃白色粉末，2～5℃避光保存，由本所秦海林教授提供，用時以0.5％CMC-Na混懸。
(3)陽性對照藥雙環(huán)醇，白色粉狀，由北京協(xié)和藥廠提供，批號20030801，用時以0.5％CMC-Na混懸。
4.ConAConA購自Sigma公司。
(4)試驗方法將動物隨機分為6組，每組7只，分別為正常對照組，ConA模型組、亞麻根提取物大劑量給藥組、亞麻根提取物中劑量給藥組、亞麻根提取物小劑量給藥組、和雙環(huán)醇給藥組。亞麻根提取物和雙環(huán)醇給藥組動物在給予ConA前24，8和1小時分別口服亞麻根提取物(0.5，1，2g/kg)和雙環(huán)醇(150mg/kg)，正常對照組和ConA模型組給予同體積賦形劑。除正常對照組外，各組均靜脈注射ConA，劑量為26mg/kg，體積20ml/kg。禁食過夜。給予ConA 16小時后將動物斷頭處死，取血，測定血清中ALT和AST的含量。肝臟取同一部位做病理檢查。
(5)試驗結(jié)果正常動物尾靜脈注射ConA后，血清ALT和AST明顯升高。肝臟病理形態(tài)以壞死和炎癥為主。雙環(huán)醇對ConA誘發(fā)的血清ALT和AST升高有顯著保護作用，病理形態(tài)損傷也明顯減輕，與以往結(jié)果一致。動物提前口服亞麻根提取物三個劑量對ConA引起的小鼠血清ALT和AST升高都具有顯著的保護作用，病理形態(tài)損傷也明顯減輕，并呈明顯的劑量-效應(yīng)關(guān)系。結(jié)果見表1
表1.亞麻根提取物對ConA引起小鼠急性肝損傷的保護作用

*P＜0.05**P＜0.01與模型組相比有顯著性差異。
(6)結(jié)論小鼠提前口服亞麻根提取物對ConA引起小鼠急性肝損傷的有明顯保護作用。
權(quán)利要求
1.一種亞麻根提取物的制備方法，其特征在于，包括如下步驟(A)以亞麻(Linum usitatissimum L.)的植株地下部分作為原料，使用溶劑提取，回收溶劑得粗浸膏；(B)粗浸膏用水溶解，然后用低級性的有機溶劑萃取，萃取完成后棄去低級性有機溶劑部分；(C)剩余的水溶液再用有機溶劑萃取，保留有機溶劑層，棄去水層；(D)有機溶劑萃取液先洗滌再濃縮得亞麻根提取物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的制備方法，其特征在于步驟(A)中所述的原料進行適度干燥或/和粉碎。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的制備方法，其特征在于步驟(A)中所述的有機溶劑選自甲醇、乙醇、異丙醇、丁醇。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的制備方法，其特征在于步驟(A)中所述的有機溶劑的量是原料重量的5-14倍。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的制備方法，其特征在于步驟(A)中所述的提取的溫度是溶劑回流的溫度。
6.根據(jù)權(quán)利要求1的制備方法，其特征在于步驟(B)中所述的低級性有機溶劑選自氯仿、苯、環(huán)己烷、石油醚、溶劑油、醋酸乙酯。
7.根據(jù)權(quán)利要求1的制備方法，其特征在于步驟(C)中所述的有機溶劑是正丁醇。
8.權(quán)利要求1-7的制備方法獲得的亞麻根提取物。
9.一種藥物組合物，其特征在于，包括權(quán)利要求8的亞麻根提取物和制藥學(xué)上常用的載體。
10.權(quán)利要求8的亞麻根提取物在制備預(yù)防和/或治療肝炎藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種亞麻(Linum usitatissimum L.)根提取物，這種提取物的制備方法，含有這種提取物的藥物組合物以及這種提取在制備預(yù)防和/或治療肝炎藥物中的應(yīng)用。
文檔編號A61P1/00GK101088526SQ200610087239
公開日2007年12月19日 申請日期2006年6月14日 優(yōu)先權(quán)日2006年6月14日
發(fā)明者秦海林, 母海成, 李志宏, 張霞 申請人:龍井民康生物制品廠, 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所