專利名稱：抗病毒中藥制劑及其制備方法、質(zhì)控方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明是一種抗病毒中藥制劑及其制備方法、質(zhì)控方法和應(yīng)用，屬于中藥的技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
肺炎、呼吸道感染、流感、禽流感、SARS、哮喘等疾病多由細(xì)菌和病毒引起。西藥抗病毒藥物主要是在病毒復(fù)制周期的環(huán)節(jié)上發(fā)揮作用，由于病毒的繁殖與宿主細(xì)胞關(guān)系密切，避免不了抗病毒藥對肌體細(xì)胞產(chǎn)生毒副作用的問題。目前西藥化學(xué)藥的研究進(jìn)展比較緩慢，而且特異性差，副作用多。應(yīng)用中藥抗病毒毒副作用小，既能殺滅病毒又對宿主細(xì)胞無影響，保護(hù)和修復(fù)組織器官、維護(hù)其正常功能的作用，有獨(dú)到的療效。中藥抗致病微生物以清熱解毒藥為主，目前一些發(fā)明人提供了含有黃芩、梔子的抗病毒制劑，如專利申請?zhí)枮?00310106197.9的專利申請，提供了黃芩和梔子的制劑用于上呼吸道感染；專利申請?zhí)枮?00510065826.6的專利申請，提供的黃芩和梔子的注射制劑用于急性膽囊炎；專利申請?zhí)枮?00510065829.0的專利申請，提供了梔芩雙苷的注射制劑用于急性呼吸系統(tǒng)感染。但是，梔子和黃芩都為味苦性寒之藥，易傷脾胃。在深入研究中發(fā)現(xiàn)，若在該組方中加入適宜的性溫補(bǔ)益藥可以克服梔子和黃芩的苦寒之性，并能提高該組方的療效，淫羊藿味辛、甘性溫，淫羊藿苷和淫羊藿總黃酮對免疫細(xì)胞、免疫因子和免疫器官均有激發(fā)作用，可以促進(jìn)抗體生成，從而對整個(gè)免疫系統(tǒng)起到較好的調(diào)節(jié)、促進(jìn)作用。有鑒于此，本申請人采用了黃芩、淫羊藿、梔子的藥材、提取物或其有效部位配伍使用，驅(qū)邪而不傷正，在抑制病毒繁殖的同時(shí)，提高宿主細(xì)胞和機(jī)體免疫調(diào)節(jié)功能，加強(qiáng)自身抗病毒能力，提高了制劑的安全性，擴(kuò)大使用范圍。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種抗病毒的中藥制劑及其制備方法、質(zhì)控方法和應(yīng)用；本發(fā)明針對現(xiàn)有技術(shù)，在中醫(yī)藥理論指導(dǎo)下，在實(shí)驗(yàn)篩選的基礎(chǔ)上，采用黃芩、淫羊藿、梔子的提取物或其有效部位配伍做成制劑，優(yōu)選出最佳的組方及工藝，其中有效部位系采用先進(jìn)工藝對粗提物進(jìn)行了提純和精制，對藥效成分進(jìn)行了富集，療效更為突出。本發(fā)明提供的滴丸和分散片制劑吸收快、生物利用度高、起效快。另外，本發(fā)明除了對藥物制劑進(jìn)行鑒別、含量測定，還采用了目前先進(jìn)的指紋圖譜技術(shù)，對制劑進(jìn)行嚴(yán)格的質(zhì)量控制，使產(chǎn)品更為穩(wěn)定、可控。
抗病毒中藥制劑，它是由梔子、黃芩、淫羊藿經(jīng)提取精制而成，重量比為1∶1～10∶1～10；或是由相應(yīng)重量份藥材經(jīng)提取后得到的梔子提取物或有效部位、黃芩提取物或有效部位、淫羊藿提取物或有效部位制作而成的直接用于注射給藥的注射液、直接供靜脈滴注的靜脈輸液、需稀釋后用于靜脈滴注的注射用濃溶液和用冷凍干燥法或噴霧干燥法制得的注射用無菌粉末和無菌塊狀物以及片劑、膠囊劑、顆粒劑、滴丸劑、丸劑、軟膠囊劑、口服液體制劑、口腔崩解片和分散片劑等藥劑學(xué)上所有能接受的劑型。具體地說，所述的抗病毒中藥制劑，是由梔子、黃芩、淫羊藿經(jīng)提取精制而成，重量比為1∶1～5∶1～5；或是由相應(yīng)重量份藥材經(jīng)提取后得到的梔子提取物或有效部位、黃芩提取物或有效部位、淫羊藿提取物或有效部位制作而成的片劑、膠囊劑、顆粒劑、滴丸劑、丸劑、軟膠囊劑、口服液體制劑、口腔崩解片和分散片劑等藥劑學(xué)上所有能接受的口服劑型。優(yōu)選為是由梔子、黃芩、淫羊藿經(jīng)提取精制而成，重量比為1∶1～3∶1～3；或是由相應(yīng)重量份藥材經(jīng)提取后得到的梔子提取物或有效部位、黃芩提取物或有效部位、淫羊藿提取物或有效部位制作而成的片劑、膠囊劑、顆粒劑、滴丸劑、丸劑、軟膠囊劑、口服液體制劑、口腔崩解片和分散片劑。
所述的抗病毒中藥制劑，梔子提取物中含梔子苷不低于3％，黃芩提取物中含黃芩苷不低于50％，淫羊藿提取物中含淫羊藿苷不低于5％。梔子的有效部位梔子總苷中含苷類成分不低于50％，黃芩的有效部位黃芩總黃酮或黃芩苷中含黃酮類成分或黃芩苷不低于50％，淫羊藿的有效部位淫羊藿總黃酮中含黃酮類成分不低于50％。
所述的梔子、黃芩、淫羊藿提取物可以是市售的或者是藥材醇提取物、藥材水提取物、藥材水提醇沉提取物、藥材半仿生提取物、藥材超臨界萃取物或者以上各提取物的精制品。
所述的藥物有效部位可以是市售的或采用以下方法制備的(1)黃芩總黃酮或黃芩苷有效部位是這樣制備的取黃芩藥材，粉碎后加入水或乙醇溶液提取，合并提取液，過濾，濃縮得黃芩總黃酮粗提物，在此基礎(chǔ)上采用乙醇沉淀法、柱層析法、萃取法、絮凝沉淀法中的一種或幾種聯(lián)合使用進(jìn)行適當(dāng)精制，得黃芩總黃酮或黃芩苷；(2)淫羊藿總黃酮有效部位是這樣制備的取淫羊藿藥材，粉碎后加入水或乙醇溶液提取，合并提取液，過濾，濃縮得淫羊藿總黃酮粗提物，在此基礎(chǔ)上采用乙醇沉淀法、柱層析法、萃取法、絮凝沉淀法中的一種或幾種聯(lián)合使用進(jìn)行適當(dāng)精制，得淫羊藿總黃酮；(3)梔子總苷有效部位是這樣制備的取梔子藥材，粉碎后加入水或乙醇溶液提取，合并提取液，過濾，濃縮得梔子總苷粗提物，在此基礎(chǔ)上采用乙醇沉淀法、柱層析法、萃取法、絮凝沉淀法中的一種或幾種聯(lián)合使用進(jìn)行適當(dāng)精制，得梔子總苷。
工藝優(yōu)選為(1)黃芩總黃酮或黃芩苷有效部位是這樣制備的取黃芩，粉碎后加入10倍量水煎煮3次，每次1小時(shí)，合并煎液，減壓濃縮至2g生藥/ml，濾過，濾液用鹽酸調(diào)節(jié)pH值至1.0～2.0，80℃保溫半小時(shí)，靜置過夜，濾過，沉淀加入3倍量水?dāng)噭?，?0％氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至7.0，加入等量乙醇，攪拌溶解，濾過，濾液用鹽酸調(diào)pH值至1.0～2.0，60℃保溫半小時(shí)，靜置過夜，濾過，沉淀用30％乙醇洗至pH值至7.0，減壓干燥，即得；(2)淫羊藿總黃酮有效部位是這樣制備的取淫羊藿，粉碎后加10倍量70％乙醇加熱回流提取3次，每次1小時(shí)，合并提取液，減壓回收乙醇至60℃時(shí)相對密度為1.05～1.10，加入3倍量水?dāng)嚢枞芙?，濾過，濾液過聚酰胺柱，用水和15％乙醇沖洗雜質(zhì)，再用70％乙醇解吸，收集解吸液，減壓回收乙醇，真空干燥，即得；(3)梔子總苷有效部位是這樣制備的取梔子，粉碎后加入8倍量70％乙醇，回流提取3次，每次1小時(shí)，提取液合并后濾過，濾液減壓回收乙醇至60℃時(shí)相對密度為1.05～1.10，加入2倍量水?dāng)嚢枞芙?，濾過，濾液過ZTC型大孔吸附樹脂柱，用水沖洗雜質(zhì)，再用40％乙醇解吸，收集解吸液，減壓回收乙醇，真空干燥，即得。
所述的抗病毒中藥分散片是這樣制備的取黃芩藥材，粉碎后加入10倍量水煎煮3次，每次1小時(shí)，合并煎液，減壓濃縮；取淫羊藿藥材，粉碎后加10倍量70％乙醇加熱回流提取3次，每次1小時(shí)，合并提取液，減壓回收乙醇；取梔子藥材，粉碎后加入8倍量70％乙醇，回流提取3次，每次1小時(shí)，提取液合并后濾過，濾液減壓回收乙醇；干燥，粉碎，混勻，加入10％微晶纖維素、5％羥丙纖維素，分別過120目篩混勻，以1％聚維酮K30乙醇溶液為粘合劑制軟材，制粒，60℃干燥，整粒，加入0.3％硬脂酸鎂，壓片，即得分散片。
所述的抗病毒中藥滴丸是這樣制備的分別取黃芩、淫羊藿、梔子的提取物或有效部位，合并提取物或有效部位，與2倍量的聚乙二醇4000、聚乙二醇6000復(fù)合基質(zhì)混合均勻，聚乙二醇4000∶聚乙二醇6000＝1∶3，水浴上熔融，攪勻，滴于二甲基硅油或其他脂溶性冷卻劑中成丸，即得滴丸。
所述的抗病毒中藥制劑的質(zhì)量控制方法，包括如下方法中的部分或全部(1)抗病毒藥物組合物的指紋圖譜測試，包括以黃芩總黃酮、淫羊藿總黃酮成分特征為主的指紋圖譜和梔子總苷成分特征為主的指紋圖譜中的一種或幾種；(2)黃芩藥材、淫羊藿藥材、梔子藥材、黃芩苷、黃芩苷元、白楊黃素、淫羊藿苷、淫羊藿次苷I、朝鮮淫羊藿苷A，B，C、寶藿苷I，II，VI、梔子苷、總黃酮中全部或部分成分的鑒別測試方法；(3)黃芩苷、黃芩苷元、白楊黃素、淫羊藿苷、淫羊藿次苷I、朝鮮淫羊藿苷A，B，C、寶藿苷I，II，VI、梔子苷、梔子總苷、總黃酮中全部或部分成分的含量測試方法。
所述的抗病毒中藥制劑的應(yīng)用，用于制備治療肺炎、上呼吸道感染、細(xì)菌性感冒、病毒性感冒、禽流感、SARS、哮喘、提高機(jī)體免疫力等疾病的藥物。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明在中醫(yī)藥理論指導(dǎo)下，在實(shí)驗(yàn)篩選的基礎(chǔ)上，采用黃芩、淫羊藿、梔子為組方，清熱藥與補(bǔ)益藥共用，驅(qū)邪而不傷正，在抑制病毒繁殖的同時(shí)，提高宿主細(xì)胞和機(jī)體免疫調(diào)節(jié)功能，加強(qiáng)自身抗病毒能力，提高了制劑的安全性和質(zhì)量的可控性，擴(kuò)大使用范圍。本發(fā)明將黃芩、淫羊藿、梔子的提取物或其有效部位配伍做成制劑，優(yōu)選出最佳的提取物組方為梔子∶黃芩∶淫羊藿＝1∶1∶1，最佳的有效部位組方為梔子總苷∶黃芩總黃酮/黃芩苷∶淫羊藿總黃酮＝1∶2∶1。本發(fā)明人在研究過程中發(fā)現(xiàn)，通過對藥效成分進(jìn)行富集，本發(fā)明制劑療效更為突出，而在有效部位制備工藝中，樹脂型號和洗脫濃度十分關(guān)鍵，經(jīng)過實(shí)驗(yàn)研究，梔子選擇ZTC型大孔樹脂40％的乙醇洗脫效果最佳，淫羊藿選擇聚酰胺柱70％的乙醇洗脫效果最佳。本發(fā)明人在制劑研究過程中發(fā)現(xiàn)，輔料對本發(fā)明滴丸劑和分散片的影響最大，通過綜合考查滴丸的外觀、溶散時(shí)間和基質(zhì)用量，本發(fā)明人確定混合基質(zhì)聚乙二醇4000(g)∶聚乙二醇6000(g)＝1∶3為本發(fā)明滴丸基質(zhì)，得到外觀光滑、圓整度好，溶散時(shí)間為4-5min的滴丸。本發(fā)明分散片選擇10％微晶纖維素，5％羥丙纖維素，0.30％硬脂酸鎂制得的產(chǎn)品，在19℃～21℃水中3min內(nèi)完全崩解，混懸性好、生物利用度高、分散均勻。本發(fā)明除了對藥物制劑進(jìn)行多指標(biāo)鑒別、含量測定外，還采用了目前先進(jìn)的指紋圖譜技術(shù)，對其進(jìn)行質(zhì)量控制，使制劑更為穩(wěn)定、可控。
為證明本發(fā)明提供的藥物具有有效的效果，申請人進(jìn)行了一系列實(shí)驗(yàn)；實(shí)驗(yàn)例1對不同配比組方藥效學(xué)比較研究
1.1本組方提取物的制備方法分別按梔子∶黃芩∶淫羊藿＝1∶1∶1、1∶3∶3、1∶5∶5、1∶10∶10取藥材，按照如下方法進(jìn)行提取(1)取黃芩，粉碎后加入10倍量水煎煮3次，每次1小時(shí)，合并煎液；(2)取淫羊藿，粉碎后加10倍量70％乙醇加熱回流提取3次，每次1小時(shí)，合并提取液，減壓回收乙醇至相對密度為1.05～1.10(60℃)，加入3倍量水?dāng)嚢枞芙猓瑸V過；(3)取梔子，粉碎后加入8倍量70％乙醇，回流提取3次，每次1小時(shí)，提取液合并后濾過，濾液減壓回收乙醇至相對密度為1.05～1.10(60℃)，加入2倍量水?dāng)嚢枞芙?，濾過。
通過甲型流感病毒感染小鼠保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)，對不同比例的處方進(jìn)行了系統(tǒng)的篩選試驗(yàn)，其中取18～22gKM種小鼠隨機(jī)分組，每組10只，雌雄兼用，①配方1病毒對照組；②配方2利巴韋林組；③配方3梔子提取物∶黃芩提取物∶淫羊藿提取物＝1∶1∶1；④配方4梔子提取物∶黃芩提取物∶淫羊藿提取物＝1∶3∶3；⑤配方5梔子提取物∶黃芩提取物∶淫羊藿提取物＝1∶5∶5；⑥配方6梔子提取物∶黃芩提取物∶淫羊藿提取物＝1∶10∶10，灌胃容量10ml/kg，1次/天×6天，給藥第2天各組小鼠(除空白對照組外)在乙醚淺麻醉下以增毒3次的病毒尿囊液滴鼻感染小鼠，每鼠30ul(15個(gè)LD50攻擊量)實(shí)驗(yàn)前禁食不禁水，實(shí)驗(yàn)當(dāng)日各組小鼠稱重，脫頸處死，解剖，觀察肺部病變，取全肺稱重，計(jì)算各鼠肺指數(shù)值，肺指數(shù)抑制率，計(jì)算各組間差異，并取肺用10％甲醛固定，作病理組織學(xué)檢查。結(jié)果見表1表1 提取物組方研究結(jié)論

由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，梔子提取物∶黃芩提取物∶淫羊藿提取物在1∶1～3∶1～3范圍療效較好，最優(yōu)為梔子提取物∶黃芩提取物∶淫羊藿提取物＝1∶1∶1。
1.2本組方有效部位的制備方法分別按梔子總苷∶黃芩總黃酮/黃芩苷∶淫羊藿總黃酮＝1∶1∶1、1∶2∶1、1∶3∶3、1∶5∶5、1∶10∶10取藥材，按照如下方法進(jìn)行制備(1)黃芩總黃酮或黃芩苷有效部位是這樣制備的取黃芩，粉碎后加入10倍量水煎煮3次，每次1小時(shí)，合并煎液，減壓濃縮至2g生藥/ml，濾過，濾液用鹽酸調(diào)節(jié)pH值至1.0～2.0，80℃保溫半小時(shí)，靜置過夜，濾過，沉淀加入3倍量水?dāng)噭颍?0％氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至7.0，加入等量乙醇，攪拌溶解，濾過，濾液用鹽酸調(diào)pH值至1.0～2.0，60℃保溫半小時(shí)，靜置過夜，濾過，沉淀用30％乙醇洗至pH值至7.0，減壓干燥，即得；(2)淫羊藿總黃酮有效部位是這樣制備的取淫羊藿，粉碎后加10倍量70％乙醇加熱回流提取3次，每次1小時(shí)，合并提取液，減壓回收乙醇至相對密度為1.05～1.10(60℃)，加入3倍量水?dāng)嚢枞芙?，濾過，濾液過聚酰胺柱，用水和15％乙醇沖洗雜質(zhì)，再用70％乙醇解吸，收集解吸液，減壓回收乙醇，真空干燥，即得；(3)梔子總苷有效部位是這樣制備的取梔子，粉碎后加入8倍量70％乙醇，回流提取3次，每次1小時(shí)，提取液合并后濾過，濾液減壓回收乙醇至相對密度為1.05～1.10(60℃)，加入2倍量水?dāng)嚢枞芙?，濾過，濾液過ZTC型大孔吸附樹脂柱，用水沖洗雜質(zhì)，再用40％乙醇解吸，收集解吸液，減壓回收乙醇，真空干燥，即得。
按照①配方1病毒對照組；②配方2利巴韋林組；③配方3梔子總苷∶黃芩總黃酮/黃芩苷∶淫羊藿總黃酮＝1∶1∶1；④配方4梔子總苷∶黃芩總黃酮/黃芩苷∶淫羊藿總黃酮＝1∶2∶1；⑤配方5梔子總苷∶黃芩總黃酮/黃芩苷∶淫羊藿總黃酮＝1∶3∶3；⑥配方6梔子總苷∶黃芩總黃酮/黃芩苷∶淫羊藿總黃酮＝1∶5∶5；⑦配方7梔子總苷∶黃芩總黃酮/黃芩苷∶淫羊藿總黃酮＝1∶10∶10分組。采用1.1中方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，結(jié)果見表2表2 有效部位組方研究結(jié)論

由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，梔子總苷∶黃芩總黃酮/黃芩苷∶淫羊藿總黃酮在1∶1～3∶1～3范圍療效較好，最優(yōu)為梔子總苷∶黃芩總黃酮/黃芩苷∶淫羊藿總黃酮＝1∶2∶1。
1.3對提取物組方、有效部位組方和梔子、黃芩提取物組方進(jìn)行藥效比較按照1.1中提取方法獲得梔子∶黃芩∶淫羊藿＝1∶1∶1提取物；按照1.2中提取方法獲得梔子總苷∶黃芩總黃酮/黃芩苷∶淫羊藿總黃酮＝1∶2∶1有效部位；按照申請?zhí)?00510065829.0中提取方法獲得梔子∶黃芩＝1∶2提取物。采用1.1中方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，結(jié)果見表3表3 提取物、有效部位與梔子、黃芩提取物組方研究結(jié)論

由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，本發(fā)明提取物和有效部位組方療效都較梔子、黃芩提取物組方效果好。
實(shí)驗(yàn)例2提取工藝研究2.1提取、精制工藝研究本發(fā)明人在深入研究過程中，發(fā)現(xiàn)不同型號的樹脂柱對梔子苷和淫羊藿苷含量影響較大，以吸附量和脫附率為指標(biāo)對樹脂柱進(jìn)行篩選。結(jié)果見表4表4 不同型號樹脂柱對梔子苷和淫羊藿苷吸附量和脫附率結(jié)果

選擇脫附率較大的樹脂同時(shí)考慮吸附量要大，梔子優(yōu)選ZTC型大孔樹脂，淫羊藿優(yōu)選聚酰胺柱。
2.2工藝參數(shù)篩選本發(fā)明人在深入研究過程中，發(fā)現(xiàn)乙醇的洗脫濃度對梔子苷和淫羊藿苷含量影響較大，梔子采用ZTC型大孔樹脂，淫羊藿采用聚酰胺柱，測得10％、40％、70％、90％的乙醇洗脫得梔子苷和淫羊藿苷含量。結(jié)果見表5表5 不同濃度乙醇洗脫梔子苷和淫羊藿苷結(jié)果

結(jié)果表明，梔子選擇40％的乙醇洗脫較佳，淫羊藿選擇70％的乙醇洗脫較佳。
實(shí)驗(yàn)例3成型工藝研究3.1滴丸劑以產(chǎn)品外觀、溶散時(shí)限為指標(biāo)，對滴丸的基質(zhì)進(jìn)行篩選。溶散時(shí)限檢查法參照《中華人民共和國藥典》2005版附錄VIIA。結(jié)果見表6表6 滴丸劑輔料研究結(jié)果

綜合考慮滴丸的外觀、溶散時(shí)間和基質(zhì)用量，采用混合基質(zhì)聚乙二醇4000(g)∶聚乙二醇6000(g)＝5∶15，即聚乙二醇4000(g)∶聚乙二醇6000(g)＝1∶3為本發(fā)明滴丸的基質(zhì)。
3.2分散片劑分散片遇水可迅速崩解形成均勻的粘性懸液的水分散片，解決了原劑型崩解性差，溶出緩慢的缺點(diǎn)，本申請人提供的分散片在19℃～21℃水中3min內(nèi)完全崩解，混懸性好、生物利用度高、分散均勻度。結(jié)果見表7表7 分散片輔料研究結(jié)果

結(jié)果表明，選擇了10％微晶纖維素，5％低取代羥丙纖維素，0.30％硬脂酸鎂制得的產(chǎn)品崩解性能好。
實(shí)驗(yàn)例4制劑藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)4.1體內(nèi)抗菌作用對金黃色葡萄球菌感染小鼠的保護(hù)作用取18～22g，KM種小鼠隨機(jī)分組，每組21只，雌雄兼用，①空白對照組等量生理鹽水；②模型對照組，等量生理鹽水；③抗病毒顆粒3g/kg；④本發(fā)明滴丸組3g/kg；⑤本發(fā)明分散片組3g/kg。以上各組給藥1次/天×6天，第3天給藥1小時(shí)后，腹腔注射金黃色葡萄球菌菌液0.5ml/只鼠(除空白對照組外)，繼續(xù)給藥3天，觀察各組動(dòng)物7日內(nèi)死亡情況，結(jié)果見表8。
表8 抗病毒制劑對金黃色葡萄球菌感染小鼠的保護(hù)作用

由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，本發(fā)明藥物制劑對金黃色葡萄球菌感染小鼠的存活率較抗病毒顆粒高，本發(fā)明藥物制劑對金黃色葡萄球菌有抑制作用。
4.2體內(nèi)抗病毒實(shí)驗(yàn)體內(nèi)抗病毒作用病毒感染小鼠半數(shù)致死量(LD50)測定取KM種小鼠49只，體重11～13g，雌雄兼用，隨機(jī)分成7組，每組7只，取增毒3次的病毒尿囊液，以10倍稀釋，每組滴一個(gè)病毒濃度，各組小鼠在乙醚淺麻醉下以病毒尿囊液30ul滴鼻，觀察14天內(nèi)死亡數(shù)，按Reed Muench法計(jì)算，LD50為2.88。
對甲型流感病毒感染小鼠的保護(hù)作用取KM種小鼠，體重11～13g，雌雄各半，隨機(jī)分成組，每組21只(1)空白對照組，等量生理鹽水；(2)模型對照組，等量生理鹽水；(3)利巴韋林組75mg/kg；(4)本發(fā)明滴丸組3g/kg；(5)本發(fā)明分散片組3g/kg。以上各組小鼠給藥1次/×6天，于給藥第天各組小鼠(除空白對照組外)在乙醚淺麻醉下以增毒3次的病毒尿囊液滴鼻感染小鼠，每鼠30ul(20個(gè)LD50攻擊量)觀察動(dòng)物感染后發(fā)病癥狀，記錄感染14天后死亡數(shù)，并計(jì)算保護(hù)率及平均存活天數(shù)，結(jié)果見表9
表9 抗病毒制劑對甲型流感病毒感染小鼠的保護(hù)作用

由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，本發(fā)明藥物制劑對甲型流感病毒感染小鼠具有明顯保護(hù)作用，本發(fā)明藥物制劑對甲型流感病毒有抑制作用較好。
具體的實(shí)施方式實(shí)施例1黃芩總黃酮100g 梔子總苷100g 淫羊藿總黃酮100g秤取上述物料，加入糊精640g、甜菊甙10g、微晶纖維素50g混合均勻，加入適量80％乙醇溶液制軟材，16目篩制粒，70℃鼓風(fēng)干燥，16目篩整粒，即得顆粒劑。
實(shí)施例2黃芩總黃酮100g 梔子總苷200g 淫羊藿總黃酮100g分別秤取上述三份物料，混合均勻，加入于85℃熔融的聚乙二醇4000與聚乙二醇6000的混合物中，聚乙二醇4000用量為200g，聚乙二醇6000為600g，攪拌均勻，滴制成丸，滴制溫度為80～90℃，滴速為30～40滴/分鐘，冷卻液溫度為10～20℃，冷卻液為甲基硅油。
實(shí)施例3黃芩總黃酮200g 梔子總苷100g 淫羊藿總黃酮100g秤取上述物料混合均有，加入10％的微晶纖維素，5％低取代羥丙纖維素，0.30％硬脂酸鎂，攪拌均勻，壓制成片即得。
實(shí)施例4黃芩苷200g 梔子總苷100g 淫羊藿總黃酮100g秤取上述物料，加入微晶纖維素500g、甜菊甙10g、硬脂酸鎂2g混合均勻，加入適量5％聚乙烯吡咯烷酮乙醇溶液制軟材，18目篩制粒，70℃鼓風(fēng)干燥，18目篩整粒，即得顆粒劑。
實(shí)施例5黃芩苷500g 梔子總苷100g 淫羊藿總黃酮100g口服液秤取上述物料混合均勻，加水?dāng)嚢?，加入檸檬酸鈉50g，濾過，濾液加入蜂蜜50，定容，加入0.3％的山梨酸鉀，灌裝，滅菌即得。
實(shí)施例6黃芩苷200g 梔子總苷100g 淫羊藿總黃酮200g分別秤取上述三份物料，混合均勻，加入于85℃熔融的聚乙二醇4000與單硬脂酸甘油酯(3∶1)的混合物中，混合物重量為800g，攪拌均勻，滴制成丸，滴制溫度為80～90℃，滴速為30～40滴/分鐘，冷卻液溫度為10～20℃，冷卻液為甲基硅油。
實(shí)施例7黃芩100g梔子100g淫羊藿100g取黃芩，粉碎后加入10倍量水煎煮3次，每次1小時(shí)，合并煎液，減壓濃縮至2g生藥/ml，濾過，濾液用鹽酸調(diào)節(jié)pH值至1.0～2.0，80℃保溫半小時(shí)，靜置過夜，濾過，沉淀加入3倍量水?dāng)噭?，?0％氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至7.0，加入等量乙醇，攪拌溶解，濾過，濾液用鹽酸調(diào)pH值至1.0～2.0，60℃保溫半小時(shí)，靜置過夜，濾過，沉淀用30％乙醇洗至pH值至7.0，減壓干燥，即得黃芩總黃酮。
取淫羊藿，粉碎后加10倍量70％乙醇加熱回流提取3次，每次1小時(shí)，合并提取液，減壓回收乙醇至60℃時(shí)相對密度為1.05～1.10，加入3倍量水?dāng)嚢枞芙猓瑸V過，濾液過聚酰胺柱，用水和15％乙醇沖洗雜質(zhì)，再用70％乙醇解吸，收集解吸液，減壓回收乙醇，真空干燥，即得淫羊藿總黃酮。
取梔子，粉碎后加入8倍量70％乙醇，回流提取3次，每次1小時(shí)，提取液合并后濾過，濾液減壓回收乙醇至60℃時(shí)相對密度為1.05～1.10，加入2倍量水?dāng)嚢枞芙?，濾過，濾液過ZTC型大孔吸附樹脂柱，用水沖洗雜質(zhì)，再用40％乙醇解吸，收集解吸液，減壓回收乙醇，真空干燥，即得梔子環(huán)希醚萜總苷。
權(quán)利要求
1.抗病毒中藥制劑，其特征在于它是由梔子、黃芩、淫羊藿經(jīng)提取精制而成，重量比為1∶1～10∶1～10；或是由相應(yīng)重量份藥材經(jīng)提取后得到的梔子提取物或有效部位、黃芩提取物或有效部位、淫羊藿提取物或有效部位制作而成的直接用于注射給藥的注射液、直接供靜脈滴注的靜脈輸液、需稀釋后用于靜脈滴注的注射用濃溶液和用冷凍干燥法或噴霧干燥法制得的注射用無菌粉末和無菌塊狀物以及片劑、膠囊劑、顆粒劑、滴丸劑、丸劑、軟膠囊劑、口服液體制劑、口腔崩解片和分散片劑等藥劑學(xué)上所有能接受的劑型。
2.按照權(quán)利要求1所述的抗病毒中藥制劑，其特征在于它是由梔子、黃芩、淫羊藿經(jīng)提取精制而成，重量比為1∶1～5∶1～5；或是由相應(yīng)重量份藥材經(jīng)提取后得到的梔子提取物或有效部位、黃芩提取物或有效部位、淫羊藿提取物或有效部位制作而成的片劑、膠囊劑、顆粒劑、滴丸劑、丸劑、軟膠囊劑、口服液體制劑、口腔崩解片和分散片劑等藥劑學(xué)上所有能接受的口服劑型。
3.按照權(quán)利要求2所述的抗病毒中藥制劑，其特征在于它是由梔子、黃芩、淫羊藿經(jīng)提取精制而成，重量比為1∶1～3∶1～3；或是由相應(yīng)重量份藥材經(jīng)提取后得到的梔子提取物或有效部位、黃芩提取物或有效部位、淫羊藿提取物或有效部位制作而成的片劑、膠囊劑、顆粒劑、滴丸劑、丸劑、軟膠囊劑、口服液體制劑、口腔崩解片和分散片劑。
4.按照權(quán)利要求3所述的抗病毒中藥制劑，其特征在于梔子提取物中含梔子苷不低于3％，黃芩提取物中含黃芩苷不低于50％，淫羊藿提取物中含淫羊藿苷不低于5％。
5.按照權(quán)利要求3所述的抗病毒中藥制劑，其特征在于梔子的有效部位梔子總苷中含苷類成分不低于50％，黃芩的有效部位黃芩總黃酮或黃芩苷中含黃酮類成分或黃芩苷不低于50％，淫羊藿的有效部位淫羊藿總黃酮中含黃酮類成分不低于50％。
6.按照權(quán)利要求4所述的抗病毒中藥制劑，其特征在于所述的梔子、黃芩、淫羊藿提取物可以是市售的或者是藥材醇提取物、藥材水提取物、藥材水提醇沉提取物、藥材半仿生提取物、藥材超臨界萃取物或者以上各提取物的精制品。
7.按照權(quán)利要求5所述的抗病毒中藥制劑，其特征在于所述的藥物有效部位可以是市售的或采用以下方法制備的(1)黃芩總黃酮或黃芩苷有效部位是這樣制備的取黃芩藥材，粉碎后加入水或乙醇溶液提取，合并提取液，過濾，濃縮得黃芩總黃酮粗提物，在此基礎(chǔ)上采用乙醇沉淀法、柱層析法、萃取法、絮凝沉淀法中的一種或幾種聯(lián)合使用進(jìn)行適當(dāng)精制，得黃芩總黃酮或黃芩苷；(2)淫羊藿總黃酮有效部位是這樣制備的取淫羊藿藥材，粉碎后加入水或乙醇溶液提取，合并提取液，過濾，濃縮得淫羊藿總黃酮粗提物，在此基礎(chǔ)上采用乙醇沉淀法、柱層析法、萃取法、絮凝沉淀法中的一種或幾種聯(lián)合使用進(jìn)行適當(dāng)精制，得淫羊藿總黃酮；(3)梔子總苷有效部位是這樣制備的取梔子藥材，粉碎后加入水或乙醇溶液提取，合并提取液，過濾，濃縮得梔子總苷粗提物，在此基礎(chǔ)上采用乙醇沉淀法、柱層析法、萃取法、絮凝沉淀法中的一種或幾種聯(lián)合使用進(jìn)行適當(dāng)精制，得梔子總苷。
8.按照權(quán)利要求7所述的抗病毒中藥制劑，其特征在于所述的藥物有效部位可以是市售的或采用以下方法制備的(1)黃芩總黃酮或黃芩苷有效部位是這樣制備的取黃芩，粉碎后加入10倍量水煎煮3次，每次1小時(shí)，合并煎液，減壓濃縮至2g生藥/ml，濾過，濾液用鹽酸調(diào)節(jié)pH值至1.0～2.0，80℃保溫半小時(shí)，靜置過夜，濾過，沉淀加入3倍量水?dāng)噭?，?0％氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至7.0，加入等量乙醇，攪拌溶解，濾過，濾液用鹽酸調(diào)pH值至1.0～2.0，60℃保溫半小時(shí)，靜置過夜，濾過，沉淀用30％乙醇洗至pH值至7.0，減壓干燥，即得；(2)淫羊藿總黃酮有效部位是這樣制備的取淫羊藿，粉碎后加10倍量70％乙醇加熱回流提取3次，每次1小時(shí)，合并提取液，減壓回收乙醇至60℃時(shí)相對密度為1.05～1.10，加入3倍量水?dāng)嚢枞芙猓瑸V過，濾液過聚酰胺柱，用水和15％乙醇沖洗雜質(zhì)，再用70％乙醇解吸，收集解吸液，減壓回收乙醇，真空干燥，即得；(3)梔子總苷有效部位是這樣制備的取梔子，粉碎后加入8倍量70％乙醇，回流提取3次，每次1小時(shí)，提取液合并后濾過，濾液減壓回收乙醇至60℃時(shí)相對密度為1.05～1.10，加入2倍量水?dāng)嚢枞芙猓瑸V過，濾液過ZTC型大孔吸附樹脂柱，用水沖洗雜質(zhì)，再用40％乙醇解吸，收集解吸液，減壓回收乙醇，真空干燥，即得。
9.按照權(quán)利要求3所述的抗病毒中藥制劑的制備方法，其特征在于所述制劑中的分散片是這樣制備的取黃芩藥材，粉碎后加入10倍量水煎煮3次，每次1小時(shí)，合并煎液，減壓濃縮；取淫羊藿藥材，粉碎后加10倍量70％乙醇加熱回流提取3次，每次1小時(shí)，合并提取液，減壓回收乙醇；取梔子藥材，粉碎后加入8倍量70％乙醇，回流提取3次，每次1小時(shí)，提取液合并后濾過，濾液減壓回收乙醇；干燥，粉碎，混勻，加入10％微晶纖維素、5％羥丙纖維素，分別過120目篩混勻，以1％聚維酮K30乙醇溶液為粘合劑制軟材，制粒，60℃干燥，整粒，加入0.3％硬脂酸鎂，壓片，即得分散片。
10.按照權(quán)利要求3中任意一項(xiàng)所述的抗病毒中藥制劑的制備方法，其特征在于所述制劑中的滴丸是這樣制備的分別取黃芩、淫羊藿、梔子的提取物或有效部位，合并提取物或有效部位，與2倍量的聚乙二醇4000、聚乙二醇6000復(fù)合基質(zhì)混合均勻，聚乙二醇4000∶聚乙二醇6000＝1∶3，水浴上熔融，攪勻，滴于二甲基硅油或其他脂溶性冷卻劑中成丸，即得滴丸。
11.按照權(quán)利要求1～3中任意一項(xiàng)所述的抗病毒中藥制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于所述的質(zhì)量控制方法包括如下方法中的部分或全部(1)抗病毒藥物組合物的指紋圖譜測試，包括以黃芩總黃酮、淫羊藿總黃酮成分特征為主的指紋圖譜和梔子總苷成分特征為主的指紋圖譜中的一種或幾種；(2)黃芩藥材、淫羊藿藥材、梔子藥材、黃芩苷、黃芩苷元、白楊黃素、淫羊藿苷、淫羊藿次苷I、朝鮮淫羊藿苷A，B，C、寶藿苷I，II，VI、梔子苷、總黃酮中全部或部分成分的鑒別測試方法；(3)黃芩苷、黃芩苷元、白楊黃素、淫羊藿苷、淫羊藿次苷I、朝鮮淫羊藿苷A，B，C、寶藿苷I，II，VI、梔子苷、梔子總苷、總黃酮中全部或部分成分的含量測試方法。
12.按照權(quán)利要求1所述的抗病毒中藥制劑的應(yīng)用，其特征在于所述的制劑用于制備治療肺炎、上呼吸道感染、細(xì)菌性感冒、病毒性感冒、禽流感、SARS、哮喘、提高機(jī)體免疫力等疾病的藥物。
全文摘要
本發(fā)明公開了抗病毒中藥制劑及其制備方法、質(zhì)控方法和應(yīng)用，由梔子、黃芩、淫羊藿或是由相應(yīng)重量份藥材經(jīng)提取后得到的提取物或有效部位組成，用于治療肺炎、呼吸道感染、流感、禽流感、SARS、哮喘等疾病。
文檔編號A61K9/00GK101088533SQ200610087579
公開日2007年12月19日 申請日期2006年6月15日 優(yōu)先權(quán)日2006年6月15日
發(fā)明者于文風(fēng) 申請人:北京奇源益德藥物研究所