專(zhuān)利名稱(chēng)：沙棘黃酮循環(huán)超聲波提取方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于植物有效成分提取工藝技術(shù)領(lǐng)域，具體為一種沙棘黃酮循環(huán)超聲波提取方法。
背景技術(shù)：
沙棘Hippophae rhamnoides，又名醋柳、酸刺，為胡頹子科酸刺屬植物，落葉權(quán)木，主要分布在歐亞大陸，在我國(guó)的三北地區(qū)為主產(chǎn)區(qū)。具有很高的食用和藥用價(jià)值，是我國(guó)醫(yī)學(xué)界常用的原料藥材。沙棘中的化學(xué)成分很多，包括氨基酸、維生素、糖類(lèi)、甙類(lèi)及微量元素。黃酮化合物是沙棘中的主要生物活性成份，沙棘黃酮特別是其中的異鼠李素對(duì)心腦血管疾病有一定的療效，尤其對(duì)心絞痛及心功能有明顯改善效果。現(xiàn)有的提取沙棘中黃酮的成熟工藝主要是溶媒法，但是工藝耗時(shí)長(zhǎng)，操作繁瑣，需要設(shè)備龐大，難以控制。近年來(lái)，應(yīng)用超聲波技術(shù)在提取天然產(chǎn)物中顯示出一定的優(yōu)勢(shì)。該技術(shù)是利用超生波產(chǎn)生“機(jī)械振動(dòng)”，“空化現(xiàn)象”以及“熱效應(yīng)”等特性，使植物組織發(fā)生理化性質(zhì)變化，達(dá)到提取有效成分的目的?，F(xiàn)有文獻(xiàn)報(bào)道中，2005年9月出版的《林產(chǎn)化學(xué)與工業(yè)》25卷第三期，“正交試驗(yàn)法優(yōu)選沙棘總黃酮的超聲波提取工藝”給出了利用超聲波技術(shù)對(duì)沙棘葉中的總黃酮提取的優(yōu)化方案，但是結(jié)果表明，總黃酮的提取率最高僅為1.72％。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明為了解決現(xiàn)有傳統(tǒng)工藝中提取沙棘黃酮產(chǎn)率低、操作復(fù)雜的問(wèn)題而提供了一種沙棘黃酮循環(huán)超聲波提取方法。
本發(fā)明是由以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的，一種沙棘黃酮循環(huán)超聲波提取方法，其步驟為，取沙棘果實(shí)壓榨除去果皮和籽，離心除去水份得純果肉，干燥后備用；然后按照液料比3∶1(體積∶重量)的比例加入90～95％的乙醇，具體操作先將90～95％的乙醇投入到循環(huán)提取器中，攪拌下加入干燥好的沙棘果肉，控制提取時(shí)間30～35分鐘，提取溫度為45℃～50℃，然后脫脂，水洗，過(guò)濾，干燥后即得成品。
利用本方法從沙棘果實(shí)中提取的黃酮內(nèi)含的異鼠李素、槲皮素是有效的藥用成分，實(shí)驗(yàn)表明沙棘黃酮是難溶于室溫乙醇的，但是其在乙醇中的溶解度與乙醇的提取溫度成正比，實(shí)際上，溫度越高(最高不超過(guò)85℃)產(chǎn)生的乙醇蒸汽對(duì)設(shè)備產(chǎn)生的壓力越大，這樣一來(lái)就需要使用復(fù)雜和高性能的設(shè)備；而且高溫還能破壞最有藥效價(jià)值的成份，經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)確定45～50℃是最佳溫度范圍。經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)證明，如果采用濃度低于90％的乙醇，則沙棘果實(shí)中的其它成份也被較多地提取出來(lái)，如果要從中篩選出有效的藥用成分，則必須進(jìn)一步精致，使用的工藝很復(fù)雜；對(duì)本發(fā)明制藥的目的而言，雜質(zhì)增多不但影響有效的藥用成份的含量還會(huì)影響有效成份對(duì)人體的療效。90％的乙醇還容易回收利用，回收設(shè)備最高能回收到95％的乙醇。最終本發(fā)明所述的工藝總黃酮提取率為5.8％～6.0％。
沙棘黃酮提取物中異鼠李素的含量測(cè)定含量測(cè)定方法高效掖相色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VID)。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅頑鍵合硅膠為填充劑；甲醇-0.4％磷酸溶液(58∶42)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為270nm。理論板數(shù)按異鼠李素峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。
對(duì)照樣品溶液的制備精密稱(chēng)取異鼠李素對(duì)照樣品適量，加甲醇制成每毫升含異鼠李素10μg的溶液，即得。
供試樣品的制備取本品粉末0.5克，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入乙醇50毫升稱(chēng)定重量，加熱回流1小時(shí)，放冷，再稱(chēng)定重量，用乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)。精密量取續(xù)濾液25毫升，置于具塞錐形瓶中，加鹽酸3.5毫升，在75℃水浴中加熱水解1小時(shí)，立即冷卻，轉(zhuǎn)移至50毫升量瓶中，用適量乙醇洗滌容器，洗液并入同一量瓶中，加乙醇至刻度，搖勻，濾過(guò)，取濾液1毫升，轉(zhuǎn)移至25毫升量瓶中，加乙醇至刻度，搖勻，即得。
測(cè)定法分別精密吸取異鼠李素對(duì)照樣品10μl與供試樣品溶液各5μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
以測(cè)定其中一次提取的沙棘黃酮樣品為例本品按干燥品計(jì)算含異鼠李素(C16H12O7)的量。供試品由順天制藥有限公司提供，取樣量，0.50781克；異鼠李素對(duì)照樣品溶液10.78μg/ml(山西省藥品檢驗(yàn)所提供)；如附圖1所示意，出峰時(shí)間7.408、對(duì)照峰面積240.23245；峰高17.64525、峰寬0.2067、板數(shù)7118。如附圖2所示意，出峰時(shí)間6.925、樣品峰面積約515.550、峰高42.65489、峰寬0.1844、板數(shù)7871。
對(duì)照峰面積(10μl)240.232，樣品峰面積(5μl)515.550；計(jì)算含量為24.54％。
表1

上表為本工藝實(shí)驗(yàn)若干次提取結(jié)果。
在本發(fā)明中使用的超聲波提取裝置來(lái)源于北京弘祥隆生物技術(shù)開(kāi)發(fā)公司，型號(hào)HF-200B，有效容積200L，超聲功率300～3600W，最大功率5300W，可控溫度室溫～55度，攪拌速度0～2000rpm，材質(zhì)不銹鋼，處理能力30～70kg/hr，能耗0.1～0.15KW/kg，其上的循環(huán)提取器是實(shí)現(xiàn)本工藝的主要場(chǎng)所，乙醇和沙棘果肉混合物主要在循環(huán)提取器不斷循環(huán)，接受超聲波的作用，時(shí)間為主要指標(biāo)。
本方法與傳統(tǒng)的溶媒加熱回流提取法相比，提取率相當(dāng)，但是本工藝所用時(shí)間短，僅為溶媒法的1/6；而且提取乙醇用量少，耗損量?jī)H為溶媒法的1/10，設(shè)備占地面積小，節(jié)約了能源，提高了經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。與對(duì)比文獻(xiàn)上提到的工藝相比，本發(fā)明得到的產(chǎn)物有效成份純度高，主要成份集中為異鼠李素、槲皮素，而對(duì)比文獻(xiàn)所述工藝得到的是總黃酮，提取率僅為1.72％而且并沒(méi)有指出其中有效的藥用成份的種類(lèi)和含量及藥用療效。


圖1為對(duì)照品的色譜2為樣品的色譜圖具體實(shí)施方式
實(shí)施例1一種沙棘黃酮循環(huán)超聲波提取方法，其步驟為，取沙棘果實(shí)壓榨除去果皮和籽，離心除去水份得純果肉，干燥后備用；然后按照液料比3∶1(體積∶重量)的比例加入90％的乙醇，具體操作先將90％的乙醇投入到循環(huán)提取器中，攪拌下加入干燥好的沙棘果肉，控制提取時(shí)間30分鐘，提取溫度為45℃，然后脫脂，水洗，過(guò)濾，干燥后即得成品。沙棘原料選自本公司沙棘種植基地。
最后以提取物為原料，加入糖粉，糊精，羧甲基淀粉鈉，微晶纖維素，泊洛沙姆混合物用乙醇做濕潤(rùn)劑，制粒，60℃干燥后加入硬脂酸鎂壓片，每片中所含主要藥用成份以異鼠李素計(jì)，不低于5mg。
實(shí)施例2一種沙棘黃酮循環(huán)超聲波提取方法，其步驟為，取沙棘果實(shí)壓榨除去果皮和籽，離心除去水份得純果肉，干燥后備用；然后按照液料比3∶1(體積∶重量)的比例加入95％的乙醇，具體操作先將95％的乙醇投入到循環(huán)提取器中，攪拌下加入干燥好的沙棘果肉，控制提取時(shí)間35分鐘，提取溫度為50℃，然后脫脂，水洗，過(guò)濾，干燥后即得成品。
實(shí)施例3一種沙棘黃酮循環(huán)超聲波提取方法，其步驟為，取沙棘果實(shí)壓榨除去果皮和籽，離心除去水份得純果肉，干燥后備用；然后按照液料比3∶1(體積∶重量)的比例加入92％的乙醇，具體操作先將92％的乙醇投入到循環(huán)提取器中，攪拌下加入干燥好的沙棘果肉，控制提取時(shí)間33分鐘，提取溫度為48℃，然后脫脂，水洗，過(guò)濾，干燥后即得成品。
權(quán)利要求
1.一種沙棘黃酮循環(huán)超聲波提取方法，其特征在于步驟為，取沙棘果實(shí)壓榨除去果皮和籽，離心除去水份得純果肉，干燥后備用；然后按照液料比3∶1(體積∶重量)的比例加入90～95％的乙醇，具體操作先將90～95％的乙醇投入到循環(huán)提取器中，攪拌下加入干燥好的沙棘果肉，控制提取時(shí)間30～35分鐘，提取溫度為45℃～50℃，然后脫脂，水洗，過(guò)濾，干燥后即得成品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的沙棘黃酮循環(huán)超聲波提取方法，其特征在于乙醇優(yōu)選90％，提取時(shí)間優(yōu)選30分鐘，提取溫度為45℃～50℃。
全文摘要
本發(fā)明屬于植物有效成分提取工藝技術(shù)領(lǐng)域，具體為一種沙棘黃酮循環(huán)超聲波提取方法。解決了現(xiàn)有傳統(tǒng)工藝中提取沙棘黃酮產(chǎn)率低、操作復(fù)雜的問(wèn)題。其步驟為，取沙棘果實(shí)壓榨除去果皮和籽，離心除去水份得純果肉，干燥后備用；然后按照液料比3∶1的比例加入90～95％的乙醇，將乙醇投入到循環(huán)提取器中，攪拌下加入干燥好的沙棘果肉，提取時(shí)間30～35分鐘，溫度為45℃～50℃，然后脫脂，水洗，過(guò)濾，干燥后即得成品。但是本工藝所用時(shí)間短，僅為溶媒法的1/6；而且提取乙醇用量少，耗損量?jī)H為溶媒法的1/10，設(shè)備占地面積小，節(jié)約了能源，提高了經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。得到的產(chǎn)物有效成份純度高，主要成份集中為異鼠李素、槲皮素。
文檔編號(hào)A61K36/185GK1900098SQ200610090929
公開(kāi)日2007年1月24日 申請(qǐng)日期2006年7月4日 優(yōu)先權(quán)日2006年7月4日
發(fā)明者馬晉鵬, 齊坤華, 馬馳, 逯轉(zhuǎn)林 申請(qǐng)人:山西順天制藥有限公司