專利名稱：前列地爾納米粒及其制備方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種前列地爾納米粒及其制備方法，其特征在于包含前列地爾、載體、穩(wěn)定劑和水，其中載體選用了新型輔料脂肪酸泊洛沙姆膽固醇酯(PPGC)和脂肪酸PEG膽固醇酯(PEGP)，制備的納米粒粒徑≤1um，具有載藥量高和穩(wěn)定性好的優(yōu)點。
背景技術：
前列地爾又名前列腺素E1，來自20碳脂肪酸，內(nèi)源性PGE1可由幾乎所有體內(nèi)細胞產(chǎn)生。是人體內(nèi)存在的廣譜性物質(zhì)，具有強烈的擴張血管和抑制血小板聚集的作用，對早期血管病變可改善微循環(huán)，對閉塞性血管病變可促使側(cè)枝循環(huán)的建立，從而緩解心絞痛，減少心肌梗塞的發(fā)生和縮小梗塞面積。因其作用迅速，療效肯定，越來越多地用于冠心病的治療。瑞典醫(yī)學研究人員因發(fā)現(xiàn)并研究前列地爾而獲1982年諾貝爾醫(yī)學獎。
1995年北京泰德制藥引進國外先進的制藥技術，前列地爾注射液(脂肪乳)。從臨床應用情況來看，前列地爾注射液(脂肪乳)與凍干粉針相比，解決凍干粉針難以忍受的血管刺激性問題，深受臨床大夫和患者的好評。但是由于前列腺素E1在水溶液狀態(tài)下不穩(wěn)定，容易降解，所以需要冷藏保存、冷藏運輸，這樣就使前列地爾注射液的使用成本不但增加而且很不方便，有效期只有一年。
聚乙二醇(PEG)為環(huán)氧乙烷和水縮聚而成的混合物，其分子量范圍為1500-40000。
泊洛沙姆(Poluoshamu)商品名叫pluronic(普流羅尼)F-68。是白色或微黃色半透明蠟狀固體，微有異臭。在水中和乙醇中易溶，在無水乙醇和乙酸乙酯中溶解。用途用作表面活性劑、乳化劑、栓劑基質(zhì)、賦形劑等。Poloxamer因有顯著的防止溶血作用，可用于靜脈注射制劑，對某些藥可以起到助溶作用。
泊洛沙姆分子式H(C2H4O)a(C3H6O)b(C2H4O)cOH，其中a和c為2～130，b為15～67，含聚氧乙烯為81.8％±1.9％。平均分子量為1000～7000的應為標示量的90.0％～110.0％。平均分子量為7000。
膽固醇又稱膽甾醇，是一種環(huán)戊烷多氫菲的衍生物，由留體部分和一條長的側(cè)鏈組成。在納米制劑中常作為穩(wěn)定劑使用。
鑒于此，本發(fā)明組根據(jù)制劑的要求，采用了由泊洛沙姆(POL)或聚乙二醇(PEG)和膽固醇以脂肪二酸或脂肪酸酐結(jié)合的新型輔料(Poloxamer-G-Cholesterol，POGC)或(PEG-G-Cholesterol，PEGC)，并以之作為主要輔料制備了前列地爾納米粒，由于新敷料親水端泊洛沙姆和PEG很好的乳化特性及疏水段膽固醇和前列地爾以分子間力很好的結(jié)合，大大提高了納米粒的載藥能力，保證了藥物在納米粒中的穩(wěn)定存在。
本發(fā)明采用新型輔料將前列地爾制成固體納米粒，克服了前列地爾注射液的使用和儲存不方便的缺點(常溫保存，有效期兩年)，與前列地爾注射液相比更有在體內(nèi)降解緩慢的優(yōu)點。
本發(fā)明采用高壓乳化低溫固化法，以POGC或PEGC為載體材料，制備前列地爾納米粒，并考察其物理穩(wěn)定性，此項工作國內(nèi)外目前未見報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明前列地爾納米粒及其制備方法，其包含前列地爾、載體、穩(wěn)定劑和水，其重量份數(shù)為前列地爾0.0005-0.05載體0.5-10穩(wěn)定劑 1.0-20水 70-99其中載體選擇可生物降解的高分子材料修飾的膽固醇酯，其中可生物降解的高分子材料，具體指泊洛沙姆、聚乙二醇中的一種，形成的物質(zhì)分別命名為脂肪酸泊洛沙姆膽固醇酯(POGC)和脂肪酸PEG膽固醇酯(PEGC)；其中脂肪酸碳原子數(shù)為2-10。
穩(wěn)定劑選擇卵磷脂、三脂肪酸甘油酯、單脂肪酸甘油酯、中的一種或兩種以上；具體包括豆寇酸、棕櫚酸、山榆酸、辛酸、癸酸、單硬脂酸甘油酯、單豆寇酸甘油酯、單棕櫚酸甘油酯、單山榆酸甘油酯、單辛酸甘油酯、單癸酸甘油酯、單硬脂酸甘油酯、二豆寇酸甘油酯、二棕櫚酸甘油酯、二山榆酸甘油酯、二辛酸甘油酯、二癸酸甘油酯、硬脂酸三甘油酯、豆寇酸三甘油酯、棕櫚酸三甘油酯、山榆酸三甘油酯、辛酸三甘油酯、癸酸三甘油酯；卵磷脂包括大豆磷脂、蛋黃磷脂、氫化大豆磷脂、氫化蛋黃磷脂、雙肉豆寇磷脂酰膽堿、雙肉豆寇磷脂酰甘油、二棕櫚酰磷脂酰膽堿、二硬脂酰磷脂酰膽堿和二硬脂酰磷脂酰甘油。
本發(fā)明前列地爾納米粒還可以含有凍干保護劑，選自葡萄糖、山梨醇、乳糖、麥芽糖、甘露醇、海藻糖及低分子右旋糖苷中的一種或一種以上本發(fā)明前列地爾納米粒，其中納米粒的粒徑≤1um。
本發(fā)明用新型輔料泊洛沙姆(POL)或聚乙二醇(PEG)和膽固醇以脂肪二酸或脂肪酸酐結(jié)合的新型輔料(Poloxamer-G-Cholesterol，POGC)或(PEG-G-Cholesterol，PEGC)其合成方法如下將3～10g膽固醇和0.1～1g 4-二甲胺基吡啶(DMAP)置于0.01～1ml二氯甲烷(或者DMF)中，攪拌，緩慢加入0.5～2.0g脂肪酸酐，氮氣保護下反應2h，自然冷卻后順序加入20-50g聚乙二醇或100～150g泊洛沙姆和1.0～3.0g二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)，緩慢攪拌24hr至1周，反應完成后旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，產(chǎn)物以氯仿溶解，經(jīng)乙醚沉淀得粗品；再經(jīng)反復沉淀精制即得脂肪酸泊洛沙姆膽固醇酯或脂肪酸聚乙二醇膽固醇酯。
其中脂肪酸的碳原子數(shù)為2-10。
前列地爾納米粒的制備工藝將處方量的前列地爾、POGC或PEGP及穩(wěn)定劑加熱溶融，加入適量滅菌注射用水中，攪拌使溶解；混合上述兩種體系，加水至100ml，高速攪拌得初乳；通氮氣條件下，將制備好的初乳用高壓均質(zhì)機均質(zhì)至經(jīng)過激光粒度儀檢測符合粒度要求，調(diào)節(jié)PH值5.0～7.0，上述液體中加入處方量的凍干保護劑，攪拌溶解，除菌過濾，灌裝，冷凍干燥即得。
前列地爾納米粒為白色疏松塊狀物，復溶后平均粒徑控制在0.3μm以下，前列地爾的包封率達到95％以上。
具體實施例實施例一組方前列地爾0.0005-0.05g、POGC0.5～10.0g、單硬脂酸甘油酯1.0～6.0g、脂肪酸1.0～6.0g、卵磷脂2.0～6.0g、甘露醇2.0～10.0g，注射用水添至30ml。
制備方法一a)將單硬脂酸甘油酯2.0g、脂肪酸1.0g、卵磷脂1.0g、POGC2.0g及前列地爾1mg加熱熔融，加入處方量的注射用水(PH10-11)和甘露醇5.0g攪拌制成初乳，調(diào)節(jié)PH值4.5～7.0，再用高壓均質(zhì)機對初乳體系進行循環(huán)高壓均質(zhì)乳化至粒度符合規(guī)定。
b)上述乳劑過濾后，冷凍干燥，充氮氣壓蓋既得。
制備方法二a)將單硬脂酸甘油酯3.0g、脂肪酸1.0g、卵磷脂1.0g、POGC 10.0g及前列地爾50mg加熱熔融，加入處方量的注射用水(PH10-11)和甘露醇10.0g攪拌制成初乳，調(diào)節(jié)PH值4.5～7.0，再用高壓均質(zhì)機對初乳體系進行循環(huán)高壓均質(zhì)乳化至粒度符合規(guī)定。
b)上述乳劑過濾后，冷凍干燥，充氮氣壓蓋既得。
實施例二組方前列地爾0.0005-0.05g、PEGC1.0～10.0g、單硬脂酸甘油酯1.0～6.0g、卵磷脂2.0～6.0g、甘露醇2.0～6.0g，注射用水添至30ml。
a)將單硬脂酸甘油酯1.0g、卵磷脂1.0g、PEGC3.0g及前列地爾0.0005g加熱熔融，加入處方量的注射用水(PH10-11)和甘露醇5.0g攪拌制成初乳，調(diào)節(jié)PH值4.5～7.0，再用高壓均質(zhì)機對初乳體系進行循環(huán)高壓均質(zhì)乳化至粒度符合規(guī)定。
b)上述乳劑過濾后，冷凍干燥，充氮氣壓蓋既得。
實施例三組方前列地爾0.0005-0.05g、POGC 1.0～8.0g、單月桂酸酸甘油酯1.0～6.0g，卵磷脂1.0～3.0g、甘露醇2.0～6.0g、低分子右旋糖苷2.0～6.0g，注射用水添至100ml。
前列地爾0.005g、POGC0.5g、單月桂酸酸甘油酯2.0g和卵磷脂1.0g加熱溶融，加入甘露醇3.0g的適量水溶液中，攪拌均勻，高速攪拌至乳滴平均粒徑≤0.5微米，加入凍干保護劑低分子右旋糖苷2.0g，溶解過濾后，冷凍干燥，充氮氣壓蓋既得。
實施例四組方前列地爾0.0005-0.05g、PEGC 1.0～8.0g、單癸酸甘油酯1.0～6.0g、甘露醇2.0～6.0g，海藻酸鈉2.0～10.0g，注射用水添至30ml。
a)將處方量的前列地爾0.005g、PEGC5.0g、單癸酸甘油酯2.0g加熱熔融，加入處方量的注射用水和甘露醇5.0g攪拌制成初乳，調(diào)節(jié)PH值4.5～7.0，再用高壓均質(zhì)機對初乳體系進行循環(huán)高壓均質(zhì)乳化至粒度≤0.5微米；加入適量凍干保護劑海藻酸鈉5.0g，過濾后，冷凍干燥，充氮氣壓蓋既得。
實施例五(血管刺激性試驗)試驗藥物按照實施例(一、二、四、五)提供方法制備，前列地爾凍干粉針，從市場購得，試驗時用0.9％氯化鈉注射液配制成5％溶液。
試驗動物健康家兔，體重2.0～2.2kg。
試驗方法取健康家兔12只，雌雄各半。按體重及性別分組，0.9％氯化鈉注射液為對照組、前列地爾注射液組和實施例(一、二、三、四)組，每組2只，于家兔左耳耳緣按臨床給藥濃度靜脈滴注10ml/kg，滴注速度1ml/分，每日1次，連續(xù)7日。對照組同法靜脈滴注0.9％氯化鈉注射液。除每次給藥時及給藥后觀察給藥局部表現(xiàn)外，于末次靜脈滴注后剪下藥側(cè)耳廓，常規(guī)固定后，在距靜脈滴注入針近心端1cm處，每隔1cm切取0.5cm寬標本，共取3塊標本。切片染色，進行鏡下病理觀察，結(jié)果見下表
血管刺激性試驗

備注“++”嚴重、“+”少許、“-”無以上試驗結(jié)果表明，本發(fā)明制備的制劑具有刺激性小的優(yōu)點。
實施例六(藥代實驗比較)試驗藥物按照實施例(一)提供方法制備，試驗時用0.9％氯化鈉注射液配制成含前列地爾5ug/ml的溶液；前列地爾注射液從市場購得，規(guī)格5ug/ml。
試驗動物健康大鼠，體重0.15～0.2kg，共20只，每組10只。
給藥5ml/Kg采血時間點6，15，30，60min，2，4，6，9h結(jié)論本發(fā)明納米粒與市售前列地爾注射液相比，起效時間基本一致，在體內(nèi)清除速度更慢，起到了增效減毒的作用，結(jié)果見說明書附圖1。


Mean-F1為本發(fā)明按照實施例(一)提供方法制備Mean-F2為前列地爾注射液(市售)
權(quán)利要求
1.一種前列地爾納米粒及其制備方法，其特征在于包含前列地爾、載體、穩(wěn)定劑和水，其重量份數(shù)為前列地爾 0.0005-0.05載體 0.5-10穩(wěn)定劑1.0-20水70-99。
2.根據(jù)權(quán)利要求1中的前列地爾納米粒中的載體，其特征在于選擇可生物降解的高分子材料修飾的膽固醇酯；具體選擇泊洛沙姆和聚乙二醇中的一種，形成的物質(zhì)分別為脂肪酸泊洛沙姆膽固醇酯(POGC)和脂肪酸聚乙二醇膽固醇酯(PEGC)，其中脂肪酸碳原子數(shù)為2-10。
3.根據(jù)權(quán)利要求1中的前列地爾納米粒中的穩(wěn)定劑，其特征在于選擇卵磷脂、三脂肪酸甘油酯、單脂肪酸甘油酯和二脂肪酸甘油酯中的一種或一種以上。
4.根據(jù)權(quán)利要求1中的前列地爾納米粒，其特征在于還可以包含凍干保護劑葡萄糖、山梨醇、乳糖、麥芽糖、甘露醇、海藻糖及低分子右旋糖苷中的一種或一種以上。
5.根據(jù)權(quán)利要求1中的前列地爾納米粒，其制備方法為將處方量的前列地爾、POGC或PEGC及穩(wěn)定劑加熱溶融，加入適量滅菌注射用水，攪拌使溶解；混合上述兩種體系，加水至100ml，高速攪拌得初乳；通氮氣條件下，將制備好的初乳用高壓均質(zhì)機至經(jīng)過激光粒度儀檢測符合粒度≤1um，除菌過濾，灌裝，冷凍干燥即得。
6.根據(jù)權(quán)利要求3中的脂肪酸，其特征在于選擇飽和脂肪酸，具體包括豆寇酸、棕櫚酸、山榆酸、辛酸、癸酸、單硬脂酸甘油酯、單豆寇酸甘油酯、單棕櫚酸甘油酯、單山榆酸甘油酯、單辛酸甘油酯、單癸酸甘油酯、單硬脂酸甘油酯、二豆寇酸甘油酯、二棕櫚酸甘油酯、二山榆酸甘油酯、二辛酸甘油酯、二癸酸甘油酯、硬脂酸三甘油酯、豆寇酸三甘油酯、棕櫚酸三甘油酯、山榆酸三甘油酯、辛酸三甘油酯、癸酸三甘油酯。
7.根據(jù)權(quán)利要求3中的卵磷脂，其特征是所述的卵磷脂包括大豆磷脂、蛋黃磷脂、氫化大豆磷脂、氫化蛋黃磷脂、雙肉豆寇磷脂酰膽堿、雙肉豆寇磷脂酰甘油、二棕櫚酰磷脂酰膽堿、二硬脂酰磷脂酰膽堿和二硬脂酰磷脂酰甘油。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種前列地爾納米粒及其制備方法，其特征在于包含前列地爾、載體、穩(wěn)定劑和水，其中載體選用了新輔料脂肪酸泊洛沙姆膽固醇酯(POGC)和脂肪酸PEG膽固醇酯(PEGC)，制備的納米粒粒徑≤1μm，具有載藥量高和穩(wěn)定性好的優(yōu)點。
文檔編號A61K47/32GK1903177SQ200610091038
公開日2007年1月31日 申請日期2006年7月12日 優(yōu)先權(quán)日2006年7月12日
發(fā)明者張文芳 申請人:張文芳