專利名稱：替比夫定的衍生物鹽及其制備方法和藥物應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，涉及替比夫定的衍生物鹽以及其制備方法和它在醫(yī)藥上的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
替比夫定是一種特異性、選擇性的核苷類似物，也稱為LdT，英文名特Telbivudine，其化學(xué)名稱為1-(2’-脫氧-β-L-阿拉伯呋喃糖基)-胸腺嘧啶，分子結(jié)構(gòu)式如下 分子式C10H14N2O5。替比夫定對乙型肝炎(HBV)病毒有很強的抑制作用，根據(jù)基于HBV感染的體外模型，以及乙型肝炎感染的試驗性感染動物模型，顯示出高效、安全的治療作用。
國際公布WO00/09531(其在中國專利號99809553.2，公開號CN1320128)公開了替比夫定在治療乙肝病毒感染的用途及藥物組合物等。
替比夫定的水溶性較差，不利于藥物制劑的制備和藥物的應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種高水溶性、穩(wěn)定的替比夫定的金屬鹽衍生物，尤其是替比夫定的鈉鹽和鉀鹽衍生化合物、以及其水合物，更進一步地，本發(fā)明還提供一種制備替比夫定的金屬鹽衍生物或其水合物的方法，還提供了替比夫定的金屬鹽衍生物或其水合物的制劑組合物及其組合物的制備方法。
發(fā)明人通過大量實驗和分析發(fā)現(xiàn)，替比夫定的尿嘧啶環(huán)上的 官能團的氫元素有很微弱的電離趨勢而顯現(xiàn)極弱的酸性，并且在溶劑介質(zhì)中尤其是在堿性的溶劑介質(zhì)(如堿性的水溶液、醇溶液)中，以及分子的空間位阻效應(yīng)，使得尿嘧啶環(huán)上的 與4位酮基存在著烯醇式結(jié)構(gòu)的互變，這給本發(fā)明替比夫定的金屬鹽衍生物的合成帶來可能，即替比夫定是可以制備成堿金屬鹽形式的。本發(fā)明提供具有如下結(jié)構(gòu)式的替比夫定的金屬鹽化合物，其藥物上可接受的溶劑化物或其水合物 式中X是堿金屬陽離子，例如鈉、鉀、鎂、鈣等，即X＝Na，K，1/2Mg，1/2Ca。特別地，優(yōu)選X為Na和K離子，即替比夫定的鈉鹽和替比夫定的鉀鹽，其分別有如下的結(jié)構(gòu)式，替比夫定鈉 替比夫定鉀
本發(fā)明替比夫定的金屬鹽化合物是一種固體化合物，在制備過程中，為保持特有結(jié)構(gòu)形態(tài)，會含有一定量的水分子，因此本發(fā)明還提供了替比夫定金屬鹽化合物的水合物，其分子結(jié)構(gòu)式如下 其中，X是堿金屬陽離子，優(yōu)選X為Na和K離子，a為每分子替比夫定金屬鹽所含結(jié)晶水的個數(shù)，a可以是整數(shù)，也可以是小數(shù)，a的取值范圍為0.5～5。
應(yīng)當(dāng)說明的是，固體化合物帶有結(jié)晶水通常受到結(jié)晶方法、結(jié)晶環(huán)境(如溫度、溶劑、蒸氣壓)、晶種引導(dǎo)結(jié)晶和預(yù)處理等條件的影響，因此，本發(fā)明規(guī)定了a的取值范圍為0.5～5，通常a值的為0.5、1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5，分別稱之為替比夫定金屬鹽(鈉鹽或鉀鹽)的半水合物、一水合物、一倍半水合物、二水合物、二倍半水合物、三水合物、三倍半水合物、四水合物、四倍半水合物、五水合物。
由分子結(jié)構(gòu)式可以看出，本發(fā)明提供的替比夫定金屬鹽(鈉鹽或鉀鹽)，作為替比夫定的金屬鹽衍生物，其分子結(jié)構(gòu)與替比夫定相比，在引入金屬離子(Na+或K+)后，碳-氮鍵由單鍵變?yōu)殡p鍵，而碳-氧雙鍵的羰基也變?yōu)樘?氧單鍵，最終形成本發(fā)明的替比夫定金屬鹽(鈉鹽或鉀鹽)?？梢钥闯?，這種由于Na+或K+的參與而發(fā)生的替比夫定的烯醇異構(gòu)而成鹽的過程不是通常的酸堿中和反應(yīng)，而是發(fā)生分子鍵位結(jié)構(gòu)上的重新組合，因此，所形成的本發(fā)明替比夫定的金屬鹽(鈉鹽或鉀鹽)是替比夫定的一種特異性的金屬鹽(鈉鹽或鉀鹽)化合物，這是本發(fā)明替比夫定金屬鹽(鈉鹽或鉀鹽)的結(jié)構(gòu)特點。
但是，也應(yīng)當(dāng)理解，本發(fā)明所述的替比夫定的鈉鹽、鉀鹽或其水合物，對于它的各種固體或溶解的鹽來說，在哪種情況下，上述表示的分子結(jié)構(gòu)式都不能被理解為它顯示了金屬離子和有機陰離子的實際相對排列。金屬離子還可位于相對陰離子中的原子的另一個位置，例如它可以是與尿嘧啶上-CO-N-基團的氮原子配位的，或者是與尿嘧啶2位碳相連的氧元素配位的，這些配位的位置也是分子內(nèi)部結(jié)構(gòu)的元素之間共振運動的體現(xiàn)，例如可以是用下式V或VI的結(jié)構(gòu)式表示 式中X是堿金屬陽離子，優(yōu)選X為Na和K離子。
本發(fā)明提供一種制備上述替比夫定的鈉鹽、鉀鹽或其水合物的方法，包括使替比夫定與能提供所期望的堿金屬陽離子的適宜堿在適合的溶劑中反應(yīng)，并向反應(yīng)液中加入丙酮或異丙醇作為反溶劑，使所期望的鹽在溶液中沉淀析出，并進一步對沉淀物進行干燥。
在上述制備中，能提供所期望的堿金屬陽離子的適宜堿是氫氧化鈉、甲醇鈉、乙醇鈉和氫氧化鉀、甲醇鉀、乙醇鉀，所采用適合的溶劑是水、甲醇、乙醇或它們?nèi)我鈨煞N或三種的混合物，為了使反應(yīng)充分而完全，反應(yīng)液系統(tǒng)的pH值應(yīng)呈堿性，適宜的是反應(yīng)液系統(tǒng)的pH≥9。
因為替比夫定與氫氧化鈉、醇鈉或氫氧化鉀、醇鉀是等摩爾量反應(yīng)的，且替比夫定相比是貴重原料，在通常情況下，為了使替比夫定充分反應(yīng)、提高收率和降低成本等方面考慮，在投料反應(yīng)時，應(yīng)當(dāng)使氫氧化鈉、醇鈉或氫氧化鉀、醇鉀的摩爾數(shù)等于或略大于替比夫定的摩爾數(shù)。
發(fā)明人從大量實驗操作中發(fā)現(xiàn)，只要替比夫定與等摩爾的堿金屬陽離子的適宜堿的溶液中發(fā)生溶解，即能夠完全地于氫氧化鈉或氫氧化鉀的水溶液，或者是醇鈉或醇鉀的醇溶液中，且溶液的pH值不小于9，通常均能夠使替比夫定與氫氧化鈉或氫氧化鉀或醇鈉或醇鉀充分、完全地發(fā)生反應(yīng)。一般地，通常可采用濃度為0.01～2mol/L的氫氧化鈉/氫氧化鉀的醇溶液(包括甲醇、乙醇或它們兩者任意比的混合溶液等)或水溶液，優(yōu)選1mol/L的氫氧化鈉/或鉀水溶液，或者適宜濃度的醇鈉/醇鉀的醇溶液(包括甲醇、乙醇或它們兩者任意比的混合溶液等)與替比夫定反應(yīng)，優(yōu)選氫氧化鈉/氫氧化鉀的醇溶液(包括甲醇、乙醇或它們兩者任意比的混合溶液等)；另外，視需要可以對反應(yīng)溶液進行加熱，還可以對反應(yīng)溶液加活性碳進行脫色、精制除菌、過濾處理，還可以在產(chǎn)生沉淀時對反應(yīng)液進行降溫處理。
得到沉淀的粗物之后，用下面的兩種方法，都可以對上述反應(yīng)后的沉淀物進行干燥而得到本發(fā)明替比夫定的金屬鹽或其水合物，方法一.將沉淀物用丙酮或異丙醇洗滌后，將其溶解于水中制成水溶液，用冷凍干燥法進行凍干，得到白色或類白色固體粉末，即得到本發(fā)明替比夫定金屬鹽或其水合物。
方法二.將沉淀物用丙酮或異丙醇洗滌后，于35℃～120℃減壓干燥至恒重，得到白色或類白色固體粉末，即得到本發(fā)明替比夫定金屬鹽或其水合物。
根據(jù)本發(fā)明制備替比夫定金屬鹽或其水合物的技術(shù)方案，其特征是替比夫定與氫氧化鈉、甲醇鈉、乙醇鈉或氫氧化鉀、甲醇鉀、乙醇鉀反應(yīng)。
應(yīng)當(dāng)理解，冷凍干燥是一種成熟的、常規(guī)的干燥方法，冷凍干燥主要有兩個步驟，即冷凍過程和干燥過程，是將溶質(zhì)溶解于水或其它適合的溶劑中，使其在低溫下冷凍凝固，再將其由凝固態(tài)直接升華除去溶劑而得到干燥體，具有易操控、物質(zhì)損失少、不破壞物質(zhì)結(jié)構(gòu)、不產(chǎn)生雜質(zhì)等優(yōu)點。在冷凍過程中，冷卻速度是可以控制的，冷卻速度快，可抑制溶質(zhì)形成晶體的過程，反之亦然，因此，通常干燥后的溶質(zhì)會處于非結(jié)晶狀態(tài)，控制冷凍過程中冷卻速度，也有可能產(chǎn)生結(jié)晶體或微晶體或它們的混合物。
本發(fā)明替比夫定金屬鹽或其水合物是一種固體化合物，它的固體形態(tài)，可以是晶體、非晶體形態(tài)、也可以是晶體和非晶體的混合物；還應(yīng)當(dāng)理解，替比夫定金屬鹽或其水合物的晶體和非晶體形態(tài)是可以相互轉(zhuǎn)化的，例如可以將非晶體的替比夫定金屬鹽或其水合物乙醇的水溶液中，使其結(jié)晶析出而得到替比夫定金屬鹽或其水合物的晶體形態(tài)的化合物，又例如將晶體形態(tài)的替比夫定金屬鹽或其水合物溶于水中快速冷凍，進行冷凍干燥即可得到非晶體形態(tài)的替比夫定金屬鹽或其水合物，但無論是晶體、非晶體或晶體和非晶體的混合物，都具有本發(fā)明替比夫定金屬鹽或其水合物的分子結(jié)構(gòu)式。
當(dāng)然，本發(fā)明還涉及了替比夫定金屬鹽水合物或溶劑化物，也應(yīng)當(dāng)理解，替比夫定金屬鹽和替比夫定金屬鹽的水合物也是可以相互轉(zhuǎn)化的，例如將替比夫定金屬鹽的水合物減壓加熱至120℃使結(jié)晶水離散而得到不帶結(jié)晶水的替比夫定金屬鹽，又例如將不帶結(jié)晶水的替比夫定金屬鹽溶于水中，用含有水的溶劑進行結(jié)晶或重結(jié)晶處理，可得到替比夫定金屬鹽的水合物。
本發(fā)明所述的替比夫定金屬鹽及其水合物，用于制備治療乙型肝炎病毒感染的藥物中的應(yīng)用。
替比夫定金屬鹽或其水合物作為活性成份用于治療乙型肝炎病毒感染，一般不直接給予患者單純的替比夫定金屬鹽或其水合物的化學(xué)物質(zhì)，通常都是以含有藥用載體的藥物組合物的形式出現(xiàn)，因此，本發(fā)明還提供了相應(yīng)的藥物組合物和制備方法。
一種用于治療乙型肝炎病毒感染的藥物組合物，含有本發(fā)明所述的替比夫定金屬鹽或其水合物和可藥用載體，其中在單位制劑中，替比夫定金屬鹽或替比夫定金屬鹽的水合物的含量為1mg～1000mg，優(yōu)選替比夫定金屬鹽或其水合物的含量為5mg～200mg，更優(yōu)選替比夫定金屬鹽或其水合物的含量為10mg～100mg，例如15mg、20mg、30mg、40mg、50mg、60mg、70mg、80mg、90mg、150mg、200mg，等等。以上所述的組合物，“單位制劑”是指每單個的制劑組合物或單個包裝的藥劑，例如每一粒片劑、每一粒膠囊劑、每一袋顆粒劑、每一瓶口服溶液劑、每一瓶注射液、每一瓶注射用粉針劑，等等。
本發(fā)明所提供的替比夫定金屬鹽及其水合物相比替比夫定而言，具有很好的水溶解性能，是一種理想的原料藥，以本發(fā)明替比夫定金屬鹽或其水合物為活性成份，以及含有一種或一種以上藥學(xué)上可接受的藥用載體，配制成經(jīng)任何適當(dāng)途徑給藥的形式，可制備藥劑學(xué)上可以接受的任何藥物劑型，包括口服制劑、注射制劑、非口服的液體制劑，等等，如口服的片劑、膠囊劑、顆粒劑、口服溶液劑、粉末劑、丸劑、舌下含服劑等等；又如注射劑，包括注射用粉針劑和注射液，等等，再如非口服的滴眼液、滴鼻液、滴耳液、透皮吸收的乳液，等等。也可以是以上各種劑型的速釋、緩釋、控釋等劑型，例如口服的分散片、緩釋片、緩釋膠囊、腸溶片、泡騰片、口腔崩解片、異型片、胞騰顆粒，等等。特別地，按本領(lǐng)域已知方法制備，優(yōu)選用于制備藥劑學(xué)上使用的片劑(包括分散片、緩釋片、腸溶片、泡騰片、口腔崩解片、異型片)、膠囊劑(包括胃溶、腸溶、緩釋膠囊)、顆粒劑、口服溶液劑、注射劑(包括注射用粉針劑和注射液)等，以滿足臨床使用上的各種需要，用于抗乙型肝炎(HBV-DNA)病毒的治療。
應(yīng)當(dāng)理解，按照本領(lǐng)域熟知的方法，藥用載體是保持藥物劑型的基質(zhì)或輔料，通常根據(jù)不同的藥劑來選用或組合使用，一般包括賦形劑或稀釋劑，例如微晶纖維素、乳糖、淀粉、糊精、磷酸鈣、蔗糖、甘露醇、山梨醇、葡萄糖、果糖、水、聚乙二醇、丙二醇、甘油、環(huán)糊精及其衍生物，等等；還可包括粘性物質(zhì)，例如聚維酮、甲基纖維素、羥甲基纖維素、羥丙甲基纖維素、羥丙基纖維素、羥乙基纖維素、明膠、瓜耳膠、黃原膠，等等；還包括潤滑劑，例如硬脂酸鎂、硬脂酸、滑石粉、硬脂基富馬酸鈉、月桂基硫酸鈉，等等；還可包括崩解劑，例如羧甲基纖維素鈉、交聯(lián)聚維酮、預(yù)膠化淀粉、玉米淀粉，等等；還可包括pH值調(diào)節(jié)劑或緩沖劑，例如磷酸鹽緩沖液、檸檬酸、檸檬酸鈉、醋酸鹽緩沖液、稀鹽酸、碳酸鈉、氫氧化鈉，等等；還可包括防腐劑，例如苯甲酸鈉、山梨酸鉀、對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸丙酯，等等；還可包括穩(wěn)定劑和抗氧劑，例如依地酸鈣鈉、亞硫酸鈉、維生素C，等等；還可包括口味調(diào)節(jié)劑，例如麥芽糖醇、果糖、蔗糖、糖精鈉、桔子香精、草莓香精，等等；另外還可包括其它常規(guī)的、恰當(dāng)?shù)奶砑觿?br> 還應(yīng)當(dāng)理解，物劑型是片劑或膠囊劑時，可以是膜包衣的。用于膜包衣的材料，包括適合的包衣劑，例如羥丙甲基纖維素、羥乙基纖維素、羥丙基纖維素、羥丙甲基纖維素鄰苯二甲酸酯，等等；還可包含增塑劑，例如聚乙二醇、檸檬酸三乙酯，等等；還包括適宜的增溶劑，如聚山梨醇酯-80；還可包含適宜的色素，如二氧化鈦、各種氧化鐵、桃紅色色素，等等。
如上所述的藥物組合物，含有一種或一種以上藥學(xué)上可接受的藥用載體，配制成經(jīng)任何適當(dāng)途徑給藥的形式，可制備藥劑學(xué)上可以接受的任何藥物劑型，替比夫定金屬鹽或其水合物是其中的活性物質(zhì)，具有抑制乙型肝炎病毒復(fù)制的作用，藥物組合物中還可以包含其它具有藥學(xué)活性的物質(zhì)，形成一種復(fù)方的藥物組合物，來聯(lián)合治療頑固的乙型肝炎病毒感染和其它并發(fā)感染。用于此目的合適的其它的藥學(xué)活性的物質(zhì)包括一種或多種抗病毒劑，例如去羥肌苷、拉米夫定、齊多夫定、阿巴卡韋、恩替卡韋、克拉夫定、阿德福韋、阿德福韋酯、泛昔洛韋、更昔洛韋、恩曲他濱、利巴韋林、替諾福韋，等等；還可以包括一種或多種免疫調(diào)節(jié)劑，例如干擾素-α、干擾素-β、干擾素-γ、胸腺肽，等等。
如上所述的藥物組合物的制備方法，該方法包括將替比夫定金屬鹽或其水合物與藥學(xué)上可接受的藥用載體充分混合制成藥劑學(xué)上可接受的任何藥物劑型，優(yōu)選的藥物劑型是片劑(包括分散片、緩釋片、腸溶片、泡騰片、口腔崩解片、異型片等)、膠囊劑(包括胃溶、腸溶、緩釋膠囊)、顆粒劑、口服溶液劑、注射劑(包括注射用粉針劑和注射液)等。通常狀況下，替比夫定金屬鹽或其水合物與藥學(xué)上可接受的藥用載體是以粉末狀態(tài)存在的，將其充分混合對于藥品制劑的質(zhì)量穩(wěn)定有著十分重要的作用，由于作為活性成份的替比夫定金屬鹽或其水合物在藥劑中的含量較小，為了防止活性成份形成聚集，不能通過簡單的混合方法將活性成份與藥用載體制成內(nèi)容物均勻良好的制劑，而應(yīng)當(dāng)通過分級混合才可能使替比夫定金屬鹽或其水合物與藥用載體充分混合；或者特別地，將替比夫定金屬鹽或其水合物溶解于水中形成溶液(基于替比夫定金屬鹽或其水合物具有十分優(yōu)異的水溶性的優(yōu)勢)，然后以噴霧或液流的方式應(yīng)用該溶液與藥用載體充分混合均勻，并有利于在隨后的操作中(如制粒、干燥、攪拌、機械加工等)使活性成份充分混勻和使損失降到最低。
雖然描述了本發(fā)明的具體相關(guān)內(nèi)容，但對本領(lǐng)域有經(jīng)驗的技術(shù)人員顯而易見的某些修改或等同的情形也應(yīng)包括在本發(fā)明范圍之內(nèi)。
本發(fā)明所述的替比夫定金屬鹽或其水合物，用于制備治療乙型肝炎病毒感染的藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明替比夫定鈉鹽和鉀鹽具有出人意料的、良好的水溶解性，經(jīng)實驗測定，在常溫常壓下替比夫定鈉鹽和鉀鹽的水溶解度均大于350mg/ml，遠遠大于替比夫定的水溶解度，這對于替比夫定鈉鹽和鉀鹽在藥物制劑的制備和藥物的應(yīng)用以及藥效的發(fā)揮等方面具有重要的意義。這一優(yōu)良的溶解度提高了它的生物利用度，藥物溶出速度顯著加快，使人體更容易吸收利用。另外，替比夫定鈉鹽和鉀鹽是一種偏堿性的化合物，口服使用時，還可以有效緩沖胃酸對藥物制劑的影響。
替比夫定鈉鹽和鉀鹽為高水溶性的化合物，對于各種藥劑尤其是注射劑、液體制劑的制備更為有利，無需添加各種增溶劑，提高了藥物制劑的質(zhì)量品質(zhì)和安全性；另外，將替比夫定制備為水溶性良好的鈉鹽和鉀鹽，也有利于制備為緩釋劑型(如口服的緩釋片、緩釋膠囊)時藥效成份替比夫定金屬鹽在胃腸液中持續(xù)、穩(wěn)定地釋放，以達到良好的緩慢釋放效果和藥效作用的持續(xù)發(fā)揮；還有，將替比夫定制備為水溶性良好的鈉鹽和鉀鹽，對于藥效成份的吸收利用也有重要的意義。
應(yīng)當(dāng)理解的，替比夫定及其衍生物鹽作為乙肝病毒抑制劑，是需要長期用藥的，用藥周期或療程一般都在半年甚至一年以上，因此，將其制備為口服用的藥劑，使用方便，有利于患者的長期應(yīng)用和依從性，而且口服的藥劑需要經(jīng)過胃腸道的吸收才能進入人體血液以達到抗病毒的作用，口服吸收的好壞，直接影響著藥物的治療效果。按照藥劑學(xué)的概念，生物利用度(Bioavailability)指藥物被吸收進入血液循環(huán)的利用程度和利用速度。本發(fā)明替比夫定金屬鹽或其水合物具有十分優(yōu)良的水溶解性，對于以它為活性成份的口服藥物制劑在吸收進入血液循環(huán)的程度與速度方面，具有重要的促進作用和意義。藥劑進入胃腸后的吸收過程，分兩個階段，即崩解分散和胃腸壁吸收兩個階段，首先需要在胃液或腸液中崩解分散開，然后再接觸并附著于胃腸壁進行吸收而進入血液，這兩個階段都會影響藥物的吸收利用和藥效的發(fā)揮，將替比夫定制備為高水溶性的替比夫定鈉鹽和鉀鹽，藥物溶出速度顯著加快，大大提高了它在胃液或腸液中崩解分散的程度和分散速度，則藥物活性成份與胃腸壁的接觸更充分，附著于胃腸壁吸收而進入血液的活性成份也更加充分，這對于藥效成替比夫定鈉鹽和鉀鹽的生物利用度的提高具有重要意義；還有，替比夫定是“濃度依賴性”的乙肝病毒抑制劑，即抗病毒療效與血藥濃度密切相關(guān)，在一定攝入量下，血藥濃度愈大，抗病毒效果愈好，由于水溶性的極大輻度提高，替比夫定鈉鹽和鉀鹽在胃腸中的吸收速度快、吸收時間更集中，有利于大大提高其吸收后的血藥濃度和血峰濃度(即血液中藥物濃度的最大值)，這對于提高替比夫定鈉鹽和鉀鹽的抗乙肝病毒療效具有重要意義。
本發(fā)明替比夫定鈉/鉀鹽及其水合物在制備治療乙型肝炎病毒感染的藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明替比夫定鈉鹽或/鉀鹽及其水合物的化學(xué)和物理性質(zhì)及藥理特性。
(1)水溶度＞350mg/ml，水溶液呈堿性，(2)水溶液的穩(wěn)定性55℃加熱7天，損失均小于6.5％，(3)固體狀態(tài)的穩(wěn)定性取替比夫定鈉鹽或/鉀鹽樣品置于60℃烘箱中，分別在第0、第5、第10天用HPLC測定其含量，損失均小于4.1％，(4)吸濕穩(wěn)定性分別將替比夫定鈉鹽或/鉀鹽置于恒溫40℃、飽和KNO3溶液和NaCl溶液存在的干燥器中，于第0、10、20天取樣測試，所有樣品含量均大于99.07％，降解物雜質(zhì)未超過1％，(5)體外抗乙肝病毒的生物活性應(yīng)用能夠體外復(fù)制表達HBV轉(zhuǎn)染的2.2.15細胞株，從體外角度，對本發(fā)明替比夫定鈉鹽或/鉀鹽的抗HBV活性進行試驗，2.2.15細胞株為轉(zhuǎn)染了HBV全基因組，能分泌HBV-DNA顆粒的人肝母瘤細胞系，采用檢測細胞培養(yǎng)液上清液中分泌型HBV-DNA滴度的改變是反映HBV-DNA復(fù)制的重要指標。實驗證明，本發(fā)明替比夫定鈉鹽或/鉀鹽對HBV轉(zhuǎn)染的2.2.15細胞株分泌HBV-DNA有很強的抑制作用。


本發(fā)明提供的有關(guān)附圖如下圖1是替比夫定鈉的核磁共振碳譜圖13C NMR(150MHz，DMSO-d6)；圖2是替比夫定鈉的核磁共振氫譜圖1H NMR(600MHz，DMSO-d6)；圖3是替比夫定鉀的核磁共振碳譜圖13C NMR(150MHz，DMSO-d6)；圖4是替比夫定鉀的核磁共振氫譜圖1H NMR(600MHz，DMSO-d6)；圖5是替比夫定鈉的紅外吸收譜圖(KBr壓片)；更進一步的，為了便于比較，本發(fā)明還提供了替比夫定的有關(guān)圖譜，圖6是替比夫定的核磁共振碳譜圖13C NMR(150MHz，DMSO-d6)；圖7是替比夫定的核磁共振氫譜圖1H NMR(600MHz，DMSO-d6)；圖8是替比夫定的紅外吸收譜圖(KBr壓片)。
具體實施例方式
在本發(fā)明的實施過程中，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在不脫離本發(fā)明的范圍和精神實質(zhì)的基礎(chǔ)上產(chǎn)生的各種實施方案和修飾是顯而易見的并且是容易進行的。通過下面的實施例來對本發(fā)明替比夫定的金屬鹽做進一步具體說明，但并不表示實施例對本發(fā)明的限制。
實施例一.替比夫定鈉及其制備取替比夫定0.91g(3.5mmol)，加入甲醇40ml使其溶解，過濾，濾液待用，向濾液中加入含有0.15克氫氧化鈉(3.8mmol)的甲醇溶液7.5ml，攪拌，使溶液均勻，視需要可對反應(yīng)液加熱處理，減壓旋去部份甲醇使之呈膠體狀，然后加入12ml丙酮或異丙醇或丙酮與異丙醇任意比的混合液，放置結(jié)晶后抽濾，濾餅用適量丙酮或異丙醇或丙酮與異丙醇任意比的混合液洗滌2～3次，于45℃真空干燥5小時，即得目標產(chǎn)物。
1HNMR(600MHz.DMSO-d6)δ7.25(1H，S)，6.25(1H，t)，5.49(1H，s)，5.30(1H，s)，4.19(1H，m)，3.66(1H，)，3.52(2H，m)，1.99-1.90(2H，m)，1.69(3H，s)ppm。
13CNMR(150MHz.DMSO-d6)δ174.3，158.4，134.0，109.1，86.4，83.9，70.6，61.7，39.6，13.9ppm。
在上述制備中，也可用乙醇代替甲醇，制得本發(fā)明替比夫定鈉。
實施例二.替比夫定鈉及其制備室溫下取替比夫定1.09g(4.2mmol)，加入濃度為1mol/l的氫氧化鈉水溶液4.4ml，攪拌，得到一澄明溶液。如需要，可以對該澄明溶液采用活性碳進行脫色、精濾處理。
向上述澄明溶液加入15ml的丙酮，攪拌1小時，用旋轉(zhuǎn)濃縮儀旋去大部份溶劑后使之呈粘稠態(tài)，再用2min時間向其中滴加丙酮或異醇使之產(chǎn)生稠厚漿狀物并攪拌，抽濾，濾餅用3×10ml異丙醇或丙酮洗滌，于30～35℃的高真空下干燥22小時，即得替比夫定鈉水合物。
如有必要，還可以將洗滌后的濾餅溶解于5ml蒸餾水中進行冷凍干燥而得到替比夫定的鈉鹽及其水合物。
其紅外吸收及核磁共振分析其氫譜和碳譜，與附圖一致。
實施例三.替比夫定鉀及其制備取替比夫定0.99g(3.8mmol)，加入甲醇45ml使其溶解，向溶液中加入含有0.23克氫氧化鉀(4.1mmol)的甲醇溶液2.2ml，攪拌，使溶液均勻，視需要可對反應(yīng)液加熱處理，過濾，將濾液減壓旋去部份甲醇，然后加入8ml丙酮或異丙醇或丙酮與異丙醇任意比的混合液，放置結(jié)晶后抽濾，濾餅用適量丙酮或異丙醇或丙酮與異丙醇任意比的混合液洗滌2～3次，于45℃真空干燥5小時，即得替比夫定鉀。
1HNMR(600MHz.DMSO-d6)δ7.19(1H，S)，6.22(1H，t)，5.47(1H，s)，5.27(1H，s)，4.22(1H，m)，3.66(1H，)，3.52(2H，d)，1.99-1.88(2H，m)，1.66(3H，s)ppm。
13CNMR(150MHz.DMSO-d6)δ173.9，158.1，133.6，109.2，86.4，83.9，70.5，61.7，39.6，14.1ppm。
在上述制備中，也可用乙醇代替甲醇，制得本發(fā)明替比夫定鉀。
實施例四.替比夫定鉀及其制備取替比夫定1.20g(4.6mmol)，加入1mol/l的氫氧化鉀水溶液5ml，攪拌使其溶解澄明，如需要，可以對該澄明溶液采用活性碳進行脫色、精濾處理。
將上述澄明溶液加入到15ml的丙酮(或異丙醇)中，攪拌0.5小時，將反應(yīng)液濃縮使之呈稠狀后用2min時間向其中滴加丙酮或異醇使之產(chǎn)生稠厚漿狀物并攪拌，抽濾，濾餅用3×10ml異丙醇或丙酮洗滌，于30～35℃的高真空下干燥20小時，即得替比夫定鉀。
核磁共振分析其氫譜和碳譜及其紅外吸收，與附圖一致。
實施例五.替比夫定鈉及其制備取替比夫定0.5mmol，加入甲醇9ml使其溶解，向溶液中加入含有0.51mmol的甲醇鈉的甲醇溶液17ml，攪拌，使溶液均勻，減壓旋去大部份甲醇，然后加入3ml丙酮或異丙醇或丙酮與異丙醇任意比的混合液，放置結(jié)晶后抽濾，濾餅用適量丙酮或異丙醇或丙酮與異丙醇任意比的混合液洗滌2～3次，于45℃真空干燥5小時，即得目標產(chǎn)物。
在上述制備中，也可用乙醇代替甲醇，制得本發(fā)明替比夫定鈉。
實施例六.替比夫定鉀及其制備取替比夫定0.57mmol，加入甲醇6.5ml使其溶解，向溶液中加入含有0.57mmol乙醇鉀的甲醇溶液20ml，攪拌，使溶液均勻，視需要可對反應(yīng)液進行精濾處理，將濾液減壓旋去大部份溶劑，然后加入6ml丙酮或異丙醇或丙酮與異丙醇任意比的混合液，放置結(jié)晶后抽濾，濾餅用適量丙酮或異丙醇或丙酮與異丙醇任意比的混合液洗滌2～3次，于40℃真空干燥3小時，即得替比夫定鉀。
在上述制備中，也可用乙醇代替甲醇，制得本發(fā)明替比夫定鉀。
實施例七.替比夫定鈉片劑及制備取替比夫定鈉50g，和其它藥用載體輔料，具體處方成份如下替比夫定鈉 50g淀粉65g乳糖22g聚維酮(K30)2.5g硬脂酸鎂1.5g水 適量按以上配方，進行濕法制粒，使替比夫定鈉與上述藥物載體充分混合均勻，烘干整粒后用壓片機制成1000片，每片含活性成份替比夫定鈉為50mg/片。
另外，也可采用常規(guī)包衣技術(shù)對上述制備的片劑進行包衣處理，可得到包衣膜片，例如可采用含有羥丙甲基纖維素、二氧化鈦、聚乙二醇、聚山梨酯-80、氧化鐵黃、氧化鐵紅、檸檬酸二乙酯和水的包衣溶液進行包衣處理，得到替比夫定鈉包衣膜片。
實施例七.替比夫定鈉膠囊劑取替比夫定鈉100g，和其它藥用載體輔料，具體處方成份如下
替比夫定鈉100g乳糖 80g甲基纖維素5g羧甲基纖維素鈉4g硬脂酸鎂 1.5g水適量按以上配方，進行濕法制粒使替比夫定鈉與上述除硬脂酸鎂外的藥物載體充分混合均勻，烘干整粒后與硬脂酸鎂混勻裝入1000?？招哪z囊中，每粒膠囊中含活性成份替比夫定鈉100mg/粒，供口服使用，用于抗乙肝病毒治療。
實施例八.替比夫定鉀片劑及制備取替比夫定鉀60g，和其它藥用載體輔料，具體處方成份如下替比夫定鉀60g甘露醇50g交聯(lián)羧甲基纖維素 25g淀粉 20g硬脂酸1.2g水適量按以上配方，進行濕法制粒使替比夫定鉀與上述藥物載體充分混合均勻，烘干整粒后用壓片機制成1000片，每片含活性成份替比夫定鉀為60mg/片，供口服使用，用于抗乙肝病毒治療。
實施例九.替比夫定鉀腸溶膠囊劑類似的，取替比夫定鉀50g，加人適量載體輔料(如微晶纖維素、乳糖、聚乙烯吡咯烷酮，等)，濕粒制粒使替比夫定鉀與上述藥物載體充分混合均勻，整粒后加硬脂酸鎂混勻后裝入1000粒腸溶型空心膠囊中，即得每粒含活性成份替比夫定鉀為50mg的腸溶膠囊，供口服使用，用于抗乙肝病毒治療。
實施例十.替比夫定鉀水合物注射用粉針劑取替比夫定鉀100g，甘露醇150g，加注射用水溶解并稀釋至1780毫升，用磷酸鹽緩沖劑調(diào)節(jié)pH為9后加注射用水至2000毫升，精濾，分灌裝至1000瓶西林瓶中，按凍干粉針劑制備工藝進行冷凍干燥，即可制備成1000瓶注射用替比夫定鉀水合物凍干粉針劑，每瓶含替比夫定鉀100mg，供注射使用，用于抗乙肝病毒治療。
實施例十一.替比夫定鈉注射液取替比夫定鈉35g，加注射用水溶解并稀釋至1300毫升，再加入丙二醇90ml后攪拌混勻，再用磷酸鹽緩沖劑調(diào)節(jié)pH為9±0.5后加注射用水至2000毫升，精濾，分灌裝至1000瓶安瓿瓶中，熔封瓶口，即可制備成1000瓶替比夫定鈉注射液，每瓶含替比夫定鈉35mg。供注射使用，用于抗乙肝病毒治療。
實施例十二.替比夫定鉀口服溶液取替比夫定鉀0.5g，麥芽糖醇6g，對羥基苯甲酸甲酯0.2g，桔子香精適量，以上組份加水溶解后用檸檬酸緩沖劑調(diào)pH至7.5～8.5，使溶液總體積為100毫升，分裝至10支玻璃瓶中，封裝，即得每瓶為10ml含替比夫定鉀50mg的口服溶液，可用于兒童抗乙肝病毒的治療。
實施例十三.替比夫定鈉顆粒取替比夫定鈉2g，另取木糖醇30g，淀粉13g，苯甲酸鉀0.3g。用適量水將替比夫定鈉溶解后加入草莓香精適量，濕法制粒、充分混勻、烘干、整粒，包裝成10袋，即制得每袋含替比夫定鈉200mg的顆粒劑，用于抗乙肝病毒的治療。
實施例十四.替比夫定鈉分散片處方替比夫定鈉 55g乳糖45g羧甲基淀粉鈉25g微晶纖維素 70g水 適量硬脂酸鎂2g
制備方法先將上述物料分別粉碎過100目篩。將乳糖、羧甲基淀粉鈉、微晶纖維素充分混合均勻，用替比夫定鈉水溶液噴霧至上述混合后的固體粉末，使替比夫定鈉與上述藥物載體充分混合均勻，制成軟材，40目篩制粒后烘干，40目篩整粒，加入硬脂酸鎂混勻，控制片劑重量，壓制成1000片，即得每片含替比夫定鈉55mg的分散片劑。該片劑在水中能速迅(三分鐘內(nèi))崩解分散，達到速釋起效的作用，用于抗乙肝病毒的治療。
實施例十五.替比夫定鉀片(緩釋劑型)處方替比夫定鉀 100g羥丙基甲基纖維素(K4M) 155g乳糖28g硬脂酸鎂1.8g8％聚維酮水溶液 適量制備方法將替比夫定鉀、羥丙基甲基纖維素(K4M)、乳糖用8％聚維酮水溶液濕法制粒使替比夫定鉀與上述藥物載體充分混合均勻，烘干、整粒后，加入硬脂酸鎂混勻，控制片劑重量，壓制成1000片，即得含量為61mg的替比夫定鉀緩釋片，用于抗乙肝病毒的治療。
羥丙基甲基纖維素為親水性聚合物，在該制劑中作為骨架材料，遇水或消化液膨脹形成凝膠屏障，控制替比夫定鉀的擴散，以起到緩釋的作用。
實施例十六.替比夫定鉀與拉米夫定的復(fù)方片劑選用適合的藥用載體和輔料，按片劑制備方法，制備成每一片藥含替比夫定鉀55mg和拉米夫定100mg的兩種活性成份的復(fù)方片劑。
實施例十七.替比夫定鈉與去羥肌苷的復(fù)方片劑選用適合的藥用載體和輔料，按片劑制備方法，制備成每一片藥含替比夫定鈉100mg和去羥肌苷200mg的兩種活性成份的復(fù)方片劑。
實施例十八.替比夫定鈉與阿德福韋酯的復(fù)方片劑選用適合的藥用載體和輔料，按片劑制備方法，制備成每一片藥含替比夫定鈉100mg和阿德福韋酯10mg的兩種活性成份的復(fù)方片劑。
實施例十九.實施例一至實施例五中任意一項所制備的替比夫定鈉/鉀鹽及其水合物在制備治療乙型肝炎病毒感染的藥物中的應(yīng)用。
權(quán)利要求
1.式(I)所示替比夫定的衍生物，其藥物上可接受的溶劑化物或其水合物 (I)，式中X是堿金屬陽離子，X＝Na，K，1/2Mg，1/2Ca。
2.權(quán)利要求1所述的替比夫定的鈉鹽化合物，具有以下分子結(jié)構(gòu)式
3.權(quán)利要求1所述的替比夫定的鉀鹽化合物，具有以下分子結(jié)構(gòu)式
4.一種替比夫定的金屬鹽的水合物，其分子結(jié)構(gòu)式如下 ，其中，X是Na離子和K離子，a為每分子替比夫定金屬鹽所含結(jié)晶水的個數(shù)，a的取值范圍為0.5～5。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述替比夫定的金屬鹽的水合物，包括替比夫定金屬鹽的半水合物、一水合物、一倍半水合物、二水合物、二倍半水合物、三水合物、三倍半水合物、四水合物、四倍半水合物、五水合物。
6..一種制備權(quán)利要求1至5所述替比夫定的金屬鹽及其水合物的方法，該方法包括使替比夫定與能提供所期望的堿金屬陽離子的適宜堿在適合的溶劑中反應(yīng)，并向反應(yīng)液中加入丙酮或異丙醇，使所期望的鹽在溶液中沉淀析出，并進一步對沉淀物進行干燥。
7.權(quán)利要求6所述的制備方法，能提供所期望的堿金屬陽離子的適宜堿是氫氧化鈉、甲醇鈉、乙醇鈉和氫氧化鉀、甲醇鉀、乙醇鉀，所采用適合的溶劑是水、甲醇、乙醇或它們?nèi)我鈨煞N或三種的混合物。
8.權(quán)利要求6所述的制備方法，進一步地可采用下面兩種方法對沉淀物進行干燥方法一.將沉淀物用丙酮或異丙醇洗滌后，將其溶解于水中制成水溶液，用冷凍干燥法進行凍干，得到白色或類白色固體粉末，即得到替比夫定金屬鹽或其水合物。方法二.將沉淀物用丙酮或異丙醇洗滌后，于35℃～120℃減壓干燥至恒重，得到白色或類白色固體粉末，即得即得到替比夫定金屬鹽或其水合物。
9.權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征是替比夫定與氫氧化鈉、甲醇鈉、乙醇鈉或氫氧化鉀、甲醇鉀、乙醇鉀反應(yīng)。
10.一種藥物組合物，含有權(quán)利要求1至5所述的任意一項的替比夫定金屬鹽或其水合物和可藥用載體。
11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的藥物組合物，其中在單位制劑中，替比夫定金屬鹽或替比夫定金屬鹽的水合物的含量為1mg～1000mg，優(yōu)選替比夫定金屬鹽或其水合物的含量為5mg～200mg，更優(yōu)選替比夫定金屬鹽或其水合物的含量為10mg～100mg。
12.用于制備權(quán)利要求10或11所述任一組合物的方法，該方法包括將替比夫定金屬鹽或其水合物與可藥用載體充分混合制成藥劑學(xué)上可接受的任何藥物劑型，優(yōu)選的藥物劑型是片劑、膠囊劑、顆粒劑、口服溶液劑、注射劑。
13.利要求1至5所述的任意一項的替比夫定金屬鹽或其水合物在制備治療乙型肝炎病毒感染的藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及替比夫定的金屬鹽衍生物，尤其是替比夫定的鈉鹽和鉀鹽衍生物、及其水合物，更進一步地，本發(fā)明還提供了制備替比夫定的金屬鹽衍生物或其水合物的方法，還提供了替比夫定的金屬鹽衍生物或其水合物的制劑組合物及其組合物的制備方法以及藥物應(yīng)用。
文檔編號A61P1/16GK1903869SQ20061010121
公開日2007年1月31日 申請日期2006年7月2日 優(yōu)先權(quán)日2006年7月2日
發(fā)明者楊喜鴻 申請人:楊喜鴻