專利名稱：A環(huán)和c環(huán)多氧化取代的五環(huán)三萜及其制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及有機化學和藥物化學領(lǐng)域，具體而言，本發(fā)明涉及A環(huán)和C環(huán)多氧化取代的五環(huán)三萜類衍生物及其制備方法和用途。本發(fā)明將該系列化合物對六種體外培養(yǎng)人體腫瘤細胞株如人前列腺癌細胞(PC-3)，鼻咽癌細胞(CNE)，口腔上皮癌細胞(KB)，人肺癌細胞(A549)，人肝癌細胞(BEL-7404)，人子宮頸癌細胞(Hela)進行了腫瘤細胞生長抑制活性篩選。該類化合物被發(fā)現(xiàn)具有一定的抑制腫瘤細胞生長活性，可預期作為抗腫瘤藥物用途。本發(fā)明還發(fā)現(xiàn)該類化合物對α-葡萄糖苷酶有著較強的抑制作用，可以預期作為防治糖尿病和治療病毒類疾病用藥。

背景技術(shù)：
腫瘤疾病的發(fā)病率和致死率不斷上升。然而治療腫瘤疾病的特效藥尤其是目前抗腫瘤臨床所用細胞毒性藥物的選擇性不高所導致的對正常細胞的惡性殺傷，限制了該類藥物的普遍適用性。因此，尋找和發(fā)現(xiàn)新的選擇性高的細胞毒性抗腫癌藥物是世界范圍內(nèi)的研究熱點。我們也致力于抗腫瘤藥物的研究。五環(huán)三萜酸類及三萜類化合物因其特殊的細胞毒性引起廣泛的興趣(Chi-I Chang等，Journal of Natural Products，(天然產(chǎn)物雜志)，2004年67卷，91-93頁)，有希望從中發(fā)現(xiàn)能夠成為新的抗腫瘤藥物的先導化合物。因此本發(fā)明的目的在于對這類化合物進行合成和結(jié)構(gòu)改造，以期尋找對腫瘤細胞株生長產(chǎn)生更強抑制作用的A環(huán)和C環(huán)多氧化取代的五環(huán)三萜類衍生物。根據(jù)中國的常發(fā)腫瘤疾病譜及腫瘤細胞的敏感性，我們選擇了人前列腺癌細胞(PC-3)，鼻咽癌細胞(CNE)，口腔上皮癌細胞(KB)，人肺癌細胞(A549)，人肝癌細胞(BEL-7404)，人子宮頸癌細胞(Hela)六株腫瘤細胞作為體外細胞毒活性藥理評價的指標。
α-葡萄糖苷酶(α-glucosidase)抑制劑是篩選抗II型糖尿病藥物的有效酶模型。成功的例子是國外按照該酶抑制劑活性篩選出的藥物阿卡波糖。同時，有報道指出，α-葡萄糖苷酶抑制劑與抗病毒活性尤其是HIV病毒有一定的關(guān)聯(lián)度。所以對此酶及該酶的抑制劑之研究方興未艾。為探明本發(fā)明中制備的A環(huán)多氧化取代的五環(huán)三萜類衍生物對該酶的抑制作用，我們以阿卡波糖為陽性對照，以α-葡萄糖苷酶(α-glucosidase)抑制劑為篩選模型進行篩選，以期尋找出該類新化合物防治糖尿病和治療病毒類疾病活性的新用途。


發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的一個目的是提供了具有式(1)所示的A環(huán)和C環(huán)多氧化取代的五環(huán)三萜類的化合物及其可藥用鹽或溶劑化物；
式(1) 其中R1～R5可以相同或不同，分別選自氫，含1～8個碳原子的烷氧基，含1～8個碳原子的酰氧基，含1～8個碳原子的磺酰氧基，鹵素，氨基，硝基，氰基，羥基，羰基；2，3位之間，9，11位之間，12，13位之間，和/或13，18位之間可以各自獨立地是碳碳單鍵或者雙鍵；2，3位之間還可以是環(huán)氧基；R6和R7可以相同或者不同，選自COOH，-CH3，-CH2OH，-COOR8，-CONH2，-CONHR8，-CON(R8)2，其中R8是含1～8個碳原子的烷基，取代或未取代的苯基，取代或未取代的苯烷基；其中“取代或未取代”是指基團可以未被取代或者被取代，用作取代的取代基選自鹵素，氨基，硝基，巰基，氰基，羥基，含1～8個碳的烷氧基，含1～8個碳的?；交?，芳基；其條件是R1～R5不能同時為氫，在A環(huán)上存在一個不為氫的取代基，同時在C環(huán)上也必須至少存在一個不為氫的取代基。(1)當R2，R3，R4為氫，R5為羰基，R6為-COOCH3，或-COOH，R7為甲基，分子中不含雙鍵時，R1不能為羥基，乙酰氧基和羰基；(2)當R3，R4為氫，R5為羰基，R7為甲基，R6為-COOCH3，僅9，11位之間為雙鍵時，R1不能為羰基，羥基，乙酰氧基，R2不能為氰基；(3)當R4為氫，R5為羰基，R7為甲基，2，3位和9，11位之間同時為雙鍵時，R1，R2為氫；(4)當R3，R4為氫原子，R5為羥基，R7為甲基，分子中不含雙鍵時，或者R1，R2均不能為氫，或者R1為α取代，R2可以為氫。(5)當R4為羰基，R5為氫，2，3位之間和12，13位之間同時為雙鍵時，R3不能為氫；(6)當R4為羰基，R5為氫，2，3位之間和12，13位之間同時為雙鍵，R6為-COOCH3，R7為-CH3時，R3不能為乙酰氧基；(7)當R4為羰基，R5為氫，僅12，13位之間為雙鍵時，R1，R3均不能為氫。
本發(fā)明的另一個目的是提供一種式(1)所示的A環(huán)和C環(huán)多氧化取代的五環(huán)三萜類衍生物的制備方法。
本發(fā)明的另一個目的是提供了式(1)化合物用于防治口腔上皮癌、前列腺癌、鼻咽癌、肺癌、肝癌、子宮頸癌及其相關(guān)腫瘤疾病的用途。
本發(fā)明的再一個目的是提供了一種含有式(1)化合物的用于防治口腔上皮癌、前列腺癌、鼻咽癌、肺癌、肝癌、子宮頸癌及其相關(guān)腫瘤疾病的藥物組合物。
本發(fā)明的又一目的是提供了式(1)化合物用于防治糖尿病相關(guān)疾病以及與α-葡萄糖苷酶相關(guān)的病毒性疾病的用途。
本發(fā)明的另一目的是提供了一種含有式(1)化合物的用于防治糖尿病相關(guān)疾病以及與α-葡萄糖苷酶相關(guān)的病毒性疾病的藥物組合物。
本發(fā)明提供了一種具有式(1)所示的A環(huán)和C環(huán)多氧化取代的五環(huán)三萜類衍生物及其可藥用鹽或溶劑化物
式(1) 其中R1～R5可以相同或不同，分別選自氫，含1～8個碳原子的烷氧基，含1～8個碳原子的酰氧基，含1～8個碳原子的磺酰氧基，鹵素，氨基，硝基，氰基，羥基，羰基；2，3位之間，9，11位之間，12，13位之間，和/或13，18位之間可以各自獨立地是碳碳單鍵或者雙鍵；2，3位之間還可以是環(huán)氧基。R6和R7可以相同或者不同，選自COOH，-CH3，-CH2OH，-COOR8，-CONH2，-CONHR8，-CON(R8)2，其中R8是含1～8個碳原子的烷基，取代或未取代的苯基，取代或未取代的苯烷基；其中“取代或未取代”是指基團可以未被取代或者被取代，用作取代的取代基選自鹵素，氨基，硝基，巰基，氰基，羥基，含1～8個碳的烷氧基，含1～8個碳的?；交?，芳基；除非另有說明，本發(fā)明中的烷基是指1～8個碳原子的烷基。其條件是R1～R5不能同時為氫，在A環(huán)上存在一個不為氫的取代基，同時在C環(huán)上也必須至少存在一個不為氫的取代基。(1)當R2，R3，R4為氫，R5為羰基，R6為-COOCH3，或-COOH，R7為甲基，分子中不含雙鍵時，R1不能為羥基，乙酰氧基和羰基；(2)當R3，R4為氫，R5為羰基，R7為甲基，R6為-COOCH3，僅9，11位之間為雙鍵時，R1不能為羰基，羥基，乙酰氧基，R2不能為氰基；(3)當R4為氫，R5為羰基，R7為甲基，2，3位和9，11位之間同時為雙鍵時，R1，R2為氫；(4)當R3，R4為氫原子，R5為羥基，R7為甲基，分子中不含雙鍵時，或者R1，R2均不能為氫，或者R1為α取代，R2可以為氫。(5)當R4為羰基，R5為氫，2，3位之間和12，13位之間同時為雙鍵時，R3不能為氫；(6)當R4為羰基，R5為氫，2，3位之間和12，13位之間同時為雙鍵，R6為-COOCH3，R7為-CH3時，R3不能為乙酰氧基；(7)當R4為羰基，R5為氫，僅12，13位之間為雙鍵時，R1，R3均不能為氫。
本發(fā)明的式(1)化合物中，當R3，R4為氫原子，R5為酮羰基，R7為甲基時，是一類優(yōu)選的式(I)化合物
式(I) 其中R1，R2，R6與式(1)化合物的定義相同；優(yōu)選R1，R2可以相同或者不同，分別選自氫，含1～8個碳原子的酰氧基，含1～8個碳原子的磺酰氧基，鹵素，氨基，硝基，氰基，羥基，羰基，或者R1，R2之間可以形成環(huán)氧基；R6選自-COOH，-CH3，-CH2OH，-COOR8，-COONH2，-CONHR8，-CON(R8)2，其中R8是含1～8個碳原子的烷基，取代或未取代的苯基，取代或未取代的苯烷基； 其條件是1.當R2為氫，R6為-COOCH3時，R1不能為羥基，乙酰氧基或羰基； 2.當R2為氫，R6為-COOH或為-CHO時，R1不能為羰基。
本發(fā)明更優(yōu)選的式(I)化合物及其可藥用鹽或溶劑化物是 3β-甲基磺酰氧基-12-羰基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯(Ia)； 2β，3β-環(huán)氧-12-羰基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯(Ib)； 2α，3β-二羥基-12-羰基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯(Ic)； 3β，28-二羥基-12-羰基-齊墩果烷(Id)； 2α，3β，28-三羥基-12-羰基-齊墩果烷(Ie)。

上述式(I)化合物的制備過程具體舉例說明如下 化合物Ia、Ib、Id、Ie分別由化合物3β-甲基磺酰氧基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯-12-烯、齊墩果烷-28-羧酸甲酯-2，12-二烯、3β，28-二羥基-齊墩果烷-12-烯和28-羥基-齊墩果烷-2，12-二烯與間氯過氧苯甲酸在二氯甲烷作溶劑中反應(yīng)得到。在化合物Ib的四氫呋喃溶液中加入濃硫酸加熱回流得到開環(huán)產(chǎn)物Ic。(參見合成路線1和2) 合成路線如下 合成路線1
合成路線2
為了更好地理解本發(fā)明的實質(zhì)，下面分別用制備實施例的形式說明化合物制備的過程，實施例給出了代表性化合物的部分物理和化學及波譜學數(shù)據(jù)。必須說明，本發(fā)明的實施例是用于說明本發(fā)明而不是對本發(fā)明的限制。根據(jù)本發(fā)明的實質(zhì)對本發(fā)明進行的簡單改進都屬于本發(fā)明要求保護的范圍。
實施例1化合物Ic的制備 化合物齊墩果烷-28-羧酸甲酯-2，12-二烯(1.0mmol)和間氯過氧苯甲酸(2.0mmol)溶解在10亳升二氯甲烷中，室溫攪拌過夜，在反應(yīng)混合液中滴加5滴濃鹽酸，室溫攪拌4小時。加入10毫升水，水層以二氯甲烷10毫升萃取。合并有機層，飽和碳酸氫鈉溶液10毫升洗滌，水洗至中性，無水硫酸鎂干燥。硅膠柱層析(洗脫液石油醚/乙酸乙酯8/1)得到化合物Ib，白色固體，產(chǎn)率50.8％。將化合物Ib加入到5毫升四氫呋喃中，加入5滴濃硫酸，加熱回流1小時。脫去大部分溶劑，加入5毫升乙酸乙酯與5毫升水，水層以乙酸乙酯5毫升萃取，合并有機層，水洗至中性。無水硫酸鎂干燥，硅膠柱層析(洗脫液石油醚/乙酸乙酯4/1)得到化合物Ic，白色固體，產(chǎn)率30.2％。
根據(jù)實施例1的方法制備以下所示實施例2～實施例6化合物 實施例23β-甲基磺酰氧基-12-羰基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯(Ia)的制備，C32H52O6S，MSESI m/e 564(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯3/1)0.54；1HNMR(400MHz)δ2.61(brd，1H，J＝3.6Hz)，2.79(brd，1H，J＝13.6Hz)，3.02(s，3H，CH3S)，3.68(s，3H，OCH3)，4.33(dd，1H，J＝4.8，10.8Hz，H-3)。
實施例32β，3β-環(huán)氧-12-羰基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯(Ib)的制備，C31H48O4，MSESIm/e484(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯5/1)0.52；1HNMR(400MHz)δ2.62(d，1H，J＝4.4Hz，H-13)，2.78(d，1H，J＝4.8Hz，H-18)，2.80(d，1H，J＝3.6Hz，H-3)，3.18(dd，1H，J＝4.0，5.6Hz，H-3)，3.68(s，3H，OCH3)。
實施例42α，3β-二羥基-12-羰基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯(Ic)的制備，C3H50O5，MSESIm/e502(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯2/1)0.05；1HNMR(400MHz)δ2.619(d，1H，J＝3.6Hz，H-13)，2.73(brd，1H，J＝13.6Hz，H-18)，3.61(d，1H，J＝10.0Hz，H-3)，3.67(s，3H，OCH3)，3.74(dd，1H，J＝8.0，18.4Hz，H-2)。
實施例53β，28-二羥基-12-羰基-齊墩果烷(Id)的制備，C30H50O3，MSESIm/e458(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯2/1)0.30；1HNMR(400MHz)δ2.64(d，1H，J＝4.4Hz，H-13)，3.20(dd，1H，J＝4.8，11.6Hz，H-3)，3.47(d，1H，J＝10.8Hz，H-28)，3.51(d，1H，J＝10.8Hz，H-28′)。
實施例62α，3β，28-三羥基-12-羰基-齊墩果烷(Ie)的制備，C30H50O4，MSESIm/e474(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯3/1)0.23；1HNMR(400MHz)δ3.49(brs，1H，H-28，H-28)，3.78(d，1H，J＝11.6Hz，H-3)，4.10(dd，1H，J＝7.6，11.6Hz，H-2)。
本發(fā)明的式(1)化合物中，當13、18位之間是碳碳單鍵或者是碳碳雙鍵，R3，R4為氫原子，R5為羥基，R7為甲基時，是一類優(yōu)選的式(II)化合物

式(II) 其中R1，R2，R6與式(1)化合物的定義相同，R5的羥基可以為α構(gòu)型或β構(gòu)型；優(yōu)選R1，R2可以相同或者不同，分別選自氫，含1～8個碳原子的酰氧基，含1～8個碳原子的磺酰氧基，鹵素，氨基，硝基，氰基，羥基，羰基，或者R1，R2之間可以形成環(huán)氧基；R6選自-COOH，-CH3，-CH2OH，-COOR8，-CONH2，-CONHR8，-CON(R8)2，其中R8是含1～8個碳原子的烷基，取代或未取代的苯基，取代或未取代的苯烷基；其條件是1.當13，18位之間為單鍵，R2為氫，R6為CH2OH時，R1不能是羥基或乙酰氧基；2.當13，18位之間為單鍵，R2為氫，R6為COOCH3時，R1不能為乙酰氧基。
本發(fā)明更優(yōu)選的式(II)化合物是 3α，12α，28-三羥基-齊墩果烷(IIa)； 2α，3β，12α-三羥基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯(IIb)； 2α，3β，12β-三羥基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯(IIc)； 3β，12α-二羥基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯-13(18)-烯(IId)；
述式(II)化合物的制備過程具體舉例說明如下 化合物IIa和IId分別由化合物Ib和3β-羥基-12羰基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯-13(18)-烯經(jīng)氫化鋁鋰還原得到?；衔颕c用氫化鋁鋰還原得到兩個產(chǎn)物IIb和IIc。(見合成路線3和4) 合成路線如下 合成路線3
合成路線4
實施例7化合物IIb和化合物IIc的制備 向氫化鋁鋰(0.9mmol)的5毫升無水四氫呋喃懸浮液中，滴加化合物Ic(0.3mmol)的5毫升無水四氫呋喃溶液。室溫攪拌2小時，滴加1M鹽酸溶腋，待無氣泡放出后，加入10毫升乙酸乙酯。水層以乙酸乙酯10毫升萃取，合并有機層，飽和碳酸氫鈉5亳升洗滌，水洗至中性，無水硫酸鎂干燥。硅膠柱層析(洗脫液石油醚/乙酸乙酯1/1)得到化合物IIb，白色固體，產(chǎn)率15.3％和化合物IIc，白色固體，產(chǎn)率20.6％。
根據(jù)實施例7的方法制備以下所示實施例8～實施例13化合物 實施例83α，12α，28-三羥基-齊墩果烷(IIa)的制備，C30H52O3，MSESIM/e460(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯2/1)0.45；1HNMR(400MHz)δ3.40(brs，1H，H-3)，3.51(d，1H，J＝10.8Hz，H-28)，3.57(d，1H，J＝10.8Hz，H-28′)，3.96(brs，1H，H-12)。
實施例92α，3β，12α-三羥基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯(IIb)的制備，C31H52O5，MSESIm/e504(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯1/1)0.18；1HNMR(400MHz)δ3.64(d，1H，J＝11.2Hz，H-3)，3.67(s，3H，OCH3)，3.74(dd，1H，J＝6.8，8.8Hz，H-2)，4.05(d，1H，J＝2.4Hz，H-12)。
實施例102α，3β，12β-三羥基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯(IIc)的制備，C31H52O5，MSESI m/e 504(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯1/1)0.08；1HNMR(400MHz)δ3.62(d，1H，J＝10.8Hz，H-3)，3.67(m，1H，H-12)，3.69(s，3H，OCH3)，3.71(dd，1H，J＝5.6，10.0Hz，H-2)。
實施例113β，12α-二羥基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯-13(18)-烯(IId)的制備，C31H50O4，MSESI m/e 486(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯3/1)0.63；1HNMR(400MHz)δ3.21(t，1H，J＝8.3Hz，H-3)，3.68(s，3H，OCH3)，429(brs，1H，H-12)。
本發(fā)明的式(1)化合物中，當9，11位之間為雙鍵，2，3位之間是碳碳單鍵或者是碳碳雙鍵，R4為氫原子，R5為酮羰基，R7為甲基時，是一類優(yōu)選的式(IIII)化合物

式(III) 其中R1，R2，R3，R6與式(1)化合物的定義相同；優(yōu)選R1，R2，R3可以相同或者不同，分別選自氫，含1～8個碳原子的酰氧基，含1～8個碳原子的磺酰氧基，鹵素，氨基，硝基，氰基，羥基，羰基，或者R1，R2之間可以形成環(huán)氧基；R6選自-COOH，-CH3，-CH2OH，-COOR8，-CONH2，-CONHR8，-CON(R8)2，其中R8是含1～8個碳原子的烷基，取代或未取代的苯基，取代或未取代的苯烷基； 其條件是1.當2，3位之間為單鍵，R2，R3為氫，R6為-COOCH3時，R1不能為羥基，乙酰氧基或羰基；2.當2，3位之間為單鍵或者是雙鍵，R2為氰基，R3為氫，R6為-COOCH3時，R1不能為羰基或乙酰氧基。
本發(fā)明更優(yōu)選的式(III)化合物是 12-羰基-齊墩果烷-28-酸-2，9(11)-二烯(IIIa)； 2，3-環(huán)氧-12-羰基-28-酸-9(11)-烯(IIIb)； 2α，3β3-二羥基-12-羰基-28-酸-9(11)-烯(IIIc)； 1α-乙酰氧基-12-羰基-28-酸-2，9(11)-二烯(IIId)； 1α-羥基-12-羰基-28-酸-2，9(11)-二烯(IIIe)； 1α-羥基-2α，3α-環(huán)氧-12-羰基-28-酸-9(11)-烯(IIIf)。

IIId IIIeIIIf 上述式(III)化合物的制備過程具體舉例說明如下 化合物3β-甲基磺酰氧基-齊墩果烷-28-酸-12-烯與三氧化鉻在醋酸(含5％酸酐)溶液中室溫攪拌過夜，再脫去甲基磺酸得到化合物IIIa，化合物IIIa和間氯過氧苯甲酸反應(yīng)得到化合物IIIb，環(huán)氧化合物IIIb溶解在四氫呋喃中，滴加濃硫酸加熱回流得到開環(huán)產(chǎn)物IIIc。化合物IIIa被二氧化硒氧化得到化合物IIId，繼而在氫氧化鉀的乙醇溶液中水解得到化合物IIIe。化合物IIIf由化合物IIIe與間氯過氧苯甲酸在二氯甲烷中反應(yīng)得到。(參見合成路線5和6) 合成路線如下 合成路線5
合成路線6
實施例12化合物IIf的制備 將化合物IIIa(1.0mmol)和二氧化硒(2.0mmol)加入到10毫升冰醋酸中，加熱回流兩個小時。濾去過量的二氧化硒，濾液中加入10毫升水和10毫升二氯甲烷。水層用二氯甲烷10毫升萃取。合并有機層，飽和碳酸鈉溶液10毫升洗滌，再水洗至中性。無水硫酸鈉干燥。硅膠柱層析(洗脫液石油醚/乙酸乙酯2/1)，得到黃色固體IIId，產(chǎn)率9.5％。將化合物IId溶解在10毫升乙醇中，加入1毫升氫氧化鉀(0.40mmol)的水溶液，加熱回流2小時。反應(yīng)完成后，脫去大部分溶劑，加入10毫升乙酸乙酯和10毫升水，水層以乙酸乙酯10毫升萃取。合并有機層，1M鹽酸溶液5毫升洗滌，水洗至中性。無水硫酸鎂干燥。硅膠柱層析(洗脫液石油醚/乙酸乙酯2/1)，得到淡黃色固體IIIe，產(chǎn)率22.0％?；衔颕IIe和間氯過氧苯甲酸(0.04mmol)溶解在5毫升二氯甲烷溶液中，室溫攪拌過夜。加入5毫升水，水層以二氯甲烷5毫升萃取，合并有機層，以飽和碳酸氫鈉溶液5毫升洗滌，水洗至中性，無水硫酸鎂干燥。硅膠柱層析(洗脫液石油醚/乙酸乙酯1/1)，得到白色固體IIIf，產(chǎn)物31.2％。根據(jù)實施例12的方法制備以下所示實施例13～實施例18化合物 實施例1312-羰基-齊墩果烷-28-酸-2，9(11)-二烯(IIIa)的制備，C30H44O3，MSESIm/e452(M+)；Rf(石油醚/氯仿/甲醇4/4/0.6)0.67；1HNMR(400MHz)δ2.98(brd，1H，J＝11.2Hz，H-13)，5.43(dd，1H，J＝16.0，1.6Hz，H-3)，5.51(m，1H，H-2)，6.04(s，1H，H-12)。
實施例142，3-環(huán)氧-12-羰基-28-酸-9(11)-烯(IIIb)的制備，C30H44O4，MSESIm/e468(M+)；Rf[(石油醚/乙酸乙酯2/1)+1％甲酸]0.33；1HNMR(400MHz)δ2.95(d，1H，J＝11.2Hz，H-13)，3.20(d，1H，J＝10.0Hz，H-2)，3.32(m，1H，H-2)，6.08(s，1H，H-11)。
實施例152α，3β-二羥基-12-羰基-28-酸-9(11)-烯(IIIc)的制備，C30H46O5，MSESIm/e486(M+)；Rf[(石油醚/乙酸乙酯2/1)+1％甲酸]0.18；1HNMR(400MHz)δ2.96(d，1H，J＝13.2Hz，H-13)，3.67(d，1H，J＝6.8Hz，H-3)，4.12(dd，1H，J＝13.2，6.8Hz，H-2)，6.01(s，1H，H-11)。
實施例161α-乙酰氧基-12-羰基-28-酸-2，9(11)-二烯(IIId)的制備，C32H46O5，MSESI m/e 510(M+)；Rf[(石油醚/乙酸乙酯3/1)+1％甲酸]0.60；1HNMR(400MHz)δ1.87(s，3H，CH3CO)，2.97(d，1H，J＝10.8Hz，H-13)，5.21(d，1H，J＝6.0Hz，H-1)，5.66(m，1H，H-3)，5.81(m，1H，H-2)，5.90(s，1H，H-11)。
實施例171α-羥基-12-羰基-28-酸-2，9(11)-二烯(IIIe)的制備，C30H44O4，MSESIm/e468(M+)；Rf[(石油醚/乙酸乙酯3/1)+1％甲酸]0.60；1HNMR(400MHz)δ2.99(d，1H，J＝10.8Hz，H-18)，4.19(d，1H，J＝6.4Hz，H-1)，5.64(d，1H，J＝9.6Hz，H-3)，5.76(m，1H，H-2)，6.11(s，1H，H-11)。
實施例181α-羥基-2α，3α-環(huán)氧-12-羰基-28-酸-9(11)-烯(IIIf)的制備，C30H44O5，MSESI m/e 484(M+)；Rf[(石油醚/乙酸乙酯2/1)+1％甲酸]0.38；1HNMR(400MHz)δ2.96(d，1H，J＝16.4Hz，H-18)，3.01(brs，1H，H-3)，3.63(dd，1H，J＝4.0，5.6Hz，H-2)，4.20(d，1H，J＝5.6Hz，H-1)，6.16(s，1H，H-12)。
本發(fā)明的式(1)化合物中，當12，13位之間是雙鍵，2，3位之間是碳碳單鍵或者是碳碳雙鍵，R4為酮羰基，R5為氫時，是一類優(yōu)選的式(IV)化合物

式(IV) 其中R1，R2，R3，R6，R7與式(1)化合物的定義相同；優(yōu)選R1，R2，R3可以相同或者不同，分別選自氫，含1～8個碳原子的酰氧基，含1～8個碳原子的磺酰氧基，鹵素，氨基，硝基，氰基，羥基，羰基，或者R1，R2之間可以形成環(huán)氧基；R6，R7選自-COOH，-CH3，-CH2OH，-COOR8，-CONH2，-CONHR8，-CON(R8)2，其中R8是含1～8個碳原子的烷基，取代或未取代的苯基，取代或未取代的苯烷基； 其條件是1.當2，3位之間為雙鍵，R1為羥基，R3為氫，R6為-COOCH3，R7為-CH3時，R2不能為氰基；2.當2，3位之間為雙鍵，R1，R2同時為氫，R6為-CH3，R7為-COOCH3時，R3不能為氫，羰基或羥基；3.當2，3位之間為雙鍵，R1，R2同時為氫，R6為CH3，R7為-COOH或-COOCH3時，R3不能為氫；4.當2，3位之間為單鍵，R3為氫，R6為-CH3，R7為-COOCH3或者為-COOH時，R1，R2不能同時為羥基或形成環(huán)氧；5.當2，3位之間為單鍵，R2為氫或氰基，R3為氫，R6為-COOCH3，R7為-CH3時，R1不能為羰基；6.當2，3位之間為單鍵，R2，R3同時為氫，R6為-COOCH3或-COOH，而R7為-CH3時，R1不能為羥基，羰基或乙酰氧基；7當2，3位之間為單鍵，R2，R3同時為氫，R6為-CH3，R1不能為酰氧基；8.當2，3位之間為單鍵，R2，R3同時為氫，R6為-CH3，R7為-COOH，-COOCH3，R1不能為羥基或羰基。
本發(fā)明更優(yōu)選的式(IV)化合物是 1α-乙酰氧基-11-羰基-齊墩果烷-30-酸-2，12-二烯(IVa)； 1α-羥基-11-羰基-齊墩果烷-30-酸-2，12-二烯(IVb)； 1α-乙酰氧基-11-羰基-齊墩果烷-30-羧酸甲酯-2，12-二烯(IVc)； 1α-乙酰氧基-2α，3α-環(huán)氧-11-羰基-齊墩果烷-30-酸-12-烯(IVd)； 1α-羥基-2α，3α-環(huán)氧-11-羰基-齊墩果烷-30-酸-12-烯(IVe)； 1α-乙酰氧基-2α，3α-環(huán)氧-11-羰基-齊墩果烷-30-羧酸甲酯-12-烯(IVf)； 1α-羥基-2α，3α-環(huán)氧-11-羰基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯-12-烯(IVg)。

上述式(IV)化合物的制備過程具體舉例說明如下 化合物IVa和IVc分別由化合物11-羰基-齊墩果烷-30-酸-2，12-二烯、11-羰基-齊墩果烷-30-羧酸甲酯-2，12烯與二氧化硒在醋酸中回流得到?；衔颕Va在氫氧化鉀的乙醇水溶液中水解得到烯丙基羥基化合物IVb?；衔颕Vd～IVg分別由化合物IVa～IVc、1α-羥基-11-羰基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯-2，12-二烯與間氯過氧苯甲酸室溫反應(yīng)得到。(參見合成路線7和8) 合成路線如下 合成路線7
R3＝OAc，R6＝CH3，R7＝COOH IVa R3＝OAc，R6＝CH3，R7＝COOH IVd R3＝OH，R6＝CH3，R7＝COOH IVb R3＝OH，R6＝CH3，R7＝COOH IVe R3＝OAc，R6＝CH3，R7＝COOCH3IVc R3＝OAc，R6＝CH3，R7＝COOCH3 IVf R3＝OH，R6＝COOCH3，R7＝CH3 R3＝OH，R6＝COOH3，R7＝CH3 IVg 實施例19化合物IVd的制備 化合物IVa(1.0mmol)與間氯過氧苯甲酸(2.0mmo1)溶解在10毫升二氯甲烷中，室溫攪拌4小時。加入15毫升水，水層以二氯甲烷10毫升萃取，合并有機層，飽和碳酸氫鈉溶液10毫升洗滌，水洗至中性，無水硫酸鎂干燥。硅膠柱層析(洗脫液石油醚/乙酸乙酯3/1)，得到白色固體IVd，產(chǎn)率312％。
根據(jù)實施例19的方法制備以下所示實施例20～實施例26化合物 實施例201α-乙酰氧基-11-羰基-齊墩果烷-30-酸-2，12-二烯(IVa)的制備，C32H46O5，MSESI m/e 510(M+)；Rf(石油醚/氯仿/甲醇4/4/0.6)0.29；1HNMR(400MHz)δ1.95(s，3H，CH3CO)，3.21(s，1H，H-18)，5.60(d，1H，J＝10Hz，H-3)，5.78(m，2H，H-1，H-2)。
實施例211α-羥基-11-羰基-齊墩果烷-30-酸-2，12-二烯(IVb)的制備，C30H44O4，MSESIm/e468(M+)；Rf(石油醚/氯仿/甲醇4/4/0.6)0.21；1HNMR(400MHz)δ3.25(brs，H-18)，4.85(d，1H，J＝5.6Hz，H-1)，5.58(d，1H，J＝10.0Hz，H-3)，5.72(dd，1H，J＝5.6，10.0Hz，H-2)，5.85(s，1H，H-12)。
實施例221α-乙酰氧基-11-羰基-齊墩果烷-30-羧酸甲酯-2，12-二烯(IVc)的制備，C33H48O5，MSESIm/e 524(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯8/1)0.52；1HNMR(400MHz)δ1.95(s，3H，CH3CO)，3.20(s，1H，H-9)，3.69(s，3H，OCH3)，5.60(d，1H，J＝10.0Hz，H-3)，5.69，(s，1H，H-12)，5.80(m，2H，H-1，H-2)。
實施例231α-乙酰氧基-2α，3α-環(huán)氧-11-羰基-齊墩果烷-30-酸-12-烯(IVd)的制備，C33H48O6，MSESIm/e 540(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯2/1)0.32；1HNMR(400Mm)δ2.02(S，3H，CH3CO)，2.93(brs，1H，H-18)，3.040(brs，lH，H-3)，3.64(brd，1H，J＝5.6Hz，H-2)，5.65(d，1H，J＝5.6Hz，H-1)，5.73(brs，1H，H-12)。
實施例241α-羥基-2α，3α-環(huán)氧-11-羰基-齊墩果烷-30-酸-12-烯(1Ve)的制備，C32H46O6，MSESIm/e 526(M+)；Rf[(石油醚/乙酸乙酯2/1)+1％甲酸]0.23；1HNMR(400MHz)δ3.07(d，1H，J＝3.6Hz，H-18)，3.16(brs，1H，H-3)，3.56(dd，1H，J＝4.0，6.0Hz，H-2),4.92(d，1H，J＝6.0Hz，H-1)，5.82(s，1H，H-12)。
實施例251α-乙酰氧基-2α，3α-環(huán)氧-11-羰基-齊墩果烷-30-羧酸甲酯-12-烯(IVf)的制備，C30H44O5，MSESI m/e 484(M+)；Rf[(石油醚/乙酸乙酯2/1)+1％甲酸]0.18；1HNMR(400MHz)δ2.02(s，3H，CH3CO)，2.92(d，1H，J＝32Hz，H-18)，3.13(brs，1H，H-3)，3.63(dd，1H，J＝2.0，52Hz，H-2)，3.69(s，3H，OCH3)，365(d，1H，J＝5.2Hz，H-1)，5.69(s，1H，H-12)。
實施例261α-羥基-2α，3α-環(huán)氧-11-羰基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯-12-烯(IVg)的制備，C31H46O5，MSESI m/e 496(M+)；Rf(石油醚/氯仿/甲醇4/4/0.6)0.58；1HNMR(400MHz)δ3.01(d，1H，J＝10.8Hz，H-18)，3.04(d，1H，J＝32Hz，H-3)，3.53(dd，J＝6.4，32Hz，H-2)，3.62(s，3H，OCH3)，4.77(d，1H，J＝6.4Hz，H-1)，5.66(s，1H，H-12)。
式(1)化合物具有重要的生物活性，體外對六株人體腫瘤細胞包括人前列腺癌細胞(PC-3)，鼻咽癌細胞(CNE)，口腔上皮癌細胞株(KB)，人肺癌細胞(A549)，人肝癌細胞(BEL-7404)，人子宮頸癌細胞(Hela)的細胞毒活性試驗表明此類A環(huán)和C環(huán)多氧化取代的五環(huán)三萜類衍生物及其中間體系列化合物(具體見實施例)對腫瘤細胞生長具有抑制作用，有可能發(fā)展成為新的防治腫瘤藥物。此外，此類A環(huán)和C環(huán)多氧化取代的五環(huán)三萜類衍生物對α-葡萄糖苷酶(α-glucosidase)顯示出明顯抑制作用，有可能發(fā)展成為新的防治糖尿病和治療病毒類疾病藥物。
本發(fā)明的式(1)化合物或其可藥用鹽及其溶劑化物可以與藥學上常用的輻料或載體結(jié)合，制備得到具有腫瘤細胞生長抑制活性從而可以用于防治腫瘤的藥物組合物。上述各類藥物組合物可以采用注射劑、片劑、膠囊劑、氣霧劑、栓劑、膜劑、滴丸劑、外用搽劑、軟膏劑等劑型藥物，還可以采用現(xiàn)代制藥界所公知的控釋或緩釋劑型或納米制劑。
本發(fā)明的式(1)化合物或其可藥用鹽及其溶劑化物可以與現(xiàn)已上市的抗腫瘤藥物如鉑類藥物順鉑(DDP)、喜樹堿類藥物伊立替康(Irinatecan、CPT-11)、長春花堿類藥物失碳長春花堿(Vinorebine，NVB諾維本)、脫氧胞昔類藥物吉西他濱(Gemcitabine，Gemzar，健擇)、足葉乙甙(Etoposide)、紫杉醇(Paclitaxel)等聯(lián)合使用，制備得到具有α-葡萄糖苷酶抑制活性的降糖活性組合物，可用于治療糖尿病尤其是非胰島素依賴性糖尿病(II型糖尿病)；或者可以用于制備以α-葡萄糖苷酶抑制為機制的抗病毒類藥物。該類藥物組合物可以采用注射劑、片劑、膠囊劑、氣霧劑、栓劑、膜劑、滴丸劑、外用搽劑、軟膏劑等劑型藥物，還可以采用現(xiàn)代制藥界所公知的控釋或緩釋劑型或納米制劑。
本發(fā)明的式(1)化合物或其可藥用鹽及其溶劑化物可以與藥學上常用的輻料或載體結(jié)合，制備得到具有α-葡萄糖苷酶抑制活性從而可以用于防治糖尿病或病毒性疾病的藥物組合物。上述各類藥物組合物可以采用注射劑、片劑、膠囊劑、氣霧劑、栓劑、膜劑、滴丸劑、外用搽劑、軟膏劑等劑型藥物，還可以采用現(xiàn)代制藥界所公知的控釋或緩釋劑型或納米制劑。
為了更好地理解本發(fā)明的實質(zhì)，下面分別用該類A環(huán)和C環(huán)多氧化取代的五環(huán)三萜類衍生物化合物對六種腫瘤細胞株生長的抑制作用的藥理實驗結(jié)果，以及對α-葡萄糖苷酶(α-glucosidase)的抑制作用實驗結(jié)果，說明其在抗腫瘤藥物研究領(lǐng)域中的新用途，以及其在防治糖尿病和治療病毒類疾病活性的新用途。藥理實施例給出了代表性化合物的部分活性數(shù)據(jù)。必須說明，本發(fā)明的藥理實施例是用于說明本發(fā)明而不是對本發(fā)明的限制。根據(jù)本發(fā)明的實質(zhì)對本發(fā)明進行的簡單改進都屬于本發(fā)明要求保護的范圍。
藥理實施例1化合物IIa對KB細胞的細胞毒活性 KB(口腔上皮癌)細胞用RPMI 1640培養(yǎng)基培養(yǎng)，培養(yǎng)基中含10％的胎牛血清，100U/mL青霉素和100U/mL的鏈霉素。細胞以每孔5×103的濃度加入到96％孔板中，在37℃-含5％CO2潮濕空氣的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時。
細胞存活率的測定用改良MTT法。細胞經(jīng)過24小時的孵育后，分別將新配的化合物VIa的二甲亞砜溶液以濃度梯度加入到各孔中，使孔中IIa化合物最終濃度分別為100μg/mL，33.3μg/mL，11.1μg/mL和3.7μg/mL。72小時后，加入10μLMTT(5mg/mL)的磷酸鹽緩沖液，再繼續(xù)在37℃培養(yǎng)4小時后，離心5分鐘除去未轉(zhuǎn)化的MTT，每孔中加入200μL二甲亞砜，以溶解還原的MTT晶體甲臜(formazan)，所形成的formazan用酶標儀在570nm波長下比色，細胞存活率由樣品相對于對照品的比值計算。其中化合物IIa對KB細胞半抑制濃度(IC50)由劑量效應(yīng)曲線得到。
化合物IIa的IC50為7.91×10-6M；而陽性對照順鉑對PC-3細胞的IC50為7.93×10-6M。
實驗結(jié)論KB細胞是測試化合物對腫瘤細胞的細胞毒性的有效工具和評價指標。本實驗表明此類具有A環(huán)和C環(huán)多氧化取代的五環(huán)三萜類衍生物及其中間體系列化合物，對KB細胞具有較強的細胞毒性，和腫瘤治療一線用藥順鉑同一數(shù)量級，有可能發(fā)展成為新的具有抗腫瘤作用的藥物。
藥理實施例2化合物IIIb對PC-3細胞的細胞毒活性 PC-3(前列腺癌)細胞用F-12培養(yǎng)基培養(yǎng)，培養(yǎng)基中含10％的胎牛血清，100U/mL青霉素和100U/mL的鏈霉素。細胞以每孔5×103的濃度加入到96孔板中，在37℃含5％CO2潮濕空氣的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時。細胞存活率的測定用改良MTT法，具體方法如藥理實施例1。其中化合物IIIb對PC-3細胞半抑制濃度(IC50)由劑量效應(yīng)曲線得到。
化合物IIIb的IC50為4.78×10-5M；而陽性對照順鉑對PC-3細胞的IC50為2.07×10-5M。
實驗結(jié)論本實驗表明此類A環(huán)多氧化取代的五環(huán)三萜類衍生物及其中間體系列化合物對PC-3細胞具有較強的細胞毒性，和順鉑在同一數(shù)量級，有可能發(fā)展成為新的具有治療前列腺癌及相關(guān)腫瘤作用的藥物。
藥理實施例3化合物IVa對CNE細胞的細胞毒活性 CNE(鼻咽癌)細胞用RPMI 1640培養(yǎng)基培養(yǎng)，培養(yǎng)基中含10％的胎牛血清，100U/mL青霉素和100U/mL的鏈霉素。以每孔5×103細胞的濃度加入到96孔板中，在37℃含5％CO2潮濕空氣的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時。
細胞存活率的測定用改良MTT法，具體方法如藥理實施例1。其中化合物IVa對CNE細胞半抑制濃度(IC50)由劑量效應(yīng)曲線得到。
化合物IVa的IC50為1.57×10-5M；而陽性對照順鉑對CNE細胞的IC50為4.62×10-6M。
實驗結(jié)論本實驗表明此類A環(huán)多氧化取代的五環(huán)三萜類衍生物及其中間體系列化合物對CNE細胞具有較強的細胞毒性，有可能發(fā)展成為新的具有抗鼻咽癌及相關(guān)腫瘤作用的藥物。
藥理實施例4化合物IIb對A549細胞的細胞毒活性 A549(人肺癌)細胞用RPMI 1640培養(yǎng)基培養(yǎng)，培養(yǎng)基中含10％的胎牛血清，100U/mL青霉素和100U/mL的鏈霉素。細胞以每孔5×103的濃度加入到96孔板中，在37℃含5％CO2，潮濕空氣的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時。
細胞存活率的測定用改良MTT法，具體方祛如藥理實施例1。其中化合物IIIb對A549細胞半抑制濃渡(IC50)由劑量效應(yīng)曲線得到。
化合物IIb的IC50為2.22×10-6M；而陽性對照順鉑對A549細胞的IC50為1.38×10-5M。
實驗結(jié)論本實驗表明此類A環(huán)多氧化取代的五環(huán)三萜類衍生物及其中間體系列化合物對A549細胞具有較強的細胞毒性，活性超過順鉑，有可能發(fā)展成為新的具有抗肺癌及相關(guān)腫瘤作用的藥物。
藥理實施例5化合物IIa對BEL-7404細胞的細胞毒活性 BEL-7404(人肝癌)細胞用RPMI 1640培養(yǎng)基培養(yǎng)，培養(yǎng)基中含lO％的胎牛血清，100U/mL青霉素和100U/mL的鏈霉素。細胞以每孔5×103的濃度加入到96孔板中，在37℃含5％CO2，潮濕空氣的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時。
細胞存活率的測定用改良MTT法，具體方法如藥理實施例1。其中化合物IIa對BFL-7404細胞半抑制濃度(IC50)由劑量效應(yīng)曲線得到。
化合物IIa的IC50為1.90×10-5M；而陽性對照順鉑對BEL-7404細胞的IC50為1.50×10-5M。
實驗結(jié)論本實驗表明此類A環(huán)多氧化取代的五環(huán)三萜類衍生物及其中間體系列化合物對BEL-7404細胞具有較強的細胞毒性，和順鉑在同一數(shù)量級，有可能發(fā)展成為新的具有抗肝癌及相關(guān)腫瘤作用的藥物。
藥理實施例6化合物IVa對Hela細胞的細胞毒活性 Hela(人子宮頸癌)細胞用RPMI 1640培養(yǎng)基培養(yǎng)，培養(yǎng)基中含10％的胎牛血清，100U/mL青霉素和100U/mL的鏈霉素。細胞以每孔5×103的濃度加入到96％孔板中，在37℃含5％CO2潮濕空氣的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時。
細胞存活率的測定用改良MTT法，具體方法如藥理實施例1。其中化合物IVa對Hela細胞半抑制濃度(IC50)由劑量效應(yīng)曲線得到。
化合物IVa的IC50為1.99×10-5M；而陽性對照順鉑對Hela細胞的IC50為4.20×10-6M。
實驗結(jié)論本實驗表明此類A環(huán)多氧化取代的五環(huán)三萜類衍生物及其中間體系列化合物對Hela細胞具有較強的細胞毒性，有可能發(fā)展成為新的具有抗子宮頸癌及相關(guān)腫瘤作用的藥物。
藥理實施例7化合物IVd對α-葡萄糖苷酶的抑制作用 化合物對α-葡萄糖苷酶的抑制作用測定采用ELISA法。樣品孔中加入磷酸緩沖液(67mM，pH6.8，170μL)，還原型谷胱甘肽(1mg/mL，5μL)，α-D-glucosidase(0.2U/mL，25μL)，化合物Ic用二甲亞砜溶解，用磷酸緩沖液稀釋，每孔25μL，使其終濃度為0.04mg/mL，0.004mg/mL，0.0004mg/mL，加入底物4-硝基酚-α-D-吡喃葡萄糖苷(23.2mM，25μL)，37℃，水浴反應(yīng)15min后，加入碳酸鈉(1M，50μL)終止反應(yīng)，在405nm波長處比色測定?？瞻卓字杏孟嗤w積的Tris-HCl緩沖液代替底物。溶劑對照孔中加入與化合物等濃度的二甲亞砜。化合物抑制率由樣品OD值對于空白和對照OD值計算。其中化合物Ic對α-葡萄糖苷酶的半抑制濃度(IC50)由劑量效應(yīng)曲線得到。
化合物IVd的IC50為6.43×10-5M；而陽性對照阿卡波糖acarbose對α-葡萄糖苷酶的IC50為1.96×10-4M。
實驗結(jié)論本實驗表明此類A環(huán)多氧化取代的五環(huán)三萜類衍生物及其中間體系列化合物對α-葡萄糖苷酶具有很強的抑制活性，有可能發(fā)展成為新的具有防治糖尿病的藥物和治療與α-葡萄糖苷酶相關(guān)聯(lián)的病毒性疾病。
權(quán)利要求
1.一種式(1)所示的A環(huán)和C環(huán)多氧化取代的五環(huán)三萜類化合物及其可藥用鹽或溶劑化物。
式(1)
其中R1～R5可以相同或不同，分別選自氫，含1～8個碳原子的烷氧基，含1～8個碳原子的酰氧基，含1～8個碳原子的磺酰氧基，鹵素，氨基，硝基，氰基，羥基，羰基；2，3位之間，9，11位之間，12，13位之間，和/或13，18位之間可以各自獨立地是碳碳單鍵或者雙鍵；2，3位之間還可以是環(huán)氧基；R6和R7可以相同或者不同，選自COOH，-CH3，-CH2OH，-COOR8，-CONH2，-CONHR8，-CON(R8)2，其中R8是含1～8個碳原子的烷基，取代或未取代的苯基，取代或未取代的苯烷基；其中“取代或未取代”是指基團可以未被取代或者被取代，用作取代的取代基選自鹵素，氨基，硝基，巰基，氰基，羥基，含1～8個碳的烷氧基，含1～8個碳的?；交?，芳基；除非另有說明，本發(fā)明中的烷基是指1～8個碳原子的烷基；
其條件是R1～R5不能同時為氫，在A環(huán)上存在一個不為氫的取代基，同時在C環(huán)上也必須至少存在一個不為氫的取代基。(1)當R2，R3，R4為氫，R5為羰基，R6為-COOCH3，或-COOH，R7為甲基，分子中不含雙鍵時，R1不能為羥基，乙酰氧基和羰基；(2)當R3，R4為氫，R5為羰基，R7為甲基，R6為-COOCH3，僅9，11位之間為雙鍵時，R1不能為羰基，羥基，乙酰氧基，R2不能為氰基；(3)當R4為氫，R5為羰基，R7為甲基，2，3位和9，11位之間同時為雙鍵時，R1，R2為氫；(4)當R3，R4為氫原子，R5為羥基，R7為甲基，分子中不含雙鍵時，或者R1，R2均不能為氫，或者R1為α取代，R2可以為氫。(5)當R4為羰基，R5為氫，2，3位之間和12，13位之間同時為雙鍵時，R3不能為氫；(6)當R4為羰基，R5為氫，2，3位之間和12，13位之間同時為雙鍵，R6為-COOCH3，R7為-CH3時，R3不能為乙酰氧基；(7)當R4為羰基，R5為氫，僅12，13位之間為雙鍵時，R1，R3均不能為氫。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的式(I)化合物及其可藥用鹽或溶劑化物，其特征是R3，R4為氫原子，R5為酮羰基，R7為甲基；
式(I)
其中R1，R2，R6與式(1)化合物的定義相同；優(yōu)選R1，R2可以相同或者不同，分別選自氫，含1～8個碳原子的酰氧基，含1～8個碳原子的磺酰氧基，鹵素，氨基，硝基，氰基，羥基，羰基，或者R1，R2之間可以形成環(huán)氧基；R6選自-COOH，-CH3，-CH2OH，-COOR8，-CONH2，-CONHR8，-CON(R8)2，其中R8是含1～8個碳原子的烷基，取代或未取代的苯基，取代或未取代的苯烷基；
其條件是(1).當R2為氫，R6為-COOCH3時，R1不能為羥基，乙酰氧基或羰基；(2).當R2為氫，R6為-COOH或為-CHO時，R1不能為羰基。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的式(I)化合物及其可藥用鹽或溶劑化物，它們是
3β-甲基磺酰氧基-12-羰基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯(Ia)；
2β，3β-環(huán)氧-12-羰基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯(Ib)；
2α，3β-二羥基-12-羰基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯(Ic)；
3β，28-二羥基-12-羰基-齊墩果烷(Id)；
2α，3β，28-三羥基-12-羰基-齊墩果烷(Ie)。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的式(II)化合物及其可藥用鹽或溶劑化物，其特征是13、18位之間是碳碳單鍵或者是碳碳雙鍵，R3，R4為氫原子，R5為羥基，R7為甲基；
式(II)
其中R1，R2，R6與式(1)化合物的定義相同，R5的羥基可以為α構(gòu)型或β構(gòu)型；優(yōu)選R1，R2可以相同或者不同，分別選自氫，含1～8個碳原子的酰氧基，含1～8個碳原子的磺酰氧基，鹵素，氨基，硝基，氰基，羥基，羰基，或者R1，R2之間可以形成環(huán)氧基；R6選自-COOH，-CH3，-CH2OH，-COOR8，-CONH2，-CONHR8，-CON(R8)2，其中R8是含1～8個碳原子的烷基，取代或未取代的苯基，取代或未取代的苯烷基；其條件是(1).當13，18位之間為單鍵，R2為氫，R6為CH2OH時，R1不能是羥基或乙酰氧基；(2).當13，18位之間為單鍵，R2為氫，R6為COOCH3時，R1不能為乙酰氧基。
5.根據(jù)權(quán)利要求4的式(II)化合物及其可藥用鹽或溶劑化物，它們是
3α，12α，28-三羥基-齊墩果烷(IIa)；
2α，3β，12α-三羥基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯(IIb)；
2α，3β，12β-三羥基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯(IIc)；
3β，12α-二羥基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯-13(18)-烯(IId)
6.根據(jù)權(quán)利要求1的式(III)化合物及其可藥用鹽或溶劑化物，其特征是9，11位之間為雙鍵，2，3位之間是碳碳單鍵或者是碳碳雙鍵，R4為氫原子，R5為酮羰基，R7為甲基
式(III)
其中R1，R2，R3，R6與式(1)化合物的定義相同；優(yōu)選R1，R2，R3可以相同或者不同，分別選自氫，含1～8個碳原子的酰氧基，含1～8個碳原子的磺酰氧基，鹵素，氨基，硝基，氰基，羥基，羰基，或者R1，R2之間可以形成環(huán)氧基；R6選自-COOH，-CH3，-CH2OH，-COOR8，-CONH2，-CONHR8，-CON(R8)2，其中R8是含1～8個碳原子的烷基，取代或未取代的苯基，取代或未取代的苯烷基；
其條件是(1).當2，3位之間為單鍵，R2，R3為氫，R6為-COOCH3時，R1不能為羥基，乙酰氧基或羰基；(2).當2，3位之間為單鍵或者是雙鍵，R2為氰基，R3為氫，R6為-COOCH3時，R1不能為羰基或乙酰氧基。
7.根據(jù)權(quán)利要求6的式(III)化合物及其可藥用鹽或溶劑化物，它們是
12-羰基-齊墩果烷-28-酸-2，9(11)-二烯(IIIa)；
2，3-環(huán)氧-12-羰基-28-酸-9(11)-烯(IIIb)；
2α，3β-二羥基-12-羰基-28-酸-9(11)-烯(IIIc)；
1α-乙酰氧基-12-羰基-28-酸-2，9(11)-二烯(IIId)；
1α-羥基-12-羰基-28-酸-2，9(11)-二烯(IIIe)；
1α羥基-2α，3α-環(huán)氧-12-羰基-28-酸-9(11)-烯(IIIf)。
8.根據(jù)權(quán)利要求1的式(IV)化合物及其可藥用鹽或溶劑化物，其特征是12，13位之間是雙鍵，2，3位之間是碳碳單鍵或者是碳碳雙鍵R4為酮羰基，R5為氫
式(IV)
其中R1，R2，R3，R6，R7與式(1)化合物的定義相同；優(yōu)選R1，R2，R3可以相同或者不同，分別選自氫，含1～8個碳原子的酰氧基，含1～8個碳原子的磺酰氧基，鹵素，氨基，硝基，氰基，羥基，羰基，或者R1，R2之間可以形成環(huán)氧基；R6，R7選自-COOH，-CH3，-CH2OH，-COOR8，-CONH2，-CONHR8，-CON(R8)2，其中R8是含1～8個碳原子的烷基，取代或未取代的苯基，取代或未取代的苯烷基；
其條件(1).當2，3位之間為雙鍵，R1為羥基，R3為氫，R6為-COOCH3，R7為-CH3時，R2不能為氰基；(2).當2，3位之間為雙鍵，R1，R2同時為氫，R6為-CH3，R7為-COOCH3時，R3不能為氫，羰基或羥基；(3).當2，3位之間為雙鍵，R1，R2同時為氫，R6為CH3，R7為-COOH或-COOCH3時，R3不能為氫；(4).當2，3位之間為單鍵，R3為氫，R6為-CH3，R7為-COOCH3或者為-COOH時，R1，R2不能同時為羥基或形成環(huán)氧；(5).當2，3位之間為單鍵，R2為氫或氰基，R3為氫，R6為-COOCH3，R7為-CH3時，R1不能為羰基；(6).當2，3位之間為單鍵，R2，R3同時為氫，R6為-COOCH3或-COOH，而R7為-CH3時，R1不能為羥基，羰基或乙酰氧基；(7).當2，3位之間為單鍵，R2，R3同時為氫，R6為-CH3，R1不能為酰氧基；(8).當2，3位之間為單鍵，R2，R3同時為氫，R6為-CH3，R7為-COOH，-COOCH3，R1不能為羥基或羰基。
9.根據(jù)權(quán)利要求8的式(IV)化合物及其可藥用鹽或溶劑化物，它們是
1α-乙酰氧基-11-羰基-齊墩果烷-30-酸-2，12-二烯(IVa)；
1α-羥基-11-羰基-齊墩果烷-30-酸-2，12-二烯(IVb)；
1α-乙酰氧基-11-羰基-齊墩果烷-30-羧酸甲酯-2，12-二烯(IVc)；
1α-乙酰氧基-2α，3α-環(huán)氧-11-羰基-齊墩果烷-30-酸-12-烯(IVd)；
1α-羥基-2α，3α-環(huán)氧-11-羰基-齊墩果烷-30-酸-12-烯(IVe)；
1α-乙酰氧基-2α，3α-環(huán)氧-11-羰基-齊墩果烷-30-羧酸甲酯-12-烯(IVf)；
1α-羥基-2α，3α-環(huán)氧-11-羰基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯-12-烯(IVg)。
10.根據(jù)權(quán)利要求1～9所述之A環(huán)和C環(huán)多氧化取代的五環(huán)三萜類的化合物及其可藥用鹽或其溶劑化物用于制備預防或治療口腔上皮癌、前列腺癌、鼻咽癌、肺癌、肝癌、子宮頸癌及其相關(guān)腫瘤疾病的藥物用途；或用于制備防治糖尿病相關(guān)疾病以及與α-葡萄糖苷酶相關(guān)的病毒性疾病的用途。
11.一種防治口腔上皮癌、前列腺癌、鼻咽癌、肺癌、肝癌、子宮頸癌及其相關(guān)腫瘤疾病，或防治糖尿病相關(guān)疾病以及與α-葡萄糖苷酶相關(guān)的病毒性疾病的藥物或藥物組合物，其含有作為活性成分的治療有效量的權(quán)利要求1～9所述之式(1)化合物或其可藥用鹽或溶劑化物或者它們的混合物和可藥用輔料，其可以是片劑、膠囊劑、注射劑、氣霧劑、栓劑、膜劑、滴丸劑、貼片劑、皮下直埋劑、外用搽劑、口服液或軟膏劑，還可以采用現(xiàn)代制藥界所公知的控釋或緩釋劑型或納米制劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及一類A環(huán)和C環(huán)多氧化取代的五環(huán)三萜類衍生物及其可藥用鹽或溶劑化物。本發(fā)明還涉及其制備方法及其藥物組合物和醫(yī)藥用途。本發(fā)明的化合物具有體外抑制六種人體腫瘤細胞株如人前列腺癌細胞(PC-3)，鼻咽癌細胞(CNE)，口腔上皮癌細胞(KB)，人肺癌細胞(A549)，人肝癌細胞(BEL-7404)，人子宮頸癌細胞(Hela)的活性，且與陽性對照順鉑在同一數(shù)量級，可預期作為抗腫瘤藥物用途。本發(fā)明的化合物還表現(xiàn)出對α-葡萄糖苷酶有著較強的抑制作用，抑制作用超過陽性對照阿卡波糖，可以預期作為防治糖尿病和治療病毒類疾病用藥。
文檔編號A61K31/56GK101117348SQ20061010414
公開日2008年2月6日 申請日期2006年8月1日 優(yōu)先權(quán)日2006年8月1日
發(fā)明者昱 趙, 陳海永, 鄭漢其, 巫秀美, 驊 白, 約阿施·史托克希特 申請人:浙江海正天華新藥研發(fā)有限公司