專利名稱：重組人干擾素α2a陰道泡騰片及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種陰道泡騰片及其制備方法，具體涉及一種干擾素α2a陰道泡騰片及其制備方法。
背景技術(shù)：
干擾素作為抗病毒、抗腫瘤和免疫調(diào)節(jié)藥物已被廣泛使用，采用的劑型主要是注射劑和外用劑型。目前，在國內(nèi)市場上廣泛應(yīng)用于治療婦科病毒性感染疾病的干擾素制劑有干擾素栓劑等產(chǎn)品。但在臨床使用過程中，干擾素栓劑存在崩解慢、不易吸收、使用不便、起效慢和污染衣物的缺點，治療效果受患者使用時的體位影響，患者陰道后穹隆腹側(cè)面患處難以接觸到藥物，治療不徹底。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供了一種崩解快、易吸收、使用方便、起效快和不污染衣物，發(fā)泡量大，藥物與病灶部位接觸充分，療效確切的重組人干擾素α2a陰道泡騰片。
本發(fā)明的另一目的是提供一種輔料用量少，工藝簡單的重組人干擾素α2a陰道泡騰片的制備方法。
為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是一種重組人干擾素α2a陰道泡騰片，其特征在于該泡騰片含有重組人干擾素α2a和輔料，所述輔料包括泡騰劑、填充劑、崩解劑和粘合劑，所述泡騰劑是硼酸、無水檸檬酸和碳酸氫鈉，所述填充劑是淀粉，所述崩解劑是羧甲基淀粉鈉，所述粘合劑是聚乙烯吡咯烷酮PVP k-30；其中制成1000片干擾素陰道泡騰片中含有下述組份重組人干擾素α2a6×107～6×109硼酸100～140g
無水檸檬酸 40～80g淀粉 200～250g碳酸氫鈉 100～140g羧甲基淀粉鈉 10～20g硬脂酸鎂 4.5～10gPVP k-30(8％)30～55毫升。
一種重組人干擾素α2a陰道泡騰片的制備方法，其特點在于它包括下述步驟(1)將PVP k-30溶于水中，制成重量百分比為8％的水溶液；(2)將淀粉、硼酸、無水檸檬酸分別干燥；(3)稱取處方量的硼酸，無水檸檬酸，加入處方量淀粉的半量，混勻，加入處方量的干擾素，混勻，再用PVP k-30水溶液做粘合劑制軟材，18目篩制粒；(4)稱取處方量的碳酸氫鈉，加入處方量一半的淀粉，用PVPk-30水溶液做粘合劑制軟材，18目篩制粒；(5)將步驟(3)和(4)中制備的兩種顆粒分別在溫度為40℃±5℃條件下減壓干燥3-5小時，顆粒水分含量控制在0.4％-0.8％，過16目篩整粒；(6)加入處方量的硬脂酸鎂，混勻，壓片；(7)包裝即得成品。
干擾素陰道泡騰片的主要輔料具有下述作用泡騰劑-硼酸、無水檸檬酸和碳酸氫鈉，酸和堿發(fā)生化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生二氧化碳?xì)怏w，使片子迅速崩解。選用硼酸，主要有以下幾方面的作用(1)硼酸對干擾素有一定的保護作用(2)作為酸源，且硼酸具有擬菌作用，同時增加無水檸檬酸，確保酸堿反應(yīng)時的發(fā)泡量。淀粉在制劑中作為填充劑，收載于中國藥典中，已廣泛用于片劑的制備中。崩解劑羧甲基淀粉鈉中國藥典已收載，為自由流動的粉末，能溶于水，無任何毒副作用，廣泛用作片劑和膠囊劑的崩解劑。粘合劑聚乙烯吡咯烷酮k-30，是一種水溶性合成高分子化合物，具有優(yōu)良的穩(wěn)定性和溶解性，常用作片劑、膠囊劑和顆粒劑制備過程中的粘合劑。
本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有以下優(yōu)點本發(fā)明壓制的陰道泡騰片具有崩解快、易吸收、使用方便、起效快和不污染衣物，發(fā)泡量大，藥物與病灶部位接觸充分，療效確切的優(yōu)點；制成的顆粒流動性良好，所壓制成的片子外觀平整光潔，硬度適中，崩解時限、發(fā)泡量等指標(biāo)符合中國藥典的相關(guān)規(guī)定；所選輔料自身理化性質(zhì)穩(wěn)定，不與干擾素發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，對干擾素的生物學(xué)活性無破壞作用，不影響干擾素的含量測定，對陰道粘膜無刺激作用，且皆為中國藥典收載的藥用輔料品種，價廉、方便、易得。
具體實施例方式
下面以實施例進一步解釋本發(fā)明，但是本發(fā)明的保護范圍并不限于這些實施。
(一)處方選擇重組人干擾素α2a陰道泡騰片的配方(1000片)

其制備工藝(1)將PVP k-30溶于純化水中制成8％的溶液，備用；(2)將淀粉、硼酸、無水檸檬酸分別于60±5℃干燥2-3小時，過100目篩備用；(3)稱取處方量的硼酸、無水檸檬酸，加入處方量半量的淀粉，加入配方量的干擾素，混勻，用配制好的PVP k-30(8％)水溶液做粘合劑制軟材，過18目篩制粒；(4)稱取處方量的碳酸氫鈉，加入處方量半量的淀粉，用配制好的PVP k-30(8％)水溶液做粘合劑制軟材，過18目篩制粒；(5)將步驟(3)和(4)中制備的兩種顆粒分別在溫度為40℃±5℃條件下減壓干燥3-5小時，顆粒水分含量控制在0.4％-0.8％，過16目篩整粒；(6)加入處方量的硬脂酸鎂、羧甲基淀粉鈉混合均勻，壓片；(7)包裝即得成品。
用法用量每次1片，隔日1次，6～10次為一個療程，將泡騰片置于陰道后穹隆處。
(二)初步穩(wěn)定性試驗根據(jù)重組人干擾素α2a的理化性質(zhì)，結(jié)合泡騰片劑型的自身特殊性，對本制劑進行了影響因素的穩(wěn)定性考察，考察本品在強光、高溫、高濕條件下的穩(wěn)定性情況，為產(chǎn)品的包裝、運輸、貯存、有效期的確定提供理論依據(jù)?？疾祉椖繀⒄罩袊幍?2005版)，選擇外觀，效價，PH值和崩解時限為考察指標(biāo)。
分別在光照4500Lx±500Lx(冷藏干燥)、高濕RH75％(冷藏避光)、高溫40℃(避光干燥)條件下進行放置，試驗結(jié)果表明本品對光照較為敏感，在強光照射下，放置15天效價降至0天的80％。本品對濕度非常敏感，高濕放置第7天片子外表面出現(xiàn)泡騰現(xiàn)象，外觀已不合格，第10天片子出現(xiàn)松片，崩解時限縮短。同時，本品對溫度也較敏感，高溫放置第5天效價降至0天的85％，放置10天效價降至0天的65％。因此本品應(yīng)包裝密封，貯存應(yīng)避光、干燥，冷藏。
加速穩(wěn)定性實驗的結(jié)果表明本品在市售包裝，溫度25±2℃，相對濕度60±10％的條件下放置6個月，效價有下降的趨勢，但仍在合格范圍內(nèi)，而其它考察指標(biāo)與0月結(jié)果比較無顯著性變化，均符合標(biāo)準(zhǔn)要求。
長期穩(wěn)定性試驗結(jié)果本品在市售包裝，溫度6±2℃，相對濕度60±10％的條件下，長期試驗12個月各項指標(biāo)均沒有顯著性變化，表明本品在上述貯藏條件下穩(wěn)定，長期穩(wěn)定性試驗正在進行。
綜合上述影響實驗、加速實驗、長期穩(wěn)定性實驗結(jié)果，重組人干擾素α2a陰道泡騰片的貯藏條件為2-8℃避光、干燥保存，按照有關(guān)規(guī)定，有效期暫定為18個月。
(三)急性毒性試驗選用性成熟健康雌性家兔，體重為2.40-2.60Kg，隨即分為兩組，每組10只。藥物組陰道一次性給藥1.0×106IU/Kg，基質(zhì)片泡騰片為對照組給相同體積。給藥組相當(dāng)于臨床用藥的100倍(臨床日用量為6.0×105IU/人，人體重按60Kg計算)。連續(xù)觀察14天。
給藥后至觀察期滿，無1例動物出現(xiàn)中毒癥狀及死亡。各組動物四肢活動自如，飲食飲水及排便正常，精神狀態(tài)良好，體重略有增加。用藥局部皮膚粘膜顏色正常，無充血、紅腫，無異常分泌物。提示重組人干擾素α2a泡騰片無急性毒性作用。
(四)長期毒性試驗選用性成熟健康雌性家兔，隨機分為五組，即基質(zhì)片組、空白對照組、泡騰片高、中、低劑量組。陰道給藥，泡騰片組小、中、大劑量分別2.4×105IU/Kg，4.8×105IU/Kg，7.2×105IU/Kg，分別相當(dāng)于臨床用量的24、48、72倍(臨床用量為6.0×105IU/人，人體重按60Kg計算)。每天定時給藥1次，連續(xù)4周。動物自由攝食、飲水。停藥后恢復(fù)2周。
觀察指標(biāo)每周稱量動物體重，觀察動物飲食情況，活動狀態(tài)，毛發(fā)、糞便等。于給藥后2周、4周和停藥后2周分別采血檢查血常規(guī)、肝、腎等功能，取主要臟器作病理學(xué)檢查心、肝、脾、肺、腎、腦、陰道、子宮、卵巢等并同時測定臟器系數(shù)。
結(jié)果表明，重組人干擾素α2a陰道泡騰片的劑量為7.2×105IU/Kg。給動物使用4周，未發(fā)現(xiàn)長期毒性反應(yīng)。
陰道泡騰片組、基質(zhì)片組和陰性對照組在刺激注射后15分鐘內(nèi)均沒有出現(xiàn)如豎毛、呼吸困難、打噴嚏、干嘔或咳嗽、鑼音、抽搐、虛脫或死亡等任一現(xiàn)象，判定過敏反應(yīng)為陰性。陽性對照組在刺激注射后15分鐘內(nèi)均出現(xiàn)不同程度上述過敏現(xiàn)象，判定過敏反應(yīng)為陽性。
結(jié)果表明重組人干擾素α2a泡騰片不引起豚鼠過敏反應(yīng)。
(五)局部刺激性試驗選用性成熟健康雌性家兔，體重2.5～3.0Kg，隨機分為4組泡騰片高、低劑量組、基質(zhì)片組和空白對照組，每組4只。高、低兩個劑量分別為2.4×105IU/Kg、7.2×105IU/Kg，折算等效劑量分別相當(dāng)于臨床用量的24倍，72倍(臨床用量為6.0×105IU/60Kg人)?；|(zhì)片組給與相同規(guī)格的片劑基質(zhì)?？瞻讓φ战M用無菌棉簽探入動物陰道中，保持相同時間。
觀察時間單次刺激試驗給藥24小時后處死動物；多次刺激試驗每天固定時間給藥1次，連續(xù)1周。于末次給藥后24小時處死動物，取出陰道局部組織，觀察充血、紅腫等現(xiàn)象。大體觀察后，經(jīng)固定液固定，進行病理組織學(xué)檢查。
結(jié)果表明，重組人干擾素α2a泡騰片對家兔陰道粘膜無明顯刺激作用。
(六)藥理學(xué)試驗選用健康Wistar雌性大鼠40只，隨即分為四組，每組10只。即對照組、泡騰片高、中、低劑量組15.0×105IU/Kg、10.0×105、5.0×105。大鼠麻醉后固定，常規(guī)手術(shù)，進行氣管、頸動脈插管，測定心率、血壓、呼吸、心電指標(biāo)。陰道給藥，記錄給藥前及給藥后3～360分鐘的各項指標(biāo)。
結(jié)果表明，重組人干擾素α2a陰道泡騰片對大鼠心電圖的各波形、心率、血壓、呼吸無明顯影響。
選用健康Wistar雌性大鼠40只，隨機分為四組，每組10只。即對照組，泡騰片高、中、低劑量組15.0×105IU/Kg、10.0×105、5.0×105。陰道給藥采用曠場行為試驗法觀察動物自發(fā)及探究行為。
結(jié)果表明，重組人干擾素α2a陰道泡騰片陰道給藥對大鼠自發(fā)及探究行為無明顯影響。
(七)有效性評價主要藥效學(xué)試驗采用HSV-2病毒液感染豚鼠陰道制備陰道炎模型，將模型豚鼠隨機分為泡騰片高、中、低劑量組，陽性對照組(無環(huán)鳥苷ACV)和陰性對照組五組，對重組人干擾素α2a陰道泡騰片治療作用進行藥效學(xué)分析。泡騰片高、中、低劑量分別為1.2×105IU/只、1.2×1041U/只、1.2×103IU/只；陽性對照組給ACV750mg/Kg(250mg/只)、陰性對照組給以0.5ml生理鹽水，陰道給藥9天，每天1次。給藥后連續(xù)觀察15天。每天記錄豚鼠干擾HSV-2死亡時間，計算死亡保護率和延長生命率。三個劑量的泡騰片組動物死亡率均顯著下降，陰道內(nèi)感染癥狀得到緩解，且隨該藥劑量增加而作用增大，呈量效關(guān)系，重組人干擾素α2a陰道泡騰片中劑量組與無環(huán)鳥苷組作用近似。
結(jié)果表明重組人干擾素α2a陰道泡騰片1.2×105IU/只、1.2×104IU/只、1.2×103IU/只，每日1次于陰道給藥，連續(xù)9日對HSV-2型單皰病毒性陰道炎有明顯擬制作用。
(八)質(zhì)量控制評價(1)外觀檢查本品為白色或類白色片，外觀完整光潔，色澤均勻。
(2)鑒別試驗用免疫印跡法(《中國藥典》2005年版三部附錄VIIIA)或免疫斑點法(《中國藥典》2005年版三部附錄VIIIB)測定，結(jié)果為陽性。
(3)PH值隨機抽取本品2片，研細(xì)，置50ml水中，攪拌，待氣泡消失后，依法測定(《中國藥典》2005年版三部附錄VA)為4.5-6.5。
(4)崩解時限取本品6片，依法檢查(《中國藥典》2005年版三部附錄VC)，符合規(guī)定。
(5)融變時限取本品3片，依法檢查(《中國藥典》2005年版三部附錄VD)，符合規(guī)定。
(6)發(fā)泡量取本品10片，依法測定(《中國藥典》2005年版二部附錄IA)，符合規(guī)定。
(7)重量差異取本品20片，精密稱定總重量，求得平均片重后，再分別精密稱定各片的重量。每片重量與平均片重相比較，超出重量差異±5％的藥片不得多于2片，并不得有1片超出限度1倍。結(jié)果符合規(guī)定。
(8)脆碎度取本品6.5g，依法測定(《中國藥典》2005年版三部附錄VE)。結(jié)果符合規(guī)定。
(9)微生物限度檢查取本品適量，依法測定(《中國藥典》2005年版三部附錄XIIG)，細(xì)菌總數(shù)小于100個/g；霉菌、酵母菌不得檢出；金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌不得檢出。
(10)效價測定取本品10片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量(約相當(dāng)于干擾素α2a 25萬IU)，置25ml量瓶中，用測定培養(yǎng)液定容至刻度，充分溶解后混勻，取藥液離心(10000rpm，10min)，取上清液，按《中國藥典》2005版三部附錄XC的方法進行測定。干擾素效價為標(biāo)示量的80％～150％。
權(quán)利要求
1.一種重組人干擾素α2a陰道泡騰片，其特征在于該泡騰片含有重組人干擾素α2a和輔料，所述輔料包括泡騰劑、填充劑、崩解劑和粘合劑，所述泡騰劑是硼酸、無水檸檬酸和碳酸氫鈉，所述填充劑是淀粉，所述崩解劑是羧甲基淀粉鈉，所述粘合劑是聚乙烯吡咯烷酮PVP k-30；其中制成1000片干擾素陰道泡騰片中含有下述組份重組人干擾素α2a 6×107～6×109硼酸 100～140g無水檸檬酸 40～80g淀粉 200～250g碳酸氫鈉 100～140g羧甲基淀粉鈉 10～20g硬脂酸鎂 4.5～10gPVP k-30(8％) 30～55毫升。
2.一種重組人干擾素α2a陰道泡騰片的制備方法，其特點在于它包括下述步驟(1)將PVP k-30溶于水中，制成重量百分比為8％的水溶液；(2)將淀粉、硼酸、無水檸檬酸分別干燥；(3)稱取處方量的硼酸，無水檸檬酸，加入處方量淀粉的半量，混勻，加入處方量的干擾素，混勻，再用PVP k-30水溶液做粘合劑制軟材，18目篩制粒；(4)稱取處方量的碳酸氫鈉，加入處方量一半的淀粉，用PVPk-30水溶液做粘合劑制軟材，18目篩制粒；(5)將步驟(3)和(4)中制備的兩種顆粒分別在溫度為40℃±5℃條件下減壓干燥3-5小時，顆粒水分含量控制在0.4％-0.8％，過16目篩整粒；(6)加入處方量的硬脂酸鎂，混勻，壓片；(7)包裝即得成品。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種重組人干擾素α2a陰道泡騰片及其制備方法，該陰道泡騰片是將重組人干擾素α2a加入部分輔料中制成酸性顆粒，和其他輔料制成的堿性顆粒混合后壓制成片，所述輔料包括泡騰劑、填充劑、崩解劑和粘合劑，所述泡騰劑是硼酸、無水檸檬酸和碳酸氫鈉，所述填充劑是淀粉，所述崩解劑是羧甲基淀粉鈉，所述粘合劑是聚乙烯吡咯烷酮PVP k－30。本發(fā)明壓制的陰道泡騰片具有崩解快、易吸收、使用方便、起效快和不污染衣物，發(fā)泡量大，藥物與病灶部位接觸充分，療效確切的優(yōu)點；所選輔料自身理化性質(zhì)穩(wěn)定，不與干擾素發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，對干擾素的生物學(xué)活性無破壞作用，不影響干擾素的含量測定，對陰道粘膜無刺激作用。
文檔編號A61P15/00GK1970079SQ200610105139
公開日2007年5月30日 申請日期2006年12月8日 優(yōu)先權(quán)日2006年12月8日
發(fā)明者陶玉, 石繼紅 申請人:陜西沃普森制藥有限公司