專利名稱：食用菌活性物質(zhì)的原態(tài)提取方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于食用菌提取物的制備領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
食用菌中含有多種生物活性成分，常見(jiàn)的包括多糖類、三萜類、甾醇類、甙類、大環(huán)內(nèi)酯類、多肽類、生物堿、黃酮類、油脂類等多種成分。由于這些活性物質(zhì)多具有抗氧化衰老、提高免疫力、預(yù)防心血管疾病等功能作用而日益受大眾青睞，因此食用菌中活性物質(zhì)提取方法的研究也引起人們的廣泛關(guān)注。傳統(tǒng)的提取方法主要有煎煮法和浸漬法，煎煮法是將物料粉碎后根據(jù)質(zhì)地不同加入適量的清水，充分浸潤(rùn)1～2小時(shí)，然后煎煮沸騰1～2小時(shí)，粗濾后料渣再重復(fù)以上步驟2～3次，最后將所有濾液靜置和精濾得到提取液；浸漬法是將物料粉碎后根據(jù)質(zhì)地加入適量的溶劑(如水、乙醇、石油醚等)，在常溫或定溫(冷浸在常溫下；熱浸若溶媒是乙醇在40～60℃，若溶媒是水在60～80℃)下密閉浸漬6～24小時(shí)，適時(shí)攪拌，然后分離、壓榨、過(guò)濾得提取液。與煎煮法相同，提取液通常采用烘烤和風(fēng)干的方法濃縮干燥。傳統(tǒng)的提取方法存在許多明顯的缺陷1、活性物質(zhì)有水溶性的(如生物堿鹽、黃酮等)，有醇溶性的(如油脂、甾醇等)，有脂溶性的(如萜類、游離生物堿、甙類等)，故單一的提取液只提取部分活性物質(zhì)，造成其他有效成分的流失；2、各成分間在溫度較高時(shí)容易發(fā)生絡(luò)合、水解、氧化、還原等化學(xué)反應(yīng)，使原始成分發(fā)生改變；3、常溫下以水為溶劑提取時(shí)，提取液容易發(fā)生酶解和因微生物繁殖而變質(zhì)；4、石油醚和乙醇溫度較高時(shí)易揮發(fā)，甚至有蒸汽發(fā)生燃燒的危險(xiǎn)。

發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明旨在提供食用菌活性物質(zhì)的原態(tài)提取方法，該方法能夠在提取過(guò)程中抑制對(duì)生物體組分的水解、酶解等降解作用；并在無(wú)須添加防腐劑的情況下，避免了提取過(guò)程中微生物繁殖對(duì)提取的干擾和危害；同時(shí)能夠充分地提取出食用菌的活性物質(zhì)。
本發(fā)明所述的提取方法，其工藝方法如下1、原料低溫脫水采用冷凍和負(fù)壓的方法，將新鮮的食用菌原料脫水干燥。
2、冷卻粉碎采用水冷式粉碎機(jī)，控制在20℃以下粉碎食用菌原料。
3、低溫(＜20℃)脂提該步驟優(yōu)選石油醚或甘油或乙醚為溶劑，溶劑體積用量為食用菌體積2～5倍，浸提粉碎食用菌原料中的脂溶性成分，加入超聲波震蕩，加快細(xì)胞內(nèi)容物析出。浸提1-4小時(shí)后用濾紙抽濾。重復(fù)浸提濾渣1-2次，合并濾液，將濾渣稍陰干。
4、低溫(＜20℃)醇提該步驟優(yōu)選乙醇為溶劑，溶劑體積用量為食用菌原料體積2～5倍，浸提粉碎食用菌原料中的醇溶性成分。利用乙醇與脂提溶劑的相溶性，可不必等上述濾渣干透。加入超聲波震蕩，加快細(xì)胞內(nèi)容物析出。浸提1-4小時(shí)后用濾紙抽濾。重復(fù)浸提濾渣1-2次，合并濾液，將濾渣稍陰干。
5、低溫(0～10℃)水提采用純水為溶劑，溶劑體積用量為食用菌體積的2～5倍，浸提粉碎食用菌原料中的水溶性成分。將上述濾渣加入適量純水浸提，利用醇提溶劑與水的相溶性，可不必等濾渣干透。加入超聲波震蕩，加快細(xì)胞內(nèi)容物析出。浸提1-4小時(shí)后用濾紙抽濾。重復(fù)操作1-2次，合并濾液。
6、超濾分離采用可耐受有機(jī)溶劑的超濾裝置，將提取的濾液中分子量小于6000和大于200萬(wàn)道爾頓的成分去除，得濃縮液。
7、冷凍干燥用冷凍干燥機(jī)將分離出的濃縮液干燥后，暫存于干燥皿。
8、低溫混合將三種浸提方法的產(chǎn)物在20℃以下用絞碎機(jī)攪拌混合。
9、冷凍保藏將成品裝于玻璃或塑料容器內(nèi)充氮密封，-15℃以下保藏。
本發(fā)明是在浸漬法的基礎(chǔ)上，進(jìn)行從結(jié)構(gòu)到程序、從條件到目標(biāo)的全面創(chuàng)新。采用全程低溫的條件，基本控制了水解、酶解等化學(xué)反應(yīng)，抑制了微生物的繁殖和有機(jī)溶劑的揮發(fā)，同時(shí)為彌補(bǔ)低溫下溶解率降低的缺陷，浸漬時(shí)應(yīng)用超聲諧振法加大溶出率。根據(jù)醚與醇、醇與水之間的相溶性，以及醚、醇對(duì)微生物的抑殺作用特點(diǎn)，采用從脂提到醇提再到水提的次序進(jìn)行連續(xù)的提取操作，不僅增加了提取率，縮短了總的提取時(shí)間，排除了外界微生物的干擾和危害，還可進(jìn)一步保持食用菌中活性物質(zhì)的原始結(jié)構(gòu)狀態(tài)，以維持其天然藥理作用。
本發(fā)明所述的提取方法主要有以下優(yōu)點(diǎn)1、把食用菌中活性物質(zhì)提取的整個(gè)過(guò)程，包括物料的脫水、粉碎、浸提、分離、干制和保藏工序，控制在低溫狀態(tài)下進(jìn)行。與采用高溫或常溫條件的傳統(tǒng)提取方法相比，抑制了對(duì)生物體組分的水解、酶解等降解作用。同時(shí)，在無(wú)須添加防腐劑的情況下，避免了提取過(guò)程中微生物繁殖對(duì)提取的干擾和危害，還可降低有機(jī)溶劑的揮發(fā)。
2、文獻(xiàn)指出，經(jīng)過(guò)水提、醇提和脂提后，食用菌中的絕大部分可溶性成分可釋出。所以，我們直接將這三種提取方法結(jié)合成三聯(lián)提取法，根據(jù)溶劑間兩兩的相溶性進(jìn)行連續(xù)操作，調(diào)整浸提次序(脂提→醇提→水提)，縮短浸提時(shí)間，減少微生物侵染浸提液的機(jī)會(huì)。
3、將提取物按分子量大小進(jìn)行分離，去除水、無(wú)機(jī)鹽、單糖等主要起營(yíng)養(yǎng)作用的小分子，以及纖維類物質(zhì)等人體難以消化吸收的大分子，提高活性物質(zhì)的純度。
4、通過(guò)低溫提取和三聯(lián)提取，使生物活性提取物較大程度上保持原始的結(jié)構(gòu)和組合狀態(tài)。為研究、生產(chǎn)提供符合生物體平衡、多元配合等傳統(tǒng)中醫(yī)藥理論的原料。

圖1是表示本發(fā)明所述的從食用菌中提取活性物質(zhì)方法的流程圖。
具體實(shí)施方式實(shí)施例11、全靈芝活性成分的提取在18℃的空調(diào)車間內(nèi)將全靈芝(靈芝加工品，粉狀)(廣東粵微食用菌技術(shù)有限公司生產(chǎn))1kg加入3L石油醚在超聲波洗滌槽內(nèi)浸漬1小時(shí)，過(guò)濾，濾渣加1L石油醚浸洗后再過(guò)濾，重復(fù)操作一次，合并濾液用超濾設(shè)備濃縮得濃縮液，濃縮液用冷凍干燥機(jī)干燥后的產(chǎn)物(A)暫存于干燥皿。濾渣陰干1小時(shí)后加入3L 95％乙醇在超聲波洗滌槽內(nèi)浸漬2小時(shí)，過(guò)濾，濾渣分兩次各加1L乙醇浸洗后再過(guò)濾，合并濾液用超濾設(shè)備濃縮得濃縮液，濃縮液用冷凍干燥機(jī)干燥后的產(chǎn)物(B)暫存于干燥皿。濾渣陰干1小時(shí)后加入3L經(jīng)冰箱降溫至4℃的純水在移入4℃冰箱的超聲波洗滌槽內(nèi)浸漬2小時(shí)，過(guò)濾，濾渣分兩次各加1L低溫純水浸洗后再過(guò)濾，合并濾液用超濾設(shè)備濃縮得濃縮液，濃縮液用冷凍干燥機(jī)干燥得產(chǎn)物(C)。用絞碎機(jī)混合濃縮液冷凍干燥后的產(chǎn)物(A)、(B)、(C)，得216g提取物，裝于玻璃瓶?jī)?nèi)充氮密封，-20℃冰箱保藏。
2、對(duì)比實(shí)驗(yàn)用傳統(tǒng)的水提粗多糖的方法提取上述全靈芝的活性成分，并將其與上述本發(fā)明所得到全靈芝活性成分進(jìn)行對(duì)比，其結(jié)果如下 由上表可知，全靈芝的提取物得率和功能試驗(yàn)陽(yáng)性率均比對(duì)應(yīng)的常規(guī)提取方法高，成分分析的活性物質(zhì)種類明顯增加。
實(shí)施例21、云芝活性成分的提取用裝40目篩的水冷式低溫粉碎機(jī)在18℃條件下將云芝干燥子實(shí)體(菇體)粉碎。在18℃的空調(diào)車間內(nèi)將云芝子實(shí)體粉1kg加入1.5L石油醚在超聲波洗滌槽內(nèi)浸漬1小時(shí)，過(guò)濾，濾渣加1L石油醚浸洗后再過(guò)濾，重復(fù)操作一次，合并濾液用超濾設(shè)備濃縮得濃縮液，濃縮液用冷凍干燥機(jī)干燥后的產(chǎn)物(A)暫存于干燥皿。濾渣陰干1小時(shí)后加入1.5L 95％乙醇在超聲波洗滌槽內(nèi)浸漬2小時(shí)，過(guò)濾，濾渣分兩次各加1L乙醇浸洗后再過(guò)濾，合并濾液用超濾設(shè)備濃縮得濃縮液，濃縮液用冷凍干燥機(jī)干燥后的產(chǎn)物(B)暫存于干燥皿。濾渣陰干1小時(shí)后加入1.5L經(jīng)冰箱降溫至4℃的純水在移入4℃冰箱的超聲波洗滌槽內(nèi)浸漬2小時(shí)，過(guò)濾，濾渣分兩次各加1L低溫純水浸洗后再過(guò)濾，合并濾液用超濾設(shè)備濃縮得濃縮液，濃縮液用冷凍干燥機(jī)干燥后得產(chǎn)物(C)，用絞碎機(jī)混合冷凍干燥后的產(chǎn)物(A)、(B)、(C)，得48g提取物，裝于玻璃瓶?jī)?nèi)充氮密封，-20℃冰箱保藏。
2、對(duì)比實(shí)驗(yàn)用傳統(tǒng)的水提粗多糖的方法提取上述云芝的活性成分，并將其與上述本發(fā)明所得到云芝活性成分進(jìn)行對(duì)比，其結(jié)果如下 由上表可知，云芝的提取物得率和功能試驗(yàn)陽(yáng)性率均比對(duì)應(yīng)的常規(guī)提取方法高，成分分析的活性物質(zhì)種類明顯增加。
實(shí)施例31、香菇活性成分的提取將新鮮香菇在速凍設(shè)備中脫水6小時(shí)，用裝20目篩的水冷式低溫粉碎機(jī)在18℃條件下將香菇子實(shí)體(菇體)粉碎。在18℃的空調(diào)車間內(nèi)將香菇子實(shí)體粉1kg加入2L石油醚在超聲波洗滌槽內(nèi)浸漬1小時(shí)，過(guò)濾，濾渣分兩次各加1L石油醚浸洗后再過(guò)濾，合并濾液用超濾設(shè)備濃縮得濃縮液，濃縮液用冷凍干燥機(jī)干燥后的產(chǎn)物(A)暫存于干燥皿。濾渣陰干1小時(shí)后加入2L 95％乙醇在超聲波洗滌槽內(nèi)浸漬2小時(shí)，過(guò)濾，濾渣分兩次各加1L乙醇浸洗后再過(guò)濾，合并濾液用超濾設(shè)備濃縮得濃縮液，濃縮液用冷凍干燥機(jī)干燥后的產(chǎn)物(B)暫存于干燥皿。濾渣陰干1小時(shí)后加入2L經(jīng)冰箱降溫至4℃的純水在移入4℃冰箱的超聲波洗滌槽內(nèi)浸漬2小時(shí)，過(guò)濾，濾渣分兩次各加1L低溫純水浸洗后再過(guò)濾，合并濾液用超濾設(shè)備濃縮得濃縮液，濃縮液用冷凍干燥機(jī)干燥得產(chǎn)物(C)。用絞碎機(jī)混合冷凍干燥后的產(chǎn)物(A)、(B)、(C)，得133g提取物，裝于玻璃瓶?jī)?nèi)充氮密封，-20℃冰箱保藏。
2、對(duì)比實(shí)驗(yàn)用傳統(tǒng)的水提粗多糖的方法提取上述香菇的活性成分，并將其與上述本發(fā)明所得到香菇活性成分進(jìn)行對(duì)比，其結(jié)果如下
由上表可知，香菇的提取物得率和功能試驗(yàn)陽(yáng)性率均比對(duì)應(yīng)的常規(guī)提取方法高，成分分析的活性物質(zhì)種類明顯增加。
權(quán)利要求
1.食用菌活性物質(zhì)的原態(tài)提取方法，包括食用菌脫水粉碎、提取、提取液過(guò)濾濃縮并保藏的過(guò)程，其特征在于整個(gè)過(guò)程均在20℃以下的低溫中進(jìn)行，并依次進(jìn)行醇提、酯提、水提，再分別將所得的醇提液、酯提液、水提液過(guò)濾濃縮和冷凍干燥后攪拌混合。
2.如權(quán)利要求1所述的提取方法，其特征在于脂提的溶劑為石油醚、甘油或乙醚中的一種。
3.如權(quán)利要求1所述的提取方法，其特征在于醇提的溶劑為乙醇。
4.如權(quán)利要求1所述的提取方法，其特征在于整個(gè)過(guò)程除水提步驟外均在18℃中進(jìn)行。
5.如權(quán)利要求1所述的提取方法，其特征在于水提是在0～10℃中進(jìn)行的。
6.如權(quán)利要求5所述的提取方法，其特征在于水提是在4℃中進(jìn)行的。
7.如權(quán)利要求1所述的提取方法，其特征在于脂提、醇提及水提的提取溶劑的體積用量各為物料體積的2～5倍。
8.如權(quán)利要求1所述的提取方法，其特征在于脂提、醇提及水提的提取過(guò)程中均加入超聲波震蕩。
9.如權(quán)利要求1所述的提取方法，其特征在于提取液的過(guò)濾步驟采用可耐受有機(jī)溶劑的超濾裝置分別超濾脂提液、醇提液及水提液，去除提取液中分子量小于6000和大于200萬(wàn)道爾頓的成分。
10.如權(quán)利要求1所述的提取方法，其特征在于混合后的提取產(chǎn)物置于-15℃以下、充氮?dú)獗２亍?br> 全文摘要
本發(fā)明所述的食用菌活性物質(zhì)的原態(tài)提取方法，屬于食用菌提取物的制備領(lǐng)域。其整個(gè)過(guò)程均在20℃以下的低溫下進(jìn)行，包括食用菌原料脫水粉碎、脂提、醇提、水提、提取液超濾分離、干燥、混合后冷凍保藏步驟。本發(fā)明采用全程低溫，基本控制了水解、酶解等化學(xué)反應(yīng)，抑制了微生物的繁殖和有機(jī)溶劑的揮發(fā)，彌補(bǔ)了低溫下溶解率降低的缺陷。根據(jù)醚與醇、醇與水之間的相溶性，以及醚、醇對(duì)微生物的抑殺作用特點(diǎn)，采用從脂提到醇提再到水提的次序進(jìn)行連續(xù)的提取操作，不僅增加了提取率，縮短了提取時(shí)間，排除了外界微生物的干擾和危害，還可進(jìn)一步保持食用菌中活性物質(zhì)的原始結(jié)構(gòu)狀態(tài)，以維持其天然藥理作用。
文檔編號(hào)A61P39/06GK1947732SQ200610123109
公開(kāi)日2007年4月18日 申請(qǐng)日期2006年10月31日 優(yōu)先權(quán)日2006年10月31日
發(fā)明者楊小兵 申請(qǐng)人:廣東省微生物研究所