專利名稱：：一種復(fù)方銀杏葉制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種中藥制劑及其制備方法，具體的說本發(fā)明涉及一種復(fù)方銀杏葉制劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
：銀杏葉為銀杏科銀杏屬植物銀杏(GinkgobilobaL.)的葉。含黃酮類(約20余種)，萜類、酚類，有益微量元素和17種氨基酸等有效成分，具有降低血清膽固醇、增加冠狀動脈血流量、改善腦血液循環(huán)、解除平滑肌痙攣，松弛支氣管和抑菌等藥理作用。臨床上不僅應(yīng)用于治療心腦血管疾病，而且對神經(jīng)系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)等也具有良好的效果。法國以及德國等科學(xué)家已經(jīng)證實，銀杏葉提取物在治療腦缺血、腦損傷后遺癥和抗衰老方面均有顯著療效。近年來，隨著人們對銀杏研究的進(jìn)一步深入，銀杏與其他藥材配伍使用的報道日漸增多。李薇等[復(fù)方銀杏葉制劑治療慢性乙型肝炎早期纖維化的初步研究，中國中西醫(yī)結(jié)合雜志.1995,15(10):593]報道，選用銀杏葉、黃芪、黃零、虎杖、川芎、丹參、當(dāng)歸、鱉甲等制成沖劑，治療慢性乙型遷延性和活動性肝炎的早期肝纖維化患者，結(jié)果顯示肝纖維化進(jìn)程得到緩解，對慢性乙型肝炎早期纖維化均有較好的療效。陳登峰等[復(fù)方銀杏通脈膠囊的研制，中國醫(yī)院藥學(xué)雜志.2000，20(3):146-147]報道，采用銀杏葉、三七、丹參、黃芪和川芎等制成復(fù)方銀杏通脈膠囊，具有活血化瘀的功效，臨床用于心腦血管疾病的預(yù)防和治療，取得了良好的效果。劉肖田等[復(fù)方銀杏葉酊治療燒傷38例觀察，浙江中西醫(yī)結(jié)合雜志.1998，8(6):391]報道了采用銀杏葉、黃連、黃芹、黃柏、樟腦等制成酊劑，治療燒傷38例，取得了滿意的療效。上述介紹我們可以看出，銀杏作為一個優(yōu)秀的治療心腦血管疾病的藥物，目前的復(fù)方銀杏制劑報道的很少，應(yīng)用于腦血管疾病的就更有限了。
發(fā)明內(nèi)容鑒于這種情況，本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)中的不足，提供了一種配方合理、工藝嚴(yán)格的復(fù)方銀杏葉制劑及其制備方法。本發(fā)明的目的通過下述技術(shù)方案予以實現(xiàn)。本發(fā)明復(fù)方銀杏葉制劑由銀杏葉、人參和川芎或冰片制成，具體的是分別提取銀杏葉、人參的活性成分和川芎的揮發(fā)油或冰片，加入輔料，制成制劑。1.銀杏提取物(總黃酮含量為5~60%，總內(nèi)酯含量1~30%)的提取取銀杏葉，粉碎或不粉碎，釆用水提法，或有機溶劑提取法，或樹脂吸附法，或超臨界萃取法提取，得銀杏葉提取物；2.人參提取物(總皂甙含量40~80%)的提取取人參(或莖、葉)，采用水提法，或有機溶劑提取法，或柱吸附法，得人參提取物；3.川芎揮發(fā)油的提取取川芎，采用水蒸餾法，或超臨界萃取法提取，即得揮發(fā)油；或采用冰片替代川芎揮發(fā)油；4.取銀杏葉提取物3090%，人參提取物1~30%，川芎揮發(fā)油150%;5.或取銀杏葉提取物3090%，人參提取物1~60%,冰片1~10%;6.取步驟4或5中所述劑量的銀杏提取物和人參提取物，加入適當(dāng)?shù)臒o水乙醇使其充分分散，混合均勻；7.將上述提取物和揮發(fā)油或冰片混合均勾，加入輔料，制成制劑。步驟6中銀杏提取物和人參提取物的混合溫度控制在65'C以下，優(yōu)選為60°C，含醇量控制在總劑量的5%以下，優(yōu)選為4%;所述步驟中7，可以制成藥劑學(xué)上任意一種劑型，優(yōu)選為滴丸劑;制備滴丸劑型使用的輔料選自下述的一種或它們的結(jié)合:聚乙二醇(分子量為9000、6000和4000任意比例的混合物)，或硬脂酸鈉，或甘油明膠，或淀粉，或糊精或乳糖等；滴制步驟如下輔料加熱熔融，加入到分散好的混合物中，充分混合，滴制成丸。溫度控制在65。C以下，優(yōu)選6(TC，其中，化料和滴制的過程中，溫度應(yīng)控制在65。C以下，優(yōu)選為^rc。滴丸劑是指將固體藥物或液體藥物與輔料基質(zhì)混合加熱熔融，滴入不相混合的冷凝劑中，收縮而成的制劑。這種滴丸的過程，實際上是將固體分散物制成滴丸的過程。由于其比表面積大，且具有很強的水溶性，使其更容易被集體分散吸收，舌下含服，直接經(jīng)靜脈吸收，避免了首過效應(yīng)。真正達(dá)到了速效、高效的目的。本發(fā)明采用了現(xiàn)代工藝，將復(fù)方銀杏葉制劑制成滴丸，質(zhì)量控制手段先進(jìn)，提髙了有效成分的含量和質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，使其真正達(dá)到了速效、高效的效果。有益效果實驗一下面通過使用實施例10提供的方法，制成本發(fā)明復(fù)方銀杏葉制劑。并對其藥效學(xué)實驗進(jìn)行闡述，進(jìn)一步說明本發(fā)明的有益效果。藥效學(xué)實驗本發(fā)明復(fù)方銀杏滴丸與天保寧片進(jìn)行比較，采用三氯化鐵局部貼服大腦中動脈造成局灶性腦缺血損傷模型，探討本發(fā)明對大鼠腦缺血的保護(hù)作用。(1)試藥本發(fā)明復(fù)方銀杏滴丸，由天津天士力集團(tuán)現(xiàn)代中藥研究所提供；天保寧片，浙江康恩貝制藥有限公司生產(chǎn)，批號000418-2;紅四氮唑(TTC)，為淡黃色粉末，北京馬氏精細(xì)化學(xué)品有限公司產(chǎn)品，批號011102。(2)動物SD大鼠，雌雄兼?zhèn)洌w重190240g，合格證號SCXKll-0008，北京維通利華動物技術(shù)有限公司提供。(3)方法和結(jié)果實驗動物隨機分為四組，即假手術(shù)對照組、MCAT模型組、本發(fā)明對照組(其中總提取物為40mg/kg)、天保寧片等效量組(含EGB24mg/kg)。動物先連續(xù)灌胃給藥三天，每日給藥容積為5ml/kg，且一日劑量分兩次給予。第四天給藥90分鐘后施行手術(shù)，術(shù)后繼續(xù)灌胃給藥一天(第四天、第五天一R劑量一次給予)。其中假手術(shù)組和MCAT模型組灌服等容積的0.5%cmc溶液。大腦中動脈血栓模型(MCAT)大鼠模犁制作大鼠腹腔注射10a/。水合氯醛溶液(350mg/kg)麻醉，右側(cè)臥位固定，在眼外眥和外耳道連線中點作一弧形切口，長約1.5cm，夾斷顳肌并切除，暴露顳骨，于實體顯微鏡下，用牙科鉆在顴骨與顳鱗骨接合處靠近口側(cè)lmm處作一直徑2.5mm的骨窗，清理殘渣，暴露大腦中動脈(位于嗅束及大腦下靜脈之間)。置一小片塑料薄膜保護(hù)血管周圍組織。將吸有50y。氯化鐵溶液10yL的小片定量濾紙敷在此段大腦中動脈上，30min后取下濾紙，用生理鹽水沖洗局部組織，逐層縫合，回籠飼養(yǎng)。室溫控制在26t假手術(shù)組除不滴加氯化鐵溶液外，其余手術(shù)步驟同模型組。神經(jīng)癥狀評分方法對試驗動物在術(shù)后6h和24h，進(jìn)行行為檢測。評分標(biāo)準(zhǔn)①提鼠尾觀察前肢屈曲情況，如雙前肢對稱前伸，記為0分；如手術(shù)對側(cè)前肢出現(xiàn)肩屈曲、肘屈曲、肩內(nèi)旋或兼具，記為1分。②將動物置于平面上，分別推雙肩向?qū)?cè)移動，檢査阻力。如雙側(cè)阻力對等且有力記為0分；如手術(shù)對側(cè)阻力下降，記為1分。③將動物兩前肢置一金屬網(wǎng)上，觀察肌張力。雙側(cè)肌張力對等且有力為0分；手術(shù)對側(cè)前肢肌張力下降記為1分。④提鼠尾，動物有不停地向手術(shù)對側(cè)旋轉(zhuǎn)者，記為1分。根據(jù)以上標(biāo)準(zhǔn)評分，滿分為4分，分?jǐn)?shù)越高，動物的行為障礙越嚴(yán)重。腦梗塞范圍的測定方法動物經(jīng)行為評分后，斷頭取腦。去掉嗅球、小腦和低位腦干，剩余部分在4以下冠狀切成5片。迅速將腦片置于TTC染液中(每5ml染液中含4。/。TTC1.5ml，1MK2HP04，O.lml，其余加蒸餾水至刻度)，37匸避光溫孵30分鐘，取出后置于10%甲醛液中避光保存24h。經(jīng)染色后非缺血區(qū)為玫瑰紅色，梗塞區(qū)為白色。將白色組織仔細(xì)挖下稱重，以梗塞組織重量占全腦重量及患側(cè)腦重量的百分比作為腦梗塞范圍。經(jīng)統(tǒng)計學(xué)檢驗采用組間配對比較t檢驗，結(jié)果見下表。<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>注與模型組相比，*P<0.05，**P<0.01結(jié)論由表中可以看出，本發(fā)明組可以明顯縮小腦梗塞范圍(PO.Ol，P<0.05)，并可以改善其6和24小時的神經(jīng)癥狀。實驗二復(fù)方銀杏滴丸對擬氣虛血瘀模型小鼠保護(hù)作用的實驗研究本研究采用小鼠8。C冷水負(fù)重游泳5分鐘造模擬臨床的氣虛血瘀證，通過測定模型動物斷頭喘氣持續(xù)時間以及腦組織生化指標(biāo)的改變，觀察本發(fā)明——復(fù)方銀杏滴丸的耐缺氧作用，以闡明藥物的部分作用機理。(l)材料:動物:健康ICR小鼠，雌雄兼用，體重21土2g，合格證號SCXK(京)2002-0003，由北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司提供。藥品受試藥物C0-GBE，棕黑色滴丸，由天津天士力集團(tuán)現(xiàn)代中藥研究所捉供，批號20020416。實驗前用0.5MCMC配制。陽性對照藥天保寧片，康恩貝集團(tuán)制藥有限公司產(chǎn)品，每片含銀杏葉提取物為40mg，人日用量3-6片/日。批號:010613-2。試劑蛋白定量(雙縮脲法)、乳酸(LA)、乳酸脫氫酶(LDH)、Na+-K'-ATP酶、Ca"-Mg"-ATP酶試劑盒均由南京建成生物工程研究所提供。其它藥品及試劑均為市售分析純。儀器HZQ-C空氣浴振蕩器，哈爾濱市東明醫(yī)療儀器廠產(chǎn)品；犯OR低溫離心機，德國Heraeus產(chǎn)品722型分光光度計，上海第三分析儀器廠產(chǎn)品；AEG-220型電子分析天平，日本Shimadzu公司產(chǎn)品。(2)分組及給藥實驗動物隨機分為六組，即模型對照組、空白對照組、天保寧片組(40mg/kg)、復(fù)方銀杏葉滴丸大劑量組(60mg/kg)、復(fù)方銀杏葉滴丸中劑量組(30mg/kg)、復(fù)方銀杏葉滴丸小劑量組(15mg/kg)。動物先連續(xù)灌胃給藥三天，一日劑量分兩次給予，每曰給藥容積為10mVkg。第四天給藥60分鐘后造模(第四天一次給全日量)。其中模型對照組和空白對照組灌服等容積的0.5%Cmc溶液。模型制作于小鼠尾尖部約2.5cm處粘一10%體重的橡皮泥球，放入8土0.5'C的冷水中游泳5分鐘后，取出待測(實驗過程中，室溫始終保持在23°C)。測定方法斷頭喘氣持續(xù)時間的測定小鼠白冷水中取出后，在雙耳后部位迅速斷頭，記錄從新頭開始至其最后一次喘氣停止的一段時間作為斷頭喘氣持續(xù)時間。生化指標(biāo)的測定測定斷頭喘氣持續(xù)時間后，于4'C冰盤上迅速取腦，并去掉嗅球、小腦及低位腦干，稱重斤加9倍預(yù)冷生理鹽水制備成10%腦勻漿，備用。LA含量和LDH活力、Na+-K+-ATP酶活力、Ca2+-Mg2+-ATP酶活力測定均按照南京建成生物工程研究所試刊盒說明進(jìn)行操作。統(tǒng)計學(xué)處理數(shù)據(jù)以平均值士標(biāo)準(zhǔn)差統(tǒng)計處理。(3)結(jié)果復(fù)方銀杏滴丸對模型小鼠斷頭喘氣持續(xù)時間的影響模型對照組與空白對照組相比，斷頭喘氣持續(xù)時間明顯延長復(fù)方銀杏滴丸三個劑量組與模型組對照組相比，斷頭喘氣持續(xù)時間有進(jìn)一步地延長(PO.l)，結(jié)果見表l。復(fù)方銀杏滴丸對模型小鼠腦組織生化指標(biāo)的影響與空白對照組相比，模型對照組小鼠腦組織LA含量明顯增加，而LDH、化+-1^+-^^酶和0&2+^82+-八丁？酶活力明顯下降(PO.01):復(fù)方銀杏滴丸三個劑量均可以明顯逆轉(zhuǎn)模型動物腦組織上述異常生化代謝的改變，表現(xiàn)為使模型動物腦組織LDH、Na+-K+-ATP酶及Ca2+-Mg2+-ATP酶活力增加，將低其已升高的LA含量(P0.05，PO.Ol)。與天寶寧片組進(jìn)行對比，復(fù)方銀杏滴丸三個劑量均可以明顯逆轉(zhuǎn)模型動物腦組織的Na+-K+-ATP酶(PO.01)的異常改變，中劑量組還可以逆轉(zhuǎn)Ca"-Mg"-ATP酶的異常(P0.05)，結(jié)果見表2。表1復(fù)方銀杏滴丸對擬氣虛型小鼠斷頭喘氣持續(xù)時間的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>天寶寧片組154032.20±2.76*復(fù)方銀杏滴丸小劑量151532.07±3.08*復(fù)方銀杏滴丸中劑量153032.07±4.04*復(fù)方銀杏滴丸大劑量146031.86±3.08*注與模型組對比，*P<0.05，**P<0.01。表2復(fù)方銀杏滴丸對擬氣虛血瘀模型小鼠腦組織生化代謝的影響組別LA含量(mmo1/1)國活力(u/gprot)酶活力Na+-K+-ATPCa2+-Mg2+-ATP空白對照組1.71±0.46**1279.92±295.81**1.73±0.56*0.8()±().13**模型對照組2.12±0.26778.41±127.46**0.60±0.380.51±0.09天寶寧片組1.45±0.23**903.91±197.95*1.05±0.19**0.89±0.17**復(fù)方銀杏小劑量1.65±0.16**1167.66±274.63**1.74±0.40**AA0.98±0.27**復(fù)方銀杏中劑量1.72±0.17**1196.71±614.02*1.89±0.64**aa1.04±0.20**A復(fù)方銀杏大劑量1.79±0.09**983.66±246.81*2.31±0.53**AA0.90±0.22**注動物數(shù)與劑量設(shè)計同表1，與模型組對比^PO.05，"PO.01;與天寶寧片組對比，ApO.05,AAP<0.01。(4)結(jié)論本實驗發(fā)現(xiàn)擬氣虛血瘀模型小鼠腦組織LDH、Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶活力均明顯下降，而LA含量明顯增加。給與復(fù)方銀杏滴丸后可以明顯逆轉(zhuǎn)這些生化指標(biāo)的改變。復(fù)方銀杏滴丸的主要成分為銀杏葉提取物(GBE)和人參莖葉皂苷等。研究表明，預(yù)防給予GBE可以有效抑制微栓塞導(dǎo)致的能量代謝障礙后出現(xiàn)的ATP、葡萄糖水平的降低以及乳酸水平的升高；人參皂苷具有抑制缺血再灌腦組織內(nèi)LDH活性下降，延緩缺氧期細(xì)胞內(nèi)ATP的耗竭，改善能量負(fù)荷的作用，并能降低運動時的血乳酸濃度，通過改變運動時的能量平衡，產(chǎn)生抗疲勞作用。從本研究結(jié)果可以看出，復(fù)方銀杏滴丸中幾種成分協(xié)同作用，通過增強模型小鼠的抵抗酸中毒能力和升高其降低的乳酸脫氫酶、ATP酶活力，改善神經(jīng)元質(zhì)膜的功能狀態(tài)，減輕酸中毒所誘發(fā)的多種病理生理反應(yīng)，從多個環(huán)節(jié)發(fā)揮保護(hù)腦組織的作用。實驗三下面通過使用實施例11提供的方法，制成本發(fā)明復(fù)方銀杏葉制劑。并對其藥效學(xué)實驗進(jìn)行闡述，進(jìn)一步說明本發(fā)明的有益效果。藥效學(xué)試驗本發(fā)明復(fù)方銀杏滴丸與天保寧片進(jìn)行比較，采用三氯化鐵局部貼服大腦中動脈造成局灶性腦缺血損傷模型，探討本發(fā)明對大鼠腦缺血的保護(hù)作用。1.實驗材料1.1動物SD大鼠，雌雄兼用，體重220土10g，合格證號SCXK11—00-0008，由北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司提供。1.2藥品與試劑受試藥復(fù)方銀杏滴丸為棕黑色滴丸，由天津天士力集團(tuán)提供，批號20020110，實驗前用0.5MCMC配制。陽性對照藥天保寧片，康恩貝集團(tuán)制藥有限公司產(chǎn)品，批號000418—2。紅四氮唑(TTC):為淡黃色粉末，北京馬氏精細(xì)化學(xué)品有限公司產(chǎn)品，批號011102。1.3儀器XTT實體顯微鏡，云南光學(xué)儀器廠產(chǎn)品。AEG-220電子分析天平，日本Shimadzu公司產(chǎn)品。307-6臺式牙科車廠上海齒科醫(yī)械廠產(chǎn)品。2.實驗方法2.1分組及給藥實驗動物隨機分為五組，即假手術(shù)對照組、MCAT模型組、復(fù)方銀杏滴丸A組(其中含總有效成分量為36mg/kg)、復(fù)方銀杏滴丸B組(其中含總有效成分量為30mg/kg)、天保寧片等效量組(含EGB24mg/kg)。動物先連續(xù)灌胃給藥三天，每日給藥容積為5ml/kg，且一日劑量分兩次給予。第四天給藥90分鐘后施行手術(shù)，術(shù)后繼續(xù)灌胃給藥一天(第四天、第五天一日劑量一次給予)。其中假手術(shù)組和MCAT模型組灌服等量的聚乙二醇一O.5%cmc溶液。2.2大腦中動脈血栓模型(MCAT)大鼠模型制作大鼠腹腔注射1(m水合氯醛溶液(300mg/kg)麻醉。按Tamura等的方法，稍加改進(jìn)。大鼠右側(cè)臥位固定，在眼外眥和外耳道連線中點作一弧形切口，長約1.5cm，夾斷顳肌并切除，暴露顳骨，于實體顯微鏡下，用牙科鉆在顴骨與顳鱗骨接合處靠近口側(cè)lmm處作一直徑2.5mm的骨窗，清理殘渣，暴露大腦中動脈(位于嗅束及大腦下靜脈之間)。置一小片塑料薄膜保護(hù)血管周圍組織。將吸有50%氯化鐵溶液10uL的小片定量濾紙敷在此段大腦中動脈上，30min后取下濾紙，用生理鹽水沖洗局部組織，逐層縫合，回籠詞養(yǎng)。室溫控制在27t。假手術(shù)組除不滴加氯化鐵溶液外，其余手術(shù)步驟同模型組。2.3神經(jīng)癥狀評分方法對試驗動物在術(shù)后化和24h，進(jìn)行行為檢il，按Bederson等的方法加以改進(jìn)。評分標(biāo)準(zhǔn)①提鼠尾觀察前肢屈曲情況，如雙前肢對稱前伸，記為O分；如手術(shù)對側(cè)前肢出現(xiàn)肩屈曲、肘屈曲、肩內(nèi)旋或兼具，.記為1分。②將動物置于平面上，分別推雙肩向?qū)?cè)移動，檢査阻力。如雙側(cè)阻力對等且有力記為0分；如手術(shù)對側(cè)阻力下降，記為1分。③將動物兩前肢置一金屬網(wǎng)上，觀察肌張力。雙側(cè)肌張力對等且有力為0分手術(shù)對側(cè)前肢肌張力下降記為1分。提鼠尾，動物有不停地向手術(shù)對側(cè)旋轉(zhuǎn)者，記為1分。根據(jù)以上標(biāo)準(zhǔn)評分，滿分為4分，分?jǐn)?shù)越高，動物的行為障礙越嚴(yán)重。2.4腦梗塞范圍的測定方法動物經(jīng)行為評分后，斷頭取腦。去掉嗅球、小腦和低位腦干，剩余部分在4'C以下冠狀切成5片。迅速將腦片置于TTC染液中(每5ml染液中含4%TTC1.5ml，1MK2HP0,0.lml，其余加蒸餾水至刻度)，37。C避光溫孵30分鐘，取出后置于1(W甲醛液中避光保存24h。經(jīng)染色后非缺血區(qū)為玫瑰紅色，梗塞區(qū)為白色。將白色組織仔細(xì)挖下稱重，以梗塞組織重量占全腦重量及患側(cè)腦重量的百分比作為腦梗塞范圍。統(tǒng)計學(xué)檢驗采用組間配對比較t檢驗，結(jié)果見下表3表3復(fù)方銀杏滴丸對腦梗塞的影響組別動物劑量腦梗塞范圍(％)神經(jīng)癥狀評分?jǐn)?shù)占全腦重占患側(cè)腦重6h24h假手術(shù)組120±0**0±0**0±0**模型組114.I6±1.32AA8.12±2.61AA2.64±0.92AA2.55±0.52AA天保寧組10242.66±1.78*5.19±3.35*1.80±0.79*1.50±0.53**復(fù)方銀杏葉滴丸A12362.45±1.48**4.75±2.93**1.82±0.75*1.55±0.69**復(fù)方銀杏葉滴丸B12301.66±0.73**3.18±1.41**1.91±0.54*1.45±0.69**注與模型組相比，*P<0.05，**P<0.01;與假手術(shù)組對比，AAP<0.01。2.小結(jié)從表中可以看出，復(fù)方銀杏滴丸A、B組均可以明顯縮小模型動物的腦梗塞范圍(PO.Ol)，并可改善其6小時和24小時的神經(jīng)癥狀。實驗四下面通過使用實施例11提供的方法，制成本發(fā)明復(fù)方銀杏葉制劑。并對其藥效學(xué)實驗進(jìn)行闡述，進(jìn)一步說明本發(fā)明的有益效果。藥效學(xué)試驗1.實驗材料1.1動物ICR小鼠，雌雄兼用，體重21土2g，合格證號SCXK11-00-0008，由北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司提供。1.2藥品與試劑1.2.1受試藥復(fù)方銀杏滴丸A、B,為棕黑色滴丸天津天士力集團(tuán)提供，批號:20020110實驗前用0.5%CMC配制。復(fù)方銀杏滴丸A，臨床人日用量為252mg;復(fù)方銀杏滴丸B，臨床人日用量為312mg。1.2.2陽性對照藥天保寧片，康恩貝集團(tuán)制藥有限公司產(chǎn)品，批號000418-2。人參養(yǎng)榮丸，北京同仁堂制藥廠產(chǎn)品，批號0019972-40。2.實驗方法2.l分組及給藥實驗動物隨機分為五組，即模型對照組、復(fù)方銀杏滴丸A組(給藥量為含總有效成分量為40mg/kg)、復(fù)方銀杏滴丸B組(給藥量為含總有效成分量為50mg/kg)、天保寧片等效量組(給藥量為含EGB40mg/kg)、人參養(yǎng)榮丸等效量組(給藥量為3g/kg)。動物先連續(xù)灌胃給藥三天，每次給藥容積為2ml/100g，且一日劑量分兩次給予。第四天給藥60分鐘后進(jìn)行負(fù)重(10%體重)游泳(第四天一日劑量一次給予)。其中模型對照組灌服等量的0.5%cmc溶液。2.2實驗方法小鼠尾尖部約2cm處系一10%體重的橡皮泥球，放入8°C±0.5'C的冰水中游泳，每桶一只，室溫始終保持在23'C。觀察小鼠從放入水中至死亡的這一段時間。若超過16分鐘，則以16分鐘計。統(tǒng)計學(xué)檢驗采用組間配對比較t檢驗，結(jié)果見下表4。表4復(fù)方銀杏滴丸對小鼠游泳死亡時間的影響組別動物數(shù)劑量(g或/kg)游泳死亡時間(秒)模型組17534.59±125.59人參養(yǎng)榮丸組163663.38±172.36*天保寧片組1640715.75±161.20**復(fù)方銀杏葉滴丸組A1640643.81±126.55*復(fù)方銀杏葉滴丸組B1550717.27±149.55**3.小結(jié)從表中可以看出，復(fù)方銀杏滴丸A、B組均可以明顯延長小鼠冰水游泳至死亡的時間(P<0.05，P<0.01)。具體實施例方式下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步的說明，下述該實施例僅用于說明本發(fā)明而對本發(fā)明沒有限制。實施例1(1)銀杏葉提取物的制備取1000g銀杏葉粉碎，用5倍量丙酮水(70:30)混合液加熱提取2次，每次2小時，溫度為506(TC，合并提取液，濾過，減壓濃縮成銀杏葉提取物280g;(2)人參提取物的制備取人參切片100g，加8倍量水，提取2次，每次3小時，合并提取液，濃縮，濃縮至每5ml含有l(wèi)g人參藥材，得人參提取物40g;(3)取川芎，粉碎，采用水蒸餾法，得川芎揮發(fā)油80g;(4)取上述銀杏提取物和人參提取物，加入無水乙醇，使其充分分散，混合均勻，溫度控制在6(TC，含醇量控制在總劑量的4%;(5)將銀杏葉、人參提取物和川芎揮發(fā)油混合均勻，加入聚乙二醇6000，在6(TC下化料，滴制成滴丸。實施例2(1)銀杏葉提取物的制備取銀杏葉粉碎，加5倍量65%乙醇回流提取2次，每次2小時，溫度為6(TC，合并提取液，濾過，減壓濃縮回收乙醇得銀杏葉提取物280g;(2)人參提取物的制備取人參切片，加8倍量70%乙醇，提取2次，每次3小時，合并提取液，回收乙醇，濃縮至每5ml含有l(wèi)g人參藥材，得人參提取物40g;(4)取川芎，粉碎，采用水蒸餾法，得川芎揮發(fā)油80g;(5)取上述銀杏提取物和人參提取物，加入無水乙醇，使其充分分散，混合均勻，溫度控制在60°C，含醇量控制在總劑量的4%;(6)將銀杏葉、人參提取物和川芎揮發(fā)油混合均勻，加入聚乙二醇9000，在60。C下化料，滴制成滴丸。實施例3(1)將銀杏葉提取物340g、人參提取物20g和川芎揮發(fā)油40g混合均勻，制成滴丸劑。(2)取川芎，粉碎，采用超臨界萃取法，得川芎揮發(fā)油40g;(3)取銀杏葉提取物和人參提取物制法同實施例2。其中，步驟l中的銀杏提取物和人參提取物，加入無水乙醇，使其充分分散，混合均勻，溫度控制在6(TC，含醇量控制在總劑量的4%;將銀杏葉、人參提取物和川芍揮發(fā)油混合均勻，加入聚乙二醇6000，在60。C下化料，滴制成滴丸。實施例4(1)銀杏葉提取物的制備取銀杏葉，加5倍量65%乙醇，加熱回流提取2次，每次1小時，溫度6(TC，合并提取液，濃縮，過大孔吸附樹脂(D101)精制，用85%乙醇洗脫，洗脫液濃縮回收乙醇，得銀杏葉提取物340g;(2)人參提取物的制備取人參，乙醇，加熱回流提取3次，每次1小時，合并提取液，濃縮，過中性氧化鋁精制，用醇洗脫，洗脫液濃縮回收乙醇，得銀杏葉提取物，得人參提取物20g;(3)取上述銀杏提取物和人參提取物，加入無水乙醇，使其充分分散，混合均勻，溫度控制在56X:，含醇量控制在總劑量的3%;(4)將銀杏葉、人參提取物和川芎揮發(fā)油40g混合均勻，加入聚乙二醇6000，在59'C下化料，滴制成滴丸。(5)川芎揮發(fā)油制法同實施例3。實施例5(1)銀杏葉提取物的制備取粉碎銀杏葉，采用采用C02超臨界萃取法，得銀杏葉提取物200g，工藝條件為溫度為45°C，萃取壓力為25Mpa，流量0.8ml/min，時間2小時。其中銀杏總黃酮50%，萜內(nèi)酯15%;(2)取上述銀杏提取物和人參提取物，加入無水乙醇，使其充分分散，混合均勻，溫度控制在6(TC，含醇量控制在總劑量的4%;(3)將銀杏葉、人參提取物和川芎揮發(fā)油120g混合均勻，加入聚乙二醇9000，在60。C下化料，滴制成滴丸。(4)人參提取物制法同實施例4;(5)川芎揮發(fā)油的制法同實施例3。實施例6(1)取上述銀杏提取物200g和人參提取物80g，加入無水乙醇，使其充分分散，混合均勻，溫度控制在59。C，含醇量控制在總劑量的5%;(2)將銀杏葉、人參提取物和川芎揮發(fā)油120g混合均勻，加入聚乙二醇9000，在60。C下化料，滴制成滴丸。(3)銀杏葉提取物制法同實施例5;(4)人參葉提取物制法實施例1;(5)川芎揮發(fā)油制法同實施例3。實施例7(1)取上述銀杏提取物140g和人參提取物100g，加入無水乙醇，使其充分分散，混合均勻，溫度控制在60'C,含醇量控制在總劑量的4%;(2)將銀杏葉、人參提取物和川芎揮發(fā)油160g混合均勻，加入聚乙二醇9000,在6(TC下化料，滴制成滴丸。(3)銀杏葉提取物制法同實施例2;(4)人參提取物的制備同實施例4;(5)川芎揮發(fā)油制備同實施例3。實施例8(1)取上述銀杏提取物140g和人參提取物100g，加入無水乙醇，使其充分分散，混合均勻，溫度控制在60'C,含醇量控制在總劑量的4%;(2)將銀杏葉、人參提取物和川芎揮發(fā)油160g混合均勻，加入聚乙二醇9000,在6(TC下化料，滴制成滴丸。(3)銀杏葉提取物制備同實施例4;(4)人參提取物的制備實施例4;(5)川芎揮發(fā)油的制備同實施例3。實施例9(1)取上述銀杏提取物240g和人參提取物60g，加入無水乙醇，使其充分分散，混合均勻，溫度控制在6(TC，含醇量控制在總劑量的4%;(2)將銀杏葉、人參提取物和川芎揮發(fā)油100g混合均勻，加入硬酯酸鈉，在58'C下化料，滴制成滴丸。(3)銀杏葉提取物制備同實施例5;(4)人參提取物制備同實施例4;(5)川芎揮發(fā)油制備同實施例3。實施例10(1)取上述銀杏提取物240g和人參提取物60g，加入無水乙醇，使其充分分散，混合均勻，溫度控制在60。C,含醇量控制在總劑量的4%;(2)將銀杏葉、人參提取物和川芎揮發(fā)油100g混合均勻，加入甘油明膠，在58。C下化料，滴制成滴丸。(3)銀杏葉提取物制備同實施例4;(4)人參提取物制備同實施例4;(5)川芎揮發(fā)油制備同實施例3。實施例11(1)取冰片16g粉碎，備用；(2)取上述銀杏提取物256g和人參提取物128g,加入無水乙醇，使其充分分散，混合均勻，溫度控制在58'C，含醇量控制在總劑量的5%;(3)將銀杏葉、人參提取物和冰片混合均勻，加入聚乙二醇6000，在6(TC下化料，滴制成滴丸。(4)銀杏葉提取物制備同實施例4;(5)人參提取物的制備同實施例4。實施例12(1)取冰片12g粉碎，備用；(2)取上述銀杏提取物312g和人參提取物76g，加入無水乙醇，使其充分分散，混合均勻，溫度控制在6(TC，含醇量控制在總劑量的4%;(3)將銀杏葉、人參提取物和冰片混合均勻，加入聚乙二醇6000，在60。C下化料，滴制成滴丸。(4)銀杏葉提取物制備同實施例2;(5)人參提取物的制備同實施例2。實施例13(1)取冰片12g粉碎，備用；(2)取上述銀杏提取物200g和人參提取物188g,加入無水乙醇，使其充分分散，混合均勻，溫度控制在6(TC，含醇量控制在總劑量的4%;(3)將銀杏葉、人參提取物和冰片混合均勻，加入硬酯酸鈉，在6(TC下化料，滴制成滴丸。(4)銀杏葉提取物制備同實施例3;(5)人參提取物的制備同實施例3。實施例14(1)取冰片16g粉碎，備用；(2)取上述銀杏提取物280g和人參提取物104g，加入無水乙醇，使其充分分散，混合均勻，溫度控制在6(TC，含醇量控制在總劑量的4%;(3)將銀杏葉、人參提取物和冰片混合均勻，加入甘油明膠，在6(TC下化料，滴制成滴丸。(4)銀杏葉提取物制備同實施例4;(5)人參提取物的制備同實施例4。實施例15("取冰片12g粉碎,備用；(2)取上述銀杏提取物160g和人參提取物228g,加入無水乙醇，使其充分分散，混合均勻，溫度控制在6(TC，含醇量控制在總劑量的4%;(3)將銀杏葉、人參提取物和冰片混合均勻，加入聚乙二醇6000，在60。C下化料，滴制成滴丸。(4)銀杏葉提取物制備同實施例5;(5)人參提取物的制備同實施例5。權(quán)利要求1.一種復(fù)方銀杏葉制劑，其特征在于，它按重量百分比由下述組分構(gòu)成銀杏葉提取物30-90％，人參提取物1-60％，冰片1-10％。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種復(fù)方銀杏制劑，其特征在于，所述各組分的含量為銀杏葉提取物6478%，人參提取物19-33%，冰片2-4%。3.—種復(fù)方銀杏葉制劑的制備方法，處方組成為銀杏葉提取物30-90%，人參提取物卜60%，冰片1-10%，采取以下步驟制成(1)取銀杏葉，粉碎或不粉碎，采用水提法，或有機溶劑提取法，或樹脂吸附法，或超臨界萃取法提取，得銀杏葉提取物；(2)取人參(或莖、葉)，采用水提法，或有機溶劑提取法，或柱吸附法，得人參提取物；(3)將上述劑量的銀杏提取物和人參提取物，在一定溫度下，加入無水乙醇使其充分分散，混合均勻；(4)將上述步驟(3)中得到的混合物和冰片混合均勻，加入輔料，制成制劑。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述銀杏葉提取物中總黃酮含量為5-60%，總內(nèi)酯含量為1-30%。5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述人參提取物中總皂甙含量為40-80%。6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述步驟(3)中的溫度為65'C以下；乙醇含量為總劑量的5%以下。7.根據(jù)權(quán)利要求3或6所述的方法，其特征在于，所述步驟(3)中的溫度為6(VC;乙醇含量為總劑量的4%。8.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述步驟(4)中的制劑為片劑、顆粒劑、膠囊和滴丸劑。全文摘要本發(fā)明涉及一種復(fù)方銀杏葉制劑，該制劑是由銀杏葉提取物、人參提取物與冰片組成。它不僅可以用于預(yù)防、治療冠心病、心絞痛，還對腦缺血損傷具有很好的保護(hù)作用。本發(fā)明提供了制備方法和藥理作用。文檔編號A61P9/10GK101099758SQ20061013767公開日2008年1月9日申請日期2003年12月25日優(yōu)先權(quán)日2003年12月25日發(fā)明者葉正良,鑫孫,章順楠申請人:天津帝士力投資控股集團(tuán)有限公司