專利名稱：：菊花總黃酮提取方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明為中藥提取的方法，主要涉及中藥有效組分提取的方法，尤其涉及菊花總黃酮的提取方法。
背景技術(shù)：
：菊花本品為為菊科植物C7jo^朋^emwmmonyW&mRamat.的干燥頭狀花序。9-11月花盛開時分批釆收，陰干或培干，或熏、蒸后曬干。藥材按產(chǎn)地和加工方法不同，分為"毫菊"、"除菊"、"貢菊"、"杭菊"。菊花，味甘苦，微寒，入肝經(jīng)，明目，清頭風(fēng)，去目翳，發(fā)表。能平肝火,內(nèi)風(fēng)，治頭暈?zāi)棵?，偏正頭風(fēng)，黑睛生翳，抱輪紅赤。病后翳膜不去者又能益肝補陰，治肝腎不足之目昏內(nèi)障。本品有白菊、黃菊和野菊花三種，白菊花味甘、清熱力稍弱，長于平肝明目；黃菊花其味苦重，清熱力較強，常用于疏風(fēng)散熱；野菊花清熱解毒力很強，善解癰腫瘡毒。菊花中黃酮類物質(zhì)對冠心病、心絞痛、高血壓、心血管疾病有很好的療效，同時還有顯著的清除人體內(nèi)自由基、抗老化、抗突變、調(diào)血脂、降血壓等藥理保健功能。國外研究發(fā)現(xiàn)菊花對單純皰疹病毒(HSV-1)、脊髓灰質(zhì)炎病毒和麻疹病毒具有不同程度的抑制作用，與空白組對照，空斑形成率減少50%。菊花水浸劑(l:4)在試管內(nèi)對堇色毛癬菌、同心性毛癬菌、許蘭氏黃癬菌、奧杜盎氏小芽肥癬菌、鐵銹色小芽胞癬菌、羊毛狀小芽胞癬菌、腹股溝表皮癬菌、紅色表皮癬菌、星形好卡氏菌等皮膚真菌均有不同程度的抑制作用。另外菊花還具有抗艾滋病作用,它能抑制ZV遞轉(zhuǎn)錄酶和HLV復(fù)制的活性?！侗静菡x》說菊花為"目科要藥"。菊花在眼科中有著廣泛的應(yīng)用，如白菊花配伍柴胡、蟬蛻、木賊、羌活、防風(fēng)、蒼術(shù)、白術(shù)、赤芍、女貞子、生地、菟絲子、甘草，用此方加減治療中心性漿液性脈絡(luò)膜視網(wǎng)膜病變、急性視網(wǎng)膜色素上皮炎、視網(wǎng)膜靜脈周圍炎、眼外傷及黃斑疾病等。配伍一些補氣血、益肝腎滋補之品還可用于治療白內(nèi)障、原發(fā)性視網(wǎng)膜色素變性、視神經(jīng)萎縮、遠視、弱視、迎風(fēng)流淚等。菊花主要含黃酮類、綠原酸、揮發(fā)油等化合物?，F(xiàn)有的菊花總黃酮提取方法,一般采用水提取或者乙醇溶液提取，濃縮，干躁，即得，這種方法提取的總黃酮含量低，用本發(fā)明可以克服此缺點。國產(chǎn)的大孔樹脂提取，提取物溶劑殘留較多，不易達到藥用標(biāo)準(zhǔn)，本發(fā)明可以克服這些缺點。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種菊花總黃酮大孔樹脂純化方法，是以乙醇加熱回流提取菊花，回收乙醇，濃縮，將菊花提取液吸附到大孔樹脂上、洗脫、收集洗脫液、濃縮、干燥，獲得純化的菊花總黃酮。本發(fā)明提供的菊花總黃酮大孔樹脂純化方法，將菊花以10%~95%的乙醇提取，優(yōu)選乙醇濃度為20%~80%,最優(yōu)選為40%。本發(fā)明提供的菊花總黃酮大孔樹脂純化方法，將菊花以乙醇提取14次，最優(yōu)選為3次。本發(fā)明提供的菊花總黃酮大孔樹脂純化方法，每次提取菊花質(zhì)量與乙醇溶液的體積比為1~20倍，優(yōu)選提取體積為4~14倍，最優(yōu)選提取體積為8~12倍。本發(fā)明提供的菊花總黃酮大孔樹脂純化方法，每次提取的時間為0.52h，最優(yōu)選時間為lh。本發(fā)明提供的菊花總黃酮大孔樹脂純化方法，大孔樹脂選用日本三菱公司HP20、SP825、SP850、SP700、SP70，優(yōu)選大孔樹脂SP850、SP700、SP70，最優(yōu)選SP70。本發(fā)明提供的菊花總黃酮大孔樹脂純化方法，菊花提取液的上樣量(菊花質(zhì)量樹脂體積)為0.5:1~8:1，優(yōu)選1:1~4:1，最優(yōu)選1.5:1。本發(fā)明提供的菊花總黃酮大孔樹脂純化方法，洗脫流速為洗脫液流速為lBV/h~5BV/h，最優(yōu)選為2BV/h。本發(fā)明提供的菊花總黃酮大孔樹脂純化方法，洗脫劑為有機醇，優(yōu)選項為乙醇。本發(fā)明提供的菊花總黃酮大孔樹脂純化方法，洗脫劑的洗脫濃度為5%95%，最優(yōu)選為20%~75%。。洗脫劑的洗脫體積為110倍柱體積，優(yōu)選為38倍柱體積，最優(yōu)選為5倍柱體積。獲得純化的菊花總黃酮含量大于55%。本發(fā)明具有以下優(yōu)點1、本發(fā)明涉及的菊花總黃酮樹脂純化的方法是一種操作簡便、快捷的方法。2、所選用的大孔樹脂具有吸附量大，解吸率大的特點。3、本發(fā)明方法以乙醇為溶劑，既價廉又無毒。4、用本發(fā)明方法純化菊花提取物，總黃酮含量可達55%以上，且重現(xiàn)性好，樹脂可重復(fù)使用。圖1.菊花靜態(tài)吸附與解吸率曲線圖2.菊花動態(tài)吸附泄漏曲線圖3.菊花動態(tài)解吸曲線圖4菊花比上柱量曲線圖5.菊花洗脫終點曲線具體實施例方式本發(fā)明將結(jié)合具體實施例作進一步說明，這些實例僅用于說明目的，而不用于限制本發(fā)明范圍。說明菊花總黃酮含量測定方法①儀器與試藥北京普析通用儀器有限公司TU-1901型紫外可見分光光度儀，聯(lián)想數(shù)字處理中心。木犀草苷對照品(供含量測定用)購于中國藥品生物制品檢定所，批號為111720-200501，使用前置五氧化二磷減壓干燥器中干燥24小時，使之恒重。甲醇為分析純(北京化工廠)，水為重蒸餾水，其它試劑均為分析純。②檢測條件檢測波長348nm,空白對照甲醇。③對照品溶液的制備精密稱取木犀草苷對照品9.4mg，置25ml量瓶中，甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得對照品溶液。④工作曲線制作精確吸取O.l、0.4、0.8、1.2、1.6ml置25ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻。以甲醇作為空白，于348nm波長處測定吸光度。以吸光度為縱坐標(biāo)，木犀草苷對照品濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并計算回歸方程為Y=43.098X-0.0117，R2=0.9999。以濃度(mg/ml)為橫坐標(biāo)，吸光度Y值為縱坐標(biāo)，進行線性回歸，其回歸方程為Y-3590.7X-188.06(r=0.9999)結(jié)果表明，木犀草苷濃度在3.76)ng/ml60.16嗎/ml范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系。⑤供試品溶液的制備取菊花提取物適量，精密稱定，置25ml容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，再精密移取1.0ml至25ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。(D含量測定取樣品溶液置348nm處測定吸光度，記錄吸光度值，代入工作曲線計算總黃酮含量。實施例l本發(fā)明的一種純化方法(1)菊花提取菊花經(jīng)40%乙醇分別以12倍、8倍、8倍體積加熱回流三次，每次lh，合并三次濾液，減壓濃縮至藥材質(zhì)量體積為h2，過(2)上柱將菊花提取液上柱，控制流出液流速為0.5BV/h，上樣量為藥材重量樹脂體積為1.5:1，至提取液全部進入樹脂床。(3)洗脫以5BV體積的20%乙醇沖洗樹脂床，控制流出液流速為2BV/h，以除去雜質(zhì)。然后以5BV體積的75。/。乙醇，控制流速為2BV/h，收集洗脫液，減壓濃縮至一定體積，進行噴霧干燥，即得純化產(chǎn)物。實施例2選用不同條件進行提取采用本發(fā)明提供的方法，選用不同條件進行菊花總黃酮提取實驗，分別稱取菊花藥材20g，9份，按表1的因素水平分別進行正交試驗，每次提取l小時，提取后濾液合并，減壓濃縮至干，真空干燥至恒重，精密稱取干膏適量，以甲醇溶于10ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻。移取1.0ml濾液至10ml容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻。按上述方法測定總黃酮的含量，并對結(jié)果進行方差分析，結(jié)果見表2、3。表1菊花提取正交實驗因素水平表<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>表2菊花提取正交三因素三水平方差分析序號ABCD有效成分質(zhì)量111110.754212224.201313335.262421234.360522315.790623123.325731325孺832132.551933215.014Kl10.21810.1226.63111.558K213.47512.54213.57512.534K312.57213.60116.06012.174R3.2583.4809.4290.976表3正交試驗方差分析表方差來源離差平方和自由度方差F值顯著性A1.88620.94311.622B2.12121.06113.072氺C15.92227.96198.127氺*誤差0.16220.081:F0.10(2，2)=9.00**:F,(2,2)=19.00結(jié)果方差分析結(jié)果表明，以提取總黃酮量為指標(biāo)，因素C有極顯著差異，因素A、B有顯著性差異，考慮到工業(yè)生產(chǎn)乙醇的成本問題，選擇低度乙醇，提取3次。由于菊花吸取溶媒體積膨脹，首次用醇量加大，因此選擇加醇量分別為12倍、8倍、8倍。結(jié)論選擇40%乙醇提取3次，加醇量分別為12倍、8倍、8倍。正交實驗中，未涉及提取時間，因此作一個以時間為單因素的實驗稱取菊花10g,共4份，每份分別加入12倍，8倍，8倍40%的乙醇，加熱回流三次，每次分別為0min(煮沸后浸泡)、30min、60min、90min，重復(fù)2次，結(jié)果見4、5。結(jié)果由表4、5可以看出，提取時間對總黃酮含量有顯著影響，但60min和90min無明顯差別，以節(jié)約能耗為主，選擇回流60min。結(jié)論選擇每次提取1小時表4不同提取時間對菊花總黃酮含量的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>表5單因素方差分析表<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>最佳工藝驗證稱取菊花藥材20g，分別加入12倍、8倍、8倍40%乙醇回流3次，每次1小時，重復(fù)3次。另取藥材20g，共3份，加入14倍80。/。乙醇回流3次，每次1小時，重復(fù)3次。分別濾過，濾液合并，減壓濃縮至干，真空干燥至恒重，精密稱取干膏適量，以甲醇溶于25ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻。移取1.0ml濾液至25ml容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻。按上述方法測定總黃酮的含量，結(jié)果見表6。表6驗證優(yōu)選菊花醇提工藝結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>結(jié)果從表6可以看出，A3B3C3比優(yōu)選醇提工藝只高約4W，優(yōu)選醇提工藝具有良好的重現(xiàn)性。結(jié)論選擇以12倍、8倍、8倍40。/。乙醇回流3次，每次l小時提取。實施例3選取樹脂種類、藥液濃度、吸附速率、上樣量、乙醇洗脫濃度、洗脫速率、洗脫終點等6因素分別進行單因素試驗，確定各因素的最佳值。上柱液制備稱取菊花藥材500g，按上述優(yōu)選提取工藝提取，12倍、8倍、8倍40%乙醇回流3次，每次1小時，濾過，合并濾液，減壓濃縮至比重為1.275(55°C)，加水稀釋至500ml，靜置24小時，濾過，上清備用，測得溶液中總黃酮含量為20.8mgml'1。②靜態(tài)吸附取5種處理好的大孔樹脂各10g，各加入菊花水溶液30ml(總黃酮濃度為4.16mgml"),每5min振搖一次，2h后分別取各樹脂吸附后的溶液0.5ml于10ml量瓶中，于349nm處測定吸光度，計算各樹脂對菊花總黃酮的吸附率。③靜態(tài)解析將靜態(tài)吸附的樹脂過濾抽干，加30ml40%乙醇解吸，每5min振搖一次，2h后分別取各樹脂吸附后的溶液0.5ml于10ml量瓶中，按上述方法測定總黃酮濃度，計算各樹脂對菊花總黃酮的解吸率。見表7、圖1。結(jié)果從圖1可以看出，5種樹脂的吸附率都較大(大于90%)，SP850、SP700、SP70的解吸率都將近6(P/q，其中SP70的解析率最大，選取SP850、SP700、SP70做動態(tài)吸附實驗。結(jié)論選取SP850、SP700、SP70做動態(tài)吸附實驗。表75種大孔樹脂對菊花總黃酮的吸附與解吸附率<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>動態(tài)吸附取處理好的靜態(tài)吸附優(yōu)選3種樹脂各15ml于柱內(nèi)(lcmX13cm)，加菊花水溶液(總黃酮濃度為4.16mg'mr1)于柱頂，以0.5BV/h的流速進行動態(tài)吸附，按樹脂床體積收集流出液，于349nm處測定吸光度，計算總黃酮的含量，繪制各樹脂的泄漏曲線，結(jié)果見表8、圖2。結(jié)果從圖2可以看出，SP70與SP850達到吸附飽和時，所吸附的總黃酮的量較大，SP70較SP850大。結(jié)論選取SP70和SP850做動態(tài)解吸試驗。表83種大孔樹脂動態(tài)吸附結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>動態(tài)解吸取處理好的SP70和SP850樹脂各20ml于柱內(nèi)(lcmX13cm)將總黃酮濃度為4.16mg'ml—1的菊花水溶液30ml加于柱頂，以0.5BV/h的流速進行吸附后，用5BV75M以2BV/h的流速進行洗脫，按樹脂床體積收集洗脫液，于349nm處測定吸光度，計算乙醇洗脫液總黃酮的含量，結(jié)果見表9、圖3。表9菊花動態(tài)解吸結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>結(jié)果從圖3可以看出，SP70較SP850的解吸效果好，因此選擇SP70作為最佳樹脂。結(jié)論選擇SP70樹脂。藥液濃度考察取菊花水溶液(總黃酮濃度為20.8mg.mr1)10ml，分別稀釋0、1.5、2、4、10倍，加入20ml(lcmX13cm)SP70樹脂上，以2BV/h的流速進行吸附后，以75%乙醇洗脫，收集洗脫液至100ml，于349nm處測定吸光度，計算總黃酮的含量。結(jié)果見表10。表10菊花藥液濃度考察結(jié)果溶液體積(ml):生藥重(g)h11.5:12:14:110:1上柱后總黃酮量(mg)190.80194.29195.35193.69172.08解吸率(％)91.7393.4193.9293.1282.73結(jié)果從表10可以看出，當(dāng)藥液稀釋2倍時，解析率最高，稀釋1.5倍與稀釋2倍相當(dāng)，且比不稀釋要高約2%，綜合考慮生產(chǎn)時效因素，選擇稀釋1.5倍，即溶液體積(ml):生藥重(g)=1.5:1。結(jié)論上柱液濃度為:溶液體積達到生藥重的1.5倍。吸附速率考察取菊花水溶液(總黃酮濃度為20.8mg.mr1)10ml，加于20ml(lcmX13cm)，分別以0.5BV/h、lBV/h、2BV/h、3BV/h、4BV/h、的流速進行吸附后，用5BV75Q/。以2BV/h的流速進行洗脫，于349nm處測定吸光度，計算乙醇洗脫液總黃酮的含量。結(jié)果見表ll。表11菊花吸附速率考察結(jié)果吸附速率(BVh-l)0.51334上柱后濃度(mgml-l)1.941.911.891.861.79解吸率(％)93.4591.6690.9989.2185.97結(jié)果從表ll可以看出，當(dāng)吸附速率為0.5BV'h"時，吸附效果最好。結(jié)論吸附速率為0.5BV'h—1。上樣量考察取菊花水溶液(總黃酮濃度為20.8mgnnr1)加于20ml(lcmX13cm)SP70樹脂上，以0.5BV/h的流速進行吸附，按樹脂床體積收集流出液，于349nm處測定吸光度，計算總黃酮的含量。結(jié)果見表12、圖4。表12<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>結(jié)果從圖4可以看出，上樣量為4倍樹脂床體積(BV)時開始泄漏，7倍樹脂床體積(BV)時達到吸附飽和，因此實際工藝中選擇1.5倍樹脂床體積(BV)上樣量，即生藥重(g):樹脂體積(ml)=1.5:1。結(jié)論上樣量為生藥重(g):樹脂體積(ml)=1.5:1。乙醇濃度考察取菊花水溶液(總黃酮濃度為20.8mg'mr1)150ml，加去離子水稀釋至225ml(總黃酮濃度為13.86mg'mr1)，加于100ml(2.5cmX23cm)SP70樹脂上，以0.5BV/h的流速進行吸附，分別用5BV水、5%、10%、20%、30%、40%、60%、80%乙醇以2BV/h流速進行洗脫，收集洗脫液至500ml，于349nm處測定吸光度，計算總黃酮的含量，結(jié)果見表13。表13菊花乙醇洗脫濃度考籌;結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>結(jié)論從表13可以看出，當(dāng)乙醇濃度為20%-60°/。時，總黃酮的含量最高，80%乙醇洗脫物中含量也較高，考慮與工業(yè)處理大孔樹脂用75%，直接用75%洗脫后不需用高濃度乙醇處理樹脂柱，因此選擇先以20%乙醇洗脫，再以75%乙醇洗脫，收集75%乙醇洗脫液。結(jié)論先以20%乙醇洗脫，再以75%乙醇洗脫，收集75%乙醇洗脫液。洗脫速率考察取菊花水溶液(總黃酮濃度為20.8mg'mr1)10ml，分別稀釋至溶液體積(ml):生藥重(g)為1:1、1.5:1、2:1、4:1、、10:1，加入20ml(lcmX13cm)SP70樹脂上，以0.5BV/h的流速進行吸附后，以75%乙醇洗脫，收集洗脫液至100ml,于349nm處測定吸光度，計算總黃酮的含量。結(jié)果見表14。表14菊花脫速率考察結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>結(jié)果從表14可以看出，流速為lBV/h洗脫時解吸率最高，但與2BV/h洗脫相差不大，為提高效率可，用2BV/h流速洗脫較優(yōu)。結(jié)論洗脫速率為2BV/h。(Q)洗脫終點考察將吸附飽和的樹脂75。/。乙醇以2BV/h流速進行洗脫，按樹脂床體積收集洗脫液(20ml)，于349nm處測定吸光度，計算總黃酮的含量。結(jié)果見表15、圖5。表15菊花洗脫終點測定結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>結(jié)果從圖5可以看出，當(dāng)洗脫液用4倍樹脂床體積時，已基本將總黃酮洗凈，選擇以5倍乙醇洗脫。結(jié)論以5倍柱體積的乙醇洗脫。最佳工藝驗證取菊花水溶液(總黃酮濃度為20.8mg，mr1)150ml，加去離子水稀釋至225ml(總黃酮濃度為13.86mg'mr1)，加于簡ml(2.5cmX23cm)SP70樹脂上，以0.5BV/h的流速進行吸附后先以500ml20%乙醇洗脫，再以500ml75。/。乙醇洗脫，收集75%乙醇洗脫液至500ml,減壓濃縮至干，6(TC真空干燥8小時，測定千膏收率，計算總黃酮的含量，重復(fù)3次。結(jié)果見表16。表16總黃酮得率及含量測定結(jié)果實驗次數(shù)123平均干膏重(g)3.653.593.603.61得率(％)2.432.392.402.41總黃酮純度(％)66.3965.7466.5666.23結(jié)果從表16可以看出，經(jīng)SP70大孔樹脂處理處理過的菊花水溶液，總黃酮含量可超過55%，達到66.23%，得率約2.4%，且具有良好的重現(xiàn)性。實施例4SP70大孔樹脂反復(fù)使用穩(wěn)定性考察稱取菊花藥材lkg，按上述優(yōu)選醇提工藝提取，提取液定容至1000ml。取菊花水溶液150ml，加水稀釋至225ml，加于100ml(2.5cmX23cm)SP70樹脂上，以0.5BV/h的流速進行吸附后先以500ml20%乙醇2BV速率洗脫，再以500ml75%乙醇2BV/h速率洗脫，收集75%乙醇洗脫液至500ml,75%乙醇洗脫液減壓濃縮至干，75"C真空干燥至恒重，測定總黃酮的含量，計算得率，在同一樹脂柱上按上述步驟重復(fù)5次。結(jié)果見表17。表17SP70大孔樹脂反復(fù)使用5個周期穩(wěn)定性考察實驗次數(shù)12345干膏重(g)3.6443.5713.5123.4183.463得率(g)2.432.382.342.282.31總黃酮含量(％)65.8366.5264.2165.1663.47結(jié)果從表17可以看出上述樹脂工藝在5個周期內(nèi)產(chǎn)品得率及總黃酮含量較穩(wěn)定，SP70樹脂可以反復(fù)使用。結(jié)論使用SP70樹脂產(chǎn)品得率及總黃酮含量在5個周期內(nèi)較穩(wěn)定。本發(fā)明涉及的參考文獻1、王春霞.菊花化學(xué)成分研究進展.中藥材，2004,27(3):224-2262、劉金旗，吳德林,王蘭,等.菊花中木犀草素-7-0-0-D-葡萄糖苷的含量測定.中成藥，2001，23(1):52,53,3、賈凌云，孫毅,王春陽，等.菊花總黃酮提取工藝.中藥材，2003，26(1):35-36.4、楊榮平，王賓豪，方艾權(quán),等.大孔樹脂分離葛根總黃酮工藝優(yōu)化.中成藥,2004,26(10):784-7875、張健，錢大瑋，李友賓，等.菊花的化學(xué)成分研究.天然產(chǎn)物研究與開發(fā),2006,18:71-73.6、肖培根.等.新編中藥志北京[M]:化學(xué)工業(yè)出版社，2002:778-782.7、劉偉.等.不同產(chǎn)地菊花中揮發(fā)油的GC/MS分析.河南中醫(yī)學(xué)干U，簡,10(5):12.8、揭新明.等.菊花微量及宏量元素分析.廣東微量元素科學(xué),1997,4(6):62.9、曹仁烈，孫在原，王仲德，等.中華皮膚科雜志,1957,(4):286.10、蔡寶昌，潘楊,吳皓,等.國外醫(yī)學(xué)中醫(yī)中藥分冊,1997,19(3):48.11、王增田.中國中醫(yī)藥信息雜志,1996,3(6):16.12、沈麗珍.菊花在眼科的臨床應(yīng)用.中國中醫(yī)眼科雜志，2001，11(2):114,115.13、中華人民共和國藥典2005年版(一部).北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005.218.權(quán)利要求1、菊花總黃酮提取方法，具體方法是將菊花經(jīng)乙醇提取后，以大孔樹脂吸附法將提取液經(jīng)上柱、洗脫、收集洗脫液、濃縮、干燥，獲得菊花總黃酮。2、如權(quán)利要求1所述的菊花總黃酮提取方法，其特征是將菊花以10%~95%的乙醇提取，優(yōu)選乙醇濃度為20%~80%，最優(yōu)選為40%。3、如權(quán)利要求1所述的菊花總黃酮提取方法，其特征是將菊花以乙醇提取三次，每次提取菊花質(zhì)量與乙醇的體積比為1~20倍，優(yōu)選提取體積為4~14倍，最優(yōu)選提取體積為812倍。4、如權(quán)利要求1所述的菊花總黃酮提取方法，其特征是菊花以乙醇提取三次，提取的時間為0.5~2h，最優(yōu)選時間為lh。5、如權(quán)利要求1所述的菊花總黃酮提取方法，其特征是大孔樹脂選用日本三菱公司HP20、SP825、SP850、SP700、SP70，優(yōu)選大孔樹脂SP850、SP700、SP70，最優(yōu)選SP70。6、如權(quán)利要求1所述的菊花總黃酮提取方法，其特征是菊花提取液的上樣量(菊花質(zhì)量樹脂體積)為0.5:1~8:1，優(yōu)選1:1~4:1，最優(yōu)選1.5:1。7、如權(quán)利要求1所述的菊花總黃酮提取方法，其特征是洗脫劑為有機醇，優(yōu)選項為乙醇。8、如權(quán)利要求1所述的菊花總黃酮提取方法，其特征是洗脫液流速為lBV/h~5BV/h，最優(yōu)選為2BV/h。9、如權(quán)利要求5所述的菊花總黃酮提取方法，其特征是洗脫劑的洗脫濃度為5%95%，最優(yōu)選為20%~75%。10、如權(quán)利要求1述的菊花總黃酮提取方法，其特征是洗脫劑的洗脫體積為110倍柱體積，優(yōu)選為38倍柱體積，最優(yōu)選為5倍柱體積。11、如權(quán)利要求1所述的菊花總黃酮提取方法，其特征是獲得純化的菊花總黃酮含量大于55%。全文摘要本發(fā)明公開了一種菊花總黃酮提取方法，該方法是將菊花經(jīng)乙醇提取后，以大孔樹脂吸附法將提取液經(jīng)上柱、洗脫、收集洗脫液、濃縮、干燥，獲得菊花總黃酮的方法。本發(fā)明涉及的菊花總黃酮提取方法是一種操作簡便、快捷的方法。所選用的大孔樹脂具有吸附量大，解吸率大的特點。本發(fā)明方法以乙醇為溶劑，既價廉又無毒。用本發(fā)明方法提取菊花總黃酮含量可達55％以上，且重現(xiàn)性好，樹脂可重復(fù)使用。文檔編號A61K36/28GK101167775SQ20061013770公開日2008年4月30日申請日期2006年10月27日優(yōu)先權(quán)日2006年10月27日發(fā)明者頌郭申請人:頌郭