專利名稱：一種新的人參皂苷苷元衍生物制劑及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種新的原人參二醇皂苷苷元衍生物的抗腫瘤用途以及含有該化合物的新型抗腫瘤制劑。該化合物的名稱為20(S)-25-甲氧基-達(dá)瑪烷-3β，12β，20-三醇[20(S)-25-methoxyl-dammarane-3β，12β，20-triol，簡稱25mdt]。
背景技術(shù)：
癌癥是殘害人類生命的世界第二大疾病，死亡率僅次于心腦血管疾病，是人類死亡的最主要因素之一。在全世界60億人口中，目前約有各類癌癥患者3500萬。癌癥造成的死亡人數(shù)每年全世界約有630萬人，據(jù)國際權(quán)威調(diào)查機(jī)構(gòu)統(tǒng)計，到2020年癌癥死亡人數(shù)將翻一番，達(dá)到1000萬人以上。近年來，工業(yè)大生產(chǎn)導(dǎo)致人類生存環(huán)境不斷惡化?；瘜W(xué)、病毒、物理輻射等各種致癌因素逐漸增多，我國的癌癥發(fā)病率也逐年上升。據(jù)國家衛(wèi)生部衛(wèi)生統(tǒng)計信息中心報道，1999年全國城市惡性腫瘤患病率男性為169.58人/萬人、女性為110.05人/萬人、大城市中患病率為148.90人/萬人、中小城市為110.70人/萬人。若按我國13億人口計算，每年惡性腫瘤的新發(fā)病例達(dá)200萬人。
目前，治療癌癥的常用方法有手術(shù)、放療和藥物治療等。專業(yè)人士指出，從50、60年代主要依靠外科治療及放射治療的進(jìn)步提高癌癥病人相對存活率至今的40年里，外科手術(shù)及放射治療的進(jìn)步已近頂峰，很難再期待有更大的突破。而藥物治療能成為功地治愈或明顯延長病人的生命，在癌癥的治療中占有越來越主要的地位。腫瘤的化療基本上著眼于直接殺傷腫瘤細(xì)胞，這一治療模式往往存在以下問題對增長緩慢的實(shí)體瘤效果差或幾乎無影響；藥物選擇性很小，毒副反應(yīng)多且嚴(yán)重，其中骨髓抑制是最主要的劑量限制因素。腫瘤細(xì)胞動力學(xué)研究已經(jīng)取得很大進(jìn)展但不完善；缺乏簡便實(shí)用的方法測知腫瘤外于何期，一些常用用藥方案幾乎多來自臨床經(jīng)驗。腫瘤的生物治療是繼手術(shù)、放療和化療之后的腫瘤的第四模式，主要通過腫瘤宿主防御機(jī)制或生物制劑的作用以調(diào)節(jié)機(jī)體自身的生物學(xué)反應(yīng)，從而抑制或消除腫瘤。雖然沒有太大毒副作用，但由于技術(shù)要求嚴(yán)、工藝復(fù)雜，因此價格高，眾多癌癥患者及家屬難以承受，影響其在癌癥治療領(lǐng)域的普及。
鑒于上述種種原因，人們把目光轉(zhuǎn)向天然抗腫瘤藥物的研發(fā)上。無論是抑制或殺傷腫瘤細(xì)胞、調(diào)整機(jī)體免疫功能、改善癥狀與特征、減輕放化療毒副作用，還是腫瘤的病后調(diào)理，天然抗癌藥物具有重要作用。由此，天然植物新療法將成為繼手術(shù)、放療、化療、生物療法的第五大治療方法。
許多學(xué)者的研究表明人參皂苷具有明顯的抗腫瘤和免疫調(diào)節(jié)作用、改善微循環(huán)作用、提高生命質(zhì)量等多種生物活性。但是由于天然人參皂苷較難吸收，而由天然皂苷轉(zhuǎn)化而來的低極性皂苷、苷元或二者的衍生物是天然人參皂苷發(fā)揮其藥效的原型。因此，有關(guān)低極性皂苷、苷元或二者的衍生物的制備與抗腫瘤活性的研究非常活躍，已發(fā)現(xiàn)它們在具有多種抗腫瘤活性的同時，基本無毒副作用。自今發(fā)現(xiàn)具有抗腫瘤活性的低極性皂苷、苷元或二者的衍生物有人參皂苷-Rg3、Rh2、C-K、Mc、PPD以及3β，12β-二羥-20(22)，24(25)-二烯達(dá)瑪烷[dammar-3β，12β-dihydroxyl-20(22)，24(25)-diene]和3β，6α，12β-三羥-20(22)，24(25)-二烯達(dá)瑪烷[dammar-3β，6α，12β-trihydroxyl-20(22)，24(25)-diene]等。已經(jīng)上市的抗腫瘤藥物參一膠囊(人參皂苷-Rg3)、正在用于臨床實(shí)驗研究的抗腫瘤藥物有人參皂苷-Rh2和人參皂苷-C-K。
在對體外多種人腫瘤細(xì)胞的抗癌實(shí)驗研究中，我們發(fā)現(xiàn)和發(fā)明了具有抗腫瘤活性的一種新的原人參二醇衍生物，其化學(xué)結(jié)構(gòu)為20(S)-25-甲氧基-達(dá)瑪烷-3β，12β，20-三醇[20(S)-25-methoxyl-dammarane-3β，12β，20-triol，簡稱25mdt]。25mdt是PPD的衍生物，但研究證明，25mdt對體內(nèi)外腫瘤細(xì)胞的抑制作用均優(yōu)于PPD和人參皂苷-Rg3。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供了具有如下結(jié)構(gòu)式的原人參二醇皂苷苷元衍生物-20(S)-25-甲氧基-達(dá)瑪烷-3β，12β，20-三醇[20(S)-25-methoxyl-dammarane-3β，12β，20-triol，簡稱25mdt]，的抗腫瘤用途以及含有25mdt作為活性成分的新型抗腫瘤制劑。
一種人參皂苷苷元衍生物25mdt具有誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化、凋亡，抑制腫瘤細(xì)胞生長等抗腫瘤活性，市場開發(fā)與應(yīng)用前景巨大。
25mdt的結(jié)構(gòu)式本發(fā)明所提供的新型抗腫瘤制劑中，以25mdt為有效成分，其總有效劑量為1-50mg/kg/d。
本發(fā)明所提供的新型抗腫瘤制劑中，25mdt可與任何法定藥用配合劑和賦形劑制成各種藥用劑型的制劑。
本發(fā)明所提供的新型抗腫瘤制劑中，25mdt可與目前市場上的任何化療藥生物制劑，包括激素類、烷化劑類、鉑類、抗代謝類、拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑類、抗微絲微管類、誘導(dǎo)分化類、抗腫瘤生長類、提高機(jī)體免疫類及其他藥物，制備成復(fù)方制劑。
本發(fā)明所提供的新型抗腫瘤制劑中，制劑劑型為口服、注射或局部用藥劑型。
本發(fā)明所提供的新型抗腫瘤制劑中，口服劑型包括片劑、粉劑、懸濁液、乳濁液、膠囊、顆粒劑、糖衣片、藥丸、液體、糖漿和檸檬水劑等。
本發(fā)明所提供的新型抗腫瘤制劑中，注射劑型包括水劑、凍干粉針、靜脈乳劑、多相質(zhì)脂體制劑、靜脈微乳劑、懸濁液等。
本發(fā)明所提供的新型抗腫瘤制劑中，局部用藥劑型包括軟膏、固體、懸濁液、水劑、粉劑、糊劑、栓劑、氣溶膠、泥敷劑、涂抹劑、灌腸劑和乳劑等。
25mdt具有抑制人腫瘤細(xì)胞(肉瘤S-180、Louise-肺癌細(xì)胞、艾氏腹水癌等)生長與增殖，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化、凋亡，抑制腫瘤新生血管生成、抑制腫瘤的侵潤和轉(zhuǎn)移、增強(qiáng)機(jī)體免疫力和降低化療藥物毒副作用等抗腫瘤活性。25mdt可以被制成用于不同癌癥治療的任何藥用及保健品劑型，主要應(yīng)用于惡性腫瘤的治療，具有廣闊的應(yīng)用前景。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例125mdt抑制S-180腫瘤細(xì)胞生長實(shí)驗實(shí)驗動物，健康昆明種小白鼠50只，體重19-24克，雄性，由中國醫(yī)科大學(xué)動物中心提供。所有動物均在同樣環(huán)境下飲水、攝食、保持自然光照。溫度25℃，濕度60-70％。動物全價顆粒飼料由沈陽市實(shí)驗動物飼料廠提供。
實(shí)驗共分5組A荷瘤對照組(ig蒸餾水10mL.kg-1)；B25mdt組(ig 10mg/Kg/d)；C人參皂苷-Rg3組(ig 10mg/kg/d)；D原人參二醇組(ig PPD 10mg/kg/d)；E西藥組D(ip紫杉醇10mg/kg/d)。
選取移植腫瘤7天，腫瘤生長良好，腹部膨隆明顯的小鼠，接種癌細(xì)胞混懸液0.2mL/只。接種后小鼠按體重隨機(jī)共分成5組，每組10只，分別為于接種后次日開始給藥，每日1次，連續(xù)給藥12天。給藥結(jié)束次日，將動物稱體重后脫臼處死，剝離出皮下腫塊稱重，進(jìn)行統(tǒng)計處理，計算抑瘤率。
25mdt對S-180荷瘤小鼠的影響見表1。統(tǒng)計學(xué)處理方法采用組間“t”檢驗。
抑瘤率(％)＝[(荷瘤對照組瘤重-實(shí)驗組瘤重)/荷瘤對照組瘤重]×100％實(shí)驗結(jié)果表明與荷瘤對照組比較，西藥組(ip 20mg.kg-1)、25mdt組(ig50mg.kg-1)都與其有顯著差異P＜0.01。而人參皂苷-Rg3組(ig 50mg.kg-1)和原人參二醇組(ig 20mg.kg-1)與荷瘤對照組比較也存在顯著性差異P＜0.05。
表1 25mdt對S-180荷瘤小鼠抑瘤作用的結(jié)果


備注1，給藥量為0.1mg/10g；2，與荷瘤對照組比較*P＜0.01。
實(shí)施例225mdt對艾氏腹水癌小鼠生存影響實(shí)驗將實(shí)驗小鼠飼養(yǎng)3天，選取生長狀態(tài)良好，腹部膨隆明顯的接種2周艾氏腹水癌的小鼠，腹部皮膚消毒，在無菌條件下給每只實(shí)驗小鼠腹腔注射癌細(xì)胞混懸液0.2mL/只。接種后小鼠按體重隨機(jī)分租，共分成5組，每組10只，分別為于接種后次日開始灌胃給藥，每日1次，連續(xù)給藥12天。觀察小鼠死亡情況并記錄，25mdt對艾氏腹水癌小鼠的生存影響見表2。
實(shí)驗結(jié)果表明與艾氏腹水癌對照組相比，25mdt對艾氏腹水癌小鼠生存期有明顯延長作用；PPD對艾氏腹水癌小鼠生存期有比較明顯的延長作用；其他組的作用不明顯。說明25mdt對抑制艾氏腹水癌的作用較大。
表2 25mdt對艾氏腹水癌小鼠生存期的影響

實(shí)施例325mdt抑制小鼠Lewis肺癌生長實(shí)驗實(shí)驗共分5組A荷瘤對照組(ig蒸餾水10mL.kg-1)；B25md 組(ig 10mg/Kg/d)；C人參皂苷-kg3組(ig 10mg/kg/d)；D原人參二醇組(ig PPD 10mg/kg/d)；E西藥組D(ip紫杉醇10mg/kg/d)。
取接種后第15天生長良好的Lewis荷瘤小鼠腹水，以無菌鹽水1∶3稀釋后，昆明種小鼠前肢右腋下sc接種0.2ml/只，接種后小鼠按體重隨機(jī)共分成5組，每組10只，分別為于接種后次日開始給藥，每日1次，連續(xù)給藥12天。給藥結(jié)束次日，將動物稱體重后脫臼處死，剝離出皮下腫塊稱重，進(jìn)行統(tǒng)計處理，計算抑瘤率。
25mdt對小鼠Lewis肺癌的影響見表3。統(tǒng)計學(xué)處理方法采用組間“t”檢驗。
表3 25mdt對小鼠Lewis肺癌抑瘤作用的結(jié)果


實(shí)施例425mdt片劑的制備將已過100目篩的25mdt 40g和乳糖24g、微晶纖維素30g、羧甲基淀粉鈉5g共同過80目篩混合，以80％乙醇制軟材，以18目篩制粒，60℃通風(fēng)干燥，以18目篩整粒后與1g硬酯酸鎂混合均勻，以Φ6mm淺凹沖打片，每片含25mdt 40mg。
實(shí)施例5顆粒劑的制備25mdt、甘露醇、乳糖、甜菊甙、糊精分別粉碎過120目篩，并分取300g、1250g、100g、5g、125g置攪拌機(jī)中混合均勻，加入粘合劑，攪拌混合制成軟材；用14目篩制成顆粒，干燥，整粒，分裝。每袋含25mdt 300mg。
權(quán)利要求
1.一種新的人參二醇皂苷苷元衍生物制劑，其特征在于以25mdt為有效成分，其總有效劑量為1-50mg/kg/d，25mdt與任何法定藥用配合劑和賦形劑制成各種藥用劑型的制劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的人參二醇皂苷苷元衍生物制劑，其特征在于25mdt與目前市場上的化療藥、生物制劑，激素類、烷化劑類、鉑類、抗代謝類、拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑類、抗微絲微管類、誘導(dǎo)分化類、抗腫瘤生長類、提高機(jī)體免疫類及其他藥物，制備成復(fù)方制劑。
3.按照權(quán)利要求1或2所述的人參二醇皂苷苷元衍生物制劑，其特征在于所述劑型為口服、注射或局部用藥劑型的任何一種。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的人參二醇皂苷苷元衍生物制劑，其特征在于所述口服劑型包括片劑、粉劑、懸濁液、乳濁液、膠囊、顆粒劑、糖衣片、藥丸、液體、糖漿和檸檬水劑；所述注射劑包括水劑、凍干粉針、靜脈乳劑、多相質(zhì)脂體制劑、靜脈微乳劑、懸濁液等；所述局部用藥劑型包括軟膏、固體、懸濁液、水劑、粉劑、糊劑、栓劑、氣溶膠、泥敷劑、涂抹劑、灌腸劑和乳劑。
5.一種具有如下結(jié)構(gòu)式的新的人參二醇皂苷苷元衍生物的用途，其特征在于該衍生物20(S)-25-甲氧基-達(dá)瑪烷-3β，12β，20-三醇[20(S)-25-methoxyl-dammarane-3β，12β，20-triol，簡稱25mdt]可用于制備治療不同癌癥的藥物制劑及保健品劑型。
全文摘要
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種新的原人參二醇衍生物的抗腫瘤用途以及含有該化合物作為活性成分的新型抗腫瘤制劑。該化合物的名稱為20(S)－25－甲氧基－達(dá)瑪烷－3β，12β，20－三醇[20(S)－25－methoxyl－dammarane－3β，12β，20－triol，簡稱25mdt]。25mdt具有抑制人腫瘤細(xì)胞(肉瘤S－180、Louise－肺癌細(xì)胞、艾氏腹水癌等)生長與增殖，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化、凋亡，抑制腫瘤新生血管生成、抑制腫瘤的侵潤和轉(zhuǎn)移、增強(qiáng)機(jī)體免疫力和降低化療藥物毒副作用等抗腫瘤活性。25mdt可以被制成用于不同癌癥治療的任何藥用及保健品劑型，主要應(yīng)用于惡性腫瘤的治療，具有廣闊的應(yīng)用前景。
文檔編號A61P35/00GK1939311SQ20061014176
公開日2007年4月4日 申請日期2006年10月1日 優(yōu)先權(quán)日2006年10月1日
發(fā)明者趙余慶, 張瑞穩(wěn), 王偉, 韓凌, 王慧, 孫寶山 申請人:沈陽藥科大學(xué)