專利名稱：：一種建立帕金森病動(dòng)物模型的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，具體涉及生物醫(yī)學(xué)中神經(jīng)病學(xué)、老年醫(yī)學(xué)及轉(zhuǎn)基因
技術(shù)領(lǐng)域：
。更具體地，涉及一種帕金森病小鼠模型，建立該帕金森病小鼠模型的方法，以及該帕金森病小鼠模型的用途。
背景技術(shù)：
：帕金森病(Parkinson'sdisease,PD)是由于中腦黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元大量丟失而表現(xiàn)出運(yùn)動(dòng)功能障礙的腦疾病，也是第二大中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病。具有關(guān)統(tǒng)計(jì)，在65歲以上的人群中，PD的發(fā)病率近21隨著我國人口老齡化進(jìn)程的發(fā)展，帕金森病病人的人數(shù)逐年增多，給家庭和社會(huì)帶來了沉重的負(fù)擔(dān)。ra的致病因素有多種，既有遺傳因素又有環(huán)境因素(VilaMandPrzedborskiS.NatureMedicine2004,10S叩pl:S58-62)。有關(guān)對(duì)PD的研究比較集中的是PD相關(guān)基因(包括a-^甜cJe^、parh'/、sjv7/^'"/7-入〃-Z7、/^ese/7/7i仏/、戶7M7、AAVA^、M^么M;/t-/等)、氧化應(yīng)激和線粒體損傷等，但目前的機(jī)制研究還遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足臨床治療的需求。隨著對(duì)PD的深入研究，研究者發(fā)現(xiàn)泛素-蛋白降解系統(tǒng)(ubiquitin-proteasomesystem,UPS)的異常同PD有密切的關(guān)系，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的帕金森病相關(guān)基因中，與UPS相關(guān)的就多達(dá)三種-Synuclein(與泛素多聚化有直接的關(guān)系)，Parkin(—種E3泛素蛋白連接酶)和UCH-L1(泛素C端水解酶L1)，另外在PD病人的腦內(nèi)存在Lewy小體，該小體含有多種蛋白，主要有a-synuclein、parkin、synphilin-1、UCH-L1、IkB和它的泛素連接酶SCF(eTrCP)等蛋白成分。在正常神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)，錯(cuò)誤折疊，功能異常的蛋白通常被泛素化，再經(jīng)蛋白降解系統(tǒng)被清除掉，而在PD患者的神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)，錯(cuò)誤折疊和功能異常的蛋白不能被蛋白降解系統(tǒng)清除，形成了沉積物?，F(xiàn)有技術(shù)用于研究帕金森病的動(dòng)物模型有許多種，按照致病的病因可分為兩類1)毒素類模型，如6-羥多巴(6-0HDA)、百草枯(Paraquat,某除草劑)、魚藤酮(Rotenone)、1-甲基-4-苯基-1，2，3,6-四氫吡啶(MPTP)等；2)基因類模型。目甜轉(zhuǎn)基因類帕金森病的動(dòng)物模型只有過表達(dá)野生型或突變型a-synuclein—種，一些基因剔除小鼠如多巴胺D2受體缺失小鼠、同源盒轉(zhuǎn)錄因子engrailedl和engrailed2雙缺失小鼠、孤兒核受體Nurrl缺失小鼠、轉(zhuǎn)錄因子Pitx3缺失小鼠、轉(zhuǎn)錄因子Lmxlb缺失小鼠、E3泛素連接酶Parkin缺失小鼠等在不同時(shí)間和不同程度地表現(xiàn)出神經(jīng)元細(xì)胞的丟失。以上這些模型都不能準(zhǔn)確模擬帕金森病的病理過程，比如MPTP模型中Lewy小體并不出現(xiàn)；ot-synuclein轉(zhuǎn)基因動(dòng)物，由于受不同啟動(dòng)子的影響，表型上有很大的差異，雖然模型中存在Lewy小體樣沉積物，但不具有多巴胺能神經(jīng)元地進(jìn)行性丟失過程。上述動(dòng)物模型存在的不足之處極大地限制了這些模型的應(yīng)用。本領(lǐng)域迫切需要開發(fā)更可靠的帕金森病動(dòng)物模型。BAG5(6c7-2-associate^/aZ^a加《e/e》是2004年克隆的BAG信號(hào)接頭蛋白家族的一個(gè)新成員(KaliaSKetal.Neuron.2004，44(6):931-45)，通過抑制Parkin的E3酶活性及Hsp70的分子伴侶活^fe'，可以加劇多巴胺能神經(jīng)元的死亡。Parkin可泛素化oc-synuclein、sy叩hilin-l等許多蛋白，再通過蛋白降解系統(tǒng)，使得這些底物被降解，如果特異地在小鼠多巴胺能神經(jīng)元中過表達(dá)BAG5，在Parkin/a-synuclein上游層面上影響Parkin的功能，是一種更有效的可靠的帕金森病的動(dòng)物模型，可用于帕金森病的機(jī)制研究和藥物研發(fā)。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種帕金森病(Parkinson'sdisease,PD)小鼠模型以及建立該帕金森病小鼠模型的方法。本發(fā)明的另一目的是提供上述該帕金森病模型的用途。在本發(fā)明的第一方面，提供了一種建立新的帕金森病小鼠模型的方法，包括下述步驟(i)提供一線性化的轉(zhuǎn)基因構(gòu)建物，該構(gòu)建物從5'至3'依次含有(a)大鼠酪氨酸羥化酶的啟動(dòng)子，(b)-globin基因的一部分和BAG5-Flag，(c)人生長(zhǎng)激素小基因；(ii)將步驟(i)中的線性化的構(gòu)建物基因引入C57/BL6小鼠受精卵；(iii)將步驟(ii)的受精卵移植到假孕的遠(yuǎn)交系ICR小鼠的輸卵管；(iv)產(chǎn)生轉(zhuǎn)基因的非人哺乳動(dòng)物，所述的非人哺乳動(dòng)物的基因組中整合有BAG5-Flag表達(dá)盒，所述表達(dá)盒含有(a)大鼠酪氨酸羥化酶的啟動(dòng)子，(b)-globin基因的一部分和BAG5-Flag,(c)人生長(zhǎng)激素小基因。在另一優(yōu)選例中，所述的方法還包括步驟(v)對(duì)步驟(iv)獲得的轉(zhuǎn)基因小鼠進(jìn)行鑒定。在另一優(yōu)選例中，所述的鑒定是通過PCR。在另一優(yōu)選例中，所述的方法還包括步驟(vi)將獲得的轉(zhuǎn)基因小鼠與正常的C57/BL6小鼠雜交，以獲得子代。在本發(fā)明的第二方面，用上述方法獲得了帕金森病小鼠模型。在本發(fā)明的第三方面，提供了一種用本發(fā)明上述方面獲得的帕金森病小鼠模型的用途，它被用于泛素-蛋白降解系統(tǒng)參與帕金森病的病理進(jìn)程機(jī)制的研究和藥物開發(fā)。本發(fā)明將BAG5cDNA融合Flag小標(biāo)志物(以利于蛋白的鑒定及區(qū)別于內(nèi)源性BAG5蛋白)克隆在多巴胺能神經(jīng)元特異性的轉(zhuǎn)基因載體中，經(jīng)轉(zhuǎn)入技術(shù)獲得了轉(zhuǎn)基因小鼠，建立了一種帕金森病小鼠模型；在此基礎(chǔ)上完成了本發(fā)明。在本發(fā)明中BAG5cDNA來自小鼠，編碼447個(gè)氨基酸殘基，包括4個(gè)BAG結(jié)構(gòu)域和第五個(gè)推測(cè)的短的BAG結(jié)構(gòu)域，在蛋白的羧基末端融合了Flag小標(biāo)志物(8個(gè)氨基酸殘基)；在本發(fā)明中采用了多巴胺能神經(jīng)元特異性的酪氨酸羥化酶的啟動(dòng)子，啟動(dòng)子來源大鼠，人源的酪氨酸羥化酶的啟動(dòng)子也可以采用。在本發(fā)明的產(chǎn)生轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的方法中，首先構(gòu)建一轉(zhuǎn)基因構(gòu)建物，該構(gòu)建物從5'至3'依次含有(a)大鼠酪氨酸羥化酶的啟動(dòng)子，(b)-globin基因的一部分和BAG5-Flag,(c)人生長(zhǎng)激素小基因；在獲得了構(gòu)建物之后，可用常規(guī)方法將線性化的構(gòu)建物轉(zhuǎn)入受精卵中，待小鼠出生后用PCR檢測(cè)鑒定BAG5-Flag是否整合入其基因組，從而獲得轉(zhuǎn)基因小鼠。本發(fā)明帕金森病小鼠模型的主要用途包括:用于研究泛素-蛋白降解系統(tǒng)與帕金森病的病理進(jìn)程的機(jī)制，用于開發(fā)延緩、治療帕金森病的藥物。本發(fā)明的主要優(yōu)點(diǎn)在于BAG5通過抑制Parkin的E3酶活性及Hsp70的分子伴侶活性，可以加劇多巴胺能神經(jīng)元的死亡。Parkin可泛素化a-synuclein、sy叩hilin-l等許多蛋白，再通過蛋白降解系統(tǒng)，使得這些底物被降解，特異地在小鼠多巴胺能神經(jīng)元中過表達(dá)BAG5，在Parkin/oc-synuclein上游層面上影響Parkin的功能，是一種更有效的可靠的帕金森病的動(dòng)物模型。圖1顯示MSCV-BAG5-Flag轉(zhuǎn)染SH-SY5Y細(xì)胞株后，通過WesternBlot檢測(cè)到約52KD的BAG5-Flag蛋白。圖2是多巴胺能神經(jīng)元特異性的轉(zhuǎn)基因構(gòu)建物prTH-globin-hGH，該構(gòu)建物從5'至3'依次含有(a)大鼠酪氨酸羥化酶的啟動(dòng)子(長(zhǎng)度為6.8kb，可在人多巴胺能細(xì)胞株SH-SY5Y中引導(dǎo)增強(qiáng)型綠色熒光蛋白的表達(dá)，見圖2a)，(b)-globin基因的一部分(l.Okb)，(c)人生長(zhǎng)激素小基因(提供PolyA尾)，見圖2b。圖3是建立的多巴胺能神經(jīng)元特異性過表達(dá)BAG5-Flag的轉(zhuǎn)基因構(gòu)建物prTH-globin-BAG5_Flag-hGH(圖3a)，轉(zhuǎn)基因質(zhì)粒prTH-globin-BAG5-Flag-hGH用限制性內(nèi)切酶NotI線性化后(14.7kb)，膠回收純化(圖3b),圖3c顯示了對(duì)BAG5-Flag轉(zhuǎn)基因陽性小鼠鑒定。具體實(shí)施例方式實(shí)施例l克隆小鼠的BAG5cDNA抽提8周齡C57/BL6小鼠腦的總RNA，5ugRNA在20ul體系中逆轉(zhuǎn)錄，取lul為模板，在20ul體系中，利用引物Primerl:5'ACCTG^77tGTGAAACTGAACACAGAAGTATG3'(SEQIDNO:3)和Primer3:5'CGATCAAGCCCTGCAGCTCTGTC3'(SEQIDN0:4)經(jīng)PCR擴(kuò)增BAG5cDNA5，端，利用引物Primer2:5'GACAGAGCTGCAGGGCTTGATCG3'(SEQIDN0:5)和Primer4:5'IDN0:6)經(jīng)PCR擴(kuò)增BAG5cDNA3，端；再取lulBAG5cDNA5'端PCR產(chǎn)物和lulBAG5cDNA3'端PCR產(chǎn)物混合，利用引物Primerl和Primer4經(jīng)PCR擴(kuò)增全長(zhǎng)BAG5cDNA。Primer4中含有Flag標(biāo)記序列(引物中下劃線部分)，以利于蛋白的鑒定及區(qū)別于內(nèi)源性BAG5蛋白；Primer1和Primer4中含有限制性內(nèi)切酶EcoRI的切點(diǎn)(引物中斜體部分)，全長(zhǎng)BAG5cDNAPCR產(chǎn)物經(jīng)EcoRI酶切后膠回收純化，克隆至質(zhì)粒載體pBluescriptIISK中(Stratagene,EcoRI酶切后用小牛腸堿性磷酸酶(CIAP)脫磷，膠回收純化)，重組質(zhì)粒命名為pBluescriptBAG5-Flag，經(jīng)DNA序列測(cè)定其序列完全正確(SEQIDN0:1),相應(yīng)的氨基酸序列見SEQIDN0:2;用限制性內(nèi)切酶EcoRI將BAG5-Flag片段從質(zhì)粒pBluescriptBAG5-Flag中切下，克隆至逆轉(zhuǎn)錄病毒載體MSCV-EGFP(來自HarinderSingh博士實(shí)驗(yàn)室，芝加哥大學(xué)分子遺傳與細(xì)胞生物學(xué)系)的EcoRI位點(diǎn)，鑒定方向，重組質(zhì)粒命名為MSCV-BAG5-Flag，轉(zhuǎn)染人多巴胺能SH-SY5Y細(xì)胞株(AmericanTissueCultureCollection),采用Flag抗體(F3165,Sigma,U.S.A.)，圖1顯示MSCV-BAG5-Flag轉(zhuǎn)染SH-SY5Y細(xì)胞株后，通過WesternBlot檢測(cè)到約52KD的BAG5-Flag蛋白。實(shí)施例2prTH-globin-BAG5-Flag-hGH質(zhì)粒的構(gòu)建建立多巴胺能神經(jīng)元特異性的轉(zhuǎn)基因構(gòu)建物prTH-globin-hGH，該構(gòu)建物從5'至3'依次含有(a)大鼠酪氨酸羥化酶的啟動(dòng)子(長(zhǎng)度為6.8kb，可在人多巴胺能細(xì)胞株SH-SY5Y中引導(dǎo)增強(qiáng)型綠色熒光蛋白的表達(dá)，見圖2a)，(b)-globin基因的一部分(l.Okb)，(c)人生長(zhǎng)激素小基因(提供PolyA尾)，見圖2b;用限制性內(nèi)切酶EcoRI將BAG5-Flag片段從質(zhì)粒pBluescriptBAG5-Flag中切下，克隆至步驟3轉(zhuǎn)基因載體-globin基因中的EcoRI位點(diǎn)，鑒定方向，建立多巴胺能神經(jīng)元特異性過表達(dá)BAG5-Flag的轉(zhuǎn)基因構(gòu)建物prTH-globin-BAG5-Flag-hGH(圖3a)。實(shí)施例3BAG5-Flag經(jīng)顯微注射引入小鼠受精卵以及轉(zhuǎn)基因陽性鼠的產(chǎn)生轉(zhuǎn)基因質(zhì)粒prTH-globin-BAG5-Flag-hGH用限制性內(nèi)切酶NotI線性化后(M.7kb)，膠回收純化(圖3b)。將線性化的DNA(約500拷貝)注射至小鼠受精卵的雄原核中，注射后的受精卵移植給假孕小鼠。約20天后，小鼠出生。小鼠出生3周后，剪尾提取DNA,用兩套PCR反應(yīng)檢測(cè)，引物如表l所示，分析是否有轉(zhuǎn)基因整合。兩套引物名稱TH-1(SEQIDN0:7)和B5-6(SEQIDN0:9)、Globinl(SEQIDN0:8)和B5-6(SEQIDNO:9)。表l<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>圖3c顯示了對(duì)BAG5-Flag轉(zhuǎn)基因陽性小鼠鑒定。轉(zhuǎn)基因陽性出現(xiàn)870bp(TH-1和B5-6)和551bp(Globinl和B5-6)帶，野生型或陰性小鼠無特異帶擴(kuò)增。以質(zhì)粒DNA為陽性對(duì)照。結(jié)果，共獲得轉(zhuǎn)基因陽性小鼠4只，經(jīng)交配繁育建系，建立了轉(zhuǎn)基因小鼠系。在閱讀了本發(fā)明的上述講述內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以對(duì)本發(fā)明作各種改動(dòng)或修改，這些等價(jià)形式落于本申請(qǐng)所附權(quán)利要求書所限定的范圍。.序列表<110>復(fù)旦大學(xué)<120>—種建立帕金森病動(dòng)物模型的方法<130>11<160>9<170〉Patentlnversion3.1<210>1<211>1464<212>DNA<213>動(dòng)物<400>1acctgaattcagatctcccggtgaccatgatagtgtttgtcaggttcaactccagctatg60gcttcccagtggaggtcgattctgacaccagcatcttgcagctcaaggaagtggttgcta120agcgacagggggttccagctgaccagctgcgtgtgatttttgccgggaaggagcttccga180atcacctgacggttc雄actgtgacctggaacaacagagtattgtacacatagtacaga240gaccacggaggagaagtcatgaaacaaatgcatctggaggggacgaaccccagagcacct300cagagggctccatatgggagtccaggagcttgacacgagtggacctgagcagccataccc360tgccggtggactctgtggggctggcggtcattctggacacagacagtaagagggattcag420aagcagccagaggtccagcagttaaacccacctacaacagc纖catctactgcaaag480gcccctgccacaaggtccagcctggaaagctccgagttcagtgtggcacctgcaaacaag540caaccctcaccttggcccagggcccatcttgctgggacgatgtcttaattccaaaccgga600tgagtggtgagtgccagtctccagactgccctggaaccagagctgaatttttctttaaat660gtggagcacacccaacctcagacaaggacacgtcggtagctttgaacctgatcaccagca720acaggcgcagcatcccttgcatagcgtgcacagatgtcaggagccctgtcctggtcttcc780agtgtaaccaccgtcacgtgatctgtttggactgtttccacttgtattgtgtcacaagac840tcaacgatcggcagtttgtccacgatgctcaacttggctactccctgccgtgtgtagctg900gctgtcccaactccctgattaaagagctccatcacttcaggatccttggagaagagcagt960.acactaggtaccagcagtatggggccgaggaatgcgtgctgcaaatgggaggtgtgctgt1020gcccccgtcctggctgtggagctggactgctacctgaacagggccagaggaaagtcacct1080gcgaagggggcaacggcctgggctgcgggtttgttttctgccgggactgtaaggaagcat1140accatgaaggggattgcgactcactgctcgaaccctcaggagccacttctcaggcctaca1200gggtggacaaaagagccgctgagcaagctcgctgggaggaggcctccaaggaaaccatca1260agaagaccaccaagccttgtcctcgctgcaacgtgccaattgaaaaaaacggaggatgta1320tgcacatgaagtgtcctcagccccagtgcaagctggagtggtgctggaactgtggctgtg1380agtggaaccgagcctgcatgggagatcactggtttgacgtggactacaaggacgacgatg1440acaagtaagaattctctagagttc1464<210>2<211>473<212>PRT<213>動(dòng)物<400>2MetlieValPheValArgPheAsnSerSerTyrGlyPheProValGlu151015ValAspSerAspThrSerHeLeuGinLeuLysGluValValAlaLys202530ArgGinGlyValProAlaAspGinLeuArgValliePheAlaGlyLys354045GluLeuProAsnHisLeuThrValGinAsnCysAspLeuGluGinGin505560SerlieValHislieValGinArgProArgArgArgSerHisGluThr65707580AsnAlaSerGlyGlyAspGluProGinSerThrSerGluGlySerlie85卯95TipGluSerArgSerLeuThrArgValAspLeuSerSerHisThrLeu100105110ProValAspSerValGlyLeuAlaVallieLeuAspThrAspSerLys115120125ArgAspSerGluAlaAlaArgGlyProAlaValLysProThrTyrAsn130135140SerPhePhelieTyrCysLysGlyProCysHisLysValGinProGly145150155LysLeuArgValGinCysGlyThrCysLysGinAlaThrLeuThrLeu165170175AlaGinGlyProSerCysTipAspAspValLeulieProAsnArgMet180185190SerGlyGluCysGinSerProAspCysProGlyThrArgAlaGluPhe195200205PhePheLysCysGlyAlaHisProThrSerAspLysAspThrSerVal210215220160AlaLeuAsnLeulieThrSerAsnArgArgSerlieProCyslieAla225230235CysThrAspValArgSerProValLeuValPheGinCysAsnHisArg245250255HisVallieCysLeuAspCysPheHisLeuTyrCysValThrArgLeu240260265270AsnAspArgGinPheValHisAspAlaGinLeuGlyTyrSerLeuPro275280285CysValAlaGlyCysProAsnSerLeuHeLysGluLeuHisHisPhe290295300ArglieLeuGlyGluGluGinTyrThrArgTyrGinGinTyrGlyAla305310315320GluGluCysValLeuGinMetGlyGlyValLeuCysProArgProGly325330335CysGlyAlaGlyLeuLeuProGluGinGlyGinArgLysValThrCys340345350GluGlyGlyAsnGlyLeuGlyCysGlyPheValPheCysArgAspCys355360365LysGluAlaTyrHisGluGlyAspCysAspSerLeuLeuGluProSer370375380GlyAlaThrSerGinAlaTyrArgValAspLysArgAlaAlaGluGin385390395400AlaArgTrpGluGluAlaSerLysGluThrlieLysLysThrThrLys405410415ProCysProArgCysAsnValProlieGluLysAsnGlyGlyCysMet420425430HisMetLysCysProGinProGinCysLysLeuGluTrpCysTrpAsn435440445CysGlyCysGluTrpAsnArgAlaCysMetGlyAspHisTrpPheAsp450455460ValAspTyrLysAspAspAspAspLys465470<210>3<211>33<212>DNA<213>動(dòng)物<400>3acctgaattcgtgaaactgaacacagaagtatg33<210>4<211>23<212>DNA<213>動(dòng)物<400>4cgatcaagccctgcagctctgtc23<210>5<211>23<212>DNA<213>動(dòng)物<400>5gacagagctgcagggcttgatcg23<210>6<211>62<212>DNA<213>動(dòng)物<400>6acctgaattcttacttgtcatcgtcgtccttgtagtcatactcccactcgtccgacttca60tg62<210>7<211>24<212>DNA<213>動(dòng)物<400>7gtggagaggatgcgcaggaggtag24<210>8<211>24<212>DNA<213>動(dòng)物<400>8gcatataaattctggctggcgtgg24<210>9<211>24<212>DNA<213>動(dòng)物<400>9cttcccgctggatctcctgaagcc2權(quán)利要求1.一種建立帕金森病動(dòng)物模型的方法，其特征在于，包括下述步驟(i)提供一線性化的轉(zhuǎn)基因構(gòu)建物，該構(gòu)建物從5’至3’依次含有(a)大鼠酪氨酸羥化酶的啟動(dòng)子，(b)β-globin基因的一部分和BAG5-Flag，(c)人生長(zhǎng)激素小基因；(ii)將步驟(i)中的線性化的構(gòu)建物基因引入非人哺乳動(dòng)物受精卵；(iii)將步驟(ii)的受精卵移植到假孕的非人哺乳動(dòng)物的輸卵管；(iv)產(chǎn)生轉(zhuǎn)基因的非人哺乳動(dòng)物，所述的非人哺乳動(dòng)物的基因組中整合有BAG5-Flag表達(dá)盒，所述的表達(dá)盒含有(a)大鼠酪氨酸羥化酶的啟動(dòng)子，(b)β-globin基因的一部分和BAG5-Flag，(c)人生長(zhǎng)激素小基因。2、如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，還包括步驟(v)對(duì)步驟(iv)獲得的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物進(jìn)行鑒定。3、如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，所述的鑒定是通過PCR法。4、如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，還包括步驟(vi)將獲得的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物與正常的非人哺乳動(dòng)物雜交，以獲得子代。5、如權(quán)利要求l所述的方法，其特征在于，所述的非人哺乳動(dòng)物是小鼠。6、如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，所述的鑒定是對(duì)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的組織用PT-PCR或WesternBlot進(jìn)行轉(zhuǎn)基因的表達(dá)分析。7、如權(quán)利要求l所述的方法，其特征在于，所述的BAG5是小鼠的BAG5。8、一種用權(quán)利要求1所述方法獲得的帕金森病動(dòng)物模型在制備篩選治療帕金森病的藥物中的用途。全文摘要本發(fā)明涉及生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一種帕金森病小鼠模型，建立該帕金森病小鼠模型的方法，以及該帕金森病小鼠模型的用途。本發(fā)明在該模型動(dòng)物的基因組中轉(zhuǎn)入了外源性BAG5-Flag表達(dá)盒，所述表達(dá)盒含有(a)大鼠酪氨酸羥化酶的啟動(dòng)子，(b)β-globin基因的一部分和BAG5-Flag，(c)人生長(zhǎng)激素小基因。本發(fā)明還提供了建立該帕金森病動(dòng)物模型的方法，本發(fā)明所述方法獲得的帕金森病動(dòng)物模型可用于研究泛素-蛋白降解系統(tǒng)與帕金森病的病理進(jìn)程的機(jī)制，篩選用于延緩、治療帕金森病的藥物。文檔編號(hào)A61K49/00GK101204585SQ20061014782公開日2008年6月25日申請(qǐng)日期2006年12月22日優(yōu)先權(quán)日2006年12月22日發(fā)明者梅余,卞敏娟,孫鳳艷,盛哲津,芳黃申請(qǐng)人:復(fù)旦大學(xué)