專利名稱：胰激肽原酶在制備放射治療腫瘤的藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及胰激肽原酶在制備放射治療腫瘤的藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
胰激肽原酶(Pancreatic Kininogenase)又稱血管舒張素，是從哺乳動物的胰臟中提取純化得到的。它作用于激肽原釋放出激肽。激肽以局部激素的形式和存在于血管內(nèi)皮上的激肽B2受體結(jié)合后就會激活磷脂酶，將膜磷脂水解成花生四烯酸和三磷酸肌醇。進而活化前列腺素合成系統(tǒng)和一氧化氮合成系統(tǒng)，使血液中前列環(huán)素和一氧化氮水平增加、血管舒張并且抑制受損血管內(nèi)膜的增生。胰激肽原酶本身屬于絲氨酸蛋白酶類，它可以催化纖溶酶原生成纖溶酶，另外其釋放出的激肽作用于血管后也可以使血液中TPA增加，從而活化纖溶系統(tǒng)，使血液中的纖維蛋白溶解，血液粘度得到降低。胰激肽原酶一方面擴張血管，一方面降血粘度，兩者的這種協(xié)同作用使微循環(huán)能夠迅速得到改善。腫瘤組織因其血管發(fā)育不健全和其組織結(jié)構(gòu)的特異，使得氧向腫瘤組織的傳入以及由腫瘤組織向外穿出都存在阻滯現(xiàn)象，造成腫瘤組織缺氧。而腫瘤組織中缺乏氧細胞的存在是腫瘤對放射不敏感的重要原因。設(shè)法提高腫瘤組織的氧水平以使其對放療增敏是多年來國內(nèi)外學(xué)者追求的目標(biāo)。如曾試用過高壓氧艙法，輸載氧體(人造血)法和使用血管擴張劑(己酮可可堿等)都沒有取得滿意的結(jié)果。原因是，雖然這些方法都能提高腫瘤的氧水平；但都同時也明顯提高了正常組織的氧分壓，而正常組織氧分壓的明顯提高是造成對放射的毒副反應(yīng)加重的最主要原因。從而提高了正常組織對放射的毒副反應(yīng)，致使無法接受這些方法，人們期待著一種既增敏又減毒的方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供胰激肽原酶的一種新的用途，即在制備放射治療腫瘤的藥物中的應(yīng)用，主要用于改善氧向腫瘤組織的傳輸，提高腫瘤組織氧水平。
實現(xiàn)本發(fā)明的技術(shù)方案是胰激肽原酶在制備放射治療腫瘤的藥物中的應(yīng)用。
上述應(yīng)用中，胰激肽原酶用于減少傳輸阻滯，改善氧向腫瘤組織的傳輸。
上述應(yīng)用中，胰激肽原酶用于提高腫瘤組織的氧分壓，具有放射治療的增敏作用與減毒作用。
上述應(yīng)用中，使用胰激肽原酶后再吸入不同濃度氧含量的氣體用于提高腫瘤組織的氧分壓，提高放射治療腫瘤的療效。
上述應(yīng)用中，胰激肽原酶用于避免正常組織吸入高氧氣體和低氧氣體后造成對放射的毒副反應(yīng)的加重。
本發(fā)明的積極效果是(1)通過試驗發(fā)現(xiàn)胰激肽原酶可以明顯地減少傳輸阻滯，改善氧向腫瘤組織的傳輸。這主要是由于胰激肽原酶改善了腫瘤微循環(huán)，從而易化了氧在腫瘤組織中的擴散過程。(2)胰激肽原酶在提高腫瘤組織的氧分壓的同時對正常組織氧分壓的提高減少，這樣不會造成對放射的毒副反應(yīng)。(3)使用胰激肽原酶后再吸入不同濃度氧含量的氣體可以提高放射治療腫瘤的療效。


圖1為本發(fā)明的應(yīng)用例的試驗步驟示意圖；圖2為吸入高氧氣體和低氧氣體時腫瘤組織與肌肉組織中氧分壓變化曲線；圖中的橫坐標(biāo)為時間，其中B1和B2表示基礎(chǔ)狀態(tài)下的第1分鐘和第2分鐘；H1至H5表示吸入高氧氣體后的第1分鐘至第5分鐘；L1至L5表示吸入低氧氣體后的第1分鐘至第5分鐘(圖3至圖6的橫坐標(biāo)及字母的含義同圖2)；圖中的縱坐標(biāo)表示氧分壓，單位為mmHg；圖3為腫瘤組織氧分壓在注射胰激肽原酶針劑前后吸入高氧氣體與低氧氣體的差別曲線；圖中縱坐標(biāo)表示腫瘤組織氧分壓，單位為mmHg；圖4為注射胰激肽原酶針劑前后腫瘤組織與肌肉組織對吸入高氧氣體和低氧氣體時氧分壓的反應(yīng)曲線；其中縱坐標(biāo)表示氧分壓，單位為mmHg；圖5為肌肉組織氧分壓在注射胰激肽原酶針劑前后吸入高氧氣體和低氧氣體的差別曲線；圖中縱坐標(biāo)表示肌肉組織氧分壓，單位為mmHg；圖6為腫瘤組織氧分壓與肌肉組織氧分壓的比值變化曲線。圖中縱坐標(biāo)表示腫瘤組織與肌肉組織氧分壓比值。
具體實施例方式
以下通過具體實施例和應(yīng)用例來說明本發(fā)明的胰激肽原酶在改善氧向腫瘤組織的傳輸，提高腫瘤組織氧分壓中的應(yīng)用。
實施例制備胰激肽原酶針劑。
取過濾滅菌的胰激肽原酶原料藥779000單位，加甘露醇5克，加乳糖10克，加適量注射用水溶解，然后加注射用水至500毫升，無菌過濾，分裝至1000個西林瓶，冷凍干燥，即得。
應(yīng)用例1、材料與方法荷瘤動物雄性T739小鼠，左右后肢接受LA795肺腺癌移植，5～10天后，瘤徑為9～12mm。在戊巴比妥(50mg/kgip)麻醉下切開皮膚暴露腫瘤，待測。
組織氧測量使用由常州千紅生化制藥有限公司研制的雙通道極譜組織氧分壓檢測儀和隱窩型微氧電極，經(jīng)檢測為靈敏，穩(wěn)定，可靠。為排除干擾，試驗儀器及受試動物均置于金屬電蔽網(wǎng)中進行。
試驗前用純氮和大氣標(biāo)定氧電極，然后將兩根相同的氧電極分別插入腫瘤組織和正常組織(以下稱為肌肉組織)，兩種組織的氧分壓分別由兩通道檢測儀數(shù)字顯示并由雙筆X---Y紀(jì)錄儀描記各自曲線，經(jīng)過30分鐘穩(wěn)定后開始正式測量。
被測藥物實施例制得的針劑。
小鼠用藥按779單位/kg溶于生理鹽水注射于左前肢肌肉深部。
標(biāo)準(zhǔn)氣體a、高氧氣體含95％的O2，5％的CO2(由北京東方醫(yī)用氣體廠配置)b、低氧氣體含10％的O2，5％的CO2，85％的N2(由北京東方醫(yī)用氣體廠配置)觀測內(nèi)容(1)、基礎(chǔ)狀態(tài)下腫瘤組織與肌肉組織中氧分壓水平。
(2)、吸入高氧氣體與低氧氣體時腫瘤組織與肌肉組織中氧分壓變化的速度與幅度的差別。
(3)、單純注射胰激肽原酶針劑對腫瘤組織與肌肉組織中氧分壓水平的影響。
(4)、注射胰激肽原酶針劑后，吸入高氧氣體與低氧氣體時腫瘤組織與肌肉組織中氧分壓反應(yīng)的速度與幅度的變化。
2、試驗步驟如圖1所示，在測得基礎(chǔ)狀態(tài)下腫瘤組織與肌肉組織的氧分壓后，先給動物吸入高氧氣體5分鐘，接著吸入低氧氣體5分鐘，再經(jīng)5分鐘恢復(fù)(吸入大氣)后，注射胰激肽原酶針劑，30分鐘后再次吸入高氧氣體5分鐘，接著吸入低氧氣體5分鐘。
3、結(jié)果(1)、基礎(chǔ)狀態(tài)下腫瘤組織與肌肉組織中氧分壓水平。
在基礎(chǔ)狀態(tài)下腫瘤組織的氧分壓為3.67±2.19mmHg，明顯低于肌肉組織的61.67±7.91mmHg，(P＜0.0006)，前者僅為后者的1/20說明腫瘤組織處于嚴重的缺氧狀態(tài)。
(2)、吸入高氧氣體與低氧氣體時腫瘤組織與肌肉組織中氧分壓變化的速度與幅度的差別。
如圖2所示，當(dāng)給動物吸入高氧氣體時，與肌肉組織相比，腫瘤組織氧分壓的上升開始的晚，上升速度緩慢，上升的幅度也??；而當(dāng)改為吸入低氧氣體時，腫瘤組織氧分壓的下降開始的也晚，速度也緩慢，幅度也小。說明氧向腫瘤組織內(nèi)傳輸或由腫瘤組織向外傳輸都有阻滯現(xiàn)象。
(3)、單純注射胰激肽原酶針劑對腫瘤組織與肌肉組織中氧分壓水平的影響。
如表1所示，在本試驗所用的劑量下和用藥后30分鐘的觀察時間內(nèi)，單純注射胰激肽原酶針劑本身對腫瘤組織和肌肉組織的氧分壓均無明顯影響。
表1

Mean+SD，n＝6(4)、注射胰激肽原酶針劑后，吸入高氧氣體與低氧氣體時腫瘤組織與肌肉組織中氧分壓反應(yīng)的速度與幅度的變化。
如前所述氧在腫瘤組織中傳輸有阻滯現(xiàn)象，但在注射胰激肽原酶針劑后30分鐘，這阻滯現(xiàn)象減輕，氧向腫瘤組織的傳輸?shù)玫礁纳?。如圖3所示，主要表現(xiàn)在吸入高氧氣體時a、腫瘤組織氧分壓上升提前注射胰激肽原酶針劑前，吸入高氧氣體0.82分鐘后腫瘤組織氧分壓開始上升。而注射胰激肽原酶針劑后，吸入高氧氣體第0.4分鐘即開始上升。
b、腫瘤組織氧分壓上升速度加快注射胰激肽原酶針劑前，吸入高氧氣體時腫瘤組織氧分壓以10.6±11.6mmHg/min的速度緩慢上升。在吸入高氧氣體2分鐘后，腫瘤組織氧分壓由3.7±5.4升到24.5±22.4mmHg。而注射胰激肽原酶針劑后，吸入高氧氣體時以23.8±16.9mmHg/min的速度上升，比前者加快一倍，在吸入高氧氣體2分鐘后，腫瘤組織氧分壓由6.71±2.2升到54.2±42.1mmHg。
c、腫瘤組織氧分壓上升的幅度提高從圖3可看出注射胰激肽原酶針劑后，吸入高氧氣體，腫瘤組織的氧分壓的上升幅度明顯高于注射胰激肽原酶針劑前。如吸入高氧氣體第五分鐘時腫瘤組織的氧分壓在注射胰激肽原酶針劑前為51.2±29.1mmHg，而在注射胰激肽原酶針劑后為78.5±27.1mmHg(P＜0.05)吸入低氧氣體時注射胰激肽原酶針劑后，腫瘤組織氧分壓下降的速度和幅度也比注射胰激肽原酶針劑前大，但在吸入低氧一分鐘后其氧分壓水平仍維持高于注射胰激肽原酶針劑前的水平，分別為44.2±5.7mmHg和33.8±52.6mmHg(P＜0.05)。
以上結(jié)果說明胰激肽原酶具有減少傳輸阻滯，改善氧在腫瘤組織中傳輸?shù)淖饔?，在供氧的條件下可顯著提高腫瘤組織氧分壓。
(5)、注射胰激肽原酶針劑后吸入高氧氣體與低氧氣體時肌肉組織氧分壓的變化。
從圖4可看出注射胰激肽原酶針劑后吸入高氧氣體時的腫瘤組織氧分壓明顯高于注射胰激肽原酶針劑前吸入高氧氣體時的腫瘤組織氧分壓。與此相反，注射胰激肽原酶針劑后吸入高氧氣體時的肌肉組織氧分壓卻明顯低于注射胰激肽原酶針劑前吸入高氧氣體的肌肉組織氧分壓。
如圖5所示，注射胰激肽原酶針劑后吸入高氧時肌肉組織的氧分壓升高的幅度低于注射胰激肽原酶針劑前的。如吸入高氧時，注射前為269.2±235.4mmHg(P＜0.05)。圖5的肌肉的反應(yīng)與圖3的腫瘤的反應(yīng)恰恰相反即腫≤0.05)。圖5的肌肉組織的反應(yīng)曲線與圖3的腫瘤組織的反應(yīng)曲線正好相反，即腫瘤組織的氧分壓相對高于肌肉組織的氧分壓。
從圖3與圖5相比較還可以看出一個現(xiàn)象，即注射胰激肽原酶針劑后吸入低氧時腫瘤組織氧分壓下降較緩慢而肌肉組織氧分壓下降較快，其結(jié)果也是腫瘤組織的氧分壓相對地高于肌肉組織的氧分壓。這一點從實驗過程中腫瘤組織氧分壓與肌肉組織氧分壓的比值的變化(見圖6)看得更明顯。由圖6可以看出注射胰激肽原酶針劑后在吸入高氧氣體轉(zhuǎn)而吸入低氧氣體的第一分鐘，腫瘤組織對肌肉組織的氧分壓比值均明顯高于注射胰激肽原酶針劑前。
權(quán)利要求
1.胰激肽原酶在制備放射治療腫瘤的藥物中的應(yīng)用。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的胰激肽原酶在制備放射治療腫瘤的藥物中應(yīng)用，其特征在于胰激肽原酶用于減少傳輸阻滯，改善氧向腫瘤組織的傳輸。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的胰激肽原酶在制備放射治療腫瘤的藥物中應(yīng)用，其特征在于胰激肽原酶用于提高腫瘤組織的氧分壓，具有放射治療的增敏作用與減毒作用。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的胰激肽原酶在制備放射腫瘤放療的藥物中應(yīng)用，其特征在于使用胰激肽原酶后再吸入不同濃度氧含量的氣體用于提高腫瘤組織的氧分壓，提高放射治療腫瘤的療效。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的胰激肽原酶在制備放射腫瘤放療的藥物中應(yīng)用，其特征在于胰激肽原酶用于避免正常組織吸入高氧氣體和低氧氣體后造成對放射的毒副反應(yīng)的加重。
全文摘要
本發(fā)明公開了胰激肽原酶的一種新的用途，即在制備放射治療腫瘤的藥物中的應(yīng)用，主要用于減少傳輸阻滯，改善氧向腫瘤組織的傳輸；提高腫瘤組織的氧分壓，具有放射治療的增敏作用與減毒作用。使用胰激肽原酶后再吸入不同濃度氧含量的氣體用于提高腫瘤組織的氧分壓，提高放射治療腫瘤的療效。而且還可以避免正常組織吸入高氧氣體和低氧氣體后放射的毒副反應(yīng)的加重。
文檔編號A61P35/00GK1943780SQ20061015250
公開日2007年4月11日 申請日期2006年9月27日 優(yōu)先權(quán)日2006年9月27日
發(fā)明者王耀方, 張叔倫, 阮桂 申請人:常州千紅生化制藥有限公司