專利名稱：茵梔黃制劑及制備方法和質(zhì)量控制方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種茵梔黃制劑及制備方法和質(zhì)量控制方法，屬于中藥技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
茵梔黃制劑清熱解毒，利濕退黃，有退黃疽和降低谷丙轉(zhuǎn)氨酶的作用；用于濕熱毒邪內(nèi)蘊(yùn)所致急性、遷延性、慢性肝炎和重癥肝炎(I型)，也可用于其他型重癥肝炎的綜合治療。茵梔黃制劑的市場(chǎng)需求量很大，目前主要的劑型有口服液、注射液等，但尚未有茵梔黃咀嚼片的文獻(xiàn)報(bào)道或生產(chǎn)。咀嚼片是近年來發(fā)展起來的一種速效制劑，與普通片劑相比具有以下優(yōu)點(diǎn)分散狀態(tài)佳、崩解時(shí)間短、藥物溶出迅速；吸收快、生物利用度高，服用方便，尤其適合老人及吞服困難的患者服用。因?yàn)榫捉榔枰楹笸谭?，其口感尤為重要，而且不易采用一般的包衣工藝防潮，所以其制備工藝存在一定的難度。另外，現(xiàn)有茵梔黃制劑的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)簡(jiǎn)單，產(chǎn)品質(zhì)量不能得到全面有效地控制，從而影響了其臨床療效。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種茵梔黃制劑及制備方法和質(zhì)量控制方法，本發(fā)明在現(xiàn)有技術(shù)的基礎(chǔ)上，通過工藝研究和篩選，制得的咀嚼片口感良好，服用方便，崩解時(shí)間短，吸收快、生物利用度高；并且研究制定了合理有效的質(zhì)量控制方法，提高了茵梔黃制劑的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。
本發(fā)明是這樣構(gòu)成的按照重量組份計(jì)算它主要由茵陳提取物10-50、梔子提取物5-40、黃芩苷60-150、金銀花提取物10-50及輔料制備而成。具體的說它主要由茵陳提取物30g、梔子提取物16g、黃芩苷100g、金銀花提取物20g及輔料制備而成。
本發(fā)明中所用的茵陳提取物、梔子提取物、黃芩苷和金銀花提取物既可為市售，也可按下述方法制備茵陳提取物的制備取茵陳，加水煎煮1-5次，合并煎液，濾過，濾液濃縮至每1ml含生藥0.5-5g，加乙醇使含醇量達(dá)50-85％，冷藏10-60小時(shí)，濾過，濾液回收乙醇至每1ml含生藥3-8g，再加乙醇使含醇量達(dá)60-95％，冷藏10-60小時(shí)，濾過，濾液回收乙醇至每1ml含生藥7-12g，加2-10倍量水，冷藏20-100小時(shí)，濾過，濾液濃縮成稠膏狀，真空干燥，即得。
梔子提取物的制備取梔子，粉碎成粗粉，加水煎煮1-5次，合并煎液，濾過，濾液濃縮至每1ml含生藥0.5-3g，加乙醇使含醇量達(dá)50-85％，冷藏10-60小時(shí)，濾過，濾液回收乙醇至每1ml含生藥2-6g，加乙醇使含醇量達(dá)70-90％，冷藏10-60小時(shí)，濾過，濾液回收乙醇至每1ml含生藥3-10g，加2-10倍量水，冷藏10-60小時(shí)，濾過，濾液濃縮成稠膏，真空干燥，即得。
黃芩苷的制備取黃芩，粉碎成粗粉，加水煎煮1-5次，合并煎液，濾過，濾液加熱至80℃，加鹽酸調(diào)節(jié)pH1～3，靜置，濾過，沉淀物加水?dāng)嚢璩珊隣?，?0％氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH至4～7，濾過，濾液加等量乙醇，加熱至80℃，加鹽酸調(diào)節(jié)pH至1～3，使黃芩苷析出，濾過，用乙醇洗滌，干燥，即得；本品含黃芩苷C21H18O11不得少于90.0％。
金銀花提取物的制備取金銀花，加水煎煮1-5次，合并煎液，濾過，濾液濃縮至每ml含生藥0.5-5g，冷至30～70℃，加20～40％氫氧化鈣溶液調(diào)節(jié)pH至10-14，濾過，沉淀物加乙醇，靜置，用50％硫酸調(diào)節(jié)pH值至1.0～5.0，濾過，濾液用40％氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至5.0～7.0，回收乙醇，濃縮至干，即得。
本發(fā)明茵梔黃制劑的制備方法為取茵陳提取物、梔子提取物、黃芩苷、金銀花提取物混合均勻后，加入甘露醇、蔗糖、淀粉、甜菊素、枸櫞酸以及硬脂酸鎂制備成茵梔黃咀嚼片。
具體的制備方法為取茵陳提取物、梔子提取物、黃芩苷、金銀花提取物混合均勻后，按原料∶輔料＝0.5-3∶1-5的比例加入甘露醇∶蔗糖∶淀粉＝1-10∶0.5-5∶0.5-5的混合物，再加入1-10‰甜菊素和0.5-5‰枸櫞酸，混合均勻，50-95％乙醇潤(rùn)濕制軟材，制粒，干燥，整粒，細(xì)粉加入0.1-1％硬脂酸鎂，充分混合均勻，壓片，包薄膜衣制成咀嚼片。
茵梔黃咀嚼片、膠囊劑和顆粒劑的質(zhì)量控制方法主要包括性狀、鑒別、檢查以及含量測(cè)定項(xiàng)目中的部分或全部；其中鑒別包括對(duì)制劑中黃芩苷、茵陳提取物、梔子提取物和金銀花提取物的薄層色譜鑒別；含量測(cè)定是對(duì)制劑中黃芩苷的含量測(cè)定。
黃芩苷的鑒別方法是以黃芩苷對(duì)照品為對(duì)照，以醋酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水＝1-10∶1-10∶0.5-5∶0.5-5為展開劑的薄層色譜法；茵陳提取物的鑒別方法是以茵陳對(duì)照藥材為對(duì)照，以60～90℃石油醚∶醋酸乙酯∶丙酮＝1-10∶1-10∶0.5-5為展開劑的薄層色譜法；梔子提取物的鑒別方法是以梔子苷對(duì)照品為對(duì)照，以醋酸乙酯∶甲酸∶水＝5-20∶0.5-5∶0.5-5為展開劑的薄層色譜法；金銀花提取物的鑒別方法是以綠原酸對(duì)照品為對(duì)照，以醋酸丁酯∶甲酸∶水＝1-20∶0.5-10∶0.5-10的上層溶液為展開劑的薄層色譜法。
所述的鑒別方法包括以下項(xiàng)目的部分或全部(1)取藥物，加入50-90％乙醇超聲提取10-100分鐘，放冷，濾過，作為供試品溶液；另取黃芩苷對(duì)照品，加甲醇溶解，作為對(duì)照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液及對(duì)照品溶液，分別點(diǎn)于同一聚酰胺薄膜上，以醋酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水＝1-10∶1-10∶0.5-5∶0.5-5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以1％三氯化鐵乙醇溶液；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的暗綠色斑點(diǎn)；(2)取藥物，加水使溶散，加入稀鹽酸，加熱至約80℃，放冷，濾過，濾液移置分液漏斗中，加醋酸乙酯提取1-5次，合并醋酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)右掖际谷芙?，作為供試品溶液；另取茵陳?duì)照藥材，加水煮沸3～30分鐘，放冷，濾過，濾液加入醋酸乙酯，同法制成對(duì)照藥材溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液、對(duì)照藥材溶液，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以60～90℃石油醚∶醋酸乙酯∶丙酮＝1-10∶1-10∶0.5-5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％氫氧化鉀乙醇溶液，置200-600nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的藍(lán)色熒光斑點(diǎn)；(3)取藥物，加水使溶散，加入稀鹽酸，加熱至約80℃，放冷，濾過，濾液移置分液漏斗中，加醋酸乙酯提取1-5次，合并醋酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)右掖际谷芙?，作為供試品溶液；取梔子苷對(duì)照品，加乙醇溶解，作為對(duì)照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液及對(duì)照品溶液，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯∶甲酸∶水＝5-20∶0.5-5∶0.5-5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(4)取藥物，加水使溶散，加入稀鹽酸，加熱至約80℃，放冷，濾過，濾液移置分液漏斗中，加醋酸乙酯提取1-5次，合并醋酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)右掖际谷芙?，作為供試品溶液；取綠原酸對(duì)照品，加乙醇溶解，作為對(duì)照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液及對(duì)照品溶液，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以醋酸丁酯∶甲酸∶水＝1-20∶0.5-10∶0.5-10的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴10％硫酸乙醇液，晾干后再噴3％三氯化鐵乙醇液，在110℃加熱至斑點(diǎn)清晰后，日光下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的紅色斑點(diǎn)。
黃芩苷的含量測(cè)定方法是以黃芩苷對(duì)照品為對(duì)照，以甲醇或乙腈∶水∶磷酸＝20-60∶30-70∶0.1-2為流動(dòng)相的高效液相色譜法。
所述含量測(cè)定方法為照中國藥典高效液相色譜法測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇或乙腈∶水∶磷酸＝20-60∶30-70∶0.1-2為流動(dòng)相；流速1.0ml/min；檢測(cè)波長(zhǎng)280nm；理論板數(shù)以黃芩苷峰計(jì)算不得低于2500；對(duì)照品溶液的制備取黃芩苷對(duì)照品，精密稱定，加乙醇-水溶液溶解制成每1ml含黃芩苷20-100μg的溶液，即得；供試品溶液的制備取本藥物，精密稱定，研細(xì)，取藥粉10-50mg，精密稱定，置100ml量瓶中，加乙醇-水溶液80-90ml，超聲提取10-30分鐘后，放冷，加乙醇-水溶液至刻度，搖勻，0.45μm微孔濾過，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5-25μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本制劑含黃芩苷C21H18O11應(yīng)為標(biāo)示量的90.0～110.1％。
所述質(zhì)量控制方法包括性狀對(duì)于咀嚼片為薄膜衣片，除去薄膜衣后顯灰黃色至棕黃色；味甜、微苦；對(duì)于膠囊劑內(nèi)容物為灰黃色至棕黃色顆粒；味甜、微苦；對(duì)于顆粒劑為灰黃色至棕黃色顆粒；味甜、微苦；鑒別(1)取藥物，加入50-90％乙醇超聲提取10-100分鐘，放冷，濾過，作為供試品溶液；另取黃芩苷對(duì)照品，加甲醇溶解，作為對(duì)照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液及對(duì)照品溶液，分別點(diǎn)于同一聚酰胺薄膜上，以醋酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水＝1-10∶1-10∶0.5-5∶0.5-5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以1％三氯化鐵乙醇溶液；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的暗綠色斑點(diǎn)；(2)取藥物，加水使溶散，加入稀鹽酸，加熱至約80℃，放冷，濾過，濾液移置分液漏斗中，加醋酸乙酯提取1-5次，合并醋酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)右掖际谷芙猓鳛楣┰嚻啡芤?；另取茵陳?duì)照藥材，加水煮沸3～30分鐘，放冷，濾過，濾液加入醋酸乙酯，同法制成對(duì)照藥材溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液、對(duì)照藥材溶液，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以60～90℃石油醚∶醋酸乙酯∶丙酮＝1-10∶1-10∶0.5-5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％氫氧化鉀乙醇溶液，置200-600nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的藍(lán)色熒光斑點(diǎn)；(3)取藥物，加水使溶散，加入稀鹽酸，加熱至約80℃，放冷，濾過，濾液移置分液漏斗中，加醋酸乙酯提取1-5次，合并醋酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)右掖际谷芙?，作為供試品溶液；取梔子苷對(duì)照品，加乙醇溶解，作為對(duì)照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液及對(duì)照品溶液，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯∶甲酸∶水＝5-20∶0.5-5∶0.5-5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(4)取藥物，加水使溶散，加入稀鹽酸，加熱至約80℃，放冷，濾過，濾液移置分液漏斗中，加醋酸乙酯提取1-5次，合并醋酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)右掖际谷芙猓鳛楣┰嚻啡芤?；取綠原酸對(duì)照品，加乙醇溶解，作為對(duì)照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液及對(duì)照品溶液，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以醋酸丁酯∶甲酸∶水＝1-20∶0.5-10∶0.5-10的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴10％硫酸乙醇液，晾干后再噴3％三氯化鐵乙醇液，在110℃加熱至斑點(diǎn)清晰后，日光下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的紅色斑點(diǎn)；檢查應(yīng)符合中國藥典附錄各制劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定；藥典高效液相色譜法測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇或乙腈∶水∶磷酸＝20-60∶30-70∶0.1-2為流動(dòng)相；流速1.0ml/min；檢測(cè)波長(zhǎng)280nm；理論板數(shù)以黃芩苷峰計(jì)算不得低于2500；對(duì)照品溶液的制備取黃芩苷對(duì)照品，精密稱定，加乙醇-水溶液溶解制成每1ml含黃芩苷20-100μg的溶液，即得；供試品溶液的制備取本藥物，精密稱定，研細(xì)，取藥粉10-50mg，精密稱定，置100ml量瓶中，加乙醇-水溶液80-90ml，超聲提取10-30分鐘后，放冷，加乙醇-水溶液至刻度，搖勻，0.45μm微孔濾過，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5-25μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本制劑含黃芩苷C21H18O11應(yīng)為標(biāo)示量的90.0～110.1％。
為了確保本發(fā)明質(zhì)量控制方法科學(xué)、合理、可行，申請(qǐng)人對(duì)方中各成分的鑒別和含量測(cè)定方法進(jìn)行了研究，具體試驗(yàn)資料如下本制劑為咀嚼片，與普通片劑相比，服用更為方便，因咬碎后吞服，所以口感尤為重要。
一、輔料選擇實(shí)驗(yàn)1、填充劑選擇1.1填充劑種類的篩選可做為填充劑的輔料主要有蔗糖①、甘露醇②、淀粉③等，我們通過實(shí)驗(yàn)，以制得干顆粒的休止角、可壓性及吸濕性做為指標(biāo)，對(duì)上述輔料中的一種或幾種進(jìn)行篩選。
表1 填充劑種類的篩選


表中結(jié)果可見，蔗糖易吸濕、可壓性較差，但其口感好，有一定的粘合性；甘露醇不易吸濕，口感甘而清涼，流動(dòng)性較好，可作為主要填充劑，淀粉不易吸濕，也可調(diào)節(jié)片子硬度。所以我們選擇三種輔料混合作為填充劑。
1.2處方篩選1.2.1在前期已確定輔料類別的基礎(chǔ)上，考察A(填充劑)、B(潤(rùn)滑劑)、C(原料藥與填充劑的用量比例)3個(gè)因素對(duì)片劑成型質(zhì)量的影響，以確定該片劑處方中輔料的用量和配比。L9(3)4正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，以片劑的外觀、重量差異、硬度，干顆粒的休止角、吸水率、粒度分布作為考察指標(biāo)。
表2 因素水平表

注G為甘露醇，T為蔗糖，D為淀粉。
樣品制備稱取干膏粉與輔料，過80目篩，混合均勻，90％乙醇潤(rùn)濕制軟材，20目篩網(wǎng)制粒，50～60℃干燥，16目篩整粒，細(xì)粉加入硬脂酸鎂，充分混合均勻，壓片。
1.2.2測(cè)定干顆粒的休止角、吸水率、粒度以及片劑的外觀、重量差異、硬度，結(jié)果見下表。
表3 L9(3)4正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果


表4 各指標(biāo)評(píng)分方法

1.2.3方差分析及結(jié)論結(jié)果見下表。
表5 方差分析表

1.2.4結(jié)果分析通過總評(píng)分考察，從表3中極差R值大小顯示，各因素作用主次為A＞C＞B；方差分析結(jié)果表明A因素、C因素的影響均有顯著性意義(P＜0.05)，B因素?zé)o顯著差異(P＞0.05)，以A1C2B3組合為佳。
2、矯味劑的篩選咀嚼片必須具有較好口感，才易被病人接受。填充劑中已選用大量甘露醇，甘露醇味甜而清涼也是較好的矯味劑，但制成的顆粒甜味不夠，須再加入少量甜味劑。茵梔黃口服液中也曾加入0.5‰枸櫞酸，經(jīng)過篩選，在此我們選用甜菊素與枸櫞酸作為矯味劑。結(jié)果見下表。
表6 矯味劑的篩選

注+好，++較好，+++很好。
結(jié)果評(píng)價(jià)從表6結(jié)果可見，加入甜菊素3‰和1‰枸櫞酸作為作矯味劑時(shí)，口感最佳。
二、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究(一)黃芩苷含量測(cè)定方法研究1、黃芩苷是本制劑中的主要有效成分，黃芩苷的含量測(cè)定方法中文獻(xiàn)報(bào)道較多有分光光度法、高效液相色譜法等。經(jīng)我們研究發(fā)現(xiàn)，本制劑采用分光光度法對(duì)制劑中黃芩苷進(jìn)行含量測(cè)定，其專屬性不強(qiáng)，誤差大，測(cè)定結(jié)果不穩(wěn)定，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差較高效液相色譜法大，故本發(fā)明采用高效液相色譜法測(cè)定黃芩苷的含量，以下是本發(fā)明制劑采用高效液相色譜法與分光光度法測(cè)定結(jié)果比較高效液相色譜法和分光光度法測(cè)定結(jié)果(n＝5)

2、高效液相色譜法檢測(cè)方法研究2.1超聲提取溶劑考察取藥物細(xì)粉約30mg，置100ml量瓶中，分別加甲醇、乙醇、70％乙醇約90ml，超聲提取40分鐘后，放冷，加溶劑至刻度，搖勻，濾過(0.45μm)，即得供試液，測(cè)定黃芩苷的含量。測(cè)定結(jié)果見下表。
不同提取溶劑對(duì)黃芩苷含量測(cè)定的影響(n＝2)


試驗(yàn)結(jié)果表明，甲醇作溶劑的黃芩苷提取率較高，但是考慮到乙醇較甲醇毒性小，且成本較低，所以選用乙醇作溶劑提取，最佳提取溶劑為70％乙醇。
2.2精密度試驗(yàn)精密吸取黃芩苷對(duì)照品溶液(60.0μg/ml)10μl，注入液相色譜儀，測(cè)定峰面積，重復(fù)進(jìn)樣5次，平均峰面積為2127967.4，RSD為0.83％。表明精密度良好。
黃芩苷對(duì)照品溶液精密度試驗(yàn)

2.3重復(fù)性試驗(yàn)取藥物細(xì)粉，按本發(fā)明中含量測(cè)定項(xiàng)下供試液的制備方法，分別制備5份供試液，進(jìn)樣，測(cè)定峰面積，黃芩苷平均含量為0.2049g/g，RSD為0.55％。表明重復(fù)性良好。
制劑供試品中黃芩苷的重復(fù)性試驗(yàn)

2.4穩(wěn)定性試驗(yàn)取藥物細(xì)粉，按本發(fā)明中含量測(cè)定項(xiàng)下供試液的制備方法制備供試液，分別于0、2、4、6、8小時(shí)測(cè)定其黃芩苷峰面積，平均峰面積為1980407，RSD為1.11％。表明供試品溶液中梔子苷在8小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。
制劑供試品中黃芩苷的穩(wěn)定性試驗(yàn)

2.5回收率試驗(yàn)采用加樣回收法，分別取本制劑(平均含量為0.2049g/g)適量，精密稱定，置100ml量瓶中，精密加入黃芩苷對(duì)照品(含黃芩苷為0.2158mg/ml)溶液15ml，按質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案，制成供試液。分別精密吸取10μl注入液相色譜儀，記錄色譜，測(cè)定含量，計(jì)算回收率。平均回收率為99.07％，RSD為1.23％，證明該方法可行。
供試品溶液中黃芩苷測(cè)定回收率試驗(yàn)

(二)黃芩苷的薄層色譜研究以黃芩苷對(duì)照品鑒別方中黃芩苷。
對(duì)照品溶液制備方法取黃芩苷對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。
供試品溶液制備方法一取藥物0.2g，研細(xì)，加甲醇20ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。取按工藝制備的缺黃芩苷的陰性樣品2g，同法制得陰性對(duì)照溶液。
供試品溶液制備方法二取藥物，研細(xì)，加70％乙醇溶液100ml，超聲提取20分鐘后，放冷，濾過，即得；取按工藝制備的缺黃芩苷的陰性樣品，同法制得陰性對(duì)照溶液。
展開劑選擇以醋酸乙酯、丁酮、甲酸不同比例的混合溶液，醋酸乙酯、丁酮、甲酸、水不同比例的混合溶液為展開劑。
結(jié)果以醋酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水＝1-10∶1-10∶0.5-5∶0.5-5為展開劑。按照方法二制備的供試品溶液，斑點(diǎn)分離好，方法重現(xiàn)性較好。最佳展開劑為醋酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水＝5∶3∶1∶1。另外，在研究過程中發(fā)現(xiàn)，點(diǎn)于以含4％醋酸鈉的羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑的硅膠G薄層板上，斑點(diǎn)大多分離較差，主斑點(diǎn)拖尾嚴(yán)重；點(diǎn)于聚酰胺薄膜上斑點(diǎn)顯色清晰，陰性無干擾，方法重現(xiàn)性好。
(三)茵陳的薄層色譜研究以茵陳對(duì)照藥材鑒別方中茵陳提取物。
對(duì)照品溶液制備方法取茵陳對(duì)照藥材3g，加水50ml，煮沸5～10分鐘，放冷，濾過，濾液加醋酸乙酯10ml，同法制成對(duì)照藥材溶液。
供試品溶液制備方法一取藥物1g，研細(xì)，加醋酸乙酯10ml回流提取30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，作為供試品溶液。取按工藝制備的缺茵陳的陰性樣品2g，同法制得陰性對(duì)照溶液。
供試品溶液制備方法二取藥物1g，研細(xì)，加水10ml使溶散，加稀鹽酸1ml，加熱至約80℃，放冷，濾過，濾液移置分液漏斗中，加醋酸乙酯提取2次，每次10ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，作為供試品溶液。取按工藝制備的缺茵陳的陰性樣品2g，同法制得陰性對(duì)照溶液。
展開劑選擇以石油醚(60～90℃)、醋酸乙酯、甲醇不同比例的混合溶液；以石油醚(60～90℃)、醋酸乙酯、丙酮不同比例的混合溶液為展開劑；以石油醚(60～90℃)、苯、丙酮不同比例的混合溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％氫氧化鉀乙醇溶液，置紫外光燈下檢視。
結(jié)果以60～90℃石油醚∶醋酸乙酯∶丙酮＝1-10∶1-10∶0.5-5為展開劑。按照方法二制備的供試品溶液，斑點(diǎn)分離好，方法重現(xiàn)性較好。最佳展開劑為60～90℃石油醚∶醋酸乙酯∶丙酮＝5∶3∶2。
(四)梔子的薄層色譜研究以梔子苷對(duì)照品鑒別方中梔子提取物。
對(duì)照品溶液制備方法取梔子苷對(duì)照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。
供試品溶液制備方法一取藥物1g，研細(xì)，加乙醚15ml，振搖10分鐘，棄去乙醚液，殘?jiān)鼡]干，加醋酸乙酯15ml，加熱回流1小時(shí)，濾過，濾液揮干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，作為供試品溶液。取按工藝制備的缺梔子的陰性樣品2g，同法制得陰性對(duì)照溶液。
供試品溶液制備方法二取藥物1g，研細(xì)，加水10ml使溶散，加稀鹽酸1ml，加熱至約80℃，放冷，濾過，濾液移置分液漏斗中，加醋酸乙酯提取2次，每次10ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，作為供試品溶液。取按工藝制備的缺梔子的陰性樣品2g，同法制得陰性對(duì)照溶液。
展開劑選擇以醋酸乙酯、丙酮、甲酸、水不同比例的混合溶液；以醋酸乙酯、甲酸、水不同比例的混合溶液；以醋酸乙酯、丙酮、醋酸乙酯、水不同比例的混合溶液為展開劑，展開，取出，晾干，分別噴以10％硫酸乙醇溶液，在110℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰及噴以5％香草醛硫酸溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰。
結(jié)果按照方法二制備的供試品溶液，以醋酸乙酯∶甲酸∶水＝5-20∶0.5-5∶0.5-5為展開劑，展開，取出，涼干，噴以5％香草醛硫酸溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰，該方法背景干擾小，斑點(diǎn)顯色清晰，陰性無干擾，方法重現(xiàn)性好。最佳展開劑為醋酸乙酯∶甲酸∶水＝10∶2∶1。
(五)金銀花的薄層色譜研究以綠原酸對(duì)照品鑒別方中金銀花提取物。
對(duì)照品溶液制備方法取綠原酸對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。
供試品溶液制備方法一取本藥物1g，研細(xì)，加水10ml使溶散，加稀鹽酸1ml，加熱至約80℃，放冷，濾過，濾液移置分液漏斗中，加醋酸乙酯提取2次，每次10ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，作為供試品溶液。取按工藝制備的缺梔子的陰性樣品2g，同法制得陰性對(duì)照溶液。
供試品溶液制備方法二取本藥物1g，研細(xì)，加甲醇10ml，放置12小時(shí)，濾過，濾液濃縮至2ml作為供試品溶液。取按工藝制備的缺金銀花的陰性樣品2g，同法制得陰性對(duì)照溶液。
結(jié)果以醋酸丁酯∶甲酸∶水＝1-20∶0.5-10∶0.5-10的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，分別以下面顯色方式顯色檢視(1)置紫外光燈(365nm)下檢視，方法一和方法二均有陰性干擾；(2)噴以10％硫酸乙醇液，在110℃加熱后，方法一斑點(diǎn)顏色較淡，不清晰，不便檢視，方法二背景干擾大，斑點(diǎn)不清晰；(3)噴以3％三氯化鐵乙醇液，“方法一板”和“方法二板”均有陰性干擾；(4)先噴10％硫酸乙醇液涼干后再噴3％三氯化鐵乙醇液，在110℃加熱后，“方法一板”紅色斑點(diǎn)清晰，陰性無干擾，“方法二板”在供試品色譜中，與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯不同顏色的斑點(diǎn)。
故選用供試品溶液制備方法一，以醋酸丁酯∶甲酸∶水＝1-20∶0.5-10∶0.5-10的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，顯色方式為(4)先噴10％硫酸乙醇液涼干后再噴3％三氯化鐵乙醇液，在110℃加熱至斑點(diǎn)清晰后，日光檢視。最佳展開劑為醋酸丁酯∶甲酸∶水＝7∶2.5∶2.5的上層溶液。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明所提供的咀嚼片分散狀態(tài)佳、崩解時(shí)間短、藥物溶出迅速；吸收快、生物利用度高；口感良好，服用方便，尤其適合老人及吞服困難的患者服用；本發(fā)明質(zhì)量控制方法精密度高，重現(xiàn)性好，回收率高，提高了茵梔黃制劑的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，可有效確保該制劑的臨床療效。
以下通過實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明，但不作為對(duì)本發(fā)明的限制。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明的實(shí)施例1茵陳提取物30g、梔子提取物16g、黃芩苷100g、金銀花提取物20g、甘露醇∶蔗糖∶淀粉＝3∶1∶1(重量比)的混合物、甜菊素、枸櫞酸、硬脂酸鎂取茵陳提取物、梔子提取物、黃芩苷和金銀花提取物的細(xì)粉混勻，按原料∶填料＝1∶2的重量比例加入甘露醇∶蔗糖∶淀粉＝3∶1∶1(重量比)的混合物，再加入3‰甜菊素和1‰枸櫞酸，混合均勻，90％乙醇潤(rùn)濕制軟材，20目篩網(wǎng)制粒，50～60℃干燥，16目篩整粒，細(xì)粉加入0.4％硬脂酸鎂，充分混合均勻，壓片，包薄膜衣，即得。本產(chǎn)品嚼服，一次4片，一日3次。
本發(fā)明的實(shí)施例2茵陳提取物50g、梔子提取物5g、黃芩苷60g、金銀花提取物50g、甘露醇∶蔗糖∶淀粉＝1∶5∶0.5(重量比)的混合物、甜菊素、枸櫞酸、硬脂酸鎂取茵陳提取物、梔子提取物、黃芩苷、金銀花提取物混合均勻后，按原料∶輔料＝3∶1的比例加入甘露醇∶蔗糖∶淀粉＝1∶5∶0.5的混合物，再加入10‰甜菊素和5‰枸櫞酸，混合均勻，50％乙醇潤(rùn)濕制軟材，制粒，干燥，整粒，細(xì)粉加入0.1％硬脂酸鎂，充分混合均勻，壓片，包薄膜衣制成咀嚼片。本產(chǎn)品嚼服，一次4片，一日3次。
本發(fā)明的實(shí)施例3茵陳提取物10g、梔子提取物40g、黃芩苷150g、金銀花提取物10g甘露醇∶蔗糖∶淀粉＝10∶0.5∶5(重量比)的混合物、甜菊素、枸櫞酸、硬脂酸鎂取茵陳提取物、梔子提取物、黃芩苷、金銀花提取物混合均勻后，按原料∶輔料＝0.5∶5的比例加入甘露醇∶蔗糖∶淀粉＝10∶0.5∶5的混合物，再加入1‰甜菊素和0.5‰枸櫞酸，混合均勻，95％乙醇潤(rùn)濕制軟材，制粒，干燥，整粒，細(xì)粉加入1％硬脂酸鎂，充分混合均勻，壓片，包薄膜衣制成咀嚼片。本產(chǎn)品嚼服，一次4片，一日3次。
本發(fā)明的實(shí)施例4所述咀嚼片質(zhì)量控制方法包括性狀為薄膜衣片，除去薄膜衣后顯灰黃色至棕黃色；味甜、微苦；鑒別(1)取本制劑或其內(nèi)容物，精密稱定，研細(xì)，取藥粉約30mg，精密稱定，置100ml量瓶中，加70％乙醇約90ml，超聲提取20分鐘后，放冷，加70％乙醇至刻度，搖勻，0.45μm微孔濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液；另取黃芩苷對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國藥典附錄薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液4μl，對(duì)照品溶液2μl，分別點(diǎn)于同一聚酰胺薄膜上，以醋酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水＝5∶3∶1∶1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以1％三氯化鐵乙醇溶液；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的暗綠色斑點(diǎn)；(2)取本制劑或其內(nèi)容物，研細(xì)，加水10ml使溶散，加稀鹽酸1ml，加熱至約80℃，放冷，濾過，濾液移置分液漏斗中，加醋酸乙酯提取2次，每次10ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，作為供試品溶液；另取茵陳對(duì)照藥材3g，加水50ml，煮沸5～10分鐘，放冷，濾過，濾液加醋酸乙酯10ml，同法制成對(duì)照藥材溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液2μl，對(duì)照藥材溶液5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以60～90℃石油醚∶醋酸乙酯∶丙酮＝5∶3∶2為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％氫氧化鉀乙醇溶液，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的藍(lán)色熒光斑點(diǎn)；(3)取本制劑或其內(nèi)容物，研細(xì)，加水10ml使溶散，加稀鹽酸1ml，加熱至約80℃，放冷，濾過，濾液移置分液漏斗中，加醋酸乙酯提取2次，每次10ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，作為供試品溶液；取梔子苷對(duì)照品，加乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取的供試品溶液及對(duì)照品溶液各3μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯∶甲酸∶水＝10∶2∶1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(4)取本制劑或其內(nèi)容物，研細(xì)，加水10ml使溶散，加稀鹽酸1ml，加熱至約80℃，放冷，濾過，濾液移置分液漏斗中，加醋酸乙酯提取2次，每次10ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，作為供試品溶液；取綠原酸對(duì)照品，加乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國藥典附錄薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液及對(duì)照品溶液各4μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以醋酸丁酯∶甲酸∶水＝7∶2.5∶2.5的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴10％硫酸乙醇液，涼干后再噴3％三氯化鐵乙醇液，在110℃加熱至斑點(diǎn)清晰后，日光檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的紅色斑點(diǎn)；檢查應(yīng)符合中國藥典附錄片劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定；含量測(cè)定照中國藥典附錄高效液相色譜法測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇∶水∶磷酸＝47∶53∶0.2為流動(dòng)相；流速1.0ml/min；檢測(cè)波長(zhǎng)280nm；理論板數(shù)以黃芩苷峰計(jì)算不得低于2500；對(duì)照品溶液的制備取黃芩苷對(duì)照品10.0mg，精密稱定，置50ml量瓶中，加70％乙醇至刻度，搖勻，精密量取15ml，置50ml量瓶中，加70％乙醇至刻度，搖勻，制成每1ml含黃芩苷60.0μg的溶液，即得；供試品溶液的制備取本制劑或其內(nèi)容物，精密稱定，研細(xì)，取藥粉約30mg，精密稱定，置100ml量瓶中，加70％乙醇約90ml，超聲提取20分鐘后，放冷，加70％乙醇至刻度，搖勻，0.45μm微孔濾過，即得；
測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本制劑含黃芩苷C21H18O11應(yīng)為標(biāo)示量的90.0～110.1％。
本發(fā)明的實(shí)施例5所述膠囊劑質(zhì)量控制方法包括性狀內(nèi)容物為灰黃色至棕黃色顆粒；味甜、微苦；鑒別(1)取藥物，精密稱定，研細(xì)，取藥粉約30mg，精密稱定，置100ml量瓶中，加90％乙醇約90ml，超聲提取10分鐘后，放冷，加90％乙醇至刻度，搖勻，0.45μm微孔濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液；另取黃芩苷對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國藥典附錄薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液4μl，對(duì)照品溶液2μl，分別點(diǎn)于同一聚酰胺薄膜上，以醋酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水＝10∶1∶5∶5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以1％三氯化鐵乙醇溶液；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的暗綠色斑點(diǎn)；(2)取藥物，研細(xì)，加水10ml使溶散，加稀鹽酸1ml，加熱至約80℃，放冷，濾過，濾液移置分液漏斗中，加醋酸乙酯提取1次，每次30ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，作為供試品溶液；另取茵陳對(duì)照藥材3g，加水50ml，煮沸3分鐘，放冷，濾過，濾液加醋酸乙酯10ml，同法制成對(duì)照藥材溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液5μl，對(duì)照藥材溶液5μ1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以60～90℃石油醚∶醋酸乙酯∶丙酮＝10∶1∶0.5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％氫氧化鉀乙醇溶液，置200nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的藍(lán)色熒光斑點(diǎn)；(3)取藥物，研細(xì)，加水10ml使溶散，加稀鹽酸1ml，加熱至約80℃，放冷，濾過，濾液移置分液漏斗中，加醋酸乙酯提取1次，每次30ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，作為供試品溶液；取梔子苷對(duì)照品，加乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液及對(duì)照品溶液，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯∶甲酸∶水＝20∶0.5∶0.5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(4)取藥物，研細(xì)，加水10ml使溶散，加稀鹽酸1ml，加熱至約80℃，放冷，濾過，濾液移置分液漏斗中，加醋酸乙酯提取3次，每次30ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，作為供試品溶液；取綠原酸對(duì)照品，加乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液及對(duì)照品溶液，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以醋酸丁酯∶甲酸∶水＝20∶0.5∶0.5的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴10％硫酸乙醇液，晾干后再噴3％三氯化鐵乙醇液，在110℃加熱至斑點(diǎn)清晰后，日光下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的紅色斑點(diǎn)。
檢查應(yīng)符合中國藥典附錄膠囊劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定；含量測(cè)定照中國藥典附錄高效液相色譜法測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈∶水∶磷酸＝20∶70∶0.1為流動(dòng)相；流速1.0ml/min；檢測(cè)波長(zhǎng)280nm；理論板數(shù)以黃芩苷峰計(jì)算不得低于2500；對(duì)照品溶液的制備取黃芩苷對(duì)照品，精密稱定，加90％乙醇溶液溶解制成每1ml含黃芩苷20μg的溶液，即得；供試品溶液的制備取本藥物，精密稱定，研細(xì)，取藥粉10mg，精密稱定，置100ml量瓶中，加90％乙醇溶液90ml，超聲提取10-30分鐘后，放冷，加90％乙醇溶液至刻度，搖勻，0.45μm微孔濾過，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各25μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本制劑含黃芩苷C21H18O11應(yīng)為標(biāo)示量的90.0～110.1％。
本發(fā)明的實(shí)施例6所述顆粒質(zhì)量控制方法包括性狀為灰黃色至棕黃色顆粒；味甜、微苦；鑒別(1)取藥物，精密稱定，研細(xì)，取藥粉約30mg，精密稱定，置100ml量瓶中，加50％乙醇約90ml，超聲提取100分鐘后，放冷，加70％乙醇至刻度，搖勻，0.45μm微孔濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液；另取黃芩苷對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國藥典附錄薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液4μl，對(duì)照品溶液2μl，分別點(diǎn)于同一聚酰胺薄膜上，以醋酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水＝1∶10∶0.5∶0.5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以1％三氯化鐵乙醇溶液；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的暗綠色斑點(diǎn)；(2)取藥物，研細(xì)，加水50ml使溶散，加稀鹽酸5ml，加熱至約80℃，放冷，濾過，濾液移置分液漏斗中，加醋酸乙酯提取5次，每次40ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，作為供試品溶液；另取茵陳對(duì)照藥材5g，加水100ml，煮沸30分鐘，放冷，濾過，濾液加醋酸乙酯10ml，同法制成對(duì)照藥材溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液3μl，對(duì)照藥材溶液10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以60～90℃石油醚∶醋酸乙酯∶丙酮＝1∶10∶5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％氫氧化鉀乙醇溶液，置600nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的藍(lán)色熒光斑點(diǎn)；(3)取藥物，研細(xì)，加水50ml使溶散，加稀鹽酸5ml，加熱至約80℃，放冷，濾過，濾液移置分液漏斗中，加醋酸乙酯提取5次，每次40ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，作為供試品溶液；取梔子苷對(duì)照品，加乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液及對(duì)照品溶液，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯∶甲酸∶水＝5∶5∶5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(4)取藥物，研細(xì)，加水50ml使溶散，加稀鹽酸5ml，加熱至約80℃，放冷，濾過，濾液移置分液漏斗中，加醋酸乙酯提取5次，每次40ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，作為供試品溶液；取綠原酸對(duì)照品，加乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液及對(duì)照品溶液，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以醋酸丁酯∶甲酸∶水＝1∶10∶10的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴10％硫酸乙醇液，晾干后再噴3％三氯化鐵乙醇液，在110℃加熱至斑點(diǎn)清晰后，日光下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的紅色斑點(diǎn)。
檢查應(yīng)符合中國藥典附錄顆粒劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定；含量測(cè)定照中國藥典附錄高效液相色譜法測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇∶水∶磷酸＝60∶30∶2為流動(dòng)相；流速1.0ml/min；檢測(cè)波長(zhǎng)280nm；理論板數(shù)以黃芩苷峰計(jì)算不得低于2500；對(duì)照品溶液的制備取黃芩苷對(duì)照品，精密稱定，加30％乙醇溶液溶解制成每1ml含黃芩苷100μg的溶液，即得；供試品溶液的制備取本藥物，精密稱定，研細(xì)，取藥粉50mg，精密稱定，置100ml量瓶中，加30％乙醇溶液80ml，超聲提取10分鐘后，放冷，加30％乙醇溶液至刻度，搖勻，0.45μm微孔濾過，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本制劑含黃芩苷C21H18O11應(yīng)為標(biāo)示量的90.0～110.1％。
本發(fā)明的實(shí)施例7所述膠囊劑質(zhì)量控制方法可以包括
性狀內(nèi)容物為灰黃色至棕黃色顆粒；味甜、微苦；鑒別(1)取本制劑或其內(nèi)容物，精密稱定，研細(xì)，取藥粉約30mg，精密稱定，置100ml量瓶中，加70％乙醇約90ml，超聲提取20分鐘后，放冷，加70％乙醇至刻度，搖勻，0.45μm微孔濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液；另取黃芩苷對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國藥典附錄薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液4μl，對(duì)照品溶液2μl，分別點(diǎn)于同一聚酰胺薄膜上，以醋酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水＝5∶3∶1∶1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以1％三氯化鐵乙醇溶液；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的暗綠色斑點(diǎn)；(2)取本制劑或其內(nèi)容物，研細(xì)，加水10ml使溶散，加稀鹽酸1ml，加熱至約80℃，放冷，濾過，濾液移置分液漏斗中，加醋酸乙酯提取2次，每次10ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，作為供試品溶液；取梔子苷對(duì)照品，加乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取的供試品溶液及對(duì)照品溶液各3μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯∶甲酸∶水＝10∶2∶1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；檢查應(yīng)符合中國藥典附錄膠囊劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定；含量測(cè)定照中國藥典附錄高效液相色譜法測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇∶水∶磷酸＝47∶53∶0.2為流動(dòng)相；流速1.0ml/min；檢測(cè)波長(zhǎng)280nm；理論板數(shù)以黃芩苷峰計(jì)算不得低于2500；對(duì)照品溶液的制備取黃芩苷對(duì)照品10.0mg，精密稱定，置50ml量瓶中，加70％乙醇至刻度，搖勻，精密量取15ml，置50ml量瓶中，加70％乙醇至刻度，搖勻，制成每1ml含黃芩苷60.0μg的溶液，即得；供試品溶液的制備取本制劑或其內(nèi)容物，精密稱定，研細(xì)，取藥粉約30mg，精密稱定，置100ml量瓶中，加70％乙醇約90ml，超聲提取20分鐘后，放冷，加70％乙醇至刻度，搖勻，0.45μm微孔濾過，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本制劑含黃芩苷C21H18O11應(yīng)為標(biāo)示量的90.0～110.1％。
本發(fā)明的實(shí)施例8所述咀嚼片質(zhì)量控制方法可以包括
性狀為薄膜衣片，除去薄膜衣后顯灰黃色至棕黃色；味甜、微苦；檢查應(yīng)符合中國藥典附錄片劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定；含量測(cè)定照中國藥典附錄高效液相色譜法測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇∶水∶磷酸＝60∶30∶2為流動(dòng)相；流速1.0ml/min；檢測(cè)波長(zhǎng)280nm；理論板數(shù)以黃芩苷峰計(jì)算不得低于2500；對(duì)照品溶液的制備取黃芩苷對(duì)照品，精密稱定，加30％乙醇溶液溶解制成每1ml含黃芩苷100μg的溶液，即得；供試品溶液的制備取本藥物，精密稱定，研細(xì)，取藥粉50mg，精密稱定，置100ml量瓶中，加30％乙醇溶液80ml，超聲提取10分鐘后，放冷，加30％乙醇溶液至刻度，搖勻，0.45μm微孔濾過，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5祃，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本制劑含黃芩苷C21H18O11應(yīng)為標(biāo)示量的90.0～110.1％。
權(quán)利要求
1.一種茵梔黃制劑，其特征在于按照重量組份計(jì)算它主要由茵陳提取物10-50、梔子提取物5-40、黃芩苷60-150、金銀花提取物10-50及輔料制備而成。
2.按照權(quán)利要求1所述的茵梔黃制劑，其特征在于它主要由茵陳提取物30g、梔子提取物16g、黃芩苷100g、金銀花提取物20g及輔料制備而成。
3.按照權(quán)利要求1或2所述的茵梔黃制劑，其特征在于所用的茵陳提取物、梔子提取物、黃芩苷和金銀花提取物既可為市售，也可按下述方法制備茵陳提取物的制備取茵陳，加水煎煮1-5次，合并煎液，濾過，濾液濃縮至每1ml含生藥0.5-5g，加乙醇使含醇量達(dá)50-85％，冷藏10-60小時(shí)，濾過，濾液回收乙醇至每1ml含生藥3-8g，再加乙醇使含醇量達(dá)60-95％，冷藏10-60小時(shí)，濾過，濾液回收乙醇至每1ml含生藥7-12g，加2-10倍量水，冷藏20-100小時(shí)，濾過，濾液濃縮成稠膏狀，真空干燥，即得；梔子提取物的制備取梔子，粉碎成粗粉，加水煎煮1-5次，合并煎液，濾過，濾液濃縮至每1ml含生藥0.5-3g，加乙醇使含醇量達(dá)50-85％，冷藏10-60小時(shí)，濾過，濾液回收乙醇至每1ml含生藥2-6g，加乙醇使含醇量達(dá)70-90％，冷藏10-60小時(shí)，濾過，濾液回收乙醇至每1ml含生藥3-10g，加2-10倍量水，冷藏10-60小時(shí)，濾過，濾液濃縮成稠膏，真空干燥，即得；黃芩苷的制備取黃芩，粉碎成粗粉，加水煎煮1-5次，合并煎液，濾過，濾液加熱至80℃，加鹽酸調(diào)節(jié)pH1～3，靜置，濾過，沉淀物加水?dāng)嚢璩珊隣睿?0％氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH至4～7，濾過，濾液加等量乙醇，加熱至80℃，加鹽酸調(diào)節(jié)pH至1～3，使黃芩苷析出，濾過，用乙醇洗滌，干燥，即得；本品含黃芩苷C21H18O11不得少于90.0％；金銀花提取物的制備取金銀花，加水煎煮1-5次，合并煎液，濾過，濾液濃縮至每ml含生藥0.5-5g，冷至30～70℃，加20～40％氫氧化鈣溶液調(diào)節(jié)pH至10-14，濾過，沉淀物加乙醇，靜置，用50％硫酸調(diào)節(jié)pH值至1.0～5.0，濾過，濾液用40％氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至5.0～7.0，回收乙醇，濃縮至干，即得。
4.如權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述茵梔黃制劑的制備方法，其特征在于取茵陳提取物、梔子提取物、黃芩苷、金銀花提取物混合均勻后，加入甘露醇、蔗糖、淀粉、甜菊素、枸櫞酸以及硬脂酸鎂制備成茵梔黃咀嚼片。
5.按照權(quán)利要求4所述茵梔黃制劑的制備方法，其特征在于取茵陳提取物、梔子提取物、黃芩苷、金銀花提取物混合均勻后，按原料∶輔料＝0.5-3∶1-5的比例加入甘露醇∶蔗糖∶淀粉＝1-10∶0.5-5∶0.5-5的混合物，再加入1-10‰甜菊素和0.5-5‰枸櫞酸，混合均勻，50-95％乙醇潤(rùn)濕制軟材，制粒，干燥，整粒，細(xì)粉加入0.1-1％硬脂酸鎂，充分混合均勻，壓片，包薄膜衣制成咀嚼片。
6.一種茵梔黃制劑的質(zhì)量控制方法，所述制劑包括咀嚼片、膠囊劑和顆粒劑，其特征在于主要包括性狀、鑒別、檢查以及含量測(cè)定項(xiàng)目中的部分或全部；其中鑒別包括對(duì)制劑中黃芩苷、茵陳提取物、梔子提取物和金銀花提取物的薄層色譜鑒別；含量測(cè)定是對(duì)制劑中黃芩苷的含量測(cè)定。
7.按照權(quán)利要求6所述茵梔黃制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于黃芩苷的鑒別方法是以黃芩苷對(duì)照品為對(duì)照，以醋酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水＝1-10∶1-10∶0.5-5∶0.5-5為展開劑的薄層色譜法；茵陳提取物的鑒別方法是以茵陳對(duì)照藥材為對(duì)照，以60～90℃石油醚∶醋酸乙酯∶丙酮＝1-10∶1-10∶0.5-5為展開劑的薄層色譜法；梔子提取物的鑒別方法是以梔子苷對(duì)照品為對(duì)照，以醋酸乙酯∶甲酸∶水＝5-20∶0.5-5∶0.5-5為展開劑的薄層色譜法；金銀花提取物的鑒別方法是以綠原酸對(duì)照品為對(duì)照，以醋酸丁酯∶甲酸∶水＝1-20∶0.5-10∶0.5-10的上層溶液為展開劑的薄層色譜法。
8.按照權(quán)利要求6或7所述茵梔黃制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于具體的鑒別方法包括以下項(xiàng)目的部分或全部(1)取藥物，加入50-90％乙醇超聲提取10-100分鐘，放冷，濾過，作為供試品溶液；另取黃芩苷對(duì)照品，加甲醇溶解，作為對(duì)照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液及對(duì)照品溶液，分別點(diǎn)于同一聚酰胺薄膜上，以醋酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水＝1-10∶1-10∶0.5-5∶0.5-5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以1％三氯化鐵乙醇溶液；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的暗綠色斑點(diǎn)；(2)取藥物，加水使溶散，加入稀鹽酸，加熱至約80℃，放冷，濾過，濾液移置分液漏斗中，加醋酸乙酯提取1-5次，合并醋酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)右掖际谷芙?，作為供試品溶液；另取茵陳?duì)照藥材，加水煮沸3～30分鐘，放冷，濾過，濾液加入醋酸乙酯，同法制成對(duì)照藥材溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液、對(duì)照藥材溶液，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以60～90℃石油醚∶醋酸乙酯∶丙酮＝1-10∶1-10∶0.5-5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％氫氧化鉀乙醇溶液，置200-600nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的藍(lán)色熒光斑點(diǎn)；(3)取藥物，加水使溶散，加入稀鹽酸，加熱至約80℃，放冷，濾過，濾液移置分液漏斗中，加醋酸乙酯提取1-5次，合并醋酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)右掖际谷芙?，作為供試品溶液；取梔子苷對(duì)照品，加乙醇溶解，作為對(duì)照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液及對(duì)照品溶液，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯∶甲酸∶水＝5-20∶0.5-5∶0.5-5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(4)取藥物，加水使溶散，加入稀鹽酸，加熱至約80℃，放冷，濾過，濾液移置分液漏斗中，加醋酸乙酯提取1-5次，合并醋酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)右掖际谷芙?，作為供試品溶液；取綠原酸對(duì)照品，加乙醇溶解，作為對(duì)照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液及對(duì)照品溶液，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以醋酸丁酯∶甲酸∶水＝1-20∶0.5-10∶0.5-10的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴10％硫酸乙醇液，晾干后再噴3％三氯化鐵乙醇液，在110℃加熱至斑點(diǎn)清晰后，日光下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的紅色斑點(diǎn)。
9.按照權(quán)利要求6所述茵梔黃制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于黃芩苷的含量測(cè)定方法是以黃芩苷對(duì)照品為對(duì)照，以甲醇或乙腈∶水∶磷酸＝20-60∶30-70∶0.1-2為流動(dòng)相的高效液相色譜法。
10.按照權(quán)利要求6或9所述茵梔黃制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于具體的含量測(cè)定方法為照中國藥典高效液相色譜法測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇或乙腈∶水∶磷酸＝20-60∶30-70∶0.1-2為流動(dòng)相；流速1.0ml/min；檢測(cè)波長(zhǎng)280nm；理論板數(shù)以黃芩苷峰計(jì)算不得低于2500；對(duì)照品溶液的制備取黃芩苷對(duì)照品，精密稱定，加乙醇-水溶液溶解制成每1ml含黃芩苷20-100μg的溶液，即得；供試品溶液的制備取本藥物，精密稱定，研細(xì)，取藥粉10-50mg，精密稱定，置100ml量瓶中，加乙醇-水溶液80-90ml，超聲提取10-30分鐘后，放冷，加乙醇-水溶液至刻度，搖勻，0.45μm微孔濾過，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5-25μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本制劑含黃芩苷C21H18O11應(yīng)為標(biāo)示量的90.0～110.1％。
11.按照權(quán)利要求6所述茵梔黃制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于所述質(zhì)量控制方法包括性狀對(duì)于咀嚼片為薄膜衣片，除去薄膜衣后顯灰黃色至棕黃色；味甜、微苦；對(duì)于膠囊劑內(nèi)容物為灰黃色至棕黃色顆粒；味甜、微苦；對(duì)于顆粒劑為灰黃色至棕黃色顆粒；味甜、微苦；鑒別(1)取藥物，加入50-90％乙醇超聲提取10-100分鐘，放冷，濾過，作為供試品溶液；另取黃芩苷對(duì)照品，加甲醇溶解，作為對(duì)照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液及對(duì)照品溶液，分別點(diǎn)于同一聚酰胺薄膜上，以醋酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水＝1-10∶1-10∶0.5-5∶0.5-5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以1％三氯化鐵乙醇溶液；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的暗綠色斑點(diǎn)；(2)取藥物，加水使溶散，加入稀鹽酸，加熱至約80℃，放冷，濾過，濾液移置分液漏斗中，加醋酸乙酯提取1-5次，合并醋酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)右掖际谷芙?，作為供試品溶液；另取茵陳?duì)照藥材，加水煮沸3～30分鐘，放冷，濾過，濾液加入醋酸乙酯，同法制成對(duì)照藥材溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液、對(duì)照藥材溶液，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以60～90℃石油醚∶醋酸乙酯∶丙酮＝1-10∶1-10∶0.5-5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％氫氧化鉀乙醇溶液，置200-600nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的藍(lán)色熒光斑點(diǎn)；(3)取藥物，加水使溶散，加入稀鹽酸，加熱至約80℃，放冷，濾過，濾液移置分液漏斗中，加醋酸乙酯提取1-5次，合并醋酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)右掖际谷芙?，作為供試品溶液；取梔子苷對(duì)照品，加乙醇溶解，作為對(duì)照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液及對(duì)照品溶液，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯∶甲酸∶水＝5-20∶0.5-5∶0.5-5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(4)取藥物，加水使溶散，加入稀鹽酸，加熱至約80℃，放冷，濾過，濾液移置分液漏斗中，加醋酸乙酯提取1-5次，合并醋酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)右掖际谷芙猓鳛楣┰嚻啡芤?；取綠原酸對(duì)照品，加乙醇溶解，作為對(duì)照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液及對(duì)照品溶液，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以醋酸丁酯∶甲酸∶水＝1-20∶0.5-10∶0.5-10的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴10％硫酸乙醇液，晾干后再噴3％三氯化鐵乙醇液，在110℃加熱至斑點(diǎn)清晰后，日光下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的紅色斑點(diǎn)；檢查應(yīng)符合中國藥典附錄各制劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定；藥典高效液相色譜法測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇或乙腈∶水∶磷酸＝20-60∶30-70∶0.1-2為流動(dòng)相；流速1.0ml/min；檢測(cè)波長(zhǎng)280nm；理論板數(shù)以黃芩苷峰計(jì)算不得低于2500；對(duì)照品溶液的制備取黃芩苷對(duì)照品，精密稱定，加乙醇-水溶液溶解制成每1ml含黃芩苷20-100μg的溶液，即得；供試品溶液的制備取本藥物，精密稱定，研細(xì)，取藥粉10-50mg，精密稱定，置100ml量瓶中，加乙醇-水溶液80-90ml，超聲提取10-30分鐘后，放冷，加乙醇-水溶液至刻度，搖勻，0.45μm微孔濾過，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5-25μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本制劑含黃芩苷C21H18O11應(yīng)為標(biāo)示量的90.0～110.1％。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種茵梔黃制劑及制備方法和質(zhì)量控制方法，它是用茵陳提取物、梔子提取物、黃芩苷、金銀花提取物和適量甘露醇、蔗糖、淀粉的混合物以及甜菊素、枸櫞酸、硬脂酸鎂制備成咀嚼片；與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明所提供的咀嚼片分散狀態(tài)佳、崩解時(shí)間短、藥物溶出迅速；吸收快、生物利用度高；口感良好，服用方便，尤其適合老人及吞服困難的患者服用；本發(fā)明質(zhì)量控制方法精密度高，重現(xiàn)性好，回收率高，提高了茵梔黃制劑的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，可有效確保該制劑的臨床療效。
文檔編號(hào)A61P1/16GK1895411SQ20061020057
公開日2007年1月17日 申請(qǐng)日期2006年6月16日 優(yōu)先權(quán)日2006年6月16日
發(fā)明者葉湘武, 江帆, 張羽斌, 潘婷, 楊坤, 閆文超 申請(qǐng)人:貴州益佰制藥股份有限公司