專利名稱：取代吡咯、含有它們的組合物、制備方法與用途的制作方法
專利說明取代吡咯、含有它們的組合物、制備方法與用途 本發(fā)明涉及特別新的化學(xué)化合物，尤其是新取代吡咯，含有它們的組合物以及它們作為藥品的用途。
更特別地，本發(fā)明涉及新的特定吡咯，它們通過調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)活性，尤其激酶活性而具有抗癌活性。
至今，化療中使用的大多數(shù)商品化合物的主要問題是副作用與病人的耐受性。只要使用的藥品選擇性地對癌細胞(健康細胞除外)起作用，就可以限制這些副作用。限制化療不良作用的其中一種解決辦法因此可能在于使用對代謝作用途徑或這些途徑構(gòu)成元素起作用的藥品，這些元素大多數(shù)在癌細胞中被表達，而在健康細胞中不會或不太會被表達。
蛋白激酶是一組酶，它們催化蛋白質(zhì)特定殘基中的羥基磷酸化，蛋白質(zhì)例如是酪氨酸、絲氨酸或蘇氨酸殘基。這樣一些磷酸化可能大大地改變蛋白質(zhì)的功能；因此，蛋白激酶在調(diào)節(jié)各種各樣的細胞過程，其中特別包括新陳代謝、細胞增殖、細胞分化、細胞遷移或細胞生存中起著重要的作用。在涉及蛋白激酶活性的各種細胞功能中，一些過程成為治療癌疾病和其它疾病的有吸引力的靶。
因此，本發(fā)明的其中一個目的是提供一些具有抗癌活性的組合物，它尤其對激酶起作用。在尋求活性調(diào)變的激酶中，F(xiàn)AK、KDR和Tie2是優(yōu)選的。
這些產(chǎn)品符合下式(I)
式(I) 式中 1)A和Ar獨自選自芳基、雜芳基、雜環(huán)基、取代芳基、取代雜芳基、取代雜環(huán)基、環(huán)烷基、取代環(huán)烷基； 2)L選自NH，CO-NH，NH-CO，NH-SO2，SO2NH，NH-CH2，CH2-NH，CH2-CO-NH，NH-CO-CH2，NH-CH2-CO，CO-CH2-NH，NH-CO-NH，NH-CS-NH，NH-CO-O，O-CO-NH，CH2-NH-CO-NH。NH-CO-NH-CH2，NH-CO-CH2-CO-NH； 3)Ra選自H、烷基和環(huán)烷基； 4)R1選自H、R、COR、SO2R，式中R選自H、OR”4、NR”5R”6、(C1-C6)烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、取代雜環(huán)基、芳基、取代芳基、雜芳基、取代雜芳基，式中R”4選自H、苯基、烷基和式中R”5和R”6獨自選自H、ROR”4、(C1-C6)烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、取代雜環(huán)基、芳基、取代芳基、雜芳基、取代雜芳基或R”5和R”6彼此連接構(gòu)成5-至8-鏈節(jié)(cha

nons)飽和環(huán)，它含有0-3個選自O(shè)、S和N的雜原子； 5)R2和R5獨自選自H、鹵素、R’2，CN，O(R’2)，OC(O)(R’2)，OC(O)N(R’2)(R’3)，OS(O2)(R’2)，N(R’2)(R’3)，N＝C(R’2)(R’3)，N(R’2)C(O)(R’3)，N(R’2)C(O)O(R’3)，N(R’4)C(O)N(R’2)(R’3)，N(R’4)C(S)N(R’2)(R’3)，N(R’2)S(O2)(R’3)，C(O)(R’2)，C(O)O(R’2)，C(O)N(R’2)(R’3)，C(＝N(R’3))(R’2)，C(＝N(OR’3))(R’2)，S(R’2)，S(O)(R’2)，S(O2)(R’2)，S(O2)O(R’2)，S(O2)N(R’2)(R’3)；式中每個R’2、R’3、R’4獨自選自H、烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、取代烷基、取代烯基、取代炔基、取代芳基、取代雜芳基、取代環(huán)烷基、取代雜環(huán)基；式中R’2和R’3每個都不同于H和同時在R2或在R3上時，它們彼此連接構(gòu)成環(huán)，它含有0-3個選自O(shè)、S和N的雜原子。
式(I)的優(yōu)選產(chǎn)品相應(yīng)于下面的定義
式(I) 式中 1)A和Ar是如前面所定義的； 2)R1是H； 3)L選自NHCO、NH-CO-NH、NH、NHSO2、NHCO-CH2-CONH； 4)Ra選自H和甲基； 5)R2和R5是如前面所定義的。
在式(I)產(chǎn)品中，Ar-L-A有利地是
式中X1、X2、X3和X4每個獨自選自N和C-R’5，式中R’5具有如R2相同的定義。
取代基R’5選自H、F、Cl、甲基、NH2、OMe、OCF3，而CONH2是優(yōu)選的。
優(yōu)選取代基R2和R5獨自選自H、鹵素、R’2，OR’2，NHR’2，NHCOR’2，NHCONHR’2，NHSO2R’2。R2和R5優(yōu)選地是H。
優(yōu)選的取代基Ra是H。
優(yōu)選的取代基L-A有利地選自NH-CO-NH-A和NH-SO2-A。
L-A是NHCONH-A時，得到特別有效的組合L-A。
本發(fā)明的產(chǎn)品優(yōu)選地有取代基A，它選自苯基、吡啶基、嘧啶基、噻吩基、呋喃基、吡咯基、唑基、噻唑基、異唑基、異噻唑基、吡唑基、咪唑基、吲哚基、吲唑基、苯并咪唑基、苯并唑基和苯并噻唑唑；任選地取代的。
更優(yōu)選地，A選自苯基、吡唑基和異唑基；任選地取代的。
該取代基A非常有利地被第一個取代基取代，該取代基選自烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基、O-烷基、O-芳基、O-雜芳基、S-烷基、S-芳基、S-雜芳基，每個基任選地被選自(C1-C3)烷基、鹵素、O-(C1-C3)烷基的取代基取代。
取代基A優(yōu)選地被第二個取代基取代，該取代基選自F、Cl、Br、I、OH、SH、SO3M、COOM、CN、NO2、CON(R8)(R9)、N(R8)CO(R9)、(C1-C3)烷基-OH、(C1-C3)烷基-N(R8)(R9)、(C1-C3)烷基-(R10)、(C1-C3)烷基-COOH、N(R8)(R9)；式中R8和R9獨自選自H、(C1-C3)烷基、鹵代(C1-C3)烷基、(C1-C3)烷基OH、(C1-C3)烷基NH2、(C1-C3)烷基COOM、(C1-C3)烷基SO3M；式中R8和R9同時不是H時，它們連接構(gòu)成5-至7-鏈節(jié)環(huán)，它含有0-3個雜原子；式中M是H或選自Li、Na和K的堿金屬陽離子；和式中R10是H或含有2-7個碳原子和1-3個選自N、O和S的雜原子的任選取代非芳族雜環(huán)。
特別優(yōu)選的取代基A選自苯基、吡唑基和異唑基；所述的取代基A可以被鹵素，(C1-C4)烷基，鹵代(C1-C3)烷基，O-(C1-C4)烷基，S-(C1-C4)烷基，鹵代O-(C1-C4)烷基和鹵代S-(C1-C4)烷基取代。A被雙取代時，A的兩個取代基可以構(gòu)成5--7-鏈節(jié)環(huán)，它含有0-3個雜原子。
實施例1-41的產(chǎn)物是本發(fā)明的主題。
本發(fā)明的產(chǎn)品可以呈下述形式 1)非手性的，或 2)外消旋的，或 3)富含立體異構(gòu)體，或 4)富含對映異構(gòu)體； 并且可以任選地成鹽。
本發(fā)明的產(chǎn)品可以用于生產(chǎn)的藥品，該藥品可用于治療病理學(xué)狀態(tài)，特別是癌。
本發(fā)明還涉及治療組合物，該組合物含有本發(fā)明的產(chǎn)品與并用的根據(jù)選擇給藥方式在藥學(xué)上可接受的賦形劑。該藥物組合物可以是固體、液體或脂質(zhì)體劑型。
在固體組合物中，可以列舉粉劑、明膠膠囊和片劑。在口服劑型中，還可以包括防止胃的酸性介質(zhì)的固體劑型。該固體劑型使用的載體主要由無機載體(例如磷酸鹽和碳酸鹽)或有機載體(例如乳糖、纖維素、淀粉或聚合物)組成。該液體劑型是由溶液、懸浮液或分散體組成。它們含有水、有機溶劑(乙醇、NMP等)或表面活性劑和溶劑或絡(luò)合劑和溶劑的混合物作為分散載體。
該液體劑型優(yōu)選地應(yīng)是可注射的，因此具有這樣一種用途的可接受配方。
可接受注射的給藥途徑包括靜脈內(nèi)、腹膜內(nèi)、肌肉內(nèi)和皮下途徑，靜脈內(nèi)途徑通常是優(yōu)選的。
本發(fā)明化合物的給藥劑量應(yīng)由從業(yè)者根據(jù)病人給藥途徑和病人狀況進行調(diào)整。
本發(fā)明化合物可以單獨給藥或與其它抗癌劑混合給藥。在可能的組合中可以列舉 ·烷基化劑，特別是環(huán)磷酰胺、美法侖、異環(huán)磷酰胺、苯丁酸氮芥、白消安、塞替派、潑尼氮芥、卡氮芥、洛莫司汀、司莫司汀，鏈脲佐菌素(steptozotocin)，decarbazine，替莫唑胺，丙卡巴肼和六甲基三聚氰胺 ·鉑衍生物，例如具體地順鉑、卡波鉑或奧克賽鉑 ·抗生素，例如具體地博來霉素、絲裂霉素，更生霉素 ·抗微管劑，例如具體地長春堿、長春新堿，長春花堿酰胺，長春瑞賓，紫杉類化合物(紫杉醇和多西紫杉醇) ·蒽環(huán)類，例如具體地阿霉素，正定霉素，伊達比星，表阿霉素，米托蒽醌，iosoxantrone ·第I和II組拓撲異構(gòu)酶抑制劑，例如足葉乙甙，替尼泊甙，安吖啶，伊立替康，拓撲替康和tomudex ·氟嘧啶，例如5-氟尿嘧啶，UFT，氟尿苷 ·胞苷類似物，例如5-氮雜胞苷，阿糖胞苷，吉西他濱，6-mercaptomurine，6-硫鳥嘌呤 ·腺苷類似物，例如pentostatin，阿糖胞苷或磷酸氟達拉濱 ·氨甲蝶呤和亞葉酸 ·酶和各種化合物，例如L-天門冬酰胺酶，羥基脲，反-視黃酸，suramine，右雷佐生，氨磷汀，herceptine和雌性或雄性激素 ·抗血管劑，例如combretastatin衍生物，像CA4P，charlcones或秋水仙素，像ZD6126及其前藥。
將輻射治療與本發(fā)明的化合物并用也是可能的。這些治療可以同時、相繼或順序給藥。這種治療應(yīng)由從業(yè)者根據(jù)待治療病人進行調(diào)整。
本發(fā)明的產(chǎn)品可用作激酶催化反應(yīng)的抑制劑。FAK，KDR和Tie2是本發(fā)明產(chǎn)品應(yīng)特別用作抑制劑的激酶。
選擇這些激酶的理由如下 FAK FAK是細胞質(zhì)酪氨酸激酶，它在轉(zhuǎn)錄由整合素(細胞粘附異源二聚體受體組)發(fā)出的信號中起到重要作用。FAK和整合素共定位在稱之粘著斑的膜周部結(jié)構(gòu)中。已證明在許多細胞型中，F(xiàn)AK及其磷酸化對酪氨酸殘基的激活作用，特別是其自體磷酸化對酪氨酸397的激活作用，是取決于整合素與其細胞外配位體的鍵合，并因此細胞粘附時被誘發(fā)[Kornberg L，等人，《J.Biol.Chem.》267(33)23439-442.(1992)]。FAK酪氨酸397的自體磷酸化通過其SH2域占據(jù)另外酪氨酸激酶，Src，的鍵合位點[Schaller等人《Mol.Cell.Biol.》，14；1680-1688，1994；Xing等人《Mol.Cell.Biol.》，5；413-421，1994]。然后，Src可以使酪氨酸925上的FAK磷酸化，因此募集接頭蛋白Grb2，并在某些細胞中誘發(fā)激活在控制細胞增殖中涉及的ras和MAP激酶路徑[Schlaepfer等人《Nature》；372786-791.1994；Schlaepfer等人《Prog.Biophy.Mol.Biol.》，71435-478.1999；Schlaepfer和Hunter，《J.Biol.Chem.》，27213189-13195，1997]。激活FAK也可能誘發(fā)jun NH2-末端激酶(JNK)，使路徑發(fā)信號，導(dǎo)致細胞向該細胞周期的G1段發(fā)展[Oktay等人，《J.Cell.Biol.》，145；1461-1469，1999]。磷脂酰環(huán)己六醇-3-OH激酶(PI3-激酶)也與酪氨酸397的FAK結(jié)合，這種相互作用對于激活PI3-激酶可能是必要的[Chen和Guan，《Proc.Nat.Acad.Sci.USA》，9110148-10152，1994；Ling等人《J.Cell.Biochem.》，73；533-544，1999]。FAK/Src配合物使各種基質(zhì)磷酸化，例如纖維原細胞中的paxillin和p130CAS[Vuori等人《Mol.Cell.Biol.》，162606-2613，1996]。
許多研究結(jié)果支持FAK的抑制劑可以用于治療癌的這種假設(shè)。一些研究認為，F(xiàn)AK在細胞增殖和/或體外存活中可能起到主要作用。例如，在CHO細胞中，一些作者已證明，p125FAK過表達導(dǎo)致加速G1向S的轉(zhuǎn)變，因此認為p125FAK促進細胞增殖[Zhao J.-H等人《J.CellBiol.》，1431997-2008，1998]。其他作者已證明，使用FAK的反義寡核苷酸處理腫瘤細胞失去其粘附作用，進入細胞凋亡(Xu等人，《CellGrowth Differ.》，4413-418，1996)。也已證明，F(xiàn)AK促進體外細胞的遷移。因此，缺乏表達FAK的成纖維細胞(FAK的敲除小鼠)具有圓形態(tài)，細胞遷移對趨藥性的信號反映的缺乏和這些缺陷都被FAK再表達抑制[DJ.Sieg等人，《J.Cell Science.》，1122677-91，1999]。FAK的C-末端域過表達(FRNK)防礙粘附細胞伸縮，并降低體外細胞遷移[Richardson A.和Parsons J.T.，《Nature》，380538-540，1996]。在CHO、COS細胞中或在人的星形細胞瘤細胞中FAK過表達有利于這些細胞的遷移。在許多體外細胞型中，F(xiàn)AK在促進細胞增殖和遷移的復(fù)雜情況暗示了FAK在瘤形成過程中的可能作用。近來研究確實證明了誘發(fā)FAK在人的星形細胞瘤細胞中表達后使體外腫瘤細胞的增殖增加[Cary L.A.等人，《J.Cell Sci.》，1091787-94，1996；Wang D等人，《J.Cell Sci.》，1134221-4230，2000]。此外，人的活組織檢查的免疫組織化學(xué)研究已證明，F(xiàn)AK已在前列腺、乳房、甲狀腺、結(jié)腸、黑色素瘤、腦和肺癌中被過表達，F(xiàn)AK的表達水平直接與具有最侵襲性表型的腫瘤相關(guān)[Weiner TM，等人，《Lancet》，342(8878)1024-1025，1993；Owens等人，《Cancer Research》，552752-2755，1995；Maung K.等人，《Oncogene》，186824-6828，1999；Wang D等人，《J.Cell Sci.》，1134221-4230，2000]。
KDR KDR(激酶插入域受體)也稱之VEGF-R2(血管內(nèi)皮生長因子受體2)，它只是在內(nèi)皮細胞中表達。這種受體與血管生長因子VEGF結(jié)合，因此通過激活其細胞內(nèi)的激酶域用作轉(zhuǎn)導(dǎo)信號的介質(zhì)。VEGF-R2激酶活性的直接抑制作用能夠降少在外源性VEGF(血管內(nèi)皮生長因子)的存在下的血管生成現(xiàn)象(Strawn等人，《癌研究》，1996，第56卷，第3540-3545頁)。特別借助VEGF-R2突變體證明了這個過程(Millauer等人，《癌研究》，1996，第56卷，第1615-1620頁)。除與VEGF的血管生成活性相關(guān)之外，該VEGF-R2受體在成人中似乎沒有任何其它的功能。因此，VEGF-R2激酶活性的選擇性抑制劑應(yīng)該證明毒性只是非常小。
除在該動態(tài)血管生成過程中的這個中心作用外，一些新結(jié)果暗示，VEGF表達有助于腫瘤細胞在化學(xué)-和放射治療后的存活，因此著重指出KDR抑制劑與其它劑的可能協(xié)同作用(Lee等人《癌研究》，2000，第60卷，第5565-5570頁)。
Tie2 Tie-2(TEK)是酪氨酸激酶受體家族的一員，內(nèi)皮細胞的特定一員。Tie2是具有酪氨酸激酶活性的第一受體，人們知道它同時是激動藥(血管生成素1或Ang1)，它刺激該受體的自體磷酸化和細胞信號[S.Davis等人(1996)《細胞》87，1161-1169]，也是拮抗劑(血管生成素2或Ang2)[P.C.Maisonpierre等人(1997)《科學(xué)》，277，55-60]。血管生成素1在新生淋巴管的生成(neoangiogenesis)最后階段可以與VEGF起協(xié)同作用[《AsaharaT.Circ.Res.》，(1998)，233-240]。敲除實驗和Tie2或Ang1表達的轉(zhuǎn)基因操作得到有血管生成缺陷的動物[D.J.Dumont等人(1994)，《Genes Dev.》，8，1897-1909和C.Suri(1996)《Cell》，87，1171-1180]。Ang1與其受體的連接導(dǎo)致Tie2激酶域的自體磷酸化，這對于新生血管以及對于募集和血管與周細胞和平滑肌細胞的相互作用是很重要的；這些現(xiàn)象有助于新生成血管的成熟和穩(wěn)定[P.C.Maisonpierre等人(1997)，《科學(xué)》，277，55-60]。Lin等人，(1997)，《J.Clin。Invest.》，100，82072-2078和Lin P.(1998)，PNAS 95，8829-8834，已表明在乳房腫瘤xenographs和黑色素瘤的模型中，腺病毒感染或注射Tie-2(Tek)的細胞內(nèi)域時抑制腫瘤生長和血管生成與肺轉(zhuǎn)移瘤。
Tie2的抑制劑可以用于不適當(dāng)?shù)爻霈F(xiàn)新生血管的情況(即在糖尿病視網(wǎng)膜病變、慢性炎癥、牛皮癬、Kaposi’s肉瘤、因黃斑變性的慢性新生血管，類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、嬰兒血管瘤和癌)。
定義 術(shù)語“鹵素”系指選自F、Cl、Br和I的元素。
術(shù)語“烷基”系指有1-12個碳原子的直鏈或支鏈飽和烴取代基。甲基，乙基，丙基，1-甲基乙基，丁基，1-甲基丙基，2-甲基丙基，1，1-二甲基乙基，戊基，1-甲基丁基，2-甲基丁基，3-甲基丁基，1，1-二甲基丙基，1，2-二甲基丙基，2，2-二甲基丙基，1-乙基丙基，己基，1-甲基戊基，2-甲基戊基，1-乙基丁基，2-乙基丁基，3，3-二甲基丁基，庚基，1-乙基戊基，辛基，壬基，癸基，十一烷基和十二烷基取代基是烷基取代基的實例。
術(shù)語“烯基”系指直鏈或支鏈烴取代基，它有一個或多個不飽和性與2-12個碳原子。乙烯基、1-甲基乙烯基、丙-1-烯基、丙-2-烯基、Z-1-甲基丙-1-烯基、E-1-甲基丙-1-烯基、Z-1，2-二甲基-丙-1-烯基、E-1，2-二甲基丙-1-烯基、丁-1，3-二烯基、1-methylidenyl-丙-2-烯基、Z-2-甲基丁-1，3-二烯基、E-2-甲基丁-1，3-二烯基、2-甲基-1-methylidenyl丙-2-烯基、十一碳-1-烯基和十一碳-10-烯基取代基是烯基取代基實例。
術(shù)語“炔基”系指直鏈或支鏈烴取代基，它有至少兩個由一對相鄰碳原子所帶的不飽和性與2-12個碳原子。乙炔基、丙-1-炔基、丙-2-炔基；和丁-1-炔基取代基是炔基取代基的實例。
術(shù)語“芳基”系指單-或多環(huán)芳族取代基，它有6-14個碳原子。苯基、萘-1-基、萘-2-基、蒽-9-基、1，2，3，4-四氫萘-5-基和1，2，3，4-四氫萘-6-基取代基芳基取代基的實例。
術(shù)語“雜芳基”系指單-或多環(huán)雜芳族取代基，它有1-13個碳原子和1-4個雜原子。吡咯-1-基、吡咯-2-基、吡咯-3-基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、唑基、噻唑基、異唑基、異噻唑基、1，2，4-三唑基、二唑基、噻二唑基、四唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、1，3，5-三嗪基、吲哚基、苯并[b]呋喃基、苯并[b]噻吩基、吲唑基、苯并咪唑基、氮雜吲哚基、喹啉基、異喹啉基、咔唑基和吖啶基取代基是雜芳基取代基的實例。
術(shù)語“雜原子”這里系指不是碳的至少二價原子。N、O、S和Se是雜原子的實例。
術(shù)語“環(huán)烷基”系指飽和或部分未飽和環(huán)烴取代基，它有3-12個碳原子。環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)戊烯基、環(huán)戊二烯基、環(huán)己基、環(huán)己烯基、環(huán)庚基、雙環(huán)[2.2.1]庚基、環(huán)辛基、雙環(huán)[2.2.2]辛基、金剛烷基和全氫萘基取代基是環(huán)烷基取代基的實例。
術(shù)語“雜環(huán)基”系指飽和或部分未飽和環(huán)烴取代基，它有1-13個碳原子和1-4個雜原子。優(yōu)選地，該飽和或部分未飽和環(huán)烴取代基應(yīng)是單環(huán)的，應(yīng)含有4或5個碳原子和1-3個雜原子。
術(shù)語“取代”系指一個或多個不是H的取代基，例如鹵素、烷基、芳基、雜芳基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、烯基、炔基、OH、O-烷基、O-烯基、O-芳基、O-雜芳基、NH2、NH-烷基、NH-芳基、NH-雜芳基、N-烷基-烷基’、SH、S-烷基、S-芳基、S(O2)H、S(O2)-烷基、S(O2)-芳基、SO3H、SO3-烷基、SO3-芳基、CHO、C(O)-烷基、C(O)-芳基、C(O)OH、C(O)O-烷基、C(O)O-芳基、OC(O)-烷基、OC(O)-芳基、C(O)NH2、C(O)NH-烷基、C(O)NH-芳基、NHCHO、NHC(O)-烷基、NHC(O)-芳基、NH-環(huán)烷基、NH-雜環(huán)基。
本發(fā)明的目的還是式(I)產(chǎn)品的制備方法。
·本發(fā)明的產(chǎn)品可以采用通常的有機化學(xué)方法制備得到。
·下面流程1、2、3和4是說明在涉及該取代吡咯的實施例的制備時所采用方法。對于這一點，它們不可能對有關(guān)制備要求保護化合物方法的本發(fā)明范圍構(gòu)成限制。
流程1
流程2
流程3
流程4
本技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員應(yīng)該理解，為了實施上述本發(fā)明的方法，可能需要引入保護氨基、羧基和醇官能團的基團，以避免副反應(yīng)。這些基團是那些允許除去而不影響該分子其余部分的基團。作為保護氨基官能團的基團實例，可以列舉氨基甲酸叔-丁酯，它可以用三氟乙酸或碘三甲基硅烷再生，乙?；?，它可以在酸性介質(zhì)(例如鹽酸)中進行再生。作為保護羧基官能團的基團，可以列舉酯(例如甲氧基甲酯、芐基酯)。作為保護醇官能團的基團，可以列舉酯(例如苯甲酰基酯)，它可以在酸性介質(zhì)中或采用催化再生方法進行再生。T.W.GREENE等人，在《有機合成中的保護基團》(Protective Groups in Organic Synthesis)，第三版，1999年，Wiley-Interscience中描述了可以使用的其它保護基團。
分離式(I)化合物，并且可以采用通常已知的方法，例如采用結(jié)晶、色譜或提取進行純化。
式(I)化合物的對映異構(gòu)體和非立體異構(gòu)體也是本發(fā)明的一部分。
在溶劑，例如像醇、酮、醚或含氯溶劑的有機溶劑中，通過這樣一種酸的作用，可以任選地將含有堿性殘基的式(I)化合物轉(zhuǎn)化成與無機或有機酸的加成鹽。
根據(jù)本身已知的方法，可以任選地將含有酸殘基的式(I)化合物轉(zhuǎn)化成金屬鹽或與含氮堿的加成鹽。在溶劑中，通過金屬(例如堿金屬或堿土金屬)堿、氨、胺或胺鹽與式(I)化合物的作用可以得到這些鹽。所生成的鹽采用通常的方法進行分離。
這些鹽也是本發(fā)明的一部分。
本發(fā)明的產(chǎn)品有至少一個游離堿性官能團時，通過所述產(chǎn)品與無機或有機酸的反應(yīng)可以制備在藥學(xué)上可接受的鹽。在藥學(xué)上可接受的鹽包括氯化物，硝酸鹽，硫酸鹽，硫酸氫鹽，焦硫酸鹽，酸式硫酸鹽，亞硫酸鹽、亞硫酸氫鹽，磷酸鹽、磷酸一氫鹽，磷酸二氫鹽，偏磷酸鹽，焦磷酸鹽，乙酸鹽、丙酸鹽、丙烯酸鹽、4-羥基丁酸鹽、辛酸鹽，己酸鹽、癸酸鹽、草酸鹽、丙二酸鹽、琥珀酸鹽、戊二酸鹽、己二酸鹽、庚二酸鹽，馬來酸鹽、富馬酸鹽、檸檬酸鹽、酒石酸鹽、乳酸鹽、苯基乙酸鹽、扁桃酸鹽、癸二酸鹽、辛二酸鹽、苯甲酸鹽、鄰苯二甲酸鹽、甲烷磺酸鹽、p-甲苯磺酸鹽、丙烷磺酸鹽、二甲苯磺酸鹽、水楊酸鹽、肉桂酸鹽、谷氨酸鹽、天冬氨酸鹽，葡糖醛酸鹽，半乳糖醛酸鹽。
本發(fā)明的產(chǎn)品有至少一個游離酸性官能團時，通過所述產(chǎn)品與無機或有機堿的反應(yīng)可以制備在藥學(xué)上可接受的鹽。在藥學(xué)上可接受的堿包括堿金屬或堿土金屬陽離子氫氧化物，例如Li，Na，K，Mg，Ca，含有堿性胺的化合物，例如氨、精氨酸，組氨酸，哌啶，嗎啉，哌嗪，三乙胺。
還通過說明本發(fā)明的下述實施例描述了本發(fā)明。
采用聯(lián)用的Micromass LCT model儀器與HP 1100儀器進行LC/MS分析。使用波長范圍200-600nm的HP G1315A二極管陣列檢測器和光散射檢測器Sedex 65測量產(chǎn)品的豐度。在180-800采集質(zhì)譜。這種數(shù)據(jù)采用Micromass MassLynx軟件進行分析。使用Hypersil BDS C18，3μm柱(50×4.6mm)進行分離，使用在含有0.05％(v/v)TFA的水中5-90％含有0.05％(v/v)三氟乙酸(TFA)的乙腈線性梯度，以流速1ml/min洗脫3.5分鐘。包括柱再平衡時間的總分析時間是7分鐘。
使用PlatformII設(shè)備(Micromass)以電噴射(ES+)方式進行MS譜分析。描述了所觀察的主要離子。
采用毛細管法，使用Mettler FP62儀器，在30℃-300℃范圍，以2℃/分升溫測量熔點。
采用LC/MS純化 使用Waters FractionsLynx系統(tǒng)采用LC/MS可以純化該產(chǎn)物，該系統(tǒng)由Waters model 600梯度泵、Waters model515再生泵、Waters ReagentManager稀釋泵、Waters model 2700自動注射器、兩個Rheodyne modelLabPro閥、Waters model 996二極管陣列檢測器、Waters model ZMD質(zhì)譜儀和Gilson model 204餾分收集器組成。該系統(tǒng)用Waters FractionLynx軟件控制。使用兩個Waters Symmetry柱(C18，5μm，19×50mm，參考目錄186000210)交替進行這種分離，一個柱處在使用含有0.07％(v/v)三氟乙酸的水/乙腈95/5(v/v)混合物的再生過程，而另一個柱處于分離過程。使用在含有0.07％(v/v)三氟乙酸的水中，5-95％含有0.07％(v/v)三氟乙酸的乙腈線性梯度以流速10ml/min進行這些柱的洗脫。在分離柱出口，使用LC Packing Accurate分離出千分之一的流出物，用甲醇以流速0.5ml/min進行稀釋并送到這些檢測器，其中75％送到二極管陣列檢測器，余下25％送到質(zhì)譜儀。余下的流出物(999/1000)送到餾分收集器，只要采用FractionLynx軟件未檢測到期望產(chǎn)物質(zhì)量，就從其收集器中除去其物流。把期望的分子式提供給FractionLynx軟件，檢測的質(zhì)量信號相應(yīng)于離子[M+H]+和/或[M+Na]+時，該軟件就觸發(fā)收集其產(chǎn)物。在某些情況下，取決于分析LC/MS結(jié)果，檢測出相應(yīng)于[M+2H]++的強離子時，把相應(yīng)于計算分子量一半的值(MW/2)也提供給FractionLynx軟件。在這些條件下，檢測到該離子[M+2H]++和/或[M+Na+H]++質(zhì)量信號時，也觸發(fā)這種收集。這些產(chǎn)物收集在涂焦油的玻璃管內(nèi)。收集后，使用SavantAES 2000或Genevac HT8離心蒸發(fā)器蒸去這些溶劑，蒸去溶劑后的管經(jīng)稱重可確定該產(chǎn)物的質(zhì)量。
EI/CI分析；直接加入(DCI＝樣品在細絲上的沉積) Finnigan SSQ7000質(zhì)譜儀；質(zhì)量范圍m/z＝29-900；電子能量70eV；源溫度70℃；反應(yīng)氣體CI氨；EI＝電子碰撞電離；CI＝化學(xué)電離。
電噴霧分析(正電噴霧ES+；負電噴霧ES-) LC-MS-DAD-ELSD聯(lián)用 方法A MSWaters-Micromass Platform II；LC；Agilent HP 1100；HypersilGOLD Thermo C18柱；3×50mm，3μm；洗脫劑水(有0.1％甲酸)+乙腈梯度，7分鐘；流速＝0.8ml/min；UV；DAD(λ＝200-400nm)。
方法B MSWaters-Micromass QTOF-2；LCAgilent HP 1100；HypersilGOLD Thermo C18柱；3×50mm，3μm；洗脫劑水(有0.1％甲酸)+乙腈梯度，7分鐘；流速＝0.9ml/min；UV；DAD(λ＝200-400nm)。
方法C MSWaters-Micromass ZQ；LCAgilent HP 1100；XBRIDGE WatersC18柱；3×50mm，2.5μm；洗脫劑水(有0.1％甲酸)+乙腈梯度，7分鐘；流速＝1.1ml/min；UV；DAD(λ＝254nm)。
1H NMR譜，400MHz，使用BRUKER AVANCE DRX-400譜儀，或300MHz，使用BRUKER AVANCE DPX-300譜儀，化學(xué)位移(δ，ppm)-在二甲基亞砜溶劑中-在溫度303K下與2.50ppm參比的d6(DMSO-d6)。
實施例1
4-{4-[3-(2-氟-5-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺 在溫度約下20℃與氬氣氣氛下，把0.012cm3 2-氟-5-三氟甲基苯基異氰酸酯和0.012cm3三乙胺加到0.017g(84.48mmol)4-(4-氨基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺在27cm3四氫呋喃中的懸浮液里。在溫度約20℃下攪拌后20小時后，該反應(yīng)混合物在減壓(2.7kPa)下濃縮至干，得到的殘留物采用閃式色譜法進行純化[洗脫劑乙酸乙酯/二氯甲烷(95/5，以體積計)]。這些餾分在減壓下濃縮后，得到黃色殘留物，它在5cm3二氯甲烷中進行攪拌，然后過濾和減壓(2.7kPa)干燥，得到22mg 4-{4-[3-(2-氟-5-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺，呈淺褐色固體狀1HNMR(300MHz，(CD3)2SO，-δ，ppm)6.57-7.02(非常寬的m2H)；6.85(寬的t，J＝2.5Hz1H)；7.29(寬的t，J＝2.5Hz1H)；7.33-7.43(m；5H)；7.49(dd，J＝10.5和8.5Hz1H)；8.60(dd，J＝7.5和2.5Hz1H)；9.31(寬的s1H)；9.58(寬的s1H)；11.2(寬的s1H)；EIm/z＝406(M+)，m/z＝205(C8H3NOF4+)，m/z＝179(C7H4NF4+)基本峰，ES+m/z＝407(MH+)。
可以按照下述方式制備4-(4-氨基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺 0.07g(0.304mmol)4-(4-氨基苯基)-1H-吡咯-3-羧酸乙酯在10cm322％氫氧化銨水溶液中的懸浮液在壓力釜中在溫度約80℃下加熱84小時。在停止加熱，然后降到環(huán)境溫度與壓力后，該反應(yīng)混合物在減壓(2.7kPa)下濃縮至干，得到橙色固體，它再采用閃式色譜法進行純化[洗脫劑 二氯甲烷/甲醇/乙腈(98/1/1，以體積計)]。這些餾分在減壓下濃縮后，得到的殘留物在10cm3乙醚中進行攪拌，然后過濾和減壓(2.7kPa)干燥，得到0.02g 4-(4-氨基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺，呈褐色固體狀EIm/z＝201(M+)基本峰，m/z＝185(M-NH2+)，m/z＝157(M-CONH2+)。
可以按照下述方式制備4-(4-氨基苯基)-1H-吡咯-3-羧酸乙酯 在溫度約20℃下，把0.2g(0.769mmol)4-(4-硝基苯基)-1H-吡咯-3-羧酸乙酯加到0.02g(0.188mmol)10％碳載鈀在15cm3甲醇中的懸浮液里。在壓力釜中，在3巴氫氣中在溫度約25℃下氫化20小時后，該反應(yīng)混合物進行過濾，該催化劑用甲醇漂洗三次，每次5cm3，然后該濾液減壓(2.7kPa)濃縮至干，得到殘留物在10cm3乙醚中進行攪拌，然后過濾和減壓(2.7kPa)干燥，得到0.079g4-(4-氨基苯基)-1H-吡咯-3-羧酸乙酯，呈褐色固體狀；EIm/z＝230(M+)基本峰，m/z＝202(M-C2H4+)，m/z＝157(M-C2H5O+)。
可以按照下述方式制備4-(4-硝基苯基)-1H-吡咯-3-羧酸乙酯 在溫度約下20℃與氬氣氣氛下，往0.512g(12.8mmol)60％在礦物油中的氫化鈉在20cm3乙醚中的懸浮液里，滴加2.212g(10mmol)4-硝基肉桂酸乙酯和1.991g(10.2mmol)甲苯磺?；谆惽杷狨セ旌衔镌?8cm3二甲基亞砜和36cm3乙醚混合物中的溶液。在回流下攪拌1小時后，將該反應(yīng)混合物溶于70cm3水、20cm3飽和氯化鈉水溶液和100cm3乙酸乙酯混合物中。該含水相用50cm3乙醚提取，再用二氯甲烷提取兩次，每次75cm3。所有的有機相合并，用無水硫酸鈉干燥，過濾和減壓(2.7kPa)濃縮至干，得到黑色的油，將它溶于75cm3水和50cm3乙酸乙酯的混合物中。該含水相用乙酸乙酯提取兩次，每次50cm3。所有的有機相合并，用無水硫酸鈉干燥，過濾和減壓(2.7kPa)濃縮至干，得到2.82g黑色固體，它再采用閃式色譜法進行純化[洗脫劑環(huán)己烷/乙酸乙酯(3/2，以體積計)]。這些餾分在減壓下濃縮后，得到1.48g橙色固體，該固體采用閃式色譜法進行純化[洗脫劑二氯甲烷]。這些餾分在減壓下濃縮后，得到0.78g4-(4-硝基苯基)-1H-吡咯-3-羧酸乙酯，呈黃色固體狀；EIm/z＝260(M+)基本峰，m/z＝215(M-C2H5O+)，m/z＝169(215-NO2)。
實施例2
1-乙?；?2-氨基-4-{4-[3-(2-氟-5-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺 在溫度約20℃與氬氣氣氛下，把0.575cm34M鹽酸在二烷中的溶液加到0.06g(0.115mmol)2-氨基-3-氨基甲酰基-4-{4-[3-(2-氟-5-三氟甲基苯基)脲基]苯基}吡咯-1-羧酸叔-丁酯在1.2cm3二烷和1.2cm3甲醇混合物中的溶液里。在溫度約50℃下攪拌15小時后，該反應(yīng)混合物在減壓(2.7kPa)下濃縮至干，得到2-氨基-3-氨基甲酰基-4-{4-[3-(2-氟-5-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯鹽酸鹽，將它溶于2.5cm3乙酸乙酯中。在溫度約20℃與氬氣氣氛下，添加0.01cm3三乙胺和0.013cm3乙酸酐。在溫度約20℃下攪拌1小時后，添加催化量的DMAP，然后保持攪拌30分鐘。該反應(yīng)混合物用5cm3乙酸乙酯進行稀釋。該有機相用水洗滌兩次，每次5cm3。所有的含水相合并，用5cm3乙酸乙酯提取。所有的有機相合并，用5cm3飽和氯化鈉水溶液洗滌，用無水硫酸鎂干燥，過濾和減壓(2.7kPa)濃縮至干，得到0.054g的殘留物采用閃式色譜法進行純化[洗脫劑二氯甲烷/甲醇(98/2，以體積計)]。這些餾分在減壓下濃縮后，得到0.010g 1-乙?；?2-氨基-4-{4-[3-(2-氟-5-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺，呈黃色固體狀；1H NMR(300MHz，(CD3)2SO，-δ，ppm)2.14(s3H)；5.20-6.10(寬的m1H)；6.40(d，J＝2.0Hz1H)；6.70-7.60(寬的m1H)；7.30(寬的d，J＝8.5Hz2H)；7.38(mt1H)；7.45-7.54(m3H)；8.62(dd，J＝7.5和2.5Hz1H)；8.92(寬的s1H)；9.25(寬的s1H)；10.7(寬的s1H)；11.4(寬的s1H)；ES+m/z＝464(MH+)。
可以按照下述方式制備2-氨基-3-氨基甲?；?4-{4-[3-(2-氟-5-三氟甲基苯基)脲基]苯基}吡咯-1-羧酸叔-丁酯 在溫度約20℃與氬氣氣氛下，往0.07g(0.221mmol)2-氨基-4-(4-氨基苯基)-3-氨基甲?；量?1-羧酸叔丁酯在2cm3四氫呋喃中的溶液里，添加0.125cm3三乙胺和0.049cm3 2-氟-5-三氟甲基苯基異氰酸酯。在溫度約20℃下攪拌4小時后，該反應(yīng)混合物溶于5cm3二氯甲烷中。該有機相用水洗滌兩次，每次5cm3。所有的含水相合并，用5cm3二氯甲烷提取。所有的有機相合并，用5cm3飽和氯化鈉水溶液洗滌，用無水硫酸鎂干燥，過濾和減壓(2.7kPa)濃縮至干。得到0.135g橙色固體，它再采用閃式色譜法進行純化[洗脫劑二氯甲烷/甲醇(100/0至98/2，以體積計)]。這些餾分在減壓下濃縮后，得到0.077g 2-氨基-3-氨基甲?；?4-{4-[3-(2-氟-5-三氟甲基苯基)-脲基]苯基}吡咯-1-羧酸叔丁酯，呈黃色固體狀；ES+m/z＝522(MH+)。
可以按照下述方式制備2-氨基-4-(4-氨基苯基)-3-氨基甲?；量?1-羧酸叔丁酯 在溫度約25℃下，往0.008g(0.0076mmol)10％碳載鈀在12cm3甲醇中的懸浮液里，添加0.075g(0.216mmol)2-氨基-3-氨基甲酰基-4-(4-硝基苯基)吡咯-1-羧酸叔丁酯。在壓力釜中，在3巴氫氣中，在溫度約25℃下氫化17小時后，該反應(yīng)混合物進行過濾，該催化劑用甲醇漂洗三次，每次5cm3，然后該濾液減壓(2.7kPa)濃縮至干，得到0.072g 2-氨基-4-(4-氨基苯基)-3-氨基甲?；量?1-羧酸叔丁酯，呈黃色固體狀；1HNMR(400MHz，(CD3)2SO，-δ，ppm)；1.55(s9H)；4.80-5.35(非常寬的m1H)；5.22(寬的s2H)；6.32(s1H)；6.40-6.85(非常寬的m1H)；6.60(寬的d，J＝8.5Hz2H)；6.99(寬的d，J＝8.5Hz2H)；7.01(寬的s2H)。
可以按照下述方式制備2-氨基-3-氨基甲?；?4-(4-硝基苯基)吡咯-1-羧酸叔丁酯 在溫度約20℃與氬氣氣氛下，往0.11g(0.447mmol)2-氨基-4-(4-硝基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺在6cm3二氯甲烷中的懸浮液里，添加0.075cm3(0.536mmol)三乙胺，然后添加0.117g(0.536mmol)二碳酸二叔丁酯。在溫度約50℃下攪拌2.5小時后，添加0.09g(0.412mmol)二碳酸二叔丁酯，在溫度約50℃下保持攪拌3小時。該反應(yīng)混合物溶于5cm3二氯甲烷中。該有機相用水洗滌三次，每次5cm3。所有的含水相合并，用5cm3二氯甲烷提取。所有的有機相合并，用無水硫酸鎂干燥，過濾和減壓(2.7kPa)濃縮至干，得到0.28g的殘留物采用閃式色譜法進行純化[洗脫劑二氯甲烷]。這些餾分在減壓下濃縮后，得到0.075g 2-氨基-3-氨基甲?；?4-(4-硝基苯基)吡咯-1-羧酸叔丁酯，呈橙色固體狀；1HNMR(300MHz，(CD3)2SO，-δ，ppm)1.57(s；9H)；5.77-6.58(寬的m2H)；6.72(s1H)；6.93(寬的s2H)；7.63(寬的d，J＝8.5Hz2H)；8.23(寬的d，J＝8.5Hz2H)。
可以按照下述方式制備2-氨基-4-(4-硝基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺 0.26g(1.139mmol)2-氨基-4-(4-硝基苯基)-1H-吡咯-3-腈在5cm3濃硫酸中的懸浮液在溫度80℃約下加熱1小時。將該反應(yīng)混合物冷卻到溫度約20℃后，把它倒在碎冰上，然后緩慢添加5N氫氧化鈉水溶液，直到堿性pH約10。該反應(yīng)混合物用二氯甲烷/MeOH混合物(98/2，以體積計)提取7次，每次10cm3。所有的有機相合并，用無水硫酸鎂干燥，過濾和減壓(2.7kPa)濃縮至干，得到0.19g 2-氨基-4-(4-硝基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺，呈紅-褐色固體狀；EIm/z＝246(M+)基本峰，m/z＝229(M-NH3+)。
可以按照下述方式制備2-氨基-4-(4-硝基苯基)-1H-吡咯-3-腈 在溫度約20℃與氬氣氣氛下，往0.5g(2.25 mmol)N-[2-(4-硝基苯基)-2-氧代乙基]乙酰胺在15cm3甲醇中的溶液里，添加0.223g(3.375mmol)丙二腈。將該反應(yīng)介質(zhì)冷卻到溫度約0℃，然后添加0.5cm3 50％氫氧化鉀水溶液。在溫度約0℃下攪拌15分鐘，然后在溫度約65℃下攪拌30分鐘后，將該反應(yīng)混合物冷卻到溫度約20℃，然后倒在碎冰上，用二氯甲烷提取七次，每次10cm3。所有的有機相合并，用50cm3飽和氯化鈉水溶液洗滌，用無水硫酸鎂干燥，過濾和減壓(2.7kPa)濃縮至干，得到0.7g褐色固體，它再采用閃式色譜法進行純化[洗脫劑二氯甲烷/甲醇(100/0-95/5，以體積計)]。這些餾分在減壓下濃縮后，得到0.265g 2-氨基-4-(4-硝基苯基)-1H-吡咯-3-腈，呈褐色固體狀；EIm/z＝228(M+)基本峰，m/z＝182(M-NO2). 可以按照下述方式制備N-[2-(4-硝基苯基)-2-氧代乙基]乙酰胺 在溫度約0℃與氬氣氣氛下，往0.5g(2.308mmol)2-氨基-(4-硝基苯基)苯乙酮在2cm3水中的懸浮液里，先添加0.435cm3(4.616mmol)乙酸酐，然后添加0.379g(4.616mmol)乙酸鈉在1.5cm3水中的溶液。在讓該溫度在0℃-20℃之間變化1小時后，添加1.5cm3濃鹽酸直到pH＝2。該反應(yīng)混合物用二氯甲烷提取五次，每次10cm3。所有的有機相合并，用無水硫酸鎂干燥，過濾和減壓(2.7kPa)濃縮至干，得到0.37gN-[2-(4-硝基苯基)-2-氧代乙基]乙酰胺，呈黃色固體狀；ES+m/z＝223(MH+)。
實施例3
2-甲?；被?4-{4-[3-(2-氟-5-三氟甲基苯基)脲基]苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺 在溫度約23℃下，往0.125g(0.578mmol)2-甲?；被?4-(4-氨基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺在15cm3四氫呋喃中的溶液里，添加0.081cm3三乙胺和0.084cm32-氟-5-三氟甲基苯基異氰酸酯。在溫度約23℃下攪拌16小時后，該反應(yīng)混合物在減壓(2.7kPa)下濃縮至干。該殘留物再稀釋在50cm3乙酸乙酯中，然后用50cm3水和50cm3飽和氯化鈉水溶液洗滌兩次，每次50cm3。該有機溶液用無水硫酸鎂干燥，用3S炭黑處理，過濾和減壓(2.7kPa)濃縮至干，得到0.115g油樣固體，它再采用閃式色譜法進行純化[洗脫劑二氯甲烷/甲醇/乙腈(95/2.5/2.5，以體積計)]。這些餾分在減壓下濃縮后，得到0.016g 2-甲?；被?4-{4-[3-(2-氟-5-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺，呈奶油固體狀，在169℃熔化。1H NMR(400MHz，(CD3)2SO，-δ，ppm)5.60(寬的m，1H)；6.41(寬的s，1H)；7.07(寬的m，1H)；7.31(d，J＝8.5Hz，2H)；7.38(m，1H)；7.48(m部分掩蔽的，1H)；7.51(d，J＝8.5Hz，2H)；8.34(s，1H)；8.61(dd，J＝2.5和7.5Hz，1H)；9.07(寬的s，1H)；9.40(寬的s，1H)；10.85(寬的m，1H)；11.45(寬的s，1H)。
可以按照下述方式制備2-甲?；被?4-(4-氨基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺 在溫度約25℃下，往0.030g(0.0285mmol)10％碳載鈀在15cm3甲醇中的懸浮液里，添加0.23g(0.834mmol)2-甲酰基氨基-4-(4-硝基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺。在壓力釜中，在2巴氫氣中，在溫度約25℃下氫化5小時后，該反應(yīng)混合物進行過濾，該催化劑用甲醇漂洗三次，每次5cm3，然后該濾液減壓(2.7kPa)濃縮至干，得到0.125g2-甲?；被?4-(4-氨基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺，呈綠色固體狀。1H NMR(400MHz，(CD3)2SO，-δ，ppm)5.13(寬的s，2H)；5.43(寬的m，1H)；6.27(d，J＝2.5Hz，1H)；6.60(d，J＝9.0Hz，2H)；6.80(寬的m，1H)；6.99(d，J＝9.0Hz，2H)；8.34(d，J＝1.5Hz，1H)；10.9(寬的s，1H)；11.25(寬的s，1H)。
可以按照下述方式制備2-甲?；被?4-(4-硝基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺 在接近25℃的溫度下，往0.3g(1.21mmol)2-氨基-4-(4-硝基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺在5cm3無水乙醇中的溶液里，添加2cm3(52.9mmol)甲酸在5cm3(52.9mmol)乙酸酐中的溶液。在這個溫度下攪拌2小時后，把該反應(yīng)介質(zhì)倒入100cm3水中。該懸浮液然后進行過濾。該固體脫水，干燥得到0.257g 2-甲?；被?4-(4-硝基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺，呈綠色粉末狀。1H NMR(400MHz，(CD3)2SO，-δin ppm)，6.22-8.53(非常寬的m，2H)；6.78(d，J＝3.0Hz，1H)；7.64(d，J＝9.0Hz，2H)；8.19(d，J＝9.0Hz，2H)；8.32(d，J＝1.5Hz，1H)；10.55(寬的s，1H)；11.6(寬的s，1H)。
如實施例2描述的那樣制備2-氨基-4-(4-硝基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺。
實施例4
2-異丁酰基氨基-4-{4-[3-(2-氟-5-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺 在溫度約25℃下，往0.125g(0.436mmol)2-異丁?；被?4-(4-氨基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺在15cm3四氫呋喃中的溶液里，添加0.076cm3(0.436mmol)2-氟-5-三氟甲基苯基異氰酸酯。在溫度約25℃下攪拌17小時后，該反應(yīng)混合物在減壓(2.7kPa)下濃縮至干。該殘留物再稀釋在40cm3乙酸乙酯中，然后用40cm3水洗滌。該有機溶液用無水硫酸鎂干燥，過濾和減壓(2.7kPa)濃縮至干，得到殘留物在8cm3環(huán)己烷/乙酸乙酯混合物(70/30，以體積計)中結(jié)晶。在過濾與干燥后，得到0.096g2-異丁?；被?4-{4-[3-(2-氟-5-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺，呈奶油色固體狀，在196℃熔化。IR(KBr)，3472、3384、1667、1594、1546、1443、1340、1313、1198、1167、1120、1070、937和614cm-1。1H NMR(400MHz，(CD3)2SO，-δ，ppm)，1.17(d，J＝7.0Hz，6H)；2.61(m，1H)；5.62(寬的m，1H)；6.40(d，J＝2.5Hz，1H)；7.00(寬的m，1H)；7.30(d，J＝9.0Hz，2H)；7.39(m，1H)；7.49(部分掩蔽的m，1H)；7.51(d，J＝9.0Hz，2H)；8.62(dd，J＝2.5和7.5Hz，1H)；8.99(寬的s，1H)；9.32(寬的s，1H)；10.95(寬的s，1H)；11.45(寬的s，1H)。
可以按照下述方式制備2-異丁?；被?4-(4-氨基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺 在溫度約25℃下，往0.047g(0.0446mmol)10％碳載鈀在25cm3甲醇中的懸浮液里，添加0.33g(1.04mmol)2-異丁酰基氨基-4-(4-硝基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺。在壓力釜中，在2巴氫氣中在溫度約25℃下氫化3.5小時后，該反應(yīng)混合物進行過濾，該催化劑用甲醇漂洗三次，每次5cm3，然后該濾液減壓(2.7kPa)濃縮至干，得到0.22g的殘留物采用閃式色譜法進行純化[洗脫劑二氯甲烷/甲醇/乙腈(96/2/2，以體積計)]。這些餾分在減壓下濃縮后，得到0.135g 2-異丁?；被?4-(4-氨基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺，呈褐色固體狀。1H NMR(400MHz，(CD3)2SO，-δ，ppm)1.16(d，J＝7.0Hz，6H)；2.60(m，1H)；5.15(寬的s，2H)；5.45(寬的m，1H)；6.24(d，J＝2.0Hz，1H)；6.60(d，J＝9.0Hz，2H)；6.94(寬的m，1H)；6.98(d，J＝9.0Hz，2H)；11.05(寬的s，1H)；11.3(寬的s，1H)。
可以按照下述方式制備2-異丁?；被?4-(4-硝基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺 在接近25℃的溫度下，往0.23g(0.93mmol)2-氨基-4-(4-硝基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺在15cm3四氫呋喃中的溶液里，添加0.260cm3(1.86mmol)三乙胺和0.098cm3(0.93mmol)異丁?；?。在這個溫度下攪拌16小時后，該反應(yīng)介質(zhì)減壓(2.7kPa)濃縮至干，得到殘留物在60cm3水中進行攪拌，然后用乙酸乙酯提取兩次，每次50cm3。該有機相用無水硫酸鎂干燥，過濾和減壓(2.7kPa)濃縮至干，得到0.35g 2-異丁?；被?4-(4-硝基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺，呈綠色粉末狀。1HNMR(400MHz，(CD3)2SO，-δ，ppm)15(d，J＝7.0Hz，6H)；2.64(m，1H)；6.50-8.50(非常寬的m，2H)；6.79(d，J＝2.5Hz，1H)；7.64(d，J＝9.0Hz，2H)；8.19(d，J＝9.0Hz，2H)；10.45(寬的s，1H)；11.65(寬的s，1H)。
如實施例2所描述的那樣制備2-氨基-4-(4-硝基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺。
實施例5
2-丁?；被?4-{4-[3-(2-氟-5-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺 在溫度約25℃下，往0.207g(0.610mmol)2-丁?；被?4-(4-氨基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺在20cm3四氫呋喃中的溶液里，添加0.096cm3(0.671mmol)2-氟-5-三氟甲基苯基異氰酸酯。在溫度約25℃下攪拌48小時后，該反應(yīng)混合物在減壓(2.7kPa)下濃縮至干。該殘留物再稀釋在40cm3乙酸乙酯中，然后用30cm3水和30cm3飽和氯化鈉水溶液洗滌兩次。該有機溶液用無水硫酸鎂干燥，過濾和減壓(2.7kPa)濃縮至干，得到的殘留物采用閃式色譜法進行純化[洗脫劑二氯甲烷/甲醇/乙腈(97/1.5/1.5，以體積計)]。這些餾分在減壓下濃縮后，得到0.093g 2-丁酰基氨基-4-{4-[3-(2-氟-5-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺，呈奶油色固體狀，在219℃熔化。IR(KBr)，3470、33 87、1717、1626、1593、1546、1443、1341、1315、1264、1193、1168、1126、1070、820、614cm-1。1H NMR(400MHz，(CD3)2SO，-δ，ppm)0.95(t，J＝7.5Hz，3H)；1.64(m，2H)；2.38(t，J＝7.5Hz，2H)；5.60(寬的m，1H)；6.39(d，J＝2.5Hz，1H)；7.05(寬的m，1H)；7.30(d，J＝9.0Hz，2H)；7.38(m，1H)；7.49(部分掩蔽m，1H)；7.51(d，J＝9.0Hz，2H)；8.61(dd，J＝2.5和7.5Hz，1H)；9.05(寬的s，1H)；9.38(寬的s，1H)；10.8(寬的s，1H)；11.4(寬的s，1H)。
可以按照下述方式制備2-丁?；被?4-(4-氨基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺 在溫度約25℃下，往0.068g(0.064mmol)10％碳載鈀在20cm3甲醇中的懸浮液里，添加0.195g(0.61mmol)2-丁?；被?4-(4-硝基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺。在壓力釜中，在2巴氫氣中，在溫度約25℃下氫化5小時后，該反應(yīng)混合物進行過濾，該催化劑用甲醇漂洗兩次，每次10cm3，然后該濾液減壓(2.7kPa)濃縮至干，得到0.207g 2-丁酰基氨基-4-(4-氨基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺，呈奶油色固體狀。1H NMR(400MHz，(CD3)2SO，-δ，ppm)0.94(t，J＝7.5Hz，3H)；1.63(m，2H)；2.37(t，J＝7.5Hz，2H)；5.11(寬的s，2H)；6.05-8.45(非常寬的m，2H)；6.24(d，J＝2.5Hz，1H)；6.60(d，J＝8.5Hz，2H)；6.99(d，J＝8.5Hz，2H)；10.8(寬的s，1H)；11.3(寬的s，1H)。
可以按照下述方式制備2-丁酰基氨基-4-(4-硝基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺 在接近25℃的溫度下，往0.20g(0.81mmol)2-氨基-4-(4-硝基-苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺在25cm3四氫呋喃總的溶液里，添加0.227cm3(1.62mmol)三乙胺和0.085cm3(0.81mmol)丁?；?。在這個溫度下攪拌后16小時，該反應(yīng)介質(zhì)減壓(2.7kPa)濃縮至干，得到殘留物在60cm3乙酸乙酯中進行攪拌，然后用水洗滌三次，每次20cm3。該有機相用無水硫酸鎂干燥，過濾和減壓(2.7kPa)濃縮至干，得到0.221g 2-丁?；被?4-(4-硝基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺，呈褐色粉末狀。1HNMR(400MHz，(CD3)2SO，-δ，ppm)0.94(t，J＝7.5Hz，3H)；1.63(m，2H)；2.36(t，J＝7.5Hz，2H)；6.20-8.50(非常寬的m，2H)；6.79(d，J＝3.0Hz，1H)；7.64(d，J＝9.0Hz，2H)；8.18(d，J＝9.0Hz，2H)；10.3(寬的s，1H)；11.6(寬的s，1H)。
如實施例2所描述的那樣制備2-氨基-4-(4-硝基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺。
實施例6
2-(3-環(huán)戊基丙?；被?-4-{4-[3-(2-氟-5-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺 在溫度約25℃下，往0.170g(0.50mmol)2-(3-環(huán)戊基丙?；被?-4-(4-氨基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺在20cm3四氫呋喃中的溶液里，添加0.072cm3(0.50mmol)2-氟-5-三氟甲基苯基異氰酸酯。在溫度約25℃下攪拌48小時后，該反應(yīng)混合物在減壓(2.7kPa)下濃縮至干。該殘留物再稀釋在50cm3乙酸乙酯中，然后用50cm3水和50cm3飽和氯化鈉水溶液洗滌。該有機溶液用無水硫酸鎂干燥，過濾和減壓(2.7kPa)濃縮至干，得到的殘留物采用閃式色譜法進行純化[洗脫劑；二氯甲烷/甲醇/乙腈(95/2.5/2.5，以體積計)]。這些餾分在減壓下濃縮后，得到0.048g 2-(3-環(huán)戊基丙?；被?-4-{4-[3-(2-氟-5-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺，呈黃色粉末狀，在222℃熔化。IR(KBr)，3470、33 89、1717、1633、1594、1546、1443、1341、1312、1194、1167、1119、1070和614cm-1。1H NMR(400MHz，(CD3)2SO，-δ，ppm)1.11(m，2H)；1.42-1.68(m，6H)；1.71-1.85(m，3H)；2.40(t，J＝8.0Hz，2H)；5.56(寬的m，1H)；6.39(d，J＝2.5Hz，1H)；7.09(寬的m，1H)；7.30(d，J＝9.0Hz，2H)；7.38(m，1H)；7.49(部分掩蔽的m，1H)；7.51(d，J＝9.0Hz，2H)；8.62(dd，J＝2.5和7.5Hz，1H)；9.00(寬的s，1H)；9.32(寬的s，1H)；10.8(寬的s，1H)；11.4(寬的s，1H)。
按照下述方式制備2-(3-環(huán)戊基丙?；被?-4-(4-氨基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺 在溫度約25℃下，往0.055g(0.0051mmol)10％碳載鈀在25cm3甲醇中的懸浮液里，添加0.210g(0.56mmol)2-(3-環(huán)戊基丙?；被?-4-(4-硝基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺。在壓力釜中，在2巴氫氣中，在溫度約25℃下氫化5小時后，該反應(yīng)混合物進行過濾，該催化劑用甲醇漂洗兩次，每次10cm3，然后該濾液減壓(2.7kPa)濃縮至干，得到0.151g 2-(3-環(huán)戊基丙?；被?-4-(4-氨基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺，呈褐色粉末狀。1HNMR(400MHz，(CD3)2SO，-δ，ppm)1.09(m，2H)；1.39-1.84(m，9H)；2.39(t，J＝8.0Hz，2H)；5.14(寬的s，2H)；6.20-7.50(非常寬的m，2H)；6.23(d，J＝2.5Hz，1H)；6.59(d，J＝8.5Hz，2H)；6.99(d，J＝8.5Hz，2H)；10.9(寬的s，1H)；11.3(寬的s，1H)。
可以按照下述方式制備2-(3-環(huán)戊基丙?；被?-4-(4-硝基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺 在接近25℃的溫度下，往0.15g(0.61mmol)2-氨基-4-(4-硝基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺在25cm3四氫呋喃中的溶液里，添加0.171cm3(1.22mmol)三乙胺和0.098mg(0.61mmol)3-環(huán)戊基丙?；?。在這個溫度下攪拌16小時后，該反應(yīng)介質(zhì)減壓(2.7kPa)濃縮至干，得到殘留物在40cm3水中進行攪拌，然后用乙酸乙酯提取三次，每次40cm3。該有機相用80cm3飽和氯化鈉水溶液洗滌，用無水硫酸鎂干燥，過濾和減壓(2.7kPa)濃縮至干，得到0.218g 2-(3-環(huán)戊基丙?；被?-4-(4-硝基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺，呈綠色粉末狀。1H NMR(400MHz，(CD3)2SO，-δ，ppm)1.11(m，2H)；1.42-1.65(m，6H)；1.69-1.86(m，3H)；2.39(t，J＝8.0Hz，2H)；6.17-8.50(非常寬的m，2H)；6.79(d，J＝2.5Hz，1H)；7.63(d，J＝9.0Hz，2H)；8.18(d，J＝9.0Hz，2H)；10.35(寬的s，1H)；11.6(寬的s，1H)。
如實施例2所描述的那樣制備2-氨基-4-(4-硝基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺。
實施例7
2-(環(huán)丙基羰基氨基)-4-{4-[3-(2-氟-5-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺 使用2-氨基-4-(4-硝基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺和環(huán)丙基羰基氯化物，如實施例4所描述的那樣可以制備2-(環(huán)丙基羰基氨基)-4-{4-[3-(2-氟-5-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺。ES+m/z＝490(MH+)。
實施例8
2-叔戊?；被?4-{4-[3-(2-氟-5-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺 使用2-氨基-4-(4-硝基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺和叔戊?；龋鐚嵤├?所描述的那樣可以制備2-叔戊?；被?4-{4-[3-(2-氟-5-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺。ES+m/z＝506(MH+)。
實施例9
2-(2-二甲基氨基乙?；被?-4-{4-[3-(2-氟-5-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺 使用2-氨基-4-(4-硝基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺和二甲基甘氨酸?；?，如實施例4所描述的那樣可以制備2-(2-二甲基氨基乙?；被?-4-{4-[3-(2-氟-5-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺ES+m/z＝507(MH+)。
實施例10
2-乙?；被?4-{6-[3-(2-氟-5-三氟甲基苯基)脲基]吡啶-3-基}-1H-吡咯-3-甲酰胺 在溫度約23℃與氬氣氣氛下，往0.11g(0.424mmol)2-乙?；被?4-(6-氨基吡啶-3-基)-1H-吡咯-3-甲酰胺在20cm3四氫呋喃中的溶液里，添加0.068cm3(0.466mmol)2-氟-5-三氟甲基苯基異氰酸酯。在溫度約20℃下攪拌1小時后，往該介質(zhì)添加0.059cm3(0.424mmol)三乙胺。該反應(yīng)混合物然后在這個溫度下攪拌18小時，再減壓(2.7kPa)濃縮至干。該殘留物進行閃式色譜純化[洗脫劑二氯甲烷/甲醇(95/5，以體積計)和醇乙酸乙酯梯度]。這些餾分在減壓下濃縮后，得到0.013g 2-乙?；被?4-{6-[3-(2-氟-5-三氟甲基苯基)脲基]吡啶-3-基}-1H-吡咯-3-甲酰胺，呈白色固體狀。ES+m/z＝466(MH+)。
可以按照下述方式制備2-乙?；被?4-(6-氨基吡啶-3-基)-1H-吡咯-3-甲酰胺 在溫度約25℃下，往0.015g(0.014mmol)10％碳載鈀在20cm3甲醇中的懸浮液里，添加0.15g(0.519mmol)2-乙?；被?4-(6-硝基吡啶-3-基)-1H-吡咯-3-甲酰胺。在壓力釜中在2巴氫氣中，在溫度約30℃下氫化2小時后，該反應(yīng)混合物進行過濾，該催化劑用乙醚漂洗兩次，每次2cm3。在脫水與干燥后，得到0.11g 2-乙?；被?4-(6-氨基吡啶-3-基)-1H-吡咯-3-甲酰胺，呈褐色固體狀。1H NMR(400MHz，(CD3)2SO，-δ，ppm)2.13(s，3H)；6.01(寬的s，2H)；5.50-8.85(非常寬的m，2H)；6.35(d，J＝2.5Hz，1H)；6.49(d，J＝8.5Hz，1H)；7.36(dd，J＝2.5和8.5Hz，1H)；7.87(d，J＝2.5Hz，1H)；10.65(s，1H)；11.35(寬的s，1H)。
可以按照下述方式制備2-乙?；被?4-(6-硝基吡啶-3-基)-1H-吡咯-3-甲酰胺 在接近20℃的溫度與氬氣氣氛下，往0.20g(0.809mmol)2-氨基-4-(6-硝基吡啶-3-基)-1H-吡咯-3-甲酰胺在40cm3四氫呋喃中的溶液里，添加0.226cm3(162mmol)三乙胺和0.058cm3(0.809mmol)乙酰氯。在這個溫度下攪拌3小時后，該反應(yīng)介質(zhì)減壓(2.7kPa)濃縮至干，得到的殘留物稀釋在200cm3乙酸乙酯中，然后用50cm3水和50cm3飽和氯化鈉水溶液洗滌，用無水硫酸鎂干燥，過濾和減壓(2.7kPa)濃縮至干，得到0.15g2-乙?；被?4-(6-硝基吡啶-3-基)-1H-吡咯-3-甲酰胺，呈綠色粉末狀。1H NMR(400MHz，(CD3)2SO，-δ，ppm)2.11(s，3H)；6.90(寬的m，2H)；6.95(d，J＝3.0Hz，1H)；8.13(dd，J＝2.5和8.5Hz，1H)；8.27(d，J＝8.5Hz，1H)；8.65(d，J＝2.5Hz，1H)；10.2(s，1H)；11.7(寬的m，1H)。
可以按照下述方式制備2-氨基-4-(6-硝基-3-吡啶基)-1H-吡咯-3-甲酰胺 在溫度約5℃下，往0.17g(0.742mmol)2-氨基-4-(6-硝基-3-吡啶-3-基)-1H-吡咯-3-腈中添加4.5cm3濃硫酸。該混合物在溫度約85℃與氬氣氣氛下加熱1小時。將該反應(yīng)混合物冷卻到5℃后，把它倒在碎冰和30cm3水中。把這種溶液倒入300cm3四氫呋喃和15cm3吡啶溶液中。攪拌5分鐘后，該有機相用30cm3飽和氯化鈉水溶液洗滌，然后用無水硫酸鎂干燥，過濾和減壓(2.7kPa)濃縮至干，得到0.20g 2-氨基-4-(6-硝基吡啶-3-基)-1H-吡咯-3-甲酰胺，呈褐色固體狀。ES+m/z＝248(MH+)。
可以按照下述方式制備2-氨基-4-(6-硝基吡啶-3-基)-1H-吡咯-3-腈 在溫度約20℃與氬氣氣氛下，往0.050g(0.224mmol)N-[2-(6-硝基吡啶-3-基)-2-氧代乙基]乙酰胺在5cm3甲醇中的溶液里，添加0.022g(0.336mmol)丙二腈。將該反應(yīng)介質(zhì)冷卻到溫度約0℃，然后添加0.1cm3 50％氫氧化鉀水溶液。在溫度約20℃下攪拌15分鐘后，然后在溫度約65℃下攪拌1.15小時，該反應(yīng)混合物在減壓(2.7kPa)下濃縮至干，然后稀釋在50cm3乙酸乙酯中。該有機相用10cm3水和10cm3飽和氯化鈉水溶液洗滌，然后用無水硫酸鎂干燥，過濾和減壓(2.7kPa)濃縮至干，得到0.043g 2-氨基-4-(6-硝基吡啶-3-基)-1H-吡咯-3-腈，呈褐色固體狀。ES+m/z＝230(MH+)。
可以按照下述方式制備N-[2-(6-硝基吡啶-3-基)-2-氧代乙基]乙酰胺 在溫度約5℃下，往1.05g(4.166mmol)2-氨基-1-(6-硝基吡啶-3-基)乙酮在25cm3水中的溶液里，先添加1.575cm3(16.66mmol)乙酸酐，然后添加1.367g(16.66mmol)乙酸鈉在3cm3水中的溶液。在5℃攪拌3小時后，該反應(yīng)混合物用乙酸乙酯提取三次，每次10cm3。所有的有機相合并，用30cm3飽和氯化鈉水溶液洗滌，然后用無水硫酸鎂干燥，過濾和減壓(2.7kPa)濃縮至干，得到0.618g N-[2-(6-硝基吡啶-3-基)-2-氧代乙基]乙酰胺，呈黃色固體狀。1H NMR(400MHz，(CD3)2SO，-δ，ppm)1.90(s，3H)；4.66(d，J＝4.5Hz，2H)；8.37(寬的t，J＝4.5Hz，1H)；8.43(d，J＝8.5Hz，1H)；8.68(dd，J＝2.0和8.5Hz，1H)；9.16(d，J＝2.0Hz，1H)。
2-氨基-1-(6-硝基吡啶-3-基)乙酮可以按照下述方式制備 在溫度約20℃下，往0.975g(6.954mmol)六亞甲基四胺在10cm3氯代苯中的溶液里，添加1.549g(6.322mmol)2-溴-1-(6-硝基吡啶-3-基)乙酮在25cm3氯代苯中的溶液。在這個溫度下攪拌1小時后，該懸浮液在50℃加熱18小時，該反應(yīng)介質(zhì)然后冷卻到5℃，再用200cm3乙醚稀釋。如此得到的沉淀進行過濾，用乙醚洗滌三次，每次50cm3。得到的銨鹽在20cm3乙醇中進行攪拌，然后在溫度約20℃下添加8cm3 37％鹽酸。然后該溶液在這個溫度下攪拌16小時。生成的沉淀進行過濾，用水洗滌三次，每次50cm3，脫水和干燥得到1.05g2-氨基-1-(6-硝基吡啶-3-基)乙酮，呈奶油色粉末狀。ES+m/z＝182(MH+)。
可以按照下述方式制2-溴-1-(6-硝基吡啶-3-基)乙酮備 在溫度約20℃下，往3.4g(20.46mmol)1-(6-硝基吡啶-3-基)乙酮在60cm3四氫呋喃中的溶液，添加7.28g(40.92mmol)N-溴琥珀酰亞胺。加熱回流36小時后，該反應(yīng)混合物在減壓(2.7kPa)下濃縮至干，然后采用閃式色譜純化[洗脫劑純二氯甲烷]。這些餾分在減壓下濃縮后，得到1.7g 2-溴-1-(6-硝基吡啶-3-基)乙酮，呈白色粉末狀。ES+m/z＝246(MH+)。
可以按照下述方式制備1-(6-硝基吡啶-3-基)乙酮 在溫度約20℃與氬氣氣氛下，往1.044g(3.98mmol)三苯基膦在10cm3甲苯中的溶液里，添加1.14g(1.99mmol)雙(二苯亞甲基丙酮)鈀和10.1g(49.75mmol)5-溴-2-硝基吡啶。在這個溫度下攪拌15分鐘后，添加16.9cm3(49.75mmol)1-乙氧基乙烯基三丁基錫在60cm3甲苯中的溶液。加熱回流15小時后，將該反應(yīng)介質(zhì)冷卻到20℃，然后倒入500cm31N鹽酸溶液，在這個溫度下攪拌16小時。該介質(zhì)再用乙酸乙酯提取三次，每次150cm3。有機相合并，然后用300cm3水洗滌，用無水硫酸鎂干燥，過濾和減壓(2.7kPa)濃縮至干，得到的殘留物采用閃式色譜法進行純化[洗脫劑純二氯甲烷]。這些餾分在減壓下濃縮后，得到3.4g 1-(6-硝基吡啶-3-基)乙酮。1H NMR(400MHz，(CD3)2SO，-δ，ppm)2.71(s，3H)；8.42(d，J＝8.5Hz，1H)；8.66(dd，J＝2.5和8.5Hz，1H)；9.15(d，J＝2.5Hz，1H)。
實施例11
2-(3-乙基脲基)-4-{4-[3-(2-氟-5-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺 在溫度約25℃下，往0.056g(0.194mmol)4-(4-氨基苯基)-2-(3-乙基脲基)-1H-吡咯-3-甲酰胺在20cm3四氫呋喃中的溶液里，添加0.031cm3(0.0213mmol)2-氟-5-三氟甲基苯基異氰酸酯。在溫度約60℃下攪拌16小時后，該反應(yīng)混合物在減壓(2.7kPa)下濃縮至干。該殘留物再稀釋在40cm3乙酸乙酯中，然后用水洗滌兩次，每次30cm3。該有機溶液用無水硫酸鎂干燥，過濾和減壓(2.7kPa)濃縮至干，得到的殘留物采用閃式色譜法進行純化[洗脫劑二氯甲烷/甲醇/乙腈(95/2.5/2.5，以體積計)]。這些餾分在減壓下濃縮后，得到0.021g 2-(3-乙基脲基)-4-{4-[3-(2-氟-5-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺，呈黃色固體狀。ES+m/z＝494(MH+)。
可以按照下述方式制備4-(4-氨基苯基)-2-(3-乙基脲基)-1H-吡咯-3-甲酰胺 在溫度約25℃下，往0.067g(0.0636mmol)10％碳載鈀在15cm3甲醇中的懸浮液里，添加0.115g(0.362mmol)4-(4-硝基苯基)-2-(3-乙基脲基)-1H-吡咯-3-甲酰胺。在壓力釜中，在2巴氫氣中在溫度約25℃下氫化2.5小時后，該反應(yīng)混合物進行過濾，該催化劑用甲醇漂洗三次，每次5cm3，然后該濾液減壓(2.7kPa)濃縮至干，得到0.056g 4-(4-氨基苯基)-2-(3-乙基脲基)-1H-吡咯-3-甲酰胺，呈橙色固體狀；ES+m/z＝289(MH+)。
可以按照下述方式制備4-(4-硝基苯基)-2-(3-乙基脲基)-1H-吡咯-3-甲酰胺 在接近25℃的溫度下，往0.2g(0.81mmol)2-氨基-4-(4-硝基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺在15cm3四氫呋喃中的溶液里，添加0.074cm3(0.891mmol)異氰酸乙酯和0.005mg(0.040mmol)二甲基氨基吡啶。在接近60℃的溫度下攪拌16小時后，該反應(yīng)介質(zhì)減壓(2.7kPa)濃縮至干，得到殘留物在100cm3水中進行攪拌，然后用乙酸乙酯提取三次，每次50cm3。該有機相用無水硫酸鎂干燥，過濾和減壓(2.7kPa)濃縮至干，得到的殘留物采用閃式色譜法進行純化[洗脫劑二氯甲烷/甲醇/乙腈(95/2.5/2.5，以體積計)]。這些餾分減壓濃縮后，得到0.120g 4-(4-硝基苯基)-2-(3-乙基脲基)-1H-吡咯-3-甲酰胺，呈黃色粉末狀。ES+m/z＝318(MH+)。
如實施例2所描述的那樣制備2-氨基-4-(4-硝基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺。
實施例12
2-乙酰基氨基-4-{4-[3-(3-氟-5-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺 在室溫下，往100mg(0.387mmol)2-乙?；被?4-(4-氨基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺在5cm3無水四氫呋喃中的懸浮液里，添加0.061cm3(0.426mmol)3-氟-5-三氟甲基苯基異氰酸酯。該反應(yīng)介質(zhì)在室溫下攪拌24小時，在水-冰浴中進行冷卻，然后用燒結(jié)玻璃過濾器進行過濾。收集的固體用少量二氯甲烷和環(huán)己烷洗滌，然后真空干燥。得到75mg2-乙酰基氨基-4-{4-[3-(3-氟-5-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺，呈淺褐色固體狀。
LCMS(方法A)m/z＝464[M+H]+；m/z＝447[M+H]+-NH3(基本峰)m/z＝462[M-H]-。保留時間(m)＝3.97。
可以按照下述方式制備2-乙?；被?4-(4-氨基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺 往1.36g(4.72mmol)2-乙?；被?4-(4-硝基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺在200cm3甲醇中的懸浮液里，添加0.15g碳載鈀(10％)。該氫化反應(yīng)在2巴與30℃下進行6小時，然后該反應(yīng)介質(zhì)用硅藻土進行過濾，用甲醇洗滌。該濾液進行減壓蒸發(fā)，得到1.14g 2-乙?；被?4-(4-氨基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺，呈褐色固體狀。1H NMR(300MHz，(CD3)2SO d6-δ，ppm)2.13(s，3H)；5.13(s，2H)；5.45(寬的m，1H)；6.24(d，J＝2.5Hz，1H)；6.59(d，J＝8.5Hz，2H)；6.90-7.10(寬的m，1H)；6.99(d，J＝8.5Hz，2H)；10.8(s，1H)；11.25(寬的s，1H)。
EIm/z＝258[M+](基本峰)；m/z＝241[M+H]+-NH3；m/z＝199241-COCH3。
可以按照下述方式制備2-乙?；被?4-(4-硝基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺 在室溫與氬氣下，往2.16g(8.77mmol)2-氨基-4-(4-硝基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺在200cm3無水四氫呋喃中的懸浮液里，添加0.851cm3(11.960mmol)乙?；取Ｔ摶旌衔镉盟?冰浴進行冷卻，然后在0℃緩慢添加3.180cm3(22.82mmol)三乙胺。該反應(yīng)在0℃攪拌15分鐘，然后在室溫下攪拌3小時。該介質(zhì)溶于乙酸乙酯中，然后該有機相用水洗滌，然后用硫酸鎂干燥，過濾和減壓蒸去溶劑。粗制產(chǎn)物采用閃式色譜純化[洗脫劑二氯甲烷/甲醇(99/1，以體積計)]。含有期望產(chǎn)物的餾分在減壓濃縮后，得到1.23g 2-乙酰基氨基-4-(4-硝基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺，呈褐色固體狀。
1H NMR(400MHz，(CD3)2SO d6-δ，ppm)2.11(s，3H)；6.50-7.20(非常寬的m，2H)；6.80(s，1H)；7.63(d，J＝9.0Hz，2H)；8.18(d，J＝9.0Hz，2H)；10.3(寬的s，1H)；11.6(寬的s，1H)。
LCMS(方法A)；m/z＝287[M-H]-。
保留時間(m)＝2.90。
使用2-氨基-4-(4-硝基苯基)-1H-吡咯-3-腈，可以如實施例2所描述的那樣制備2-氨基-4-(4-硝基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺。
實施例13
2-乙酰基氨基-4-{4-[3-(3-乙基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺 在室溫下，往懸浮液100mg(0.387mmol)2-乙?；被?4-(4-氨基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺在5cm3無水四氫呋喃中的溶液里，添加0.061cm3(0.426mmol)1-乙基-3-異氰酰苯。該反應(yīng)介質(zhì)在室溫下攪拌24小時，然后減壓蒸發(fā)至干。粗制產(chǎn)物采用閃式色譜純化[洗脫劑；二氯甲烷/甲醇(97/3，以體積計)]。含有期望產(chǎn)物的餾分在減壓濃縮后，得到107mg 2-乙?；被?4-{4-[3-(3-乙基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺。呈褐色固體狀。
LCMS(方法A)m/z＝406[M+H]+m/z＝389[M+H]+-NH3 保留時間(m)＝3.67。
實施例14
2-乙?；被?4-{4-[3-(4-氟-3-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺 使用4-氟-3-(三氟甲基)苯基異氰酸酯和2-乙?；被?4-(4-氨基-苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺，可以如實施例13所描述的那樣制備2-乙?；被?4-{4-[3-(4-氟-3-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺。其特征如下 LCMS(方法A)m/z＝464[M+H]+；m/z447[M+H]+-NH3(基本峰)；m/z＝462[M-H]-， 保留時間(m)＝3.83。
實施例15
2-乙?；被?4-{4-[3-(3-氟苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺 使用3-氟苯基異氰酸酯和2-乙?；被?4-(4-氨基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺，可以如實施例12所描述的那樣制備2-乙?；被?4-{4-[3-(3-氟苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺。其特征如下 LCMS(方法A)m/z＝396[M+H]+；m/z＝379[M+H]+-NH3。
保留時間(m)＝3.42。
實施例16
2-乙酰基氨基-4-{4-[3-(4-氟苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺 使用4-氟苯基異氰酸酯和2-乙?；被?4-(4-氨基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺，可以如實施例12所描述的那樣制備2-乙?；被?4-{4-[3-(4-氟苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺。
LCMS(方法A)m/z＝396[M+H]+；m/z＝379[M+H]+-NH3。
保留時間(m)＝3.42。
實施例17
2-乙酰基氨基-4-{4-[3-(2-氟苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺 使用2-氟苯基異氰酸酯和2-乙?；被?4-(4-氨基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺，可以如實施例12所描述的那樣制備2-乙?；被?4-{4-[3-(2-氟苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺。
LCMS(方法B)m/z＝396[M+H]+(基本峰)；m/z＝379[M+H]+-NH3。
保留時間(m)＝3.70。
實施例18
2-乙?；被?4-{4-[3-(4-二氟甲氧基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺 使用4-(二氟甲氧基)苯基異氰酸酯和2-乙?；被?4-(4-氨基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺，可以如實施例12所描述的那樣制備2-乙?；被?4-{4-[3-(4-二氟甲氧基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺。
LCMS(方法A)m/z＝444[M+H]+；m/z 427[M+H]+-NH3m/z＝442[M-H]-。
保留時間(m)＝3.51。
實施例19
2-乙?；被?4-{4-[3-(3，4-二甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺 使用3，4-二甲基苯基異氰酸酯和2-乙?；被?4-(4-氨基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺，可以如實施例12所描述的那樣制備2-乙?；被?4-{4-[3-(3，4-二甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺。
LCMS(方法A)m/z＝406[M+H]+，m/z＝389[M+H]+-NH3。m/z＝404[M-H]- 保留時間(m)＝3.60。
實施例20
2-乙?；被?4-{4-[3-(3，4-二甲氧基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺 使用3，4-二甲氧基苯基異氰酸酯和2-乙?；被?4-(4-氨基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺，可以如實施例12所描述的那樣制備2-乙酰基氨基-4-{4-[3-(3，4-二甲氧基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺。
LCMS(方法A)m/z＝438[M+H]+；m/z＝421[M+H]+-NH3m/z＝436[M-H]-。
保留時間(m)＝2.94。
實施例21
2-乙酰基氨基-4-{4-[3-(4-三氟甲氧基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺 使用4-(三氟甲氧基)苯基異氰酸酯和2-乙?；被?4-(4-氨基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺，可以如實施例12所描述的那樣制備2-乙酰基氨基-4-{4-[3-(4-三氟甲氧基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺。
LCMS(方法A)m/z＝462[M+H]+；m/z＝445[M+H]+-NH3m/z＝460[M-H]-。
保留時間(m)＝3.85。
實施例22
2-乙酰基氨基-4-{4-[3-(2，5-二甲氧基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺 使用2，5-二甲氧基苯基異氰酸酯和2-乙?；被?4-(4-氨基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺，可以如實施例13所描述的那樣制備2-乙?；被?4-{4-[3-(2，5-二甲氧基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺。
LCMS(方法C)m/z＝438[M+H]+。m/z＝436[M-H]-。
保留時間(m)＝3.16。
實施例23
2-乙酰基氨基-4-[4-(3-苯基脲基)苯基]-1H-吡咯-3-甲酰胺 使用苯基異氰酸酯和2-乙?；被?4-(4-氨基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺，可以如實施例13所描述的那樣制備2-乙?；被?4-[4-(3-苯基脲基)苯基]-1H-吡咯-3-甲酰胺。
LCMS(方法C)m/z＝378[M+H]+。m/z＝376[M-H]-。
保留時間(m)＝2.97。
實施例24
2-乙酰基氨基-4-{4-[3-(2-甲氧基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺 使用2-甲氧基苯基異氰酸酯和2-乙?；被?4-(4-氨基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺，可以如實施例13所描述的那樣制備2-乙?；被?4-{4-[3-(2-甲氧基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺。
LCMS(方法C)m/z＝408[M+H]+m/z＝406[M-H]- 保留時間(m)＝3.16 實施例25
2-乙?；被?4-{4-[3-(2-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺 使用2-(三氟甲基)苯基異氰酸酯和2-乙酰基氨基-4-(4-氨基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺，可以如實施例13所描述的那樣制備2-乙?；被?4-{4-[3-(2-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺。
LCMS(方法C)m/z＝446[M+H]+m/z＝444[M-H]- 保留時間(m)＝3.32 實施例26
2-乙?；被?4-[4-(3-o-甲苯基脲基)苯基]-1H-吡咯-3-甲酰胺 使用2-甲基苯基異氰酸酯和2-乙酰基氨基-4-(4-氨基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺，可以如實施例13所描述的那樣制備2-乙酰基氨基-4-[4-(3-o-甲苯基脲基)苯基]-1H-吡咯-3-甲酰胺。
LCMS(方法C)m/z＝392[M+H]+m/z＝390[M-H]- 保留時間(m)＝3.07。
實施例27
2-乙酰基氨基-4-{4-[3-(3-甲氧基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺 使用3-甲氧基苯基異氰酸酯和2-乙?；被?4-(4-氨基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺，可以如實施例13所描述的那樣制備2-乙?；被?4-{4-[3-(3-甲氧基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺。
LCMS(方法C)m/z＝408[M+H]+m/z＝406[M-H]- 保留時間(m)＝3.01 實施例28
2-乙?；被?4-{4-[3-(3-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺 使用3-(三氟甲基)苯基異氰酸酯和2-乙?；被?4-(4-氨基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺，可以如實施例13所描述的那樣制備2-乙酰基氨基-4-{4-[3-(3-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺。
LCMS(方法C)m/z＝446[M+H]+m/z＝444[M-H]- 保留時間(m)＝3.54 實施例29
2-乙?；被?4-[4-(3-m-甲苯基脲基)苯基]-1H-吡咯-3-甲酰胺使用3-甲基苯基異氰酸酯和2-乙酰基氨基-4-(4-氨基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺，可以如實施例13所描述的那樣制備2-乙?；被?4-[4-(3-m-甲苯基脲基)苯基]-1H-吡咯-3-甲酰胺。
LCMS(方法C)m/z＝392[M+H]+m/z＝390[M-H]- 保留時間(m)＝3.20 實施例30
2-乙?；被?4-{4-[3-(4-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺 使用4-(三氟甲基)苯基異氰酸酯和2-乙?；被?4-(4-氨基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺，可以如實施例13所描述的那樣制備2-乙?；被?4-{4-[3-(4-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺. LCMS(方法C)m/z＝446[M+H]+m/z＝444[M-H]- 保留時間(m)＝3.58 實施例31
2-乙酰基氨基-4-[4-(3-p-甲苯基脲基)苯基]-1H-吡咯-3-甲酰胺使用4-甲基苯基異氰酸酯和2-乙?；被?4-(4-氨基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺，可以如實施例1 3所描述的那樣制備2-乙?；被?4-[4-(3-p-甲苯基脲基)苯基]-1H-吡咯-3-甲酰胺。
LCMS(方法C)m/z＝392[M+H]+m/z＝390[M-H]- 保留時間(m)＝3.19 實施例32
2-乙?；被?4-{4-[3-(4-氯-3-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺 使用4-氯-3-(三氟甲基)苯基異氰酸酯和2-乙酰基氨基-4-(4-氨基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺，可以如實施例13所描述的那樣制備2-乙?；被?4-{4-[3-(4-氯-3-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺。
LCMS(方法C)m/z＝480[M+H]+m/z 478＝[M-H]- 保留時間(m)＝3.80 實施例33
2-乙酰基氨基-4-{4-[3-(2-氯-5-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺 使用2-氯-5-(三氟甲基)苯基異氰酸酯和2-乙?；被?4-(4-氨基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺，可以如實施例13所描述的那樣制備2-乙?；被?4-{4-[3-(2-氯-5-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺。
LCMS(方法C)m/z＝480[M+H]+m/z＝478[M-H]- 保留時間(m)＝3.82 實施例34
2-乙酰基氨基-4-{4-[3-(2-氟-3-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺 使用2-氟-3-(三氟甲基)苯基異氰酸酯和2-乙?；被?4-(4-氨基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺，可以如實施例13所描述的那樣制備2-乙?；被?4-{4-[3-(2-氟-3-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺。
LCMS(方法C)m/z＝464[M+H]+m/z＝462[M-H]- 保留時間(m)＝3.64 實施例35
2-乙酰基氨基-4-{4-[3-(3-氯-4-二氟甲氧基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺 使用3-氯-4-(di氟甲氧基)苯基異氰酸酯和2-乙?；被?4-(4-氨基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺，可以如實施例13所描述的那樣制備2-乙酰基氨基-4-{4-[3-(3-氯-4-二氟甲氧基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺。
LCMS(方法C)m/z＝478[M+H]+m/z＝476[M-H]- 保留時間(m)＝3.52 實施例36
2-乙?；被?4-{4-[3-(3，5-二甲氧基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺 使用3，5-二甲氧基苯基異氰酸酯和2-乙酰基氨基-4-(4-氨基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺，可以如實施例13所描述的那樣制備2-乙酰基氨基-4-{4-[3-(3，5-二甲氧基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺。
LCMS(方法C)m/z＝438[M+H]+m/z＝436[M-H]- 保留時間(m)＝3.07 實施例37
2-乙?；被?4-{4-[3-(3，5-二甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺 使用3，5-二甲基苯基異氰酸酯和2-乙?；被?4-(4-氨基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺，可以如實施例13所描述的那樣制備2-乙酰基氨基-4-{4-[3-(3，5-二甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺。
LCMS(方法C)m/z＝406[M+H]+m/z＝404[M-H]- 保留時間(m)＝3.43 實施例38
2-乙?；被?4-{4-[3-(2，5-二甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺 使用2，5-二甲基苯基異氰酸酯和2-乙酰基氨基-4-(4-氨基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺，可以如實施例13所描述的那樣制備2-乙?；被?4-{4-[3-(2，5-二甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺。
LCMS(方法C)m/z＝406[M+H]+m/z＝404[M-H]- 保留時間(m)＝3.29 實施例39
2-乙酰基氨基-4-{4-[3-(2-甲氧基-5-甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺 使用2-甲氧基-5-甲基苯基異氰酸酯和2-乙?；被?4-(4-氨基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺，可以如實施例13所描述的那樣制備2-乙?；被?4-{4-[3-(2-甲氧基-5-甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺。
LCMS(方法C)m/z＝422[M+H]+m/z＝420[M-H]- 保留時間(m)＝3.38 實施例40
2-乙?；被?4-{4-[3-(4-甲基-3-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺 使用3-(三氟甲基)-4-甲基苯基異氰酸酯和2-乙酰基氨基-4-(4-氨基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺，可以如實施例13所描述的那樣制備2-乙酰基氨基-4-{4-[3-(4-甲基-3-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺. 熔點＝266℃. ES+m/z＝460[M+H]+；m/z＝482[M+Na]+ 實施例41
2-乙酰基氨基-4-[4-(2，3-二氯代苯磺?；被?苯基]-1H-吡咯-3-甲酰胺 70mg(0.271mmol)2-乙酰基氨基-4-(4-氨基苯基)-1H-吡咯-3-甲酰胺和70mg(0.285mmol)2，3-二氯代苯磺酰氯在1.5cm3吡啶中的懸浮液在室溫下攪拌24小時，然后該反應(yīng)介質(zhì)減壓蒸發(fā)至干。粗制產(chǎn)物采用閃式色譜純化[洗脫劑；二氯甲烷/甲醇(97/3，以體積計)]。含有期望產(chǎn)物的餾分在減壓濃縮后，得到22mg2-乙?；被?4-[4-(2，3-二氯代苯sulphonyl氨基)苯基]-1H-吡咯-3-甲酰胺，呈淺褐色固體狀，在265℃熔化。
ES+m/z＝469[M+H]+ 化合物活性測定-實驗方案 1.FAK 采用時間分辯的熒光試驗(HTRF)測量酶自體磷酸化抑制作用，確定化合物對FAK的抑制活性。
件N-末端為用組氨酸標記的人FAK的全cDNA，克隆到桿狀丙毒表達載體pFastBac HTc中。該蛋白質(zhì)被表達，并且純化達到約70％均勻度。
這種酶(6.6μg/ml)與各種濃度的待試驗化合物，在含有10mMMgCl2、100μM Na3VO4、15μM ATP的50mM Hepes緩沖液，pH＝7.2中，在37℃培養(yǎng)1小時，測定該激酶活性。添加含有0.4mM KF、133mMEDTA、0.1％BSA的Hepes緩沖液(pH＝7.0)使酶反應(yīng)停止，再在室溫下，往這種緩沖液中添加用XL665標記的抗組氨酸抗體和酪氨酸的磷酸化單克隆抗體，該單克隆抗體是與銪穴合物(Eu-K)共軛的，進行標記1-2小時。兩個熒光基團的特征由G.Mathis等人，《癌研究》，1997，17，第3011-3014頁可得到。激發(fā)銪穴合物與受體XL665之間的能量轉(zhuǎn)移是與FAK自體磷酸化度成比例的。使用Packard Discovery平板計數(shù)器測量了XL-665特效性長時間信號。所有含量測定進行兩次，并且計算兩次含量測定結(jié)果的平均值。本發(fā)明化合物抑制FAK自體磷酸化活性表示為相對于對照的抑制百分數(shù)，該對照活性是在沒有試驗化合物存在下測定的。對于％抑制的計算結(jié)果，可看作是665nm信號/在620nm信號的比。
2.KDR 采用閃爍技術(shù)(96-孔板)，通過體外KDR酶在基質(zhì)磷酸化試驗中測定了這些化合物的抑制作用。
人的KDR酶的胞漿域以GST融合形式被克隆到桿狀丙毒表達載體pFastBac中。這種蛋白質(zhì)在SF21細胞中被表達，然后純化到約60％均勻度。
在20mM MOPS、10mM MgCl2、10mM MnCl2、1mM DTT、2.5mMEGTA、10mM b-甘油磷酸酯，pH＝7.2中，在10mM MgCl2、100μMNa3VO4、1mM NaF的存在下，測量了KDR的激酶活性。在4℃把10μl該化合物加到70μl含有100ng KDR酶的激酶緩沖液中。添加20μl含有2μg基質(zhì)(以GST融合蛋白形式表達的PLC的SH2-SH3片段)、2μCi33P[ATP]和2μM冷ATP的溶液引發(fā)這個反應(yīng)。在37℃培養(yǎng)1小時后，添加1個體積(100μl)200mM EDTA停止這個反應(yīng)。除去培養(yǎng)緩沖液，這些孔用300μl PBS洗滌三次。使用Top Count NXT(Packard)放射性計數(shù)器測量每個孔的放射性。
通過測量四個裝有放射性ATP與僅僅基質(zhì)的不同孔的放射性，測定了背景噪音。
在四個都裝有反應(yīng)物(33P-[ATP]、KDR和PLC基質(zhì))，但沒有化合物的孔中，測量了總活性的對照值。
以沒有化合物時所測定對照活性的抑制百分數(shù)表示本發(fā)明化合物的KDR活性抑制作用。
在作為抑制對照的每個平板中都包含了化合物SU5614(Calbiochem)(1μM)。
3.Tie2 使用由人胎盤分離的cDNA作為模型，通過PCR產(chǎn)生了相應(yīng)于胞內(nèi)域776-1124的氨基酸的人Tie2的編碼序列。這個序列以GST融合蛋白形式已引入到桿狀丙毒表達載體pFastBacGT中。
在PLC磷酸化試驗中，在純化到約80％均勻度的GST-Tie2的存在下，通過Tie2測定了這些分子的抑制作用。這種基質(zhì)是由以GST融合蛋白形式表達PLC的SH2-SH3片段組成的。
在含有10mM MgCl2、10mM MnCl2、1mM DTT、10mM甘油磷酸酯的20mM MOPS緩沖液(pH7.2)中測定了Tie2的激酶活性。在保持在冰上的FlashPlate 96孔板中，每個孔放入由70μl含有100ng GST-Tie2酶的激酶緩沖液組成的反應(yīng)混合物。然后添加10μl待試驗分子，它稀釋在DMSO中，最大濃度為10％。對于一定濃度，每次測量進行四次。添加20μl含有2μg GST-PLC、2μM冷ATP和1μCi 33P[ATP]的溶液引發(fā)該反應(yīng)。在37℃培養(yǎng)1小時后，加入1個體積(100μl)200mM EDTA停止該反應(yīng)。在除去培養(yǎng)緩沖液后，這些孔使用300μl PBS洗滌三次。使用Wallac MicroBeta1450測量其放射性。
計算出Tie2活性的抑制，并以沒有化合物時測量的對照活性計以抑制百分數(shù)表示。
結(jié)果表1

權(quán)利要求
1.符合下式(I)的產(chǎn)品
式中
1)A和Ar獨自選自芳基、雜芳基、雜環(huán)基、取代芳基、取代雜芳基、取代雜環(huán)基、環(huán)烷基、取代環(huán)烷基；
2)L選自NH，CO-NH，NH-CO，NH-SO2，SO2NH，NH-CH2，CH2-NH，CH2-CO-NH，NH-CO-CH2，NH-CH2-CO，CO-CH2-NH，NH-CO-NH，NH-CS-NH，NH-CO-O，O-CO-NH，CH2-NH-CO-NH，NH-CO-NH-CH2，NH-CO-CH2-CO-NH；
3)Ra選自H、烷基和環(huán)烷基；
4)R1選自H、R、COR、SO2R，式中R選自H、OR”4、NR”5R”6、(C1-C6)烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、取代雜環(huán)基、芳基、取代芳基、雜芳基、取代雜芳基，式中R”4選自H、苯基、烷基，以及式中R”5和R”6獨自選自H、R OR”4、(C1-C6)烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、取代雜環(huán)基、芳基、取代芳基、雜芳基、取代雜芳基或者R”5和R”6彼此連接構(gòu)成5-至8-鏈節(jié)飽和環(huán)，它含有0-3個選自O(shè)、S和N的雜原子；
5)R2和R5獨自選自H、鹵素、R’2，cN，O(R’2)，OC(O)(R’2)，OC(O)N(R’2)(R’3)，OS(O2)(R’2)，N(R’2)(R’3)，N＝C(R’2)(R’3)，N(R’2)C(O)(R’3)，N(R’2)C(O)O(R’3)，N(R’4)C(O)N(R’2)(R’3)，N(R’4)C(S)N(R’2)(R’3)，N(R’2)S(O2)(R’3)，C(O)(R’2)，C(O)O(R’2)，C(O)N(R’2)(R’3)，C(＝N(R’3))(R’2)，C(＝N(OR’3))(R’2)，S(R’2)，S(O)(R’2)，S(O2)(R’2)，S(O2)O(R’2)，S(O2)N(R’2)(R’3)；
式中每個R’2、R’3、R’4獨自選自H、烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、取代烷基、取代烯基、取代炔基、取代芳基、取代雜芳基、取代環(huán)烷基、取代雜環(huán)基；式中，R’2和R’3每個都不同于H時，同時存在在R2或R3上時，它們彼此連接構(gòu)成含有0-3個選自O(shè)、S和N的雜原子的環(huán)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的產(chǎn)品，其特征在于
1 A和Ar是如前面所定義的；
2) R1是H；
3) L自NHCO，NH-CO-NH，NH，NHSO2，NHCO-CH2-CONH；
4) Ra選自H和甲基；
5) R2和R5是如前面所定義的。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的產(chǎn)品，其特征在于Ar-L-A是
式中每個X1、X2、X3和X4獨自選自N和C-R’5，式中R’5具有如R2相同的定義。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的產(chǎn)品，其特征在于R’5選自H、F、Cl、甲基、NH2、OMe、OCF3和CONH2。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的產(chǎn)品，其特征在于R2和R5獨自選自H、鹵素、R’2、OR’2、NHR’2、NHCOR’2、NHCONHR’2、NHSO2R’2。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的產(chǎn)品，其特征在于R2是H。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的產(chǎn)品，其特征在于R5是H。
8.根據(jù)權(quán)利要求1-7中任一項權(quán)利要求所述的產(chǎn)品，其特征在于Ra是H.
9.根據(jù)權(quán)利要求1-8中任一項權(quán)利要求所述的產(chǎn)品，其特征在于L-A選自NH-CO-NH-A和NH-SO2-A。
10.根據(jù)權(quán)利要求1-9中任一項權(quán)利要求所述的產(chǎn)品，其特征在于A選自苯基、吡啶基、嘧啶基、噻吩基、呋喃基、吡咯基、唑基、噻唑基、異惡唑基、異噻唑基、吡唑基、咪唑基、吲哚基、吲唑基、苯并咪唑基、苯并唑基和苯并噻唑基；任選地被取代。
11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的產(chǎn)品，其特征在于A選自苯基、吡唑基和異惡唑基；任選地被取代。
12.根據(jù)權(quán)利要求10-11中任一項權(quán)利要求所述的產(chǎn)品，其特征在于A被第一取代基取代，該取代基選自烷基、鹵代烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基、O-烷基、O-芳基、O-雜芳基、S-烷基、取代S-烷基、S-芳基、S-雜芳基，每個取代基任選地被選自(C1-C3)烷基、鹵素、O-(C1-C3)烷基的取代基取代。
13.根據(jù)權(quán)利要求10-12中任一項權(quán)利要求所述的產(chǎn)品，其特征在于A被第二個取代基取代，該取代基選自F、Cl、Br、I、OH、SH、SO3M、COOM、CN、NO2、CON(R8)(R9)、N(R8)CO(R9)、(C1-C3)烷基-OH、(C1-C3)烷基-N(R8)(R9)、(C1-C3)烷基-(R10)、(C1-C3)烷基-COOH、N(R8)(R9)；式中R8和R9獨自選自H、(C1-C3)烷基、鹵代(C1-C3)烷基、(C1-C3)烷基OH、(C1-C3)烷基NH2、(C1-C3)烷基COOM、(C1-C3)烷基SO3M；式中R8和R9同時不是H時，它們連接構(gòu)成5-至7-鏈節(jié)環(huán)，它含有0-3個選自N、O和S的雜原子；式中M是H或選自Li、Na和K的堿金屬陽離子；以及式中R10是H或任選地取代非芳族雜環(huán)，它含有2-7個碳原子和1-3個選自N、O和S的雜原子。
14.根據(jù)權(quán)利要求10-13中任一項權(quán)利要求所述的產(chǎn)品，其特征在于A是苯基、吡唑基或異惡唑基，它被鹵素、(C1-C4)烷基、鹵代(C1-C3)烷基、O-(C1-C4)烷基、S-(C1-C4)烷基、鹵代O-(C1-C4)烷基和鹵代S-(C1-C4)烷基取代，并且A是雙取代時，兩個取代基可以彼此連接構(gòu)成5-至7-鏈節(jié)環(huán)，它含有0-3個選自O(shè)、N和S的雜原子。
15.根據(jù)權(quán)利要求1-14中任一項權(quán)利要求所述的產(chǎn)品，其特征在于它是
4-{4-[3-(2-氟-5-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺，
1-乙?；?2-氨基-4-{4-[3-(2-氟-5-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺，
2-甲?；被?4-{4-[3-(2-氟-5-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺，
2-異丁?；被?4-{4-[3-(2-氟-5-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺，
2-丁?；被?4-{4-[3-(2-氟-5-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺，
2-(3-環(huán)戊基丙?；被?-4-{4-[3-(2-氟-5-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺，
2-(環(huán)丙基羰基氨基)-4-{4-[3-(2-氟-5-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺，
2-叔戊酰基氨基-4-{4-[3-(2-氟-5-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺，
2-(2-二甲基氨基乙酰基氨基)-4-{4-[3-(2-氟-5-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺，
2-乙?；被?4-{6-[3-(2-氟-5-三氟甲基苯基)脲基]吡啶-3-基}-1H-吡咯-3-甲酰胺，
2-(3-乙基脲基)-4-{4-[3-(2-氟-5-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺，
2-乙?；被?4-{4-[3-(3-氟-5-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺，
2-乙?；被?4-{4-[3-(3-乙基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺，
2-乙?；被?4-{4-[3-(4-氟-3-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺，
2-乙?；被?4-{4-[3-(3-氟苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺，
2-乙酰基氨基-4-{4-[3-(4-氟苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺，
2-乙酰基氨基-4-{4-[3-(2-氟苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺，
2-乙酰基氨基-4-{4-[3-(4-二氟甲氧基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺，
2-乙酰基氨基-4-{4-[3-(3，4-二甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺，
2-乙酰基氨基-4-{4-[3-(3，4-二甲氧基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺，
2-乙?；被?4-{4-[3-(4-三氟甲氧基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺
2-乙?；被?4-{4-[3-(2，5-二甲氧基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺，
2-乙?；被?4-[4-(3-苯基脲基)苯基]-1H-吡咯-3-甲酰胺，
2-乙?；被?4-{4-[3-(2-甲氧基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺，
2-乙?；被?4-{4-[3-(2-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺，
2-乙?；被?4-[4-(3-o-甲苯基脲基)苯基]-1H-吡咯-3-甲酰胺，
2-乙?；被?4-{4-[3-(3-甲氧基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺，
2-乙?；被?4-{4-[3-(3-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺，
2-乙?；被?4-[4-(3-m-甲苯基脲基)苯基]-1H-吡咯-3-甲酰胺
2-乙?；被?4-{4-[3-(4-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺，
2-乙?；被?4-[4-(3-p-甲苯基脲基)苯基]-1H-吡咯-3-甲酰胺，
2-乙?；被?4-{4-[3-(4-氯-3-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺，
2-乙?；被?4-{4-[3-(2-氯-5-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-lH-吡咯-3-甲酰胺，
2-乙?；被?4-{4-[3-(2-氟-3-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-lH-吡咯-3-甲酰胺，
2-乙?；被?4-{4-[3-(3-氯-4-二氟甲氧基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺，
2-乙酰基氨基-4-{4-[3-(3，5-二甲氧基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺，
2-乙?；被?4-{4-[3-(3，5-二甲基苯基)脲基]苯基}-lH-吡咯-3-甲酰胺，
2-乙?；被?4-{4-[3-(2，5-二甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺，
2-乙?；被?4-{4-[3-(2-甲氧基-5-甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺，
2-乙?；被?4-{4-[3-(4-甲基-3-三氟甲基苯基)脲基]苯基}-1H-吡咯-3-甲酰胺，
2-乙?；被?4-[4-(2，3-二氯代苯磺?；被?苯基]-1H-吡咯-3-甲酰胺。
16.根據(jù)上述權(quán)利要求中任一項權(quán)利要求所述的產(chǎn)品，其特征在于它呈下述形式
1)非手性的，或
2)外消旋的，或
3)富含立體異構(gòu)體，或
4)富含對映異構(gòu)體二；
并且其特征還在于它任選地成鹽。
17.藥物組合物，它含有根據(jù)上述權(quán)利要求中任一項權(quán)利要求所述的產(chǎn)品，其與在藥學(xué)上可接受的賦形劑組合使用。
18.根據(jù)權(quán)利要求1-16中任一項權(quán)利要求所述產(chǎn)品作為激酶催化反應(yīng)的抑制劑的用途。
19.根據(jù)權(quán)利要求18所述產(chǎn)品的用途，其特征在于該激酶選自FAK、KDR和Tie2。
20.根據(jù)權(quán)利要求1-16中任一項權(quán)利要求所述產(chǎn)品在制備藥品中的用途，該藥品用于治療病理學(xué)狀態(tài)。
21.根據(jù)權(quán)利要求20所述的用途，其特征在于病理學(xué)狀態(tài)是癌。
全文摘要
取代吡咯，含有它們的組合物，制備方法與用途。本發(fā)明特別涉及取代吡咯制備方法，含有它們的組合物及其制備方法以及它們作為藥品的用途，特別作為抗癌藥品的用途。
文檔編號A61K31/40GK101115716SQ200680004457
公開日2008年1月30日 申請日期2006年2月8日 優(yōu)先權(quán)日2005年2月10日
發(fā)明者B·羅南, M·塔巴特, C·索艾勒, F·維維安尼, E·巴奎, J·-P·勒塔萊, P·德斯馬澤奧 申請人:艾文蒂斯藥品公司