專利名稱：：角膜結(jié)膜病變的預(yù)防或治療劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及以2-苯基-1，2-苯并異硒唑-3(2H)-酮或其鹽為有效成分的干眼癥、淺層點狀角膜病變(superficialpunctatekeratopathy),角膜上皮缺損、角膜糜爛、角膜潰瘍、結(jié)膜上皮缺損、千性角膜結(jié)膜炎、上輪部角膜結(jié)膜炎(superiorlimbickeratoconjunctivitis)、絲狀角膜結(jié)月莫炎(FilamentaryKeratoconjunctivitis),角膜炎、結(jié)膜炎等角膜結(jié)膜病變的預(yù)防或治療劑。
背景技術(shù)：
：角膜為直徑約lcm、厚度約lmm的透明、無血管組織，另外，結(jié)膜為覆蓋角膜緣后方的眼球表面和眼瞼背面的粘膜，角膜或結(jié)膜對視功能產(chǎn)生重要影響。如果由角膜潰瘍、角膜炎、結(jié)膜炎、干眼癥等各種疾病引起的角膜結(jié)膜病變因某種原因?qū)е滦迯?fù)延遲，或未進(jìn)行修復(fù)而遷延化，則由于角膜和結(jié)膜為相連的組織，因此對上皮的正常構(gòu)筑產(chǎn)生不良影響，甚至損傷角膜實質(zhì)或內(nèi)皮的結(jié)構(gòu)或功能。近年來，隨著細(xì)胞生物學(xué)的發(fā)展，參與細(xì)胞分裂移動.粘結(jié)伸展分化等的因子已經(jīng)被闡明，在角膜病變的修復(fù)方面，上述因子承擔(dān)重要作用(非專利文獻(xiàn)l、非專利文獻(xiàn)2)。另一方面，非專利文獻(xiàn)3中記載了2-苯基-1，2-苯并異硒唑-3(2H)-酮(常用名依布硒啉(ebselen),以下稱為"依布硒啉，，)具有抗氧化活性，專利文獻(xiàn)1記載了依布硒啉作為腦動脈硬化癥及慢性腦循環(huán)不全癥的治療劑有效。然而，尚無研究上述化合物對角膜結(jié)膜病變等眼疾病的藥理作用的報道。專利文獻(xiàn)l:特開2001-261555號乂/^艮非專利文獻(xiàn)l:臨眼，46,738-743(1992)非專利文獻(xiàn)2:眼科手術(shù)，5，719-727(1992)非專利文獻(xiàn)3:Proc.Natl.Acad.Sci.USA,100(13)，7919-7924(2003)
發(fā)明內(nèi)容研究依布硒啉的新型醫(yī)藥用途是一個非常有趣的課題。本發(fā)明人等為研究上述化合物的新型醫(yī)藥用途進(jìn)行了深入研究，發(fā)現(xiàn)在使用角膜病變模型的角膜病變治愈效力試驗等中，上述化合物或其鹽對角膜病變發(fā)揮優(yōu)良的預(yù)防及改善效果，從而完成了本發(fā)明。此外，對與依布竭啉相同地具有抗氧化作用的公知化合物也進(jìn)行了相同的試驗，與上述公知化合物相比，依布竭啉顯示相當(dāng)高的效果，證明依布硒啉具有優(yōu)異的有用性。即，本發(fā)明為含有依布硒啉或其鹽作為有效成分的干眼癥、淺層點狀角膜病變、角膜上皮缺損、角膜糜爛、角膜潰瘍、結(jié)膜上皮缺損、干性角膜結(jié)膜炎、上輪部角膜結(jié)膜炎、絲狀角膜結(jié)膜炎、角膜炎或結(jié)膜炎等角膜結(jié)膜病變的預(yù)防或治療劑。本發(fā)明的依布硒啉是下述化學(xué)結(jié)構(gòu)式[I]表示的縮合雜環(huán)化合物。另外，作為上述化合物的鹽，只要是藥學(xué)上可接受的鹽即可，沒有特殊的限制，可以舉出與鹽酸、硝酸、硫酸等無機(jī)酸形成的鹽，與乙酸、富馬酸、馬來酸、琥珀酸、酒石酸等有機(jī)酸形成的鹽等。需要說明的是，上述化合物也可以為溶劑合物的形態(tài)。本發(fā)明中，所謂角膜結(jié)膜病變是指由淚液異常、代謝異常、外部傷害等各種原因?qū)е陆悄せ蚪Y(jié)膜受損的狀態(tài)，例如可以舉出千眼癥、淺層點狀角膜病變、角膜上皮缺損、角膜糜爛、角膜潰瘍、結(jié)膜上皮缺損、干性角膜結(jié)膜炎、上輪部角膜結(jié)膜炎、絲狀角膜結(jié)膜炎、角膜炎或結(jié)膜炎等。另外，本發(fā)明中所謂干眼癥是指淚液減少癥、眼干燥癥、缺淚癥、舍格倫氏綜合征、干性角膜結(jié)膜炎、斯-約氏綜合征、淚腺功能不全、邁博姆氏腺功能不全、眼瞼炎、伴隨VDT(可見顯示末端(VisualDisplayTerminal))作業(yè)、手術(shù)、藥劑、外傷、使用隱形眼鏡等出現(xiàn)的角膜結(jié)膜病變、或伴有該角膜結(jié)膜病變的癥狀。本發(fā)明的角膜結(jié)膜病變的預(yù)防或治療劑，可以口服給藥，也可以非口服(滴眼、經(jīng)皮等)給藥。作為給藥劑型，可以舉出滴眼劑、眼軟膏、皮膚軟膏、注射劑、片劑、膠嚢劑、顆粒劑、細(xì)粒劑、散劑等?？梢圆捎贸Ｓ眉夹g(shù)制成制劑。例如，滴眼劑可以根據(jù)需要使用下述添加劑進(jìn)行配制氯化鈉、濃甘油等等滲劑；磷酸鈉、乙酸鈉等緩沖劑；聚氧乙烯脫水山梨醇單油酸酯、硬脂酸聚烴氧40酯、聚氧乙烯氫化蓖麻油等表面活性劑；檸檬酸鈉、乙二胺四乙酸鈉等穩(wěn)定劑；苯扎氯銨、對羥基苯曱酸酯等防腐劑等。pH只要在眼科制劑所允許的范圍內(nèi)即可，優(yōu)選在48的范圍內(nèi)。眼軟膏劑可以使用白色凡士林、液體石蠟等常用基質(zhì)進(jìn)行調(diào)制。另外，片劑、膠嚢劑、顆粒劑、細(xì)粒劑、散劑等口服制劑可以根據(jù)需要使用下述添加劑進(jìn)行調(diào)制乳糖、結(jié)晶纖維素、淀粉、植物油等增量劑，硬脂酸鎂、滑石等潤滑劑，羥丙基纖維素、聚乙烯基吡咯烷酮等粘合劑，羧曱基纖維素鈣、低取代羥丙甲纖維素等崩解劑，羥丙曱纖維素、聚乙二醇、硅樹脂等包衣劑，明膠涂膜等涂膜劑等。本發(fā)明還涉及給與患者藥理上有效量的2-苯基-1,2-苯并異硒唑-3(2H)-酮或其鹽的角膜結(jié)膜病變預(yù)防或治療方法。上述化合物的給藥量，可以根據(jù)癥狀、年齡、劑型等適當(dāng)選擇，如果是滴眼劑，可以l日l次凄t次、4安0.000001~1%(w/v)、伊乙選0.0001-0.1%(w/v)的劑量滴眼給藥。另外，如果為口服制劑，通?？梢詌日l次或分?jǐn)?shù)次、按O.l~5000mg、優(yōu)選l~1000mg的劑量口服給藥。如下所述，實施下述藥理試驗時，依布硒啉對角膜病變模型發(fā)揮優(yōu)良的預(yù)防及改善效果，因此可有效用作干眼癥、淺層點狀角膜病變、角膜上皮缺損、角膜糜爛、角膜潰瘍、結(jié)膜上皮缺損、干性角膜結(jié)膜炎、上輪部角膜結(jié)膜炎、絲狀角膜結(jié)膜炎、角膜炎、結(jié)膜炎等角膜結(jié)膜病變的預(yù)防或治療劑。具體實施例方式下面給出藥理試驗及制劑例的結(jié)果，這些例子用于更好地理解本發(fā)明，本發(fā)明的范圍并不限定于此。[藥理試-驗]1、使用眼窩外淚腺摘除大鼠的角膜病變的治愈效力試驗4吏用雄性SD大鼠，基于Fujihara等人的方法(Invest.Ophthalmol.Vis.Sci42(1):96-100(2001)),制作角膜病變模型。制成角膜病變模型后，利用宮田等人的方法(眼科臨床醫(yī)報，48(2)，183-188(1994))的改良方法(新眼科21(1):87-90(2004)),判定角膜病變的改善率。(實驗方法)使用雄性SD大鼠，給予戊巴比妥鈉實施全身麻醉，然后，摘除眼窩外淚腺，經(jīng)2個月誘發(fā)角膜病變。然后，如下所述地給與依布硒啉。另外，作為比4交化合物'如下所述地給與下述式[n]表示的3-甲基-i-苯基-2-p比喳p林-5-酮(以下，稱為"依達(dá)拉奉(edaravone)")、及下述式[I1I]表示的(3R)-1,2-二硫戊環(huán)-3-戊酸(以下，稱為"a-硫辛酸(a-Lipoicacid)，，)。已知依達(dá)拉奉及a-硫辛酸具有抗氧化作用(J.Radiat.Res.,45,319-323(2004)，J.Nutr.,133，3327-3330(2003)),如上所述依布竭p林也具有相同作用，/人這一點來看，依布硒啉與依達(dá)拉奉及a-石克辛酸是相同的。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>依布；西淋滴眼組在兩眼內(nèi)滴入依布硒啉(25(iM)的生理鹽水溶液，l日6次，滴眼14日(一組8只大鼠)。依達(dá)一立奉滴眼組在兩眼內(nèi)滴入依達(dá)^立奉(200jiM)的生理鹽水溶液，l日6次，滴眼14日(一組8只大鼠)。a-碌lJ辛酸滴眼組在兩眼內(nèi)滴入a-硫辛酸(200pM)的生理鹽水溶液，l日6次，滴眼14日(一組8只大鼠)。對照組中，在兩眼內(nèi)滴入生理鹽水，l日6次，滴眼14日(一組8只大鼠)。滴眼開始14日后，用熒光素將角膜的病變部分染色。按下述基準(zhǔn)分別對角膜的上部、中部及下部的熒光素染色程度進(jìn)行評分，根據(jù)上述各部分?jǐn)?shù)總和的平均值計算角膜病變的改善率。(判定基準(zhǔn))0:未一皮染色1:染色稀疏，各點狀的染色部分分離2:染色為中等程度，點狀的染色部分一部分相鄰接3:染色密集，各點狀的染色部分鄰接需要說明的是，各分?jǐn)?shù)間設(shè)0.5作為中間值。(結(jié)果)以對照組(生理鹽水)的分?jǐn)?shù)平均值為基準(zhǔn)(改善率0%),根據(jù)下面的計算式算出依布硒啉(25pM)滴眼組、依達(dá)拉奉(200(iM)及a-硫辛酸(200pM)滴眼組的改善率。上述改善率示于表l。需要說明的是，分?jǐn)?shù)的平均值為各組8例的平均值。改善率(％)={(對照組)_(給與化合物)}/病變度x100(對照組)-(正常眼)表1<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>(討論)上述使用大鼠的藥理試驗的結(jié)果表明，依布硒啉具有比依達(dá)拉奉及a-硫辛酸顯著的改善率。特別是，即使以依達(dá)拉奉及a-硫辛酸的1/8倍濃度給與依布硒啉，仍然具有依達(dá)拉奉及a-石克辛酸2倍以上的改善率，結(jié)果令人驚訝。由此表明依布硒啉對角膜結(jié)膜病變具有顯著的改善效果。2、使用SAMP10的藥理試驗才艮據(jù)平井、柴垣等人的方法(特愿2006-104913),使用促老化才莫型小鼠(Senescence-AcceleratedMouse)PIO(以下、稱為SAMPIO),評價依布硒啉對角膜病變的效果。需要說明的是，^使用顯示正常老化的SAMR1作為對照動物。(實驗方法)SAMP10隨著年齡增長發(fā)生角膜病變。因此，對確認(rèn)出現(xiàn)增齡變化之前的16周齡時的雌性SAMP10的角膜病變進(jìn)行評價，之后，開始給與依布竭啉溶液或其基劑。給藥8周后的24周齡時再次進(jìn)行相同的評價。相同地，對16周齡時的雌性SAMR1的角膜病變進(jìn)行評價，之后，開始給與所述基劑，給藥8周后的24周齡時再次進(jìn)行相同的評價。(給藥方法)將依布硒啉以0.45mg/mL及4.5mg/mL的濃度懸濁在P/。(W/V)曱基纖維素水溶液(使甲基纖維素溶解于超純水中配制而成)中，將配制成的依布硒啉溶液以每lg小鼠體重給與6.67fiL的比例，l日l次口服給與雌性SAMPIO,分別為3mg/kg組及30mg/kg組。每周給藥5天(周一、二、三、四、五)，進(jìn)行8周。作為對照組，相同地以每lg小鼠病變度=[表l〗體重給與6.67^L的比例，口服給與SAMP10小鼠P/。(W/V)曱基纖維素水溶液。另外，作為對照動物的雌性SAMR1，也相同地口服給與1%(W/V)甲基纖維素水溶液。需要說明的是，SAMP10各組的例數(shù)為22只眼(ll只小鼠)，SAMR1的例數(shù)為16只眼(8只小鼠)。(評價方法)對即將開始給藥前及開始給藥8周后的SAMP10及SAMR1的角膜病變部分進(jìn)行熒光素染色。根據(jù)"1、使用眼窩外淚腺摘除大鼠模型的角膜病變的治愈效力試驗"中記載的判定標(biāo)準(zhǔn)，分別對角膜上部、中間部分及下部的焚光素染色程度進(jìn)行評分，將上述各部的分?jǐn)?shù)相加，使角膜病變程度數(shù)值化(總計9分為滿分)。(結(jié)果)需要說明的是，表中的分值是各組的平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤差。[表2]表2<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>**p<0.01與SAMR1相比(Student的t檢驗)*p<0.05與SAMP10的基劑給藥組相比(Duimett斗全馬全)**p<0.01與SAMH1相比(Student的t才企一驗)*p<0.05與SAMP10的基劑鄉(xiāng)合藥組相比(Dunnett^r-驗)(討論)由表2可知，16周齡時，SAMR1的基劑給與組和SAMP10的基劑給與組之間沒有顯著性差異(Student的t檢驗)，SAMP10的各給藥組之間也沒有顯著性差異(Tukey檢驗)。24周齡時，SAMP10的基劑給與組與SAMR1的基劑給與組相比，染色分值顯著升高。即，可以確認(rèn)SAMP1O隨著年齡增大發(fā)生角膜病變。在此條件下，3mg/kg及30mg/kg兩個依布硒啉給藥組，與SAMP10的基劑給與組相比染色分值顯著降低。即，可以確認(rèn)依布硒啉對角膜病變具有預(yù)防及改善效果。[制劑例]以下給出使用依布硒啉的代表性制劑例。處方例l滴眼劑100ml中依布硒啉10mg氯化鈉900mg滅菌精制水適量通過改變依布竭口林的添加量，可以調(diào)制濃度為O.OOl%(w/v)、0.03%(w/v)、0.1%(w/v)、0.3%(w/v)、1.0%(w/v)的滴眼劑。處方例2滴眼劑100ml中依布石西口林100mg氯化鈉800mg石粦酸氫二鈉100mg磷酸二氫鈉適量滅菌精制水適量通過改變依布硒啉的添加量，可以調(diào)制濃度為0.05%(w/v)、0.3%(w/v)、0.5%(w/v)、1%(w/v)的滴眼劑。處方例3眼軟膏劑100g中依布竭啉0.3g液體石蠟10.0g白色凡士林適量通過改變依布竭啉的添加量可以調(diào)制濃度為1%(w/w)、3%(w/w)的眼軟膏劑。處方例4片劑100mg中依布石西啉乳糖lmg66.4mg玉米淀粉羧曱基纖維素4丐羥丙基纖維素硬脂酸鎂20mg6mg0.6mg在混合機(jī)中混合依布硒啉、乳糖，向其中加入欺甲基纖維素鉤及羥丙基纖維素，將此混合物造粒，所得顆粒干燥后進(jìn)行整粒，在此整粒顆粒中加入硬脂酸鎂進(jìn)行混合，將此混合物用打片機(jī)打片。另外，通過改變依布竭啉的添加量，可以調(diào)制100mg中含量為0.1mg、10mg、50mg的片劑。權(quán)利要求1、一種角膜結(jié)膜病變的預(yù)防或治療劑，所述角膜結(jié)膜病變的預(yù)防或治療劑含有2-苯基-1，2-苯并異硒唑-3(2H)-酮或其鹽作為有效成分。2、如權(quán)利要求1所述的預(yù)防或治療劑，其中，所述角膜結(jié)膜病變?yōu)楦裳郯Y、淺層點狀角膜病變、角膜上皮缺損、角膜糜爛、角膜潰瘍、結(jié)膜上皮缺損、干性角膜結(jié)膜炎、上輪部角膜結(jié)膜炎、絲狀角膜結(jié)膜炎、角膜炎或結(jié)膜炎。3、如權(quán)利要求1所述的預(yù)防或治療劑，其給藥方式為滴眼給藥或口服給藥。4、如權(quán)利要求1所述的預(yù)防或治療劑，其劑型為滴眼劑、眼軟膏劑、片劑、細(xì)粒劑或月交嚢劑。5、一種角膜結(jié)膜病變的預(yù)防或治療方法，所述方法為對患者給與藥理學(xué)上有效量的2_苯基-1,2-苯并異硒唑-3(2H)-酮或其鹽。6、如權(quán)利要求5所述的預(yù)防或治療方法，其中，所述角膜結(jié)膜病變?yōu)楦裳郯Y、淺層點狀角膜病變、角膜上皮缺損、角膜糜爛、角膜潰瘍、結(jié)膜上皮缺損、干性角膜結(jié)膜炎、上輪部角膜結(jié)膜炎、絲狀角膜結(jié)膜炎、角膜炎或結(jié)膜炎。7、如權(quán)利要求5所述的預(yù)防或治療方法，其給藥方式為滴眼給藥或口服給藥。8、如權(quán)利要求5所述的預(yù)防或治療方法，其中，使用滴眼劑、眼軟膏劑、片劑、細(xì)粒劑或膠嚢劑進(jìn)行給藥。9、2-苯基-1,2-苯并異硒唑-3(2H)-酮或其鹽在制備角膜結(jié)膜病變的預(yù)防或治療劑中的應(yīng)用。10、如權(quán)利要求9所述的應(yīng)用，其中，所述角膜結(jié)膜病變?yōu)楦裳郯Y、淺層點狀角膜病變、角膜上皮缺損、角膜糜爛、角膜潰瘍、結(jié)膜上皮缺損、干性角膜結(jié)膜炎、上輪部角膜結(jié)膜炎、絲狀角膜結(jié)膜炎、角膜炎或結(jié)膜炎。11、如權(quán)利要求9所述的應(yīng)用，其給藥方式為滴眼給藥或口服給藥。12、如權(quán)利要求9所述的應(yīng)用，其劑型為滴眼劑、眼軟膏劑、片劑、細(xì)粒劑或膠嚢劑。全文摘要本發(fā)明的目的在于提供2-苯基-1，2-苯并異硒唑-3(2H)-酮或其鹽的新型醫(yī)藥用途。2-苯基-1，2-苯并異硒唑-3(2H)-酮或其鹽對角膜病變模型發(fā)揮優(yōu)良的預(yù)防及改善效果，可有效用作干眼癥、淺層點狀角膜病變、角膜上皮缺損、角膜糜爛、角膜潰瘍、結(jié)膜上皮缺損、干性角膜結(jié)膜炎、上輪部角膜結(jié)膜炎、絲狀角膜結(jié)膜炎、角膜炎、結(jié)膜炎等角膜結(jié)膜病變的預(yù)防或治療劑。文檔編號A61K31/095GK101175487SQ20068001711公開日2008年5月7日申請日期2006年5月17日優(yōu)先權(quán)日2005年5月17日發(fā)明者中村雅胤,吉田篤史,平井慎一郎申請人:參天制藥株式會社