專利名稱：阿那曲唑中間體的雜質(zhì)及其應(yīng)用的制作方法
阿那曲唑中間體的雜質(zhì)及其應(yīng)用相關(guān)申請本申請要求2005年6月27日提交的美國臨時申請No.60/694,528 的權(quán)益和2006年6月27日提交的有待編號的美國專利申請的優(yōu)先權(quán)， 并入此處作為參考。發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明涉及稱為"雜質(zhì)A"的阿那曲唑中間體的雜質(zhì)及其應(yīng)用。發(fā)明背景化學(xué)名稱為1,3-苯二乙腈-a , a , oc', oc '曙四甲基-5-(lH-l,2,4-三唑-l-基甲基)并且具有以下化學(xué)結(jié)構(gòu)的阿那曲唑為芳香酶(雌激素合成酶)體系的有效和選擇性的非甾體抑 制劑，其在外周組織中將腎上腺雄激素轉(zhuǎn)化為雌激素。其用于治療晚期 或局部性晚期乳腺癌，或者在絕經(jīng)后婦女中在早期乳腺癌中作為輔助治 療。該藥物商業(yè)上可得自AstmZeneca的ARIMIDEX 。類似于任何合成化合物，阿那曲唑中可含有多種來源的外來化合物 或雜質(zhì)。其可為未反應(yīng)的起始原料、反應(yīng)的副產(chǎn)物、副反應(yīng)的產(chǎn)物或降 解產(chǎn)物。阿那曲唑或任何活性藥物組分(API)中的雜質(zhì)不合乎需要， 并且在極端情況下，甚至可能對使用含有該API的劑型治療的患者有 害?，F(xiàn)有技術(shù)中還已知的是，API中的雜質(zhì)可由API本身的降解產(chǎn)生， 其與純API在儲存期間、制造過程(包括化學(xué)合成)期間的穩(wěn)定性有關(guān)。阿那曲峻工藝雜質(zhì)包括未反應(yīng)的起始物料、起始物料中含有的雜質(zhì)的化學(xué)衍生 物、合成副產(chǎn)物和降解產(chǎn)物。除了穩(wěn)定性(其為API儲存期限的一個因素)之外，工業(yè)生產(chǎn)過程 中產(chǎn)生的API的純度顯然也是商業(yè)化的必要條件。工業(yè)生產(chǎn)過程中引入的雜質(zhì)必須限制在非常小的量，并且優(yōu)選基本上不存在。例如API制造 商的ICH Q7A手冊要求過程雜質(zhì)必須通過在制造過程中規(guī)定原料的質(zhì) 量、控制例如溫度、壓力、時間和化學(xué)計量比的過程參數(shù)，并且包括例 如結(jié)晶、蒸餾和液-液萃取的純化步驟而保持在設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)以下?；瘜W(xué)反應(yīng)的產(chǎn)品混合物很少為具有符合藥品標(biāo)準(zhǔn)的具有足夠純度 的單一化合物。副產(chǎn)物和反應(yīng)的副產(chǎn)物以及反應(yīng)中使用的附加試劑在大 多數(shù)情況下還將存在于產(chǎn)品混合物中。在API工藝的某些階段，例如(S)-否適于繼續(xù)加工，并且最終用于藥品。由于絕對純度為通常難以達到的 理想值，API不需要絕對純。相反，純度標(biāo)準(zhǔn)以確保API盡可能不含雜 質(zhì)為目的，并因而盡可能在臨床使用中安全。正如以上的討論，美國食 品與藥物管理局手冊推薦某些雜質(zhì)的量限制在低于0.1 % 。副產(chǎn)物、副反應(yīng)的產(chǎn)物，例如雜質(zhì)A和附加試劑(共同稱為"雜質(zhì)") 通常通過光譜和/或其它物理方法鑒定，然后與峰位(例如色譜中的那 些)或TLC板上的斑點有關(guān)。(Strobel p. 953, Strobel, H.A.; Hememan, W.R., Chemical Instrumentation: A Systematic Approach, 3rd dd. (Wiley & Sons: New York 1989))。此后，雜質(zhì)例如可通過其在TLC板上的相對 位置確定，并且其中板上的位置從板的基線開始以厘米測量；或者通過 其在HPLC色譜中的相對位置確定，其在色譜中的位置通常在樣品注入 柱子和特定組分通過檢測器洗脫之間以分鐘測量。色譜中的相對位置已 知為"保留時間"。保留時間可根據(jù)儀器的條件以及多種其它因素在平均值附近變 化。為了減輕這些變化在雜質(zhì)精確識別方面的影響，專業(yè)人員使用"相 對保留時間"("RRT")來確定雜質(zhì)。(Strobel p. 922 )。雜質(zhì)的RRT 為其保留時間除以參考標(biāo)記物的保留時間?？梢杂欣剡x擇API之外的 化合物，其以足以被檢測的充分大的量和足夠低而不會飽和色譜柱的量 存在或加入到混合物中，并且使用該化合物作為確定RRT的參考標(biāo)記 物。藥物制備研究與開發(fā)領(lǐng)域的熟練技術(shù)人員能夠理解的是，相對純態(tài) 的化合物可用作"參考標(biāo)準(zhǔn)"。參考標(biāo)準(zhǔn)與僅僅用于定性分析的參考標(biāo) 記物類似，然而還用于在未知混合物中確定參考標(biāo)準(zhǔn)的化合物量。當(dāng)參 考標(biāo)準(zhǔn)已知濃度的溶液和未知混合物使用相同方法分析時，參考標(biāo)準(zhǔn)為"外標(biāo)，，。(Strobel p. 924, Snyder p. 549, Snyder, L.R.; Kirkland, JJ. Introduction to Modern Liquid Chromatography, 第二版(John Wiley & Sons: New York 1979))。混合物中化合物的量可通過比較4全測器響應(yīng)程 度確定。參見美國專利6,333,198,以參考的方式并入此處。如果已經(jīng)預(yù)先確定了補償檢測器對兩個化合物敏感性差異的"響應(yīng) 因子，，，則參考標(biāo)準(zhǔn)還可用于確定混合物中另一化合物的量。(Strobel p. 894)。為此目的，參考標(biāo)準(zhǔn)直4妻加入到混合物中并且已知為"內(nèi)標(biāo)"。(Strobel p. 925, Snyder p. 552 )。在沒有考慮加入?yún)⒖紭?biāo)準(zhǔn)的情況下，當(dāng)未知混合物中使用已知為"標(biāo)準(zhǔn)添加"的工藝含有可檢測量的參考標(biāo)準(zhǔn)化合物時，參考標(biāo)準(zhǔn)可用 作內(nèi)標(biāo)。在"標(biāo)準(zhǔn)添加^支術(shù)"中，至少兩種樣品通過加入已知并且不同量的 內(nèi)標(biāo)制備。(Strobel pp. 391-393, Snyder pp. 571, 572 )。在沒有添加物 的混合物中存在的參考標(biāo)準(zhǔn)的檢測器響應(yīng)的比例可通過將檢測器響應(yīng) 對每種樣品中加入的參考標(biāo)準(zhǔn)的量繪圖確定，并且將曲線外推至參考標(biāo) 準(zhǔn)的零濃度。(例如參見Strobel,

圖11.4 p. 392 ) 。 HPLC中檢測器(例 如紫外線檢測器或折光率檢測器)的響應(yīng)可以并且通常由于從HPLC柱 中洗脫的各化合物而不同。已知的響應(yīng)因子為4全測器對從柱中洗脫的不 同化合物響應(yīng)信號差異的原因。如本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員已知的那樣，通過理解其化學(xué)結(jié)構(gòu)和合成路 徑，并且確定影響最終產(chǎn)物中雜質(zhì)量的參數(shù)，工藝雜質(zhì)的控制大大加 強。參考標(biāo)準(zhǔn)的檢測或定量用于確定API或其中間體的純度水平?；?物作為標(biāo)準(zhǔn)的使用需要依賴于基本上純化合物的樣品。發(fā)明概述本發(fā)明一方面提供新分離的雜質(zhì)A，具有下式結(jié)構(gòu)的2,3-雙-[3-(氰 基-二曱基-甲基)-5-曱基-苯基]-2-曱基-丙腈。本發(fā)明另 一方面提供了在樣品中確定某種化合物存在的方法，包括使用雜質(zhì)A作為參考標(biāo)記物進行HPLC或TLC。本發(fā)明又一方面提供在樣品中確定雜質(zhì)A存在的方法，包括使用雜 質(zhì)A作為參考標(biāo)記物進行HPLC或TLC。特別地，該方法包括(a )通過HPLC或TLC確定與含有雜質(zhì)A的參考標(biāo)記物中的雜質(zhì) A相應(yīng)的保留時間；(b) 通過HPLC或TLC確定與含有3,5-雙(2-氰基異丙基)曱苯和雜 質(zhì)A的樣品中的雜質(zhì)A相應(yīng)的保留時間；和(c) 通過比較步驟(a)的保留時間和步驟(b)的保留時間確定 樣品中雜質(zhì)A的存在。本發(fā)明 一方面提供在樣品中確定某種化合物的量的方法，包括使用 雜質(zhì)A作為參考標(biāo)準(zhǔn)進行HPLC或TLC。本發(fā)明另一方面還提供從3,5-雙(2-氰基異丙基)甲苯(雜質(zhì)A以小 于約0.10%的HPLC面積存在)制備阿那曲唑的方法，所述方法包括以 下步驟(a) 得到一批或多批3,5-雙(2-氰基異丙基)甲苯的一個或多個樣，口口 ，(b) 在每個樣品中測量雜質(zhì)A的水平；(c) 基于來自該批料中樣品的測量，從步驟(a)中選擇雜質(zhì)A水 平小于約0.10% HPLC面積的批料；和(d) 使用選擇的批料制備阿那曲唑。本發(fā)明又一方面提供了用于在5-雙(2-氰基異丙基)甲苯樣品中確定 雜質(zhì)A的存在的方法，包括將5-雙(2-氰基異丙基)甲苯樣品與水合并 以得到溶液；將所得溶液注入到100毫米x 4.6毫米HYPERSILBDS CI8 (或類似)柱中；在約35分鐘使用水(此處稱為"洗脫液A")和乙 腈(此處稱為"洗脫液B")作為洗脫液/人該柱中洗脫樣品，并使用UV 檢測器(優(yōu)選在210納米波長)測量相關(guān)樣品中的雜質(zhì)A含量。在一個實施方案中，本發(fā)明提供了含有通過本發(fā)明方法制備的阿那 曲唑和藥學(xué)上可接受的賦形劑的藥物組合物。在另一實施方案中，本發(fā)明提供了用于制備藥物制劑的方法，包括 將通過本發(fā)明方法制備的阿那曲唑與藥學(xué)上可接受的載體混合。發(fā)明詳述與3,5-雙(2-氰基異丙基)甲苯有關(guān)的術(shù)語"基本上純"指的是3,5-雙(2-氰基異丙基)甲苯含有少于約0.10% HPLC面積的雜質(zhì)A。如下所述，與阿那曲唑有關(guān)的術(shù)語"基本上純"指的是阿那曲唑含 有少于約0.10%HPLC面積的雜質(zhì)B。本發(fā)明提供一種新分離的雜質(zhì)，具有下式結(jié)構(gòu)的2,3-雙-[3-(氰基-二 甲基-甲基)-5-曱基-苯基]-2-甲基-丙腈。稱為"雜質(zhì)A"的該雜質(zhì)污染阿那曲唑中間體式1的3,5-雙(2-氰基異丙基)甲苯。CNI其可具有以下特征數(shù)據(jù)與式I的3，5-雙(2-氰基異丙基)曱苯有關(guān)的 約1.53的RRT和/或m/z峰值約為406的M/S光譜。雜質(zhì)A可使用庚烷和乙酸乙酯的混合物作為洗脫液通過柱色譜分 離。洗脫液優(yōu)選含有比例約為9:1的庚烷和乙酸乙酯。雜質(zhì)A優(yōu)選含有 約0%至約10%HPLC面積的式I的3,5-雙(2-氰基異丙基)曱苯。本發(fā)明人已經(jīng)發(fā)現(xiàn)雜質(zhì)A在制備阿那曲唑的反應(yīng)過程期間由式I的 3，5-雙(2-氰基異丙基)甲苯轉(zhuǎn)化為以下結(jié)構(gòu)的稱為"雜質(zhì)B"的污染阿那曲唑的雜質(zhì):其中R和R'獨立地可為H或1,2,4-三唑。雜質(zhì)A向雜質(zhì)B的轉(zhuǎn)化通過以 下方案說明其中R和IT可獨立i也為H或l， 2， 4-三唑 雜質(zhì)B這種轉(zhuǎn)化以這樣一種方式以致雜質(zhì)A的量與雜質(zhì)B的量非常類似。并且由于該雜質(zhì)特征在于與阿那曲唑類似的溶解度，從而難以從阿那曲 唑中分離，并且難以將其用作參考標(biāo)記物和標(biāo)準(zhǔn)。因此，將上述認識與本發(fā)明的發(fā)明人發(fā)現(xiàn)雜質(zhì)A可以更加容易和有效地從起始物質(zhì)中分離 的事實結(jié)合，使得式I的3,5-雙(2-氰基異丙基)曱苯作為參考標(biāo)記物和標(biāo) 準(zhǔn)物更加具有吸引力。本發(fā)明另外提供了確定化合物在樣品中存在的方法，包括使用雜質(zhì) A作為參考標(biāo)記物進行HPLC或TLC。本發(fā)明還提供了測定雜質(zhì)A在樣品中存在的方法，包括使用雜質(zhì)A作為參考標(biāo)記物進行HPLC或TLC。具體而言，該方法包括(a)通過HPLC或TLC確定與含有雜質(zhì)A的參考標(biāo)記物中的雜質(zhì) A相應(yīng)的保留時間；(b )通過HPLC或TLC確定與含有3,5-雙(2-氰基異丙基)曱苯和雜 質(zhì)A的樣品中的雜質(zhì)A相應(yīng)的保留時間；和(c)通過比較步驟(a)的保留時間和步驟(b)的保留時間確定 樣品中雜質(zhì)A的存在。本發(fā)明提供了確定樣品中某種化合物量的方法，包括使用雜質(zhì)A作 為參考標(biāo)準(zhǔn)進行HPLC或TLC。本發(fā)明此外提供了確定樣品中雜質(zhì)A的量的方法，包括使用雜質(zhì)A 作為參考標(biāo)準(zhǔn)進行HPLC或TLC。具體而言，該方法包括(a )通過HPLC或TLC測量在含有已知量的雜質(zhì)A的參考標(biāo)準(zhǔn)中 與雜質(zhì)A相應(yīng)的峰下面的面積；(b )通過HPLC或TLC測量在含有雜質(zhì)A和3,5-雙(2-氰基異丙基) 甲苯的^f品中與雜質(zhì)A相應(yīng)的峰下面的面積；和(c)通過比較步驟(a)的面積和步驟(b)的面積確定樣品中雜 質(zhì)A的量。本發(fā)明還提供了由含有少于約0.10%HPLC面積的雜質(zhì)A的3,5-雙 (2-氰基異丙基)甲苯制備阿那曲唑的方法，其包括以下步驟(a) 得到一批或多批3,5-雙(2-氰基異丙基)甲苯的一個或多個樣口卩，(b) 測量各個樣品中雜質(zhì)A的水平；(c) 基于各批料的樣品的測量，選擇來自步驟(a)的雜質(zhì)A含量 小于約0.10%HPLC面積的批料；和(d) 使用選擇的批料制備阿那曲唑。在步驟b)中測量的水平高于約0.10%HPLC面積的情況下，該方法另外包括通過本領(lǐng)域任何已知方式純化的步驟，包括美國臨時專利申 請60/694,528中^^開的方法，其中3,5-雙(2-氰基異丙基)曱苯從選自C6-9芳香烴和C2—8醚的溶劑中結(jié)晶。本發(fā)明提供了 一種HPLC方法，用于在3,5-雙(2-氰基異丙基)曱苯樣 品中確定雜質(zhì)A的存在及其量，包括將5-雙(2-氰基異丙基)甲苯樣品 與水混合以得到一種溶液；將所得溶液注入到100毫米x4.6毫米HYPERSIL BDS C18柱(或類似的柱)中；在約35分鐘使用水(此處 稱為"洗脫液A")和乙腈(此處稱為"洗脫液B")作為洗脫液從柱 中洗脫樣品，并且使用UV檢測器(優(yōu)選在210納米波長)測量相關(guān)樣 品中雜質(zhì)A的含量。-使用的洗脫液優(yōu)選可為洗脫液A和洗脫液B的混合物，其中它們的 比例隨著時間而變化，即為梯度洗脫液。在第O分鐘，該洗脫液含有80 %洗脫液A和20。/。洗脫液B。在第30分鐘，該洗脫液含有40%洗脫液 A和60 %洗脫液B。在第35分鐘，該洗脫液含有20 %洗脫液A和80 。/o洗脫液B,然而在第36分鐘，該洗脫液含有80。/。洗脫液A和20。/。洗 脫液B。本發(fā)明此外提供含有通過本發(fā)明方法制得的阿那曲唑和藥學(xué)上可 4妄受的賦形劑的藥物組合物。學(xué)上可接受的載體的藥物制劑的方法。雖然已經(jīng)根據(jù)某些優(yōu)選實施方案描述了本發(fā)明，考慮到說明書的描 述，其它實施方案將對本領(lǐng)域技術(shù)人員顯而易見。本發(fā)明通過以下實施 例詳細說明本發(fā)明化合物的制備。對本領(lǐng)域技術(shù)人員顯而易見的是，包 括對材料和方法的多種改變可以不離開本發(fā)明范圍而進行。實施例雜質(zhì)A的分析使用以下HPLC在3,5-雙(2-氰基異丙基)甲苯粗品中進行柱&填料HYPERSIL BDS Cl8柱；3微米，100 Catn. 28103-104630或等效物。 洗脫液A:水 洗脫液B:乙月會梯度 時間(分鐘) 0303536停止時間 35分鐘 平4軒時間 5分4中米x 4.6毫米:%洗脫液A 80 40 20 80%洗脫液B 20 60 80 20檢測器柱溫 注入稀釋劑1.0毫升/分鐘 210納米的紫外線60°C5微升乙腈流動相的組成和流速可以改變以實現(xiàn)所需的系統(tǒng)適應(yīng)性。 質(zhì)譜分析直接輸入到ESI離子源。使用的操作條件如下儀器LCQDeca(Thermofmmgan)，以陽離子才莫式4喿作樣品濃度乙腈中10-6M噴霧電壓4kV毛細管電壓13V毛細管溫度270°C已經(jīng)根據(jù)某些優(yōu)選實施方案描述了本發(fā)明，考慮到說明書的描述， 其它實施方案將對本領(lǐng)域技術(shù)人員顯而易見。本發(fā)明通過以下詳細i兌明 的實施例說明本發(fā)明組合物的制備和使用方法。對本領(lǐng)域技術(shù)人員顯而 易見的是，包括對材料和方法的多種改變可以不離開本發(fā)明范圍而進 行。以下實施例說明單個結(jié)晶試驗，其可以重復(fù)以得到相同的收率并且 純度提高直至得到最終所需純度。實施例1: 3,5-雙(2-氰基異丙基)曱苯從甲苯中結(jié)晶 4克具有初始雜質(zhì)A含量為1.93 HPLC面積百分比的3,5-雙(2-氰基 異丙基)甲苯樣品懸浮在10毫升甲苯中，并加熱到65。C,直到發(fā)生完全 溶解。然后在1小時期間內(nèi)將溶液冷卻至25°C,然后在2小時期間內(nèi)冷 卻到0。C。在0。C下30分鐘后將所得懸浮液過濾，并將濾液使用預(yù)先冷 卻到0。C的2.5毫升甲苯?jīng)_洗。以3.2克的量回收純化的3,5-雙(2-氰基異 丙基)曱苯，雜質(zhì)A含量為1.02HPLC面積百分比。實施例3: 3,5-雙(2-氰基異丙基)甲苯從甲苯中結(jié)晶和重結(jié)晶 含有0.45%雜質(zhì)A的3,5_雙(2-氰基異丙基)甲苯(50克)溶解在甲 苯(150毫升)中并加熱到65-7(TC，直到達到完全溶解。10分鐘后， 將溶液在6小時內(nèi)冷卻到25°C。在此時間后，將懸浮液在]小時內(nèi)冷卻 到-20。C,在相同溫度下攪拌30分鐘然后過濾。然后將固體用預(yù)先冷卻到-2(TC的甲苯(25毫升)洗滌。濕固體然后使用HPLC分析，顯示0.24%的雜質(zhì)A含量。將該固體 重結(jié)晶兩次以上得到具有0.07%雜質(zhì)A的3,5-雙(2-氰基異丙基)甲苯。 然后將該固體在烘箱中在5(TC干燥，直到除去全部溶劑。實施例4: 3，5-雙(2-氰基異丙基)甲苯從3體積甲苯中結(jié)晶 42克初始雜質(zhì)A含量為0.11 HPLC面積百分比的3,5-雙(2-氰基異 丙基)曱苯樣品懸浮在130毫升甲苯中，并且加熱到61°0直到產(chǎn)生完全 溶解。然后將該溶液在3小時期間內(nèi)冷卻到2VC以得到懸浮液，然后在 2小時期間內(nèi)冷卻到-20。C。 30分鐘以后在-20。C,將所得懸浮液過濾， 并將濾液用2.5毫升預(yù)先冷卻到-2(TC的甲苯?jīng)_洗。純化的3,5-雙(2-氰基 異丙基)甲苯以40.1克的量回收，具有0.06 HPLC面積百分比的雜質(zhì)A實施例4:阿那曲唑的合成將30克具有0.06 HPLC面積百分比的雜質(zhì)A的3,5_雙(2-氰基異丙 基)曱苯溶于150毫升乙腈，并加入24.8克N-溴丁二酰亞胺。將所得懸 浮液加熱至50°C30分鐘，直到得到淡黃色溶液。然后加入0.5克2,2'-偶氮二(2-甲基丙腈)，并將反應(yīng)加熱至7CTC6小時。將溶液冷卻至2(TC, 并在強烈攪拌下倒入150毫升焦亞^L酸鈉在水中的5重量％的溶液中。 然后分離有機層并且用100毫升碳酸鈉在水中的5重量％的溶液洗滌， 然后減壓除去有機溶劑直到得到90毫升的總體積。然后將所得懸浮液 加熱到5CTC，并且在30分鐘期間內(nèi)緩慢加入150毫升庚烷，將溫度升 高至70°C。然后將懸浮液冷卻至20°C,并且在燒結(jié)玻璃漏斗上過濾。 在減壓下干燥，以85 %純度(HPLC )得到54克粗品1-溴-3,5-雙(2-氰基異丙基)曱苯。B:阿那曲唑的形成16.7克1,2,4-三唑樣品在2CTC溶于52毫升NMP中，并且在1小時 內(nèi)逐份加入9.7克氫氧化鈉，同時將溫度保持在小于3VC。將溶液在20 。C攪拌18小時，然后冷卻至-30。C。在6小時內(nèi)緩慢加入40克粗品(x-溴-3,5-雙(2-氰基異丙基)甲苯在 60毫升NMP中的溶液，同時將溫度保 持在-20。C以下。在加入結(jié)束后將懸浮液在-20。C攪拌18小時，并且在此 期間，反應(yīng)通過HPLC監(jiān)測。當(dāng)起始物質(zhì)的量低于0.5%時，以足以提 供約6.5至約7的pH的量加入乙酸。將混合物緩慢加熱至20°C，然后加入120毫升甲苯、240毫升庚烷和170毫升水。將兩相體系強烈攪拌 30分鐘，然后分離有機層。然后向水相中加入240毫升水、60毫升甲 苯和120毫升庚烷，并且在有機相分離之前將體系攪拌30分鐘。然后 向水相部分加入400毫升甲苯和240毫升水，并將兩相體系攪拌1小時。 將有機層分離，并用180毫升0.05N硫酸在水中的溶液洗滌3次。最終 的有機相在減壓下在4(TC濃縮到150毫升的最終體積，并且在1小時期 間內(nèi)滴加180毫升庚烷。將懸浮液冷卻到0°C,攪拌1小時并過濾。將 粗固體在5(TC溶于390毫升2-丙醇中，并在攪拌下緩慢加入78毫升庚艇。將溶液冷卻至0。C,攪拌l小時并且過濾。將固體在55。C減壓干燥 直到得到恒重；得到具有0.06%雜質(zhì)B的純度大于99.4 HPLC面積百分 比的23.5克產(chǎn)品，并且通過DSC測量的熔點為85°C。實施例5:雜質(zhì)A的分離含有雜質(zhì)A的3，5-雙(2-氰基異丙基)曱笨樣品通過使用9:1的庚烷/ 乙酸乙酯混合物洗脫的快速柱色譜純化，并用HPLC分析組分。純度大 于90%的含有雜質(zhì)A的組分集中存儲并且真空除去溶劑，得到式I的雜 質(zhì)A (2,3-雙-[3-(氰基-二甲基-甲基)-5-曱基-苯基]-2-甲基-丙腈)。
權(quán)利要求
1.分離的下式的2，3-雙-[3-(氰基-二甲基-甲基)-5-甲基-苯基]-2-甲基-丙腈(雜質(zhì)A)
2. 權(quán)利要求1的分離的雜質(zhì)，含有約0%至約10%的3,5-雙(2-氰基異丙基)甲苯。
3. 權(quán)利要求2的分離的雜質(zhì)，其中其污染了下式I的阿那曲唑中間 體3,5-雙(2-氰基異丙基)甲苯<formula>formula see original document page 2</formula>
4. 權(quán)利要求1和權(quán)利要求2任一的分離的雜質(zhì)，特征在于與式I 的3,5-雙(2-氰基異丙基)曱苯有關(guān)的約l.53處的RRT。
5. 權(quán)利要求l-3中任意一項的分離的雜質(zhì)，特征在于在約406處具 有m/z峰的M/S光譜。
6. 確定化合物在樣品中存在的方法，包括以雜質(zhì)A作為參考標(biāo)記 物進行HPLC或TLC。
7. 根據(jù)權(quán)利要求6的方法，其中該方法用于確定樣品中雜質(zhì)A的 存在，包括以雜質(zhì)A作為參考標(biāo)記物進行HPLC或TLC。
8. 權(quán)利要求6或權(quán)利要求7任一的方法，包括(a )通過HPLC或TLC確定與含有雜質(zhì)A的參考標(biāo)記物中的雜質(zhì) A相應(yīng)的保留時間；(b )通過HPLC或TLC確定與含有3,5-雙(2-氰基異丙基)甲苯和雜 質(zhì)A的樣品中的雜質(zhì)A相應(yīng)的保留時間；和(c)通過比較步驟(a)的保留時間和步驟(b)的保留時間確定 樣品中雜質(zhì)A的存在。
9. 確定化合物在樣品中的量的方法，包括以雜質(zhì)A作為參考標(biāo)準(zhǔn) 進行HPLC或TLC。
10. 權(quán)利要求6-9中任意一項的方法，其中該方法用于確定雜質(zhì)A 在樣品中的量，包括進行HPLC或TLC,其中雜質(zhì)A被用作參考標(biāo)準(zhǔn)。
11. 權(quán)利要求6-10中任意一項的方法，包括(a )通過HPLC或TLC測量在含有已知量的雜質(zhì)A的參考標(biāo)準(zhǔn)中 與雜質(zhì)A相應(yīng)的峰下面的面積；(b )通過HPLC或TLC測量在含有雜質(zhì)A和3,5-雙(2-氰基異丙基) 甲苯的樣品中與雜質(zhì)A相應(yīng)的峰下面的面積；和(c)通過比較步驟(a)的面積和步驟(b)的面積確定樣品中雜 質(zhì)A的量。
12. 由含有少于約0.10%HPLC面積的雜質(zhì)A的3,5-雙(2-氰基異丙 基)甲苯制備阿那曲唑的方法，其包括以下步驟(a) 得到一批或多批3,5-雙(2-氰基異丙基)甲苯的一個或多個樣cr .口O ，(b) 測量各個樣品中雜質(zhì)A的水平；(c) 基于各批料的樣品的測量，選擇來自步驟(a)的雜質(zhì)A含量 小于約0.10%HPLC面積的批料；和(d) 使用選擇的批料制備阿那曲唑。
13. 權(quán)利要求12的方法，其中當(dāng)在步驟b)中測量的水平高于約 0.10%HPLC面積時，所述方法另外在步驟d之前包括純化3,5-雙(2-氰 基異丙基)曱苯。
14. 權(quán)利要求12和13中任一的方法，其中純化通過從選自Cm芳 香烴和(32_8醚的溶劑結(jié)晶3,5-雙(2-氰基異丙基)曱苯進行。
15. 用于確定3,5-雙(2-氰基異丙基)甲苯樣品中雜質(zhì)A的存在和量 的HPLC方法，包括(a) 將5-雙(2-氰基異丙基)甲苯樣品與水混合以得到溶液；(b) 將所得溶液注入到柱中；(c) 在約35分鐘使用水，洗脫液A、和乙腈，洗脫液B作為洗脫 液從柱中洗脫樣品，和(d)使用UV檢測器測量相關(guān)樣品中雜質(zhì)A的含量。
16. 權(quán)利要求15的方法，其中UV檢測器在約210納米的波長操作。
17. 權(quán)利要求15和權(quán)利要求16中任一的方法，其中使用的洗脫液 為洗脫液A和洗脫液B的混合物。
18. 權(quán)利要求15-17中任一的方法，其中洗脫液A與洗脫液B的比 隨著時間變化。
19. 權(quán)利要求15-18中任一的方法，其中在第0分鐘，該洗脫液含 有80 %洗脫液A和20 %洗脫液B;在第30分鐘，該洗脫液含有40 %洗 脫液A和60 %洗脫液B;在第35分鐘，該洗脫液含有20 %洗脫液A和 80。/。洗脫液B;并且在第36分鐘，該洗脫液含有80 %洗脫液A和20 % 洗脫液B。
20. 含有根據(jù)權(quán)利要求12-14中任一方法制備的阿那曲唑和藥學(xué)上 可接受的賦形劑的藥物組合物。
21. —種制備藥物制劑的方法，包括將根據(jù)權(quán)利要求12-14中任一 方法制備的阿那曲唑和藥學(xué)上可接受的載體混合。
全文摘要
提供了用于確定阿那曲唑中雜質(zhì)的參考標(biāo)記物和參考標(biāo)準(zhǔn)。
文檔編號A61K31/4196GK101233100SQ200680023016
公開日2008年7月30日 申請日期2006年6月27日 優(yōu)先權(quán)日2005年6月27日
發(fā)明者A·蓬蒂羅利, R·卡薩羅內(nèi) 申請人:西科爾公司