專(zhuān)利名稱(chēng)：Mek的雜環(huán)抑制劑及其使用方法
背景技術(shù)：
發(fā)明領(lǐng)域 本發(fā)明涉及一系列用于治療哺乳動(dòng)物中的過(guò)度增殖性疾病如癌癥和炎癥的新的雜環(huán)化合物。本發(fā)明還涉及使用這樣的化合物治療哺乳動(dòng)物，特別是人類(lèi)中的過(guò)度增殖性疾病的方法，以及涉及包含這樣的化合物的藥物組合物。
現(xiàn)有技術(shù)狀況描述 通過(guò)生長(zhǎng)因子受體和蛋白激酶進(jìn)行的細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)是細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖和分化的重要調(diào)節(jié)因素。在正常的細(xì)胞生長(zhǎng)中，生長(zhǎng)因子(即PDGF或EGF及其他)通過(guò)受體活化激活MAP激酶途徑。在參與正常及非受控細(xì)胞生長(zhǎng)的最重要且了解最充分的MAP激酶途徑之一是Ras/Raf激酶途徑?；钚訥TP-結(jié)合Ras導(dǎo)致Raf激酶的激活和間接磷酸化。然后，Raf在兩個(gè)絲氨酸殘基(MEK1的S218和S222，MEK2的S222和S226)上磷酸化MEK1和MEK2(Ahn等人，Methods in Enzymology，2001，332，417-431)。接著，激活的MEK使其唯一的已知底物MAP激酶ERK1和ERK2磷酸化。經(jīng)由MEK的ERK磷酸化，對(duì)于ERK1而言發(fā)生在Y204和T202上，對(duì)于ERK2而言發(fā)生在Y185和T183上(Ahn等人，Methods inEnzymology，2001，332，417-431)。磷酸化的ERK進(jìn)行二聚，然后易位至細(xì)胞核，在細(xì)胞核處積蓄(Khokhlatchev等人，Cell.1998，93，605-615)。在細(xì)胞核中，ERK參與數(shù)種重要的細(xì)胞功能，包括但不限于核轉(zhuǎn)運(yùn)、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、DNA修復(fù)、核小體裝配和易位，以及mRNA加工和翻譯(Ahn等人，Molecular Cell.2000，6，1343-1354)。總之，用生長(zhǎng)因子處理細(xì)胞導(dǎo)致ERK1及ERK2的激活，ERK1及ERK2的激活導(dǎo)致增殖以及在一些情況下導(dǎo)致分化(Lewis等人，Adv.Cancer Res.，1998，74，49-139)。
在增殖性疾病中，參與ERK激酶途徑的生長(zhǎng)因子受體、下游信號(hào)蛋白或者蛋白激酶的基因突變和/或過(guò)表達(dá)導(dǎo)致細(xì)胞非受控的增殖，并最終形成腫瘤。例如一些癌癥含有突變，該突變由于生長(zhǎng)因子持續(xù)產(chǎn)生而導(dǎo)致該途徑的持續(xù)激活。其他突變可導(dǎo)致激活的GTP-結(jié)合Ras復(fù)合物失活中的缺陷，其又導(dǎo)致MAP激酶途徑的激活。在50％的結(jié)腸癌和超過(guò)90％的胰腺癌以及許多其他類(lèi)型的癌癥中均發(fā)現(xiàn)了Ras的突變的、致癌的形式(Kohl等人，Science，1993，260，1834-1837)。最近，已在超過(guò)60％的惡性黑素瘤中鑒別出bRaf突變(Davies，H.等人，Nature，2002，417，949-954)。在bRaf中的這些突變導(dǎo)致組成性激活的MAP激酶級(jí)聯(lián)。原發(fā)性腫瘤樣品及細(xì)胞系的研究也顯示MAP激酶途徑在胰腺、結(jié)腸、肺、卵巢和腎的癌癥中的組成性激活或過(guò)度激活(Hoshino，R.等人，Oncogene，1999，18，813-822)。因此，在癌癥和由于基因突變導(dǎo)致的MAP激酶途徑過(guò)度激活之間存在密切的關(guān)聯(lián)性。
由于組成性的或過(guò)度激活的MAP激酶級(jí)聯(lián)在細(xì)胞增殖和分化中起非常重要的作用，因此認(rèn)為抑制該途徑對(duì)于過(guò)度增殖性疾病是有益的。在該途徑中，MEK是關(guān)鍵角色，因?yàn)樗赗as和Raf的下游。此外，它是引人注目的治療靶，因?yàn)镸EK磷酸化的唯一已知底物是MAP激酶，ERK1和ERK2。在一些研究中，已表明抑制MEK具有潛在的治療價(jià)值。例如已顯示小分子MEK抑制劑抑制裸鼠異種移植中的人類(lèi)腫瘤生長(zhǎng)(Sebolt-Leopold等人，Nature-Medicine，1999，5(7)，810-816；Trachet等人，AACR April 6-10，2002，Poster#5426；Tecle，H.，IBC 2nd InternationalConference of Protein Kinases，September 9-10，2002)、阻滯動(dòng)物的靜態(tài)異常性疼痛(WO 01/05390)以及抑制急性髓性白血病細(xì)胞的生長(zhǎng)(Milella等人，J.Clin.Invest.，2001，108(6)，851-859)。
MEK的小分子抑制劑已在包括美國(guó)專(zhuān)利公布2003/0232869、2004/0116710和2003/0216460以及美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)10/654,580和10/929,295中公開(kāi)，這些文獻(xiàn)的每一篇均引入本文作為參考。在最近幾年中，至少出現(xiàn)了15項(xiàng)另外的專(zhuān)利申請(qǐng)。參見(jiàn)例如美國(guó)專(zhuān)利5,525,625；WO 98/43960、WO 99/01421、WO 99/01426、WO 00/41505、WO00/42002、WO 00/42003、WO 00/41994、WO 00/42022、WO 00/42029、WO 00/68201、WO 01/68619、WO 02/06213、WO 03/077914和WO03/077855。
發(fā)明概述 本發(fā)明提供用于治療過(guò)度增殖性疾病的新的雜環(huán)化合物及其藥學(xué)可接受的鹽和前藥。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)本文所述的具有特定取代基的6-氧代-1，6-二氫噠嗪和6-氧代-1，6-二氫吡啶化合物是MEK酶的有效抑制劑。
更具體地，本發(fā)明的一個(gè)方面提供了化合物，包括其互變異構(gòu)體、代謝物、拆分的對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體、溶劑合物和藥學(xué)可接受的鹽，所述化合物具有式I
其中 R1為Cl或F； R3為H、Me、Et、OH、MeO-、EtO-、HOCH2CH2O-、HOCH2C(Me)2O-、(S)-MeCH(OH)CH2O-、(R)-HOCH2CH(OH)CH2O-、環(huán)丙基-CH2O-、HOCH2CH2-、

R7為環(huán)丙基-CH2-或C1-C4烷基，其中所述烷基任選地用一個(gè)或多個(gè)F取代； R8為Br、I或SMe；且 R9為CH3、CH2F、CHF2、CF3、F或Cl。
本發(fā)明的又一方面提供了化合物，包括其互變異構(gòu)體、代謝物、拆分的對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體、溶劑合物和藥學(xué)可接受的鹽，所述化合物具有式IV
其中 R1為Cl或F； R3為H、Me、Et、OH、MeO-、EtO-、HOCH2CH2O-、HOCH2C(Me)2O-、(S)-MeCH(OH)CH2O-、(R)-HOCH2CH(OH)CH2O-、環(huán)丙基-CH2O-、HOCH2CH2-、

R7為甲基或乙基，其中所述甲基和乙基任選地用一個(gè)或多個(gè)F取代； R8為Br、I或SMe；且 R9為H、C1-C4烷基、Cl或CN，其中所述烷基任選地用獨(dú)立地選自F或CN的一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)取代，條件是 a)當(dāng)R1為F，R8為Br，R9為H且R3為HOCH2CH2O時(shí)，則R7不能為Me或Et； b)當(dāng)R1為F，R8為I，R9為H且R3為MeO時(shí)，則R7不能為Me； c)當(dāng)R1為F，R8為Me，R9為H且R3為HOCH2CH2O時(shí)，則R7不能為Me；且 d)當(dāng)R1為F，R8為Br，R9為H且R3為環(huán)丙基-CH2O時(shí)，則R7不能為Me。
另一方面，本發(fā)明提供了式XI的化合物的兩種晶形
其中將兩種晶形稱(chēng)為1型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺和2型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺。
還提供了用于制備式XI的化合物的1型和2型的方法。
另一方面，本發(fā)明提供了抑制MEK的組合物，所述組合物包含一種或多種本發(fā)明的化合物。
本發(fā)明還提供了制備本發(fā)明的化合物的方法。
另一方面，本發(fā)明提供了使用本發(fā)明的化合物作為藥物治療由MEK介導(dǎo)的疾病或醫(yī)學(xué)病癥的方法。例如本發(fā)明提供本發(fā)明的化合物作為藥物治療哺乳動(dòng)物中過(guò)度增殖性疾病或炎性病癥的方法，所述方法包括向所述哺乳動(dòng)物給藥有效治療所述過(guò)度增殖性疾病的量的一種或多種本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽或前藥。另一方面，本發(fā)明提供了本發(fā)明的化合物，其用于制備治療過(guò)度增殖性疾病或炎性病癥的藥物。
另一方面，本發(fā)明提供了在需要治療的溫血?jiǎng)游锶缛祟?lèi)中產(chǎn)生MEK抑制作用的方法，其包括向所述動(dòng)物給藥有效量的本發(fā)明的化合物。
又一方面，本發(fā)明提供了治療或預(yù)防MEK介導(dǎo)的病癥，其包括向有此需要的人類(lèi)或動(dòng)物給藥藥物組合物，所述藥物組合物包含有效治療或預(yù)防所述MEK介導(dǎo)的病癥的量的本發(fā)明化合物或其藥學(xué)可接受的鹽或在體內(nèi)可裂解的前藥。
本發(fā)明的化合物還可有利地與其他已知的治療劑組合使用。
本發(fā)明還涉及抑制MEK的藥物組合物，所述藥物組合物包含選自本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)可接受的前藥、藥學(xué)活性代謝物或藥學(xué)可接受的鹽的有效量的化合物。
本發(fā)明的又一方面是本發(fā)明化合物在制備用于治療或預(yù)防患有MEK介導(dǎo)的疾病或醫(yī)學(xué)病癥的溫血?jiǎng)游铮瑑?yōu)選哺乳動(dòng)物，更優(yōu)選人類(lèi)中由MEK介導(dǎo)的疾病或醫(yī)學(xué)病癥的藥物中的用途。更具體地，本發(fā)明包括本發(fā)明的化合物在制備用于治療或預(yù)防哺乳動(dòng)物中過(guò)度增殖性疾病或炎性病癥的藥物中的用途。
本發(fā)明的其他優(yōu)點(diǎn)和新的特征將在下文的描述中被部分地闡述，對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言，當(dāng)閱讀下面的說(shuō)明書(shū)時(shí)這些其他優(yōu)點(diǎn)和新的特征會(huì)部分地變得顯而易見(jiàn)，或通過(guò)實(shí)踐本發(fā)明可以了解它們。通過(guò)所附的權(quán)利要求中特別指出的工具、組合、組合物和方法可以實(shí)現(xiàn)和獲得本發(fā)明的這些優(yōu)點(diǎn)。
附圖簡(jiǎn)述 引入本文并形成說(shuō)明書(shū)一部分的附圖闡明了本發(fā)明的非限制性實(shí)施方案，并和說(shuō)明書(shū)一起用于解釋本發(fā)明的原理。
在附圖中

圖1顯示用于合成化合物96的反應(yīng)路線。
圖2顯示用于合成化合物96、100、101和102的反應(yīng)路線。
圖3顯示用于合成化合物109、110和111的反應(yīng)路線。
圖4顯示用于合成化合物109、110和111的可選的反應(yīng)路線。
圖5顯示用于合成化合物119、120和121的反應(yīng)路線。
圖6顯示用于合成化合物124和125的反應(yīng)路線。
圖7顯示用于合成化合物128、129和130的反應(yīng)路線。
圖8顯示用于合成化合物145和146的反應(yīng)路線。
圖9顯示用于合成化合物145的可選的反應(yīng)路線。
圖10顯示根據(jù)實(shí)施例16A步驟3制備的2型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺的X-射線粉末衍射圖譜。
圖11顯示根據(jù)實(shí)施例16A步驟4制備的1型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺的X-射線粉末衍射圖譜。
圖12顯示根據(jù)實(shí)施例16B制備的1型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺的X-射線粉末衍射圖譜。
圖13顯示根據(jù)實(shí)施例16D制備的1型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺的X-射線粉末衍射圖譜。
圖14顯示2型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺的DSC熱分析圖。
圖15顯示1型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺的DSC熱分析圖。
發(fā)明詳述 本發(fā)明的發(fā)明化合物及其互變異構(gòu)體、代謝物、拆分的對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體、溶劑合物和藥學(xué)可接受的鹽以及前藥用于治療過(guò)度增殖性疾病。概括而言，本發(fā)明的一方面涉及起MEK抑制劑作用的本發(fā)明的化合物。
更具體地，本發(fā)明的一方面提供了化合物，包括其互變異構(gòu)體、代謝物、拆分的對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體、溶劑合物和藥學(xué)可接受的鹽，所述化合物具有式I
其中 R1為Cl或F； R3為H、Me、Et、OH、MeO-、EtO-、HOCH2CH2O-、HOCH2C(Me)2O-、(S)-MeCH(OH)CH2O-、(R)-HOCH2CH(OH)CH2O-、環(huán)丙基-CH2O-、HOCH2CH2-、

R7為環(huán)丙基-CH2-或C1-C4烷基，其中所述烷基任選地用一個(gè)或多個(gè)F取代； R8為Br、I或SMe；且 R9為CH3、CH2F、CHF2、CF3、F或Cl。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，提供了具有式IA的化合物，包括其互變異構(gòu)體、代謝物、拆分的對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體、溶劑合物和藥學(xué)可接受的鹽
其中 R1為Cl或F； R3為H、Me、OH、MeO、EtO、HOCH2CH2O、MeOCH2CH2O、HOCH2CH2CH2、

R7為環(huán)丙基-CH2-或C1-C4烷基，其中所述烷基任選地用一個(gè)或多個(gè)F取代； R8為Br、I或SMe；且 R9為CH3、CH2F、CHF2、CF3、F或Cl。
在一個(gè)實(shí)施方案中，在式I或IA的化合物中，R7為環(huán)丙基-CH2-或Me。在另一實(shí)施方案中，R9為CH3、F或Cl。
在另一實(shí)施方案中，提供了式II的化合物
或其藥學(xué)可接受的鹽，其中 R3為H、MeO、HOCH2CH2O、MeOCH2CH2O、HOCH2CH2CH2、

且 R9為H、CH3、F或Cl。
在N1位具有甲基取代基和具有特定的R3和R9基團(tuán)的式II的化合物是有效的MEK抑制劑。
本發(fā)明的具體的新化合物包括下列任何一種 4-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺； 4-(2-氟4-(甲硫基)苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺； N-(環(huán)丙基甲氧基)-4-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺； 4-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)N-(2-甲氧基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺； 4-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-N-甲氧基-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺； (S)-4-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺； 4-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺； 5-氟-4-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺； (S)-5-氟-4-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺； 5-氯-4-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺； (S)-5-氯-4-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺； 4-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-N-(3-羥基丙基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺；和 (S)-N-(2，3-二羥基丙基)-4-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺。
在另一實(shí)施方案中，提供了式III的化合物
或其藥學(xué)可接受的鹽，其中 R1為Cl或F； R3為H、Me、MeO、HOCH2CH2O、HOCH2CH2CH2、HOCH2CH2、
R8為Br或I；且 R9為CH3、F、Cl或Br。
在N1位具有甲基取代基和具有特定的R1、R3、R8和R9基團(tuán)的式III化合物是有效的MEK抑制劑。
本發(fā)明的具體的新化合物包括下列任何一種 5-溴-4-(4-溴-2-氟苯氨基)-N-(環(huán)丙基甲氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺； 4-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺； (R)-N-(2，3-二羥基丙氧基)-4-(2-氟-4-碘苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺； 4-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-甲氧基-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺； N-(環(huán)丙基甲氧基)-4-(2-氟-4-碘苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺； (S)-4-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺； 4-(2-氯-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺； (S)-4-(2-氯-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺； 4-(4-溴-2-氯苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺； (S)-4-(4-溴-2-氯苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺； 4-(4-溴-2-氟苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺； (R)-4-(4-溴-2-氟苯氨基)-N-(2，3-二羥基丙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺； 4-(4-溴-2-氟苯氨基)-N-(1-羥基-2-甲基丙烷-2-基氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺； 4-(2-氟-4-碘苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺； 4-(4-溴-2-氟苯氨基)-5-氟-N-(2-羥基乙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺； 4-(2-氟-4-碘苯氨基)-N，1，5-三甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺； N-(環(huán)丙基甲基)-4-(2-氟-4-碘苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺； 4-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(3-羥基丙基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺； 5-氟-4-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺； 4-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺； N-(2，3-二羥基丙基)-4-(2-氟-4-碘苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺； 5-氯-4-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺； (S)-5-氯-4-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺； 5-氯-4-(2-氟-4-碘苯氨基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺； 5-氯-N-(2，3-二羥基丙基)-4-(2-氟-4-碘苯氨基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺； (S)-N-(2，3-二羥基丙基)-4-(2-氟-4-碘苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺；和 (S)-5-氯-N-(2，3-二羥基丙基)-4-(2-氟-4-碘苯氨基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺。
本發(fā)明的具體的新化合物還包括下列化合物 4-(4-溴-2-氟苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺；和 (S)-4-(4-溴-2-氟苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺。
本發(fā)明的再一方面提供了化合物，包括其互變異構(gòu)體、代謝物、拆分的對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體、溶劑合物和藥學(xué)可接受的鹽，所述化合物具有式IV
其中 R1為Cl或F； R3為H、Me、Et、OH、MeO-、EtO-、HOCH2CH2O-、HOCH2C(Me)2O-、(S)-MeCH(OH)CH2O-、(R)-HOCH2CH(OH)CH2O-、環(huán)丙基-CH2O-、HOCH2CH2-、

R7為甲基或乙基，其中所述甲基和乙基任選地用一個(gè)或多個(gè)F取代； R8為Br、I或SMe；且 R9為H、C1-C4烷基、Cl或CN，其中所述烷基任選地用獨(dú)立地選自F或CN的一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)取代，條件是 a)當(dāng)R1為F，R8為Br，R9為H且R7為Me或Et時(shí)，則R3不能為HOCH2CH2O； b)當(dāng)R1為F，R8為I，R9為H且R3為MeO時(shí)，則R7不能為Me； c)當(dāng)R1為F，R8為Me，R9為H且R3為HOCH2CH2O時(shí)，則R7不能為Me；且 d)當(dāng)R1為F，R8為Br，R9為H且R3為環(huán)丙基-CH2O時(shí)，則R7不能為Me。
在一個(gè)實(shí)施方案中的式IV的化合物中，R9為H、Me、Et、Cl或CN。
在一個(gè)實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明的化合物具有式V
或其藥學(xué)可接受的鹽，其中 R3為HOCH2CH2O或(S)-MeCH(OH)CH2O；且 R9為H、CH3、F或Cl，條件是當(dāng)R1為F、R8為SMe、R9為Cl且R7為Me時(shí)，則R3不能為HOCH2CH2O。
R3為HOCH2CH2O或(S)-MeCH(OH)CH2O的式V的化合物是有效的MEK抑制劑。
本發(fā)明的具體的新化合物包括下列任何一種 2-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺； (S)-2-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺； 2-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺； (S)-2-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺； 5-氟-2-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺； (S)-5-氟-2-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺；和 (S)-5-氯-2-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物具有式VI
或其藥學(xué)可接受的鹽，其中 R1為Cl或F； R3為H、HOCH2CH2O或(S)-MeCH(OH)CH2O；且 R9為H、Me、F或Cl。
其中R1為Cl、R3為HOCH2CH2O或(S)-MeCH(OH)CH2O且R9為H的式VI的化合物是有效的MEK抑制劑。
其中R1為F、R3為H且R9為Me的式VI的化合物是有效的MEK抑制劑。
其中R3為HOCH2CH2O或(S)-MeCH(OH)CH2O的式VI的化合物是有效的MEK抑制劑。
其中R1為F、R3為HOCH2CH2O且R9為Me的式VI的化合物是有效的MEK抑制劑并也具有良好的溶解性。在用于本文時(shí)，術(shù)語(yǔ)“良好的溶解性”指通過(guò)實(shí)施例C的方法測(cè)定時(shí)，溶解度大于50μg/mL，例如溶解度為約50至270μg/mL的化合物。
根據(jù)本發(fā)明的式VI的具體的新化合物包括下列任何一種 2-(2-氯-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺； (S)-2-(2-氯-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺； 2-(2-氟-4-碘苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺； 2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺； (S)-2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺； (S)-2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺； 2-(2-氯-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺； 5-氯-2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺； (S)-2-(2-氯-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺； (S)-5-氯-2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺； 5-氟-2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺；和 (S)-5-氟-2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺。
在另一實(shí)施方案中，提供了其中R1為F、R3為HOCH2CH2O且R9為甲基的式VI的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽。
發(fā)現(xiàn)式XI的化合物
能夠以?xún)煞N晶形存在，在下文中稱(chēng)為1型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺和2型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺，2型可以轉(zhuǎn)化為1型。
如實(shí)施例16E和16F中所述，使用X-射線粉末衍射分析和差示掃描量熱法分析式XI的化合物的特定晶形的樣品。
當(dāng)說(shuō)本發(fā)明涉及式XI的化合物的晶形時(shí)，通過(guò)X-射線粉末衍射數(shù)據(jù)測(cè)定的結(jié)晶度適宜地大于約60％，更適宜地大于約80％，優(yōu)選地大于約90％且更優(yōu)選地大于約95％。
根據(jù)本發(fā)明的又一方面，提供了基本上為2型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺形式的式XI的化合物的晶形。
根據(jù)本發(fā)明的又一方面，提供了基本上為1型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺形式的式XI的化合物的晶形。
2型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺形式的式XI的化合物的X-射線衍射圖譜在2θ角度為約9.5和12.6處具有特征峰。根據(jù)本發(fā)明的再一方面，提供了2型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺形式的式XI的化合物，其X-射線衍射圖譜在2θ角度為約9.5、12.6、14.7和19.6處具有特征峰。
2型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺的X-射線衍射圖譜基本上如下文圖10所示，其在大約表A中所示的位置具有特征峰[按2θ角度]。
表A 1型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺形式的式XI的化合物的X-射線衍射圖譜在2θ角度為約9.2和13.0處具有特征峰。根據(jù)本發(fā)明的又一方面，提供了1型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺形式的式XI的化合物，其X-射線衍射圖譜在2θ角度為約9.2、13.0、18.3、21.0和21.7處具有特征峰。
1型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺的X-射線衍射圖譜基本上如下文圖11或12所示，其在大約表B中所示的位置具有特征峰[按2θ角度]。
表B 如上所述，取決于使用的測(cè)量條件，XRPD衍射圖中的峰強(qiáng)度可能顯示一些可變性。因此，在表A和B以及下文引用時(shí)，沒(méi)有用數(shù)字說(shuō)明相對(duì)強(qiáng)度。而是使用下列強(qiáng)度定義
其中相對(duì)強(qiáng)度源自用可變狹縫測(cè)量的X-射線衍射圖譜。
圖13顯示根據(jù)實(shí)施例16D制備的1型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺的X-射線粉末衍射圖譜。
會(huì)清楚的是，表A和B省略了圖10至13的X-射線衍射圖譜中存在的一些較小的峰。
2型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺形式的式XI的化合物的X-射線衍射圖譜基本上如圖10所示。
1型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺形式的式XI的化合物的X-射線衍射圖譜基本上如圖11或12所示。
在定義2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺的晶形的X-射線粉末衍射峰的前述段落中，表述“…在2θ角度為約…”中所用的術(shù)語(yǔ)“為約”指峰的確切位置(即所引用的2θ角度值)，不應(yīng)被理解為絕對(duì)值，因?yàn)楸绢I(lǐng)域技術(shù)人員會(huì)理解，在一臺(tái)機(jī)器與另一臺(tái)機(jī)器之間、一份樣品與另一份樣品之間，或者由于所用測(cè)量條件的輕微變化，峰的確切位置可能輕微變化。前述段落中還說(shuō)明，2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺的晶形所提供的X-射線粉末衍射圖譜“基本上”與圖10至13中所示的X-射線粉末衍射圖譜相同，并且基本上具有表A和B中分別顯示的大部分主峰(2θ角度值)。應(yīng)該理解，在上下文中使用術(shù)語(yǔ)“基本上”也意在指示，在一臺(tái)機(jī)器與另一臺(tái)機(jī)器之間、一份樣品與另一份樣品之間，或者由于所用測(cè)量條件的輕微變化，X-射線粉末衍射圖譜的2θ角度值可能輕微變化，所以附圖中所示或表A和B引用的峰位置也不應(yīng)被理解為絕對(duì)值。
本文公開(kāi)了制備1型或2型的式XI的化合物的方法。
在一方面，用于制備基本上為1型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺形式的式XI的化合物的方法包括 a)將2-(2-氟4-碘苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸(2-乙烯氧基乙氧基)酰胺與酸性混合物接觸足夠的時(shí)間，以將該化合物轉(zhuǎn)化為2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺； b)使來(lái)自步驟a)的物質(zhì)從包含1型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺晶種的有機(jī)溶劑中結(jié)晶；和 c)分離所述1型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺。
在一方面，步驟a)中的酸性混合物可以是無(wú)機(jī)酸或有機(jī)酸。在另一方面，步驟a)可以在兩相含水酸-乙酸乙酯溶劑體系中進(jìn)行。在一方面，步驟b)的有機(jī)溶劑為乙酸乙酯。
在另一方面，用于制備基本上為1型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺形式的式XI的化合物的方法包括 a)將2型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺與少量的1型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺在有機(jī)溶劑中攪拌；和 b)分離1型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺。
在一方面，用于步驟a)的1型物質(zhì)的量為約5重量％。
在另一方面，步驟a)在稍高于環(huán)境溫度，例如從約50至60℃的溫度在乙酸乙酯中進(jìn)行。
在另一方面，本發(fā)明提供了制備基本上為2型的權(quán)利要求1的2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺形式的式XI的化合物的方法，其包括 a)將2-(2-氟-4-碘苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸(2-乙烯氧基乙氧基)酰胺與酸性混合物接觸足夠的時(shí)間，以將該化合物轉(zhuǎn)化為2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺； b)使來(lái)自步驟a)的物質(zhì)從有機(jī)溶劑中結(jié)晶；和 c)分離2型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺。
在一方面，步驟b)的有機(jī)溶劑包含2型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺的晶種。步驟a)的酸性混合物可以是無(wú)機(jī)酸或有機(jī)酸，并且步驟a)可以在有機(jī)溶劑如THF中進(jìn)行。在一方面，步驟b)的有機(jī)溶劑可以選自乙酸乙酯和甲基異丁基酮，兩者任選地存在異己烷。
本發(fā)明的某些化合物可以作為兩種或更多種互變異構(gòu)體的形式存在?！盎プ儺悩?gòu)體”是兩種或更多種結(jié)構(gòu)同分異構(gòu)體中的一種，所述結(jié)構(gòu)同分異構(gòu)體存在于平衡狀態(tài)中并易于從一種異構(gòu)體形式轉(zhuǎn)化為另一種，例如通過(guò)氫從相同分子內(nèi)的一個(gè)位置移動(dòng)到另一個(gè)位置而形成的結(jié)構(gòu)?；衔锏钠渌プ儺悩?gòu)形式可以經(jīng)由例如烯醇化/去烯醇化等互換。因此，本發(fā)明包括本發(fā)明化合物的所有互變異構(gòu)形式的制備。
本發(fā)明的化合物可能具有一個(gè)或多個(gè)不對(duì)稱(chēng)中心；因此這些化合物可以被制備為單個(gè)(R)-或(S)-立體異構(gòu)體或其混合物。除非另外說(shuō)明，說(shuō)明書(shū)和權(quán)利要求中具體化合物的描述或命名意指包括單個(gè)對(duì)映異構(gòu)體以及它們的非對(duì)映異構(gòu)體混合物、外消旋體或其他。因此，本發(fā)明還包括本發(fā)明化合物的所有這樣的異構(gòu)體，包括非對(duì)映異構(gòu)體混合物和拆分的對(duì)映異構(gòu)體?；谒鼈兊奈锢砘瘜W(xué)差異，通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法例如通過(guò)色譜法或分步結(jié)晶，可將非對(duì)映異構(gòu)體混合物分離成它們的單個(gè)非對(duì)映異構(gòu)體?？梢匀缦路蛛x對(duì)映異構(gòu)體通過(guò)與合適的旋光化合物(如醇)反應(yīng)將對(duì)映異構(gòu)體混合物轉(zhuǎn)化為非對(duì)映異構(gòu)體混合物，分離非對(duì)映異構(gòu)體并將單個(gè)非對(duì)映異構(gòu)體轉(zhuǎn)化(如水解)為相應(yīng)的純的對(duì)映異構(gòu)體。立體化學(xué)的測(cè)定方法和立體異構(gòu)體的分離方法在本領(lǐng)域中是公知的(參見(jiàn)“Advanced Organic Chemistry”，第四版，J.March，John Wiley andSons，New York，1992中第四章的討論)。
本發(fā)明還包括含有本發(fā)明的化合物的藥物組合物以及通過(guò)給藥本發(fā)明的化合物治療增殖性疾病或異常細(xì)胞生長(zhǎng)的方法。具有游離氨基、酰氨基、羥基或羧基的本發(fā)明化合物可轉(zhuǎn)化為藥學(xué)可接受的前藥。
“前藥”是在生理?xiàng)l件下或者通過(guò)溶劑分解可被轉(zhuǎn)化成特定化合物或者這樣的化合物的藥學(xué)可接受的鹽的化合物。前藥包括其中氨基酸殘基或者兩個(gè)或更多個(gè)(如2、3或4個(gè))氨基酸殘基的多肽鏈通過(guò)酰胺或酯鍵共價(jià)地與本發(fā)明化合物的游離氨基、羥基或羧酸基團(tuán)連接的化合物。氨基酸殘基包括但不限于20種通常用三個(gè)字母符號(hào)表示的天然存在的氨基酸，而且還包括4-羥脯氨酸、羥賴(lài)氨酸、鎖鏈素(demosine)、異鎖鏈素(isodemosine)、3-甲基組氨酸、正纈氨酸、β-丙氨酸、γ-氨基丁酸、瓜氨酸(cirtulline)、高半胱氨酸、高絲氨酸、鳥(niǎo)氨酸和甲硫氨酸砜。本發(fā)明的一種優(yōu)選的前藥是與纈氨酸殘基共價(jià)連接的本發(fā)明化合物。
還包括其他類(lèi)型的前藥。例如游離的羧基可衍生作酰胺或烷基酯。作為另一個(gè)實(shí)例，可以通過(guò)將羥基轉(zhuǎn)化為磷酸酯、半琥珀酸酯、二甲基氨基乙酸酯或磷酰氧基甲氧羰基而將含有游離羥基的本發(fā)明化合物衍生為前藥，如Advanced Drug Delivery Reviews，1996，19，115中所述。還包括羥基和氨基的氨基甲酸酯前藥，以及羥基的碳酸酯前藥、磺酸酯前藥和硫酸酯前藥。還包括羥基衍生作(酰氧基)甲基和(酰氧基)乙基醚，其中所述?；梢允峭榛ィ芜x地被包括但不限于醚、胺和羧酸官能團(tuán)的基團(tuán)取代，或者其中所述?；侨缟纤龅陌被狨?。這一類(lèi)型的前藥在J.Med.Chem.，1996，39，10中有描述。更多具體實(shí)例包括用例如以下的基團(tuán)替代醇基團(tuán)中的氫原子(C1-C6)烷酰氧基甲基、1-((C1-C6)烷酰氧基)乙基、1-甲基-1-((C1-C6)烷酰氧基)乙基、(C1-C6)烷氧羰基氧基甲基、N-(C1-C6)烷氧羰基氨甲基、琥珀?；?C1-C6)烷?；?、α-氨基(C1-C4)烷?；⒎减；挺?氨?；颚?氨?；?α-氨酰基，其中每個(gè)α-氨酰基獨(dú)立地選自天然L-氨基酸、P(O)(OH)2、-P(O)(O(C1-C6)烷基)或糖基(由去除半縮醛形式碳水化合物的羥基得到的基團(tuán))。
游離胺還可衍生作酰胺、磺酰胺或磷酰胺。例如，可以通過(guò)用例如如下基團(tuán)替代胺基團(tuán)中的氫原子來(lái)形成前藥R-羰基、RO-羰基、NRR-羰基，其中R和R′各自獨(dú)立地為(C1-C10)烷基、(C3-C7)環(huán)烷基、芐基，或者R-羰基為天然α-氨?；蛱烊沪?氨酰基-天然α-氨?；?；-C(OH)C(O)OY，其中Y為H、(C1-C6)烷基或芐基；-C(OY0)Y1，其中Y0為(C1-C4)烷基，Y1為(C1-C6)烷基、羧基(C1-C6)烷基、氨基(C1-C4)烷基或單-N-或二-N，N-(C1-C6)烷基氨基烷基；-C(Y2)Y3，其中Y2為H或甲基，Y3為單N-或二-N，N-(C1-C6)烷基氨基、嗎琳代、哌啶-1-基或吡咯烷-1基。
所有這些前藥基團(tuán)均可引入包括但不限于醚、胺和羧酸官能團(tuán)的基團(tuán)。
可以使用本領(lǐng)域已知的常規(guī)技術(shù)鑒別本發(fā)明化合物的前藥。前藥的多種形式在本領(lǐng)域中是已知的。這樣的前藥衍生物的實(shí)例參見(jiàn)例如a)Design of Prodrugs，由H.Bundgaard編輯(Elsevier，1985)和Methods inEnzymology，Vol.42，p.309-396，由K.Widder等人編輯(Academic Press，1985)；b)A Textbook of Drug Design and Development，由Krogsgaard-Larsen和H.Bundgaard編輯，第5章″Design and Application of Prodrugs，″by H.Bundgaard p.113-191(1991)；c)H.Bundgaard，Advanced Drug DeliveryReviews，8，1-38(1992)；d)H.Bundgaard等人，Journal of PharmaceuticalSciences，77285(1988)；和e)N.Kakeya等人，Chem.Pharm.Bull.，32692(1984)，上述各文獻(xiàn)被特別引入本文作為參考。
此外，本發(fā)明還包括本發(fā)明化合物的溶劑合物、代謝物和藥學(xué)可接受的鹽。
術(shù)語(yǔ)“溶劑合物”指分子和一種或多種溶劑分子的聚集體。
“代謝物”是特定化合物或其鹽通過(guò)在體內(nèi)代謝而產(chǎn)生的藥學(xué)活性產(chǎn)物。這樣的產(chǎn)物可以來(lái)自例如所給藥的化合物的氧化、還原、水解、酰胺化、去酰胺化、酯化、去酯化、酶裂解等。因此，本發(fā)明包括本發(fā)明化合物的代謝物，包括通過(guò)如下方法產(chǎn)生的化合物，該方法包括使本發(fā)明的化合物與哺乳動(dòng)物接觸一段足夠的時(shí)間以獲得其代謝產(chǎn)物。
通常如下鑒別代謝物制備本發(fā)明化合物的放射標(biāo)記的(例如14C或3H)同位素，以可檢測(cè)的劑量(例如大于約0.5mg/kg)將其向動(dòng)物如大鼠、小鼠、豚鼠、猴子或人類(lèi)進(jìn)行非經(jīng)腸的給藥，經(jīng)過(guò)足夠的時(shí)間使代謝發(fā)生(通常為約30秒至30小時(shí))，再?gòu)哪颉⒀夯蚱渌飳W(xué)樣品中分離其轉(zhuǎn)化產(chǎn)物。這些產(chǎn)物是易于分離的，因?yàn)樗鼈兪墙?jīng)標(biāo)記的(通過(guò)使用能夠在代謝物中保存下來(lái)的抗體分離其他產(chǎn)物)。以常規(guī)方式，例如通過(guò)MS、LC/MS或NMR分析確定代謝物結(jié)構(gòu)。通常，以與本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的常規(guī)藥物代謝研究相同的方式完成代謝物的分析。只要沒(méi)有在體內(nèi)以其他方式發(fā)現(xiàn)所述代謝物，它們就在本發(fā)明化合物的治療劑量的診斷測(cè)定法中有用。
除非另外說(shuō)明，如本文所用的“藥學(xué)可接受的鹽”包括保留特定化合物的游離酸和游離堿的生物學(xué)有效性的鹽，并且該鹽不是生物學(xué)或其他方面不合意的。本發(fā)明的化合物可具有足夠酸性的官能團(tuán)、足夠堿性的官能團(tuán)或這兩種官能團(tuán)均具有，并因此與許多無(wú)機(jī)或有機(jī)堿以及無(wú)機(jī)和有機(jī)酸反應(yīng)以形成藥學(xué)可接受的鹽。藥學(xué)可接受的鹽的實(shí)例包括通過(guò)本發(fā)明的化合物與無(wú)機(jī)或有機(jī)酸或者無(wú)機(jī)堿反應(yīng)制備的鹽，這些鹽包括硫酸鹽、焦硫酸鹽、硫酸氫鹽、亞硫酸鹽、亞硫酸氫鹽、磷酸鹽、磷酸一氫鹽、磷酸二氫鹽、偏磷酸鹽、焦磷酸鹽、氯化物、溴化物、碘化物、乙酸鹽、丙酸鹽、癸酸鹽、辛酸鹽、丙烯酸鹽、甲酸鹽、異丁酸鹽、己酸鹽、庚酸鹽、丙炔酸鹽、草酸鹽、丙二酸鹽、琥珀酸鹽、辛二酸鹽、癸二酸鹽、延胡索酸鹽、馬來(lái)酸鹽、丁炔-1，4-二酸鹽、己炔-1，6-二酸鹽、苯甲酸鹽、氯苯甲酸鹽、甲基苯甲酸鹽、二硝基苯甲酸鹽、羥基苯甲酸鹽、甲氧基苯甲酸鹽、鄰苯二甲酸鹽、磺酸鹽、二甲苯磺酸鹽、苯乙酸鹽、苯丙酸鹽、苯丁酸鹽、檸檬酸鹽、乳酸鹽、γ-羥基丁酸鹽、乙醇酸鹽、酒石酸鹽、甲磺酸鹽、丙磺酸鹽、萘-1-磺酸鹽、萘-2-磺酸鹽和扁桃酸鹽。因?yàn)楸景l(fā)明的單個(gè)化合物可以包含一個(gè)以上的酸性或堿性基團(tuán)，所以本發(fā)明的化合物在單個(gè)化合物中可以包含單、二或三鹽。
如果本發(fā)明的化合物為堿，可根據(jù)本領(lǐng)域中已有的任何適當(dāng)?shù)姆椒ㄖ苽淦谕乃帉W(xué)可接受的鹽，例如用酸性化合物，特別是無(wú)機(jī)酸如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等，或者用有機(jī)酸如乙酸、馬來(lái)酸、琥珀酸、扁桃酸、延胡索酸、丙二酸、丙酮酸、草酸、乙醇酸、水楊酸、吡喃糖苷酸如葡糖醛酸或半乳糖醛酸、α-羥基酸如檸檬酸或酒石酸、氨基酸如天冬氨酸或谷氨酸、芳族酸如苯甲酸或肉桂酸、磺酸如對(duì)甲苯磺酸或乙磺酸等處理游離堿。
如果本發(fā)明的化合物為酸，可通過(guò)任何適當(dāng)?shù)姆椒?，例如用無(wú)機(jī)堿或有機(jī)堿處理游離酸來(lái)制備期望的藥學(xué)可接受的鹽。優(yōu)選的無(wú)機(jī)鹽是用堿金屬或堿土金屬如鋰、鈉、鉀、鋇和鈣形成的鹽。優(yōu)選的有機(jī)堿鹽包括例如銨、二芐基銨、芐基銨、2-羥基乙基銨、雙(2-羥基乙基)銨、苯基乙基芐胺、二芐基乙二胺等鹽。酸性基團(tuán)的其他鹽可以包括例如與普魯卡因、奎寧和N-甲基葡糖胺形成的鹽，以及與堿性氨基酸如甘氨酸、鳥(niǎo)氨酸、組氨酸、苯基甘氨酸、賴(lài)氨酸和精氨酸形成的鹽。
本發(fā)明提供制備本發(fā)明化合物的方法作為本發(fā)明的另外特征。本發(fā)明的化合物可使用如下所述的反應(yīng)路線和合成路線，采用本領(lǐng)域已有的技術(shù)，使用容易獲得或可以通過(guò)本領(lǐng)域已知的方法合成的原料進(jìn)行制備。
制備本發(fā)明的化合物的圖解顯示在圖1-7中。
化合物96的制備示于圖1中。取代的肼28可以通過(guò)兩步操作轉(zhuǎn)化為亞聯(lián)氨基丙二酸酯29。在第一步中，肼28與丙酮酸乙酯在標(biāo)準(zhǔn)脫水條件下縮合，例如在MgSO4的存在下，在合適的有機(jī)溶劑如氯仿或二氯甲烷中，在0℃至環(huán)境溫度的范圍內(nèi)。在第二步中，通過(guò)用堿在低溫下，在合適的有機(jī)溶劑如THF、DMF、二噁烷或MeCN中處理，然后加入甲基丙二酰氯實(shí)現(xiàn)?；?。在一個(gè)實(shí)施方案中，用于THF中的LiH在0℃處理腙，然后加入甲基丙二酰氯并溫?zé)岬绞覝亍Ａu基噠嗪酮31由亞聯(lián)氨基丙二酸酯29通過(guò)在強(qiáng)堿性條件下環(huán)化然后脫羧來(lái)制備。環(huán)化可以通過(guò)用強(qiáng)堿如DBU、LDA或NaH在合適的有機(jī)溶劑如THF或MeCN中，在室溫下處理亞聯(lián)氨基丙二酸酯29實(shí)現(xiàn)。在一個(gè)實(shí)施方案中，用于MeCN中的DBU在室溫下實(shí)現(xiàn)環(huán)化?？梢酝ㄟ^(guò)在濃HCl的存在下，在合適的有機(jī)溶劑如二噁烷或萘烷或二噁烷/萘烷混合物中將吡嗪酮甲酯部分(methyl esterpyrazinone moiety)加熱到高溫實(shí)現(xiàn)脫羧以形成羥基噠嗪酮31。羧酸94可以由羥基噠嗪酮31在兩步過(guò)程中制備，即氯化然后氧化。氯化步驟可以通過(guò)用POCl3、亞硫酰氯、草酰氯或PCl5處理來(lái)實(shí)現(xiàn)。在一個(gè)實(shí)施方案中，該轉(zhuǎn)化用純的POCl3在高溫(～85℃)下實(shí)現(xiàn)。在氯化步驟后，羧酸94可以通過(guò)在標(biāo)準(zhǔn)條件下氧化來(lái)制備，包括但不限于于水中的KMnO4，于有機(jī)溶劑如二噁烷、二甲苯或吡啶中的SeO2，于H2SO4水溶液中的NaOCl/RuCl3、CrO3，于水中的K2Cr2O7和Na2Cr2O7。在一個(gè)實(shí)施方案中，該轉(zhuǎn)化用K2Cr2O7-H2SO4實(shí)現(xiàn)。羧酸94可以在兩步操作中轉(zhuǎn)化為噠嗪酮酯95，其包括將噠嗪酮酸94酯化，然后進(jìn)行鈀介導(dǎo)的交叉偶聯(lián)反應(yīng)。酯化可以在標(biāo)準(zhǔn)條件下進(jìn)行，包括但不限于于MeOH中的濃HCl，于MeOH中的TMSCl或于合適的有機(jī)溶劑如乙醚/MeOH、THF/MeOH或PhMe/MeOH中的TMSCHN2。鈀介導(dǎo)的交叉偶聯(lián)反應(yīng)可以通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)方法實(shí)現(xiàn)，包括但不限于用苯胺、鈀催化劑如Pd(OAc)2、PdCl2(dppf)、Pd(Ph3P)4或Pd2dba3、膦配體和堿在合適的有機(jī)溶劑如THF、DMF、PhMe、DME或MeCN中，在高溫下處理氯噠嗪酮酯。在一個(gè)實(shí)施方案中，交叉偶聯(lián)反應(yīng)包括用于甲苯中的Pd(OAc)2、外消旋的2，2-雙(二苯基膦基)-1，1′-聯(lián)萘和Cs2CO3在70至100℃處理酯94。在其中期望R9＝Br的化合物95的實(shí)施方案中，溴取代基可以在交叉偶聯(lián)反應(yīng)后引入。噠嗪酮的溴化可以用NBS在合適的有機(jī)溶劑如DMF、MeCN或混合溶劑體系中在室溫完成。在一個(gè)實(shí)施方案中，溴化在DMF中進(jìn)行。異羥肟酸酯96可以通過(guò)用適當(dāng)?shù)牧u胺和酰胺堿如LDA、LiHMDS或NaHMDS在合適的有機(jī)溶劑如THF中，在低溫處理噠嗪酮酯95來(lái)制備。在一個(gè)實(shí)施方案中，在0℃，將LiHMDS溶液加至噠嗪酮酯95和羥胺的THF溶液中。然后將反應(yīng)混合物溫?zé)岬绞覝匾垣@得期望的異羥肟酸酯96。在一些情況下，用于偶聯(lián)反應(yīng)的羥胺含有標(biāo)準(zhǔn)的保護(hù)基。在那些情況下，可以通過(guò)本領(lǐng)域已知的標(biāo)準(zhǔn)條件脫去保護(hù)基。
圖2描繪化合物96、100、101和102的合成。取代的肼28可以根據(jù)兩種操作之一轉(zhuǎn)化為亞聯(lián)氨基丙二酸酯97。在一個(gè)實(shí)施方案中，對(duì)于其中R9為烷基或鹵素的類(lèi)似物特別有用的是將取代的肼28縮合然后?；?。在該實(shí)施方案中，肼28與2-氧代丙二酸二乙酯可以在使用Dean-Stark分水器的標(biāo)準(zhǔn)脫水條件下，在合適的有機(jī)溶劑如苯或甲苯中，在80至120℃范圍內(nèi)的溫度縮合。通過(guò)用堿在適當(dāng)?shù)臏囟认?，在合適的有機(jī)溶劑如THF、DMF、二噁烷或MeCN中處理，然后加入酰化試劑實(shí)現(xiàn)用提供(deliver)?；脑噭；蕴峁﹣喡?lián)氨基丙二酸酯97。?；噭┑膶?shí)例對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員是熟知的，包括但不限于酰氯、酸酐和活化的酯。在一個(gè)實(shí)施方案中，在0℃用于THF中的LiH處理腙，然后加入酰氯并在25至60℃攪拌以提供化合物97。用于合成其中R9不為鹵素的化合物97的可選的方法包括用提供?；脑噭；?8，接著與2-氧代丙二酸二乙酯縮合以提供亞聯(lián)氨基丙二酸酯97。根據(jù)該方法，取代的肼28可以通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)的?；椒ㄞD(zhuǎn)化為酰肼。在一個(gè)實(shí)施方案中，這種轉(zhuǎn)化用適當(dāng)?shù)孽Ｂ仍诙燃淄橹?，?℃至環(huán)境溫度下實(shí)現(xiàn)。得到的肼與氧代丙二酸二乙酯在使用Dean-Stark分水器的標(biāo)準(zhǔn)脫水條件下，在合適的有機(jī)溶劑如苯或甲苯中，在80至130℃的溫度下縮合。噠嗪酮99由亞聯(lián)氨基丙二酸酯97通過(guò)在堿性條件下環(huán)化以提供中間體酸或酯98，然后氯化以提供噠嗪酮99來(lái)制備。環(huán)化可以通過(guò)用于合適的有機(jī)溶劑如THF或乙醚中的酰胺堿如LiHMDS、NaHMDS、KHMDS或LDA在低溫處理亞聯(lián)氨基丙二酸酯97來(lái)實(shí)現(xiàn)。在一個(gè)實(shí)施方案中，環(huán)化用于THF中的LiHMDS在低溫(-78至-40℃)下實(shí)現(xiàn)，然后用濃HCl處理以獲得98的酯衍生物(R＝Et)。在另一實(shí)施方案中，98的酸衍生物(R＝H)通過(guò)噠嗪酮酯98的原位皂化獲得。在完成環(huán)化后，在低溫(-78至-40℃)下用水終止反應(yīng)混合物的反應(yīng)，然后在攪拌下溫?zé)岬江h(huán)境溫度，再酸化。接著噠嗪酮99由噠嗪酮酸或酯98通過(guò)用POCl3、亞硫酰氯、草酰氯或PCl5處理來(lái)制備。在一個(gè)實(shí)施方案中，這種轉(zhuǎn)化用純POCl3在高溫(～85℃)實(shí)現(xiàn)。當(dāng)R9不為F時(shí)，噠嗪酮酸99(當(dāng)R＝H時(shí))然后則可被轉(zhuǎn)化為噠嗪酮101。在合適的有機(jī)溶劑如THF中，使用酰胺堿如LDA、LiHMDS、NaHMDS或KHMDS，在適當(dāng)?shù)臏囟?-78℃至室溫)下通過(guò)SNAr反應(yīng)實(shí)現(xiàn)苯胺基團(tuán)的引入。在一個(gè)實(shí)施方案中，在低溫(-20至-80℃)將苯胺加至于THF中的LDA或LiHMDS中。然后加入噠嗪酮酸99(R＝H)并將反應(yīng)混合物溫?zé)岬绞覝匾陨婶人?01。然后異羥肟酸酯96和酰胺102可以使用標(biāo)準(zhǔn)的偶聯(lián)試劑，例如但不限于1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDCI)、1-羥基苯并三唑-6-磺酰氨基甲基鹽酸鹽(HOBt)或苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷并磷鎓六氟磷酸鹽(PyBOP)，和適當(dāng)?shù)陌坊蛄u胺在合適的有機(jī)溶劑如DMF、THF或二氯甲烷中由酸101制備。在一些情況下，所述胺或羥胺包含標(biāo)準(zhǔn)的保護(hù)基。在那些情況下，可以通過(guò)本領(lǐng)域已知的標(biāo)準(zhǔn)條件脫去保護(hù)基?？蛇x地，噠嗪酮酯(ester pyridazinone)99(R＝Et)可以通過(guò)如圖1所述的標(biāo)準(zhǔn)方法，經(jīng)由噠嗪酮酯(pyridazinone ester)100轉(zhuǎn)化為異羥肟酸酯96。當(dāng)期望R8＝Br或I時(shí)，期望的鹵素可以使用NBS或NIS，在合適的有機(jī)溶劑或混合溶劑體系如DMF、THF-MeOH或AcOH-THF中，在適當(dāng)?shù)乃岽呋瘎┐嬖谙乱搿?br> 在圖3中，化合物109、110和111的合成使用2，6-二氯煙酸作為原料。根據(jù)美國(guó)專(zhuān)利3,682,932所述的操作，煙酸103通過(guò)在2N NaOH水溶液中回流被轉(zhuǎn)化為一氯代酸104。將104烷基化以提供105可以通過(guò)包括烷基鹵的標(biāo)準(zhǔn)堿烷基化條件，使用2當(dāng)量的合適的烷基鹵和堿實(shí)現(xiàn)，以提供N-烷基吡啶酮酯105和區(qū)域異構(gòu)的O-烷基吡啶酯的混合物，它們易于通過(guò)柱色譜法分離。這些條件包括但不限于于丙酮或DMF中的K2CO3在室溫或高溫下，或者于THF中的NaH在環(huán)境溫度或高溫下，然后加入烷基鹵。在某些實(shí)施方案中，這種烷基化用于DMF中的LiH在0℃，然后加入烷基溴或烷基碘，并溫?zé)岬绞覝貋?lái)實(shí)現(xiàn)。吡啶酮酯105的溴化可以用Br2和乙酸或于適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)溶劑如DMF中的NBS完成。在某些實(shí)施方案中，將NBS加至于DMF中的吡啶酮酯105中以獲得106。溴化物106向化合物107的轉(zhuǎn)化可以使用Pd介導(dǎo)的交叉偶聯(lián)條件實(shí)現(xiàn)。當(dāng)R9＝烯基或炔基時(shí)，它們可以使用適當(dāng)?shù)倪€原劑進(jìn)一步還原以在R9處提供烷基取代基。通常，這種化學(xué)可以使用多種Pd催化劑和配體，加入或不加入堿，在合適的有機(jī)溶劑如DMF、PhMe、DME、THF、CH3CN中，在高溫下完成。偶聯(lián)的配偶子(partner)將取決于R9的性質(zhì)。例如如果期望R9＝CN，則偶聯(lián)的配偶子為Zn(CN)2。該反應(yīng)可以用于NMP中的Pd2dba3和dppf在120℃進(jìn)行。這些鈀介導(dǎo)的交叉偶聯(lián)在文獻(xiàn)有充分記載，并且是本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的。通過(guò)SNAr反應(yīng)完成適當(dāng)取代的苯胺基團(tuán)的引入以提供108。這可以在合適的有機(jī)溶劑如THF中，使用酰胺堿如LDA、LiHMDS、NaHMDS或KHMDS，在適當(dāng)?shù)臏囟?-78℃至室溫)下完成。在某些實(shí)施方案中，在低溫(-20至-80℃)下將苯胺加至于THF中的LDA或LiHMDS中。然后加入吡啶酮105，并在低溫下攪拌混合物以產(chǎn)生酯108。接著可以使用標(biāo)準(zhǔn)皂化條件如LiOH或NaOH，在標(biāo)準(zhǔn)的水性/有機(jī)溶劑混合體系中制備羧酸109。異羥肟酸酯110和酰胺111可以使用標(biāo)準(zhǔn)的偶聯(lián)操作制備，包括但不限于EDCI、HOBt或PyBOP以及適當(dāng)?shù)陌坊蛄u胺在合適的有機(jī)溶劑如DMF、THF或二氯甲烷中。在某些實(shí)施方案中，用于DMF中的HOBt和EDCI完成偶聯(lián)。在一些情況下，用于偶聯(lián)反應(yīng)的胺或羥胺含有標(biāo)準(zhǔn)的保護(hù)基。在那些情況下，可以通過(guò)本領(lǐng)域已知的標(biāo)準(zhǔn)條件脫去保護(hù)基。
圖4顯示用于合成化合物109、110和111的可選的反應(yīng)路線。該路線對(duì)于其中R7不等于Me或Et的類(lèi)似物特別有用。煙酸103根據(jù)七步操作轉(zhuǎn)化為N-烷基吡啶酮甲酯114，其中首先將2，6-二氯煙酸103轉(zhuǎn)化為甲氧基吡啶酸，將其酯化以得到甲酯，再脫保護(hù)以得到一氯代酯112。在某些實(shí)施方案中，轉(zhuǎn)化為甲氧基吡啶酸通過(guò)將叔丁醇鉀加至酸103的MeOH溶液中，然后將該混合物加熱回流若干天實(shí)現(xiàn)。酯化以得到甲酯可以在標(biāo)準(zhǔn)條件下進(jìn)行，包括但不限于Fisher酯化(MeOH，H2SO4)，于MeOH中的TMSCl或于合適的有機(jī)溶劑如PhMe/MeOH中的TMSCHN2中。接著甲氧基吡啶的脫甲基化可以通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)條件完成，包括但不限于HCl在高溫下，于乙酸中的pTsOH在高溫下以及HBr的MeOH水溶液在高溫下。通過(guò)用HBr的乙酸水溶液在高溫(80至120℃)處理甲氧基吡啶實(shí)現(xiàn)優(yōu)選的脫甲基化以得到吡啶酮112。112的烷基化可以通過(guò)包括烷基鹵的標(biāo)準(zhǔn)堿性烷基化條件，使用一當(dāng)量適當(dāng)?shù)耐榛u和堿完成，以得到N-烷基吡啶酮酯113和區(qū)域異構(gòu)的O-烷基吡啶酯的混合物，它們易于通過(guò)柱色譜法分離。這些條件包括但不限于于丙酮或DMF中的K2CO3在室溫或高溫下，或于THF中的NaH在環(huán)境溫度或高溫下，以及接著加入烷基鹵。在某些實(shí)施方案中，該烷基化用于DMF中的LiH在0℃，然后加入烷基溴或烷基碘并溫?zé)岬绞覝貙?shí)現(xiàn)。吡啶酮酯113的溴化可以用Br2和乙酸或于合適的有機(jī)溶劑如DMF中的NBS實(shí)現(xiàn)。在某些實(shí)施方案中，將NBS加至吡啶酮酯113的DMF溶液中以得到114?？梢允褂免Z介導(dǎo)的交叉偶聯(lián)條件實(shí)現(xiàn)溴化物114至化合物115的轉(zhuǎn)化。當(dāng)R9＝烯基或炔基時(shí)，可以使用適當(dāng)?shù)倪€原劑進(jìn)一步還原以在R9處提供烷基取代基。通常，這種化學(xué)可以使用多種Pd催化劑和配體，加入或不加入堿，在合適的有機(jī)溶劑如DMF、PhMe、DME、THF、CH3CN中，在高溫下完成。偶聯(lián)的配偶子將取決于R9的性質(zhì)。這些Pd介導(dǎo)交叉偶聯(lián)在文獻(xiàn)中有充分記載，并且對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員是公知的。引入適當(dāng)?shù)娜〈桨坊鶊F(tuán)以提供116通過(guò)SNAr反應(yīng)實(shí)現(xiàn)。這可以在合適的有機(jī)溶劑如THF中，使用酰胺堿如LDA、LiHMDS、NaHMDS或KHMDS，在適當(dāng)?shù)臏囟?-78℃至室溫)下完成。在某些實(shí)施方案中，在低溫(-20至-80℃)下將苯胺加至于THF中的LDA或LiHMDS中。然后加入吡啶酮115并將混合物在低溫下攪拌以產(chǎn)生酯116。116向羧酸109以及異羥肟酸酯110和酰胺111的轉(zhuǎn)化可以按照?qǐng)D3所述實(shí)現(xiàn)?？蛇x地，異羥肟酸酯110可以直接由于合適的有機(jī)溶劑如THF中的甲酯116，使用適當(dāng)?shù)牧u胺和酰胺堿如LDA、LiHMDS、NaHMDS或KHMDS，在適當(dāng)?shù)臏囟?-78℃至室溫)下制備。在某些實(shí)施方案中，將LiHMDS的溶液在0℃加至酯116和羥胺的THF溶液中。然后將反應(yīng)混合物溫?zé)岬绞覝匾缘玫狡谕漠惲u肟酸酯110。在一些情況下，偶聯(lián)反應(yīng)所用的羥胺含有標(biāo)準(zhǔn)的保護(hù)基。在那些情況下，可以通過(guò)本領(lǐng)域已知的標(biāo)準(zhǔn)條件脫去保護(hù)基。
圖5顯示用于合成化合物119、120和121的反應(yīng)路線，其中使用N-烷基吡啶酮甲酯112作為原料。117的形成可以通過(guò)由SNAr反應(yīng)引入適當(dāng)?shù)娜〈桨坊鶊F(tuán)來(lái)實(shí)現(xiàn)。這可以在合適的有機(jī)溶劑如THF中，使用酰胺堿如LDA、LiHMDS、NaHMDS或KHMDS，在適當(dāng)?shù)臏囟?-78℃至室溫)下完成。在某些實(shí)施方案中，在低溫(-20至-80℃)下將苯胺加至于THF中的LDA或LiHMDS中。然后加入吡啶酮112并將混合物在低溫下攪拌以生成酯117。這可以在合適的有機(jī)溶劑如THF中使用酰胺堿如LDA、LiHMDS、NaHMDS或KHMDS在適當(dāng)?shù)臏囟?-78℃至室溫)下完成。將吡啶酮117氯化以產(chǎn)生吡啶酮118可以使用標(biāo)準(zhǔn)條件如于合適有機(jī)溶劑如DMF中的NCS實(shí)現(xiàn)。118向羧酸119以及異羥肟酸酯120和酰胺121的轉(zhuǎn)化可以按照?qǐng)D3和4所述的完成。
圖6顯示用于合成化合物124和125的反應(yīng)路線。4-氟噠嗪酮123可以由4-氯噠嗪酮122通過(guò)用KF或HF處理，使用或不使用堿如Et3N或Me3N，在合適的有機(jī)溶劑如CH3CN、THF、DMF、NMP或DMSO中制備。在一個(gè)實(shí)施方案中，這種轉(zhuǎn)化用于DMSO中的KF在高溫(例如160℃)實(shí)現(xiàn)。噠嗪酮酯123(當(dāng)R＝Et)可以被轉(zhuǎn)化為噠嗪酮124，其中通過(guò)SNAr反應(yīng)完成苯胺基團(tuán)的引入。這可以在合適的有機(jī)溶劑如DMF、EtOH、iPrOH、CH3CN或THF中使用堿如Cs2CO3、NaHCO3、K2CO3或Na2CO3，在80至160℃的溫度完成。在一個(gè)實(shí)施方案中，將苯胺和Cs2CO3加至噠嗪酮123的DMF溶液中并將反應(yīng)混合物加熱到80℃。可選地，噠嗪酮酸123(R＝H)可以通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)方法如圖2所述的那些轉(zhuǎn)化為噠嗪酮125。噠嗪酮124或125可以通過(guò)如圖1或2中所述轉(zhuǎn)化為異羥肟酸酯或酰胺。
圖7顯示用于合成化合物128、129和130的反應(yīng)路線，其中吡啶酮甲酯117被用作原料。吡啶酮酯117的溴化可以用Br2和乙酸或于合適的有機(jī)溶劑如DMF中的NBS實(shí)現(xiàn)。優(yōu)選將NBS加至吡啶酮酯117的DMF溶液中以得到126。溴化物126向其中R9為氰基的化合物127的轉(zhuǎn)化可以使用Pd介導(dǎo)的交叉偶聯(lián)條件實(shí)現(xiàn)。通常，這種化學(xué)可以使用多種Pd催化劑和配體，加入或不加入堿，在合適的有機(jī)溶劑如DMF、PhMe、DME、THF、CH3CN或NMP中，在高溫下完成。優(yōu)選地，該反應(yīng)用于DMF中的Zn(CN)2和Pd2dba3和dppf在120℃進(jìn)行。127向羧酸128以及異羥肟酸酯129和酰胺130的轉(zhuǎn)化可以如圖3和4所述完成。
在圖8中，描述了其中R9＝H或F的式V的化合物的合成，其中2，6-二氯煙酸或2，6-二氯-5-氟煙酸被用作原料。此路線對(duì)于其中R7為Me的類(lèi)似物特別有用。按照美國(guó)專(zhuān)利3682932(1972)所述的操作，煙酸140通過(guò)在2N NaOH水溶液中回流轉(zhuǎn)化為一氯代酸141。141的烷基化可以通過(guò)包括烷基鹵的標(biāo)準(zhǔn)堿性烷基化條件，使用兩當(dāng)量適當(dāng)?shù)耐榛u和堿實(shí)現(xiàn)，以得到N-烷基吡啶酮酯和區(qū)域異構(gòu)的O-烷基吡啶酯的混合物，它們易于通過(guò)柱色譜法分離。這些條件包括但不限于于丙酮或DMF中的K2CO3在室溫或高溫下，或者于THF中的NaH在環(huán)境溫度或高溫下，然后加入烷基鹵。優(yōu)選該烷基化在0℃用于DMF中的LiH，接著加入烷基溴或烷基碘并溫?zé)岬绞覝貋?lái)實(shí)現(xiàn)。通過(guò)SNAr反應(yīng)完成適當(dāng)?shù)娜〈桨坊鶊F(tuán)的引入以提供143。這可以在合適的有機(jī)溶劑如THF中，使用酰胺堿如LDA、LiHMDS、NaHMDS或KHMDS，在適當(dāng)?shù)臏囟?-78℃至室溫)下完成。優(yōu)選在低溫(-20至-80℃)下將苯胺加至于THF中的LDA或LiHMDS中。然后加入吡啶酮并將混合物在低溫?cái)嚢枰陨甚?43。接著，羧酸144可以使用標(biāo)準(zhǔn)皂化條件如LiOH或NaOH在標(biāo)準(zhǔn)的水性/有機(jī)溶劑混合體系中制備。異羥肟酸酯145和酰胺146可以使用標(biāo)準(zhǔn)的偶聯(lián)操作制備，包括但不限于EDCI、HOBt或PyBOP以及適當(dāng)?shù)陌坊蛄u胺在合適的有機(jī)溶劑如DMF、THF或二氯甲烷中。優(yōu)選地，使用于DMF中的HOBt和EDCI完成偶聯(lián)。在一些情況下，偶聯(lián)反應(yīng)中所用的胺或羥胺包含標(biāo)準(zhǔn)的保護(hù)基。在那些情況下，可以通過(guò)本領(lǐng)域已知的標(biāo)準(zhǔn)條件脫去保護(hù)基。
在圖9中，描述了其中R9＝H或F的式V的化合物的可選的合成，其中2，6-二氯煙酸或2，6-二氯-5-氟煙酸被用作原料。煙酸140可以按照五步操作被轉(zhuǎn)化為N-烷基吡啶酮甲酯149，其中2，6-二氯煙酸140首先被轉(zhuǎn)化為甲氧基吡啶酸，將其皂化以產(chǎn)生甲酯，再脫保護(hù)以得到一氯代酯147。向甲氧基吡啶酸的轉(zhuǎn)化優(yōu)選通過(guò)將叔丁醇鉀加至酸140的MeOH溶液中，然后將該混合物加熱回流若干天來(lái)實(shí)現(xiàn)。酯化以得到甲酯可以在標(biāo)準(zhǔn)條件下進(jìn)行，包括但不限于Fisher酯化(MeOH，H2SO4)、于MeOH中的TMSCl或于合適的有機(jī)溶劑如PhMe/MeOH中的TMSCHN2。接著，甲氧基吡啶的脫甲基化可以通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)條件實(shí)現(xiàn)，包括但不限于HCl在高溫下，于乙酸中的pTsOH在高溫下和HBr的MeOH水溶液在高溫下。優(yōu)選的脫甲基化以得到吡啶酮147通過(guò)在高溫(80至120℃)下用HBr的乙酸水溶液處理甲氧基吡啶實(shí)現(xiàn)。將147烷基化以提供148可以通過(guò)包括烷基鹵的標(biāo)準(zhǔn)堿性烷基化條件，用一當(dāng)量適當(dāng)?shù)耐榛u和堿實(shí)現(xiàn)，以提供N-烷基吡啶酮酯和區(qū)域異構(gòu)的O-烷基吡啶酯的混合物，它們易于通過(guò)柱色譜法分離。這些條件包括但不限于于丙酮或DMF中的K2CO3在室溫或高溫下，或者于THF中的NaH在環(huán)境溫度或高溫下，并接著加入烷基鹵。優(yōu)選該烷基化在0℃用于DMF中的LiH，然后加入烷基溴或烷基碘，并溫?zé)岬绞覝貙?shí)現(xiàn)。通過(guò)SNAr反應(yīng)完成適當(dāng)?shù)娜〈桨坊鶊F(tuán)的引入。這可以在合適的有機(jī)溶劑如THF中，使用酰胺堿如LDA、LiHMDS、NaHMDS或KHMDS，在適當(dāng)?shù)臏囟?-78℃至室溫)下完成。優(yōu)選在低溫(-20至-80℃)下將苯胺加至于THF中的LDA或LiHMDS中。然后加入吡啶酮并將混合物在低溫下攪拌以產(chǎn)生酯149。異羥肟酸酯145可以直接由甲酯149在合適的有機(jī)溶劑如THF中，使用適當(dāng)?shù)牧u胺和酰胺堿如LDA、LiHMDS、NaHMDS或KHMDS，在適當(dāng)?shù)臏囟?-78℃至室溫)下制備。優(yōu)選地，在0℃將LiHMDS的溶液加至甲酯149和羥胺的THF溶液中。然后將反應(yīng)混合物溫?zé)岬绞覝匾垣@得期望的異羥肟酸酯145。在一些情況下，偶聯(lián)反應(yīng)中所用的羥胺含有標(biāo)準(zhǔn)的保護(hù)基。在那些情況下，可以通過(guò)本領(lǐng)域已知的標(biāo)準(zhǔn)條件脫去保護(hù)基。
在又一方面，本發(fā)明提供了制備式IA的化合物的方法，所述方法包括 將式100或101的化合物
與R3NH2或者(i)當(dāng)R3如式IA中所定義時(shí)，在偶聯(lián)試劑的存在下反應(yīng)，或者(ii)當(dāng)R3如式IA中所定義，只是R3不為H或Me時(shí)，在酰胺堿的存在下反應(yīng)，以提供所述化合物IA。
在又一方面，本發(fā)明提供了制備式IV的化合物的方法，所述方法包括 將式108或109的化合物
與R3NH2或者(i)當(dāng)R3如式IV中所定義時(shí)，在偶聯(lián)試劑的存在下反應(yīng)，或者(ii)當(dāng)R3如式IV中所定義，只是R3不為H或Me時(shí)，在酰胺堿的存在下反應(yīng)。
在又一方面，本發(fā)明提供了制備式VI的化合物的方法，所述方法包括 (a)將具有式105的化合物溴化，
其中R為烷基，以提供化合物106
(b)在鈀催化劑和配體的存在下，并任選地在堿的存在下，將化合物106與Zn(Me)2反應(yīng)，以提供化合物107
(c)在鈀催化劑、膦配體和酰胺堿的存在下，將化合物107與具有下式的苯胺反應(yīng)，
以提供化合物108
(d)任選地在堿性條件下水解化合物108，以提供化合物109
(e)將化合物108或109與R3NH2或者(i)當(dāng)R3如式VI中所定義時(shí)，在偶聯(lián)試劑的存在下反應(yīng)，或者(ii)當(dāng)R3如式VI中所定義，只是R3不為H時(shí)，在酰胺堿的存在下反應(yīng)，以提供所述式VI的化合物。
在一個(gè)實(shí)施方案中，通過(guò)包括下列步驟的方法制備化合物105 (a)將化合物103
與氫氧化鈉水溶液反應(yīng)，以提供化合物104
(b)在堿存在下，將化合物104與RX反應(yīng)，以提供化合物105，其中R為Me，X為鹵素。
在又一方面，本發(fā)明提供了制備式II化合物的方法，所述方法包括 (a)將具有式Me-NH-NH2的肼與下列物質(zhì)反應(yīng) (i)與2-氧代丙二酸二乙酯反應(yīng)，然后用?；噭┨幚恚鲺；噭┨峁┚哂惺紺(＝O)CH2R9的?；渲蠷9如式II中所定義，或者 (ii)與酰化試劑反應(yīng)，所述?；噭┨峁┚哂惺紺(＝O)CH2R9的酰基，其中R9如式II中所定義，然后用氧代丙二酸二乙酯處理，以提供化合物97
(b)在低于-40℃的溫度下，用酰胺堿處理化合物97，然后用濃HCl處理，以提供式98的化合物
(c)將化合物98氯化，以提供化合物99
(d)在鈀催化劑、配體和酰胺堿的存在下，將化合物99與具有下式的苯胺反應(yīng)，
以提供化合物100
(e)將式100的化合物與R3NH2或者(i)當(dāng)R3如式II中所定義時(shí)，在偶聯(lián)試劑的存在下反應(yīng)，或者(ii)當(dāng)R3如式II中所定義，只是R3不為H時(shí)，在酰胺堿的存在下反應(yīng)，以提供所述式II的化合物。
在又一方面，本發(fā)明提供了制備其中R9為H、Me或Cl的式II化合物的方法，所述方法包括 (a)將具有式Me-NH-NH2的肼與下列物質(zhì)反應(yīng) (i)與2-氧代丙二酸二乙酯反應(yīng)，然后用酰化試劑處理，所述酰化試劑提供具有式C(＝O)CH2R9的?；?，其中R9為H、Me或Cl；或 (ii)與酰化試劑反應(yīng)，所述?；噭┨峁┚哂惺紺(＝O)CH2R9的?；?，其中R9為H、Me或Cl，然后用氧代丙二酸二乙酯處理，以提供化合物97
(b)在低于-40℃的溫度下，用酰胺堿處理化合物97，以提供式98的化合物
(c)將化合物98氯化，以提供化合物99
(d)在酰胺堿的存在下，將化合物99與具有下式的苯胺反應(yīng)，
以提供化合物101
(e)將化合物101與R3NH2或者(i)當(dāng)R3如式II中所定義時(shí)，在偶聯(lián)試劑的存在下反應(yīng)，或者(ii)當(dāng)R3如式II中所定義，只是R3不為H時(shí)，在酰胺堿的存在下反應(yīng)，以提供所述式II的化合物。
在又一方面，本發(fā)明提供了制備其中R9為Me的式V的化合物的方法，所述方法包括 (a)將具有式105的化合物溴化，
其中R為烷基，以提供化合物106
(b)在鈀催化劑和配體的存在下，并任選地在堿的存在下，將化合物106與Zn(Me)2反應(yīng)，以提供化合物107
(c)在酰胺堿的存在下，將化合物107與具有下式的苯胺反應(yīng)，
以提供化合物108
(d)任選地在堿性條件下水解化合物108，以提供化合物109
(e)在偶聯(lián)試劑或酰胺堿的存在下，將化合物108或化合物109與其中R3如式V中所定義的R3NH2反應(yīng)，以提供所述式V的化合物。
在又一方面，本發(fā)明提供了制備其中R9為Cl的式V的化合物的方法，所述方法包括 (a)在酰胺堿的存在下，將式112的化合物
與具有下式的苯胺反應(yīng)，
以提供化合物117
(b)將化合物117氯化，以提供化合物118
(c)任選地水解化合物118，以提供化合物118A
(d)在偶聯(lián)試劑或酰胺堿的存在下，將化合物118或118A與(S)-MeCH(OH)CH2ONH2或HOCH2CH2ONH2反應(yīng)，以提供所述式V的化合物。
在又一方面，本發(fā)明提供了制備其中R9為H或F的式V的化合物的方法，所述方法包括 (a)用NaOH水溶液處理其中R9為H或F的式140的化合物，
以提供化合物141
(b)在堿的存在下，將化合物141與其中X為鹵化物的CH3X反應(yīng)，以提供化合物142
(c)在酰胺堿的存在下，將化合物142與具有下式的苯胺反應(yīng)，
以提供化合物143
(d)任選地水解化合物143，以提供化合物144
(e)在偶聯(lián)試劑或酰胺堿的存在下，使化合物143或144與其中R3如式V中所定義的R3NH2反應(yīng)，以提供所述式V的化合物。
在上述方法的一個(gè)實(shí)施方案中，偶聯(lián)試劑為1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽、1-羥基苯并三唑-6-磺酰氨基甲基鹽酸鹽或苯并三唑-1-基氧基三吡咯烷并磷鎓六氟磷酸鹽。
另一方面，本發(fā)明提供使用本發(fā)明的化合物作為藥物治療由MEK介導(dǎo)的疾病或醫(yī)學(xué)病癥的方法。例如本發(fā)明提供本發(fā)明的化合物，其作為用于治療哺乳動(dòng)物中過(guò)度增殖性疾病或炎性病癥的藥物，包括向所述哺乳動(dòng)物給藥有效治療所述過(guò)度增殖性疾病的量的一種或多種本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽或前藥。另一方面，本發(fā)明提供本發(fā)明的化合物，其用于制造治療過(guò)度增殖性疾病或炎性病癥的藥物。
另一方面，本發(fā)明提供在需要治療的溫血?jiǎng)游锶缛祟?lèi)中產(chǎn)生MEK抑制作用的方法，所述方法包括向所述動(dòng)物給藥有效量的本發(fā)明化合物。
再一方面，本發(fā)明提供治療或預(yù)防MEK介導(dǎo)的病癥的方法，所述方法包括向有此需要的人類(lèi)或動(dòng)物給藥藥物組合物，所述藥物組合物包含有效治療或預(yù)防所述MEK介導(dǎo)的病癥的量的本發(fā)明化合物或其藥學(xué)可接受的鹽或可體內(nèi)裂解的前藥。
本發(fā)明還涉及抑制MEK的藥物組合物，所述藥物組合物包含有效量的選自本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)可接受的前藥、藥學(xué)活性代謝物或藥學(xué)可接受的鹽的化合物。
本發(fā)明還涉及用于治療哺乳動(dòng)物中過(guò)度增殖性疾病的藥物組合物，所述組合物包含治療有效量的本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽、前藥或水合物和藥學(xué)可接受的載體。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述藥物組合物用于治療癌癥，例如腦癌、肺癌、鱗狀細(xì)胞癌、膀胱癌、胃癌、胰腺癌、乳腺癌、頭癌、頸癌、腎癌、腎癌、卵巢癌、前列腺癌、結(jié)腸直腸癌、食管癌、睪丸癌、婦科癌或甲狀腺癌。在另一實(shí)施方案中，所述藥物組合物用于治療非癌癥性過(guò)度增殖性疾病，例如良性的皮膚增生(如銀屑病)、再狹窄增生或前列腺增生(如良性前列腺肥大((BPH))。
本發(fā)明還涉及用于治療哺乳動(dòng)物中的胰腺炎或腎臟疾病(包括增生性腎小球腎炎和糖尿病誘導(dǎo)的腎病)或治療疼痛的藥物組合物，所述組合物包含治療有效量的本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽、前藥或水合物和藥學(xué)可接受的載體。
本發(fā)明還涉及用于防止哺乳動(dòng)物中胚細(xì)胞植入的藥物組合物，所述組合物包含治療有效量的本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽、前藥或水合物和藥學(xué)可接受的載體。
本發(fā)明還涉及用于治療哺乳動(dòng)物中與血管生成或血管發(fā)生有關(guān)的疾病的藥物組合物，所述組合物包含治療有效量的本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽、前藥或水合物和藥學(xué)可接受的載體。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述藥物組合物用于治療選自以下的疾病腫瘤血管發(fā)生，慢性炎性疾病或其他炎性病癥如類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、動(dòng)脈粥樣硬化、炎癥性腸病，皮膚疾病如銀屑病、濕疹和硬皮病，糖尿病，糖尿病性視網(wǎng)膜病變，早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病變，年齡相關(guān)性黃斑變性，血管瘤，神經(jīng)膠質(zhì)瘤，黑色素瘤，卡波西氏肉瘤及卵巢癌、乳腺癌、肺癌、胰腺癌、前列腺癌、結(jié)腸癌和表皮樣癌。
本發(fā)明還涉及治療哺乳動(dòng)物中過(guò)度增殖性疾病的方法，所述方法包括向所述哺乳動(dòng)物給藥治療有效量的本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽、前藥或水合物。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述方法涉及治療癌癥例如腦癌、肺癌、鱗狀細(xì)胞癌、膀胱癌、胃癌、胰腺癌、乳腺癌、頭癌、頸癌、腎癌、腎癌、卵巢癌、前列腺癌、結(jié)腸直腸癌、食管癌、睪丸癌、婦科癌或甲狀腺癌。在另一實(shí)施方案中，所述方法涉及治療非癌癥性過(guò)度增殖性疾病如良性的皮膚增生(如銀屑病)、再狹窄增生或前列腺增生(如良性前列腺肥大(BPH))。
本發(fā)明還涉及用于治療哺乳動(dòng)物中過(guò)度增殖性疾病的方法，所述方法包括向所述哺乳動(dòng)物給藥治療有效量的本發(fā)明的化合物或其藥物學(xué)可接受的鹽、前藥或水合物以及選自以下的抗腫瘤藥有絲分裂抑制劑、烷化劑、抗代謝藥、嵌入性抗生素、生長(zhǎng)因子抑制劑、細(xì)胞周期抑制劑、酶抑制劑、拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑、生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑、抗激素藥、血管發(fā)生抑制劑和抗雄激素。
本發(fā)明還涉及治療哺乳動(dòng)物中胰腺炎或腎臟疾病的方法，所述方法包括向所述哺乳動(dòng)物給藥治療有效量的本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽、前藥或水合物。
本發(fā)明還涉及防止哺乳動(dòng)物中胚細(xì)胞植入的方法，所述方法包括向所述哺乳動(dòng)物給藥治療有效量的本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽、前藥或水合物。
本發(fā)明還涉及治療哺乳動(dòng)物中與血管生成或血管發(fā)生相關(guān)的疾病的方法，所述方法包括向所述哺乳動(dòng)物給藥治療有效量的本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽、前藥或水合物。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述方法用于治療選自以下的疾病腫瘤血管發(fā)生，慢性炎性疾病如類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、動(dòng)脈粥樣硬化、炎癥性腸病，皮膚疾病如銀屑病、濕疹和硬皮病，糖尿病，糖尿病性視網(wǎng)膜病變，早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病變，年齡相關(guān)性黃斑變性，血管瘤，神經(jīng)膠質(zhì)瘤，黑色素瘤，卡波西氏肉瘤及卵巢癌、乳腺癌、肺癌、胰腺癌、前列腺癌、結(jié)腸癌和表皮樣癌。
本發(fā)明還涉及用于治療哺乳動(dòng)物中與炎性疾病、自身免疫性疾病、破壞性骨病、增殖性疾病、感染性疾病、病毒性疾病、纖維變性性疾病或神經(jīng)變性性疾病相關(guān)的疾病或病癥的藥物組合物，所述組合物包含治療有效量的本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽、前藥或水合物和藥學(xué)可接受的載體。以上疾病或病癥的實(shí)例包括但不限于類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，動(dòng)脈粥樣硬化，炎癥性腸病，皮膚疾病如銀屑病、濕疹和硬皮病，糖尿病和糖尿病性并發(fā)癥，糖尿病性視網(wǎng)膜病變，早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病變，年齡相關(guān)性黃斑變性，血管瘤，慢性阻塞性肺病，特發(fā)性肺纖維變性，包括哮喘、過(guò)敏性鼻炎及特應(yīng)性皮炎在內(nèi)的過(guò)敏反應(yīng)，腎臟疾病及腎衰，多囊性腎病，急性冠脈綜合征，充血性心衰，骨關(guān)節(jié)炎，神經(jīng)纖維瘤病，器官移植排斥，惡病質(zhì)和疼痛。
本發(fā)明還提供本發(fā)明的化合物，它們?cè)谥委熁加猩鲜霾“Y的溫血?jiǎng)游?，?yōu)選哺乳動(dòng)物，更優(yōu)選人類(lèi)中的這些疾病和病癥中用作藥物。本發(fā)明還提供式本發(fā)明的化合物在制備用于治療患有上述病癥的溫血?jiǎng)游?，?yōu)選哺乳動(dòng)物，更優(yōu)選人類(lèi)中的上述疾病和病癥的藥物中的用途。
根據(jù)本發(fā)明的方法可用本發(fā)明的化合物或所述化合物的藥學(xué)可接受的鹽、前藥和水合物治療的患者包括例如已被診斷患有下述疾病的患者銀屑病、再狹窄、動(dòng)脈粥樣硬化、BPH、肺癌、骨癌、CMML、胰腺癌、皮膚癌、頭及頸部癌、皮膚或眼內(nèi)黑素瘤、子宮癌、卵巢癌、直腸癌、肛門(mén)區(qū)域的癌癥、胃癌、結(jié)腸癌、乳癌、睪丸癌、婦科腫瘤(如子宮肉瘤、輸卵管癌、子宮內(nèi)膜癌、宮頸癌、陰道癌或外陰癌)、霍奇金氏病、食道癌、小腸癌、內(nèi)分泌系統(tǒng)癌癥(如甲狀腺癌、甲狀旁腺癌或腎上腺癌)、軟組織肉瘤、尿道癌、陰莖癌、前列腺癌、慢性或急性白血病、兒童實(shí)體瘤、淋巴細(xì)胞性淋巴瘤、膀胱癌、腎或輸尿管癌(如腎細(xì)胞癌、腎盂癌)或者中樞神經(jīng)系統(tǒng)的腫瘤(如原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)淋巴瘤、脊髓軸腫瘤、腦干神經(jīng)膠質(zhì)瘤或垂體腺瘤)。
本發(fā)明還涉及用于抑制哺乳動(dòng)物中異常細(xì)胞生長(zhǎng)的藥物組合物，所述組合物包含一定量的本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽或溶劑合物或前藥以及一定量的化療藥，其中所述化合物、鹽、溶劑合物或前藥的量與所述化療藥的量一起有效地抑制異常細(xì)胞生長(zhǎng)。許多化療藥在本領(lǐng)域中目前是已知的。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述化療劑藥選自有絲分裂抑制劑、烷化劑、抗代謝藥、嵌入性抗生素、生長(zhǎng)因子抑制劑、細(xì)胞周期抑制劑、酶、拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑、生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑、抗激素藥、血管發(fā)生抑制劑以及抗雄激素。
另一方面，本發(fā)明提供了抑制MEK的藥物組合物，所述藥物組合物包含一種或多種本發(fā)明的化合物。
本發(fā)明還涉及用于抑制哺乳動(dòng)物中異常細(xì)胞生長(zhǎng)或治療過(guò)度增殖性疾病的方法，該方法包括向所述哺乳動(dòng)物給藥一定量的本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽、溶劑合物或前藥并與放射治療聯(lián)合，其中所述組合物、鹽、溶劑合物或前藥與放射治療聯(lián)合有效地抑制所述哺乳動(dòng)物中異常細(xì)胞生長(zhǎng)或治療過(guò)度增殖性疾病。給予放射治療的技術(shù)在本領(lǐng)域中是已知的，這些技術(shù)均可用于本文所述的聯(lián)合治療中。在這一聯(lián)合治療中本發(fā)明的化合物的給藥可如本文所述進(jìn)行確定。
認(rèn)為本發(fā)明的化合物可使異常細(xì)胞對(duì)于用于殺死和/或抑制這些細(xì)胞生長(zhǎng)的放射治療更敏感。因此，本發(fā)明還涉及用于增加哺乳動(dòng)物中異常細(xì)胞對(duì)放射治療敏感性的方法，所述方法包括向哺乳動(dòng)物給藥一定量的本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽或溶劑合物或前藥，所述量對(duì)于增加異常細(xì)胞對(duì)放射治療的敏感性是有效的。該方法中所述化合物、鹽或溶劑合物的量可根據(jù)本文所述的用于確定這些化合物的有效量的方法來(lái)確定。
本發(fā)明的化合物還可有益地與其他已知的治療藥聯(lián)合。例如，本發(fā)明還涉及抑制哺乳動(dòng)物中異常細(xì)胞生長(zhǎng)的方法和藥物組合物，所述組合物包含一定量的本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽或溶劑合物、其前藥或其同位素標(biāo)記衍生物以及一定量的一種或多種選自抗血管發(fā)生劑、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制劑和抗增殖藥的物質(zhì)。
抗血管發(fā)生劑如MMP-2(基質(zhì)-金屬蛋白酶2)抑制劑、MMP-9(基質(zhì)-金屬蛋白酶9)抑制劑和COX-II(環(huán)加氧酶II)抑制劑可與本發(fā)明的化合物以及本文所述的藥物組合物聯(lián)合使用。有用的COX-II抑制劑的實(shí)例包括CELEBREXTM(alecoxib)、伐地考昔和羅非考昔。有用的基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑的實(shí)例在以下文獻(xiàn)中描述WO 96/33172、WO 96/27583、EP818442、EP 1004578、WO 98/07697、WO 98/03516、WO 98/34918、WO98/34915、WO 98/33768、WO 98/30566、EP 606,046、EP 931,788、WO90/05719、WO 99/52910、WO 99/52889、WO 99/29667、WO 99/07675、EP 945864、美國(guó)專(zhuān)利5,863,949、美國(guó)專(zhuān)利5,861,510和EP 780,386，所有這些文獻(xiàn)以其全部?jī)?nèi)容引入本文作為參考。優(yōu)選的MMP-2和MMP-9抑制劑是那些對(duì)于抑制MMP-1幾乎沒(méi)有或者沒(méi)有活性的抑制劑。更優(yōu)選的MMP-2和MMP-9抑制劑是那些相對(duì)于其他基質(zhì)-金屬蛋白酶(即MMP-1、MMP-3、MMP-4、MMP-5、MMP-6、MMP-7、MMP-8、MMP-10、MMP-11、MMP-12和MMP-13)而言選擇性抑制MMP-2和/或MMP-9的抑制劑。
術(shù)語(yǔ)“異常細(xì)胞生長(zhǎng)”和“過(guò)度增殖性疾病”在本申請(qǐng)中可以相互交換使用。
除非另有說(shuō)明，如本文所用，“異常細(xì)胞生長(zhǎng)”指不依賴(lài)于正常調(diào)節(jié)機(jī)制的細(xì)胞生長(zhǎng)(如接觸抑制丟失)。這包括例如以下的異常生長(zhǎng)(1)通過(guò)表達(dá)突變的酪氨酸激酶或者受體酪氨酸激酶過(guò)度表達(dá)而增殖的腫瘤細(xì)胞(腫瘤)；(2)其他其中發(fā)生異常酪氨酸激酶激活的增殖性疾病的良性和惡性細(xì)胞；(3)任何通過(guò)受體酪氨酸激酶增殖的腫瘤；(4)任何通過(guò)異常絲氨酸/蘇氨酸激酶激活而增殖的腫瘤；以及(5)其他其中發(fā)生異常絲氨酸/蘇氨酸激酶激活的增殖性疾病的良性和惡性細(xì)胞。
除非另有說(shuō)明，如本文所用，術(shù)語(yǔ)“治療(treating)”指逆轉(zhuǎn)、緩解、抑制該術(shù)語(yǔ)適用的疾病或病癥或這些疾病或病癥的一種或多種癥狀的進(jìn)展或者預(yù)防它們。除非另有說(shuō)明，如本文所用，術(shù)語(yǔ)“治療(treatment)”指如上所定義的治療的行為。
與這樣的量相應(yīng)的給定活性劑的量將根據(jù)因素如具體的化合物、病癥及其嚴(yán)重程度、需要治療的哺乳動(dòng)物特征(如體重)等而變化，盡管如此但是其仍可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員常規(guī)地確定。“治療”意指哺乳動(dòng)物如人類(lèi)的病癥的至少減輕，所述病癥至少部分地是由MEK的活性所影響，而且治療包括但不限于預(yù)防哺乳動(dòng)物病癥的發(fā)生，特別是當(dāng)發(fā)現(xiàn)哺乳動(dòng)物有患該病癥的傾向但還沒(méi)有診斷出患有該疾病時(shí)；調(diào)節(jié)和/或抑制病癥；和/或緩解病癥。
為了使用本發(fā)明的化合物、其藥學(xué)可接受的鹽或前藥治療(包括預(yù)防性治療)包括人類(lèi)在內(nèi)的哺乳動(dòng)物，通常根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)的藥學(xué)實(shí)踐將其配制成藥物組合物。根據(jù)本發(fā)明的這一方面，本發(fā)明提供了一種包含上文定義的本發(fā)明化合物或其藥學(xué)可接受的鹽或前藥以及藥學(xué)可接受的稀釋劑或載體的藥物組合物。
為制備本發(fā)明的藥物組合物，優(yōu)選根據(jù)常規(guī)的藥物復(fù)合技術(shù)將治療或預(yù)防有效量的本發(fā)明化合物或其藥學(xué)可接受鹽、溶劑合物、代謝物或前藥(單獨(dú)或與另外的治療劑一起)和藥學(xué)可接受的載體充分混合，制成一定劑量。載體可以采用多種形式，取決于期望用于給藥的制劑形式，例如口服或腸胃外。合適的載體的實(shí)例包括任何用于制備特定治療組合物可能需要的溶劑、分散介質(zhì)、助劑、包衣、抗細(xì)菌和抗真菌劑、等滲和吸收延遲劑、甜味劑、穩(wěn)定劑(促進(jìn)長(zhǎng)時(shí)間保存)、乳化劑、粘合劑、增稠劑、鹽、防腐劑、溶劑、分散介質(zhì)、包衣、抗細(xì)菌和抗真菌劑、等滲和吸收延遲劑、調(diào)味劑以及各種混雜物質(zhì)，例如緩沖劑和吸收劑。這些介質(zhì)和試劑與藥學(xué)活性物質(zhì)的應(yīng)用在本領(lǐng)域中是熟知的。除非任何常規(guī)介質(zhì)或試劑與本發(fā)明的化合物不相容，否則它在治療組合物和制劑中的使用是預(yù)期的。還可以將輔助活性成分引入本文所述的組合物和制劑中。
本發(fā)明的組合物可以是適于口服使用的形式(例如片劑、錠劑、硬或軟膠囊劑、水或油混懸劑、乳劑、可分散性散劑或顆粒劑、糖漿劑或酏劑)、適于局部使用的形式(例如乳膏劑、軟膏劑、凝膠劑或水或油溶液劑或混懸劑)、適于吸入給藥的形式(例如微細(xì)散劑或液態(tài)氣霧劑)、適于吹入給藥的形式(例如微細(xì)散劑)或者適于腸胃外給藥的形式(例如用于靜脈內(nèi)、皮下或肌內(nèi)給藥的無(wú)菌水或油溶液劑或用于直腸給藥的栓劑)。例如，用于口服使用的組合物可以包含例如一種或多種著色劑、甜味劑、調(diào)味劑和/或防腐劑。
合適的用于片劑制劑的藥學(xué)可接受的賦形劑包括例如惰性稀釋劑如乳糖、碳酸鈉、磷酸鈣或碳酸鈣；造粒劑和崩解劑如玉米淀粉或藻酸；粘合劑如淀粉；潤(rùn)滑劑如硬脂酸鎂、硬脂酸或滑石；防腐劑如對(duì)羥基苯甲酸乙酯或丙酯和抗氧化劑如抗壞血酸。片劑制劑可以是未包衣的，或者是包衣的以改進(jìn)它們?cè)谖改c道內(nèi)的崩解和隨后的活性成分的吸收或者改善它們的穩(wěn)定性和/或外觀，不論那種情況，均使用本領(lǐng)域熟知的常規(guī)包衣劑和方法進(jìn)行。
用于口服使用的組合物可以是其中活性成分與惰性固體稀釋劑如碳酸鈣、磷酸鈣或高嶺土混合的硬膠囊的形式，或者是其中活性成分與水或油如花生油、液體石蠟或橄欖油混合的軟膠囊的形式。
水混懸劑通常包含細(xì)粉末形式的活性成分和一種或多種助懸劑如羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、藻酸鈉、聚乙烯吡咯烷酮、黃蓍樹(shù)膠和阿拉伯樹(shù)膠；分散劑或潤(rùn)濕劑如卵磷脂或環(huán)氧烷與脂肪酸的縮合物(如聚氧乙烯硬脂酸酯)或環(huán)氧乙烷與長(zhǎng)鏈脂族醇的縮合物如十七烷乙烯基氧基十六醇或環(huán)氧乙烷與衍生自脂肪酸和己糖醇的偏酯的縮合物如聚氧乙烯山梨糖醇單油酸酯或環(huán)氧乙烷與衍生自脂肪酸和己糖醇酐的偏酯的縮合物如聚氧乙烯脫水山梨糖醇單油酸酯。水混懸劑還可以包含一種或多種防腐劑(如對(duì)羥基苯甲酸乙酯或丙酯)、抗氧化劑(如抗壞血酸)、著色劑、調(diào)味劑和/或甜味劑(如蔗糖、糖精或天冬甜素)。
可通過(guò)將活性成分懸浮在植物油(如花生油、橄欖油、芝麻油或椰子油)或礦物油(如液體石蠟)中來(lái)制備油混懸劑。油混懸劑還可以包含增稠劑如蜂蠟、固體石蠟或鯨蠟醇。還可以加入甜味劑，例如上文所述的那些以及調(diào)味劑以得到可口的口服制劑。這些組合物可以通過(guò)加入抗氧化劑如抗壞血酸來(lái)保存。
適于通過(guò)加入水而制備水懸浮液的可分散性散劑和顆粒劑通常包含活性成分以及分散劑或潤(rùn)濕劑、助懸劑和一種或多種防腐劑。適當(dāng)?shù)姆稚┗驖?rùn)濕劑以及助懸劑的實(shí)例如上文所提及的那些。還可以存在其他的賦形劑如甜味劑、調(diào)味劑和著色劑。
本發(fā)明的藥物組合物還可以是水包油型乳劑的形式。油相可以是植物油如橄欖油或花生油，或礦物油如液體石蠟，或它們的任意混合物。適當(dāng)?shù)娜榛瘎┛梢允抢缣烊荒z如阿拉伯樹(shù)膠或黃蓍樹(shù)膠、天然磷脂如大豆、卵磷脂、衍生于脂肪酸和己糖醇酐的酯或偏酯(如脫水山梨糖醇單油酸酯)和所述偏酯和環(huán)氧乙烷的縮合物如聚氧乙烯脫水山梨糖醇單油酸酯。乳劑還可以包含甜味劑、調(diào)味劑和防腐劑。
可以用甜味劑如甘油、丙二醇、山梨糖醇、天冬甜素或蔗糖配制糖漿劑和酏劑，并且糖漿劑和酏劑還可包含緩和劑、防腐劑、調(diào)味劑和/或著色劑。
所述藥物組合物還可以是無(wú)菌可注射用水或油混懸劑的形式，其可以根據(jù)已知方法使用一種或多種合適的如上所述的分散劑或潤(rùn)濕劑和助懸劑進(jìn)行配制。無(wú)菌可注射用制劑還可以是在無(wú)毒腸胃外可接受的稀釋劑或溶劑中的無(wú)菌可注射用溶液或懸浮液，如在1，3-丁二醇中的溶液。
栓劑可通過(guò)將活性成分和合適的非刺激性賦形劑混合來(lái)制備，所述非刺激性賦形劑在常溫下是固體但在直腸溫度下為液體，因此可以在直腸中熔化釋放出藥物。合適的賦形劑包括例如可可脂和聚乙二醇。
局部用制劑如乳膏、軟膏、凝膠劑和水或油溶液劑或混懸劑通?？赏ㄟ^(guò)使用本領(lǐng)域熟知的常規(guī)方法用活性成分和常規(guī)的局部可接受的載體或稀釋劑配制而獲得。
通過(guò)吹入給藥的組合物可以是含有平均直徑為例如30μm或更小的顆粒的微細(xì)散劑形式，該散劑本身僅包含活性成分或者用一種或多種生理學(xué)可接受的載體如乳糖稀釋。然后將用于吹入的散劑方便地保存在膠囊中，該膠囊包含例如1-50mg活性成分，通過(guò)渦輪吸入裝置如用于吹入已知藥物色甘酸鈉的裝置使用。
通過(guò)吸入給藥的組合物可以是用于使活性成分作為包含微細(xì)固體粒子或液滴的氣溶膠分配的常規(guī)加壓氣霧劑形式。可以使用常規(guī)的氣霧劑拋射劑如揮發(fā)性氟代烴或烴，并且氣霧劑裝置方便地用于分配計(jì)量量的活性成分。
關(guān)于制劑的更多信息，參見(jiàn)Comprehensive Medicinal Chemistry第5卷第25.2章(Corwin Hansch；Chairman of Editorial Board)，Pergamon Press1990，將該文獻(xiàn)特別地引入本文作為參考。
與一種或多種賦形劑組合制備單個(gè)劑型的本發(fā)明的化合物的量將必須根據(jù)治療對(duì)象、疾病或病癥的嚴(yán)重程度、給藥頻率、對(duì)該化合物的處置以及處方醫(yī)生的判斷而變化。不過(guò)，有效劑量為約0.001至約100mg/kg體重/日，優(yōu)選約1至約35mg/kg/日，單次或分開(kāi)給藥。對(duì)于70kg的人，給藥量將為約0.07至2.45g/，優(yōu)選約0.05至約1.0g/日。在一些情況下，低于前述范圍的下限的劑量水平可能是更合適的，而在另一些情況下可以使用較大的劑量而不引起任何有害的副作用，條件是該較大的劑量首先分成幾份小的劑量在該一整天中給藥。有關(guān)給藥途徑和用藥法的更多信息，參見(jiàn)Comprehensive Medicinal Chemistry第5卷第25.3章(Corwin Hansch；Chairman of Editorial Board)，Pergamon Press 1990，將該文獻(xiàn)特別地引入本文作為參考。
本發(fā)明的化合物用于治療或預(yù)防目的的劑量大小一般將根據(jù)熟知的用藥原則，根據(jù)病癥的性質(zhì)和嚴(yán)重程度、動(dòng)物或患者的年齡和性別以及給藥途徑而變化。
本發(fā)明的化合物可以單獨(dú)與用于治療將得益于抑制MEK的疾病狀態(tài)的其他藥物和治療方法組合使用。除了本發(fā)明的化合物外，所述治療還可以包括常規(guī)的外科手術(shù)或放療或化療。所述化療可以包括一種或多種下面種類(lèi)的抗腫瘤藥 (i)如醫(yī)學(xué)腫瘤學(xué)中使用的抗增殖/抗腫瘤藥，例如烷化劑(例如順鉑、奧沙利鉑、卡鉑、環(huán)磷酰胺、氮芥、美法侖、苯丁酸氮芥、白消安、替莫唑胺和亞硝基脲)；抗代謝藥(例如吉西他濱、抗葉酸類(lèi)例如氟嘧啶類(lèi)如5-氟脲嘧啶和替加氟、雷替曲塞、氨甲蝶呤、阿糖胞苷、羥基脲或歐洲專(zhuān)利申請(qǐng)239362中公開(kāi)的優(yōu)選抗代謝藥之一，例如N-(5-[N-(3，4-二氫-2-甲基-4-氧代喹唑啉-6-基甲基)-N-甲基氨基]-2-噻吩甲?；?-L-谷氨酸)；抗癌抗生素(例如蒽環(huán)霉素類(lèi)如阿霉素、博來(lái)霉素、多柔比星、柔紅霉素、表柔比星、伊達(dá)比星、絲裂霉素-C、更生霉素和光神霉素)；抗有絲分裂劑(例如長(zhǎng)春生物堿類(lèi)如長(zhǎng)春新堿、長(zhǎng)春花堿、長(zhǎng)春地辛和長(zhǎng)春瑞賓以及紫杉類(lèi)如泰素和泰索帝以及polokinase抑制劑)；和拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑(例如鬼臼霉素類(lèi)如足葉乙甙和替尼泊苷、安叮啶、托潑替坎和喜樹(shù)堿； (ii)細(xì)胞生長(zhǎng)抑制劑例如抗雌激素(例如他莫昔芬、托瑞米芬、雷洛昔芬、屈洛昔芬和艾多昔芬)、雌激素受體下調(diào)劑(例如呋維司曲)、抗雄激素(例如比卡魯胺、氟他胺、尼魯米特、醋酸環(huán)丙孕酮和CasodexTM(4’-氰基-3-(4-氟苯基磺?；?-2-羥基-2-甲基-3’-(三氟甲基)丙酰苯胺))、LHRH拮抗劑或LHRH激動(dòng)劑(例如戈舍瑞林、亮丙瑞林和布舍瑞林)、孕激素類(lèi)(例如乙酸甲地孕酮)、芳香化酶抑制劑(例如asanastrozole、來(lái)曲唑、vorazole和依西美坦)以及5α-還原酶抑制劑例如非那雄胺； (iii)抑制腫瘤細(xì)胞入侵的活性劑(例如c-Src激酶家族抑制劑和金屬蛋白酶抑制劑如馬立馬司他以及尿激酶纖溶酶原激活物受體功能抑制劑或乙酰肝素酶抗體)； (iv)生長(zhǎng)因子功能抑制劑，例如生長(zhǎng)因子抗體、生長(zhǎng)因子受體抗體(例如抗-erbB2抗體曲司佐單抗[HerceptinTM、抗-EGFR抗體panitumumab和抗-erbB 1抗體西土西單抗[Erbitux C225]]、由Stem等人Critical Reviews inOncology/Haematology，2005，vol.54，pp11-29)公開(kāi)的任何生長(zhǎng)因子或生長(zhǎng)因子受體抗體，所述抑制劑包括酪氨酸激酶抑制劑(例如表皮生長(zhǎng)因子家族酪氨酸激酶抑制劑例如N-(3-氯-4-氟苯基)-7-甲氧基-6-(3-嗎琳代丙氧基)喹唑啉-4-胺(吉非替尼，AZD1839)、N-(3-乙炔基苯基)-6，7-雙(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-胺(埃洛替尼，OSI-774)和6-丙烯酰氨-N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(3-嗎琳代丙氧基)喹唑啉-4-胺(CI 1033))、erbB2酪氨酸激酶抑制劑如lapatinib、肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子家族的抑制劑、血小板衍生生長(zhǎng)因子家族抑制劑如伊馬替尼、絲氨酸/蘇氨酸激酶的抑制劑(例如Ras/Raf信號(hào)抑制劑如法呢基轉(zhuǎn)移酶抑制劑如sorafenib(BAY 43-9006))、通過(guò)MEK和/或AKT激酶的細(xì)胞信號(hào)抑制劑、肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子家族抑制劑、c-kit抑制劑、abl激酶抑制劑、IGF受體(胰島素樣生長(zhǎng)因子)激酶抑制劑；aurora激酶抵制劑(例如AZD1152、PH739358、VX-680、MLN8054、R763、MP235、MP529、VX-528和AX39459)以及周期素依賴(lài)性激酶抑制劑如CDK2和/或CDK4抑制劑； (v)抗血管發(fā)生劑例如抑制血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子作用的活性劑(例如抗血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子抗體貝伐佐單抗[AvastinTM]、和VEGF受體酪氨酸激酶抑制劑如4-(4-溴-2-氟苯胺基)-6-甲氧基-7-(1-甲基哌啶-4-基甲氧基)喹唑啉(ZD6474，WO 01/32651實(shí)施例2內(nèi))、4-(4-氟-2-甲基吲哚-5-基氧基)-6-甲氧基-7-(3-吡咯烷-1-基丙氧基)喹唑啉(AZD2171，WO 00/47212實(shí)施例240內(nèi))、vatalanib(PTK787，WO 98/35985)和SU11248(sunitinib，WO01/60814)、例如PCT公開(kāi)WO 97/22596、WO 97/30035、WO 97/32856和WO 98/13354中公開(kāi)的化合物)以及通過(guò)其他機(jī)制起作用的化合物(例如羅喹美克、整合蛋白αvβ3功能抑制劑、MMP抑制劑、COX-2抑制劑和血管抑素)； (vi)血管破壞藥例如康布瑞塔卡汀A4以及PCT公開(kāi)WO 99/02166、WO 0/40529、WO 00/41669、WO 01/92224、WO 02/04434和WO02/08213中公開(kāi)的化合物； (vii)反義治療(例如針對(duì)上述靶的反義治療如ISIS 2503以及抗-ras反義)； (viii)基因治療方法，包括例如GVAXTM、替代異常基因例如異常p53或者異常BRCA1或BRCA2的方法、GDEPT(基因指導(dǎo)的酶前藥治療方法例如使用胞嘧啶脫氨酶、胸苷激酶或細(xì)菌硝基還原酶的方法以及增強(qiáng)患者對(duì)化療或放療的耐受性的方法，例如多藥耐藥基因治療； (ix)干擾素；和 (x)免疫治療方法，包括例如離體和體內(nèi)增加患者腫瘤細(xì)胞的免疫原性的方法例如用細(xì)胞因子例如白介素2、白介素4或粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子轉(zhuǎn)染、降低T細(xì)胞無(wú)反應(yīng)性的方法、使用轉(zhuǎn)染的免疫細(xì)胞如細(xì)胞因子轉(zhuǎn)染的樹(shù)突狀細(xì)胞的方法、使用細(xì)胞因子轉(zhuǎn)染的腫瘤細(xì)胞系的方法以及使用抗獨(dú)特型抗體的方法。
這些聯(lián)合治療可通過(guò)同時(shí)、順續(xù)或單獨(dú)給藥單個(gè)治療成分的方式來(lái)實(shí)現(xiàn)。這些組合產(chǎn)品采用在本文以上描述的劑量范圍內(nèi)的本發(fā)明化合物和規(guī)定劑量范圍內(nèi)的其他藥物活性劑。
根據(jù)本發(fā)明的這一方面，本發(fā)明提供用于聯(lián)合治療癌癥的包含本文前述定義的本發(fā)明化合物和本文前述定義的其他抗腫瘤藥的藥物組合物。
雖然本發(fā)明的化合物主要是作為用于溫血?jiǎng)游?包括人類(lèi))的治療活性劑有價(jià)值，但是在需要抑制MEK作用的任何時(shí)候它們也是有用的。因此，它們作為用于開(kāi)發(fā)新的生物學(xué)試驗(yàn)和研究新的藥理學(xué)活性劑的藥理學(xué)標(biāo)準(zhǔn)物是有用的。
由本發(fā)明涵蓋的本發(fā)明的代表性化合物包括但不限于實(shí)施例中的化合物以及它們的藥學(xué)可接受的酸或堿加成鹽或其前藥。下面給出的實(shí)施例意在例示本發(fā)明的具體實(shí)施方式
，但無(wú)意于以任何方式限制本申請(qǐng)的說(shuō)明書(shū)或權(quán)利要求書(shū)的范圍。
本申請(qǐng)中公開(kāi)的全部文章和參考文獻(xiàn)包括專(zhuān)利均引入本文作為參考。
在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，提供了包含用于治療上述疾病的物質(zhì)的制品或“試劑盒”。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述試劑盒包括含有本發(fā)明化合物或其劑型的容器。所述試劑盒還可以包括位于容器上或伴隨容器的標(biāo)簽或包裝插頁(yè)。術(shù)語(yǔ)“包裝插頁(yè)”用于指通常包括在治療產(chǎn)品的商業(yè)包裝內(nèi)的說(shuō)明書(shū)，其中包含關(guān)于使用所述治療產(chǎn)品的指征、用途、劑量、用法、禁忌和/或警告的信息。合適的容器包括例如瓶子、小瓶、注射器、泡罩包裝等。所述容器可以由各種材料如玻璃或塑料形成。所述容器保存本發(fā)明的化合物或其劑型，所述化合物或劑型可有效地治療病癥，并且可以具有無(wú)菌入口(例如，所述容器可以是靜脈內(nèi)溶液袋或小瓶，其具有皮下注射用注射器可穿刺的塞子)。所述標(biāo)簽或包裝插頁(yè)可以指示組合物用于治療的病癥選擇，例如癌癥。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述標(biāo)簽或包裝插頁(yè)指示本發(fā)明的化合物或其劑型能夠用于治療由MEK介導(dǎo)的疾病或醫(yī)學(xué)病癥。此外，所述標(biāo)簽或包裝插頁(yè)可以指示要治療的患者是患有由MEK介導(dǎo)的疾病或醫(yī)學(xué)病癥的個(gè)體，例如過(guò)度增殖性疾病或炎性病癥。所述標(biāo)簽或包裝插頁(yè)還可以指示組合物可以用于治療其他疾病。作為替代或附加，所述制品還可以包括第二容器，所述第二容器包括藥學(xué)可接受的緩沖劑如抑菌注射用水(BWFI)、磷酸鹽緩沖的鹽水、林格氏液和葡萄糖溶液。從商業(yè)和用戶(hù)的角度，它還可以包括其他合意的材料，包括其他緩沖劑、稀釋劑、過(guò)濾器、針頭和注射器。
根據(jù)另一實(shí)施方案，試劑盒包括(a)內(nèi)部包含本發(fā)明的化合物或其劑型的第一容器；和任選的(b)內(nèi)部包含第二藥物劑型的第二容器，其中所述第二藥物劑型包括具有抗過(guò)度增殖或抗炎活性的第二化合物。作為替代或附加，所述制品還可以包括含有藥學(xué)可接受的緩沖液，例如抑菌注射用水(BWFI)、磷酸鹽緩沖的鹽水、林格氏液和葡萄糖溶液的第三容器。從商業(yè)和用戶(hù)的角度，它還可以包括其他合意的材料，包括其他緩沖劑、稀釋劑、過(guò)濾器、針頭和注射器。
所述試劑盒還可以包括用于給藥本發(fā)明的化合物或其劑型的指導(dǎo)和如果存在，所述第二藥物劑型。例如，如果試劑盒包括本發(fā)明的化合物或其劑型(“第一劑型”)和第二藥物劑型，則試劑盒還可以包括用于同時(shí)、依次或獨(dú)立地向有此需要的患者給藥所述第一和第二藥物組合物的指導(dǎo)。
在另一實(shí)施方案中，所述試劑盒適合遞送本發(fā)明化合物的固體口服形式，例如片劑或膠囊。所述試劑盒優(yōu)選包括許多單位劑量。所述試劑盒可以包括卡片，卡片上具有按其預(yù)期用途列出的劑量。所述試劑盒的例子是“泡罩包裝”。泡罩包裝在包裝工業(yè)中是公知的，被廣泛用于包裝藥物單位劑型。如果需要，可以提供記憶助手，例如為數(shù)字、字母或其他標(biāo)記的形式或使用日歷插頁(yè)，用于指示治療日程表中可以給藥劑量的日期。
在某些其他實(shí)施方案中，其中試劑盒包括本發(fā)明的化合物或其劑型和第二治療藥，所述試劑盒可以包括用于包含獨(dú)立組分的容器如分開(kāi)的瓶子或分開(kāi)的箔包裹，然而，獨(dú)立的組合物也可以被包含在單個(gè)、未分開(kāi)的容器內(nèi)。通常，試劑盒包括用于給藥獨(dú)立組分的指導(dǎo)。當(dāng)優(yōu)選在不同的劑型(例如口服和胃腸外)中給藥獨(dú)立組分，當(dāng)以不同的給藥間隔給藥獨(dú)立組分，或當(dāng)處方醫(yī)師期望滴定組合的個(gè)體組分時(shí)，所述試劑盒形式是尤其有益的。
生物學(xué)測(cè)定法 可以使用下列測(cè)定法來(lái)測(cè)量本發(fā)明的化合物作為MEK抑制劑的作用。
實(shí)施例A MEK酶測(cè)定法(實(shí)驗(yàn)1a) 本發(fā)明化合物的活性可通過(guò)以下方法進(jìn)行測(cè)定。在大腸桿菌(E.coli)中表達(dá)N-末端6His-標(biāo)記的組成型活性MEK-1(2-393)，并通過(guò)常規(guī)方法純化蛋白(Ahn等人，Science 1994，265，966-970)。MEK1的活性通過(guò)以下方法進(jìn)行評(píng)估測(cè)量在MEK1存在下來(lái)自γ-33P-ATP的γ-33P-磷酸鹽在N-端His標(biāo)記的ERK2中的摻入，該N-端His標(biāo)記的ERK2在大腸桿菌中表達(dá)并通過(guò)常規(guī)方法純化。該測(cè)定法在96孔聚丙烯板上進(jìn)行。培育混合物(100μL)包含25mM Hepes，pH 7.4、10mM MgCl2、5mM β-甘油磷酸、100μM原釩酸鈉、5mM DTT、5nm MEK1和1μM ERK2。將抑制劑懸浮于DMSO中，包括對(duì)照在內(nèi)的所有反應(yīng)均在終濃度為1％的DMSO下進(jìn)行。通過(guò)加入10μM ATP(0.5μCiγ-33P-ATP/孔)使反應(yīng)開(kāi)始，并在室溫下培育45分鐘。加入等體積的25％TCA終止反應(yīng)，并使蛋白沉淀。沉淀的蛋白截留在玻璃纖維B過(guò)濾板上，并用Tomtec MACH III收集器洗去過(guò)量的標(biāo)記ATP。使板風(fēng)干，之后加入30μL/孔的Packard Microscint20，并使用Packard TopCount對(duì)板進(jìn)行計(jì)數(shù)。
實(shí)施例B 細(xì)胞FRK1/2磷酸化測(cè)定法(實(shí)驗(yàn)1b) 本發(fā)明化合物的MEK1/2抑制性質(zhì)可由下列體外細(xì)胞測(cè)定法確定?；A(chǔ)ERK1/2磷酸化的抑制通過(guò)將細(xì)胞與化合物一起培育1小時(shí)和定量固定細(xì)胞上的熒光pERK信號(hào)并歸一化為總ERK信號(hào)來(lái)確定。
材料和方法Malme-3M細(xì)胞獲自ATCC，生長(zhǎng)在補(bǔ)充有10％胎牛血清的RPMI-1640中。將細(xì)胞以15,000細(xì)胞/孔鋪在96-孔板上并使結(jié)合1-2小時(shí)。然后以最終濃度1％DMSO加入經(jīng)稀釋的化合物。在1小時(shí)后，用PBS洗滌細(xì)胞并在3.7％甲醛的PBS溶液中固定15分鐘。然后用PBS/0.2％Triton X-100洗滌并在100％MeOH中透化15分鐘。細(xì)胞在Odyssey封閉緩沖劑(LI-COR Biosciences)中封閉至少1小時(shí)。將磷酸化ERK1/2(Cell Signaling#9106，單克隆的)和總ERK12(Santa CruzBiotechnology#sc-94，多克隆的)的抗體加至細(xì)胞中并培育至少1小時(shí)。在用PBS/0.2％TritonX-100洗滌后，將細(xì)胞用熒光標(biāo)記的第二抗體(山羊抗免IgG-IRDye800，Rockland和山羊抗鼠IgG-Alexa Fluor 680，MolecularProbes)再培育1小時(shí)。然后將細(xì)胞洗滌并使用Odyssey紅外成像系統(tǒng)(LI-COR Biosciences)在兩個(gè)波長(zhǎng)處分析熒光。將磷酸化的ERK信號(hào)歸一化為總ERK信號(hào)。
實(shí)施例C 水溶性測(cè)定法 化合物的熱力學(xué)水溶性使用改良的搖瓶法測(cè)量。各化合物的結(jié)晶度使用偏振光顯微鏡(Olympus BX51)證實(shí)。對(duì)于各受試化合物，將約0.5mg干燥化合物稱(chēng)量到小瓶中以用于制備標(biāo)準(zhǔn)溶液。再將約0.5mg稱(chēng)量到幾個(gè)小瓶中用于水性未知物，一個(gè)小瓶用于一個(gè)待測(cè)pH。
對(duì)于各水性未知物，將處于期望pH下的0.5mL水性緩沖液(10mM磷酸鉀)加至0.5mg干燥化合物中。(對(duì)于pH 1.2，使用0.1N HCl)。因此該測(cè)定法的上限濃度為1mg/mL。然后將各水性未知物在350rpm在室溫下渦旋24小時(shí)以允許足夠的時(shí)間用于平衡。在渦旋后，檢查各樣品的最終pH并證實(shí)。然后取出等份并過(guò)濾到HPLC小瓶中用于分析。
各化合物的貯備液通過(guò)將0.5mg化合物溶于總體積為1mL的甲醇中制備，貯備液濃度為500μg/mL。然后將貯備液系列稀釋以產(chǎn)生5至250μg/mL的校正曲線。
緊接著用LC/UV分析樣品和標(biāo)準(zhǔn)品。對(duì)于各含水樣品，將兩種不同的體積注射三次。對(duì)于各標(biāo)準(zhǔn)品，將兩種不同的體積注射一次。將獲得超出校正范圍以外的峰的樣品系列稀釋并再次分析。
HPLC/PDA系統(tǒng)由Alliance 2795分離系統(tǒng)(Waters)或Acquity UPLC分離系統(tǒng)(Waters)以及2996光電二極管陣列檢測(cè)器(Waters)組成。在Alliance系統(tǒng)中，分析物的色譜分離使用YMC ODS-Aq C18柱(3.0×50mm，3μm粒度，120

，Waters)聯(lián)合流動(dòng)相A(水性，0.01％七氟丁酸(HFBA)，1％異丙醇)和B(0.01％HFBA和1％異丙醇的乙腈溶液)的梯度條件實(shí)現(xiàn)。單次注射的總運(yùn)行時(shí)間，包括再平衡時(shí)間為5分鐘。分析物響應(yīng)通過(guò)監(jiān)測(cè)220nm和254nm處的吸光度測(cè)量。大多數(shù)化合物在該系統(tǒng)中的檢測(cè)限為約1μg/mL。
在Acquity系統(tǒng)中，分析物的色譜分離使用AcquityUPLC BEH，C18柱(2.1×50mm，1.7μm粒度，Waters)聯(lián)合流動(dòng)相A(水性，0.1％甲酸(FA)，1％異丙醇)和B(0.1％FA和1％異丙醇的乙腈溶液)的梯度條件實(shí)現(xiàn)。單次注射的總運(yùn)行時(shí)間，包括再平衡時(shí)間為3分鐘。分析物響應(yīng)通過(guò)監(jiān)測(cè)220nm和254nm處的吸光度測(cè)量。大多數(shù)化合物在該系統(tǒng)中的檢測(cè)限為約1g/mL。在Acquity系統(tǒng)的后端為ZQ-2000單個(gè)四極質(zhì)譜儀(Waters)。正極ESI用于母體化合物的質(zhì)量鑒定。
獲得數(shù)據(jù)并用Waters Empower軟件處理。校正通過(guò)將分析物的峰面積比作為標(biāo)準(zhǔn)樣品的名義濃度的函數(shù)繪圖而實(shí)現(xiàn)。校正模型通過(guò)校正曲線的線性回歸而產(chǎn)生。模型用于計(jì)算所有含水樣品的濃度。
盡管預(yù)知式I至VI的化合物的藥理學(xué)性質(zhì)會(huì)隨著結(jié)構(gòu)變化而不同，但通?；衔锼哂械幕钚院?或溶解度可以由下列濃度或劑量證明 式II的化合物 實(shí)驗(yàn)1a(酶測(cè)定法)IC50≤250nM，例如≤100nM，再例如≤30nM。
實(shí)驗(yàn)1b(細(xì)胞測(cè)定法)IC50≤180nM，例如≤80nM，再例如≤10nM。
式III的化合物 實(shí)驗(yàn)1a(酶測(cè)定法)IC50≤250nM，例如≤50nM，再例如≤20nM；和 實(shí)驗(yàn)1b(細(xì)胞測(cè)定法)IC50≤600nM，例如≤30nM，再例如≤10nM。
式V的化合物 實(shí)驗(yàn)1a(酶測(cè)定法)IC50≤40nM，例如≤20nM；和 實(shí)驗(yàn)1b(細(xì)胞測(cè)定法)IC50≤10nM。
式VI的化合物 實(shí)驗(yàn)1a(酶測(cè)定法)IC50≤35nM，再例如≤15nM，再例如≤10nM。
實(shí)驗(yàn)1b(細(xì)胞測(cè)定法)IC50≤5nM，再例如≤1nM。
實(shí)施例 為例證本發(fā)明，引入以下的實(shí)施例。不過(guò)，要理解，這些實(shí)施例并不限制本發(fā)明而僅是意在提出實(shí)踐本發(fā)明的方法。本領(lǐng)域技術(shù)人員將認(rèn)識(shí)到所描述的化學(xué)反應(yīng)可容易地適于制備多種本發(fā)明的其他MEK抑制劑，而且制備本發(fā)明的化合物的替代方法也認(rèn)為在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。例如，通過(guò)對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員而言清楚的修改，例如通過(guò)適宜地保護(hù)干擾基團(tuán)、通過(guò)利用除了那些已描述的試劑以外的本領(lǐng)域已知的其他合適試劑和/或通過(guò)對(duì)反應(yīng)條件進(jìn)行常規(guī)修改可以成功地進(jìn)行根據(jù)本發(fā)明的未例示化合物的合成。另外，應(yīng)認(rèn)識(shí)到，本文公開(kāi)的或者本領(lǐng)域已知的其他反應(yīng)物適用于制備本發(fā)明的其他化合物。
在下面描述的實(shí)施例中，除非另有說(shuō)明，所有溫度均以攝氏溫度表述。除非另有說(shuō)明，試劑購(gòu)自商業(yè)供應(yīng)商如Aldrich Chemical Company、Lancaster，TCI或Maybridge，并且使用時(shí)沒(méi)有進(jìn)一步純化。四氫呋喃(THF)、N，N-二甲基甲酰胺(DMF)、二氯甲烷、甲苯、二惡烷和1，2-二氟乙烷以全密封瓶購(gòu)自Aldrich，并按原樣使用。
以下所述的反應(yīng)一般在氮?dú)饣驓鍤庹龎合禄蚴褂酶稍锕?除非另有說(shuō)明)在無(wú)水溶劑中進(jìn)行，反應(yīng)瓶通常配備橡膠隔片以經(jīng)注射器加入底物和試劑。玻璃器皿烘干/或熱干。
柱色譜法在帶有硅膠柱的Biotage系統(tǒng)(制造商Dyax Corporation)上或在硅膠SepPak cartridge(Waters)上進(jìn)行。
使用Varian儀器于400MHz下記錄1H-NMR譜。使用氯仿作為參比標(biāo)準(zhǔn)(7.25ppm)，得到CDCl3溶液的1H-NMR(以ppm報(bào)告)。如果需要，使用其他的NMR溶劑。當(dāng)報(bào)告多個(gè)峰時(shí)，使用以下縮略詞s(單峰)、d(雙峰)、t(三重峰)、m(多重峰)、br(寬峰)、dd(雙二重峰)、dt(雙三重峰)。給出偶聯(lián)常數(shù)時(shí)，以赫茲(Hz)報(bào)告。
實(shí)施例1
4-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺 步驟A2-(2-甲基亞聯(lián)氨基)丙酸乙酯的制備在0℃，向丙酮酸乙酯(37.8mL，338mmol)和MgSO4(40.8g，339mmol)的CHCl3(500mL)懸浮液中加入甲基肼(18.0mL，332mmol)的CHCl3(100mL)溶液。將反應(yīng)混合物溫?zé)岬绞覝?。在室溫下攪?4小時(shí)后，將反應(yīng)混合物過(guò)濾。將濾液減壓濃縮，得到44g(94％)期望的產(chǎn)物，將其不經(jīng)進(jìn)一步純化直接使用。
步驟B3-(2-(1-乙氧基-1-氧代亞丙烷-2-基)-1-甲基肼基)-3-氧代丙酸甲酯的制備在0℃，向2-(2-甲基亞聯(lián)氨基)丙酸乙酯(25.0mL，186mmol)的THF(500mL)溶液中加入LiH(2.02g，241mmol)。將所得混合物在0℃攪拌10分鐘，溫?zé)岬绞覝?，并攪?小時(shí)。在0℃加入甲基丙二酰氯(26.7mL，242mmol)的THF(20mL)溶液。將反應(yīng)物溫?zé)岬绞覝夭嚢?6小時(shí)。在0℃，用1N HCl水溶液小心地驟冷反應(yīng)物，減壓濃縮，并用EtOAc稀釋。有機(jī)層用MgSO4干燥，過(guò)濾，并減壓濃縮以得到46g(99％)期望的產(chǎn)物，將其不經(jīng)進(jìn)一步純化直接使用。
步驟C5-羥基-2，6-二甲基-3-氧代-2，3-二氫噠嗪-4-羧酸甲酯的制備在0℃，向2-(2-甲基-2-(甲基-3-氧代丙?；?亞聯(lián)氨基)丙酸乙酯(1.02g，4.09mmol)的MeCN(10mL)溶液中加入DBU(2.0mL，13mmol)。將反應(yīng)混合物溫?zé)岬绞覝夭嚢?小時(shí)。將反應(yīng)混合物減壓濃縮并用EtOAc稀釋。有機(jī)層用10％HCl水溶液洗滌，用MgSO4干燥，過(guò)濾，并減壓濃縮以得到0.39g(48％)粗制產(chǎn)物，將其不經(jīng)進(jìn)一步純化直接使用。
步驟D5-羥基-2，6-二甲基噠嗪-3(2H)-酮的制備將5-羥基-2，6-二甲基-3-氧代-2，3-二氫噠嗪-4-羧酸甲酯(3.00g，15.1mmol)和6N HCl水溶液(25mL，150mmol)在二噁烷(25mL)中的混合物回流48小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻到室溫并減壓濃縮以得到粗制產(chǎn)物，將其用EtOAc稀釋。有機(jī)層用水和鹽水洗滌，用MgSO4干燥，過(guò)濾，并減壓濃縮以得到0.74g(35％)期望的產(chǎn)物。水層減壓濃縮。所得固體用水和EtOAc-THF稀釋。將有機(jī)層分離。水層用EtOAc(2x)萃取。合并的有機(jī)層用MgSO4干燥，過(guò)濾，并減壓濃縮以得到另外0.80g(37％)期望的產(chǎn)物。總共獲得1.54g(72％)期望的產(chǎn)物，將其不經(jīng)進(jìn)一步純化直接使用。
步驟E5-氯-2，6-二甲基噠嗪-3(2H)-酮的制備將5-羥基-2，6-二甲基噠嗪-3(2H)-酮(736mg，5.25mmol)和POCl3(4.5mL)的混合物在85℃攪拌2小時(shí)。將反應(yīng)混合物減壓濃縮以得到粗制產(chǎn)物，將其用飽和Na2CO3水溶液驟冷。將所得混合物攪拌2小時(shí)并用EtOAc(3x)萃取。合并的有機(jī)層用MgSO4干燥，過(guò)濾，并減壓濃縮以得到587mg(70％)期望的產(chǎn)物，將其不經(jīng)進(jìn)一步純化直接使用。
步驟F4-氯-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-羧酸的制備存0℃，存攪拌下向5-氯-2，6-二甲基噠嗪-3(2H)-酮(780mg，4.67mmol)的發(fā)煙H2SO4(25mL)溶液中緩慢加入K2Cr2O7(3.33g，11.2mmol)。在加入K2Cr2O7后，除去冰浴并使反應(yīng)混合物溫?zé)岬绞覝?。?dāng)反應(yīng)開(kāi)始進(jìn)展得太快時(shí)，再放置冰浴并加入剩余的K2Cr2O7。將反應(yīng)混合物在60℃攪拌16小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻到室溫，倒入冰中，并用EtOAc(3x)萃取。合并的有機(jī)層用MgSO4干燥，過(guò)濾，并減壓濃縮以得到649mg(74％)期望產(chǎn)物，將其不經(jīng)進(jìn)一步純化直接使用。
步驟G4-氨-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-羧酸甲酯的制備將4-氯-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-羧酸(390mg，2.07mmol)和濃HCl(0.10mL)的MeOH(6mL)溶液回流8小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻到室溫并減壓濃縮以得到粗制產(chǎn)物，將其再溶于EtOAc中。有機(jī)層用水洗滌，用MgSO4干燥，過(guò)濾，并減壓濃縮以得到粗制產(chǎn)物，將其通過(guò)硅膠閃蒸柱色譜法(100％己烷至10至20至30至50％EtOAc的己烷溶液)純化以提供72mg(17％)期望的產(chǎn)物。
步驟H4-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-羧酸甲酯的制備在N2氣氛下，將4-氯-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-羧酸甲酯(72mg，0.35mmol)、2-氟-4-甲硫基苯胺(69mg，0.44mmol)、Pd(OAc)2(10mg，0.044mmol)、BINAP(40mg，0.064mmol)、和Cs2CO3(197mg，0.60mmol)在甲苯(1.5mL)中的混合物溶液密封到小瓶?jī)?nèi)。將它在室溫下攪拌10分鐘，然后在80℃在攪拌下加熱16小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻到室溫并用EtOAc稀釋。將沉淀物濾除并用EtOAc洗滌。將濾液用水洗滌。將有機(jī)層分離，水層用EtOAc萃取。合并的有機(jī)層用MgSO4干燥，過(guò)濾，濃縮以得到粗制產(chǎn)物，將其通過(guò)硅膠閃蒸柱色譜法(100％CH2Cl2至1％MeOH的CH2Cl2溶液)純化，然后再進(jìn)行硅膠閃蒸柱色譜法(10至15至20％EtOAc的CH2Cl2溶液)純化以提供48mg(42％)期望的產(chǎn)物。
步驟I4-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-1-甲基-6-氧代-N-(2-(乙烯基氧基)乙氧基)-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺的制備在0℃，向4-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-羧酸甲酯(25mg，0.077mmol)和O-(2-乙烯基氧基-乙基)-羥胺(24mg，0.23mmol)的THF(2mL)溶液中加入LiHMDS(0.54mL，0.54mmol，1M的THF溶液)。將反應(yīng)混合物溫?zé)岬绞覝夭嚢?小時(shí)。將反應(yīng)混合物用飽和NaHCO3水溶液驟冷并用EtOAc稀釋。有機(jī)層用鹽水洗滌，用MgSO4干燥，過(guò)濾，并減壓濃縮以得到粗制產(chǎn)物，將其通過(guò)硅膠閃蒸柱色譜法(100％CH2Cl2至1.5％MeOH的CH2Cl2溶液)純化以得到30mg(99％)期望的產(chǎn)物。
步驟J4-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺的制備在室溫下，向4-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-1-甲基-6-氧代-N-(2-(乙烯基氧基)乙氧基)-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺(30mg，0.077mmol)的EtOH/THF(2mL/2mL)溶液中加入1N HCl水溶液(0.15mL，0.15mmol，1N水溶液)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。將反應(yīng)混合物中和到pH 7，用EtOAc(3x)稀釋?zhuān)盟礈?，用MgSO4干燥，過(guò)濾，并減壓濃縮以得到粗制產(chǎn)物，將其通過(guò)硅膠閃蒸柱色譜法(100％EtOAc至100％CH2Cl2至2.5至3至5％MeOH的CH2Cl2溶液)純化以提供6mg(22％)期望的產(chǎn)物。檢測(cè)到MS APCI(-)m/z 367(M-1)；1HNMR(400MHz，CD3OD)δ7.35(t，1H)，7.18(dd，1H)，7.14(dd，1H)，5.92(s，1H)，4.06(t，2H)，3.79(t，2H)，3.74(s，3H)，2.51(s，3H)。
實(shí)施例2
5-溴-4-(4-溴-2-氟苯氨基)-N-(環(huán)丙基甲氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺 步驟A4-(2-氟苯氨基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-羧酸甲酯的制備按照前面實(shí)施例1(步驟H)所述的操作，使用4-氯-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-羧酸甲酯(109mg，0.54mmol，按照前面實(shí)施例1(步驟A-G)所述制備)和2-氟苯胺(0.053mL，0.54mmol)，以61％的產(chǎn)率制備標(biāo)題化合物。
步驟B5-溴-4-(4-溴-2-氟苯氨基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-羧酸甲酯的制備將4-(2-氟苯氨基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-羧酸甲酯(88mg，0.32mmol)和NBS(59mg，0.33mmol)在DMF(1.5mL)中的混合物在室溫下攪拌2小時(shí)。反應(yīng)混合物用EtOAc稀釋并用水(2x)洗滌。有機(jī)層用MgSO4干燥，過(guò)濾，并減壓濃縮以得到粗制產(chǎn)物，將其通過(guò)硅膠閃蒸柱色譜法(100％CH2Cl2至0.5％MeOH的CH2Cl2溶液)純化然后再進(jìn)行硅膠閃蒸柱色譜法(30％EtOAc的CH2Cl2溶液)純化以得到80mg 5-溴-4-(2-氟苯氨基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-羧酸甲酯和5-溴-4-(4-溴-2-氟苯氨基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-羧酸甲酯的混合物。將該混合物再進(jìn)行溴化。在室溫下向該混合物中加入DMF(1.5mL)然后加入NBS(29mg，0.22mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2.5小時(shí)。再加入15mgNBS并將反應(yīng)混合物在室溫下再攪拌20小時(shí)。將反應(yīng)混合物用EtOAc稀釋并用水(2x)洗滌。有機(jī)層用MgSO4干燥，過(guò)濾，并減壓濃縮以得到粗制產(chǎn)物，將其通過(guò)硅膠閃蒸柱色譜法(30％EtOAc的CH2Cl2溶液)純化以提供62mg(64％)期望的產(chǎn)物。
步驟C5-溴-4-(4-溴-2-氟苯氨基)-N-(環(huán)丙基甲氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺的制備按照實(shí)施例1(步驟I)所述的操作，使用5-溴-4-(4-溴-2-氟苯氨基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-羧酸甲酯(31mg，0.071mmol)和O-環(huán)丙基甲基-羥胺(20mg，0.23mmol)，以40％的產(chǎn)率制備標(biāo)題化合物。檢測(cè)到MS APCI(-)m/z 487，489，491(M-1，Br圖譜)；1HNMR(400MHz，CD3OD)δ7.38(dd，1H)，7.31(dd，1H)，7.05(t，1H)，3.82(s，3H)，3.65(d，2H)，1.13(m，1H)，0.58(q，2H)，0.31(q，2H)。
實(shí)施例3
4-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺 步驟AN-甲基丙酰肼的制備在0℃，向甲基肼(27.6mL，508mmol)和催化量DMAP的CH2Cl2(130mL)溶液中加入乙酰氯(15.0mL，169mmol)的CH2Cl2(30mL)溶液。將反應(yīng)混合物溫?zé)岬绞覝夭嚢?6小時(shí)。將白色固體濾除并將濾液減壓濃縮以得到粗制產(chǎn)物，將其通過(guò)真空蒸餾純化以提供8.25g(48％)期望的產(chǎn)物(63-66℃在0.14mm Hg)。
步驟B2-(2-甲基-2-丙?；鶃喡?lián)氨基)丙二酸二乙酯的制備將N-甲基丙酰肼(18.78g，183.9mmol)和氧代丙二酸二乙酯(56.1mL，368mmol)的甲苯(136mL)溶液在Dean-Stark分水器中回流4小時(shí)。將反應(yīng)混合物減壓濃縮以得到粗制產(chǎn)物，將其通過(guò)硅膠閃蒸柱色譜法(100％己烷至5至10％EtOAc的己烷溶液)純化以提供23g(49％)期望的產(chǎn)物。
步驟C4-羥基-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-羧酸乙酯的制備在-78℃，向LiHMDS(0.78mL，0.78mmol，1M THF溶液)的THF(1mL)溶液中加入2-(2-甲基-2-丙?；鶃喡?lián)氨基)丙二酸二乙酯(50mg，0.19mmol)的THF(1mL)溶液。將所得混合物緩慢溫?zé)岬?40℃并在-40℃攪拌1.5小時(shí)。將反應(yīng)混合物用10％HCl水溶液驟冷并用水稀釋。將所得混合物用EtOAc(2x)萃取。合并的有機(jī)層用水洗滌，用MgSO4干燥，過(guò)濾，并減壓濃縮以得到粗制產(chǎn)物，將其通過(guò)硅膠閃蒸柱色譜法(100％己烷至20％EtOAc的己烷溶液)純化以提供25mg(61％)期望的產(chǎn)物。
步驟D4-氯-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-羧酸乙酯的制備將4-羥基-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-羧酸乙酯(1.85g，8.72mmol)和POCl3(9mL)的混合物在85℃加熱16小時(shí)。在減壓下除去POCl3。然后將粗制產(chǎn)物用冰水驟冷?；旌衔镉蔑柡退芤篘aHCO3(pH～6至7)中和并用EtOAc(3x)萃取。合并的有機(jī)層用MgSO4干燥，過(guò)濾，并減壓濃縮以得到粗制產(chǎn)物，將其通過(guò)硅膠閃蒸柱色譜法(100％己烷至5至10至20％EtOAc的己烷溶液)純化以提供1.72g(86％)期望的產(chǎn)物。
步驟E4-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-羧酸乙酯的制備按照實(shí)施例1(步驟H)所述的操作，使用4-氯-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-羧酸乙酯((500mg，2.17mmol)和2-氟-4-甲硫基苯胺(375mg，2.38mmol)，以81％的產(chǎn)率制備標(biāo)題化合物。
步驟F4-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺的制備按照實(shí)施例1(步驟I和J)所述的操作，使用4-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-羧酸乙酯(50mg，0.14mmol)和O-(2-乙烯基氧基-乙基)-羥胺(44mg，0.43mmol)，以78％的產(chǎn)率制備標(biāo)題化合物。檢測(cè)到MS APCI(-)m/z 381(M-1)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.10(dd，1H)，7.03(dd，1H)，6.87(t，1H)，3.99(t，2H)，3.79(s，3H)，3.74(t，2H)，2.47(s，3H)，1.74(s，3H)。
按照實(shí)施例1(步驟I)所述的操作，使用4-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-羧酸乙酯和適當(dāng)?shù)牧u胺制備下列化合物。
實(shí)施例4
N-(環(huán)丙基甲氧基)-4-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺 檢測(cè)到MS APCI(-)m/z 391(M-1)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.09(dd，1H)，7.03(dd，1H)，6.86(t，1H)，3.78(s，3H)，3.71(d，2H)，2.47(s，3H)，1.75(s，3H)1.16(m，1H)，0.58(m，2H)，0.31(m，2H)。
實(shí)施例5
4-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-N-(2-甲氧基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺 檢測(cè)到MS APCI(-)m/z 395(M-1)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.10(dd，1H)，7.03(d，1H)，6.87(t，1H)，4.05(t，2H)，3.78(s，3H)，3.64(t，2H)，3.37(s，3H)，2.47(s，3H)，1.74(s，3H)。
實(shí)施例6
4-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-N-甲氧基-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺 檢測(cè)到MS APCI(-)m/z 351(M-1)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.10(d，1H)，7.04(d，1H)，6.87(t，1H)，3.78(s，3H)，3.76(s，3H)，2.47(s，3H)，1.74(s，3H)。
實(shí)施例7
4-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺 步驟A4-羥基-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-羧酸的制備在-78℃，向LiHMDS(331mL，331mmol，1M THF溶液)的THF(430mL)溶液中加入按照實(shí)施例3(步驟B)所述的操作制備的2-(2-甲基-2-丙酰基亞聯(lián)氨基)丙二酸二乙酯(21.40g，82.86mmol)的THF(10mL)溶液。在1小時(shí)內(nèi)將所得混合物緩慢溫?zé)岬?40℃并在-40℃攪拌1.5小時(shí)。向-40℃的反應(yīng)混合物中加入水(500mL)。將反應(yīng)混合物溫?zé)岬绞覝夭嚢?小時(shí)。將反應(yīng)混合物減壓濃縮以除去THF。在0℃，將所得水性混合物用6N HCl水溶液驟冷，并酸化到pH 1至2。將所得混合物在室溫下攪拌16小時(shí)。將沉淀物濾除并用CH2Cl2研磨以提供7.21g(47％)期望的產(chǎn)物。濾液用EtOAc(3x)萃取。合并的有機(jī)層用水洗滌，用MgSO4干燥，過(guò)濾，并減壓濃縮以得到粗制產(chǎn)物，將其用CH2Cl2研磨以得到另外3.56g(23％)期望的產(chǎn)物。水層再用EtOAc(3x)萃取。合并的有機(jī)層用水洗滌，用MgSO4干燥，過(guò)濾，并減壓濃縮以得到粗制產(chǎn)物，將其用CH2Cl2研磨以得到另外1.32g(9％)期望的產(chǎn)物?？偣驳玫?2.09g(79％)期望的產(chǎn)物。
步驟B4-氯-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-羧酸的制備將4-羥基-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-羧酸(876mg，4.76mmol)和POCl3(4.5mL)的混合物在85℃加熱24小時(shí)。在減壓下除去POCl3。粗制產(chǎn)物用冰驟冷。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。在通過(guò)過(guò)濾除去固體后，水性濾液用EtOAc(3x)萃取。合并的有機(jī)層用MgSO4干燥，過(guò)濾，并減壓濃縮以得到粗制產(chǎn)物。將回收的產(chǎn)物與前面分離的固體合并并用乙醚研磨以提供577mg(60％)期望的產(chǎn)物。
步驟C4-(2-氟-4-碘苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-羧酸的制備在-78℃，向4-氯-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-羧酸(200mg，0.99mmol)和2-氟-4-碘苯胺(478mg，1.97mmol)的THF(6.5mL)懸浮液中緩慢加入LiHMDS(3.00mL，3.00mmol，1M THF溶液)。在完成加入后，將所得混合物緩慢溫?zé)岬绞覝夭嚢?小時(shí)。在0℃，將反應(yīng)混合物用6N HCl水溶液(8mL)驟冷，溫?zé)岬绞覝兀嚢?.5小時(shí)。將沉淀物過(guò)濾，用水和醚洗滌，并用醚研磨以提供158mg(38％)期望的產(chǎn)物。
步驟D4-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺的制備在室溫下，向4-(2-氟-4-碘苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-羧酸(41mg，0.10mmol)和HOBt(28mg，0.21mmol)的DMF(1.5mL)懸浮液中加入EDCI(40mg，0.21mmol)。將所得混合物攪拌1.5小時(shí)。在室溫下將O-(2-乙烯基氧基乙基)羥胺(21mg，0.20mrmol)和TEA(0.030mL，0.22mmol)加至活化的酯中。在攪拌1.5小時(shí)后，將反應(yīng)混合物用EtOAc稀釋并用飽和NH4Cl水溶液、鹽水、飽和NaHCO3(2x)水溶液和鹽水洗滌。將有機(jī)層分離，用MgSO4干燥，過(guò)濾，并減壓濃縮以得到4-(2-氟-4-碘苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-N-(2-(乙烯基氧基)乙氧基)-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺，將其不經(jīng)進(jìn)一步純化直接使用。按照前面實(shí)施例1(步驟J)所述的操作，使用粗4-(2-氟-4-碘苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-N-(2-(乙烯基氧基)乙氧基)-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺制備標(biāo)題化合物(兩步產(chǎn)率為40％)。檢測(cè)到MS APCI(-)m/z 461(M-1)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.52(dd，1H)，7.44(d，1H)，6.63(t，1H)，3.98(t，2H)，3.80(s，3H)，3.74(t，2H)，1.78(s，3H)。
按照前面實(shí)施例7(步驟C和D)所述的操作，使用適當(dāng)?shù)谋桨泛土u胺制備下列化合物。在一些情況下，可能需要最終的脫保護(hù)步驟。這些脫保護(hù)可通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)文獻(xiàn)方法實(shí)現(xiàn)。
實(shí)施例8
(R)-N-(2，3-二羥基丙氧基)-4-(2-氟-4-碘苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺 檢測(cè)到MS APCI(-)m/z 491(M-1)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.52(dd，1H)，7.44(d，1H)，6.63(t，1H)，4.02(m，1H)，3.88(m，2H)，3.80(s，3H)，3.59(m，2H)，1.77(s，3H)。
實(shí)施例9
4-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-甲氧基-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺 檢測(cè)到MS APCI(-)m/z 431(M-1)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.52(dd，1H)，7.44(d，1H)，6.63(t，1H)，3.79(s，3H)，3.75(s，3H)，1.77(s，3H)。
實(shí)施例10
N-(環(huán)丙基甲氧基)4-(2-氟-4-碘苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺 檢測(cè)到MS APCI(-)m/z 471(M-1)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.51(dd，1H)，7.44(d，1H)，6.62(t，1H)，3.79(s，3H)，3.70(d，2H)，1.78(s，3H)，1.15(m，1H)，0.57(q，2H)，0.30(q，2H)。
實(shí)施例11
4-(4-溴-2-氟苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺 步驟A2-(2-甲基亞聯(lián)氨基)丙二酸二乙酯的制備在室溫下，向氧代丙二酸二乙酯(95g，546mmol)的EtOH(600mL)溶液(2L 3-頸燒瓶，配有熱電偶，N2管道，冷凝器和機(jī)械攪拌器)中一次性加入MeNHNH2(32mL，600mmol)。將反應(yīng)混合物溫?zé)岬?0℃(內(nèi)部溫度，通過(guò)加熱套加熱)并攪拌6小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻到室溫并攪拌過(guò)夜。將反應(yīng)混合物減壓濃縮以得到粗制產(chǎn)物以及固體沉淀物，將其通過(guò)硅膠塞(3∶2己烷∶EtOAc)純化以提供81g(74％)期望的產(chǎn)物。
步驟B2-(2-甲基-2-丙?；鶃喡?lián)氨基)丙二酸二乙酯的制備在0℃，在45分鐘內(nèi)，通過(guò)加液漏斗向2-(2-甲基亞聯(lián)氨基)丙二酸鹽(100g，494mmol)的THF(1L)溶液中加入LiHMDS(643mL，643mmol)。將反應(yīng)混合物在0℃攪拌45分鐘。一次性加入丙酰氯(51.6mL，593mmol)。將所得混合物溫?zé)岬绞覝夭嚢?0小時(shí)。將所得混合物用飽和NH4Cl水溶液(85mL)和水(85mL)驟冷。將反應(yīng)混合物減壓濃縮并加入額外的水(300mL)。將所得混合物用EtOAc(3×250mL)萃取。將合并的有機(jī)層用飽和NaHCO3水溶液(2×250mL)然后用鹽水(250mL)洗滌，用MgSO4干燥，過(guò)濾，并減壓濃縮以得到112g(88％)粗制產(chǎn)物，將其不經(jīng)進(jìn)一步純化直接用于下一步驟。
步驟C4-羥基-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-羧酸的制備在-78℃，向LiHMDS(331mL，331mmol，1M THF溶液)的THF(430mL)溶液中加入2-(2-甲基-2-丙?；鶃喡?lián)氨基)丙二酸鹽(21.40g，82.86mmol)的THF(10mL)溶液。在1小時(shí)內(nèi)將所得混合物緩慢溫?zé)岬?40℃并在-40℃攪拌1.5小時(shí)。在-40℃向反應(yīng)混合物中加入水(500mL)。將反應(yīng)混合物溫?zé)岬绞覝夭嚢?小時(shí)。將反應(yīng)混合物減壓濃縮，在0℃用6N HCl水溶液驟冷，并酸化到pH 1至2。將所得混合物在室溫下攪拌16小時(shí)。將沉淀物濾除并用CH2Cl2研磨以提供7.21g(47％)期望的產(chǎn)物。將濾液用EtOAc(3x)萃取。合并的有機(jī)層用水洗滌，用MgSO4干燥，過(guò)濾，并減壓濃縮以得到粗制產(chǎn)物，將其用CH2Cl2研磨以得到另外3.56g(23％)期望的產(chǎn)物。水層再用EtOAc(3x)萃取。合并的有機(jī)層用水洗滌，用MgSO4干燥，過(guò)濾，并減壓濃縮以得到粗制產(chǎn)物，將其用CH2Cl2研磨以得到另外1.32g(9％)期望的產(chǎn)物。總共得到12.09g(79％)期望的產(chǎn)物。
步驟D4-氯-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-羧酸的制備將4-羥基-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-羧酸(35.4g，192mmol)、催化量的DMF(3滴)、和POCl3(178mL，1.92mol)的混合物在90℃加熱2天，然后減壓除去POCl3。將粗制產(chǎn)物用冰驟冷，將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2小時(shí)。濾除由溶液形成的沉淀物并用醚洗滌。將收集的沉淀物用醚研磨以提供11.7g(30％)期望的產(chǎn)物。濾液用EtOAc(2x)萃取。合并的有機(jī)層用MgSO4干燥，過(guò)濾，并減壓濃縮以得到粗制產(chǎn)物，將其用醚研磨并減壓干燥以得到另外9.56g(24％)期望的產(chǎn)物?？偣驳玫?1.29g(55％)期望的產(chǎn)物。
步驟E4-(4-溴-2-氟苯基aminuteso)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-羧酸的制備在-78℃，向4-溴-2-氟苯胺(22.6g，116mmol)的THF(165mL)溶液中緩慢加入LiHMDS(174mL，174mmol，1M THF溶液)的溶液。將所得混合物在-78℃攪拌1小時(shí)。在-78℃，向該混合物中加入作為固體的4-氯-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-羧酸(11.0g，54.4mmol)。將反應(yīng)混合物緩慢溫?zé)岬绞覝夭嚢?1小時(shí)。在0℃用10％HCl水溶液(250mL)驟冷反應(yīng)物并酸化。向該混合物中加入水(100mL)、EtOAc(350mL)和鹽水(50mL)。將反應(yīng)混合物溫?zé)岬绞覝夭嚢?0分鐘。將有機(jī)層分離并用EtOAc(2×300mL)萃取酸性水層。合并的有機(jī)層用MgSO4干燥，過(guò)濾，并減壓濃縮以得到粗制產(chǎn)物，將其用醚(5x)研磨，過(guò)濾，用醚洗滌，并減壓干燥以提供14.51g(75％)期望的產(chǎn)物。
步驟F4-(4-溴-2-氟苯基aminuteso)-1，5-二甲基-6-氧代-N-(2-(乙烯基氧基)乙氧基)-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺的制備在室溫下向4-(4-溴-2-氟苯基aminuteso)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-羧酸(14.51g，40.74mmol)和HOBt(11.01g，81.48mmol)的DMF(165mL)懸浮液中加入EDCI(15.62g，81.48mmol)。將所得混合物攪拌1.5小時(shí)。在室溫下將O-(2-(乙烯基氧基)乙基)羥胺(8.36mL，81.48mmol)和TEA(11.36mL，81.48mmol)加至活化的酯中。在攪拌1.5小時(shí)后，將反應(yīng)混合物用EtOAc稀釋并用飽和NH4Cl水溶液、鹽水、飽和NaHCO3(2x)水溶液和鹽水洗滌。將有機(jī)層分離，用MgSO4干燥，過(guò)濾，并減壓濃縮以得到粗制產(chǎn)物，將其不經(jīng)進(jìn)一步純化直接使用。
步驟G4-(4-溴-2-氟苯基aminuteso)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺的制備將4-(4-溴-2-氟苯基aminuteso)-1，5-二甲基-6-氧代N-(2-(乙烯基氧基)乙氧基)-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺(17.98g，40.75mmol)和6N HCl水溶液(13.58mL，81.50mmol)在EtOH/THF(50mL/50mL)中的混合物在室溫下攪拌3小時(shí)。將反應(yīng)混合物減壓濃縮并用水(50mL)稀釋。將所得混合物用EtOAc(2x)萃取。合并的有機(jī)層用MgSO4干燥，過(guò)濾，并減壓濃縮以得到粗制產(chǎn)物，將其通過(guò)硅膠閃蒸柱色譜法(100％CH2Cl2至2.5％MeOH的CH2Cl2溶液)純化以提供9.41g(兩步產(chǎn)率為56％)期望的產(chǎn)物。檢測(cè)到MS APCI(-)m/z 413，415(M-1，Br圖譜)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.38(dd，1H)，7.27(d，1H)，6.79(t，1H)，3.99(t，2H)，3.80(s，3H)，3.74(t，2H)，1.77(s，3H)。
檢測(cè)到MS APCI(-)m/z 413，415(M-1，Br圖譜)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.38(dd，1H)，7.27(d，1H)，6.79(t，1H)，3.99(t，2H)，3.80(s，3H)，3.74(t，2H)，1.77(s，3H)。
實(shí)施例12
(S)-4-(4-溴-2-氟苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺 檢測(cè)到MS APCI(-)m/z 427，429(M-1，Br圖譜)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.39(dd，1H)，7.27(dd，1H)，6.79(t，1H)，3.98(m，1H)，3.84(dd，1H)，3.80(s，3H)，3.72(dd，1H)，1.78(s，3H)，1.15(d，3H)。
實(shí)施例13
2-(4-溴-2-氟苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸甲酯 步驟A2-氯-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸的制備按照美國(guó)專(zhuān)利3,682,932所述的操作，由二氯煙酸(3.00g，15.6mmol，Aldrich)制備2-氯-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸以得到1.31g(48％)期望的產(chǎn)物。
步驟B2-氯-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸甲酯的制備向2-氯-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸(0.644g，3.71mmol)的DMF(20mL)溶液中加入氫化鋰(95％，0.078g，9.28mmol)并將反應(yīng)混合物在N2下攪拌40分鐘。然后加入甲基碘(0.508mL，1.16g，8.16mmol)并將反應(yīng)混合物再攪拌45分鐘。將反應(yīng)混合物用2M HCl驟冷直到pH為6-7。將反應(yīng)混合物用EtOAc和飽和NaCl稀釋并分離層。將水層用EtOAc(1x)反萃取。將合并的有機(jī)層干燥(Na2SO4)并減壓濃縮以得到粗的黃色固體。HPLC分析顯示兩種產(chǎn)物比率為4∶1，將其通過(guò)閃蒸柱色譜法(二氯甲烷/EtOAc，15∶1至10∶1)分離以得到0.466g(62％)純的期望產(chǎn)物，為白色結(jié)晶狀固體。還將少量產(chǎn)物分離為淺黃色結(jié)晶狀固體并鑒定為區(qū)域異構(gòu)體2-氯-6-甲氧基-煙酸甲酯。
步驟C5-溴-2-氯-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸甲酯的制備向2-氯-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸甲酯(0.100g，0.496mmol)的DMF(5mL)溶液中加入N-溴琥珀酰亞胺(0.177g，0.992mmol)并將反應(yīng)混合物在室溫下在N2下攪拌4小時(shí)。將反應(yīng)混合物用飽和亞硫酸氫鈉驟冷，然后用EtOAc和H2O稀釋并分離層。將水層用EtOAc(2x)反萃取。將合并的有機(jī)層干燥(Na2SO4)并減壓濃縮，以定量的產(chǎn)率得到黃色固體。
步驟D2-氯-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸甲酯的制備在0℃在N2下，向5-溴-2-氯-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸甲酯(0.400g，1.43mmol)和1，1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)(0.0587g，0.0713mmol)的二噁烷(8mL)懸浮液中加入二甲基鋅(0.713mL，1.43mmol，2M甲苯溶液)。立即將反應(yīng)混合物在100℃加熱30分鐘。將反應(yīng)混合物冷卻到0℃并用MeOH(0.800mL)驟冷。將反應(yīng)混合物用EtOAc稀釋并用1M HCl洗滌。將水層用EtOAc(1x)反萃取。合并的有機(jī)層用飽和NaCl洗滌，干燥(Na2SO4)并減壓濃縮成暗黃色的膠。通過(guò)閃蒸柱色譜法(二氯甲烷/EtOAc，15∶1)純化得到0.164g(53％)純的期望產(chǎn)物，為黃色結(jié)晶狀固體。
步驟E2-(4-溴-2-氟苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸甲酯的制備在-78℃在N2下，向4-溴-2-氟苯胺(0.058g，0.31mmol)的THF(2mL)溶液中滴加雙(三甲基甲硅烷基)酰胺鋰(0.56mL，0.56mmol，1M己烷溶液)。將反應(yīng)混合物在-78℃攪拌1小時(shí)。然后滴加作為T(mén)HF(1mL)溶液的2-氯-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸甲酯(0.060g，0.28mmol)并將反應(yīng)混合物在-78℃攪拌25分鐘。通過(guò)加入H2O將反應(yīng)混合物驟冷并用0.1M HCl調(diào)整pH，然后用EtOAc和飽和NaCl稀釋并分離層。水層用EtOAc(1x)反萃取。將合并的EtOAc層干燥(Na2SO4)并減壓濃縮。通過(guò)閃蒸柱色譜法(二氯甲烷/EtOAc，20∶1)純化得到0.086g(84％)純的期望產(chǎn)物，為白色結(jié)晶狀固體。檢測(cè)到MS ESI(+)m/z 371，373(M+，Br圖譜)；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.57(s，1H)，7.79(s，1H)，7.32(d，1H)，7.18(d，1H)，6.58(t，1H)，3.85(s，3H)，3.29(s，3H)，2.14(s，3H)。
實(shí)施例14
2-(4-溴-2-氟苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺 步驟A2-(4-溴-2-氟苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-N-(2-(乙烯基氧基)乙氧基)-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺的制備向2-(4-溴-2-氟苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸甲酯(0.060g，0.16mmol)的THF(2mL)溶液中加入O-(2-乙烯基氧基-乙基)-羥胺(0.042mL，0.41mmol)。將溶液冷卻到0℃并滴加雙(三甲基甲硅烷基)酰胺鋰(0.81mL，0.81mmol，1M己烷溶液)。將反應(yīng)混合物溫?zé)岬绞覝?。在攪?5分鐘后，通過(guò)加入飽和NaHCO3將反應(yīng)混合物驟冷并在EtOAc和飽和NaCl之間分配。將層分離，將有機(jī)層干燥(Na2SO4)并減壓濃縮。通過(guò)閃蒸柱色譜法(二氯甲烷/MeOH，20∶1)純化得到0.067g(94％)純的期望產(chǎn)物，為灰白色結(jié)晶狀固體。
步驟B2-(4-溴-2-氟苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺的制備向2-(4-溴-2-氟苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-N-(2-(乙烯基氧基)乙氧基)-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺(0.067g，0.150mmol)的乙醇(2mL)溶液中加入2M HCl水溶液(0.380mL，0.760mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌16小時(shí)。用1M NaOH調(diào)整反應(yīng)混合物的pH。用EtOAc和H2O稀釋反應(yīng)混合物。將有機(jī)層分離并用飽和NaCl洗滌。合并的水層用EtOAc(1x)反萃取。將合并的有機(jī)層干燥(Na2SO4)并減壓濃縮以得到0.060g(94％)純的期望產(chǎn)物，為灰白色結(jié)晶狀固體。MS ESI(+)m/z414，416(M+，Br圖譜檢測(cè)到)；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.80(s，1H)，8.44(s，1H)，7.31(d，1H)，7.19(d，1H)，6.59(t，1H)，4.05(m，2H)，3.85(m，1H)，3.75(m，2H)，3.29(s，3H)，2.15(s，3H)。
使用實(shí)施例13和14所述的方法制備下列化合物。在一些情況下，例如在實(shí)施例14中，可能需要最終的脫保護(hù)步驟。這些脫保護(hù)可以通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)文獻(xiàn)方法實(shí)現(xiàn)。
實(shí)施例15
2-(2-氟-4-碘苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸甲酯 按照實(shí)施例13的步驟E所述的操作，使用2-氟-4-碘苯胺將2-氯-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸甲酯轉(zhuǎn)化為2-(2-氟-4-碘苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸甲酯，以得到期望的產(chǎn)物，為白色結(jié)晶狀固體。檢測(cè)到MS ESI(+)m/z 417(M+1)；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.56(s，1H)，7.79(s，1H)，7.49(d，1H)，7.36(d，1H)，6.43(t，1H)，3.85(s，3H)，3.30(s，3H)，2.15(s，3H)。
實(shí)施例16
2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺 步驟A2-(2-氟-4-碘苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-N-(2-(乙烯基氧基)乙氧基)-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺的制備向2-(2-氟-4-碘苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸甲酯(0.500g，1.20mmol)的THF(60mL)溶液中加入O-(2-乙烯基氧基-乙基)-羥胺(0.149g，1.44mmol)。將溶液冷卻到0℃并滴加雙(三甲基甲硅烷基)酰胺鋰(4.81mL，4.81mmol)(1M己烷溶液)。將反應(yīng)混合物溫?zé)岬绞覝亍Ｔ跀嚢?0分鐘后，通過(guò)加入1M HCl將反應(yīng)混合物驟冷并在EtOAc和飽和NaCl之間分配。將層分離，將有機(jī)層干燥(Na2SO4)并減壓濃縮以得到粗的黃色固體，將其不經(jīng)進(jìn)一步純化直接用于下一步驟。
步驟B2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺的制備向2-(2-氟-4-碘苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-N-(2-(乙烯基氧基)乙氧基)-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺(0.585g，1.20mmol)的乙醇(10mL)溶液中加入2M HCl水溶液(3mL)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌45分鐘。用1M NaOH將反應(yīng)混合物的pH調(diào)整為pH 7。用EtOAc和H2O稀釋反應(yīng)混合物。將有機(jī)層分離并用飽和NaCl洗滌。合并的水層用EtOAc(1x)反萃取。將合并的有機(jī)層干燥(Na2SO4)并減壓濃縮。通過(guò)硅膠閃蒸柱色譜法(二氯甲烷/MeOH，15∶1)純化得到2-(2-氟-4-碘苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-N-(2-(乙烯基氧基)乙氧基)-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺(0.421g；兩步產(chǎn)率76％)，為淺黃色固體。MS ESI(+)m/z 462(M+1)圖譜檢測(cè)到；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.77(s，1H)，8.50(s，1H)，7.47(d，1H)，7.36(d，1H)，6.43(t，1H)，4.04(br s，2H)，3.85(br s，1H)，3.74(br s，2H)，3.29(s，3H)，2.14(s，3H).MS ESI(+)m/z 462(M+1)圖譜檢測(cè)到。
實(shí)施例16A 1型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺的制備
步驟12-(2-氟-4-碘苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸甲酯的制備在28分鐘內(nèi)，在-43至-41.6℃下，在-45℃氮?dú)庵邢?-氟-4-碘苯胺(182g，0.77mol)的THF(5.25L)攪拌溶液中加入1M雙(三甲基甲硅烷基)酰胺鋰的己烷(1260g)溶液。在1小時(shí)后，在43分鐘內(nèi)加入2-氯-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸甲酯(155g，0.72mol)的THF(1.05L)溶液。將混合物在-46℃保持1小時(shí)55分鐘，然后溫?zé)岬?13℃并在5分鐘內(nèi)用水(186mL，10.3mol)驟冷，將溫度保持在-12℃至-11℃。然后使混合物在30分鐘內(nèi)溫?zé)岬?℃。然后在1小時(shí)內(nèi)加入2M HCl直到達(dá)到pH 7-8(加入了1855mL)。在放置過(guò)夜后，使混合物溫?zé)岬江h(huán)境溫度，加入氯化鈉溶液(1L，15％w/v)。棄去下層(水層)，THF層通過(guò)蒸餾濃縮到約1.4L。在約52℃，在1小時(shí)15分鐘內(nèi)向混合物中加入異己烷(4.65L)，然后在3小時(shí)內(nèi)將混合物冷卻到20℃。在20℃經(jīng)過(guò)1小時(shí)后，將混合物冷卻到0℃并在該溫度下放置過(guò)夜。然后將反應(yīng)混合物過(guò)濾，固體用冷的異己烷(5℃)(2×1.25L)洗滌。將固體在45℃的真空烘箱中干燥以提供2-(2-氟-4-碘苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸甲酯(248g，0.60mol，產(chǎn)率83％)。1H NMR(D6-DMSO)7.75(d，1H，J 1Hz，ArH)，7.68(dd，1H，J 11，2Hz，ArH)，7.42(d，1H，J 8.5Hz，ArH)，6.62(～t，1H，J8.5Hz，ArH)，3.69(s，3H，OCH3)，3.22(s，3H，NCH3)，2.03(s，3H，ArCH3)。
步驟22-(2-氟-4-碘苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸(2-乙烯氧基乙氧基)酰胺的制備氮?dú)庵?，?5分鐘內(nèi)向2-(2-氟-4-碘苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸甲酯(221g，0.53mol)和O-(2-乙烯基氧基乙基)-羥胺(63g，0.61mol)的THF(2.85L)攪拌溶液中加入1M雙(三甲基甲硅烷基)酰胺鋰的己烷溶液(1431g)，同時(shí)將溫度保持在-14.7至-12.4℃。在-15℃經(jīng)過(guò)2小時(shí)后，向混合物中加入水(165mL，9.2mol)，然后在20分鐘內(nèi)加入2M HCl溶液(1.98L)。然后使混合物溫?zé)岬?2℃，將下層水相(2.25L)分離并棄去。有機(jī)相用氯化鈉溶液(15重量％，1100mL)洗滌并通過(guò)在環(huán)境壓力下蒸餾2.25L溶劑將體積減至約1.75L。在2.5小時(shí)內(nèi)向混合物中加入異己烷(3.35L)，同時(shí)將溫度保持在約58℃。在該溫度下再經(jīng)過(guò)1小時(shí)后，將混合物冷卻到20℃，保持1小時(shí)然后冷卻到0℃，并在該溫度下保持過(guò)夜。再加入異己烷的量(500mL)，將混合物放置1小時(shí)，然后加入更多的異己烷(500mL)。在0℃經(jīng)過(guò)45分鐘后，將漿過(guò)濾并用冷的異己烷(1.1L)洗滌固體，然后在30℃的真空烘箱中干燥以提供2-(2-氟-4-碘苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸(2-乙烯氧基乙氧基)酰胺(190g，0.39mol，產(chǎn)率74％)。1H NMR(D6-DMSO)7.63(dd，1H，J 11，2Hz，ArH)，7.52(s，1H，ArH)，7.38(d，1H，J 8.5Hz，ArH)，6.55-6.46(m，2H，ArH/OCH＝CH2)，4.18(dd，1H，J 14，2Hz，OCH＝CH2)，3.99(dd，1H，J 7，2Hz，OCH＝CH2)，3.90-3.88(m，2H，OCH2)，3.81-3.79(m，2H，OCH2)，3.25(s，3H，NCH3)，2.02(s，3H，ArCH3)。
步驟32型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺的制備氮?dú)庵?，?5分鐘內(nèi)在17-22℃，向2-(2-氟-4-碘苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸(2-乙烯氧基乙氧基)酰胺(170g，0.35mol)的THF(850mL)攪拌溶液中加入2M HCl(318mL)。在1小時(shí)后反應(yīng)完成(由HPLC指示)，在10分鐘內(nèi)加入2M氫氧化鈉溶液(318mL)，同時(shí)將溫度保持在約22℃。混合物的pH為約8。然后用MIBK(1.02L)分配混合物，分離下面的水層并棄去。然后通過(guò)在環(huán)境壓力和85-98℃的夾套溫度下蒸餾減少有機(jī)溶液的體積。除去750mL溶劑后，蒸餾速率明顯減慢，將混合物冷卻到約22℃。將晶體2型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺(1g，晶種，按照實(shí)施例16C所述制備)加至混合物中然后加入乙酸乙酯(170mL)。在5分鐘后，混合物開(kāi)始結(jié)晶，在23-25℃在50分鐘內(nèi)加入異己烷(1.7L)。將漿在25℃保持80分鐘然后過(guò)濾。固體用異己烷(680mL)洗滌然后在30℃的真空烘箱中干燥以標(biāo)題物質(zhì)(147g，0.31mol，產(chǎn)率89％)。1H NMR(D6-DMSO)7.63(dd，1H，J11，2Hz，ArH)，7.55(s，1H，ArH)，7.38(d，1H，J 8.5Hz，ArH)，6.52(～t，1H，J 8.5Hz，ArH)，4.91-4.35(bs，1H，OH)，3.74(～t，2H，J 5Hz，OCH2)，3.51(～t，2H，J 5Hz，OCH2)，3.25(s，3H，NCH3)，2.02(s，3H，ArCH3).MS(ESI)(+)m/z 484(27％，[M+Na]+)，462(100％，[M+H]+)，385(8％)，100(26％)。
步驟41型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺的制備在50℃，向來(lái)自步驟3的產(chǎn)物(123g)的乙酸乙酯(2.0L)攪拌漿中加入1型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺(4.9g)(按照步驟5所述制備)并用乙酸乙酯(0.45L)將殘余的物質(zhì)洗到容器內(nèi)。將混合物在該溫度下保持64小時(shí)。樣品的分析指示該物質(zhì)主要是2型。在又一小時(shí)后，將混合物的溫度升到60℃，在該溫度下經(jīng)過(guò)6小時(shí)后再加入3.25g 1型1，2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺(按實(shí)施例16D所述制備)并用乙酸乙酯(100mL)洗滌。在60℃再繼續(xù)攪拌16小時(shí)，然后分析指示剩余一些2型。然后通過(guò)在52℃批料溫度和400mbar下蒸餾溶劑(除去780mL)減少混合物的體積。然后繼續(xù)在60℃攪拌過(guò)夜并且再分析混合物，但分析指示還剩余一些2型。在又7小時(shí)后，將額外的擋板放到反應(yīng)器上并繼續(xù)攪拌直到第二天。然后加入更多乙酸乙酯(0.5L)以幫助攪拌功效并將混合物在60℃再保持2小時(shí)。發(fā)現(xiàn)此時(shí)取出的樣品為1型。將2型翻轉(zhuǎn)為1型總共花費(fèi)143小時(shí)。將物質(zhì)在50℃保持過(guò)夜，然后冷卻到12℃并過(guò)濾。在12℃用乙酸乙酯(400mL)洗滌濾餅，然后在35℃的真空烘箱中干燥一個(gè)周末(68小時(shí))以提供1型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺(109g)。
實(shí)施例16B 1型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺的制備 向上述2-(2-氟-4-碘苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸(2-乙烯氧基乙氧基)酰胺(4.2g，8.52mmol)(按照實(shí)施例16A，步驟2制備)和乙酸乙酯(126.00mL)的快速攪拌混合物中加入氯化氫(17.05mL，17.0493g，17.05mmol)。在2小時(shí)后，剩余少于1％的原料(通過(guò)HPLC分析)，使相沉降。將下面的水相分離并棄去，用氯化鈉洗滌有機(jī)相(42mL，15％wt/vol，然后2×25mL，9％wt/vol)。然后通過(guò)在大氣壓下(65℃入口溫度)蒸餾溶劑(44mL)減少體積。然后將溶液冷卻到70℃，加入按照實(shí)施例16A，步驟4制備的1型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺(40.3265mg)。將混合物在70℃攪拌20小時(shí)。在4小時(shí)15分鐘內(nèi)將溫度降至24℃，然后在1小時(shí)內(nèi)降至1℃。然后將漿過(guò)濾，用冷乙酸乙酯(17mL)洗滌濾餅，將固體在45℃的真空烘箱中干燥，以提供1型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺(3.15g，76％)。
實(shí)施例16C 2型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺的制備 將2-(2-氟-4-碘苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸(2-乙烯氧基乙氧基)酰胺(500mg，915μmol)和氯化氫(1mL)在四氫呋喃(5mL)中的混合物攪拌過(guò)夜。然后加入氫氧化鈉(1M，2.00mL)，在又10分鐘后向混合物中加入甲基異丁基酮(3mL)和乙酸乙酯(3mL)。將層分離，用50％鹽水(4mL)洗滌有機(jī)溶液，然后蒸發(fā)(約一半物質(zhì)由于溢出而損失)。將殘余物溶于甲基·異丁基酮(3mL)和乙酸乙酯(1mL)中，將混合物加熱回流。在冷卻到50℃后，混合物變混濁，加入異己烷(5mL)。這引起固體結(jié)晶，將混合物冷卻到20℃，然后再加入異己烷(5mL)。然后將固體過(guò)濾，用異己烷(1mL)洗滌并在40℃的真空烘箱中干燥，以提供140mg標(biāo)題化合物。
實(shí)施例16D 1型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺的制備 將來(lái)自實(shí)施例16的最終產(chǎn)物(25mg)連同磁力攪拌器一起放到Syn10(Radleys)反應(yīng)試管中，通過(guò)在攪拌下加入預(yù)熱到50℃的一等份甲醇(1mL)將物質(zhì)溶于甲醇中。再向反應(yīng)試管中加入5mg甲醇以保證在冷卻時(shí)產(chǎn)生過(guò)飽和的溶液。當(dāng)大部分固體已溶解時(shí)，將所得溶液通過(guò)Pall 0.45μm PTFE Acrodisc CR13過(guò)濾器過(guò)濾到第二個(gè)50℃的Syn 10試管中。然后以3℃/min的速率將試管冷卻到0℃，并保持在0℃直到物質(zhì)已經(jīng)結(jié)晶。濾除樣品，通過(guò)抽吸干燥然后在環(huán)境條件下放置。小心地從濾紙上取出固體并通過(guò)XRPD檢查。
實(shí)施例16E X-射線粉末衍射(PXRD) 1型和2型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺的X-射線粉末衍射圖譜通過(guò)將晶體物質(zhì)的樣品放置到Siemens單硅晶(SSC)晶片墊上并在載物玻璃的幫助下將樣品鋪展成薄層來(lái)確定。樣品以30分辨率/分鐘旋轉(zhuǎn)(以改進(jìn)計(jì)數(shù)統(tǒng)計(jì))并用由銅長(zhǎng)細(xì)焦管產(chǎn)生的X-射線照射，該管在40kV和40mA下運(yùn)行，波長(zhǎng)為1.5406埃，使用Bruker D5000X-射線粉末衍射計(jì)(Bruker AXS，Banner LaneCoventry CV49GH)。使經(jīng)校準(zhǔn)的X-射線源經(jīng)過(guò)設(shè)置為V20的自動(dòng)可變發(fā)散狹縫，使經(jīng)反應(yīng)的輻射經(jīng)過(guò)2mm抗散射狹縫和0.2mm檢測(cè)器狹縫。在θ-θ模式中，在2度至40度2θ的范圍內(nèi)，將樣品暴露1秒/0.02度2θ增量(連續(xù)掃描模式)。儀器配有閃爍計(jì)數(shù)器作為檢測(cè)器。通過(guò)用Diffract+軟件運(yùn)行的Dell Optiplex 686NT 4.0工作站進(jìn)行控制和數(shù)據(jù)捕獲。在2θ2-40°的范圍內(nèi)收集數(shù)據(jù)，2θ0.02°增量為4s/增量。
技術(shù)人員明白，所得X-射線粉末衍射圖譜可能根據(jù)測(cè)量條件(例如設(shè)備、樣品制備或所用的機(jī)器)而具有一個(gè)或多個(gè)測(cè)量誤差。尤其是，通常知道X-射線粉末衍射圖譜中的強(qiáng)度可能根據(jù)測(cè)量條件和樣品制備而波動(dòng)。例如，技術(shù)人員會(huì)意識(shí)到，峰的相對(duì)強(qiáng)度可能受到例如尺寸超過(guò)30微米并縱橫不均勻的顆粒的影響，它們可能影響樣品的分析。技術(shù)人員還會(huì)意識(shí)到，反射的位置可能受到樣品位于衍射計(jì)中的確切高度和衍射計(jì)的零校正的影響。樣品的表面形狀也可能有小的影響。因此本領(lǐng)域技術(shù)人員會(huì)理解，本文所示的衍射圖譜數(shù)據(jù)不應(yīng)被理解為絕對(duì)值(關(guān)于更多信息，參見(jiàn)Jenkins，R&Snyder，R.L.‘Introduction to X-Ray PowderDiffractometry’John Wiley&Sons，1996)。因此，將理解2-(2-氟-4-碘苯氨基)N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺的晶形不限于提供與圖10至13所示的X-射線粉末衍射圖譜相同的X-射線粉末衍射圖譜的晶體，提供與圖10至13所示的X-射線粉末衍射圖譜基本上相同的X-射線粉末衍射圖譜的任何晶體均落入本發(fā)明的范圍內(nèi)。X-射線粉末衍射領(lǐng)域的技術(shù)人員能夠判斷X-射線粉末衍射圖譜的基本同一性。
實(shí)施例16F 差示掃描量熱法 使用Mettler DSC820e對(duì)1型和2型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺進(jìn)行差示掃描量熱法(DSC)分析。將包含在配有穿孔蓋的40μL鋁盤(pán)內(nèi)的通常小于5mg物質(zhì)的樣品以每分鐘10℃的恒定加熱速率在25℃至325℃的溫度范圍內(nèi)加熱。使用氮的沖洗氣體以每分鐘100mL的流速使用。
結(jié)果暗示，1型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺由于熔化而在169.7℃的發(fā)生溫度處顯示巨大、尖銳的吸熱(圖15)，而2型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺由于熔化而在154.3℃的發(fā)生溫度處顯示巨大尖銳的吸熱(圖14)。在熔化后，觀察到由于降解而產(chǎn)生的巨大的放熱事件。將理解，DSC的發(fā)生和/或峰溫度值可能在一臺(tái)儀器與另一臺(tái)儀器之間、一種方法與另一種方法之間或一份樣品與另一份樣品之間輕微變化，因此引用的值不應(yīng)被理解為絕對(duì)值。
實(shí)施例17
(S)-2-(4-溴-2-氟苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺 步驟A按照實(shí)施例14步驟A所述的操作，將2-(4-溴-2-氟苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸甲酯轉(zhuǎn)化為(S)-2-(4-溴-2-氟苯氨基)N-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)丙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺。
步驟B向(S)-2-(4-溴-2-氟苯氨基)N-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)丙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺(0.037g，0.0682mmol)的THF(1.00mL)溶液中加入1M HCl(0.682mL，0.682mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。反應(yīng)混合物用EtOAc稀釋并用飽和NaHCO3(3x)、飽和NaCl(1x)洗滌，干燥(Na2SO4)，并減壓濃縮。通過(guò)閃蒸柱色譜法(二氯甲烷/甲醇，30∶1)純化得到0.020g(69％)純的期望產(chǎn)物，為黃色固體。檢測(cè)到MS ESI(+)m/z 428，430(M+，Br圖譜)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.55(s，1H)，7.40(d，1H)，7.24(d，1H)，6.68(t，1H)，3.86(m，1H)，3.71(m，1H)，3.58(m，1H)，3.40(s，3H)，2.12(s，3H)，1.10(d，3H)。
實(shí)施例18
2-(4-溴-2-氟苯氨基)-5-乙基-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸甲酯 步驟A2-氯-5-乙基-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸甲酯的制備按照實(shí)施例13步驟D所述，使用二乙基鋅(1M己烷溶液)，將5-溴-2-氯-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸甲酯轉(zhuǎn)化為2-氯-5-乙基-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸甲酯，以獲得期望的產(chǎn)物，為黃色結(jié)晶狀固體。
步驟B2-(4-溴-2-氟苯氨基)-5-乙基-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸甲酯按照實(shí)施例13步驟E所述，將2-氯-5-乙基-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸甲酯轉(zhuǎn)化為2-(4-溴-2-氟苯氨基)-5-乙基-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸甲酯。檢測(cè)到MS ESI(+)m/z 383，385(M+，Br圖譜)；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.59(s，1H)，7.76(s，1H)，7.32(d，1H)，7.18(d，1H)，6.59(t，1H)，3.86(s，3H)，3.28(s，3H)，2.56(q，2H)，1.22(t，3H)。
實(shí)施例19
2-(4-溴-2-氟苯氨基)-5-乙基-N-(2-羥基乙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺 按照實(shí)施例14所述，將2-(4-溴-2-氟苯氨基)-5-乙基-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸甲酯偶聯(lián)并脫保護(hù)，以獲得期望的產(chǎn)物，為黃色固體。檢測(cè)到MS APCI(+)m/z 428，430(M+，Br圖譜)；1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.51(br s，1H)，9.54(br s，1H)，7.57(d，1H)，7.47(s，1H)，7.25(d，1H)，6.69(t，1H)，4.67(br s，1H)，3.74(m，2H)，3.50(m，2H)，3.24(s，3H)，2.43(q，2H)，1.14(t，3H)。
實(shí)施例20
2-(4-溴-2-氟苯氨基)-5-氯-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸甲酯 向2-(4-溴-2-氟苯氨基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸甲酯的DMF溶液中加入N-氯琥珀酰亞胺。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌25分鐘，然后用飽和亞硫酸氫鈉驟冷。反應(yīng)混合物用H2O稀釋并在EtOAc/二乙醚和飽和NaCl之間分配。分離層，水層用EtOAc(1x)反萃取。將合并的有機(jī)層干燥(Na2SO4)并減壓濃縮。通過(guò)閃蒸柱色譜法(二氯甲烷/EtOAc，15∶1)純化得到期望的產(chǎn)物，為白色固體。檢測(cè)到MS ESI(+)m/z389，391，393(M+，Cl，Br圖譜)；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.88(s，1H)，8.13(s，1H)，7.34(d，1H)，7.24(d，1H)，6.69(t，1H)，3.87(s，3H)，3.29(s，3H)。
實(shí)施例21
2-(4-溴-2-氟苯氨基)-5-氯-N-(2-羥基乙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺 按照實(shí)施例14所述，將2-(4-溴-2-氟苯氨基)-5-氯-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸甲酯偶聯(lián)并脫保護(hù)以獲得期望的產(chǎn)物，為淺黃色固體。檢測(cè)到MS APCI(+)m/z 434，436，438(M+，Cl，Br圖譜)；1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.56(br s，1H)，9.75(br s，1H)，7.91(s，1H)，7.57(d，1H)，7.26(d，1H)，6.89(t，1H)，4.68(br s，1H)，3.70(m，2H)，3.50(m，2H)，3.28(s，3H)。
實(shí)施例22
5-氰基-2-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸甲酯 步驟A2-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸甲酯的制備在-78℃在N2下，向由2-氯-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸甲酯和2-氟-4-(甲硫基)苯胺在THF(5mL)中制備的溶液中滴加雙(三甲基甲硅烷基)酰胺鋰(1M己烷溶液)。將反應(yīng)混合物在-78℃攪拌1小時(shí)。然后將2-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸甲酯作為在THF內(nèi)的溶液滴加，將反應(yīng)混合物在-78℃攪拌1小時(shí)。通過(guò)加入H2O驟冷反應(yīng)混合物，用飽和NH4Cl將pH調(diào)整至pH 7，然后用EtOAc稀釋。將有機(jī)層分離并用飽和NaCl洗滌，干燥(Na2SO4)，并減壓濃縮。通過(guò)閃蒸柱色譜法(二氯甲烷/EtOAc，15∶1)純化得到期望產(chǎn)物。
步驟B5-溴-2-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸甲酯的制備向2-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸甲酯的溶液中加入N-溴琥珀酰亞胺。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1小時(shí)，然后用飽和亞硫酸氫鈉驟冷。反應(yīng)混合物用H2O稀釋并在EtOAc/二乙醚和飽和NaCl之間分配。將層分離并將水層用EtOAc(1x)反萃取。將合并的有機(jī)層干燥(Na2SO4)并減壓濃縮。通過(guò)閃蒸柱色譜法(二氯甲烷/EtOAc，15∶1)純化得到5-溴-2-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸甲酯。
步驟C5-氰基-2-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸甲酯將5-溴-2-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸甲酯(0.020g，0.050mmol)、三(二亞芐基丙酮)-二鈀(0)(0.046g，0.050mmol)、1，1′-雙(二苯基膦)-二茂鐵(0.055g，0.100mmol)和Zn(CN)2(0.006g，0.055mmol)的混合物在120℃加熱2小時(shí)。將反應(yīng)混合物用EtOAc和H2O稀釋并分離層。EtOAc層用飽和NH4Cl和飽和NaCl洗滌，干燥(Na2SO4)并減壓濃縮成暗黃色的膠。通過(guò)閃蒸柱色譜法(二氯甲烷/EtOAc，10∶1)純化得到0.005g(29％)純的期望產(chǎn)物，為黃色固體。檢測(cè)到MS APCI(-)m/z 346(M-1)；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ10.84(s，1H)，8.39(s，1H)，6.95-7.06(m，3H)，3.90(s，3H)，3.17(s，3H)，2.50(s，3H)。
除非另有說(shuō)明，按照上面實(shí)施例在前面所述的操作制備下列化合物。
實(shí)施例23-A
(S)-2-(4-溴-2-氟苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺 步驟A2-氯-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸的制備按照美國(guó)專(zhuān)利3,682,932(1972)所述的操作，由二氯-煙酸(3.00g，15.6mmol，Aldrich)制備2-氯-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸，以獲得1.31g(48％)期望的產(chǎn)物。
步驟B2-氯-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸甲酯的制備向2-氯-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸(0.644g，3.71mmol)的DMF(20mL)溶液中加入氫化鋰(95％，0.078g，9.28mmol)并將反應(yīng)混合物在N2下攪拌40分鐘。然后加入甲基碘(0.508mL，1.16g，8.16mmol)并將反應(yīng)混合物再攪拌45分鐘。用2M HCl驟冷反應(yīng)混合物直到pH為6-7。將反應(yīng)混合物用EtOAc和飽和NaCl稀釋并將層分離。水層用EtOAc(1x)反萃取。將合并的有機(jī)層干燥(Na2SO4)并減壓濃縮以得到粗的黃色固體。HPLC分析顯示兩種產(chǎn)物比率為4∶1，通過(guò)閃蒸柱色譜法(二氯甲烷/EtOAc，15∶1至10∶1)分離它們以得到0.466g(62％)純的期望產(chǎn)物，為白色結(jié)晶狀固體。還分離了作為淺黃色結(jié)晶狀固體的次要產(chǎn)物，經(jīng)鑒定為區(qū)域異構(gòu)體2-氯-6-甲氧基煙酸甲酯。
步驟C2-(4-溴-2-氟苯氨基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸甲酯的制備在-78℃在N2下，向4-溴-2-氟苯胺(0.192g，1.01mmol)的THF(5mL)溶液中滴加雙(三甲基甲硅烷基)酰胺鋰(1.50mL，1.50mmol，1M己烷溶液)。將反應(yīng)混合物在-78℃攪拌1小時(shí)。然后將2-氯-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸甲酯(0.202g，1.00mmol)作為在THF(5mL)內(nèi)的溶液滴加，將反應(yīng)混合物在-78℃攪拌1小時(shí)。通過(guò)加入H2O驟冷反應(yīng)混合物，用飽和NH4Cl將pH調(diào)整至pH 7，然后用EtOAc稀釋。將有機(jī)層分離并用飽和NaCl洗滌，干燥(Na2SO4)，并減壓濃縮。通過(guò)閃蒸柱色譜法(二氯甲烷/EtOAc，15∶1)純化得到0.232g(65％)純的期望產(chǎn)物，為白色結(jié)晶狀固體。
步驟D(S)-2-(4-溴-2-氟苯氨基)-N-(2-(叔丁氧二甲基甲硅烷氧基)丙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺的制備在0℃，向2-(4-溴-2-氟苯氨基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸甲酯(0.050g，0.14mmol)和(S)-O-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)丙基)羥胺(0.072g，0.35mmol)的THF(1.50mL)溶液中緩慢加入雙(三甲基甲硅烷基)酰胺鋰(0.70mL，0.70mmol)。在加入后，將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1小時(shí)，然后用飽和NaHCO3驟冷。將反應(yīng)混合物在EtOAc和飽和NaCl之間分配。將層分離，水層用EtOAc(1x)反萃取。將合并的有機(jī)層干燥(Na2SO4)，過(guò)濾并減壓濃縮以獲得粗的棕色固體，將其不經(jīng)進(jìn)一步純化用于下一步驟。
步驟E(S)-2-(4-溴-2-氟苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺的制備向(S)-2-(4-溴-2-氟苯氨基)-N-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)丙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺(0.074g，0.14mmol)的THF(1.50mL)溶液中加入1M HCl水溶液(1.4mL，1.4mmol)。將反應(yīng)物在室溫下攪拌16小時(shí)。將反應(yīng)混合物用EtOAc稀釋并用飽和NaHCO3(3x)水溶液和飽和NaCl水溶液洗滌。將有機(jī)層干燥(Na2SO4)，過(guò)濾并減壓濃縮以獲得粗的白色固體。通過(guò)用Et2O滴定純化粗制產(chǎn)物并分離所得固體，提供(S)-2-(4-溴-2-氟苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺(0.030g；兩步產(chǎn)率52％)，為白色固體。MS ESI(+)m/z 414，416(M+)Br圖譜檢測(cè)到；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.65(d，1H)，7.42(dd，1H)，7.28(m，1H)，6.81(t，1H)，6.28(d，1H)，3.88(m，1H)，3.70(dd，1H)，3.58(dd，1H)，3.38(s，3H)，1.11(d，3H)。
實(shí)施例23-B
2-(2-氟-4-碘苯氨基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺 MS ESI(+)m/z 388(M+1)圖譜檢測(cè)到；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ10.8(s，1H)，7.47(d，2H)，7.39(d，1H)，6.54(t，1H)，6.26(d，1H)，5.59(br s，2H)，3.24(s，3H)。
實(shí)施例23-C
N-乙氧基-2-(2-氟-4-碘苯氨基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺 MS ESI(+)m/z 432(M+1)圖譜檢測(cè)到；1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.4(br s，1H)，9.83(br s，1H)，7.66(dd，1H)，7.58(d，1H)，7.43(d，1H)，6.65(t，1H)，6.18(d，1H)，3.70(q，2H)，3.21(s，3H)，1.10(t，3H)。
實(shí)施例23-D
2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺 MS ESI(+)m/z 448(M+1)圖譜檢測(cè)到；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.66(d，1H)，7.56(m，1H)，7.46(m，1H)，6.65(t，1H)，6.28(d，1H)，3.85(t，2H)，3.67(t，2H)，3.36(s，3H)。
實(shí)施例23-E
(S)-2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺 MS ESI(+)m/z 462(M+1)圖譜檢測(cè)到；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.66(d，1H)，7.56(d，1H)，7.46(d，1H)，6.65(t，1H)，6.28(d，1H)，3.85(m，1H)，3.67(m，1H)，3.57(m，1H)，3.38(s，3H)，1.11(d，3H)。
實(shí)施例23-F
N-乙氧基-2-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺 MS APCI(+)m/z 352(M+1)圖譜檢測(cè)到；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.64(d，1H)，7.12(dd，1H)，7.05(m，1H)，6.86(t，1H)，6.21(d，1H)，3.85(q，2H)，3.32(s，3H)，2.47(s，3H)，1.22(t，3H). 實(shí)施例23-G
2-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺 MS ESI(+)m/z 368(M+1)圖譜檢測(cè)到；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ10.28(s，1H)，8.48(s，1H)，7.38(d，1H)，7.00(m，1H)，6.96(m，1H)，6.79(t，1H)，6.19(d，1H)，4.04(m，2H)，3.88(m，1H)，3.75(m，2H)，3.22(s，3H)，2.48(s，3H)。
實(shí)施例23-H
(S)-2-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺 MS ESI(+)m/z 382(M+1)圖譜檢測(cè)到；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.64(d，1H)，7.12(d 1H)，7.04(d，1H)，6.85(t，1H)，6.21(d，1H)，4.01(m，1H)，3.90(m，1H)，3.71(m，1H)，3.60(m，1H)，3.32(s，3H)，2.47(s，3H)，1.10(d，3H)。
實(shí)施例23-H1
2-(4-溴-2-氯苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺 實(shí)施例23-H2
(S)-2-(4-溴-2-氯苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺 實(shí)施例23-K
2-(2-氯-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺 檢測(cè)到MS APCI(+)m/z 464，466(M+，Cl圖譜)；1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.59(br s，1H)，10.06(br s，1H)，7.86(d，1H)，7.64(d，1H)，7.54(dd，1H)，6.53(d，1H)，6.21(d，1H)，4.67(t，1H)，3.78(t，2H)，3.52(m，2H)，3.13(s，3H)。
實(shí)施例23-L
(S)-2-(2-氯-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺 檢測(cè)到MS APCI(+)m/z 478，480(M+，Cl圖譜)；1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.59(s，1H)，9.99(s，1H)，7.86(d，1H)，7.64(d，1H)，7.54(dd，1H)，6.53(d，1H)，6.21(d，1H)，4.73(m，1H)，3.75(m，1H)，3.58(m，2H)，3.14(s，3H)，1.02(d，3H)。
實(shí)施例23-M
2-(2-氯-4-碘苯氨基)-N-甲氧基-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺 實(shí)施例23-N
(S)-2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺 MS ESI(+)m/z 476(M+1)圖譜檢測(cè)到；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.79(s，1H)，8.53(s，1H)，7.46(d，1H)，7.35(m，1H)，6.44(t，1H)，4.15(m，1H)，3.92(dd，1H)，3.69(dd，1H)，3.28(s，3H)，2.14(s，3H)，1.14(d，3H)。
實(shí)施例23-0
(S)-4-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺 檢測(cè)到MS APCI(-)m/z 395(M-1)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.10(dd，1H)，7.03(d，1H)，6.87(t，1H)，4.00(m，1H)，3.85(dd，1H)，3.79(s，3H)，3.72(dd，1H)，2.47(s，3H)，1.75(s，3H)，1.16(d，3H)。
實(shí)施例23-P
(S)-4-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺 MS APCI(-)m/z 475(M-1)檢測(cè)到；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.52(dd，1H)，7.44(dd，1H)，6.63(t，1H)，3.98(m，1H)，3.84(dd，1H)，3.79(s，3H)，3.72(dd，1H)，1.78(s，3H)，1.16(d，3H). 實(shí)施例23-Q
2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-甲氧基-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺 通過(guò)上面實(shí)施例在前面所述的操作制備下列化合物。
實(shí)施例24-A
2-(4-溴-2-氟苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺 實(shí)施例24-B
2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-甲氧基-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺 實(shí)施例24-C
N-乙氧基-2-(2-氟-4-碘苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺 實(shí)施例24-D
N-乙氧基-2-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺 MS APCI(+)m/z 366(M+1)圖譜檢測(cè)到；1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.38(br s，1H)，9.79(br s，1H)，7.54(s，1H)，7.23(dd，1H)，6.99(dd，1H)，6.73(t，1H)，3.76(q，2H)，3.19(s，3H)，2.46(s，3H)，2.01(s，3H)，1.12(t，3H)。
實(shí)施例24-E
2-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺 MS APCI(+)m/z 382(M+1)圖譜檢測(cè)到；1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.48(br s，1H)，9.78(br s，1H)，7.56(s，1H)，7.23(dd，1H)，6.99(m，1H)，6.73(t，1H)，4.68(br s，1H)，3.76(t，2H)，3.51(t，2H)，3.19(s，3H)，2.46(s，3H)，2.01(s，3H)。
實(shí)施例24-F
(S)-2-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺 MS APCI(+)m/z396(M+1)圖譜檢測(cè)到；1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.48(br s，1H)，9.68(br s，1H)，7.55(s，1H)，7.23(dd，1H)，6.99(dd，1H)，6.73(t，1H)，4.73(d，1H)，3.74(m，1H)，3.56(d，2H)，3.20(s，3H)，2.46(s，3H)，2.01(s，3H)，1.02(d，3H)。
實(shí)施例24-G
2-(4-溴-2-氯苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺 實(shí)施例24-H
(S)-2-(4-溴-2-氯苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺 實(shí)施例24-I
2-(2-氯-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺 檢測(cè)到MS APCI(+)m/z 478，480(M+，Cl圖譜)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.79(d，1H)，7.59(s，1H)，7.52(dd，1H)，6.39(d，1H)，3.89(t，2H)，3.67(t，2H)，3.34(s，3H)，2.13(s，3H)。
實(shí)施例24-J
(S)-2-(2-氯-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺 實(shí)施例24-K
2-(2-氯-4-碘苯氨基)-N-甲氧基-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺 實(shí)施例24-L
5-氯-2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺 檢測(cè)到MS ESI(+)m/z 482，484(M+，Cl圖譜)；1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.56(br s，1H)，9.69(br s，1H)，7.89(s，1H)，7.64(dd，1H)，7.40(dd，1H)，6.72(t，1H)，4.66(t，1H)，3.67(t，2H)，3.49(m，2H)，3.28(s，3H)。
實(shí)施例24-M
(S)-5-氯-2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺 實(shí)施例24-N
4-(2-氯-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺 檢測(cè)到MS APCI(-)m/z 477，479(M-1，Cl圖譜)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.77(d，1H)，7.54(dd，1H)，6.51(d，1H)，4.01(t，2H)，3.81(s，3H)，3.75(t，2H)，1.74(s，3H)。
實(shí)施例24-O
(S)-4-(2-氯-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺 檢測(cè)到MS APCI(-)m/z 491，493(M-1，Cl圖譜)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.77(d，1H)，7.54(dd，1H)，6.51(d，1H)，4.00(m，1H)，3.87(dd，1H)，3.80(s，3H)，3.75(dd，1H)，1.74(s，3H)，1.16(d，3H)。
實(shí)施例24-P
4-(4-溴-2-氯苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺 檢測(cè)到MS APCI(-)m/z 429，431，433(M-1，Br，Cl圖譜)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.62(d，1H)，7.38(dd，1H)，6.67(d，1H)，4.02(t，2H)，3.81(s，3H)，3.75(t，2H)，1.73(s，3H)。
實(shí)施例24-Q
(S)-4-(4-溴-2-氯苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺 本發(fā)明的其他化合物包括具有下面表1-8所示的通式Ia、IVa、IVb、IVc、IVd、IVe、IVf和IVg的化合物。

表1








表2


表3



表4



表5



表6



表7



表8


除非另有說(shuō)明，本發(fā)明的其他實(shí)施例包括可通過(guò)上述方法制備的下列化合物。
實(shí)施例25-A
4-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺 檢測(cè)到MS APCI(-)m/z 321(M-1)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.09(dd，1H)，7.04(d，1H)，6.87(t，1H)，3.81(s，3H)，2.48(s，3H)，1.70(s，3H)。
實(shí)施例25-B
5-氟-4-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺 檢測(cè)到MS APCI(-)m/z 385(M-1)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.14(td，1H)，7.07(m，2H)，4.05(t，2H)，3.79(s，3H)，3.78(t，2H)，2.49(s，3H)。
實(shí)施例25-C
(S)-5-氟-4-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺 檢測(cè)到MS APCI(-)m/z399(M-1)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.14(td，1H)，7.07(m，2H)，4.04(m，1H)，3.93(dd，1H)，3.81(m，1H)，3.80(s，3H)，2.49(s，3H)，1.18(d，3H)。
實(shí)施例25-D
5-氯-4-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺 檢測(cè)到MS APCI(-)m/z401，403(M-1，Cl圖譜)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.06(m，3H)，3.94(t，2H)，3.81(s，3H)，3.73(t，2H)，2.49(s，3H)。
實(shí)施例25-E
(S)-5-氯-4-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺 檢測(cè)到MS APCI(-)m/z 415，417(M-1，Cl圖譜)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.06(m，3H)，3.98(m，1H)，3.81(m，1H)，3.80(s，3H)，3.69(dd，1H)，2.49(s，3H)，1.16(d，3H)。
實(shí)施例25-F
4-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-N-(3-羥基丙基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺 檢測(cè)到MS APCI(-)m/z 379(M-1)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.09(dd，1H)，7.03(d，1H)，6.86(t，1H)，3.81(s，3H)，3.64(t，2H)，3.43(t，2H)，2.47(s，3H)，1.80(m，2H)，1.71(s，3H)。
實(shí)施例25-G
(S)-N-(2，3-二羥基丙基)-4-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺 檢測(cè)到MS APCI(-)m/z 395(M-1)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.10(dd，1H)，7.03(dd，1H)，6.86(t，1H)，3.81(s，3H)，3.80(m，1H)，3.51(m，3H)，3.37(dd，1H)，2.47(s，3H)，1.71(s，3H)。
實(shí)施例25-H
4-(4-溴-2-氟苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺 檢測(cè)到MS APCI(-)m/z 353，355(M-1，Br圖譜)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.38(dd，1H)，7.27(m，1H)，6.80(t，1H)，3.82(s，3H)，1.72(s，3H)。
實(shí)施例25-I
(R)-4-(4-溴-2-氟苯氨基)-N-(2，3-二羥基丙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺 檢測(cè)到MS APCI(-)m/z 443，445(M-1，Br圖譜)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.39(dd，1H)，7.27(m，1H)，6.79(t，1H)，4.03(m，1H)，3.89(m，2H)，3.80(s，3H)，3.59(m，2H)，1.77(s，3H)。
實(shí)施例25-J
4-(4-溴-2-氟苯氨基)-N-(1-羥基-2-甲基丙烷-2-基氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺 檢測(cè)到MS APCI(-)m/z 441，443(M-1，Br圖譜)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.38(dd，1H)，7.27(d，1H)，6.79(t，1H)，3.81(s，3H)，3.38(s，2H)，1.78(s，3H)，1.25(s，6H)。
實(shí)施例25-K
4-(2-氟-4-碘苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺 檢測(cè)到MS APCI(-)m/z 401(M-1)；1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.75(s，1H)，8.25(s，1H)，7.90(s，1H)，7.65(s，1H)，7.43(s，1H)，6.63(t，1H)，3.71(s，3H)，1.63(s，3H)。
實(shí)施例25-L
4-(4-溴-2-氟苯氨基)-5-氟-N-(2-羥基乙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺 檢測(cè)到MS APCI(-)m/z 417，419(M-1，Br圖譜)；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.66(br.s，1H)，9.30(br.s，1H)，7.28(m，2H)，6.97(td，1H)，4.11(t，2H)，3.84(t，2H)，3.82(s，3H)，3.51(t，1H)。
實(shí)施例25-M
4-(2-氟-4-碘苯氨基)-N，1，5-三甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺 檢測(cè)到MS APCI(-)m/z 415(M-1)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.52(dd，1H)，7.44(m，1H)，6.61(t，1H)，3.81(s，3H)，2.87(s，3H)，1.74(s，3H)。
實(shí)施例25-N
N-(環(huán)丙基甲基)-4-(2-氟-4-碘苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺 檢測(cè)到MS APCI(-)m/z 455(M-1)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.52(dd，1H)，7.44(dd，1H)，6.62(t，1H)，3.83(s，3H)，3.18(d，2H)，1.75(s，3H)，1.06(m，1H)，0.51(dd，2H)，0.27(dd，2H)。
實(shí)施例25-O
4-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(3-羥基丙基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺 檢測(cè)到MS APCI(-)m/z 459(M-1)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.52(dd，1H)，7.44(dd，1H)，6.62(t，1H)，3.81(s，3H)，3.63(t，2H)，3.43(t，2H)，1.79(m，2H)，1.74(s，3H)。
實(shí)施例25-P
5-氟-4-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺 檢測(cè)到MS APCI(-)m/z 465(M-1)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.55(dd，1H)，7.50(d，1H)，6.95(td，1H)，4.05(t，2H)，3.80(s，3H)，3.78(t，2H)。
實(shí)施例25-Q
4-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺 檢測(cè)到MS APCI(-)m/z 445(M-1)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.52(dd，1H)，7.44(dd，1H)，6.62(t，1H)，3.82(s，3H)，3.68(t，2H)，3.46(t，2H)，1.74(s，3H)。
實(shí)施例25-R
N-(2，3-二羥基丙基)-4-(2-氟-4-碘苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺 檢測(cè)到MS APCI(-)m/z 475(M-1)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.52(dd，1H)，7.44(dd，1H)，6.62(t，1H)，3.82(s，3H)，3.80(m，1H)，3.52(m，3H)，3.36(dd，1H)，1.74(s，3H)。
實(shí)施例25-S
5-氯-4-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺 檢測(cè)到MS APCI(-)m/z 481，483(M-1，Cl圖譜)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.53(dd，1H)，7.49(d，1H)，6.88(t，1H)，3.97(t，2H)，3.81(s，3H)，3.74(t，2H)。
實(shí)施例25-T
(S)-5-氯-4-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺 檢測(cè)到MS APCI(-)m/z 495，496(M-1，Cl圖譜)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.53(dd，1H)，7.49(d，1H)，6.88(t，1H)，3.99(m，1H)，3.83(m，1H)，3.81(s，3H)，3.71(dd，1H)，1.17(d，3H)。
實(shí)施例25-U
5-氯-4-(2-氟-4-碘苯氨基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺 檢測(cè)到MS APCI(-)m/z 421，423(M-1，Cl圖譜)；1H NMR(400MHz，CDCl3/CD3OD)δ7.56(td，1H)，7.46(m，1H)，6.82(t，1H)，3.87(s，3H)。
實(shí)施例25-V
5-氯-N-(2，3-二羥基丙基)-4-(2-氟-4-碘苯氨基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺 檢測(cè)到MS APCI(+)m/z 497，499(M+1，Cl圖譜)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.53(dd，1H)，7.49(d，1H)，6.86(t，1H)，3.84(s，3H)，3.80(m，1H)，3.55(d，2H)，3.50(m，1H)，3.37(dd，1H)。
實(shí)施例25-W
(S)-N-(2，3-二羥基丙基)-4-(2-氟-4-碘苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺 檢測(cè)到MS APCI(-)m/z 475(M-1)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.52(dd，1H)，7.44(d，1H)，6.62(t，1H)，3.82(s，3H)，3.80(m，1H)，3.52(m，3H)，3.36(dd，1H)，1.74(s，3H)。
實(shí)施例25-X
(S)-5-氯-N-(2，3-二羥基丙基)-4-(2-氟-4-碘苯氨基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺 檢測(cè)到MS APCI(+)m/z 497，499(M+1，Cl圖譜)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.52(dd，1H)，7.48(d，1H)，6.86(t，1H)，3.84(s，3H)，3.80(m，1H)，3.55(d，2H)，3.51(d，1H)，3.37(dd，1H)。
實(shí)施例25-Y
2-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺 MS APCI(+)m/z 308(M+1)圖譜檢測(cè)到；1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.38(s，1H)，7.92(br s，1H)，7.89(d，1H)，7.45(br s，1H)，7.25(dd，1H)，7.04(dd，1H)，6.88(t，1H)，6.09(d，1H)，3.07(s，3H)，2.48(s，3H)。
實(shí)施例25-Z
5-氟-2-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺 步驟A2-氯-5-氟-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸的制備將2，6-二氯-5-氟煙酸(15.00g，71.43mmol，Lancaster合成)和2N NaOH(178.6mL，357.2mmol)的混合物攪拌回流2小時(shí)，然后在室溫下攪拌16小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻到0℃并用12N HCl(32.74mL，392.9mmol)酸化。將混合物在冰浴中冷卻30分鐘，將固體過(guò)濾并用H2O洗滌。將經(jīng)分離的固體在溫EtOH中制漿，過(guò)濾，然后用溫EtOH洗滌。將固體收集并真空干燥過(guò)夜以獲得期望的產(chǎn)物(6.4g，47％)，為米色固體。
步驟B2-氯-5-氟-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸甲酯的制備在0℃，向2-氯-5-氟-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸(6.37g，33.26mmol)的DMF(250mL)溶液中加入LiH(95％，0.661g，83.14mmol)。將反應(yīng)混合物攪拌45分鐘，然后加入碘甲烷(4.56mL，73.16mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2小時(shí)，然后用2M HCl驟冷直到反應(yīng)混合物的pH為6-7。將反應(yīng)混合物用EtOAc和飽和NaCl稀釋并分離層。將水層用EtOAc(1x)反萃取。將合并的有機(jī)層干燥(Na2SO4)并減壓濃縮以獲得粗的黃色的油。HPLC分析顯示兩種產(chǎn)物比率為5∶1，通過(guò)閃蒸柱色譜法(二氯甲烷/EtOAc，15∶1)分離它們以得到期望的產(chǎn)物(5.40g，74％)，為淺黃色固體。還分離了作為淺黃色結(jié)晶狀固體的次要產(chǎn)物，經(jīng)鑒定為區(qū)域異構(gòu)體2-氯-5-氟-6-甲氧基煙酸甲酯。
步驟C5-氟-2-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸甲酯的制備在-78℃在N2下，向2-氟-4-(甲硫基)苯胺(0.236g，1.50mmol)的THF(10mL)溶液中滴加雙(三甲基甲硅烷基)酰胺鋰(3.42mL，3.42mmol，1M己烷溶液)。在加入完成后將反應(yīng)混合物在-78℃攪拌1小時(shí)。然后將2-氯-5-氟-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸甲酯(0.300g，1.37mmol)作為在THF(5mL)內(nèi)的溶液滴加，將反應(yīng)混合物在-78℃攪拌30分鐘。通過(guò)加入1M HCl驟冷反應(yīng)混合物直到反應(yīng)混合物的pH為5，然后用EtOAc和飽和NaCl稀釋。將有機(jī)層分離，干燥(Na2SO4)，并減壓濃縮。通過(guò)閃蒸柱色譜法(二氯甲烷/EtOAc，15∶1)純化得到純的期望產(chǎn)物(0.359g，75％)，為白色固體。
步驟D5-氟-2-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-1-甲基-6-氧代-N-(2-(乙烯基氧基)乙氧基)-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺的制備在0℃，向5-氟-2-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸甲酯(0.100g，0.294mmol)和O-(2-(乙烯基氧基)乙基)羥胺(0.045mL，0.441mmol)在THF(2mL)中的混合物內(nèi)滴加雙(三甲基甲硅烷基)酰胺鋰(1.18mL，0.441mmol，1M己烷溶液)。將反應(yīng)混合物攪拌20分鐘，用1M HCl驟冷，然后在EtOAc和飽和NaCl之間分配。將層分離，水層用EtOAc(1x)反萃取。將合并的有機(jī)層干燥(Na2SO4)，過(guò)濾并減壓濃縮以獲得粗的黃色固體，將其不經(jīng)進(jìn)一步純化用于下一步驟。
步驟E5-氟-2-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺的制備向5-氟-2-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-1-甲基-6-氧代-N-(2-(乙烯基氧基)乙氧基)-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺(0.121g，0.294mmol)的EtOH(3mL)溶液中加入2M HCl(0.75mL)。將反應(yīng)物在室溫下攪拌16小時(shí)。用1M NaOH將反應(yīng)混合物的pH調(diào)整為pH 7。用EtOAc和H2O稀釋反應(yīng)混合物。將有機(jī)層分離并用飽和NaCl洗滌。用EtOAc(1x)反萃取合并的水層。將合并的有機(jī)層干燥(Na2SO4)并減壓濃縮。通過(guò)硅膠閃蒸柱色譜法(二氯甲烷/MeOH，15∶1)純化得到5-氟-2-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺(0.079g；兩步產(chǎn)率70％)，為白色固體。MS ESI(+)m/z 386(M+1)圖譜檢測(cè)到；1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.54(br s，1H)，9.65(br s，1H)，7.65(d，1H)，7.23(dd，1H)，6.99(dd，1H)，6.81(t，1H)，4.67(t，1H)，3.74(t，2H)，3.51(q，2H)，3.25(s，3H)，2.46(s，3H)。
實(shí)施例25-AA
5-氯-2-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺 檢測(cè)到MS ESI(+)m/z 402，404(M+，Cl圖譜)；1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.59(br s，1H)，10.00(br s，1H)，7.93(s，1H)，7.23(dd，1H)，7.01(dd，1H)，6.93(t，1H)，4.66(t，1H)，3.73(t，2H)，3.51(m，2H)，3.24(s，3H)，2.47(s，3H)。
實(shí)施例25-BB
(S)-5-氟-2-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺 MS APCI(+)m/z 400(M+1)圖譜檢測(cè)到；1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.54(br s，1H)，9.61(br s，1H)，7.64(d，1H)，7.22(dd，1H)，6.99(dd，1H)，6.81(t，1H)，4.73(s，1H)，3.73(m，1H)，3.54(d，2H)，3.25(s，3H)，2.46(s，3H)，1.01(d，3H)。
實(shí)施例25-CC
(S)-5-氯-2-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺 檢測(cè)到MS APCI(+)m/z 416，418(M+，Cl圖譜)；1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.59(br s，1H)，9.94(br s，1H)，7.92(s，1H)，7.23(dd，1H)，7.01(dd，1H)，6.94(t，1H)，4.71(d，1H)，3.75(m，1H)，3.54(d，2H)，3.24(s，3H)，2.47(s，3H)，1.02(d，3H)。
實(shí)施例25-DD
2-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-N-甲氧基-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺 MS ESI(+)m/z 338(M+1)圖譜檢測(cè)到；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ10.33(s，1H)，8.39(s，1H)，7.40(d，1H)，7.02(dd，1H)，6.96(dd，1H)，6.75(t，1H)，6.20(d，1H)，3.83(s，3H)，3.23(s，3H)，2.47(s，3H)。
實(shí)施例25-FF
2-(2-氟-4-碘苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺 MS ESI(+)m/z 402(M+1)圖譜檢測(cè)到；1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.75(s，1H)，7.85(br s，1H)，7.78(s，1H)，7.66(d，1H)，7.40(m，2H)，6.54(t，1H)，3.13(s，3H)，2.00(s，3H)。
實(shí)施例25-HH
2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(3-羥基丙基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺 MS ESI(+)m/z 460(M+1)圖譜檢測(cè)到；1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.34(s，1H)，8.27(t，1H)，7.72(s，1H)，7.64(dd，1H)，7.38(dd，1H)，6.50(t，1H)，4.41(t，1H)，3.17(s，5H)，2.01(s，3H)，1.55(s，2H)。
實(shí)施例25-JJ
(S)-5-氯-2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺 MS APCI(+)m/z 460(M+1)圖譜檢測(cè)到；1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.54(br s，1H)，9.62(br s，1H)，7.86(s，1H)，7.62(dd，1H)，7.38(dd，1H)，6.69(t，1H)，4.69(m，1H)，3.46(m，2H)，3.27(s，3H)，0.99(d，3H)。
實(shí)施例25-KK
(S)-2-(2-氯-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺 MS APCI(+)m/z 492(M+1)圖譜檢測(cè)到；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.79(d，1H)，7.58(m，1H)，7.52(dd，1H)，6.39(d，1H)，3.87(m，1H)，3.73(dd，1H)，3.62(dd，1H)，3.35(s，3H)，2.13(s，3H)，1.10(d，3H)。
實(shí)施例25-LL
5-氟-2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺 MS ESI(+)m/z 466(M+1)圖譜檢測(cè)到；1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.53(br s，1H)，9.37(br s，1H)，7.64(dd，1H)，7.62(d，1H)，7.37(dd，1H)，6.61(t，1H)，4.68(t，1H)，3.69(t，2H)，3.49(q，2H)，3.30(s，3H)。
實(shí)施例25-MM
(S)-5-氟-2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺 MS APCI(+)m/z 480(M+1)圖譜檢測(cè)到；1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.49(br s，1H)，9.48(br s，1H)，7.61(m，2H)，7.36(m，1H)，6.59(t，1H)，4.77(br s，1H)，3.69(m，1H)，3.49(s，1H)，3.48(d，1H)，3.29(s，3H)，0.99(d，3H)。
前面的描述僅作為對(duì)本發(fā)明原理的說(shuō)明。此外，由于多種修改和變化對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見(jiàn)的，因此不希望本發(fā)明限于上述精確結(jié)構(gòu)和方法。相應(yīng)地，可以認(rèn)為所有適當(dāng)?shù)男揎椇偷刃问蕉悸淙胨降臋?quán)利要求所定義的本發(fā)明的范圍內(nèi)。
當(dāng)詞語(yǔ)“包含”、“包括”、“含有”在本發(fā)明的說(shuō)明書(shū)和所附的權(quán)利要求中使用時(shí)，其意在明確所述特征、整數(shù)、成分或步驟的存在，但是并不排除它們的一種或多種其他特征、整數(shù)、成分、步驟或基團(tuán)的存在或加入。
權(quán)利要求
1.一種化合物，包括其互變異構(gòu)體、代謝物、拆分的對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體、溶劑合物和藥學(xué)可接受的鹽，所述化合物具有式I
其中
R1為Cl或F；
R3為H、Me、Et、OH、MeO-、EtO-、HOCH2CH2O-、HOCH2C(Me)2O-、(S)-MeCH(OH)CH2O-、(R)-HOCH2CH(OH)CH2O-、環(huán)丙基-CH2O-、HOCH2CH2-、
R7為環(huán)丙基-CH2-或C1-C4烷基，其中所述烷基任選地用一個(gè)或多個(gè)F取代；
R8為Br、I或SMe；且
R9為CH3、CH2F、CHF2、CF3、F或Cl。
2.一種化合物，包括其互變異構(gòu)體、代謝物、拆分的對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體、溶劑合物和藥學(xué)可接受的鹽，所述化合物具有式IA
其中
R1為Cl或F；
R3為H、Me、OH、MeO、EtO、HOCH2CH2O、MeOCH2CH2O、HOCH2CH2CH2、
R7為環(huán)丙基-CH2-或C1-C4烷基，其中所述烷基任選地用一個(gè)或多個(gè)F取代；
R8為Br、I或SMe；且
R9為CH3、CH2F、CHF2、CF3、F或Cl。
3.權(quán)利要求1或2的化合物，其中R7為環(huán)丙基-CH2-或Me。
4.權(quán)利要求1或2的化合物，其中R9為CH3、F或Cl。
5.一種具有式II的化合物
或其藥學(xué)可接受的鹽，其中
R3為H、MeO、HOCH2CH2O、MeOCH2CH2O、HOCH2CH2CH2、
R9為H、CH3、F或Cl。
6.權(quán)利要求5的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽，其中所述化合物選自
4-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺；
4-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺；
N-(環(huán)丙基甲氧基)-4-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺；
4-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-N-(2-甲氧基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺；
4-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-N-甲氧基-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺；
(S)-4-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺；
4-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺；
5-氟-4-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺；
(S)-5-氟-4-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺；
5-氯-4-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺；
(S)-5-氯-4-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺；
4-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-N-(3-羥基丙基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺；和
(S)-N-(2，3-二羥基丙基)-4-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺。
7.一種具有式III的化合物
或其藥學(xué)可接受的鹽，其中
R1為Cl或F；
R3為H、Me、MeO、HOCH2CH2O、HOCH2CH2CH2、HOCH2CH2、
R8為Br或I；且
R9為CH3、F、Cl或Br。
8.權(quán)利要求7的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽，其選自
5-溴-4-(4-溴-2-氟苯氨基)-N-(環(huán)丙基甲氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺；
4-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺；
(R)-N-(2，3-二羥基丙氧基)-4-(2-氟-4-碘苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺；
4-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-甲氧基-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺；
N-(環(huán)丙基甲氧基)-4-(2-氟-4-碘苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺；
(S)-4-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺；
4-(2-氯-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺；
(S)-4-(2-氯-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺；
4-(4-溴-2-氯苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺；
(S)-4-(4-溴-2-氯苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺；
4-(4-溴-2-氟苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺；
(R)-4-(4-溴-2-氟苯氨基)-N-(2，3-二羥基丙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺；
4-(4-溴-2-氟苯氨基)-N-(1-羥基-2-甲基丙烷-2-基氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺；
4-(2-氟-4-碘苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺；
4-(4-溴-2-氟苯氨基)-5-氟-N-(2-羥基乙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺；
4-(2-氟-4-碘苯氨基)-N，1，5-三甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺；
N-(環(huán)丙基甲基)-4-(2-氟-4-碘苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺；
4-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(3-羥基丙基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺；
5-氟-4-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺；
4-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺；
N-(2，3-二羥基丙基)-4-(2-氟-4-碘苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺；
5-氯-4-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺；
(S)-5-氯-4-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺；
5-氯-4-(2-氟-4-碘苯氨基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺；
5-氯-N-(2，3-二羥基丙基)-4-(2-氟-4-碘苯氨基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺；
(S)-N-(2，3-二羥基丙基)-4-(2-氟-4-碘苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺；和
(S)-5-氯-N-(2，3-二羥基丙基)-4-(2-氟-4-碘苯氨基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺。
9.權(quán)利要求1或7的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽，其中所述化合物選自
4-(4-溴-2-氟苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺；和
(S)-4-(4-溴-2-氟苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫噠嗪-3-甲酰胺。
10.一種化合物，包括其互變異構(gòu)體、代謝物、拆分的對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體、溶劑合物和藥學(xué)可接受的鹽，所述化合物具有式IV
其中
R1為Cl或F；
R3為H、Me、Et、OH，MeO-、EtO-、HOCH2CH2O-、HOCH2C(Me)2O-、(S)-MeCH(OH)CH2O-、(R)-HOCH2CH(OH)CH2O-、環(huán)丙基-CH2O-、HOCH2CH2-、
R7為甲基或乙基，其中所述甲基和乙基任選地用一個(gè)或多個(gè)F取代；
R8為Br、I或SMe；且
R9為H、C1-C4烷基、Cl或CN，其中所述烷基任選地用獨(dú)立地選自F或CN的一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)取代，條件是
a)當(dāng)R1為F，R8為Br，R9為H且R7為Me或Et時(shí)，則R3不能為HOCH2CH2O；
b)當(dāng)R1為F，R8為I，R9為H且R3為MeO時(shí)，則R7不能為Me；
c)當(dāng)R1為F，R8為Me，R9為H且R3為HOCH2CH2O時(shí)，則R7不能為Me；且
d)當(dāng)R1為F，R8為Br，R9為H且R3為環(huán)丙基-CH2O時(shí)，則R7不能為Me。
11.權(quán)利要求10的化合物，其中R9為H、Me、Et、Cl或CN。
12.一種具有式V的化合物
或其藥學(xué)可接受的鹽，其中
R3為HOCH2CH2O或(S)-MeCH(OH)CH2O；且
R9為H、CH3、F或Cl，
條件是當(dāng)R1為F，R8為SMe，R9為Cl且R7為Me時(shí)，則R3不能為HOCH2CH2O。
13.權(quán)利要求12的化合物，其中所述化合物選自
2-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺；
(S)-2-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺；
2-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺；
(S)-2-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺；
5-氟-2-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺；
(S)-5-氟-2-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺；和
(S)-5-氯-2-(2-氟-4-(甲硫基)苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺。
14.一種具有式VI的化合物
或其藥學(xué)可接受的鹽，其中
R1為Cl或F；
R3為H、HOCH2CH2O或(S)-MeCH(OH)CH2O；且
R9為H、Me、F或Cl。
15.權(quán)利要求14的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽，其中R1為F，R3為HOCH2CH2O-且R9為甲基。
16.權(quán)利要求14的化合物，其中所述化合物為
2-(2-氯-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺；
(S)-2-(2-氯-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺；
2-(2-氟-4-碘苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺；
2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺；
(S)-2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺；
(S)-2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺；
2-(2-氯-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺；
5-氯-2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺；
(S)-2-(2-氯-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺；或
(S)-5-氯-2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺。
17.權(quán)利要求14的化合物，其中所述化合物選自
5-氟-2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺；和
(S)-5-氟-2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基丙氧基)-1-甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺。
18.權(quán)利要求14的化合物，其中所述化合物為2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺。
19.式XI的化合物的一種晶形，
其基本上為2型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺的形式。
20.根據(jù)權(quán)利要求19的式XI的化合物的晶形，其特征為X-射線衍射圖譜在約9.5和12.6的2θ角度具有特征峰。
21.根據(jù)權(quán)利要求19的式XI的化合物的晶形，其特征為X-射線衍射圖譜在約9.5、12.6、14.7和19.6的2θ角度具有特征峰。
22.根據(jù)權(quán)利要求19的式XI的化合物的晶形，其特征為X-射線衍射圖譜基本上如圖10所示。
23.式XI的化合物的一種晶形，
其基本上為1型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺的形式。
24.根據(jù)權(quán)利要求23的式XI的化合物的晶形，其特征為X-射線衍射圖譜在約9.2和13.0的2θ角度具有特征峰。
25.根據(jù)權(quán)利要求23的式XI的化合物的晶形，其特征為X-射線衍射圖譜在約9.2、13.0、18.3、21.0和21.7的2θ角度具有特征峰。
26.根據(jù)權(quán)利要求23的式XI的化合物的晶形，其特征為X-射線衍射圖譜基本上如圖11所示。
27.根據(jù)權(quán)利要求1至26中任一項(xiàng)的化合物，其用作藥物。
28.根據(jù)權(quán)利要求1至26中任一項(xiàng)的化合物，其用作用于治療過(guò)度增殖性疾病或炎性病癥的藥物。
29.權(quán)利要求1至26中任一項(xiàng)的化合物在制備用于治療過(guò)度增殖性疾病或炎性病癥的藥物中的用途。
30.一種在需要治療的溫血?jiǎng)游锶缛祟?lèi)中產(chǎn)生MEK抑制作用的方法，所述方法包括向所述動(dòng)物給藥有效量的權(quán)利要求1至26中任一項(xiàng)的化合物。
31.一種藥物組合物，其包含權(quán)利要求1至26中任一項(xiàng)的化合物以及藥學(xué)可接受的載體。
32.一種制備權(quán)利要求2的化合物的方法，所述方法包括
將式100或101的化合物
與R3NH2或者(i)當(dāng)R3如權(quán)利要求2中所定義時(shí)，在偶聯(lián)試劑的存在下反應(yīng)，或者(ii)當(dāng)R3如權(quán)利要求2中所定義，只是R3不為H或Me時(shí)，在酰胺堿的存在下反應(yīng)，以提供權(quán)所述利要求2的化合物。
33.一種制備權(quán)利要求10的化合物的方法，所述方法包括
將式108或109的化合物
與其中R3如權(quán)利要求10中所定義的R3NH2或者在(i)偶聯(lián)試劑的存在下反應(yīng)，或者(ii)當(dāng)R3如權(quán)利要求10中所定義，只是R3不為H或Me時(shí)，在酰胺堿的存在下反應(yīng)。
34.一種制備權(quán)利要求14的化合物的方法，所述方法包括
(a)將具有式105的化合物溴化，
其中R為烷基，以提供化合物106
(b)在鈀催化劑和配體的存在下，并任選地在堿存在下，將化合物106與Zn(Me)2反應(yīng)，以提供化合物107
(c)在鈀催化劑、膦配體和酰胺堿的存在下，將化合物107與具有下式的苯胺反應(yīng)，
以提供化合物108
(d)任選地在堿性條件下水解化合物108，以提供化合物109
和
(e)將化合物108或化合物109與R3NH2或者(i)當(dāng)R3如權(quán)利要求14中所定義時(shí)，在偶聯(lián)試劑的存在下反應(yīng)，或者(ii)當(dāng)R3如權(quán)利要求14中所定義，只是R3不為H時(shí)，在酰胺堿的存在下反應(yīng)，以提供所述權(quán)利要求14的化合物。
35.權(quán)利要求34的方法，其中化合物105通過(guò)包括下列步驟的方法制備
(a)將化合物103
與氫氧化鈉水溶液反應(yīng)，以提供化合物104
和
(b)在堿存在下，將化合物104與RX反應(yīng)，以提供化合物105，
其中R為Me，且X為鹵素。
36.一種制備權(quán)利要求5的化合物的方法，所述方法包括
(a)將具有式Me-NH-NH2的肼與下列物質(zhì)反應(yīng)
(i)與2-氧代丙二酸二乙酯反應(yīng)，然后用?；噭┨幚?，所述?；噭┨峁┚哂惺紺(＝O)CH2R9的?；渲蠷9如權(quán)利要求5中所定義，或者
(ii)與酰化試劑反應(yīng)，所述?；噭┨峁┚哂惺紺(＝O)CH2R9的酰基，其中R9如權(quán)利要求5中所定義，然后用氧代丙二酸二乙酯處理，以提供化合物97
(b)在低于-40℃的溫度下，用酰胺堿處理化合物97，然后用濃HCl處理，以提供式98的化合物
(c)將化合物98氯化，以提供化合物99
(d)在鈀催化劑、配體和酰胺堿的存在下，將化合物99與具有下式的苯胺反應(yīng)，
以提供化合物100
和
(e)使式100的化合物與R3NH2或者(i)當(dāng)R3如權(quán)利要求5中所定義時(shí)，在偶聯(lián)試劑的存在下反應(yīng)，或者(ii)當(dāng)R3如權(quán)利要求5中所定義，只是R3不為H時(shí)，在酰胺堿的存在下反應(yīng)，以提供所述權(quán)利要求5的化合物。
37.一種制備其中R9為H、Me或Cl的權(quán)利要求5的化合物的方法，所述方法包括
(a)將具有式Me-NH-NH2的肼與下列物質(zhì)反應(yīng)
(i)與2-氧代丙二酸二乙酯反應(yīng)，然后用酰化試劑處理，所述?；噭┨峁┚哂惺紺(＝O)CH2R9的酰基，其中R9為H、Me或Cl；或
(ii)與酰化試劑反應(yīng)，所述酰化試劑提供具有式C(＝O)CH2R9的?；?，其中R9為H、Me或Cl，然后用氧代丙二酸二乙酯處理，以提供化合物97
(b)在低于-40℃的溫度下，用酰胺堿處理化合物97，以提供式98的化合物
(c)將化合物98氯化，以提供化合物99
(d)在酰胺堿的存在下，將化合物99與具有下式的苯胺反應(yīng)，
以提供化合物101
和
(e)將化合物101與R3NH2或者(i)當(dāng)R3如權(quán)利要求5中所定義時(shí)，在偶聯(lián)試劑的存在下反應(yīng)，或者(ii)當(dāng)R3如權(quán)利要求5中所定義，只是R3不為H時(shí)，在酰胺堿的存在下反應(yīng)，以提供所述權(quán)利要求5的化合物。
38.一種制備其中R9為Me的權(quán)利要求12的化合物的方法，所述方法包括
(a)將具有式105的化合物溴化，
其中R為烷基，以提供化合物106
(b)在鈀催化劑和配體的存在下，并任選地在堿的存在下，將化合物106與Zn(Me)2反應(yīng)，以提供化合物107
(c)在酰胺堿的存在下，將化合物107與具有下式的苯胺反應(yīng)，
以提供化合物108
(d)任選地在堿性條件下水解化合物108，以提供化合物109
和
(e)在偶聯(lián)試劑或酰胺堿的存在下，將化合物108或化合物109與其中R3如權(quán)利要求12中所定義的R3NH2反應(yīng)，以提供所述權(quán)利要求12的化合物。
39.一種制備其中R9為Cl的權(quán)利要求12的化合物的方法，所述方法包括
(a)在酰胺堿的存在下，將式112的化合物
與具有下式的苯胺反應(yīng)，
以提供化合物117
(b)將化合物117氯化，以提供化合物118
和
(c)任選地水解化合物118，以提供化合物118A
(d)在偶聯(lián)試劑或酰胺堿的存在下，將化合物118或118A與(S)-MeCH(OH)CH2ONH2或HOCH2CH2ONH2反應(yīng)，以提供所述權(quán)利要求12的化合物。
40.一種制備其中R9為H或F的權(quán)利要求12的化合物的方法，所述方法包括
(a)用NaOH水溶液處理其中R9為H或F的式140的化合物，
以提供化合物141，
(b)在堿的存在下，將化合物141與其中X為鹵化物的CH3X反應(yīng)，以提供化合物142
(c)在酰胺堿的存在下，將化合物142與具有下式的苯胺反應(yīng)，
以提供化合物143
(d)任選地水解化合物143，以提供化合物144
和
(e)在偶聯(lián)試劑或酰胺堿的存在下，將化合物143或144與其中R3如權(quán)利要求12中定義的R3NH2反應(yīng)，以提供所述權(quán)利要求12的化合物。
41.根據(jù)權(quán)利要求31-40中任一項(xiàng)的方法，其中所述偶聯(lián)試劑為1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽、1-羥基苯并三唑-6-磺酰氨基甲基鹽酸鹽或苯并三唑-1-基氧基三吡咯烷并磷鎓六氟磷酸鹽。
42.一種制備權(quán)利要求23的基本上為1型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺形式的式XI的化合物的方法，其包括
a)將2-(2-氟-4-碘苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸(2-乙烯氧基乙氧基)酰胺與酸性混合物接觸足夠的時(shí)間，以將該化合物轉(zhuǎn)化為2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺；
b)使來(lái)自步驟a)的物質(zhì)從包含1型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺晶種的有機(jī)溶劑中結(jié)晶；和
c)分離所述1型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺。
43.權(quán)利要求42的方法，其中步驟a)的所述酸性混合物為含水酸-乙酸乙酯溶劑體系。
44.權(quán)利要求42或43的方法，其中步驟b)的所述有機(jī)溶劑為乙酸乙酯。
45.一種制備權(quán)利要求23的基本上為1型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺形式的式XI的化合物的方法，其包括
a)將2型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺與少量的1型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺在有機(jī)溶劑中攪拌；和
b)分離所述1型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺。
46.權(quán)利要求45的方法，其中所述有機(jī)溶劑為乙酸乙酯。
47.權(quán)利要求45或46的方法，其中在約50至60℃的溫度進(jìn)行步驟a)。
48.一種制備權(quán)利要求19的基本上為2型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺形式的式XI的化合物的方法，其包括
a)將2-(2-氟-4-碘苯氨基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-羧酸(2-乙烯氧基乙氧基)酰胺與酸性混合物接觸足夠的時(shí)間，以將該化合物轉(zhuǎn)化為2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺；
b)使來(lái)自步驟a)的物質(zhì)從有機(jī)溶劑中結(jié)晶；和
c)分離所述2型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺。
49.根據(jù)權(quán)利要求48的方法，其中在步驟b)中，所述有機(jī)溶劑包含2型2-(2-氟-4-碘苯氨基)-N-(2-羥基乙氧基)-1，5-二甲基-6-氧代-1，6-二氫吡啶-3-甲酰胺的晶種。
50.根據(jù)權(quán)利要求48的方法，其中步驟b)的所述有機(jī)溶劑為乙酸乙酯。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了用于治療哺乳動(dòng)物中的過(guò)度增殖性疾病如癌癥和炎癥以及炎性病癥的MEK抑制劑。本發(fā)明還公開(kāi)了使用這樣的化合物治療哺乳動(dòng)物中的過(guò)度增殖性疾病的方法和包含這樣的化合物的藥物組合物。
文檔編號(hào)A61K31/50GK101626767SQ200680026372
公開(kāi)日2010年1月13日 申請(qǐng)日期2006年5月17日 優(yōu)先權(quán)日2005年5月18日
發(fā)明者A·L·馬洛, E·華萊士, 徐廷法, J·P·利西卡圖斯, 楊鴻云, J·布萊克, R·A·斯托里, R·J·布思, J·D·皮泰姆, J·倫納德, M·R·菲爾丁 申請(qǐng)人:陣列生物制藥公司, 阿斯利康公司