專利名稱：含有鐵螯合劑的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及含有鐵螯合劑的藥物組合物。更具體地，本發(fā)明涉及適 于胃腸外施用并能提供所納入活性化合物的緩慢和持續(xù)釋放的組合物。 在另 一方面，本發(fā)明涉及可納入到藥物組合物中以實現(xiàn)持續(xù)釋放并特別 適于遞送鐵螯合劑的藥物載體。本發(fā)明還涉及制備這種組合物的方法、 可用于重構(gòu)所述組合物的粉末和試劑盒、以及所述組合物的用途。
背景技術(shù)：
多年來已經(jīng)使用鐵螯合劑用于診斷和治療?？刹捎煤芏鄻藴蕦ζ溥M 行分類，所述標準比如其來源(合成的與生物學產(chǎn)生的分子)、其與溶 劑如水(疏水性與親水性)的相互作用或者其化學計量的相互作用。一個用于治療的鐵螯合劑的實例是去鐵敏。例如，藥物產(chǎn)品Desferal⑧含有 甲磺酸鹽形式的去鐵敏。去鐵敏用于治療慢性鐵過栽(chronic iron overload )和在不能耐受靜 脈切開術(shù)的患者中與遲發(fā)性皮膚卟啉病相關(guān)的鐵過載，所述慢性鐵過載例 如在伴隨病癥不包括靜脈切開術(shù)的患者中輸血性*血黃素沉著癥、重癥 地中海貧血、鐵粒幼紅細胞性貧血、自身免疫性溶血性貧血、以及其它慢 性貧血、特發(fā)性(原發(fā)性)血色素沉著癥中的慢性鐵過載。此外，去鐵敏 被指明用于治療急性鐵中毒、具有鋁相關(guān)骨病的晚期腎衰患者中的慢性鋁 過載、滲析性腦病或鋁相關(guān)的貧血。更近些時候，已發(fā)現(xiàn)鐵螯合劑可用于預防神經(jīng)元變性，治療神經(jīng)元 損傷和支持神經(jīng)元再生。Ben-Shachar D.等(J. Neurochem.， vol. 56, 1991， 1441-1444)公開了通 過施用鐵螯合劑去鐵敏(Desferal)延緩6-羥基多巴胺誘導的黑質(zhì)紋狀體多 巴胺神經(jīng)元的變性。為了避免直接向腦內(nèi)注射來治療神經(jīng)退行性疾病尤其是帕金森病 的需要，開發(fā)了新型的鐵螯合劑并公開于例如WO 00/74664中，人們 相信其具有顯著增加的親脂性?；谒鲂禄衔锏母倪M的理化性質(zhì)，暗示這些化合物可能能夠穿越血腦屏障，使得它們在靜脈內(nèi)施用后滲透到腦組織中，并因此使更可行和方便的治療方案成為可能。另一方面，眾所周知，開發(fā)新的治療實體總是充滿挑戰(zhàn)、費時耗資的，并且最重要的是伴隨著重大的臨床風險。實際上，極少有在體外或甚至在臨床前研 究中具有有希望的藥理特性的候選新藥在隨后的臨床研究中實際上被證明是安全和有效的。關(guān)于在WO 00/74664中公開的化合物，不知它 們在帕金森病或與神經(jīng)元變性相關(guān)或與需要神經(jīng)元再生相關(guān)的任何其 它病癥的治療中是否確實是臨床上有效的。進一步設想鐵螯合劑在神經(jīng)元再生中的有益效果可能與其抑制或 延遲瘢痕形成的能力有關(guān)。鐵螯合劑的這些臨床應用公開于例如WO 98/51708和EP0 878 480中。建議通過任何口服或可注射途徑(包括直 接局部注射)施用于受影響的組織。為了將鐵螯合劑用于新的治療應用，理想的是它們以能直接施用 到受影響的組織和部位并具有延長的效力(優(yōu)選比已知的市售水溶液長 得多)的制劑來提供，以避免對敏感組織或器官的頻繁施用。一些開發(fā)鐵螯合劑的持續(xù)釋放制劑的努力是已知的。例如，Lowther N.等(Drug Dev. Ind. Pharm.， vol. 25， iss. 11, 1999， 1157-1166)描述了正 癸烷磺酸去鐵敏-B的基于油的可注射貯庫制劑。其中活性成分以混懸形 式引入的油性載體液體包含芝麻油、油酸乙酯以及通常至少一種表面活 性劑。所述組合物的釋放特性證實全部的正癸烷磺酸去鐵敏-B處于持續(xù) 釋放的形式。另一方面，所述組合物中的表面活性劑比如Tweei^80和 Spai^85會導致組織刺激。另外，所述活性化合物從混懸劑中的體外釋 放似乎延長至約12小時，這對于避免重復胃腸外施用來說可能不夠長。Schlicher， E.J. et al. (Int. J. Pharm. vol. 153, 1997, 235-245)描述了去鐵 敏的微粒組合物。所述微粒由丙交酯-乙交酯共聚物(一種疏水性生物可降 解聚合物)制備。然而，所述,的藥物載荷能力太低以至不能容納將在 至少數(shù)天的時間內(nèi)有效的活性化合物劑量。而且，已知丙交酯-乙交酯共聚 物降解成酸性反應產(chǎn)物，所述酸性反應產(chǎn)物可使得所述微粒內(nèi)的微環(huán)境基 本呈酸性，這會導致酸不穩(wěn)定的去鐵敏的降解。US 2005/175684 Al公開了鐵螯合劑如去鐵敏的靶向脂質(zhì)體組合物。所 述組合物能提供持續(xù)^r放和長時活性。它們通過組合所述鐵螯合劑、 一種 或更多種形成嚢泡的脂質(zhì)、以及至少一種靶向劑，以所述鐵螯合劑柳旨質(zhì)體包封的方式制備。隨后，通過分離方法比如離心或透析將所述月旨質(zhì)體遞 送體系純化而除去任何非脂質(zhì)體包封的鐵螯合劑，使得所述組合物僅包含 脂質(zhì)體形式的藥物物質(zhì)。這些脂質(zhì)體的缺點在于其表面攜帶靶向配體的無 菌脂質(zhì)嚢泡的工業(yè)生產(chǎn)還未纟艮好地確立并且預期非常昂貴。而且，所述優(yōu) 選的靶向配體，特別是肽和蛋白質(zhì)，常常是免疫原性的，因此可導致患者 的不良反應。類似地，Postma N. S.等(J. Control. Rel.， vol. 58, 1999, 51-60)制備并測 試了脂質(zhì)體包封的去鐵敏。對兩種脂質(zhì)體進行比較，其中第一種在體溫下 表現(xiàn)為"流體"脂質(zhì)體，而第二種脂質(zhì)體被描述為"剛性的"。在兩種情況下， 含有去鐵敏的脂質(zhì)體均首先通過反相蒸發(fā)法制備，然后通過多次超離心和 洗滌與非脂質(zhì)體藥物分離。雖然通過小鼠中的生物分布研究已證實了 一些 持續(xù)釋放作用，但所述組合物的適用性和治療有效性還未確立。US 5，043，166描述了載有細胞抑制劑的脂質(zhì)體，所述細胞抑制劑來自 已知為高心臟毒性化合物的蒽環(huán)糖苷類抗生素比如阿霉素。雖然脂質(zhì)體包 封本身已經(jīng)降低了所述藥物物質(zhì)的心臟毒性，但該文獻表明可通過親脂性 自由基抑制劑(quencher)和水溶性鐵螯合劑比如去鐵敏、鐵草氨菌素的 共包封來實現(xiàn)毒性的進一步降低。人們希望所述輔助化合物將在體內(nèi)通過 藥物物質(zhì)降低過氧化脂質(zhì)損傷。該文獻還教導了各脂質(zhì)體的制備，其通過 使用傳統(tǒng)的膜方法進行。在制備之后，通過濾膜擠出將脂質(zhì)體按大小分級， 并通過離心、超濾、凝膠過濾或采用離子交換樹脂處理除去未包封的活性 成分，使得所述最終組合物僅包含包封的活性成分。同樣，US 5,023,087公開了提供各種類型活性化合物的持續(xù)釋放的脂 質(zhì)體。再次建議另外引入作為保護劑的鐵螯合劑比如去鐵敏，以通過降低 它的某些毒性作用來增加所述組合物的耐受性。而且，所述脂質(zhì)體適于肌 肉內(nèi)和/或皮下施用。所述脂質(zhì)體的制備與US 5,043,166所教導的類似。設 計制備方法以提供栽有藥物和保護劑的脂質(zhì)體，所述脂質(zhì)體被純化而除去 未包封的活性劑并在注射后緩慢釋放所納入的化合物。因此，仍然需要改善的胃腸外施用鐵螯合劑的組合物。因此，本發(fā)明的一個目的是提供適于遞送鐵螯合劑的藥物組合物，所 述藥物組合物沒有已知組合物的缺點和限制。另一個目的是提供納入鐵螯 合劑的組合物，所述組合物適于胃腸外施用并可用于治療損傷的神經(jīng)組織 而不需要重復施用。另外的目的在于所述組合物的制備以及可在使用之前重構(gòu)以得到所述組合物的粉末和試劑盒。在以下描述和權(quán)利要求的基礎 上，進一步的目的將是顯而易見的。發(fā)明內(nèi)容根據(jù)本發(fā)明，提供了用于胃腸外施用的包含選自生理上可接受的鐵螯 合劑的活性化合物的藥物組合物，其中至少 一部分的所述活性化合物以持 續(xù)釋放形式納入。所述組合物進一步的特征在于其包含第二部分的以立即 釋放形式納入的所述活性化合物。在另一個實施方案中，所述組合物進一 步的特征在于高粘度和其在室溫下的粘彈性表現(xiàn)。一種優(yōu)選的鐵螯合劑是去鐵敏(DFO),已知其為有效的用于人治療的 鐵螯合劑，并且其已被用于治療鐵中毒。另一種優(yōu)選的鐵螯合劑是地拉羅 司(desferasirox)。去鐵敏和地拉羅司可以以藥學上可接受的鹽的形式被 納入，比如在去鐵敏的情況下的甲磺酸鹽。包含在所述組合物中的至少一部分鐵螯合劑以持續(xù)釋放形式納入。根 據(jù)本發(fā)明的一個優(yōu)選實施方案，另一部分的鐵螯合劑以立即釋放形式存 在，可通過將相應的藥物部分納入持續(xù)釋放顆粒(比如聚合物微?；蛑|(zhì) 顆粒)中而實現(xiàn)持續(xù)釋放性質(zhì)。在一個優(yōu)選的實施方案中，所述組合物的一個特性在于其相對高的粘 度，顯著高于胃腸外施用的典型水性組合物的粘度。該高粘度可用于增加 所述組合物在施用部位的停留時間并因此增加其有效性。所述組合物特別可用于直接施用到神經(jīng)組織內(nèi)，比如損傷內(nèi)、神經(jīng)內(nèi)、 脊柱內(nèi)、鞘內(nèi)、或髓內(nèi)施用。 一個優(yōu)選的用途是施用到損傷的神經(jīng)內(nèi)以促 進組織再生或延遲瘢痕形成。由于穩(wěn)定性的緣故，可能優(yōu)選以干燥形式(比如凍干粉末)提供和儲 存所述組合物。此粉末可以在施用之前用合適的液體栽體重構(gòu)。所述粉末 以及任選地所述液體載體可以是藥物試劑盒的一部分。


圖1顯示了在7天處理之后的大鼠的脊髓損傷，所述處理分別采用安 慰劑(a)、具有低粘度并無粘彈性表現(xiàn)的組合物(b)以及含有一部分以持 續(xù)釋放形式納入的活性化合物和第二部分以立即釋放形式納入的活性化 合物并具有高粘度和粘彈性表現(xiàn)的本發(fā)明組合物(c)。
具體實施方式
本發(fā)明提供了用于胃腸外施用的包含選自生理上可接受的鐵螯合劑的 活性化合物的藥物組合物。至少一部分的所述活性化合物以持續(xù)釋放形式 納入。所述組合物還包含第二部分的以立即釋放形式納入的所述活性化合 物。在另一個實施方案中，所述組合物進一步的特征在于其在室溫下的高 粘度和粘彈性。動態(tài)粘度是常用的粘度形式，常常只是簡化成粘度。單位是SI單位帕斯卡秒(Pas)或泊(P)。觸變性流體在比與剪切應變速率變化相關(guān)的時間更長的時間內(nèi)對剪切 應變速率表現(xiàn)出時間依賴的響應。觸變性流體在被搖動時會液化，然后在 停止時固化(或不固化)。通過旋轉(zhuǎn)流變儀如ARES-AR流變儀測量和測定粘度、粘彈性和觸變 4亍為的方法在例如Alfred N. Martin 、 James Swarbrick和Arthur Cammerata的Physical Pharmacy中作了詳細描述。S. R. van Tomme等描 述了可用于本發(fā)明的測量流變性質(zhì)粘度的方法(Biomaterials 26 (2005)， 2129-2135)。各公開內(nèi)容通過參考并入本文。在另一方面，提供了一種藥物組合物，其可通過包括形成持續(xù)釋放顆 粒的液體或皿樣水懸液的方法而得到，所述持續(xù)釋放顆粒栽有選自生理 上可接受的鐵螯合劑的活性化合物。所述方法進一步的特征在于不存在從 所述載藥的持續(xù)釋放顆粒中除去未納入所述持續(xù)釋放顆?；蛭磁c所述持 續(xù)釋放顆粒結(jié)合的溶解的活性化合物的步驟。如本文中所用的，活性化合物是可用于診斷、預防或治療機體的疾病、 癥狀及其它病況或用于影響機體功能的化學物質(zhì)或生物物質(zhì)或物質(zhì)混合 物。本發(fā)明組合物包含至少一種、任選兩種或更多種的這些活性化合物。 其它可用作活性化合物的同義詞的表述是藥物、藥物物質(zhì)、活性成分、活 性劑等。所述活性化合物，或者如果存在超過一種活性化合物，則所述活性化 合物中的至少一種是生理上可接受的鐵螯合劑。生理上可接受主要是指所 述鐵螯合劑就期望用途而言是安全的和可耐受的。這并非意味著所述化合 物沒有副作用，而是所述副作用相對于患者可從該化合物獲得的益處而 言，表現(xiàn)為可接受的。螯合試劑或螯合劑是其分子能與伴侶分子形成復合物(比如螯合物)的物質(zhì)。鐵螯合劑尤其能螯合鐵離子-常常也能螯合其它金屬離子-由此 降低鐵的活性。例如，鐵螯合劑比如去鐵敏可用于減少鐵中毒事件中鐵的 毒性。有幾種鐵螯合劑是已知的并已被建議或用于治療目的。例如，所述鐵螯合劑可選自脯氨it^-4-羥化酶的抑制劑；N-草酰甘氨酸；吡咬衍生物， 比如5-芳基^i^J^衍生物或5-芳基氨曱?；苌铮?-羧酸酯/鹽，2，5 二 羧酸酯/鹽、其乙酯或乙酰胺或-5-?；酋０?，2,4 二羧酸酯/鹽、其乙酯或 乙酰胺或二曱氧基乙酰胺；3,4聯(lián)吡啶，比如5 ^J^-6-(lH)-酮、1,6-二氫-2-甲基-6-氧代-5-腈；2，2，-聯(lián)吡咬，比如5，5，-二羧酸或其藥學上可接受的鹽、 4，4'-二羧酸乙酯或乙酰胺；3，4'-二羥基苯甲酸酯/鹽，比如二乙酯；脯氨酸 及其結(jié)構(gòu)和功能類似物；p-氛基丙腈；去鐵敏；地拉羅司；蒽環(huán)類；2，7，8-三 羥基蒽醌類，菲布他丁(fibrostatin)-C;闊馬酸或其藥學上可接受的鹽；和 5-氧雜脯氨酸。近來，發(fā)現(xiàn)鐵螯合劑可用于治療神經(jīng)元損傷和支持神經(jīng)元再生。認為 鐵螯合劑在此治療適應癥中的有益效果與其抑制或延遲瘢痕形成的能力 有關(guān)。目前進一步推測鐵螯合劑對瘢痕形成的抑制作用可以通過抑制^^、 形成中所涉及的鐵依賴性酶、尤其是抑制脯氨跣基-4-羥化酶來介導。鐵螯 合劑用于治療神經(jīng)元損傷的用途在例如WO 98/51708中〃>開，其教導通過 參考全部并入本文。在一個優(yōu)選的實施方案中，所述鐵螯合劑是去鐵敏或其鹽、衍生物、 異構(gòu)體或溶劑化物。在另一個優(yōu)選的實施方案中，所述鐵螯合劑是地拉羅 司或其鹽、衍生物、異構(gòu)體或溶劑化物。地拉羅司是4-[3，5-雙(2-羥基苯 基)-lH-l,2,4-三哇-l-基苯甲酸。去鐵敏(N-5-(3-[(5-tJ^戊基)-羥基氨甲酰 基-丙酰氨基)戊基-3-([5-(N-羥基乙酰氨基)-戊基-氨甲酖基)-丙酖基異羥 肟酸)具有多個羰基和羥基，提供了與F^+中的電子配位的電子。所述化合 物以一比一的比率螯合鐵。去鐵敏與二價離子比如Fe"的親和性顯著更低。(單)曱烷磺酸去鐵敏也稱為甲磺酸去鐵敏，可以以產(chǎn)品Desferaf的 形式得到，用于治療慢性鐵過載和在不能耐受靜脈切開術(shù)的患者中與遲發(fā) 性皮膚卟啉病相關(guān)的鐵過載，所述慢性鐵過載例如在伴隨病癥不包括靜脈 切開術(shù)的患者中輸血性含^bfc黃素沉著癥、重癥地中海貧血、鐵粒幼紅細 胞性貧血、自身免疫性溶血性貧血、以及其它慢性貧血、特發(fā)性(原發(fā)性) 血色素沉著癥的慢性鐵過栽。此外，去鐵敏被指明用于治療急性鐵中毒、具有鋁相關(guān)骨病的晚期腎衰竭患者中的慢性鋁過載、透析性腦病或鋁相關(guān) 性貧血。優(yōu)選地，選擇曱烷磺酸去鐵敏作為本發(fā)明的鐵螯合劑。還優(yōu)選去鐵敏的其它鹽，比如鹽酸去鐵敏(desferrioxamine chloride )、碌酸去l5^敏、硫 酸去鐵敏、曱磺酸去鐵敏、正癸烷磺酸去鐵敏和恩波酸去鐵敏 (desfeirioxamine embonate )。甲烷磺酸去鐵敏是非常親水性的、高度水溶性的和低脂溶性的。其在 酸性水溶液中是相當不穩(wěn)定的。在人類中，在肌肉內(nèi)注射后，其在血流中 的^J現(xiàn)半衰期起初為約2.4小時，末期半衰期為約6小時。其口服施用后 吸收差，表現(xiàn)為口服生物利用度僅為約2%。如果選擇曱烷磺酸去鐵敏去鐵敏作為鐵螯合劑，則其在本發(fā)明組合物中的含量優(yōu)選為至少約o.:r/。(w/w)，比如約o.iy。(w/w)到約so。/。(w/w)。更優(yōu)選地，其為至少約1% (w/w)，比如約1% (w/w)到約30Vo (w/w)。另 一個本發(fā)明優(yōu)選的含量是至少5% (w/w)，比如約5到約25% (w/w)，以及 例如約20% (w/w)。任選地，所述組合物可包含一種或更多種其它的活性成分。如果存在 另外的活性化合物，優(yōu)選所述其它的化合物選自膠原合成抑制劑、與膠 原IV有親和力的抗體、層粘連蛋白和/或巢蛋白(entactine);刺激神經(jīng)組織 生長的化合物、來自SDF-1家族的趨化因子、尤其是SDF-1y。這些化合 物可具有產(chǎn)生與鐵螯合劑效果相似、互補或協(xié)同作用的潛能，相應的藥物 組合可用于例如治療神經(jīng)組織損傷，這也是本發(fā)明組合物的一個優(yōu)選用 途。所述組合物適于胃腸外施用。本文中使用的胃腸外施用包括任何侵入 性的施用途徑，比如真皮下、真皮內(nèi)、皮下、肌肉內(nèi)、局部、腫瘤內(nèi)、腹 膜內(nèi)、組織間隙、損傷內(nèi)、靜脈內(nèi)、動脈內(nèi)、神經(jīng)內(nèi)、脊柱內(nèi)、鞘內(nèi)、或 髓內(nèi)施用。此外，可以通過注射、輸注、插入或;tt^進行施用。施用本發(fā) 明組合物的一個優(yōu)選方式是通過注射到神經(jīng)組織內(nèi)，比如損傷內(nèi)、神經(jīng)內(nèi)、 脊柱內(nèi)、鞘內(nèi)或髄內(nèi)注射。至少一部分的納入到所述組合物中的鐵螯合劑和任選的全部所述鐵螯 合劑處于持續(xù)釋放形式。更優(yōu)選地，所述處于持續(xù)釋放形式的部分少于鐵 螯合劑的總納入劑量。本文中的持續(xù)釋放理解為任何形式的緩慢釋放，也常被稱為控制釋放、延長釋放、延期釋放、延遲釋放等。藥物釋放與時間 的關(guān)系曲線可以是線性的或非線性的，比如在釋放階段的開始時較快，在 快結(jié)束時較慢，反之亦然。處于持續(xù)釋放形式是指所W目應部分的鐵螯合劑以施用后緩慢釋放的 方式配制和/或加工?？梢酝ㄟ^通常已知的配制方法和技術(shù)實現(xiàn)所述持續(xù)釋 放的性質(zhì)， 一些配制方法和技術(shù)將在下文進一步描述。在一個優(yōu)選的實施方案中，所述處于持續(xù)釋放形式的鐵螯合劑在施用后經(jīng)至少約24小時的時期從所述組合物中釋放。更優(yōu)選地，所述持續(xù)釋放 的劑量部分經(jīng)至少約48小時、或在至少約72小時的時期釋，放。如果所述 組合物旨在治療損傷的神經(jīng)，以及如果旨在采用單次施用來達到所期望的 治療效果，則優(yōu)選所述鐵螯合劑經(jīng)至少約4天、或至少約5天或甚至一周 的時期釋放，這取決于可變因素比如損傷大小和每個損傷的注射位點數(shù) 目。在另一些實施方案中，釋放特性適于提供經(jīng)至少約2周、3周、或甚 至4周的時期的釋放。不希望受理論限制，認為所述鐵螯合劑的持續(xù)釋放 可以或者應該適于實現(xiàn)瘢痕形成的足夠延遲，而不會抑制在所述損傷處的 神經(jīng)組織的再生和生長。所述鐵螯合劑的釋放不易在體內(nèi)測定。因此，所述優(yōu)選的藥物釋放持 續(xù)時間指通過合適的方法在37'C使用合適的介質(zhì)(比如緩沖劑或注射用 水)在體外測定的釋放特性。例如，以下方法可用于測定從含有持續(xù)釋放 顆粒的組合物中的體外釋放以18 g注射用水稀釋2g所述組合物的樣品。通過使用6倍(120 g) 量的注射用水進行滲濾洗滌所得的^t體,結(jié)果去除約99.5%的游離的(即 未與顆粒結(jié)合的或未包封的)活性成分。在所洗滌的^t體中，取出10 ml， 裝入小瓶中并在37'C培育。從小瓶中取樣并分析游離的以及與顆粒結(jié)合的 或包封的活性成分。本發(fā)明人還已發(fā)現(xiàn)，除了以持續(xù)釋放形式提供一部分鐵螯合劑以外， 還以立即釋放形式提供一些活性化合物是非常有益的。本發(fā)明上下文中的 立即釋放應理解為在施用的最初12小時內(nèi)的釋放，更優(yōu)選在施用的最初6 小時內(nèi)的釋放，或甚至是在施用的最初2小時內(nèi)的釋放。特別地，如果活 性化合物的一部分溶于所施用組合物的相關(guān)水性液相中，并且未被持續(xù)釋 放顆粒(比如脂質(zhì)體)包封或未與持續(xù)釋放顆粒(比如脂質(zhì)體)結(jié)合，則 該部分處于立即釋放形式。如果包含載有活性化合物的持續(xù)釋放顆粒的組合物是不經(jīng)任何從負載顆粒中去除未包封于該顆粒中或未與該顆粒結(jié)合的活性化合物的步驟(比如通過重復的洗滌和離心、過濾、透析或色i普) 而制備的，則此處于立即釋放形式的活性化合物的部分通常是存在的。作 為替代方案，可以通過將活性化合物溶于已包含載有活性化合物的持續(xù)釋 放顆粒的組合物中，或通過使載有活性化合物的持續(xù)釋放顆粒與所述活性 化合物的溶液組合，得到包含立即釋放部分的組合物。為避免疑義，為濃 縮所述組合物和/或所述包含于其中的持續(xù)釋放顆粒的目的進行的單一離 心步驟并不代表去除或分離溶解的活性化合物的步驟。才艮據(jù)一個實施方案，所述組合物包含至少約5% (w/w)且至多約80% (w/w)的處于持續(xù)釋放形式的所納入活性化合物，并因此包含至少約20% (w/w)且至多約95。/。 (w/w)的處于立即釋放形式的所納入活性化合物。在 另一個實施方案中，所述持續(xù)釋放部分對所述立即釋放部分的重量比為至 多約l:l。優(yōu)選實施方案的另一個特征是調(diào)整所述組合物以在室溫(優(yōu)選約 20。C)下具有粘彈性。粘彈性是水膠體形成各種強度^的能力，這取決 于水膠體的結(jié)構(gòu)、濃度、離子強度、pH和溫度?？赏ㄟ^測定振蕩力對所 述材料運動的影響來檢測復合粘度和皿行為。不希望受理論限制，認為本發(fā)明組合物的粘彈性和高粘性會導致在施 用位點的停留時間延長，這可以增強所述組合物的持續(xù)有效性。因此，至 少一些所述活性劑的持續(xù)釋放和在注射位點的粘性導致的停留在實現(xiàn)待 治療組織部位(比如受損的神經(jīng)或脊髓)內(nèi)的長期治療活性上可以是協(xié)同 作用的。優(yōu)選所述i且合物的動態(tài)粘度相應地為室溫下至少約5 mPa*s，或至少 約10 mPa*s或甚至20 mPa*s。在另一些實施方案中，所述組合物的動態(tài) 粘度相應地為至少約50 mPa*s，或至少約100 mPa*s。所述組合物還配制為粘彈性凝膠，所述粘彈性凝膠是指粘性如此之高 以至如果僅使用低剪切力，則所述材料的行為類似于彈性固體，而當所述 剪切力超過定義為屈服點的閾值時，所述材料的行為類似于粘性流體。凝 膠是具有有限的(通常是相當小的)屈月艮應力的半固體體系?？赏ㄟ^調(diào)整所述組合物以具有剪切稀化行為而潛在地進一 步增強粘度 增加的有益效果。剪切稀化是指材料在剪切應力增加時粘性變小。剪切稀化有時還稱為假塑性行為。為施用的目的，粘性流體或在屈服點以上的凝 膠的剪切稀化行為是相當有用的，因為這意味著所述組合物可相當容易和 快速地注射而不必使用太大的力。已知在水性體系中的剪切稀化行為孝皮某 些賦形劑所誘導，所述賦形劑比如(任選交聯(lián)的)的聚丙烯酸酯、硅酸鎂 鋁或藻酸鹽。在另一方面，所述組合物優(yōu)選是剪切稀化的且同時是觸變的，這意味 著在應用剪切應力后需要一些時間來恢復最初的粘性或凝膠強度。這種行 為可以(也不希望受理論限制)例如通過利用帶相反電荷的組分(例如分 子、膠體、顆粒等)之間的靜電相互作用來實現(xiàn)。例如，陽離子離子螯合 劑鹽比如甲磺酸去鐵敏可與帶負電荷的顆粒比如帶負電荷的脂質(zhì)(例如磷 脂酖甘油)組合。認為在施加剪切應力時可以至少部分地破壞去鐵敏和脂 質(zhì)或脂質(zhì)顆粒之間的靜電相互作用，并認為在除去剪切應力后從流動狀態(tài) 的回復允許相互作用的再次形成，導致粘度增加。此外，這種行為可用于 使在靜止狀態(tài)下高粘性的或甚至為皿樣的、在施用位點具有長停留時間 但仍可良好注射(即相對易于注射)的組合物的施用成為可能。根據(jù)本發(fā)明，至少一部分劑量的納入所述組合物中的鐵螯合劑處于持 續(xù)釋放形式。對制劑專家而言，已知許多技術(shù)用于配制處于持續(xù)釋放形式 的鐵螯合劑。例如，配制為凝膠可提供所述活性化合物的持續(xù)釋放。過去 已描述了各種類型的可注射凝膠組合物，可以使用并調(diào)整這些組合物以納 入所述離子螯合劑。在一個已知的概念中，設計高剪切稀化和觸變性的聚合物凝膠制劑。 通過在施用前施加剪切力，顯著降低這些凝膠的粘度，從而允許以相對小 的針注射，而所述凝膠強度在施用后緩慢回復。根據(jù)另一個概念，配制在施用后響應其環(huán)境的變化(比如pH、溫度、離子強度)而形成凝膠的液 體組合物。根據(jù)第三個方法，注射含有非水溶劑的液體聚合物制劑。施用 時，溶劑從注射位點擴散開，這導致聚合物顆粒的沉淀或凝膠的形成。在 A. Hatefi et al., Journal of Controlled Release 80 (2002), 9-28中已經(jīng)詳細討 論了生物可降解的可注射凝膠，該文獻通過參考并入本文中。另一種類型的可注射凝膠可基于賦形劑乙酸異丁酸蔗糖而配制。相應 的賦形劑和配方技術(shù)稱為SaberTM。所述組合物最初含有少量藥學上可接 受的有機溶劑，由此所述組合物以液體狀態(tài)施用。施用后，所述組合物中 的溶劑被迅速吸收，所述組合物l^固化成皿。則所納入的鐵螯合劑主要是由于活性化合物在所述凝膠內(nèi)的緩慢擴散而 緩慢釋放。在所述活性化合物和所述凝膠或其任意組分之間的其它相互作 用會進一步延緩所述鐵螯合劑的釋放。根據(jù)另 一個實施方案，將至少 一部分的所述離子螯合劑配制于持續(xù)釋 放顆粒中、包封于持續(xù)釋放顆粒中、或者與持續(xù)釋放顆粒結(jié)合。優(yōu)選地，該劑量分數(shù)小于總納入劑量，比如總劑量的約5至約80% (w/w)。在另一 些實施方案中，納入持續(xù)釋放顆粒中或與持續(xù)釋放顆粒結(jié)合的劑量分數(shù)是 約10到約50% (w/w)，或約15到約30% (w/w)。本文中使用的顆粒定義為不論其形狀、組成或內(nèi)部形態(tài)的小的固體物、 半固體物或液體材料。對于低膠體尺寸范圍內(nèi)的顆粒而言，清楚地區(qū)分固 體、液體和半固體狀態(tài)可能甚至是不可能的或不合適的?？捎米鞅景l(fā)明組 合物中的持續(xù)釋放顆粒的顆?？梢允且韵碌囊环N或更多種聚合物的、脂 質(zhì)的或類脂的微顆?；蚣{米顆粒、脂質(zhì)體、非離子表面活性劑嚢泡 (niosome，乙IL^化脂肪醇類構(gòu)成的脂質(zhì)體)、膠束、M束和交,束。本文中使用的微顆粒定義為不論其組成、幾何形狀或內(nèi)部結(jié)構(gòu)的重量 平均直徑或體積平均直徑在約0.1 fim到約1,000 nm、更通常在約1 jun到 約500jim范圍內(nèi)的基本上為固體或半固體的顆粒。例如，球形微顆粒(常 稱為微球)包括在術(shù)語孩i顆粒內(nèi)，還包括嚢結(jié)構(gòu)，比如微嚢。還存在幾種 其它的同義詞描述如上定義的微顆粒。納米顆粒通常被理解為數(shù)目、重量或體積平均直徑在約1到約1,000 nm范圍內(nèi)的任何顆粒。同樣，4吏用該術(shù)語而不論其組成、幾何形狀、或 內(nèi)部結(jié)構(gòu)。納米球和納米嚢是納米顆粒的實例。脂質(zhì)顆粒代表一類以其組成為特征的顆粒。才艮據(jù)其大小，脂質(zhì)顆粒還 可分為微顆粒和納米顆粒。脂質(zhì)顆粒不要求特定的形狀。脂質(zhì)體代表一類脂質(zhì)顆粒。更準確地，脂質(zhì)體是具有不同大小和結(jié)構(gòu) 的人工脂質(zhì)雙層嚢泡。單層嚢泡是由封閉含水空間的單一脂質(zhì)雙層限定的 脂質(zhì)體。相比之下，寡層嚢泡或多層嚢泡包含數(shù)個膜。通常，所述膜大概 3-5nm厚并由兩親性脂質(zhì)組成，比如天然或合成來源的磷脂。任選地，通 過引入其它脂質(zhì)(比如甾醇或膽酸衍生物)來修飾所述膜的性質(zhì)。具有基 于具有低的相轉(zhuǎn)變溫度(即低于體溫)的磷脂的特別柔性的膜的脂質(zhì)體有時稱為傳遞體(transfersome )。根據(jù)其直徑和雙層膜的數(shù)目，脂質(zhì)體還可以分為多層嚢泡 (multilamellar vesicle (MLV)，兩個或更多個雙層，通常超過約150-200 nm)、小單層嚢泡(small unilamellar vesicle (SUV ),—個單一的雙層,通常 小于約100nm)、多泡狀嚢泡(multivesicular vesicle (MVV)，在較大的嚢 泡內(nèi)有若干泡結(jié)構(gòu))和大單層嚢泡(large unilamellar vesicle (LUV), —個 單一的雙層，通常大于約100nm)'在一個優(yōu)選的實施方案中，所述活性成分被包封于M在水相中的形 成嚢泡的脂質(zhì)中或與其結(jié)合，所述水相呈粘彈性皿的形式。應當注意， 并不需要任何或所有形成嚢泡的脂質(zhì)實際上都以脂質(zhì)體的形式存在于凝 膠型組合物中。例如，所述脂質(zhì)可形成除脂質(zhì)體以外的其它膠體結(jié)構(gòu)，所 述其它膠體結(jié)構(gòu)也能對與這些結(jié)構(gòu)結(jié)合的那些活性化合物分子產(chǎn)生持續(xù) 釋放作用。任選地，皿型組合物也可以同時包含脂質(zhì)嚢泡和其它膠體結(jié) 構(gòu)。多種方法通常用于制備脂質(zhì)體和其它脂質(zhì)顆粒以及用于納入活性成 分，包括膜方法、超聲波處理、去污劑透析、乙醇注射、醚浸潰(e仇er infusion )、反相蒸發(fā)、擠出和高壓均質(zhì)化。這些方法、所得的產(chǎn)品及其性 質(zhì)在Kerby et al" Liposomes, in: Encyclopedia of controlled drug delivery, vol. 1, 461-492 (John Wiley & Sons, 1999)中作了詳細描述，其通過參考并 入本文。脂質(zhì)納米顆粒(常稱為固體脂質(zhì)納米顆粒(solid lipid nanoparticle， SLN))是沒有嚢泡結(jié)構(gòu)的膠體顆粒。它們基于脂質(zhì)或類脂賦形劑并且可以 負載各種親脂性的或水溶性差的活性化合物。用于制備這些顆粒的一種常 用方法是高壓均質(zhì)化。膠束、皿束和混合膠束是特別小的具有各種形狀、長度或直徑通常 為約5到約100 nm的膠體結(jié)構(gòu)，其通過兩親分子比如去污劑的結(jié)合而形 成。與脂質(zhì)體不同，這些結(jié)構(gòu)基于單層，所述單層較不穩(wěn)定并傾向于在稀 釋時分解.膠束可交聯(lián)形成穩(wěn)定的納米顆粒。關(guān)于膠束的詳細描述公開于 例如WO 02/085337和EP-A 730 860中，其教導通過參考并入本文。非離子表面活性劑嚢泡是與脂質(zhì)體類似的膠體結(jié)構(gòu)，除了嚢泡膜主要 由非離子兩親化合物而不是離子性組分組成以外。17優(yōu)選地，所述持續(xù)釋放顆粒(如果存在于本發(fā)明的組合物中的話)的平均直徑選自約50nm到約100fim，更優(yōu)選約100 rnn到約50 pm。除非 另外指出，本文中使用的平均顆粒直徑指通過激光衍射或光子相關(guān)光鐠法 或等效方法測量的樣品的數(shù)均直徑。如果選擇顆粒以提供至少一部分所述鐵螯合劑的持續(xù)釋放，則也優(yōu)選 這些顆粒^t在至少部分由水組成的液相中。除了水以外，所述液相可包 含其它的液體成分，比如一種或更多種藥學上可接受的溶劑，例如乙醇、 丙酮、甘油、丙二醇、聚乙二醇、乙酸乙酯、N-甲基吡咯烷酮、二甲基亞 砜或二甲基曱酰胺。然而，更優(yōu)選地，所述液體僅為水。另一方面，所述 水相可包含溶質(zhì)和任選的其它顆粒，比如溶解的活性成分、溶解的賦形劑、 或混懸的活性成分。在一個優(yōu)選的實施方案中，所述組合物包含任選地為脂質(zhì)體的脂質(zhì)顆 粒。這些脂質(zhì)顆粒優(yōu)選至少以其非聚集形式具有約100 nm到約10 nm的 平均直徑。在另一個實施方案中，其平均直徑小于約5pm。所迷脂質(zhì)顆粒優(yōu)選由兩親性脂質(zhì)組成或基于兩親性脂質(zhì)。磷脂是合適 的兩親性脂質(zhì)的實例。可用于組成所述脂質(zhì)顆粒的磷脂包括例如卵磷脂、 水合卵磷脂、磷脂酰^、水合磷脂酰M、 二肉豆蔻?；字、 二月桂St^磷脂酰膽堿、二棕櫚?；字蠱、 二硬脂St^磷脂酰膽堿、 二油酰基磷脂酰膽堿、二棕櫚?；字Ｒ掖及?、l-肉豆蔻S5^-2-棕櫚酰 基l-棕櫚SL^-2-肉豆蔻?；字Ｄ憠A、磷脂酖膽堿、磷脂酰甘油、二油 酰^^磷月旨酰甘;由、二棕桐]St^磷月旨酸(dipalmitpyl phosphatidic acid)和 二棕櫚酰基磷脂酸。卵磷脂是通常由天然來源(比如蛋黃或大豆)提取的 磷脂的混合物；其通常還含有相當量的非磷脂組分。磷脂酰M通常為從 主要含有磷脂酰膽喊的卵磷脂提取的磷脂級分，如果其源自蛋黃，則通常含有大量的l-棕櫚酰基-2-油g5^磷脂酰膽堿。在另一個優(yōu)選的實施方案中，所述脂質(zhì)顆粒包含至少一種兩性離子的 磷脂和至少一種帶負電荷的磷脂。如果所述鐵螯合劑是去鐵敏、或去鐵敏 的鹽如甲磺酸鹽，則這是特別有用的。有用的兩性離子磷脂是例如磷脂酰 膽堿或磷脂酰膽堿的混合物。還是作為舉例，有用的帶負電荷的磷脂是磷 脂酰甘油或磷脂耽甘油的混合物。所述兩性離子和所述帶負電荷的磷脂的 比率可任選地選自約1:9到約9:1。更優(yōu)選地，其為約2:8到約8:2， 或者才艮據(jù)另一個實施方案，為約4:6到約6:4，比如1 : 1。不希望受理論限制，認為所述帶負電荷的磷脂可與所述帶正電荷的去 鐵斜目互作用，可能有助于所述持續(xù)釋放性質(zhì)，并可能也增加所述組合物 的粘性以及提供剪切稀化和/或觸變流變行為。應選擇所述組合物中顆粒的含量，以足夠用于結(jié)合、包封或納入存在 于所述組合物中的至少一部分鐵螯合劑，以提供持續(xù)釋放性質(zhì)。根據(jù)所述 顆粒的大小、結(jié)構(gòu)和組成，它們還可具有各種應考慮到的負載所述活性化合物的能力。通常，所述顆粒代表約0.1。/。到約35。/。(w/w)的所述組合物， 優(yōu)選約10 %到約30% (w/w),比如約15%、約20%或約25% (w/w)。如 果所述顆粒AJf旨質(zhì)或磷脂顆粒，和/或如果所述鐵螯合劑是去鐵敏或其鹽， 則這是特別優(yōu)選的。在一個目前優(yōu)選的具體實施方案中，所述組合物是含有約5%到約 30% (Ww)的去鐵敏鹽和約1%到約20% (w/w)的具有約200 nm到約5 平均直徑的磷脂顆粒的水性組合物，其中至少一部分所述去鐵敏鹽與所述 磷脂嚢泡結(jié)合，并且其中所述磷脂囊泡包含兩性離子的磷脂(比如磷脂酰 膽堿)和帶負電荷的磷脂(比如磷脂酰甘油)。取決于所述鐵螯合劑的性質(zhì)和所述顆粒的性質(zhì)，所述顆粒的藥物負載 量可以在約1%到約50% (w/w)的范圍內(nèi)。特別有用的范圍是約5%到約 25% (w/w)，或約10%到約20% (w/w)，尤其是如果所述顆粒;O旨質(zhì)顆粒 和/或如果所述鐵螯合劑是去鐵敏或其鹽的話。在本文中，所述藥物負栽量指相對于所述顆粒重量的被包封或納入到 所述顆粒中的、或與所述顆粒結(jié)合的以重量計的活性化合物的量。它可通 過將所迷顆粒從其所分散的液相中分離(比如通過溫和離心、色譜、過濾、 滲濾、切向流過濾、或透析)和分析在所述顆粒中和在所述液相中的活性 成分的量而測定。當本發(fā)明組合物旨在用于胃腸外施用，并且尤其用于向神經(jīng)組織內(nèi)注 射，比如用于損傷內(nèi)、神經(jīng)內(nèi)、脊柱內(nèi)、鞘內(nèi)或髓內(nèi)施用時，必要的是所 述組合物是無菌的并且不含內(nèi)毒素。另外，優(yōu)選所述組合物具有生理上可 接受的pH和重量摩爾滲透壓濃度。根據(jù)所選擇的鐵螯合劑，可將所述pH 調(diào)節(jié)為約3到約8。只要可能，就應將pH調(diào)節(jié)在約4到約7.5的范圍內(nèi)， 所述范圍也是在選擇去鐵敏作為鐵螯合劑的情況下的優(yōu)選范圍?？赡懿荒軐⑺鲋亓磕枬B透壓濃度調(diào)節(jié)至生理值，尤其是如果需要高濃度的高滲透活性的鐵螯合劑比如去鐵敏或其鹽的話。另一方面，出于耐受性原因，目前優(yōu)選重量摩爾滲透壓濃度不超過約1000mOsmol/kg，比 如約400到約800 mOsmol/kg。另一方面，目前還不知道哪些重量摩爾滲 透壓濃度對某些施用方式是可耐受的，尤其是損傷內(nèi)、神經(jīng)內(nèi)、脊柱內(nèi)、 鞘內(nèi)施用方式，并且有可能發(fā)現(xiàn)甚至高于1000 mOsmol/kg的重量摩爾滲 透壓濃度也是可接受的。所述組合物可包含優(yōu)選選自用于胃腸外劑型的藥學可接受賦形劑的一 種或更多種其它賦形劑。例如，所述組合物可包含一種或更多種pH調(diào)節(jié) 劑、滲透劑(osmotic agent )、增粘劑、^!^形成劑、抗氧化劑、自由基清 除劑、防腐劑、表面活性劑、穩(wěn)定劑、溶劑、增容劑(bulking agent )、冷 凍干燥保護劑。這些賦形劑的實例對于本發(fā)明所屬技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員而 言通常是已知的。優(yōu)選的其它賦形劑包括pH調(diào)節(jié)劑，尤其是選自堿和堿性緩沖鹽、以 及增粘劑。如果需要，其它賦形劑中還優(yōu)選的是穩(wěn)定劑、冷凍干燥保護劑 和增容劑。在需要穩(wěn)定劑以實現(xiàn)所述組合物的所希望的產(chǎn)品性能或*期，或使 得所述組合物可被冷凍千燥以增加存儲時間的情況下，這些穩(wěn)定劑可選 自糖或糖醇，比如乳糖、葡萄糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇；或 多糖比如右旋糖酐或葡聚糖；或天然或合成的氨基酸比如甘氨酸；或包括 寡肽和多肽的水溶性肽。應當注意，這些穩(wěn)定劑中的一些也具有冷凍干燥 組合物中增容劑和冷凍干燥保護劑的作用?？赏ㄟ^各種方法制備本發(fā)明的組合物。如果將所述組合物設計為聚合 物皿，則其可例如在鐵螯合劑和任選的其它賦形劑的存在下，通過將所 述各聚合物(比如丙交酯-乙交酯共聚物)與合適的藥學上可接受的有M 劑組合而制備，所述合適的藥學上可接受的有機溶劑比如節(jié)醇、苯甲酸卡 酯、甘油二乙酸酯、三丁酸甘油酯、檸檬酸三乙酯、檸檬酸三丁酯、乙?；勖仕崛阴?、乙絲檸檬酸三丁酯、甘油三乙酯(triethylglyceride)、 磷酸三乙酯、鄰苯二曱酸二乙酯、酒石酸二乙酯、聚丁烯、甘油、乙二醇、 聚乙二醇、辛醇、乳酸乙酯、丙二醇、碳酸亞丙酯、碳酸亞乙酯、丁內(nèi)酯、 環(huán)氧乙烷、環(huán)氧丙烷、N-曱基-2-吡咯烷酮、2-吡咯烷酮、甘油縮曱醛、乙 酸甲酯、乙酸乙酯、甲基乙基酮、二甲基曱酰胺、二甲基亞砜、四氫呋喃、 己內(nèi)酰胺、癸基甲基亞砜、油酸、l-十二烷基氮雜環(huán)庚-2-酮、或其混合物?？勺⑸淠z的制備進一步描述于A. Hatefi et al.， Journal of Controlled Release 80 (2002)， 9國28中。如果設計所述組合物以包含聚合物持續(xù)釋放微顆粒，比如丙交酯-乙交 酯共聚物或類似的疏水性生物可降解微顆粒，那么所述組合物可例如通過 已充分描述的基于乳劑的形成微顆粒的方法而制備，比如溶劑蒸發(fā)或溶劑 萃取。優(yōu)選地，水/油/水型的雙乳劑由包含所述鐵螯合劑和任選的其它賦形劑的內(nèi)7jc相、包含一種或更多種聚合物和任選的其它賦形劑的有^M目以 及通常含有至少一種表面活性劑或聚合物穩(wěn)定劑的連續(xù)水相制備。1^從 該雙乳劑的有W目中通過萃取和/或蒸發(fā)除去有機溶劑，致使所述聚合物固 化成微顆粒。制備聚合物微顆粒的替代方法包括噴霧干燥、噴霧冷凍干燥、超臨界 流體處理、噴霧冷凝、靜電組裝、乳液聚合、以;M目分離或凝聚。制備微顆粒的方法進一步詳細描述于E. Mathiowitz et al.， Microencapsulation, in: Encyclopedia of Controlled Drug Delivery (ed. E. Mathiowitz)， Vol. 2, p.493-546, John Wiley & Sons (1999)中，其通過參考并入本文。所述微顆粒可以與額外量的活性成分(優(yōu)選與納入到所述微顆粒中的 活性成分相同，但也任選不同的化合物)組合，與水性栽體(所述顆?；?懸于其中并施用)組合以及任選地與其它賦形劑組合。如果所述鐵螯合劑 是去鐵敏，并且如果所述微顆粒由在原位降解成酸性反應產(chǎn)物的聚合物如 聚丙交酯、聚乙交酯、或丙交酯-乙交酯共聚物制備，則可優(yōu)選納入至少一 種調(diào)節(jié)pH的賦形劑或緩沖賦形劑，以避免所述酸不穩(wěn)定的活性化合物降 解。各種用于制備脂質(zhì)顆粒(包括脂質(zhì)體)的方法也是已知的，比如那些 描述于Kerby et al.， Liposomes, in: Encyclopedia of controlled drug delivery, vol. 1， 461-492 (John Wiley & Sons, 1999)中的方法，其通過參考并 入本文，根據(jù)本發(fā)明，優(yōu)選的是，如果設計所述組合物以包含脂質(zhì)顆粒或脂質(zhì) 體作為持續(xù)釋放顆粒，則所述組合物通過組合一種或更多種形成顆粒的脂 質(zhì)、所述鐵螯合劑以及水，任選地在其它活性成分和/或非活性成分的存在 下而制備，以形成水性分散體。隨后，可使用合適的均質(zhì)化工具比如111&3加"3乂@或高壓均質(zhì)機將所述^t體均質(zhì)化。所述均質(zhì)化優(yōu)選在升高 的溫度下進行，比如在高于所選擇的用于形成顆粒的一種或更多種脂質(zhì)的相轉(zhuǎn)變溫度范圍或在高于其熔融溫度范圍的溫度下。因此，可以根據(jù)一種或更多種脂質(zhì)的選擇而選擇均質(zhì)化溫度，以確保 這些脂質(zhì)處于流體或液體狀態(tài)而不是固體狀態(tài)。通常，所述溫度將處于約0。C到約75。C的范圍內(nèi)，所述范圍將覆蓋大多數(shù)目前看來對于胃腸外施用 是藥學上可接受的磷脂。更優(yōu)選地，所述溫JLA約20'C到約70'C。如果設計所述脂質(zhì)顆粒以納入或結(jié)合僅一部分所述鐵螯合劑，則所述 組合物中剩余部分的活性化合物溶解于或者溶解和混懸于所述顆粒分散 體的液體連續(xù)相中。由于所述組合物旨在用于胃腸外施用，因此其必須以無菌形式提供。 這可通過無菌處理，使用預先滅菌的設備、成分和容器來實現(xiàn)。作為替代 方案，將所述組合物在最終容器中滅菌，如果可行，則這是優(yōu)選的選擇方 案。如果加熱滅菌不可以，則優(yōu)選輻照滅菌。例如，可通過，輻照^:用至 少約15 kGy、優(yōu)選不超過約35 kGy、比如約25 kGy的劑量將所述組合物 滅菌。出于產(chǎn)品穩(wěn)定性原因，當在室溫下或在制冷下(比如在2。C到約8'C) 存儲所述組合物時，實現(xiàn)商業(yè)上可接受的保存期可能是不可行的。在此情 況下，可在例如-20。C的溫度下冷凍并存儲所述組合物。在另一個優(yōu)選的實施方案中，將所述組合物設計為在施用前重構(gòu)為液 體組合物的粉末。該選擇方案也可克服與即用型組合物的有限穩(wěn)定性相關(guān) 的問題。本文中使用的粉末是由混懸在空氣或另一種氣相中的很多微細顆 粒組成的基本上干燥的材料。該粉末可能團聚成多孔性固體形式，對于凍 干粉來說情況常常如此。在此形式下，其不再自由流動，但仍然是如本文 所定義的粉末。為制備粉末，可通過上述方法以液體或凝膠樣形式制備所述組合物， 然后干燥，比如通過冷凍千燥。根據(jù)此實施方案，所述組合物還包含至少 一種用作增容劑、冷凍干燥助劑、和/或穩(wěn)定劑的賦形劑看來是有用的。優(yōu) 選地，將所述至少一種賦形劑溶于所述組合物的連續(xù)液相中。所述賦形劑 優(yōu)選選自糖或糖醇，比如乳糖、葡萄糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇、 t 醇；多糖，比如右旋糖酐或葡聚糖；天然或合成的氨基酸，比如甘氨酸； 以及水溶性肽，包括寡肽和多肽，比如明膠。進一步優(yōu)選所述干燥步驟以以下方式進行殘留水含量小于約5%(w/w)，更優(yōu)選小于約3% (w/w)。在另一個實施方案中，所述殘留水含量 小于約2% (w/w)。這些殘留水含量可以通過選擇工藝^lfc (如干燥的溫度 或持續(xù)時間)來實現(xiàn)，這對于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言通常是已知的。
粉末可以作為藥物試劑盒的一部分提供。除了所述粉末以外，這樣的 試劑盒還可包含用于由所述粉末重構(gòu)可注射組合物的無菌液體。
如本文以上所述，本發(fā)明組合物尤其可用于向受損或發(fā)炎的神經(jīng)組織 部位直接注射，比如損傷內(nèi)、神經(jīng)內(nèi)、脊柱內(nèi)、鞘內(nèi)和/或髓內(nèi)注射。這些 施用對于治療人或動物的與神經(jīng)外傷性癥狀和/或神經(jīng)變性癥狀相關(guān)的急 性或慢性的疾病和病癥而言是非常有前途的。這些疾病和病癥可與神經(jīng)元 的外傷性損傷或炎癥相關(guān)，任選地由軸突損傷、脊髓損傷、腦損傷、外周 神經(jīng)損傷、多發(fā)性石更化、中風和中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤的切除所導致。
在一個優(yōu)選的實施方案中，所述組合物用于治療脊髄或外周神經(jīng)損 傷。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，單次施用所述組合物(每處損傷)可足以提供所希望的在 足夠長時間里允許神經(jīng)生長和/或再生的瘢痕抑制作用。對于大的損傷而 言，選擇多于一個注射位點對于更好覆蓋整個損傷而言可能是有用的，這 仍被認為是根據(jù)本發(fā)明的僅一次施用。所述組合物的長期有效性是特別有 益的，因為通常不需要重復施用。
還已發(fā)現(xiàn)，可選擇施用的體積以增加治療的有效性。優(yōu)選地，以在所 述損傷體積的約30%到約150%的范圍內(nèi)的體積注射所述組合物。更優(yōu)選 地，所述注射體積為所述損傷體積的約50%到約100%,比如約7(T/。。為 實施本實施方案，必須估計或測量所述損傷的體積。 一個優(yōu)選的確定所述 損傷體積的方法是通it^共振成像。
實施例
通過以下的實施例，進一步說明本發(fā)明。
實施例1:甲磺酸去4^敏的粘性^J^樣組合物的制備
將甲磺酸去鐵敏(70 g)、卵磷脂酰膽堿(17.5 g)和卵磷脂酰甘油(17.5 g) 稱重并與注射用7JC(245 g)混合。將粗混合物在水浴中加熱至約60'C。隨后，
使用高速均質(zhì)機(111汁3加1 ^1@)將所述混合物均質(zhì)化。觀察到所述^t體在
外觀上是乳狀白色或近白色的。不進行除去任何未包封于所述磷脂或未與 所述磷脂結(jié)合的溶解的曱磺酸去鐵敏的洗滌或分離步驟。將所述均質(zhì)化的 ^t體填入6ml小瓶中并以鋁帽封口。隨后通過，輻照以25kGy的劑量將所述小瓶滅菌。
通過激光衍射(Malvern Mastersize,)對所述組合物的樣品進行分析， 表明平均粒徑為約70 jim。 pH為約4.9,重量摩爾滲透壓濃度為1005 mOsmol/kg。所述組合物是高度粘性的，其粘度為約65 mPa*s。
實施例2:甲磺酸去4^敏組合物的制備
根據(jù)實施例1制備包含脂質(zhì)顆粒的甲磺酸去鐵敏組合物，但是具有較 低含量的活性成分和不同比率(3:1)的兩種脂質(zhì)。同樣，不進行除去任何 未包封于所述磷脂或未與所述磷脂結(jié)合的溶解的曱磺酸去鐵敏的洗滌或 分離步驟。
實施例3:體內(nèi)有效性比較
使4只雌性Wistar大鼠(200-250 g遞受用斯考滕線刀(Scouten Wire knife )(Kopflnstruments)施加的限定性機械脊髓損傷。隨后，使用漢密爾 頓注射器(Hamilton syringe)將根據(jù)實施例1制備的20 pi體積的組合物 注射進每只大鼠的損傷處。
7天后將所述大鼠處死并檢查其損傷.所有經(jīng)過治療的大鼠均顯示 瘢痕形成受到抑制。在暴露于含有標記的膠原蛋白抗體的試劑時，在損傷 處未檢查到所述抗體的存在(參見圖3c )。相比之下，已接受沒有曱磺酸 去鐵敏的等效水性脂質(zhì)顆粒組合物的對照動物則已形成瘢痕，這可通過標 記的膠原蛋白抗體觀察到(參見圖3a)。通常，不進行治療時預期在約7 天內(nèi)形成叛痕。
權(quán)利要求
1.一種用于胃腸外施用的藥物組合物，其包含選自生理上可接受的鐵螯合劑的活性化合物，其中所述活性化合物的第一部分以持續(xù)釋放形式被納入，并且其中所述活性化合物的第二部分以立即釋放形式被納入。
2. —種用于胃腸外施用的藥物組合物，其包含選自生理上可接受 的鐵螯合劑的活性化合物，其中至少一部分的所述活性化合物以持續(xù)釋 放形式被納入，并且其中所述組合物在室溫下具有高粘度和粘彈性行 為。
3. 權(quán)利要求1或2的組合物，其中所述鐵螯合劑選自脯氨?；?4-羥化酶抑制劑、N-草酰甘氨酸；吡咬衍生物，比如5-芳基^^tJ^衍生物 或5-芳基氨甲St&衍生物，2-羧酸酯/鹽，2,5 二羧酸酯/鹽、其乙酯或乙酰 胺或-5-酰基磺酰胺，2,4 二羧酸酯/鹽、其乙酯或乙跣胺，或二甲氡基乙酰 胺；3，4聯(lián)吡咬，比如5 ^^-6-(lH)-酮、1,6畫二氫-2-甲基國6-氧代-5-腈；2,2'誦 聯(lián)吡啶，比如5，5'-二羧酸或其藥學上可接受的鹽，4，4，-二羧酸乙酯或乙酰 胺；3,4'-二羥基苯甲酸酯/鹽，比如二乙酯；脯氨酸及其結(jié)構(gòu)和功能類似物; P-氨基丙腈；去鐵敏；地拉羅司；蒽環(huán)類；2，7，8-三羥基蒽醌類，菲布他丁 -C;闊馬酸或其藥學上可接受的鹽；和5-氧雜脯氨酸。
4. 前述權(quán)利要求中任一項的組合物，其包含任選地選自以下的其 它活性化合物膠原蛋白合成抑制劑、與膠原蛋白IV有親和力的抗體、 層粘連蛋白和/或巢蛋白；刺激神經(jīng)組織生長的化合物、來自SDF-1家族的 趨化因子、尤其是SDF-1y。
5. 前述權(quán)利要求中任一項的組合物，其中所述鐵螯合劑是去鐵敏、 地拉羅司、或它們的鹽、衍生物、異構(gòu)體或溶劑化物。
6. 權(quán)利要求5的組合物，其中所述去鐵敏的鹽選自甲烷磺酸鹽(曱磺 酸鹽)、正癸烷磺酸鹽、磺酸鹽、硫酸鹽、鹽酸鹽和恩波酸鹽。
7. 權(quán)利要求6的組合物，其包含約0.1%到約50% (w/w)、優(yōu)選約l %到約30% (w/w)的去^^敏鹽。
8. 前述權(quán)利要求中任一項的組合物，其中所述以持續(xù)釋放形式納 入的活性化合物部分是所述組合物中該活性化合物總含量的約5 %到約 80% (w/w)。
9. 前述權(quán)利要求中任一項的組合物，其中根據(jù)在37"C時通過體外 釋放試驗的測定，所述以持續(xù)釋放形式納入的活性化合物在至少48小 時、更優(yōu)選至少l周的時間期間從所述組合物中釋放。
10. 前述權(quán)利要求中任一項的組合物，其包含分散于水相中的持續(xù) 釋放顆粒，其中所述顆粒栽有至少一些包含于所述組合物中的活性化合 物。
11. 權(quán)利要求10的組合物，其中所述顆粒包含約1 %到約50 % (w/w ) 的活性成分。
12. 權(quán)利要求10或11的組合物，其中所述顆粒選自聚合物的、脂質(zhì) 的或類脂的微顆粒或納米顆粒、脂質(zhì)體、非離子表面活性劑囊泡、膠束、 ^^束和交W^束。
13. 權(quán)利要求10至12中任一項的組合物，其中所述顆粒的平均直徑 范圍是約50 nm到約100 nm,優(yōu)選為約100 nm到約50 jun。
14. 權(quán)利要求10至13中任一項的組合物，其中所述活性化合物是帶 離子電荷的化合物，其中所述顆粒包含帶離子電荷的賦形劑，并且其中所 述活性化合物的電荷和所述帶離子電荷的賦形劑的電荷是相反的。
15. 權(quán)利要求10至14中任一項的組合物，其中所述顆粒主要是磷脂 顆粒，比如磷脂嚢泡。
16. 權(quán)利要求15的組合物，其中所述磷脂顆粒包含一種或更多種天然 或合成的磷脂，所述磷脂選自卵磷脂、水合卵磷脂、磷脂酰膽喊、7jc合磷 脂酰膽堿、二棕櫚敞J^磷脂酰膽堿、二肉豆蔻?；字Ｄ憠A、二硬脂酰 基磷脂酰膽堿、二油跣基磷脂跣膽堿和磷脂酰甘油。
17. 權(quán)利要求16的組合物，其中所述磷脂囊泡包含比率為約1:9到約 9:1的兩性離子型磷脂和帶負電荷的磷脂。
18. 前述權(quán)利要求中任一項的組合物，其具有剪切稀化和/或觸變行為。
19. 前述權(quán)利要求中任一項的組合物，其具有約4.0到約7.5的pH 和/或不超過約1000 mOsmol/kg的重量摩爾滲透壓濃度。
20. 前述權(quán)利要求中任一項的組合物，還包含至少一種選自以下的 賦形劑pH調(diào)節(jié)劑、滲透劑、增粘劑、^形成劑、抗氧化劑、自由基 清除劑、防腐劑、表面活性劑、穩(wěn)定劑、溶劑、增容劑、冷凍千燥保護劑。
21. 權(quán)利要求20的組合物，其中所述穩(wěn)定劑選自糖或糖醇，比如乳糖、 葡萄糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇；多糖，比如右旋糖肝或葡聚糖; 天然或合成的氨基酸，比如甘氨酸；和水溶性肽，包括寡肽和多肽。
22. —種用于胃腸外施用的水性藥物組合物，其包含約5%到約30% (w/w)的去鐵敏鹽和約1%到約20% (w/w)的平均直徑為約100 nm到約50 Hm的磷脂顆粒，其中至少一部分所述去鐵敏鹽與所述磷脂嚢泡結(jié)合，并 且其中所述磷脂嚢泡包含兩性離子型磷脂和帶負電荷的磷脂。
23. —種用于胃腸外施用的藥物組合物，其包*自生理上可接受的 鐵螯合劑的活性化合物，所述組合物可通過包括以下步驟的方法得到形 成或提供載有所述活性化合物的持續(xù)釋放顆粒的水懸液，避免將未被納入 到所述持續(xù)釋放顆粒中的溶解的活性化合物與持續(xù)釋放顆粒分離的步驟。
24. 權(quán)利要求23的組合物，其為粘彈性凝膠的形式。
25. 制備權(quán)利要求l的藥物組合物的方法，其包括形成或提供載有活 性化合物的持續(xù)釋放顆粒的水懸液的步驟，其中所述水懸液還包含未納入 到所述持續(xù)釋放顆粒中的溶解的活性化合物，所述方法的進一步特征在于 不存在將未納入到所述持續(xù)釋放顆粒中的溶解的活性化合物與所述持續(xù) 釋放顆粒分離的步驟。
26. 制備權(quán)利要求15的組合物的方法，其包括以下步驟(a) 組合所述鐵螯合劑、兩性離子型磷脂、帶負電荷的磷脂、7jc和任選的 其它賦形劑，以形成混合物；以及(b) 在高于所述兩性離子型磷脂和帶負電荷的磷脂的相轉(zhuǎn)變溫度的溫度下 將所述混合物均質(zhì)化以得到含有磷脂嚢泡的均質(zhì)化^L體。
27. 權(quán)利要求26的方法，其特征還在于其不包括將步驟(b)中得到的 所述磷月旨嚢泡與存在于所述^t體中而未被納入到所述磷脂嚢泡中或未 與所述磷脂嚢泡結(jié)合的任何鐵螯合劑分離的步驟。
28. 權(quán)利要求26或27的方法，還包括(c)將步驟(b)中得到的均質(zhì)化分 散體滅菌的步驟，優(yōu)選通過輻照，比如Y輻照進行。
29. 用于制備根據(jù)權(quán)利要求1至22中任一項的藥物組合物的粉末，其 包含所述活性化合物、至少一種固體賦形劑、和不超過約5% (w/w)的殘 留水或溶劑。
30. 權(quán)利要求29的粉末，其通過將權(quán)利要求1至22中任一項的組合物冷凍干燥而得到。
31. 用于制備根據(jù)權(quán)利要求1至22中任一項的藥物組合物的試劑盒, 其包含權(quán)利要求29或30所述的粉末，以及任選的用于由所述粉末重構(gòu)所 述組合物的液體。
32. 權(quán)利要求1至22中任一項的組合物在制備用于損傷內(nèi)、神經(jīng)內(nèi)、 脊柱內(nèi)、鞘內(nèi)和/或髓內(nèi)施用的藥物中的用途。
33. 權(quán)利要求1至22中任一項的組合物在制備用于治療與神經(jīng)外傷性 癥狀和/或神經(jīng)變性癥狀有關(guān)的急性或'隄性疾病和病癥的藥物中的用途。
34. 權(quán)利33的用途，其中所述疾病和病癥選自神經(jīng)元的外傷性損傷或 炎癥，任選地由軸突損傷、脊髄損傷、腦損傷、外周神經(jīng)損傷、多發(fā)性硬 化、中風和中樞神經(jīng)系統(tǒng)肺瘤的切除所導致。
35. 治療正在受與神經(jīng)外傷性癥狀和/或神經(jīng)變性癥狀相關(guān)的急性或慢 性疾病和狀況影響的人或動物的方法，所述疾病和狀況比如神經(jīng)元的外傷 性損傷或炎癥，任選地由軸突損傷、脊髓損傷、腦損傷、外周神經(jīng)損傷、 多發(fā)性硬化、中風和中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤的切除所導致，所述方法包括給所 U或動物損傷內(nèi)、神經(jīng)內(nèi)、脊柱內(nèi)、鞘內(nèi)和/或髓內(nèi)施用權(quán)利要求l至 22中任一項的組合物。
36. 權(quán)利要求35的方法，其中所施用的組合物的體積是通it^共振成 4象所測定的所述損傷體積的約30至150 % ，更優(yōu)選約50至約100 % 。
37. 權(quán)利要求35或36的方法，其包括單次施用一定體積的所述組合物。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種用于胃腸外施用的含有鐵螯合劑的藥物組合物。所述活性化合物至少部分處于持續(xù)釋放形式。優(yōu)選粘性的組合物還可含有持續(xù)釋放顆粒，比如磷脂顆粒，其中可以納入活性成分。所述組合物通過神經(jīng)內(nèi)或脊柱內(nèi)注射而特別可用于神經(jīng)組織的治療和再生，比如受損神經(jīng)纖維的治療和再生。
文檔編號A61K9/00GK101252913SQ200680031848
公開日2008年8月27日 申請日期2006年9月4日 優(yōu)先權(quán)日2005年9月2日
發(fā)明者卡門·馬尚內(nèi)克, 奧克·弗蘭森, 蘇珊·赫爾曼斯, 英格麗德·維里肯 申請人:紐洛桑生物醫(yī)藥有限公司