專利名稱：：核心2glcnac-t抑制劑的制作方法核心2GLCNAC-T抑制劑本發(fā)明涉及使用已知的或新的化合物作為藥學(xué)活性物質(zhì)抵抗可以通過調(diào)節(jié)(例如抑制)核心(Core)2GlcNAc-轉(zhuǎn)移酶(EC2.4.1.102)治療的疾病。該酶也被稱為UDP-GlcNAc:Gaipi,3GalNAc-R(N-乙酰葡糖胺(GlcNAc)~>N-乙酰半乳糖胺(GalNAc))(3-l務(wù)N-乙酰葡萄糖胺基轉(zhuǎn)移酶(核心2卩-1,6N-乙酰氨基轉(zhuǎn)移酶，以下均稱作核心2GlcNAc-T)。核心2GlcNAc-T抑制劑尤其是本申請中的化合物已被應(yīng)用于治療與核心2GlcNAc-T有關(guān)的疾病尤其是相關(guān)組織中該酶活性與正常濃度相比有所提高的疾病，或者應(yīng)用于有必要降低核心2GlcNAc-T活性的情況下，例如降低至正常值或以下。炎性疾病例如動脈粥樣硬化和多發(fā)性硬化、糖尿病、癌癥及癌轉(zhuǎn)移都屬一這種情況。雖然大家都知道核心2GlcNAc-T抑制劑，但是并沒有將其作為分離的活性物質(zhì)應(yīng)用于藥物研發(fā)。WO0187548,KuhnsW.等.GlycoconjugateJournal10381-394,HindsgaulO.JBiolChem.266(27):17858-62(1991)和TokiD.等BiochemBiophysResCommun.198(2):417-23(1994)都公開了一些已知化合物的例子。公開了已知的和新的具有治療作用的甾體糖苷類核心2GlcNAc-T抑GlcNAc-T參與許多疾病過程基礎(chǔ)的已發(fā)表文獻。其中沒有公開式I的化合物。本申請公開了多個甾體糖普類核心2GlcNAc-T抑制劑和這些化合物可用于治療的附加條件。本申請中公開的一些甾體糖苷已在一些數(shù)量有限的疾病模型中進行了檢測。例如，在保護大鼠胃粘膜病變(JP2004-143126和MatsudaH等BioorgMedChemLett.24;13(6):1101-6(2003》、小鼠耳部水腫檢測抗炎活性(KimSY等ArchPharmRes.22(3):313-6(1999))、防止衰老(W09916786)和作為佐劑(OdaK等BiolChem.381(1):67國74(2000))的實驗中。CN1243129和CN1237583公開了在癌癥治療中使用某些已公開的化合物和一些已應(yīng)用于體外細胞毒性檢測的化合物(，寸i口Hernandez,J.C.Bioorganic&MedicinalChemistry12(16),4423-4429(2004),MimakiY.等NaturalProductLetters,14(5),357-364(2000).，HuK.PlantaMedica,63(2),161-165(1997)，DongM.等PlantaMed.67(9):853畫7(2001),NakamuraO.等Phytochemistry.36(2):463國7(1994),HuK.等PlantaMed.62(6):573-5(1996),HuK和YaoX.AnticancerDrugs.12(6):541-7(2001),HuK和YaoX.PhytotherRes.17(6):620-6(2003)),但是基于細胞的檢測中的活性水平遠低于目前公開的化合物抑制核心2GlcNAc-T活性的活性水平。上述出版物中沒有公開某些甾體糖苷也可以作為核心2GlcNAc-T的抑制劑。某些植物固醇化合物被作為飲食添加劑使用，它們可以阻止從腸道吸收膽固醇并最終降低血漿LDL膽固醇。但是這些化合物的使用劑量大致為每日數(shù)毫克并且人們并不知道它們是核心2GlcNAc-T的抑制劑。笫一方面，本發(fā)明提供了一種治療涉及到核心2GlcNAc-T有害活性尤其是活性升高的疾病的方法，該方法包括給予需要治療的病人治療有效量的結(jié)構(gòu)式I的核心2GlcNAc-T抑制劑。)~"0Sac1Sac2其中R1為H、d-6烷基、Cw羥基烷基或d—6烷氧基或d-6-烷氧基-d-6烷基；R2為H、-OH或Cw烷氧基；Sac1和SaJ為獨立選擇的糖部分；Z為通過其3位的環(huán)碳原子與所示氧連接的固醇部分；或其藥學(xué)可接受鹽、醚、酯或互變異構(gòu)體。將結(jié)構(gòu)式I的環(huán)命名為環(huán)A?，F(xiàn)有技術(shù)認為核心2GlcNAc-T(特別是通過參與支鏈寡糖的合成)涉及一系列疾病，無獨有偶，本申請的發(fā)明人也已確定對核心2GlcNAc-T的調(diào)節(jié)尤其是抑制還可用于治療血管疾病(包括糖尿病并發(fā)癥)、自身免疫病和炎性疾病。本發(fā)明可治療的具體疾病包括肌病、視網(wǎng)膜病、腎病、動脈粥樣硬化、哮喘、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、炎性腸病、移植排斥、缺血再灌注損傷(例如中風(fēng)、心肌缺血、出血性休克后的腸再灌注)、再狹窄、克隆(氏)病、血栓、包括潰瘍性結(jié)腸炎在內(nèi)的結(jié)腸炎)、狼瘡、凍傷、急性白血球介導(dǎo)的肺損傷(例如成人呼吸窘迫綜合征)、外傷性休克、敗血癥性休克、腎炎、牛皮癬、膽嚢炎、肝硬化、憩室炎、暴發(fā)型肝炎、胃炎、胃和十二指腸潰瘍、肝腎綜合征、應(yīng)激性結(jié)腸綜合征、黃疰、胰腺炎、潰瘍性結(jié)腸炎、人粒細胞埃里希體病、維-奧二氏綜合征T細胞激活，艾滋病、可用核心2衍生的聚糖治療的由病毒、細菌、原蟲和寄生蟲引起的感染和癌癥。本方法尤其適于治療癌轉(zhuǎn)移。癌癥包括白血病、淋巴瘤、黑素瘤、腺瘤、肉瘤和固體組織癌；具體的癌癥包括前列腺癌、睪丸癌、乳腺癌、胰腺癌、頸癌、子宮癌、腎癌、肺癌、直腸癌、乳癌、胃癌、曱狀腺癌、頸癌、腸癌、唾液腺癌、膽道癌、骨盆癌、縱隔、尿道、支氣管、膀胱、食道、結(jié)腸、小腸和肉瘤(例如卡波濟(氏)肉瘤)和腺瘤性息肉。對于治療尤其敏感的癌癥有口腔癌，肺癌例如肺腺癌，結(jié)腸直腸癌、膀胱癌、肝癌、胃癌、直腸癌、前列腺癌、睪丸癌、乳腺癌、肺癌、口腔癌。尤其適用于核心2GlcNAc-T活性增高的癌癥或癌轉(zhuǎn)移。結(jié)構(gòu)式I的化合物中優(yōu)選I^為H、Cw烷基或Cw羥基烷基；更優(yōu)選R1為H、-CH3或-CH20H;更進一步優(yōu)選R1為-CH2OH;更進一步優(yōu)選R1為-CH20H并且環(huán)A為葡萄糖或半乳糖部分；最優(yōu)選葡萄糖；優(yōu)選R2為H、-OH;或其藥學(xué)可接受鹽、醚、酯或互變異構(gòu)體。糖SaJ和Sac2包括但是不局限于單糖、雙糖、三糖、四糖和多糖。Sad和Sa優(yōu)選單糖，但是也可以為獨立選擇的二糖或寡糖。優(yōu)選SaJ和Sa^獨立選自丁糖、戊糖和己糖；優(yōu)選Sac1選自戊糖、脫氧己醛糖和己醛糖，更優(yōu)選Sac1選自阿拉伯糖、木糖、奎諾糖、鼠李糖或一種己醛糖，更優(yōu)選SaJ選自阿拉伯糖、木糖、奎諾糖、鼠李糖、葡萄糖、甘露糖、古洛糖、阿卓糖、阿洛糖、艾杜糖和塔羅糖，更進一步優(yōu)選SaJ選自鼠李糖或葡萄糖；最優(yōu)選葡萄糖。優(yōu)選Sac^選自戊糖、脫氧己醛糖和己醛醣；更優(yōu)選SaJ選自阿拉伯糖、木糖、葡萄糖、甘露醇、半乳糖和脫氧己醛糖；更優(yōu)選Sac2選自阿拉伯糖、木糖、葡萄糖、甘露醇、半乳糖和一種6-脫氧己醛糖；更進一步優(yōu)選Sac^選自葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、木糖和鼠李糖；更優(yōu)選鼠李糖。在一個優(yōu)選的組合中，A組為葡萄糖或半乳糖，Sad為阿拉伯糖、木糖、奎諾糖、鼠李糖、葡萄糖、甘露糖、半乳糖、阿卓糖、阿洛糖、艾杜糖和塔羅糖，優(yōu)選葡萄糖和鼠李糖并且Sa為鼠李糖。尤其優(yōu)選結(jié)構(gòu)式III的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage10</formula>葡萄糖鼠李糖其中A環(huán)為葡萄糖部分，其結(jié)構(gòu)式可寫做<formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula>最優(yōu)選的化合物為固醇部分Z的6-脫氧-a-L-吡喃甘露糖基(1—2)-0-[卩-D-吡喃葡糖基-(1—3)]-卩-D-吡喃葡糖苷。其中Glc為葡萄糖，Rha為鼠李糖，2和3指與中心葡糖基結(jié)合的位點。"固醇部分，，指如結(jié)構(gòu)式V所示的包含四環(huán)體系的部分v通常糖環(huán)A在3位與固醇部分Z連接。通常固醇部分環(huán)體系是經(jīng)過修飾的，例如加入一個或多個環(huán)和/或多個雙4定和/或一個或多個取代基。例如固醇部分可能具有以下的環(huán)體系膽甾烷、孕甾烷、雄(甾)烷、雌(甾)烷、膽固醇、膽烷、黃體酮，一種鹽(腎上腺)皮質(zhì)激素例如脫氫表雄酮或其7-酮或7-羥基類似五或一種膽酸。在一個優(yōu)選實施方案中，固醇部分是一種本身有益或中性的固醇。"中性"指由FDA或GRAS批準(zhǔn)該固醇環(huán)可用于人類或動物。"有益"指當(dāng)單獨給予這種固醇時它對人體或動物有益。固醇部分Z可以是一種天然來源(如植物來源)的甾體皂苷或?qū)χ参镧摅w皂苷元進行化學(xué)修飾得到的固醇部分。例如皂苷元可以是一種呋喃甾醇糖苷、螺旋甾烷醇糖苷(包括含有氧和氮的環(huán))、達瑪烷糖苷或其他甾體皂苷。例如固醇部分Z可以是來自于結(jié)構(gòu)式VI的固醇部分?？梢砸牍檀己薞或VI的基團或環(huán)選自結(jié)構(gòu)式VIa至VIe所列結(jié)構(gòu)，其中虛線表示與固醇核相關(guān)的環(huán)。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage12</formula>R9為H;R11為H、d-6烷基或-OH或119和R11—起形成-CH2-CH2-基團；優(yōu)選R11為H、-OH或-CH3或W和R]1—起形成-CH2-CH2-基團；R13為H、Cw烷基或C^羥基烷基；優(yōu)選R"為H、-CH2OH或-CH3。R15為H或-OH。R"為H、-OH或Cw烷氧基或R"和R"—起形成連接相鄰兩個碳原子的雙鍵的第二個鍵；優(yōu)選R"為H、-OH或-OCH3或R5和R6一起形成連接相鄰兩個碳原子的雙鍵的第二個鍵。R"為Cw烷基、C2—6烯基、(:2.6炔基或被一個或多個選自O(shè)H、Cu6烷氧基和SS的基團取代的Cw烷基；優(yōu)選R"為C2.6烯基或被一個或多個選自O(shè)H、Cw烷氧基和S"的基團取代的Cw烷基；更優(yōu)選1117為(32.6烯基或被一個或多個選自O(shè)H、-0。^和S"的基團取代的Cw烷基；更進一步優(yōu)選R"選自3-甲基-丁-2-烯基、2-甲基-丙-2-烯基、4位被83取代的3-甲基丁烷基、4位被S"取代的l-羥基-3-甲基丁烷基或者4位被SS取代的l-甲氧基-3-曱基丁烷基；R21為Cw烷基、Cw羥基烷基或-CH2;優(yōu)選R21為-CHs、-CH2OH或=012;R^為-OH;1124為Cw烷基、C2.6烯基或C2,6炔基；優(yōu)選1124為C2_6烯基；最優(yōu)選2-甲基-丙-2-烯基；R"為Cw羥基烷基；R"為C^烷基、6幾基烷基或被S"取代的d—6烷基；優(yōu)選R27為Cw烷基或被S4取代的d-6烷基；更優(yōu)選R27為-CH3或-CH2-S,R28為d-8烷基、C2.8烯基或C2.8炔基；優(yōu)選R28為d.8烷基或C2.8烯基；更優(yōu)選3-乙基-4-曱基-戊烷基或5-曱基-己-4-烯基；R"為C卜6羥基烷基或被S4又代的Cw烷基；優(yōu)選R犯為被S、又代的d—6烷基；R"為Ci—6烷基；優(yōu)選R"為-CH3;且Sac3、Sac4和Sac5為獨立選擇的糖；優(yōu)選Sac3、Sac4和Sac5為獨立選擇的單糖；更優(yōu)選它們獨立選自己糖、戊糖或丁糖；更進一步優(yōu)選它們獨立選自葡萄糖、半乳糖、奎諾糖、巖藻糖、阿拉伯糖和木糖，最優(yōu)選葡萄糖。:代表或者是單鍵或者是雙^t;X可以是O或NH;優(yōu)選X為O。優(yōu)選的不會將更多VI(a)基團引入VI(e)的固醇部分Z的W為C^烷基；W為H;118為VII(a);優(yōu)選115為C"烷基；R7為H;R8為VII(a);R11為Cw烷基并且R6為H或-OH;更優(yōu)選R5為C"烷基；R7為H;118為VII(a);R11為Cw烷基；116為H或-OH,1112為C"烷基并且R"為Cw烷基或Cw羥基烷基。進一步優(yōu)選的不會將更多VI(a)基團引入VI(e)的的固醇部分Z的115為Cw烷基；117為H;R8為VII(b);優(yōu)選115為C^烷基；R7為H;R8為VII(b)并且R12、R13和R11為烷基；更優(yōu)選R5為烷基并且W為H。進一步優(yōu)選的不會將更多VI(a)基團引入VI(e)的固醇部分Z的R5為H;W為Cw烷基；118為Q-6?；?；優(yōu)選115為H;117為C"烷基；R8為d-6酰基并且1112,和R13為H;R11為H或-OH。進一步優(yōu)選的不會將更多VI(a)基團引入VI(e)的固醇部分Z的R5為H;R7為Cw烷基；R8為VIIb;優(yōu)選R5為H;R7為C"烷基；R8為VITb;R2和R13為H;并且R11為H或-OH;可將更多VI(a)基團引入的優(yōu)選固醇部分Z的RS為H;I^為烷基；R8為H或-OH;R12和R"為H并且R"為C2-6烯基或被一個或多個選自-OH、-0013和33的基團取代的Cw烷基；優(yōu)選RS為H;R7為Cw烷基；R8為H或-OH;R12和R13為H并且R口選自4位被33取代的3-曱基-丁-2-烯基、2-甲基-丙-2-烯基、3-甲基丁烷基、4位被S^又代的l-羥基-3-甲基丁烷基或者4位被S^又代的1-甲氧基-3-甲基丁烷基；進一步優(yōu)選的可將VI(a)基團引入的固醇部分RS為Cw烷基、R7為H、R"為(:2.6烯基；優(yōu)選115為d-6烷基、117為H、R"為烯基、R12和R"為d—6烷基；更優(yōu)選R5為d-6烷基、117為H、R"為C2.6烯基、R12和R"為Cw烷基；更優(yōu)選115為Cw烷基，R7為H、R"為C2_6烯基，R12和R"為d-6烷基并且R"為-OH。優(yōu)選的可將另外的VI(c)基團引入的固醇部分Z的115為H、R7為Cw烷基、R8為H或-OH,R"為H或-OH;R"和R3為H。優(yōu)選的結(jié)構(gòu)式VI(a)和VI(b)的固醇部分是具有如圖1所示的環(huán)狀結(jié)構(gòu)的部分更優(yōu)選具有下列取代基的部分。在任何一種結(jié)構(gòu)中，標(biāo)記為"25"的碳原子可以是R或S構(gòu)型。優(yōu)選的結(jié)構(gòu)式VIc的甾體部分Z(其中的X為O)含有下列基團菝葜皂苷元、異菝葜皂式配基、12|3-羥基異菝葜皂式配基、萬年青皂苷元、異萬年青皂苷元、沙莫皂苷元、12|3-羥基沙莫皂苷元、馬爾可皂苷元、楊諾皂苷元、鈴蘭皂苷元A、鈴蘭皂苷元B、托可皂苷元、劍麻急普元、吉托皂苦元、agigenin、毛地黃皂苷配基、克洛皂苦元、潘尼枯苷元、(25R)-螺旋甾烷-3(3、17a,21-三醇、allogenin、(25R)誦5a-螺旋甾烷陽2a,3卩,5a,6a隱四醇、(24S,25R)-5a-螺旋甾烷-201，3(3,501,6&24-五醇、雅姆皂苦元、薯蕷皂苷元、絲蘭皂苷元、，百合皂苷元、魯斯可皂苦元、(25S)-魯斯可皂苷元、neopraserigenin、彭諾急香元、異紐阿替急普元、cepagenin、24a-羥基彭諾皂苷元、麥冬苷元、sibiricogenm、歐鈴蘭皂苷元、新魯斯皂普元、?？略碥赵?、新海可急苦元、門諾皂苷元、劍麻皂苷元和hispigenin。優(yōu)選結(jié)構(gòu)式VIc(其中X為NH)的固醇部分含有下列基團澳洲茄次石成、茄《計定、番茄石成和5-脫氬番癡石成。優(yōu)選的結(jié)構(gòu)式VI(c)的固醇部分Z具有圖4所列環(huán)狀結(jié)構(gòu)更優(yōu)選具有其中所列取代基。優(yōu)選的從VIi至VIxxxii的固醇部分可以從這里的甾體糖普化合物或表2以及另外從HostettmanK.Saponins.中獲得。CambridgeUniversityPressUK.(1995),OriK.等.Phytochemistry.31(8):2767-75(1992),ShimomuraH.等，Phytochemistry28,3163-3170(1989),優(yōu)選的結(jié)構(gòu)式I化合物與具有優(yōu)選糖部分的任何優(yōu)選固醇部分Z結(jié)合。結(jié)構(gòu)式I優(yōu)選的化合物為原纖細薯蕷苷(protogracillin)、原新纖細薯蕷苷(protoneogracimn)、甲基原纖細薯蕷苷、曱基原新纖細薯蕷苷、々i原纖細薯蕷苦、血竭苷(dracenoside)Q、薯蕷苷(dioscoreside)E、血竭普P、ii菜籽皂苷(tuberoside)C、icogenin纖細薯蕷苷、collettisideIV17-OH纖細薯蕷苷、血竭苷H、血竭苷L、血竭苷I、百合糖苷(百合糖苷)H、百合糖苷I、血竭苷D、neoalsosideA、neoalsosideC和北拐參急香(hoduloside)V、LotosideII。其他還未命名的優(yōu)選化合物為表2中的化合物17、21和25。優(yōu)選化合物的化學(xué)名如下原纖細薯蕷苷為[(3p,22a,25R)-26-(!3-D-吡喃葡糖基氧基-22-羥基呔甾-5-烯-3-基0-6-脫氧-a-L-吡喃甘露糖基(1—2)-0-[P-D-吡喃葡萄糖基-(l—3)]-P-D-吡喃葡萄糖苷];原新纖細薯蕷苦為[(3p,22a,25S)-26-(|3-D-吡喃葡萄糖基氧基)一22-輕基呋甾-5-烯-3-基0-6-脫氧-a-L-吡喃甘露糖基(1—2)-0-[P-D-吡喃葡萄糖基-(l—3)]-P-D-吡喃葡萄糖苷];甲基原纖細薯蕷苷為[(3p,22a,25R)-26-((3-D-吡喃葡萄糖基氧基)-22-曱氧基呋甾-5-烯-3-基0-6-脫氧-a-L-吡喃甘露糖基(1—2)-0-[(3-D-吡喃葡萄糖基-(l卄3)]-(3-D-吡喃葡萄糖苷];甲基原新纖細薯蕷苷為[(3(3,22a,25S)-26-(l3-D-吡喃葡萄糖基氧基)-22-甲氧基呋甾-5-烯-3-基0-6-脫氧-a-L-吡喃甘露糖基(1—2)-0-[P-D-吡喃葡萄糖基-(1—3)-(3-D-吡喃葡萄糖苷];假原纖細薯蕷苷為[(3p,25R)-26-(!3-D-吡喃葡萄糖基氧基)呋甾烷-5,20(22)-二烯-3-基0-6-脫氧-a-L-吡喃甘露糖基-(1—2)-0-[l3-D-吡喃葡萄糖基-(1—3)]-f3-D-吡喃葡萄糖苷];血竭苷Q為[(3J3)-26-(j3-D-吡喃葡萄糖基氧基)-14-羥基呋甾烷-5，20(22)-二烯-3-基0-6-脫氧-a-L-吡喃甘露糖基-(1—2)-0-[P-D-吡喃葡萄糖基-(l—3)]-13-D-吡喃葡萄糖苷];薯蕷普E為[26-CH3-D-吡喃葡萄糖基-3卩,26-二羥基-23(S)-曱氧基l-25(R)-呋甾烷-5,20(22)-二烯-3-O-a-L-吡喃鼠李糖基(1—2)-[卩-D誦吡喃葡萄糖基(1—3)]-J3-D-吡喃葡萄糖苷];血竭苷P為[(3卩)-26-(卩-D-吡喃葡萄糖基llJ0-14,22-二羥基呋甾_5-烯-3-基0-6-脫氧-a-L-吡喃甘露糖基-(l—2)-(3-D-0-[(3-D-吡喃葡萄糖基-(1—3)]-吡喃葡萄糖苷；韭菜籽皂苷C為[(2(1,3|3，501，255)-26-(|3-0-吡喃葡萄糖基氧基)-2-羥基呋甾-20(22)-烯-3-基0-6-脫氧-a-L-吡喃甘露糖基-(1—2)-0-[卩-D-吡喃葡萄糖基-(l—3)]+D-吡喃葡萄糖苷];icogenin為[(3卩,2201,2511)-26-羥基-22-曱氧基呋甾-5-烯-3-基0-6-脫氧-a-L-吡喃甘露糖基-(1—2)-0-[|3-D-吡喃葡萄糖基-(1—3)]+D-吡喃葡萄糖苷];纖細薯蕷苷為[(3p,25R)-螺甾-5-烯-3-基0-6-脫氧-a-L-吡喃甘露糖基-(1—2)-0-[l3-D-吡喃葡萄糖基-(1—3)]-P-D-吡喃葡萄糖苷collettisideIV為[[(3卩,25S)-螺甾-5-烯-3-基0-6-脫氧-a-L-吡喃甘露糖基-(1-—-2)-0-[P-D-吡喃葡萄糖基-(1—3)]-(3-D-吡喃葡萄糖苷];17-OH纖細薯蕷苷為[(3(3,25R)-17-羥基螺甾-5-烯-3-基O-6-脫氧-a-L-p比喃甘露糖基-0^2)-0-[卩-D-p比喃葡萄糖基-(1—-3)]-(3-D-吡喃葡萄糖苷];血竭苷H為[(3(3)-14-羥基螺甾-5-烯-3-基0-6-脫氧-a-L-吡喃甘露糖基-(l—2)-0-[(5-D-吡喃葡萄糖基-(1—3)]-P-D-吡喃葡萄糖苷；血竭苷L為[(3卩,24S,25R)-14,24-二羥基螺甾-5-烯-3-基O-6-脫氧國a-L陽吡喃甘露糖基-(1—2)-0國[卩-D國吡喃葡萄糖基-(l卄-3)]國卩國D-吡喃葡萄糖苷];血竭苷I為[(3卩)-螺甾烷-5,25(27)-二烯-3-基0-6-脫氧-a-L-吡喃甘露糖基-(1—2)-0-[(3-D-吡喃葡萄糖基-(l—3)]-l3-D-吡喃葡萄糖苷];百合糖普H為[(3p,25S)-27-羥基螺甾-5-烯-3-基0-6-脫氧-a-L-吡喃甘露糖基-(1—2)-0-[P-D-吡喃葡萄糖基-(1—3)]-P-D-吡喃葡萄糖苷]百合糖苦I為[(3(3,25R)-27-[(3S)-4-縣-3-羥基-3-曱基-l-氧代丁氧基]螺甾-5-烯-3-基0-6-脫氧-a-L-吡喃甘露糖基-(1—2)-0-[(3-D-吡喃葡萄糖基-(l—3)]-(3-D-吡喃葡萄糖苷];血竭苷D為[3-[(0-6-脫氧-a-L-吡喃甘露糖基-(1—2)-0-[(3-D-吡喃葡萄糖基-("3)]-P-D-吡喃葡萄糖基)氧基]-14-羥基-孕甾-5,16-二烯-20-酮neoalsosideA為[(3(3,1213，23S,24S)-20,24-環(huán)氧國12,23,25-三羥基達瑪達瑪烷_3-基0-6-脫氧-a-L-吡喃甘露糖基-(1—2)-0-[P-D-吡喃葡萄糖基-(1—3)]-l3-D-吡喃葡萄糖苷]neoalsosideC為[(3卩,4a，12卩,23S,24S)-20,24畫環(huán)氧-12,23,25，28-tetra羥基達瑪達瑪烷-3-基0-6-脫氧-a-L-吡響甘露糖基-(1—2)-0-[卩-D-吡喃葡萄糖基-(l—3)]-J3-D-吡喃葡萄糖苷；北拐棗皂苷V為[(3l3,16卩,23R)-16,23:16,30-二環(huán)氧-20-羥基-13-甲基達瑪達瑪-24-烯-3-基0-6-脫氧-0^-吡喃甘露糖基-(1~>2)-0-[|3-0-吡喃葡萄糖基-(1—3)]-P-D-吡喃葡萄糖苷；LotosideII為[(3卩,15a,16(3,22R)-16,22-環(huán)氧-15,16,20-三羥基達瑪一24-烯-3-基-0-6-脫氧-a-L-吡喃甘露糖基-(l—2)-0-[l3-D-吡喃葡萄糖基-(1—3)]-(3-D-吡喃葡萄糖苷]?；衔?7為[(3p,24R,25R)-17，24-二羥基螺甾-5-烯-3-基O-6-脫氧-a-L-吡喃甘露糖基-(l—2)-0-[l3-D-吡喃葡萄糖基-(1—-3)]-(3-0-吡喃葡萄糖苷]化合物21為[(3p)21-(J3-D-吡喃葡萄糖基氧基)-20-liydr氧基達瑪_24-烯-3-基0-6-脫氧-01丄-吡喃甘露糖基-(1-—-2)-0-[|3-0-吡喃葡萄糖基-(1—3)]-P-D-吡喃葡萄糖苷]?；衔?5為[(3p,16卩，22R)-16,22:16，30-二環(huán)氧-20-羥基達瑪-24-烯-3-基0-6-脫氧-a-L-吡喃甘露糖基-(l—2)-0-[l3-D-吡喃葡萄糖基-(l—3)]-13-D-吡喃葡萄糖苷]。當(dāng)所述優(yōu)選取代基(例如d-6烷基、Cw羥基烷基)由1-6個碳(即Cw)組成時，這種取代基更優(yōu)選由1-4個碳組成(即Cm),更進一步優(yōu)選由1-2個碳組成(即甲基或乙基)最優(yōu)選一個碳原子(即甲基形式)。相似的，當(dāng)所述部分取代例如Q—6烷基或Cw烷氧基-Cw烷基的Cw烷氧基由1-6個碳(即Cw)組成時這些取代相互獨立，更優(yōu)選由1-4個碳組成(即CM)更進一步優(yōu)選由1-2個碳組成(即曱基或乙基)最優(yōu)選一個碳原子(即曱基形式)。當(dāng)化學(xué)鏈中的碳原子數(shù)量允許時，烷基、烯基和炔基可以是直鏈或支鏈。例如Cw烷基可以是甲基、乙基、正丙基或異丙基、正丁基、異丁基或叔丁基、異戊基、2,2-二甲基丙基、正己基、異己基和1,3-二甲基丁基。例如d-6烯基可以是烯丙基、l-甲基-丙-2-烯基，2-甲基-丙-2-烯基、2-甲基-丙-l-烯基、丁-2-烯基、丁-3-烯基、1-甲基-丁-2-烯基、3-曱基-丁-2-烯基；C^烯基可以是任何d-6烷基的烯基也可以是5-曱基-己-5-烯基、4-甲基-5-己烯基、3,4-二甲基-2-己烯基。例如C!-6炔基可以是炔丙基、丁-2-炔基、3-丁炔基、l-曱基-3-丁炔基。在化學(xué)上允許的情況下，Cw羥基烷基可以是一種Cw單羥基烷基或一種二羥基烷基。在可能被糖基取代的部分，優(yōu)選該化學(xué)鍵通過該糖的氧原子形成如下基團<formula>formulaseeoriginaldocumentpage20</formula>在結(jié)構(gòu)式I中，糖部分由多個手性中心組成。因此每一個糖基的1、2、3、4和5的任何一個碳原子都可以獨立的呈R或S型。根據(jù)異頭碳的形式，每一個糖基可以獨立地呈a或l3異頭碳的形式。對于A環(huán)優(yōu)選p形式。根據(jù)這些手性中心附近的排列和取代基R1和R2的基團，每一個單糖可以采用許多不同的形式。因此，例如當(dāng)W為H并且I^為-OH時，糖部分可以排列為吡喃阿拉伯糖、吡喃木糖、吡喃核糖或吡喃木糖；該糖部分優(yōu)選吡喃木糖或吡喃阿拉伯糖；該糖部分更優(yōu)選吡喃木糖。當(dāng)R1為-CH3并且R2為-OH時，糖部分A為6-脫氧吡喃已糖，并且可能排列為6-脫氧阿洛糖、6-脫氧阿卓糖、6-脫氧半乳糖(巖藻糖)、6-脫氧葡萄糖(查諾糖)、6-脫氧核醣、6-脫氧甘露糖(鼠李糖)或6-脫氧塔羅糖，優(yōu)選巖藻糖或奎諾糖，最優(yōu)選奎諾糖。當(dāng)！^為-CH20H并且I^為-OH時，糖部分A為吡喃已糖也可以是阿洛糖、阿卓糖、半乳糖、葡萄糖、古洛糖、艾杜糖、甘露糖或塔羅糖；優(yōu)選半乳糖或葡萄糖，更優(yōu)選葡萄糖。糖包括但是不局限于單糖、雙糖、三糖、四糖和多糖。糖部分優(yōu)選單糖但是可能獨立選自二糖或寡聚糖。單糖包括但是不局限于丁糖、戊糖、己糖、和庚糖，優(yōu)選丁糖、戊糖和己糖。例如丁糖可以是丁醛糖，例如赤鮮糖、蘇糖和醛酮糖赤鮮酮糖。戊糖包括但是不局限于戊醛糖例如阿拉伯糖、來蘇糖、核糖和木糖和戊酮糖例如核酮糖、木酮糖和脫氧戊糖例如2-脫氧核糖和3-脫氧核糖。優(yōu)選的戊糖是木糖和阿拉伯糖。戊糖的形式可以是呋喃糖(例如呔喃阿拉伯糖、呔i'南來蘇糖、呔。南核糖和吹喃木糖)或吡喃糖(例如吡喃阿^i伯糖、吡喃來蘇糖、吡喃核糖和吡喃木糖)。己糖包括但是不局限于己醛糖例如阿洛糖、阿卓糖、半乳糖、塔羅糖、古洛糖、艾杜糖、甘露糖和葡萄糖(優(yōu)選葡萄糖、甘露糖、古洛糖、阿卓糖、阿洛糖、艾杜糖和塔羅糖)和己酮糖例如果糖、阿洛酮糖、山梨糖和塔蓋糖。己糖可以是脫氧己糖，其中在鍵合基團的任何位置-OH都可以變成-H。6-脫氧己糖例如6-脫氧阿洛糖、6-脫氧阿卓糖、6-脫氧半乳糖(巖藻糖)、6-脫氧葡萄糖(奎諾糖)、6-脫氧古洛糖、6-脫氧艾杜糖、6-脫氧甘露糖(鼠李糖)或6-脫氧塔羅糖。脫氧己糖也可以是2-脫氧、3-脫氧、4-脫氧和5-脫氧。脫氧位置可能不止一個。脫氧己糖的例子包括2-脫氧-葡萄糖、2-脫氧半乳糖、4-脫氧巖藻糖、3-脫氧半乳糖、2-脫氧葡萄糖、3-脫氧葡萄糖、4-脫氧葡萄糖。優(yōu)選脫氧己醛糖。己糖也包括氨基己糖例如氨基半乳糖、氨基葡糖和甘露糖胺。優(yōu)選的己糖為己醛糖和脫氧己糖，尤其優(yōu)選的己糖為葡萄糖、半乳糖、奎諾糖、巖藻糖和鼠李糖。己糖也可以是呋喃糖或吡喃糖的形式，優(yōu)選吡喃糖。其他單糖包括糖醛酸，例如果糖酮酸、半乳糖醛酸、艾杜糖醛酸、葡糖醛酸、古洛糖醛酸、甘露糖醛酸和塔羅糖醛酸；景天庚酮糖、唾液酸、神經(jīng)氨酸、胞壁酸、N-乙酰神經(jīng)氨酸、N-乙酰胞壁酸、O-乙酰神經(jīng)氨酸和N-羥乙?；窠?jīng)氨酸。在己糖中，優(yōu)選己醛糖和脫氧已糖(尤其脫氧己醛糖)；在戊糖中優(yōu)選戊醛糖和脫氧戊糖(尤其脫氧戊糖)。結(jié)構(gòu)式I的化合物中藥學(xué)可接受酯是一種與脂肪族或芳香族羧酸或磺酸形成的酯類。脂肪族羧酸可以有多至6個碳原子，例如甲基、乙基、叔丁基、丁二?；蛄u基丁二?；?malyl)。芳香族羧酸可能為苯甲酸，磺酸可以是甲基磺酸或?qū)谆交撬岵⑶野ㄈ魏慰甚セ恢玫孽ァＫ帉W(xué)可接受酯還包括糖的-OH被多至6個碳原子的脂肪族羧酸酯化的已知化合物。也包括26位碳被羥基曱基戊酰胺酸(gluteryricacid)酯化的酯或其甲酯(例如化合物19和結(jié)構(gòu)VIxxiv)。藥學(xué)可接受酯為具有在任何一個-OH形成的Cw羥基烷基化合物，例如在糖部分或甾體部分通過將一個或多個-OH轉(zhuǎn)變成烷氧基。結(jié)構(gòu)式I的化合物中適合的藥學(xué)可接受鹽是一種與無機酸或有機酸形成的酸加成鹽，例如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、三氟乙酸鹽或馬來酸鹽；或是堿金屬鹽例如鈉，堿土金屬鹽例如釣或銨鹽例如四(2-羥乙基)銨。結(jié)構(gòu)式I的化合物可以從很多種植物中提取。本發(fā)明化合物的來源和示例提取方案見表2的參考(在這里以參考文獻引用)。本申請的參考文獻詳細描述了本發(fā)明化合物的其他來源和純化這些化合物的方法(HostettmanK.Saponins.CambridgeUniversityPressUK.(1995)-特別是在表2.2、2.9、2.10和2.11以及附錄3中，通過引用并入本文)。許多本發(fā)明的化合物為羥基化甾體。根據(jù)本
技術(shù)領(lǐng)域：
的常識，當(dāng)這些化合物在純化或制備的過程中與例如醇類的溶劑接觸后可能被轉(zhuǎn)化成烷氧基衍生物或其他衍生物例如甲基縮酮(在干燥時可恢復(fù)至原來的化合物)。尤其是結(jié)構(gòu)式IV的化合物，其中呋喃甾醇的22位碳原子被-OH取代，當(dāng)與醇類接觸后會被轉(zhuǎn)化為烷氧基衍生物。值得注意的是在使用含有曱醇的溶劑從植物來源提取這些化合物時可能會轉(zhuǎn)變成甲氧基衍生物?；蛘撸鼈冊跍囟壬叩那闆r下在適當(dāng)?shù)臒o水醇類例如甲醇中回流會被轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的烷氧基衍生物(HuK.PlantaMedica,63(2),161-165(1997))。這些烷氧基化合物也是本發(fā)明的化合物。如果本發(fā)明的化合物提取自天然來源，優(yōu)選使用其純化后的形式。純化后的形式指該化合物的純度至少為1%，10%的純度比較適當(dāng)，至少30%的純度更合適，優(yōu)選50%的純度，更優(yōu)選至少80%的純度，更進一步優(yōu)選至少90%的純度，最優(yōu)選至少95%的純度。這些化合物的純度可以非常方便地用該化合物的紫外吸收與樣品中其他物質(zhì)的紫外吸收的比值表示，一般在205nm測定。例如可以使用色譜儀系統(tǒng)如本申請的參考文獻尤其是與所研究的化合物相關(guān)的參考文獻或共同未決申請W0050609775中描述的TLC和HPLC測定該化合物的純度。或者，可以通過本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的合成途徑合成本發(fā)明的化合物。例如使用合適的苷元進行糖基化?？梢再徺I到許多合適的普元，或者制備一種適當(dāng)?shù)目嘣?，或者從天然來源中純?見Hostettmanibid及其參考文獻)，或者將適當(dāng)?shù)奶腔衔锶ヌ腔?例如該申請公開的那些化合物)，或者從各種起始物質(zhì)通過化學(xué)合成制備。有經(jīng)驗的技術(shù)人員了解適合制備本發(fā)明化合物的螺旋甾烷醇和吹喃甾醇苷元的來源。例如X=0或X=NH的螺旋甾烷醇苷元中可以是菝葜苷、異菝葜皂式配基、12卩-羥基異菝葜皂式配基、萬年青皂苷元、異萬年青皂苷元、沙莫皂苷元、12P-羥基沙莫皂苷元、馬爾可皂苷元、楊諾皂苷元、鈴蘭皂苷配基A、鈴蘭皂苷元B、托可皂苷元、劍麻皂苷元、新替告皂苷元、芰脫皂苷元、Agigenin、毛地黃皂苷配基、克洛皂苷元、潘尼枯苷元、(25R)-螺旋甾烷-3卩，17a21-三醇、Allogenin、(25R)-5a-螺旋甾烷國2a，3卩,5a,6a-四醇、(24S,25R)-5a-螺旋甾烷-2a,3j3,5a,6p,24-五醇、亞莫皂苷元、薯蕷皂苷元、絲蘭皂苷元、百合皂苷元、魯斯可皂苷元、(25S)-魯斯可皂苷元、Neopraserigenin、彭諾皂苷元、異紐阿替皂苷元、Cepagenin,24a-羥基彭諾皂苷元、麥冬普元、Sibiricogenin、歐鈴蘭皂普元、新魯斯皂苷元、海柯皂苷元、新?？稍碥赵㈤T諾皂苷元、劍麻皂苷元、澳洲茄次堿、茄甜定、番茄石威和5-脫氬番茄石威。例如對可以筒單地通過酸水解甾體糖苷去糖基化，比如使用2NHC1和二噁烷50:50的混合物在封閉的試管中在IO(TC下水解4.5小時(HuK.(1997)ibid)。許多年以前人們就知道很多合成甾體苦元的方法。例如Kessar等已報道了薯蕷皂苷元、亞莫皂苷元、克里托皂苷元和異納爾索皂苦元的合成方法(KessarS.等Tetrahedron.24(2):905-7(1968),KessarS.等Tetrahedron24(2):899國904(1968),KessarS.等Tetrahedron.24(2):887-92(1968))。許多三糖取代螺旋甾烷醇皂苷的通用合成路線都是已知的(DengS等..CarbohydrRes.;30;317(l-4):53-62.(1999),LiB等.9;331(1):1-7.(2001),YuB.等.Tetrahedronletters,42，77-79(2001),YuB等JOrgChem.;13;67(25):9099-102(2002))。具有2,3分枝寡糖的螺旋甾烷醇皂苦的合成方法也是已知的(LiC等.CarbohydrRes.;306(1-2):189-95.(1998),ZouCC.等CarbohydrRes.4;338(8):721-7(2003),GuG等JOrgChem.69(16):5497-500(2004))。呋喃甾醇皂苷、衍生皂苷的合成方法和螺旋甾烷醇皂苷和呋喃甾醇皂苷之間互相轉(zhuǎn)變的方法也已#議明(YuB等.JCombChem.;3(5):404國6.(2001),YuB等.JOrgChem.;13;67(25):9099-102(2002),ChengM.S.等JOrgChem.;2;68(9):3658-62(2003),DuY等.OrgLett;2;5(20):3627國30.(2003)，LiM等CarbohydrRes.20;338(2):117-21(2003),LahmannM等CarbohydrRes.337(21-23):2153-9(2002),WangS.M.等Steroids.69(10):599-604(2004),TobariA.等EurJMedChem.35(5):511-27(2000》。此外，使用|3-糖普酶可以將螺旋甾烷醇皂苷和呋喃甾醇皂苷相互轉(zhuǎn)化(InoueK.Phytochemistry41(3),725-7(1996))。并且假皂苷可以環(huán)化生成螺旋甾烷醇衍生物(TobariA.等(2000)ibid)。已有組合方法合成皂苷的報道(LautretteS.等ChemCommun(Camb).7;(5):586-7(2004),YuB等.JCombChem.;3(5):404-6.(2001))。這些參考文獻也提供了對糖羥基烷基進行衍生化的信息和更多的參考文獻，在這里均以參考文獻引用。在這里"普元"指不含糖部分的甾體苷類。在被糖基占據(jù)的位置可能存在其它取代基。尤其是屬于呋喃甾醇皂苷的苷元在糖基化時可能與相應(yīng)的螺旋甾烷醇化合物一樣處于閉環(huán)的狀態(tài)。"甾體苷類"是含有與一個或多個糖基相連的甾體或被取代的甾體核的化合物。"甾體急苷元"是甾體皂苷的苷元。"甾體皂苷"是一種天然存在的甾體糖普。"抗細胞粘著劑，，是一種可降低細胞對底物例如血小板或血管內(nèi)壁或其他組織的黏附性的一種物質(zhì)，"抗細胞-細胞相互作用劑"是一種減少細胞相互作用的物質(zhì)。"抗細胞外滲劑，，是一種可以減少細胞從血液穿過血管壁的物質(zhì)。為了避免誤解，"Cw?；?，為CO-Q.5-烷基。在這里，"治療"一詞包括作為預(yù)防的治療和對目前或忽輕忽重的疾病的治療。第二個方面，本發(fā)提供了用結(jié)構(gòu)式I的化合物生產(chǎn)治療涉及到核心2GlcNAc-T有害酶活尤其是酶活提高的疾病的藥物的用途。這些病癥的例子已在本發(fā)明的第一方面中描述。第三方面，本發(fā)明提供了治療涉及到核心2GlcNAc-T有害酶活尤其是酶活提高的疾病的藥用組合物，其中包含結(jié)構(gòu)式I的化合物。這些組合物優(yōu)選包含藥學(xué)可接受栽體、稀釋劑或輔料。第四方面，本發(fā)明提供了將本發(fā)明化合物作為抗細胞粘著劑、抗外滲劑和抗細胞-細胞相互作用劑的用途。通常是在無菌或無熱原的條件下制備包含結(jié)構(gòu)式I的化合物的本發(fā)明藥物。這些藥物可以口服或通過非腸道途徑給藥，包括靜脈、肌肉、腹膜內(nèi)、皮下、經(jīng)皮、氣道(氣霧劑)、直腸、陰道、和局部(包括口腔和舌下)給藥。這些藥物通常是液體制劑，除了含有結(jié)構(gòu)式I的化合物之外還包括藥學(xué)可接受稀釋劑或者為固體制劑。如果是口服給藥，本發(fā)明的化合物通常以片劑或膠嚢、粉末或顆?；蛞后w溶液或混懸劑的形式提供?？诜瑒┖信c藥學(xué)可接受輔料例如惰性稀釋劑、崩解劑、粘合劑、潤滑劑、甜味劑、嬌味劑、著色劑和防腐劑混合在一起的活性成份。合適的惰性稀釋劑包括碳酸鈉和碳酸鉤、磷酸鈉和磷酸鈣和乳糖，合適的崩解劑包括玉米淀粉和褐藻酸。粘合劑包括例如淀粉和明膠，而潤滑劑包括，如果存在的話，例如硬脂酸鎂、硬脂酸或滑石粉。如果需要的話可以使用例如單硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯的腸溶包衣材料將藥片包衣以延遲藥物在胃腸道的吸收?？诜z嚢包括硬明膠膠嚢(其中的活性成份與固體稀釋劑混合)和軟明膠膠嚢(其中的活性成份與水或一種油例如花生油、液體石蠟或橄欖油混合)。直腸給藥處方可以為栓劑的形式，含有一種合適的例如由可可脂或一種水楊酸鹽組成的基質(zhì)。適于陰道給藥的處方可以采取陰道栓劑、藥塞、乳劑、凝膠劑、貼劑、泡沫劑或噴霧劑的處方，其中除了活性成份之外還包括本專業(yè)領(lǐng)域認為合適的栽體。通過肌肉、腹膜、皮下、和靜脈途徑給藥的制劑通常包括一種藥學(xué)可接受稀釋劑以提供無菌溶液、乳劑、脂質(zhì)體處方或混懸劑。通常用緩沖液將制劑調(diào)節(jié)至適當(dāng)?shù)膒H值或等滲性。例如合適的稀釋劑包括林格(氏)溶液和等滲氯化鈉。依據(jù)本發(fā)明，液體混懸劑可能包括例如纖維素衍生物、海藻酸鈉、聚乙烯吡咯酮和西黃蓍膠的混懸劑和例如卵磷脂的潤濕劑。合適的防腐劑包括乙基和正丙基對-羥基苯甲酸甲酯。本發(fā)明純化的核心2GlcNAc-T也可以用于食品和飲料中。通常情況下，核心2GlcNAc-T抑制劑的適當(dāng)濃度范圍在100ng至10mg/接受者公斤體重/天，優(yōu)選劑量范圍為1貼to5.0mg/kg/d。通常所需的劑量以每天一次或每天服用數(shù)次小劑量的形式給予。這些小劑量可以以單位劑量的形式服用，例如含有活性成份l嗎至1500mg,優(yōu)選40iiig至1000mg，最優(yōu)選50嗎至700mg。通過參考以下非限制性實施例、圖解和圖例對本發(fā)明進行進一步描述。附圖也展示了純化原薯蕷皂苷(protodioscin)和假原薯蕷急苷的方法，它們也可以從薯蕷屬根組織中純化。圖2顯示了從薯蕷屬根中純化的原纖細薯蕷苷和纖細薯蕷苷的結(jié)構(gòu)。圖3顯示了式VI(a)和VI(b)的優(yōu)選甾體部分圖4顯示了式VI(c)的優(yōu)選甾體部分Z。圖5顯示了式VI的優(yōu)選甾體部分Z。實施例表l:為本發(fā)明的示例化合物。表2:化合物名稱與參考示例索引。表3:從薯蕷屬植物提取的化合物的13CNMR數(shù)據(jù)(在吡啶-d5中)。實施例1:制備本發(fā)明化合物制備和純化薯蕷屬根提取物萃取用MeOH-H20將薯蕷屬根的千燥粉末萃取三次(8:2,分別為36L、26L和24L)。通過真空干燥將第一次萃取物(CDXA-13-148-1)濃縮至5L。將第二次和第三次的萃取物混合(CDXA-13-148-2和13-148-3)并濃縮至3.3L。分級分離將濃縮后的萃取物上樣DianionHP20柱(2.7Kg)，批量為2.0L,用H20和H20-MeOH(8:2,6:4和4:6，每次1LMeOH)洗脫。通過TCL檢測柱洗脫物，收集到8個流分(CDXA-13-149-1至8)。柱層析l:將CDXA國13隱149-4和13-149-5合并(45.4g)，用硅膠吸附(IOIg)，上樣硅膠柱(255g)并用EtOAc-MeOH-H20(80:20:3,1.7L;75:25:3,2.0L;70:30:4,1.04L;65:35:4,2.08L;和60:40:5,1.05L)洗脫。用TCL檢測柱洗脫物，收集到26個流分(CDXA-13-166-F1至F26)。柱層析2:將CDXA-13國166-F14至F22合并(25.2g)，用硅膠吸附(48.2g)上樣硅膠柱(305g)并用EtOAc-MeOH-H2O(80:20:3,600ml;75:25:3，4120ml;70:30:4,2080ml;65:35:4,1050ml;和60:40:5,1050ml)洗脫。用TCL檢測柱洗脫物，收集到28個流分(CDXA-13-167-F1至F28)。純化原纖細薯蕷苷將流分13-167-F5至F16合并并真空濃縮，將分離所得白色粉末，過濾、干燥(CDXA-13-167-K5，2.27g)并在ACN-H20(28:72;100ml)中于90°C油浴回流加熱過夜。用HPLC進一步純化所得產(chǎn)物(Novaprep5000半制備HPLC柱(C18,5.0x20.0cm),先用ACN-H20(25:75)洗脫41.2分鐘，然后用ACN-H20(50:50)洗脫20分鐘，流速為100ml/分鐘。在UV205nm處檢測并收集兩批原纖細薯蕷苷的主要吸收峰(CDXA-13-168-1，374mg;CDXA-13-169-1，552mg)。薯蕷皂苷和纖細薯蕷苷的純化將流分CDXA-13-149-F6(22.4g)上樣至C18柱(296g，5X20cm)，用MeOH-H20(3:7,4:6,45:55,50:50,55:45,60:40,65:35,7:3，75:25,80:20，85:15和90:10,均為1000ml)洗脫，收集到8個流分(CDXA-13-159-F1至F8)。用硅膠(257g硅膠)分離流分CDXA-13-159-F7(4.5g)，用EtOAc-MeOH隱H20(85:15:2,1020ml;80:20:3,3090ml;75:25:3,1030ml)洗脫，得到14個流分(CDXA-13-160-F1至F14)。流分CDXA-13-160-F2和F3為薯蕷苷(CDXA-13-160-1,404mg)，流分CDXA-13-160-F4為纖細薯蕷苷(CDXA-13-160-2,195mg),二者均是白色粉末。原纖細薯蕷苷為純度96.7%的白色粉末纖細薯蕷苷為90.8%的白色粉末從薯蕷屬分離的化合物的質(zhì)鐠和氫核磁共振數(shù)據(jù)纖細薯蕷苷(+)ESI-MSm/z907.56[M+Na+];力NMR(400Hz，C5D5N)50.69(3H,d,J=5.6Hz,27-H3)，0.83(3H,s,18-H3),1.07(3H，s:19-H3),1.14(3H，d,J=7.2Hz,21-H3),1.79(3H,d,J=6.4Hz,rha6'-H3):4.96(1H,d,J=7.2Hz,gc1畫H),5.12(1H,d,J=7.6Hz,glc1"國H)，5.33(1H,d,J=5.2Hz,6-H),6.41(1H,s,ilial'-H)。原纖細薯蕷苷(+)ESI-MSm/z1087.56[M+Na+];，HNMR(400HzC5D5N)S0.91(3H,s,18-H3),1.00(3H，d,J=6.4Hz,27-H3),1.08(3H,s,19-H3),1.35(3H,d,J=6.8Hz,21-H3),1.78(3H,s,J=6.0Hz,Rha-6'-H3),4.84(1H,d,3=7.6Hz,Glc-1"'國H),4.97(1H,d,J=6.8Hz,Glc陽l'隱H),5.13(1H,d,J=8.0Hz,glcl"-H),5.33(1H,d，J=4.0Hz,6畫H),6.42(IH,s,Rha-1'-H)。薯蕷皂苷(+)ESI-MSm/z891.55[M+Na+];!HNMR(400Hz,C5D5N)S0.70(3H,d，J=4.8Hz,27-H3),0.84(3H,s,18-H3),1.06(3H,s,19-H3),1.15(3H,d,J=6.8Hz,21-H3),1.66(3H,d,J=4.8Hz,rha6"-H3),1.79(3H,d,J=6.4Hz,rha6'-H3),4.97(1H,d,J=6.8Hz,glcl鄰,5.31(1H,d,J=4.0Hz,6-H),5.91(1H,s,rhal"-H),6.45(1H,s,rhal'-H)。實施例2化合物的生物學(xué)活性。2a.細胞培養(yǎng)在添加有10%小牛血清、2mM谷氨酰胺、100IU/ml青霉素和100將/ml鏈霉素的RPMI培養(yǎng)基中培養(yǎng)人白細胞系(U937)。2b.檢測核心2GlcNAc-T的活性可以-使用三種方法(i)葡萄糖誘導(dǎo)核心2GlcNAc-T將白細胞(U937細胞)于正常濃度的葡萄糖(5.8mM)或高濃度葡萄糖溶液中(15mM)于37。C溫育24小時。溫育之后，可將細胞裂解并保存在-20。C直至用于檢測核心2GlcNAc-T的活性或立即用于檢測。(ii)TNF-a誘導(dǎo)核心2GlcNAc-T在存在和不存在待檢測化合物的情況下將白細胞(U937細胞)力口入重組TNF-a(8pg/ml)中。溫育24小時之后檢測核心2GlcNAc-T的活性，用pmoles/h/mg蛋白表示。(iii)無細胞體系檢測核心2GlcNAc-T在無細胞體系檢測核心2GlcNAc-T時，將來自過度表達TNF-a的轉(zhuǎn)基因小鼠(雌性,B6.SJL誦Tg(TNF)由Taconic-M+B，Bomholtveg10,8680Ry,Denmark提供)或用于生物醫(yī)學(xué)研究的近交系BB大鼠(FestingM.F.W.(Ed.)的心肌細胞裂解物與不同濃度的被檢測化合物于37。C溫育1小時。檢測核心2GlcNAc-T的活性，以pmole/h/mg蛋白表示。2c測定核心2GlcNAc-T的活性為了檢測核心2GlcNAc-T的活性，用PES沖洗白細胞，冷凍并在0.9%TritonX-100中于0。C裂解。按照前述方法測定核心2GlcNAc-T的活性(16)。在無細胞體系檢測中用心臟裂解物代替細胞裂解物。在下述條件下檢測50mM2(N-嗎啉代)乙磺酸(MES,Sigma,Dorset,UK)、pH7.0,1mMUDP畫6卩H]-N-乙酰葡糖胺(16，000dpm/nmol,NENLifeScienceProducts,Hounslow,UK)、0.1MGIcNAc(Sigma,Dorset,UK)、底物為1mM半乳糖卩l(xiāng)-3N-乙酰半乳糖胺a-對硝基苯酚(Sigma,Dorset,UK)和16pi的裂解物(100-200昭蛋白質(zhì))。終體積為32pl。將該混合物在37。C溫育1小時后，用1ml的用冰預(yù)冷的蒸餾水起始反應(yīng)并用C18Sep-Pak柱(Waters-Millipore,Watford,UK)處理。在用20ml蒸餾水洗脫柱子后，用5ml曱醇洗脫產(chǎn)物。用液體閃爍(3-計數(shù)器(LKB-Wallac,London,UK)計算樣品的放射性。在不存在加入受體的情況下檢測核心2GlcNAc-T的內(nèi)源性活性。比活以pmole/h/mg細胞蛋白表示。在任何一種情況下均用BioRad蛋白檢測儀(BioRad,Hertfordshire,UK)檢測蛋白質(zhì)濃度。表4:示例化合物的近似ICs。值(nM)<table>tableseeoriginaldocumentpage30</column></row><table>聲夢糖苷IV"45NA(*)如上所述使用TNF-a小鼠的心臟細胞裂解物進行無細胞檢測。(**)參照化合物(***)22nM對核心2GlcNAc-T的抑制為89%NA=22.5nM下未檢測到活性。表5所使用化合物的近似純度化合物編號HPLC檢測近似純度原纖細薯蕷苷196.7纖細薯蕷苷1898胡,巴皂苷IVa4389%,筍糖苷I44>95%參考文獻1.HuK.PlantaMedica,63(2),161-165(1997).2.YangD.等JournalofAgriculturalandFoodChemistry,51(22),6438-6444(2003).3.AquinoR.等J.Nat.Products49(2)1096-1101(1986).4.TomovaM.等IntConf.ChemBiotechnol.3,(1)298-302.5.LiuH.W.等JAsianNatProdRes,5(4):241-247(2003).6.SangS.Phytochemistiy，52(8)，1611-1615(1999).7.ZhengQ.等Steroids,69(2),111-119(2004).8.Hernandez,J.C.Bioorganic&MedicinalChemistry12(16):4423-4429(2004).9.IaoueT.等Phytochemistry40(2),521-5(1995).10.KawasakiT.等Chemical&PharmaceuticalBulletin,22(9):2164-75(1974).11TsukamotoTandKawasakiT.PharmBull4(2):104-8(1956).12.ChenC.等YunnanZhiwuYanjiu,9(4),495-502(1987).13.TangS.等YunnanZhiwuYanjiu，9(2),233-8(1987).14.KintyaP.(TranslationofKhimiyaPrirodnykhSoedinenii〉[VolumeDate1997〗，33(6),658-662(1998).15.YinF.等J.NatProducts,67(6),942-952(2004).16.FujitaS.等Phytochemistry,38(2),465-72(1995).17.YoshikawaK等.Chemical&PharmaceuticalBulletin,40(9):2287-91(1992).18.YoshikawaK.等Chemical&PharmaceuticalBulletin,40(9):2275-8(1992).19.RenaultJ.等，Phytochemistry,44(7),1321-1327(1997).20.RavikumarP.R,等.IndianJ.Chem.26B,1012-1017(1987).21.YoshikawaM.等.Heterocycles47,397-405(1998).22.MimakiY.等Phytochemistry.33(3):675-82(1993).23.LiuC.等.YaoxueXuebao,18(8),597-606(1983).24.ChenC.等YunnanZhiwuYanjiu,6(1)，111-17(1984)。權(quán)利要求1.式I的化合物或其藥學(xué)可接受鹽、醚或酯在生產(chǎn)治療涉及到核心2GlcNAc-T有害酶活的疾病的藥物中的用途，其中R1為H、C1-6烷基、C1-6羥基烷基、C1-6烷氧基或C1-6-烷氧基-C1-6-烷基；R2為H、-OH或C1-6烷氧基；Sac1和Sac2為獨立選擇的糖部分；并且Z為甾體部分。2.根據(jù)權(quán)利要求l的用途，其中R為-H、-CH3或-CH20H。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的用途，其中R1為-CH20H，環(huán)為葡萄糖部分。4.才艮據(jù)權(quán)利要求1至3中任何一項的用途，其中W為-OH。5.根據(jù)權(quán)利要求1至4中任何一項的用途，其中SaJ選自戊糖和己醛糖。6.根據(jù)權(quán)利要求1至5中任何一項的用途，其中Sac1為己酪糖。7.根據(jù)權(quán)利要求1至6中任何一項的用途，其中SaJ為葡萄糖。8.根據(jù)權(quán)利要求1至7中任何一項的用途，其中Sac^選自葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、木糖和鼠李糖。9.根據(jù)權(quán)利要求1-8中任何一項的用途，其中為Sac2為鼠李糖。10.根據(jù)權(quán)利要求1-9中任何一項的用途，其中甾體部分Z的結(jié)構(gòu)式為:其中R3、R"和R"獨立選自H和-OH;R4和R25獨立選自Cw烷基；R5、R7和R2獨立選自H和Cw烷基；RS為H或-OH,或者沒有通常也存在的H而且116為=0;R8為H、-OH或d.6?；蚴沁x自VIIa或VIIb的基團;<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>R9為H;R11為H、Cw烷基或-OH,或R9和R11—起形成-CH2-CHr基團；R"為H、Cw烷基或d—6羥基烷基；優(yōu)選R"為H、-CH2OH或R"為Cw羥基烷基；R27為d.6烷基、d.6羥基烷基或被S4取代的d.6烷基；R28為d.8烷基、C2.8烯基或C2.8炔基；34為糖；并且zzzz表示單鍵或雙鍵。11.根據(jù)權(quán)利要求17的用途，其中甾體部分Z引入選自以下的基團-CH3;<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>其中R^為H或-OH;R14、R19、1123和1129獨立選自d—6烷基；R"為H或-OH;R16為H、-OH或d.6烷氧基，或R15和R16—起形成連接相鄰碳原子雙鍵的第二鍵；R"為C"烷基、(32-6烯基、C2-6炔基或是被選自-OH、Cw烷氧基和Sac3的一個或多個基團取代的Cw烷基；R"為Cw烷基、Cw羥基烷基或-CH2;1122為-0比R24為d—6烷基、(32.6烯基或(32.6炔基；R犯為d-6羥基烷基或被SacS取代的C-6烷基；R"為d.e烷基；Sac3和Sac5獨立選自糖基；并且X為O或NH。12.根據(jù)權(quán)利要求10或11中任何一項的用途，其中R"為C2.6烯基或被一個或多個選自-OH、-OCH3和Sac3的基團取代的Cw烷基。13.根據(jù)權(quán)利要求10至12中任何一項的用途，其中1117選自3-曱基-丁-2-烯基、2-甲基-丙-2-烯基、4位被Sa取代的3-甲基丁烷基、4位被Sac^取代的l-羥基-3-曱基丁烷基或者4位被SaJ取代的1-甲氧基-3-甲基丁烷基。14.根據(jù)權(quán)利要求10至13中任何一項的用途，其中Sac^為葡萄糖。15.根據(jù)權(quán)利要求10至14中任何一項的用途，其中R"為-CH3、-CH2OH或《H2。16.根據(jù)權(quán)利要求10至15中任何一項的用途，其中R"為-CHs或陽CH2-Sac4。17.根據(jù)權(quán)利要求15的用途，其中Sac"為葡萄糖。18.根據(jù)權(quán)利要求10至17中任何一項的用途，其中R"為3-乙基-4-曱基-戊烷基或5-甲基-己-4-烯基。19.根據(jù)權(quán)利要求10至18中任何一項的用途，其中113()為-CH2-Sac5。20.根據(jù)權(quán)利要求18中任何一項的用途，其中Sa為葡萄糖。21.根據(jù)權(quán)利要求10至20中任何一項的用途，其中X為O。22.根據(jù)1-21中任何一項權(quán)利要求的用途，其中所述化合物選自原纖細薯蕷苷、原新纖細薯蕷苷、甲基原纖細薯蕷苷、甲基原新纖細薯蕷苷、假原新纖細薯蕷苷、血竭苷Q、薯蕷苷E、血竭苷P、韭菜籽皂苷C、icogenin、纖細薯蕷苷、collettisideIV、17-OH纖細薯蕷苷、血竭苷H、血竭苷L、血竭苷I、百合糖苷H、百合糖苷I、血竭苦D、neoalsosideA、neoalsosideC、北拐參急苦V、LotosideII、化合物17、化合物21和化合物25。23.根據(jù)權(quán)利要求1至22中任何一項的用途，其中待治療的疾病選自血管疾病、自身免疫和炎癥。24.根據(jù)權(quán)利要求1至22中任何一項的用途，其中待治療的疾病選自多發(fā)性硬化、肌病、視網(wǎng)膜病、腎病、動脈粥樣硬化、哮喘、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、腸炎、移植排斥、缺血再灌注損傷、再狹窄、回腸炎、克隆(氏)病、血栓、結(jié)腸炎、狼瘡、凍傷、急性白血球誘導(dǎo)的肺損傷、創(chuàng)傷性休克、敗血癥性休克、腎炎、牛皮辨、膽嚢炎、肝硬變、憩室炎、暴發(fā)型肝炎、胃炎、胃和十二指腸潰瘍、肝腎綜合征、應(yīng)激性結(jié)腸綜合征、黃疰、胰腺炎、潰瘍性結(jié)腸炎、維-奧二氏綜合征T-細胞激活、艾滋病、可使用核心2衍生葡聚糖進行治療的由病毒、細菌、原蟲和寄生蟲引起的感染、癌癥和癌轉(zhuǎn)移。25.—種藥用組合物，所述組合物包含用于治療權(quán)利要求23或24所述疾病的式I化合物。全文摘要本發(fā)明提供了一種治療涉及到核心2GlcNAc-T有害活性的疾病的方法，該方法包括給予需要治療的病人治療有效量的結(jié)構(gòu)式I的核心2GlcNAc-T抑制劑或其藥學(xué)可接受鹽、醚、酯，其中R¹為H、C_1-6烷基、C_1-6羥基烷基、C_1-6烷氧基或C_1-6-烷氧基-C_1-6烷基；R²為H、-OH或C_1-6烷氧基；S¹和S²為獨立選擇的糖部分；Z為固醇部分。文檔編號A61P37/00GK101257909SQ200680032400公開日2008年9月3日申請日期2006年7月6日優(yōu)先權(quán)日2005年7月6日發(fā)明者R·奇伯申請人:英國技術(shù)集團國際有限公司