專利名稱：神經(jīng)植入物的制作方法
碎申經(jīng)4直入物本發(fā)明涉及一種生物相容性神經(jīng)植入物，其用于對例如因意外事故損 傷或手術(shù)后所發(fā)生的神經(jīng)斷裂或缺陷部位進行搭橋。本發(fā)明神經(jīng)植入物適 于使斷裂的神經(jīng)有可能越過缺陷部位而再生，因此可能在短時間內(nèi)使功能 性興奮傳導也越過經(jīng)由神經(jīng)植入物橋接的缺陷部位?，F(xiàn)有技術(shù)迄今曾經(jīng)嘗試過，神經(jīng)上的斷裂或者神經(jīng)內(nèi)的缺陷部位(此時分離的 神經(jīng)端部不能再互相連接)借助于輔助裝置得以再生，從而使缺陷部位用 自體神經(jīng)段來橋接，例如來源于外周神經(jīng)的神經(jīng)段。此外還已知，外周神經(jīng)損傷用置入的自體小靜脈或膠原小管進行橋接 來治療。此外，由EP 1 523 999 Al還已知，血管內(nèi)的移植物，即所謂的支架 (Stents),通過蜘蛛絲成分提供較大的機械強度。WO 01/56626只記敘了用蜘蛛絲作為縫合材料，而不是作為橋接神經(jīng) 斷裂的植入物。WO 2005/094911，公開于本專利申請的優(yōu)先權(quán)日之后，因此僅僅涉及 有關(guān)現(xiàn)有技術(shù)的新穎性；它記敘了用于制備包括包裹物在內(nèi)的植入物的連 接材料，所述植入物應能用于神經(jīng)再生。WO 2005/094911未提及，純蜘蟲朱 絲已適合使神經(jīng)細胞越過缺陷部位生長，而是記敘了許多可供選擇的連接 材料，由其可制得形狀穩(wěn)定的植入物。US 2003/0100108 Al記敘了制備在基質(zhì)上的腱植入物，該腱植入物也包 括絲線。這些腱植入物利用了絲線的機械特性，但沒有利用其能力來使神 經(jīng)在缺陷部位上生長。DE 100 53 611 A1記敘了一種導管，在其中軸突能生長。該導管，也稱 作導軌，由聚合的羥基羧酸組成，其中可安置經(jīng)擠壓加工制得的合成單絲。本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題與已知的用于橋接神經(jīng)缺陷部位的移植物相比，本發(fā)明的目的是提供 一種自體移植物或者連接材料的替代物。本發(fā)明的一個特別的目的在于，物》另一個目的是提供一種神經(jīng)植入物，該神經(jīng)植入物不需要或者不包括 自體神經(jīng)，而且特別優(yōu)選，也不需要或不包括其他的自體組織。本發(fā)明的一個特別的目的在于，提供一種在制造藥物組合物時應用的 神經(jīng)植入物，其可才喬接神經(jīng)內(nèi)的缺陷部位，同時在這一應用時優(yōu)選僅僅一 次手術(shù)處理即足以能使神經(jīng)再生以產(chǎn)生機能興奮傳導，而且特別優(yōu)選的是， 另外在缺陷部位范圍內(nèi)重建自然的神經(jīng)組織。發(fā)明簡述為解決上述發(fā)明目的，本發(fā)明提供一種神經(jīng)植入物，這種神經(jīng)植入物 是蜘蛛絲。本發(fā)明特別提供了供制造藥物組合物用的蜘蛛絲，其醫(yī)學適應 癥是應該被橋接的神經(jīng)缺陷。在第一種實施方式中，該神經(jīng)植入物由絲線構(gòu)成，優(yōu)選由多根天然蜘 蛛絲的絲線構(gòu)成，它置于神經(jīng)端部之間，這些神經(jīng)端部限定了神經(jīng)內(nèi)缺陷 部位的界限。在此情況下，將蜘蛛絲絲線這樣對齊，從而使它跨越神經(jīng)缺 陷部位的間距，在這間距之上預期產(chǎn)生再生的神經(jīng)組織。在第二種實施方式中，本發(fā)明神經(jīng)植入物由置于軟管狀包裹物中的蜘 蛛絲絲線構(gòu)成。膠原小管適合用作這種接納蜘蛛絲的包裹物，但優(yōu)選為自 體小靜脈、異體無細胞小靜脈或者免疫學相容的小靜脈。在第三種實施方式中，本發(fā)明提供一種神經(jīng)植入物，該神經(jīng)植入物已 包含自體神經(jīng)細胞，優(yōu)選施旺細胞。在該實施方式中，神經(jīng)植入物具有軟 管狀包裹物，其為根據(jù)第二種實施方式的包裹物，在其內(nèi)部包括縱向放置 的蜘蛛絲，但其中在包裹物和蜘蛛絲之間所留的空腔中填滿生物相容性基質(zhì)材料，例如 Matrigel (可從 Becton Dickinson 購得，小鼠 Engelbreth-Holm-Swarm (EHS)肉瘤的提取物，該肉瘤是含有ECM蛋白質(zhì)的 腫瘤。主要成分是層粘連蛋白，其次為膠原IV、硫酸乙酰肝素-蛋白聚糖、 觸覺蛋白(entactin )和巢蛋白(nidogen ))。在第三種實施方式的另一提高形式中，不單獨使用基質(zhì)材料，而采用 基質(zhì)材料與活體外培養(yǎng)的施旺細胞的混合物，優(yōu)選是培養(yǎng)的自體施旺細胞，或者培養(yǎng)的免疫相容性施旺細胞。該實施方式的缺點是，為獲取培養(yǎng)的施 旺細胞，必需事先手術(shù)取出神經(jīng)組織，以及培養(yǎng)取出的施旺細胞。因此， 于此場合下，在可以使用本發(fā)明神經(jīng)植入物之前，必需事先進行外科手術(shù) 來取得神經(jīng)組織，例如外周神經(jīng)，而且也必需有培養(yǎng)期，來產(chǎn)生必要數(shù)目 的培養(yǎng)施旺細胞。在第四種實施方式中，本發(fā)明神經(jīng)植入物是由線狀蜘蛛絲構(gòu)成的，所 述蜘蛛絲圍繞在載體元件周圍。在此情況下，作為載體元件可以再度使用 許多平行放置的線狀蜘蛛絲絲段，也可使用自體的或者無細胞小靜脈，以 及由自體的或者無細胞小靜脈的壁構(gòu)成的條狀元件，以及條狀合成材料， 例如外科縫合材料。本發(fā)明神經(jīng)植入物的各實施方式，適合在在神經(jīng)斷裂或者缺陷部位進 行外科置入后，于短時間內(nèi)重新恢復功能性興奮傳導，并起著越過斷裂或 者缺陷部位而形成自然神經(jīng)組織的作用。與此相應，本發(fā)明各實施方式可 用來制備醫(yī)學上用于治療神經(jīng)缺陷部位的材料，從而使得缺陷部位經(jīng)由缺 陷部位神經(jīng)組織的定向生長而橋接。因此，通過在2至4.5 cm或更大的間距中橋接哺乳動物運動神經(jīng)中的 缺陷部位，可至少部分地重新建立興奮傳導，而且在數(shù)小時至2~5日內(nèi)越 過神經(jīng)斷裂或缺陷部位，基本上，優(yōu)選完全，恢復神經(jīng)功能作用。在2至 10日，優(yōu)選3至4日的時間內(nèi)，顯示本發(fā)明神經(jīng)植入物所占據(jù)的神經(jīng)斷裂 或缺陷部位上通過產(chǎn)生功能性神經(jīng)組織而再生神經(jīng)組織，優(yōu)選是相對于天 然神經(jīng)組織沒有顯示出組織學的差別?；谟^察到本發(fā)明神經(jīng)植入物至少是在一些神經(jīng)或者植入物接受者 中，能夠越過神經(jīng)缺陷而不經(jīng)植入物接受者的神經(jīng)細胞生長就可至少部分 地使興奮傳導得以實現(xiàn)，現(xiàn)在可以認為，神經(jīng)植入物中所含的蜘蛛絲在植 入神經(jīng)斷裂或者缺陷部位后，能夠至少部分地傳導神經(jīng)電脈沖。本發(fā)明神經(jīng)植入物的一個特別優(yōu)點在于，神經(jīng)在短時間段內(nèi)越過斷裂 或者缺陷部位而再生。作為斷裂神經(jīng)快速再生的結(jié)果，可以斷定，神經(jīng)斷 裂或者缺陷部位所圍繞的組織沒有顯著的組織學可證明的退化。本發(fā)明神經(jīng)植入物的一個特別優(yōu)點是，于數(shù)日至僅數(shù)周內(nèi)，用本發(fā)明 的神經(jīng)植入物連接的端部(這些端部限制神經(jīng)斷裂或缺陷部位的邊界)在 神經(jīng)植入物范圍內(nèi)在組織學上具有與天然神經(jīng)組織學上沒有區(qū)別的組織，而且缺陷部位優(yōu)選地用施旺細胞橋接。所以，在運動神經(jīng)的缺陷部位中植入本發(fā)明神經(jīng)植入物之后，觀察到 因意外事故或者手術(shù)而分離的軸突被新長出的軸突取代，并且越過神經(jīng)植 入物在缺陷部位區(qū)域內(nèi)發(fā)生天然神經(jīng)組織的快速重建。本發(fā)明神經(jīng)植入物的另 一個優(yōu)點是，以足夠大的量提取對于其功能而 言是必需的無菌的來自蜘蛛的線狀蜘蛛絲(其優(yōu)選保持在無菌條件下)，并 可直接供本發(fā)明神經(jīng)植入物之用。就本發(fā)明的目的而言，術(shù)語蜘蛛絲或者蜘蛛絲絲線優(yōu)選從輪網(wǎng)蜘蛛(wheel net spider )采取的蜘蛛絲，例如從絡新婦(Nephila)屬蜘蛛，特別是 對羽足絡新婦蜘蛛(A^p/H'/" c/"Wp^)采得的蜘蛛絲。此外，不太優(yōu)選的是， 就本發(fā)明的目的而言，術(shù)語蜘蛛絲包括改性蜘蛛絲，例如用物理方法經(jīng)冷 卻及/或加熱、牽伸或者輻射處理的蜘蛛絲，或者化學改性的蜘姝絲，以及 用生物技術(shù)從微生物、植物或者昆蟲制造的蜘蛛絲蛋白所得到的絲線。此 外，本發(fā)明的目的而言，屬于術(shù)語蜘蛛絲還有從其他昆蟲制得的蛋白絲， 例如從蝴蝶毛蟲，特別是蠶，或者蛾獲得的蛋白絲。用Y-射線來滅菌。 發(fā)明詳述為了橋接神經(jīng)斷裂或者缺陷部位，將本發(fā)明神經(jīng)植入物放入神經(jīng)中， 包括運動神經(jīng)，例如坐骨神經(jīng)或者臂神經(jīng)叢(plexus brachialis),或者感覺神 經(jīng)，如視神經(jīng)和聽神經(jīng)，以及植物神經(jīng)。該神經(jīng)植入物特別可用于哺乳動 物，并優(yōu)選可用于人類。為此，在外科手術(shù)中，其內(nèi)含有線狀蜘蛛絲的本發(fā)明神經(jīng)植入物的第 一端與神經(jīng)斷裂或者缺陷部位的神經(jīng)端部的第一端連接，以及將含有線狀 蟲知蛛絲的神經(jīng)植入物的第二端與對面的神經(jīng)斷裂或者缺陷部位的第二神經(jīng) 端部連接。通過將第一神經(jīng)端部和神經(jīng)植入物的第一端(也即其中含有線狀 蜘蛛絲)在空間上的緊密排列，以及將第二神經(jīng)端部與神經(jīng)植入物第二端(也 即其中含有線狀蜘蛛絲)在空間上的緊密排列，本發(fā)明神經(jīng)植入物和神經(jīng)端 部之間(所述神經(jīng)端部限定斷裂或者缺陷部位的邊界)得以連接。所述空間上的緊密排列，優(yōu)選借助縫合固定，例如用已知的外科縫合材料，或者借助粘合劑，例如用已知的纖維蛋白膠粘劑。在本發(fā)明的第 一 實施方式中(在該實施例中本發(fā)明神經(jīng)植入物僅由線 狀蜘蛛絲構(gòu)成)，用外科手術(shù)的方法產(chǎn)生空間上的緊密排列，優(yōu)選將限定神 經(jīng)斷裂或者缺陷部位邊界的各個神經(jīng)端部與神經(jīng)植入物的各個端部固定。 在其中線狀蜘蛛絲置于包裹物內(nèi)、優(yōu)選自體的或者無細胞小靜脈內(nèi)的本發(fā) 明神經(jīng)植入物的各實施方式中，作為直接空間排列、任選地通過將蜘蛛絲 固定在神經(jīng)端部而加以連接的可選擇形式，也可通過將斷裂的神經(jīng)端部逐 段地插入神經(jīng)植入物包裹物的開放端、并將其固定在包裹物上(例如通過 將神經(jīng)端部與神經(jīng)植入物包裹物的端部系住、或者縫合、或者粘貼)而互 相連4妄。在優(yōu)選實施方式中，線狀蜘蛛絲以l根，優(yōu)選10至10000根，更優(yōu)選 100至IOOO根平行片段的形式包括在神經(jīng)植入物中。另外則也可以使神經(jīng)植入物內(nèi)的線狀蜘蛛絲成為另一種結(jié)構(gòu)，例如扭絞、以多束線狀蜘蛛絲的 形式彼此放置，例如將蜘蛛絲以束的形式互相交織，或者將線狀蜘蛛絲圍 繞載體元件周圍一層或多層、同向或者反向纏繞。由此可形成相應于第四 種實施方式的本發(fā)明神經(jīng)植入物，或者作為對第二種或者第三秤實施方式 的補充而具有載體元件，以便使載體元件也置于包裹物內(nèi)。同時可以用自 體的或無細胞小靜脈或者這種自體或非細胞的小靜脈的樁狀或條狀的壁節(jié) 段作為載體元件，或者可以用樁狀或條狀生物相容性材料，例如由線狀蜘 蛛絲或者外科縫合材料構(gòu)成的生物相容性材料。 下面參照附圖來詳細說明本發(fā)明，其中 -

圖1示明本發(fā)明神經(jīng)植入物第一種實施方式的示意圖，-圖2示明本發(fā)明神經(jīng)植入物第二種實施方式的示意圖，-圖3示明本發(fā)明神經(jīng)植入物第三種實施方式的示意圖，-圖4示明本發(fā)明神經(jīng)植入物第四種實施方式的示意圖，以及-圖5示明活體外培養(yǎng)施旺細胞過程中的線狀蜘蛛絲的顯微照片。圖1中示出本發(fā)明神經(jīng)植入物中線狀蜘蛛絲的示意排列，即A)蜘蛛絲1的絲段基本平行放置，B)線狀蜘蛛絲1相互絞纏的絲束，以及C)線狀蜘蟲朱絲1的絞轉(zhuǎn)的絲束。據(jù)信，線狀蜘蛛絲對神經(jīng)細胞生長，特別對施旺細胞生長起著準繩或者導軌的作用，從而神經(jīng)細胞可以在其上對準并定向，以便橋接兩個分開的神經(jīng)端部之間的斷裂或者缺陷部位。圖2中示意顯示出本發(fā)明神經(jīng)植入物第二種實施方式的剖面，其中線 狀蜘蛛絲1置于包裹物2內(nèi)，優(yōu)選基本上平行于包裹物2的縱軸線。圖3中以第二種實施方式的深化形式，示意顯示本發(fā)明神經(jīng)植入物的 第三種實施方式，其中線狀蜘蛛絲1基本上以縱向置于包裹物2內(nèi)，其中 蜘蛛絲1和包裹物2的內(nèi)表面之間所留間隙用生物相容性基質(zhì)材料3填滿， 任選與自體的或者免疫學相容的培養(yǎng)的神經(jīng)細胞(優(yōu)選施旺細胞)混合。圖4示明本發(fā)明神經(jīng)植入物第四種實施方式的可行實施方式，該神經(jīng) 植入物具有載體元件4，以便在其周圍安置線狀蜘蛛絲1，例如以絲束圍繞 載體元件4周圍纏繞，或者以多個絲束同向或反向圍繞載體元件4周圍纏 繞。該載體元件4優(yōu)選是條狀物，該條狀物取自自體小靜脈，或者無細胞 小靜脈的條狀物，或者獲自生物相容性材料，例如外科材料。圖4B中顯 示出，載體元件4同樣可由線狀蜘蛛絲1構(gòu)成，或者由外科縫合材料和蜘 蛛絲絲線的混合物構(gòu)成。實施例1:蜘蛛絲的生產(chǎn)新婦蜘蛛(A^p/n7a c/av^ e勻用膠帶固定在底座上。在機械刺激絲腺之后，可 取得所分泌的由蜘蛛絲組成的絲，為試驗目的，將其在凈化臺上環(huán)繞無菌 的50 mLFalcon小管進行巻曲。為此，可讓Falcon小管以5至20轉(zhuǎn)/分鐘的 轉(zhuǎn)數(shù)旋轉(zhuǎn)。為進行下面的試驗和實施例，不經(jīng)另外的處理或者滅菌就可使 用如此獲得的線狀天然蜘蛛絲。實施例2:橋接坐骨神經(jīng)中間距為2.5cm的缺陷部位 作為帶有缺陷部位的運動神經(jīng)的實施例，外科切除大鼠左后腿上的一段距離為2.5 cm的坐骨神經(jīng)。在相同的外科手術(shù)中，在無菌條件下，將各 個動物身上的各自的缺陷分別用下列加以連接，所述蜘蛛絲按照實施例1 制備1) 一束約250至350根近似平行排列、長度約2.8 cm的蜘蛛絲絲線，或者2) 兩束各約200根蜘蛛絲、長度約3 cm、將其圍繞一條無細胞小靜脈的帶反向纏繞(邊緣長度1 mm)。在此情況下，將構(gòu)成缺陷部位邊界的坐骨神經(jīng)的神經(jīng)端部面對神經(jīng)植 入物的蜘蛛絲端部放置，并下述方法任擇其一以將兩端相互固定a) 將頭頂頭》t置的兩個端部用蜘i朱絲捆扎起來，b) 通過用外科縫合材料縫合，或者c) 通過用纖維蛋白膠粘劑膠合。在此情況下，觀察到大鼠從麻醉中蘇醒后，左后爪不像在坐骨神經(jīng)斷 裂時的通常所見那樣不自然地保持夾緊狀態(tài)，而是相反爪子采取自然張開 的姿態(tài)。不需要另一次手術(shù)，在2至4日之后，術(shù)后的動物其左后腿就能 沒有顯著妨礙地自然活動。通過神經(jīng)植入物的組織學研究確定，在植入后5至10日，用本發(fā)明神 經(jīng)植入物橋接的神經(jīng)斷裂區(qū)域中，已形成神經(jīng)組織，所形成的神經(jīng)組織與 天然神經(jīng)組織沒有顯著的組織學區(qū)別。這種神經(jīng)植入物也被用于橋接家兔聽神經(jīng)和-見神經(jīng)的缺陷部位(l、 3和 5mm)。植入后2至5或者10日內(nèi)，可觀察到興奮傳導。在按照2)有載體元件的神經(jīng)植入物情況下，已確認，無細胞小靜脈小 條已完全與周圍的組織相適應。在蜘蛛絲區(qū)域中未觀察到有炎癥的過程。實施例3:有包裹物的神經(jīng)植入物作為本發(fā)明神經(jīng)植入物第二種實施方式的實施例，將按照實施例1制 備約800 ~ 1000根蜘蛛絲絲線裁成長度約3.5cm,并且以基本上軸向穿入無 細胞小靜脈中。按本發(fā)明的目的，作為神經(jīng)植入物組成部分的包裹物，也 可以具有縱剖面，從而可將蜘蛛絲嵌入縱向拆開的包裹物中。接著，可以 閉合包裹物的縱剖面，例如不用額外措施通過縱剖面切口邊緣的靠近借助 包裹物材料的內(nèi)應力，或者通過縫合或者粘合縱剖面，或者通過捆扎包裹 物，例如用蜘^Mi絲線或者外科縫合材料?？捎糜诒景l(fā)明神經(jīng)植入物的無細胞d、靜脈或者無細胞'』、靜脈條狀物， 是由外周靜脈來制造。作為對此的例子，從因其他實驗目的而殺死的豬取 腿靜脈。所述小靜脈的直徑約2至3mm，長度為5 cm。為進行無細胞化， 將小靜脈置于胰蛋白酶溶液(0.05%(重量)胰蛋白酶，0.02。/。(重量)EDTA)中24小時，并振動溫育。接著，除去胰蛋白酶溶液，并將這時已無細胞的小靜脈借助在振動下用PBS溫育進行凈化，這樣的洗滌至少重復一次。如此 無細胞小靜脈可直接使用，或者在間隔時間內(nèi)在-80。C下深度冷凍。為了將神經(jīng)植入物與限定缺陷部位邊界的神經(jīng)端部連接起來，將諸神 經(jīng)端部各插入包裹物的端部，此時對其中放置的蜘蛛絲要加以安排，以使 之接觸神經(jīng)端部，優(yōu)選頭對頭或者端部對端部。為了固定起見，將各神經(jīng) 端部縫在包裹物端部上。該實施方式中可供擇用的神經(jīng)植入物，其蜘蛛絲絲線長度突出于包裹 物端部，例如在每個端部上約3 ~5 mm。然后，將神經(jīng)端部這樣與神經(jīng)植 入物連接使處于包裹物外面的蜘蛛絲絲線的線段各保持對著神經(jīng)端部的 狀態(tài)，并將毗鄰的端部用蜘蛛絲捆扎，或者涂以纖維蛋白膠粘劑。根據(jù)實施例3所述將該神經(jīng)植入物應用于大鼠坐骨神經(jīng)缺陷時，能夠 橋接約5 cm的間距，因而在植入后3至5日內(nèi)恢復神經(jīng)的功能性。根據(jù)實施例3,在此也沒有觀察到所涉及的爪子在間隔時間內(nèi)出現(xiàn)爪樣 的緊緊抓住的姿態(tài)。組織學的研究表明，在此，植入后約5至10天與天然 神經(jīng)組織也沒有顯著區(qū)別。實施例4:帶有包裹物和生物相容性基質(zhì)材料的神經(jīng)植入物 作為本發(fā)明神經(jīng)植入物第三實施方式的實施例，按實施例3所述具有軸向排列的蜘蛛絲的、由無細胞小靜脈構(gòu)成的神經(jīng)植入物，借助注射器填滿Matrigel。這一神經(jīng)植入物的功能試驗與實施例3相比得到了類似的結(jié)果。因此， 現(xiàn)在可以認為，生物相容性基質(zhì)材料對神經(jīng)植入物特性沒有帶來重要改進。實施例5:具有包裹物和生物相容基質(zhì)材料的神經(jīng)植入物與培養(yǎng)的自體 施旺細胞混合為了制備具有包裹物的神經(jīng)植入物——其中在包裹物內(nèi)部以軸向?qū)R 安置了蜘蛛絲絲線，并且包裹物所余留的內(nèi)部空間填以與培養(yǎng)的自體施旺 細胞混合的生物相容性基質(zhì)材料一一采用了按照實施例3制得的無細胞小 靜脈，其中由200至300根平行的蜘蛛絲絲線構(gòu)成的絲束嵌入該小靜脈。為了生產(chǎn)培養(yǎng)的自體施旺細胞，使用了外周神經(jīng)，其為手術(shù)取出的，，并切成約lmm大小的段。將這些神經(jīng)段轉(zhuǎn)移到 未涂覆的培養(yǎng)皿內(nèi)的培養(yǎng)基(DMEM/F12, 20%胎牛血清，1%青鏈霉素)中， 在37。C， 5。/。C02下溫育約3周。該介質(zhì)每周更換三次新鮮培養(yǎng)基。如果觀 察到成纖維細胞繁殖生長，則將神經(jīng)段移置到新的培養(yǎng)皿中，并繼續(xù)培養(yǎng)。生長出第一批施旺細胞后，將神經(jīng)段在37。C， 5。/oC02下用膠原酶I和 分散酶溫育過夜。接著，借助附設(shè)的注射器使神經(jīng)段重復通過針頭小心進 行均質(zhì)化，并在PBS(磷酸鹽緩沖的生理鹽水)中洗滌。進行多個洗滌步驟， 其間進行離心后，將細胞懸浮液轉(zhuǎn)移到聚-L-賴氨酸涂覆的培養(yǎng)瓶中，并在 37°C、 5% C02下，于M2培養(yǎng)基(黑素細胞生長培養(yǎng)基，Promocell)中進行 培養(yǎng)。該培養(yǎng)基抑制污染的成纖維細胞生長，然而施旺細胞卻可接著使用。正如前面所述，培養(yǎng)后的施旺細胞借助膠原酶I和分散酶分離，并用 PBS洗滌。細胞懸浮液可在其間進行冷卻，或者直接使用。作為生物相容 性基質(zhì)材料，可將Matrigel(可從Becton Dickinson購得)與施旺細胞小心地 混合，使細胞密度達到約102~ 10Vml基質(zhì)材料。將由施旺細胞和基質(zhì)材料 組成的該混合物，小心地吸移到包裹物中，在包裹物中已軸向安置由蜘蛛 絲構(gòu)成的絲線。在此情況下，優(yōu)選的是，所述無細胞小靜脈，以及相應地類似小靜脈， 一直到蜘蛛絲為止，都完全填滿基質(zhì)材料，使之具有圓形的外圍。如此制得的神經(jīng)植入物根據(jù)實施例2用來橋接坐骨神經(jīng)缺陷部位。同 樣于短時間內(nèi)，即2至4日內(nèi)，神經(jīng)功能得以恢復，此時同樣避免了運動 神經(jīng)的完全官能障礙，運動神經(jīng)的完全官能障礙表現(xiàn)為受神經(jīng)支配的四肢 的痙攣和保持抓緊的爪狀。組織學的研究表明，在神經(jīng)植入物的部位基本上形成了自然的神經(jīng)組
權(quán)利要求
1.用于對神經(jīng)內(nèi)的斷裂或缺陷部位進行搭橋的神經(jīng)植入物，其特征在于，所述神經(jīng)植入物是線狀蜘蛛絲(1)。
2. 權(quán)利要求1所述的神經(jīng)植入物，其特征在于，所述線狀蜘蛛絲(l)基 本上以軸線方向上置于包裹物(2)內(nèi)。
3. 權(quán)利要求2所述的神經(jīng)植入物，其特征在于，包裹物(2)和線狀蜘蛛
4. 權(quán)利要求3所述的神經(jīng)植入物，其特征在于，基質(zhì)材料(3)中含有自 體培養(yǎng)的施旺細月包。
5. 前述權(quán)利要求中任何一項所述的神經(jīng)植入物，其特征在于，所述線 狀蜘蛛絲(l)圍繞載體元件(4)周圍安置，并且在其縱向上基本對齊。
6. 前述權(quán)利要求中任何一項所述的神經(jīng)植入物，其特征在于，所述線 狀蜘蛛絲(1 )是天然蜘蛛絲。
7. 權(quán)利要求6所述的神經(jīng)植入物，其特征在于，所述天然蜘蛛絲從輪 網(wǎng)蜘蛛耳又得。
8. 前述權(quán)利要求中任何一項所述神經(jīng)植入物用于制備對神經(jīng)內(nèi)斷裂或 缺陷部位進行搭橋用的醫(yī)藥制品中的用途。
9. 權(quán)利要求8所述的用途，其特征在于，所述神經(jīng)是運動神經(jīng)或感覺 神經(jīng)。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種生物相容性神經(jīng)植入物，其用于對例如意外事故損傷或者手術(shù)后發(fā)生的神經(jīng)斷裂或者缺陷部位進行搭橋。本發(fā)明的神經(jīng)植入物含有由天然或人造蜘蛛絲構(gòu)成的絲線，它使斷裂的神經(jīng)有可能越過缺陷部位再生，從而可能在短時間內(nèi)產(chǎn)生功能性興奮傳導。
文檔編號A61L27/36GK101257936SQ200680032678
公開日2008年9月3日 申請日期2006年9月6日 優(yōu)先權(quán)日2005年9月6日
發(fā)明者克斯廷·賴默斯, 克里斯蒂娜·阿爾梅林, 彼得·沃格特 申請人:漢諾威醫(yī)學院