專利名稱：：制備與使用納米乳劑的組合物和方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及納米乳劑領(lǐng)域。在一個(gè)實(shí)施方案中，納米乳劑采用高剪切應(yīng)力技術(shù)制備。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供均勻微流化納米乳齊'J(uniformmicrofluidizednanoemulsion)。在另一個(gè)實(shí)施方案中,均勻納米乳劑包含化合物，例如藥物、營養(yǎng)制品或藥用化妝品。在一個(gè)實(shí)施方案中，當(dāng)與常規(guī)納米顆粒組合物和/或納米乳劑相比時(shí)，均勻納米乳劑包括改進(jìn)的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供抗菌納米乳劑的制備方法。
背景技術(shù)：
：微乳劑/納米乳劑技術(shù)具有巨大的商業(yè)價(jià)值。僅就營養(yǎng)制品領(lǐng)域而言，全球貿(mào)易的市場價(jià)值估計(jì)為2500億美元。因此，將脂溶性營養(yǎng)制品摻入飲料(食品工業(yè)增長最快的部分)以及低脂食品或脫脂食品中是十分有益的。所需要的納米乳劑是i)溫度穩(wěn)定性和pH穩(wěn)定性得到改進(jìn)；ii)生物利用度得到改進(jìn)；和iii)因微生物抗性所致存放期限得到改進(jìn)。另外，納米乳劑的制備應(yīng)相對容易和便宜。發(fā)明概述本發(fā)明涉及納米乳劑領(lǐng)域。在一個(gè)實(shí)施方案中，納米乳劑采用高剪切應(yīng)力技術(shù)制備。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供均勻微流化納米乳劑。在另一個(gè)實(shí)施方案中，均勻納米乳劑包含化合物，例如藥物、營養(yǎng)制品或藥用化妝品。在一個(gè)實(shí)施方案中，當(dāng)與常規(guī)納米顆粒組合物和/或納米乳劑相比時(shí)，均勻納米乳劑包括改進(jìn)的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供抗菌納米乳劑的制備方法。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供包含具有最大直徑和最小直徑的粒子群的納米乳劑，其中所述最大直徑和最小直徑之差不超過100nm。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供包含直徑介于約IO納米和約110納米之間的粒子群的納米乳劑，其中所述納米乳劑沒有被直徑大于110納米的粒子污染。在一個(gè)實(shí)施方案中，粒子將化合物包封起來。在一個(gè)實(shí)施方案中，化合物為藥物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，化合物為營養(yǎng)制品。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供包含第一粒子群和第二粒子群的納米乳劑，其中在所述第一粒子群中大部分粒子的直徑介于約10納米和約20納米之間，其中在所述第二粒子群中大部分粒子的直徑介于約40納米和約80納米之間，其中所述納米乳劑沒有被直徑大于110納米的粒子污染。在一個(gè)實(shí)施方案中，粒子將化合物包封起來。在一個(gè)實(shí)施方案中，化合物為藥物。在一個(gè)實(shí)施方案中，化合物為營養(yǎng)制<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>本發(fā)明提供一種包含直徑介于約50納米和約150納米之間的粒子群的納米乳劑，其中所述納米乳劑沒有^^皮直徑大于160納米的粒子污染。在一個(gè)實(shí)施方案中，粒子將化合物包封起來。在一個(gè)實(shí)施方案中，化合物為藥物。在一個(gè)實(shí)施方案中，化合物為營養(yǎng)制品。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一種方法，該方法包括a)提供i)包含化合物和液體分散介質(zhì)的預(yù)混合物，其中所述化合物在所述介質(zhì)中的溶解度大于30mg/ml;和ii)能夠維持至少25,000PSI的微流化器(microfluidizer);b)采用將所述預(yù)混合物單程暴露于所述微流化器以形成直徑范圍約介于10-110nm之間的納米乳粒子群。在一個(gè)實(shí)施方案中，分散介質(zhì)選自水性介質(zhì)和油基介質(zhì)。在一個(gè)實(shí)施方案中，水性介質(zhì)選自水、片木才各氏溶液、右^走糖和短《連醇類。在一個(gè)實(shí)施方案中，油基介質(zhì)選自但不限于得自植物源和海洋源的飽和及不飽和油、硅油、礦物油和才直物衍生油(plant-derivedoil)。在一個(gè)實(shí)施方案中，化合物選自但不限于植物甾醇、鱈魚肝油、生育酚、卵磷脂、葉黃素、玉米黃質(zhì)和大豆蛋白。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一種方法，該方法包括a)提供i)加熱的分散介質(zhì)；ii)基本溶于所述介質(zhì)的化合物；iii)能夠從所述介質(zhì)制備均勻納米乳劑的微流化器；b)在至少70。C的溫度下將所述化合物加到所述介質(zhì)中以形成預(yù)混合物；和c)在至少25,000PSI的壓力下，使所述預(yù)混合物微流化以形成粒徑范圍介于10-110nm之間的納米乳劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述^:介質(zhì)選自大豆油和水。在一個(gè)實(shí)施方案中，將所述分散介質(zhì)加熱到至少65°C。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述化合物可選自植物甾醇、鱈魚肝油、生育酚、卵磷脂、葉黃素、玉米黃質(zhì)、番茄紅素、乳清蛋白和大豆蛋白。在一個(gè)實(shí)施方案中，納米乳劑將化合物包封起來。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述粒徑的86%的平均直徑為54nm。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述粒徑的14%的平均直徑為16nm。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述粒徑的82%的平均直徑為64nm。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述粒徑的17%的平均直徑為19nm。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述粒徑的78%的平均直徑為88nm。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述粒徑的22%的平均直徑為27nm。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述粒徑的84%的平均直徑為90nm。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述粒徑的16%的平均直徑為23nm。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述粒徑的80%的平均直徑為55nm。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一種方法，該方法包括a)提供i)包含化合物、第一抗氧化劑、第二抗氧化劑和水性分散介質(zhì)的預(yù)混合物，其中所述化合物在所述介質(zhì)中的溶解度大于30mg/ml;和ii)能夠維持至少25,000PSI的微流化器；和b)采用將所述預(yù)混合物單程暴露于所述微流化器中以形成直徑范圍介于40-110nm之間的納米乳粒子群。其中所述粒徑在至少4個(gè)月內(nèi)保持穩(wěn)定。在一個(gè)實(shí)施方案中，該方法還包括將所述納米乳粒子群用巴斯德滅菌法進(jìn)行滅菌，其中所述粒徑保持穩(wěn)定。在一個(gè)實(shí)施方案中，該方法還包括將所述納米乳粒子群冷凍，其中所述粒徑保持穩(wěn)定。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一種方法，該方法包括a)提供i)包含第一抗氧化劑的穩(wěn)定的水性分散介質(zhì)；ii)包含天然乳化劑的溶液；iii)基本溶于所述包含第二抗氧化劑的介質(zhì)的化合物；iv)能夠從所述介質(zhì)制備均勻納米乳劑的微流化器；b)將所述化合物和所述溶液加到所述介質(zhì)中，并加熱到至少50。C的溫度以形成預(yù)混合物；和c)在至少25,000PSI的壓力下，使所述預(yù)混合物微流化以形成粒徑范圍介于40-110nm之間的納米乳劑，其中所述粒徑在至少4個(gè)月內(nèi)保持穩(wěn)定。在一個(gè)實(shí)施方案中，納米乳劑將化合物包封起來。在一個(gè)實(shí)施方案中，該方法還包括將所述納米乳劑用巴斯德滅菌法進(jìn)行滅菌，其中所述粒徑保持穩(wěn)定。在一個(gè)實(shí)施方案中，該方法還包括將所述納米乳劑冷凍，其中所述粒徑保持穩(wěn)定。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述溶液包含牛奶。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述化合物包含DHA魚油。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述巴斯德滅菌法包括將所述納米乳劑暴露在75。C下30秒鐘。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述冷凍包括將所述納米乳劑暴露在-4。C下24小時(shí)。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一種方法，該方法包括a)提供i)對所給予的治療有效量的化合物不應(yīng)的受治療者；ii)包含包封有所述化合物的粒子群的納米乳劑，其中所述粒子的直徑介于約10nm和約110nm之間，其中所述納米乳劑沒有被直徑大于IIO納米的粒子污染；b)在所述化合物生物利用度得到改進(jìn)且其中所述化合物是治療有效的條件下，將所述納米乳劑遞送給所述患者。在一個(gè)實(shí)施方案中，改進(jìn)的生物利用度包括選自以下的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)T皿降低、Cmax增加和AUC增大。在一個(gè)實(shí)施方案中，遞藥包括選自口服、經(jīng)皮、靜脈內(nèi)、腹膜內(nèi)、肌內(nèi)和皮下的方法。在一個(gè)實(shí)施方案中，納米乳劑包含植物甾醇。在一個(gè)實(shí)施方案中，納米乳劑包含番茄紅素。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供改進(jìn)納米乳劑生物利用度的方法，該方法包括提供均勻微流化納米乳劑，并將該均勻納米乳劑遞送給受治療者。在一個(gè)實(shí)施方案中，受治療者(患者)包括哺乳動(dòng)物。在一個(gè)實(shí)施方案中，納米乳劑將化合物包封起來。在一個(gè)實(shí)施方案中，經(jīng)口服給藥遞送納米乳劑。在另一個(gè)實(shí)施方案中，通過包括但不限于經(jīng)皮、靜脈內(nèi)、腹膜內(nèi)、肌內(nèi)或皮下的方法遞送納米乳劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述改進(jìn)的生物利用度包括選自以下的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)T皿降低、C隱增加和AUC增大。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述納米乳劑配制成用于口服給藥。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述納米乳劑包含植物甾醇。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述納米乳劑包含番茄紅素。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供具有抗菌性能的納米乳劑，其中所述納米乳劑包含包封有所述化合物的粒子群，其中所述粒子的直徑介于約10納米和約110納米之間，其中所述納米乳劑沒有被直徑大于110納米的粒子污染。在一個(gè)實(shí)施方案中，納米乳劑抵抗細(xì)菌生長至少3個(gè)月。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗菌性能包括剪切力引起的細(xì)胞裂解。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗菌性能包括氧化環(huán)境。在一個(gè)實(shí)施方案中，納米乳劑是無菌的。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供具有抗菌性能的均勻微流化納米乳劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述納米乳劑抵抗細(xì)菌生長至少3個(gè)月。在一個(gè)實(shí)施方案中，納米乳劑包含直徑分布介于10-110nm之間的粒子。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述抗菌性能包括剪切力引起的細(xì)胞裂解。在一個(gè)實(shí)施方案中，納米乳劑是無菌的。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一種方法，該方法包括a)提供i)包含化合物和液體分散介質(zhì)的預(yù)混合物；和ii)高壓下能夠產(chǎn)生連續(xù)湍流的裝置；b)使用所述裝置產(chǎn)生直徑均一的納米乳粒子群。在一個(gè)實(shí)施方案中，分散介質(zhì)選自水性介質(zhì)和油基介質(zhì)。在一個(gè)實(shí)施方案中，水性介質(zhì)選自水、鹽溶液、林格氏溶液、右旋糖和短鏈醇類。在一個(gè)實(shí)施方案中，油基介質(zhì)選自得自植物源和海洋源的飽和及不飽和油、硅油和礦物油。在一個(gè)實(shí)施方案中，化合物選自植物甾醇、鱈魚肝油、生育酚、卵磷脂、葉黃素、玉米黃質(zhì)和大豆蛋白。定義9行解釋。然而，下列術(shù)語則按照下面的定義進(jìn)行解釋。本文所用術(shù)語"微流化"、"使......微流化"或"微流化器"是指利用高壓連續(xù)湍流的儀器或過程，包括但不限于微流化器或者其它可以用來生產(chǎn)均勻納米乳劑的類似裝置。例如樣t流化可以在30秒時(shí)間內(nèi)(通常指單程暴露)，由預(yù)混合物制備包含藥物、營養(yǎng)制品或藥用化妝品的均勻納米乳劑。微流化器通?？稍诩s25,000PSI的壓力下操作以生產(chǎn)均勻納米乳劑。本文所用術(shù)語"均勻納米乳劑(uniformnanoemulsion)"是指粒徑大小在任何規(guī)定范圍內(nèi)的任何乳劑，其中最大直徑與最小直徑之差不超過約600nm，優(yōu)選約300nm，更優(yōu)選約200nm,但是最優(yōu)選約100nm(即例如，采用本文所提供的微流化法生產(chǎn)粒徑范圍約10-110nm的均勻納米乳劑，并且本文是指均勻微流化納米乳劑)。優(yōu)選總粒徑分布(即100%)包括在粒徑大小的規(guī)定范圍內(nèi)。本文還認(rèn)為超出粒徑大小規(guī)定范圍3%以下的粒徑分布仍為均勻納米乳劑。本文所用術(shù)語"群(population)"是指納米乳粒子按直徑大小分布的任何混合物。例如，納米乳粒子群的粒徑范圍可以介于約10-110nm之間。本文所用術(shù)語"納米粒子(nan叩article)"是指直徑不大于300納米(nm)的任何粒子(如美國國家科學(xué)基金會(huì)(NationalScienceFoundation)定義)，或者優(yōu)選不大于lOOnm(如美國國立衛(wèi)生研究院(NationalInstitutesofHealth)定義)。最常規(guī)的技術(shù)生產(chǎn)平均粒徑約300納米(nm)以上的納米顆粒組合物。本文所用術(shù)語"分散介質(zhì)"是指任何油基液或水成液，其中藥物、營養(yǎng)制品或藥用化妝品加熱時(shí)可以溶解。油基液可以包括-f旦不限于得自植物源和海洋源的飽和及不飽和油，包括但不限于大豆、紅花、橄欖、玉米、棉花籽、亞麻籽(linseed)、紅花、棕櫚、花生、亞麻仁(flaxseed)、向日葵、米糠、芝麻、油菜籽、可可脂等及其混合物；硅油和礦物油?；蛘?，水性介質(zhì)可包括但不限于水、鹽溶液、短鏈醇類、5%右旋糖、林格氏溶液(乳酸化林格氏注射液、乳酸化林格氏溶液加5%右旋糖注射液、跳化林格氏注射液(acylatedRinger'sinjection))、Normosol-M、IsolyteE等等，以及具有高表面活化性能的合成和/或天然洗滌劑、脫氧膽酸鹽、環(huán)糊精、離液序列高的鹽、離子配對劑等等，及其混合物。本文所用術(shù)語"化合物"是指能在分散介質(zhì)中基本溶解的任何藥物、營養(yǎng)制品或藥用化妝品(即例如有機(jī)化學(xué)品、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、油、維生素、晶體、礦物質(zhì)等等)。本文所用術(shù)語"基本溶解的"是指任何化合物溶于分散介質(zhì)至濃度30mg/ml以上。優(yōu)選加熱分散介質(zhì)時(shí)，化合物被溶解。本文所用術(shù)語"預(yù)混合物"是指其后用于生產(chǎn)納米顆粒組合物或均勻微流化納米乳劑的任何混合物。預(yù)混合物通常含有液體分散介質(zhì)和化合物，任選含有乳化劑和/或抗氧化劑。本文所用術(shù)語"穩(wěn)定的"是指任何納米乳粒子群的直徑在較長時(shí)期內(nèi)(即例如1天至24個(gè)月，優(yōu)選2周至12個(gè)月，但更優(yōu)選2個(gè)月至5個(gè)月)保持在約10-110nm范圍內(nèi)。例如，如果納米乳粒子群經(jīng)過長期保存、溫度變化和/或pH變化，其直徑仍保持在約10-110nm的范圍內(nèi)，則該納米乳劑是穩(wěn)定的。本文所用術(shù)語"抗菌"是指沒有觀測到細(xì)菌生長。本文所用術(shù)語"無菌"是指納米乳劑中不含活的細(xì)菌細(xì)胞。本文所用術(shù)語"藥學(xué)可接受的"是指在合理的醫(yī)學(xué)判斷范圍內(nèi)，適用于與人和動(dòng)物組織接觸而無過度毒性、刺激性、變態(tài)反應(yīng)或其它問題或并發(fā)癥，與合理的利益/風(fēng)險(xiǎn)比相對稱的化合物、材料、組合物和/或劑型。本文所用術(shù)語"藥學(xué)上可接受的鹽"是指衍生物，其中通過制成母體化合物的酸式鹽或^5成式鹽而對其進(jìn)行改性。藥學(xué)上可接受的鹽的實(shí)例包括但不限于堿性殘基(例如胺)的無機(jī)或有機(jī)酸的鹽；酸性殘基(例如羧酸)的堿金屬鹽或有機(jī)鹽等等。藥學(xué)上可接受的鹽包括由例如無毒無機(jī)酸或有機(jī)酸所形成的母體化合物的常規(guī)無毒鹽或季銨鹽。例如，這些常規(guī)無毒鹽包括由例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸、硝酸等無機(jī)酸所衍生的無毒鹽；以及用諸如以下的有機(jī)酸制備的鹽乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、硬脂酸、乳酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、抗壞血酸、雙羥萘酸、馬來酸、羥基馬來酸、苯乙酸、谷氨酸、苯曱酸、水楊酸、磺胺酸、2-乙酸基苯曱酸、富馬酸、曱苯磺酸、甲磺酸、乙二磺酸、草酸、羥乙磺酸等。本文所用術(shù)語"治療有效量"當(dāng)涉及藥物劑量時(shí)，是指向許多需要這種治療的受治療者給予或遞送藥物，提供規(guī)定藥理反應(yīng)的劑量。要強(qiáng)調(diào)的是，在特定情況下，給予特定受治療者"治療有效量"，在治療本文所述疾病時(shí)并不總是有效的，即使這樣的劑量仍被本領(lǐng)域技術(shù)人員視為"治療有效量"。實(shí)際上，具體的受治療者可能是對"治療有效量"不應(yīng)的。例如不應(yīng)受治療者可能具有低的生物利用度，因此無法獲得臨床功效。還要理解的是，在特定情況下，藥物劑量是以口服劑量計(jì)量的，或者是參照如血液中所測藥物水平。本文所用術(shù)語"不應(yīng)的"是指在遞送化合物后，受治療者沒有反應(yīng)出如醫(yī)務(wù)人員正常情況下所觀察的預(yù)期臨床功效。本文所用術(shù)語"遞送"或"給予"是指向受治療者提供藥物或營養(yǎng)制品的任何途徑，這些途徑為醫(yī)學(xué)界標(biāo)準(zhǔn)所認(rèn)可。例如，本發(fā)明提供的遞藥或給藥途徑包括但不限于口服、經(jīng)皮、靜脈內(nèi)、腹膜內(nèi)、肌內(nèi)或皮下。本文所用術(shù)語"受治療者(患者)，，是指本發(fā)明實(shí)施方案可以向其遞藥或給藥的任何動(dòng)物。例如，受治療者(患者)可為人、狗、貓、牛、豬、馬、小鼠、大鼠、沙鼠(gerbil)、倉鼠等。本文所用術(shù)語"包封"、"包封有"或"將......包封起來"是指任何化合物被保護(hù)性材料完全包裹起來。例如，化合物可以被在微流化過程形成的納米乳粒子群包封起來。本文所用術(shù)語"營養(yǎng)制品(nutraceutical)，，是指添加到食物源(即例如強(qiáng)化食物或膳食補(bǔ)充劑)的任何化合物，除其基礎(chǔ)營養(yǎng)價(jià)值外還提供保健或藥療益處。本文所用術(shù)語"藥用化妝品(cosmeceutical)"是指添加到既具有化妝品性質(zhì)又具有藥物性質(zhì)的制品中的任何化合物(即例如過氧化苯曱?；蚓S生素A)。藥用化妝品一般用于外用以改善膚色或總的外觀形象。藥用化妝品可以用作組合物，包括但不限于乳膏劑、油制劑、泡沫制劑、噴霧劑、液體制劑等等。藥用化妝品可以包括很多種類，例如但不限于類胡蘿卜素、酚類化合物或水溶性抗氧化劑。附圖簡述圖l是示例性數(shù)據(jù)，顯示在制備3個(gè)月后微流化植物甾醇納米乳粒子群的粒徑分布。圖1A是示例性數(shù)據(jù)，顯示在制備3個(gè)月后微流化植物甾醇納米乳的粒徑分布。圖2是示例性數(shù)據(jù)，顯示在制備4個(gè)月后微流化鱈魚肝油納米乳粒子群的粒徑分布。圖3是示例性數(shù)據(jù)，顯示在制備5個(gè)月后微流化生育酚納米乳粒子群的粒徑分布。圖4是示例性數(shù)據(jù)，顯示^(敬流化葉黃素/玉米黃質(zhì)納米乳粒子群的粒徑分布。圖5是示例性數(shù)據(jù)，顯示微流化大豆蛋白納米乳粒子群的粒徑分布。圖6是示例性數(shù)據(jù)，顯示微流化乳清蛋白納米乳粒子群的粒徑分布。圖7是示例性數(shù)據(jù)，顯示微流化橙汁/植物甾醇/葉黃素納米乳粒子群的粒徑分布。圖8是示例性數(shù)據(jù)，顯示制備2個(gè)月后微流化DHA魚油/水納米乳粒子群的粒徑分布。圖9是示例性數(shù)據(jù)，顯示制備3周后微流化DHA魚油/牛奶納米乳粒子群的粒徑分布。圖IO是示例性數(shù)據(jù)，顯示微流化DHA魚油/牛奶/生育酚納米乳粒子群的粒徑分布。圖11是示例性數(shù)據(jù)，顯示用巴斯德滅菌法滅菌后微流化DHA魚油/牛奶/生育酚納米乳粒子群的粒徑分布。圖12是示例性數(shù)據(jù)，顯示凍融工藝后微流化DHA魚油/牛奶/生育酚納米乳粒子群的粒徑分布。圖13是當(dāng)飼喂富含番茄紅素的飲食時(shí)，沙鼠血漿番茄紅素水平的示例性數(shù)據(jù)。圖14表示當(dāng)飼喂富含微流化番茄紅素納米乳劑的飲食時(shí)沙鼠血漿番茄紅素水平的示例性l史據(jù)。圖15表示在制備微流化植物甾醇納米乳劑過程中所產(chǎn)生的抗菌性能的一個(gè)實(shí)施方案。圖16是示例性數(shù)據(jù)，顯示實(shí)施例12所使用的微流化植物甾醇納米乳粒子群的粒徑分布。圖17是示例性數(shù)據(jù)，顯示4周后微流化植物甾醇納米乳劑飲食在降低高膽固醇血癥倉鼠血漿LDL-C方面，比微粉化植物甾醇飲食或結(jié)晶植物甾醇飲食有效。圖18表示比較以下預(yù)混合物膽固醇粒徑分布的示例性數(shù)據(jù)圖A:Tween80/水(按照'118專利)；圖B:油/卵磷脂/Tween80/水(由本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案提供)。圖19表示比較以下微流化膽固醇納米乳劑粒徑分布的示例性數(shù)據(jù)圖A:Tween80/水(按照'118專利，采用重復(fù)多程微流化法(repeatedmicrofluidizationpasses));圖B:油/卵磷脂/Tween80/水(由本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案提供，采用單程孩i流化法(singlemicrofluidizationpass))。圖20表示比較以下微流化膽固醇納米乳劑粒徑分布的示例性數(shù)據(jù)圖A:Tween80/水(按照'118專利，采用單程暴露)；圖B:油/卵磷脂/Tween80/水(由本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案提供，采用單程暴露)。發(fā)明詳述本發(fā)明涉及納米乳劑領(lǐng)域。在一個(gè)實(shí)施方案中，納米乳劑通過高剪切應(yīng)力技術(shù)生產(chǎn)。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供均勻微流化納米乳劑。在另一個(gè)實(shí)施方案中，均勻納米乳劑包含化合物，例如藥物、營養(yǎng)制品或藥用化妝品。在一個(gè)實(shí)施方案中，當(dāng)與常規(guī)納米顆粒組合物和/或納米乳劑相比時(shí)，均勻納米乳劑包括改進(jìn)的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供抗菌納米乳劑的制備方法。納米乳劑作為遞送系統(tǒng)的用途總的來講涉及藥物。然而，納米乳劑營養(yǎng)制品遞送則幾乎未引起關(guān)注。例如，一個(gè)納米乳劑系統(tǒng)含有植物甾醇(Bruce等，"Methodforproducingdispersiblesterolandstanolcompounds(可分散甾醇與甾烷醇化合物的生產(chǎn)方法)"，美國專利第6,3S7，477號(2002)，通過引用結(jié)合到本文中)。然而該技術(shù)采用研磨法生產(chǎn)納米乳劑，因此粒徑要比本文所提供的大至少6倍。雖然不一定了解發(fā)明的機(jī)制，但是我們認(rèn)為這種直徑的差異提供了穩(wěn)定性和功效兩方面的明顯優(yōu)勢(見下文)。此外，'411專利沒有公開纟參入可吸收孩丈量營養(yǎng)物。納米乳劑作為遞送系統(tǒng)的另一個(gè)用途涉及藥用化妝品。藥用化妝品可以包含例如類胡蘿卜素類，包括但不限于a-胡蘿卜素、p-胡蘿卜素、P-隱黃質(zhì)、番茄紅素、藏紅花酸、墨角藻黃素、halocynthiaxanthin、角黃素、蝦青素(astraxanthin)、葉黃素或玉米黃質(zhì)；酚類化合物，包括但不限于槲皮素、蕓香苷、楊梅樹皮素、山柰酚、兒茶素、表沒食子兒茶素、表兒茶素、白藜蘆醇(reservatrol)、生育酚、阿魏酸鹽(ferulate)、泛醌醇-10(ubiquinol-10)、大豆異黃酮類(例如染料木素(genestein))、大豆黃素、a-硫辛酸、花色素苷類、鞣花單寧類、沒食子酸或鞣花酸；或水溶性抗氧化劑，例如抗壞血酸、尿酸或膽紅素。本發(fā)明涉及包含用于所有可吸收(即例如脂溶性)營養(yǎng)物的口服遞送載體的納米粒子群或納米乳劑，可吸收營養(yǎng)物包括但不限于脂肪酸、類胡蘿卜素、生育酚、生育三烯酚和輔酶Q。然而，遞送方法并不限于口服，還包括但不限于經(jīng)皮、靜脈內(nèi)、腹膜內(nèi)、肌內(nèi)或皮下。在另一個(gè)實(shí)施方案中，類胡蘿卜素包括但不限于葉黃素和玉米黃質(zhì)。本發(fā)明還涉及用于所有不可吸收(即例如脂溶性)植物甾醇化合物口服遞送載體的納米粒子群或納米乳劑，植物甾醇化合物包括但不限于植物甾醇和植物甾烷醇(phytostanol)。在一個(gè)實(shí)施方案中，化合物被納米粒子或納米乳包封起來。在一個(gè)實(shí)施方案中，用常用乳化劑來制備納米乳劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述乳化劑包括但不限于磷脂、甘油單脂肪酸酯(fattyacidmonoglyceride)、甘油二脂肪酸酯(fattyaciddiglyceride)或聚山梨酯(polysorbate)。本發(fā)明還提供本發(fā)明的某些納米乳劑實(shí)施方案，所述納米乳劑的表面積與體積之比使得生物利用度比起本領(lǐng)域已知現(xiàn)有方法和組合物的有改進(jìn)。本發(fā)明還提供本發(fā)明的某些納米乳劑實(shí)施方案，所述納米乳劑是抗微生物生長的。雖然不一定了解發(fā)明的機(jī)制，但是我們認(rèn)為微流化工藝包括高剪切應(yīng)力和/或產(chǎn)生氧化環(huán)境，從而破壞微生物的完整性和/或阻止微生物生長。I.納米乳劑的制備方法有許多方法被用來制備納米乳劑。具體地講，這些方法提供的粒徑變化大，需要有機(jī)溶劑和/或聚合物。如果考慮將這些已知納米乳劑用于口服藥物或營養(yǎng)物遞送系統(tǒng)，則生物相容性和生理副作用的問題會(huì)變成大問題。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供納米乳劑的制備方法，該方法包括高壓連續(xù)湍流。在一個(gè)實(shí)施方案中，高壓湍流包括孩i流化。在一個(gè)實(shí)施方案中，采用單程暴露(即例如在30秒鐘時(shí)間內(nèi))由預(yù)混合物制備均勻納米乳劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，均勻納米乳劑包含最小直徑與最大直徑之差不超過約100nm的粒子群。在一個(gè)實(shí)施方案中，采用至少25,000PSI的壓力來生產(chǎn)均勻納米乳劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供無需有機(jī)溶劑或聚合物制備均勻微流化納米乳劑的方法。在一個(gè)實(shí)施方案中，微流化納米乳劑是由混懸液制備的。在另一個(gè)實(shí)施方案中，微流化納米乳劑是由微乳劑制備的。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供使用基本溶于液體分散介質(zhì)的化合物的均勻微流化納米乳劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，納米乳劑將化合物包封起來。在一個(gè)實(shí)施方案中，化合物包括藥物和/或營養(yǎng)制品。示例性的營養(yǎng)制品和膳食補(bǔ)充劑參見例如Roberts等，Nutriceuticals:TheCompleteEncyclopediaofSupplements,Herbs,Vitamins,andHealingFoods(營養(yǎng)制品補(bǔ)充劑、草藥、維生素和食療食物大百科全書)(美國營養(yǎng)協(xié)會(huì)(AmericanNutriceuticalAssociation),2001)，該文獻(xiàn)通過引用特別結(jié)合到本文中。膳食補(bǔ)充劑和營養(yǎng)制品還可參見Physicians'DeskReferenceforNutritionalSupplements,第一版(2001)和ThePhysicians'DeskReferenceforHerbalMedicines,第一版(2001)，這兩個(gè)文獻(xiàn)都通過引用結(jié)合到本文中。營養(yǎng)制品或膳食補(bǔ)充劑，亦稱植物化學(xué)品或功能食品，一般是一類膳食補(bǔ)充劑、維生素、礦物質(zhì)、草藥或?qū)ι眢w有醫(yī)療作用或生物作用的食療食物當(dāng)中的任一種。示例性的營養(yǎng)制品或膳食補(bǔ)充劑包括但不限于葉黃素、葉酸、脂肪酸(例如DHA和ARA)、水果纟是取物、蔬菜提取物、維生素和礦物質(zhì)補(bǔ)充劑、磷脂酰絲氨酸、硫辛酸、褪黑素、葡糖胺/軟骨素、蘆薈、膠樹脂(Guggul)、氨基酸(例如谷氨酰胺、精氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、賴氨酸、曱硫氨酸、苯丙氨酸、蘇氨酸、色氨酸和纈氨酸)、綠茶、番茄紅素、全食品、食品添加劑、草藥、植物性營養(yǎng)素(phytonutrient)、抗氧化劑、水果的黃酮類組分、月見草油、亞麻仁、魚油、海洋動(dòng)物油和益生菌制劑。營養(yǎng)制品和膳食補(bǔ)充劑還包括一般被基因工程改造成具有所需性能的生物工程食品，亦稱"營養(yǎng)增補(bǔ)劑(pharmafoods)"。具體地講，這些化合物包括但不限于天然存在的油、脂肪酸和蛋白質(zhì)。在一個(gè)實(shí)施方案中，天然存在的油包括魚油(即例如鱈魚肝油)。在一個(gè)實(shí)施方案中，天然存在的脂肪酸包括w-3(即例如DHA)。在一個(gè)實(shí)施方案中，納米乳劑幾乎不含或者不含脂肪。在一個(gè)實(shí)施方案中，天然存在的蛋白質(zhì)包括大豆或乳清。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供均勻微流化納米乳劑的制備方法，所述納米乳劑包含直徑范圍介于10-110nm之間的粒子群。A.微流化器微流化是馬區(qū)動(dòng)單動(dòng)增壓泵(singleactingintensifierpump)的獨(dú)特工藝。增壓泵增加液壓至所選擇的水平，反過來，液壓又將壓力施加到產(chǎn)物流。當(dāng)增壓泵運(yùn)行其壓力沖程時(shí)，會(huì)驅(qū)使產(chǎn)物以恒壓通過相互作用室。在相互作用室內(nèi)有特殊設(shè)計(jì)的固定布局微通道，通過微通道的產(chǎn)物流將加至高速，產(chǎn)生高切力和沖擊力，在高速產(chǎn)物流自身撞擊及撞擊耐磨表面時(shí)，產(chǎn)生均勻納米乳。當(dāng)增壓泵完成其壓力沖程時(shí)，會(huì)逆轉(zhuǎn)方向，抽取新的大量產(chǎn)物。在進(jìn)料行程結(jié)束時(shí)，會(huì)再一次逆轉(zhuǎn)方向，驅(qū)使產(chǎn)物保持恒壓，從而重復(fù)該過程。當(dāng)產(chǎn)物流流出相互作用室時(shí)，會(huì)通過內(nèi)置的調(diào)節(jié)產(chǎn)物至所需溫度的熱交換器。在這一點(diǎn)上，產(chǎn)物可以通過系統(tǒng)再循環(huán)進(jìn)一步加工，或者可接到外部至下一加工步驟(Cook等，"ApparatusForFormingEmulsions(乳劑的生產(chǎn)設(shè)備)"，美國專利第《"3,Z54號(1985);和Cook等，"MethodOfFormingAMicroemulsion(微乳劑的制備方法)，，，美國專利第《卯&754號(1990)，這兩項(xiàng)專利都通過引用結(jié)合到本文)。B.納米顆粒組合物早期嘗試應(yīng)用4鼓流化器來生產(chǎn)所需藥物的納米顆粒組合物，因?yàn)樵撍幬镫y溶解于液體分散介質(zhì)。在一項(xiàng)公開的技術(shù)中，"難溶解"被定義為10mg/ml以下(Bosch等，"Processforpreparingtherapeuticcompositionscontainingnanoparticles(含有纟內(nèi)米并立子的治療纟且合物的制備方法)"，美國專利第5,5化/7S號(1996)(通過引用結(jié)合到本文))。雖然優(yōu)選考慮水不溶性化合物，但是油不溶性化合物也用微流化工藝進(jìn)行處理。"118專利"的微流化工藝被描述為"碾磨"作用，因此表明不溶性化合物粒子在生產(chǎn)納米顆粒組合物過程中經(jīng)歷了物理崩解。此外，這一早期工藝需要較長的加工時(shí)間(即重復(fù)微乳化循環(huán))，從而促使微流化器發(fā)熱。因此，這一早期技術(shù)需要40。C以下的加工溫度。這種技術(shù)導(dǎo)致平均納米乳劑粒徑約300nm便是一個(gè)問題。雖然'118專利指出，可以獲得較小的粒徑(即100nm以下)，但是并未提供證明這種能力的數(shù)據(jù)。本文提供的示例性數(shù)據(jù)采用了Bosch等人的工藝，得到完整的粒徑分布圖。參見實(shí)施例13。這些數(shù)據(jù)顯示Bosch等人的技術(shù)無法生產(chǎn)本發(fā)明所提供的均勻納米乳劑。其他人實(shí)施了'118的基礎(chǔ)技術(shù)將各種不溶性化合物包封起來。實(shí)際上，這些后續(xù)的公開內(nèi)容將納米顆粒組合物定義為"由難溶解的治療藥或診斷藥所組成的顆粒吸附到非交聯(lián)表面穩(wěn)定劑中，或者與非交聯(lián)表面禾急定劑蹄合"(Cooper等，"NanoparticulateSterolFormulationsAndNovelSterolCombinations(納米顆粒甾醇制劑與新的甾醇組合)"，美國專利申請公布號W似/OWWWv47(2004)，參見第一頁第三段，(通過引用結(jié)合到本文))。同'118專利一樣，Cooper等人公開了用難溶于液體分散介質(zhì)(即水、油、醇類、二醇類等)的化合物來制備納米顆粒組合物。例如Cooper等人把"難溶于水"的藥物定義為溶解度不超過約30mg/ml。例如，本領(lǐng)域有人提出包含一種或多種甾醇類或甾烷醇類(即谷甾醇或植物甾醇類)的植物甾醇納米顆粒組合物的粒徑不超過50nm。Cooper等人沒有使用微流化器，也沒有提供任何數(shù)據(jù)顯示提供均勻的粒徑范圍介于10-110nm之間的能力。Cooper等人依賴較傳統(tǒng)的碾磨工藝，無法產(chǎn)生范圍介于10-110nm之間的均勻的粒徑分布。Cooper等人應(yīng)用本領(lǐng)域已知的碾磨機(jī)DYNO-MILLKDL。這種設(shè)備現(xiàn)由美國GlenMillsInc.(Clifton,NJ)銷售，廣告宣傳中具有下列技術(shù)信息。DYNC^-MILL是一種通用臥式珠磨機(jī)，應(yīng)用范圍從油漆、涂料至制藥以及用于蛋白質(zhì)提取的細(xì)胞破碎。研究論文中曾報(bào)道研磨至平均直徑為320nrn。DYNO-MILL始終在濕潤情況下工作，也就是說，待研磨的原料保持在任何合適液體的懸浮液中。置于外殼內(nèi)的研磨室包括一系列沿轉(zhuǎn)軸縱深等距離相間的攪拌器。研磨室的外殼用來控制待加工原料的溫度。研磨室一端是固定的，懸臂穿過轉(zhuǎn)軸突出出來。軸承端裝有具有間隙公差的分離器間隙，可以設(shè)為20微米。研磨室裝有其容積約80%的珠粒(即PolyMill500;研磨珠直徑500^im)。根據(jù)具體的應(yīng)用，可獲得由玻璃、陶瓷、金屬、碳化鎢和其它材料制成的研磨珠。現(xiàn)將加工原料裝入研磨室。當(dāng)研磨室充滿原料和研磨珠時(shí)，開動(dòng)機(jī)器，攪拌器盤旋轉(zhuǎn)，迫使研磨珠用颶風(fēng)式壓力反復(fù)沖擊加工原料。這種具有數(shù)千次獨(dú)立沖擊力的作用，引起原料尺寸持續(xù)快速地減小。在同一珠磨機(jī)中，可以通過改變研磨室和間隙設(shè)置，進(jìn)行批量加工和連續(xù)加工。Cooper等人最多局限于植物甾醇納米顆粒組合物，其中90%的粒徑為187nm以下。然而，未給出實(shí)際的粒徑分布。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供Cooper等人所述技術(shù)，該技術(shù)不能產(chǎn)生范圍介于10-11Onm之間均勻的粒徑分布。參見實(shí)施例14。不像本發(fā)明的某些實(shí)施方案，Cooper等人沒有考慮包括加熱過程的納米顆粒組合物的制備方法。實(shí)際上，Cooper等人提出討論，得出的結(jié)論是用包括加熱的工藝制備植物甾醇納米顆粒組合物存在4艮多問題，需要改進(jìn)。本發(fā)明某些實(shí)施實(shí)施方案解決了這些問題。曾有人提出，不溶于所選液體分散介質(zhì)的兩種藥物美洛昔康和托吡酯，作為應(yīng)用Cooper等人的納米顆粒組合物技術(shù)來改進(jìn)臨床給藥的可能的備選技術(shù)(Cooper等,"Nanoparticulatemeloxicamformulations(納米顆粒美洛昔康劑型)"，美國專利申請^^布號20似/022卯3S(2004),口Gustow等,"Nanoparticulatetopiramateformulations(纟內(nèi)米澤貞并立4乇p比酯劑型)"，美國專利申請公布號2^^/W5S75S(2004))。這兩項(xiàng)專利公布小冊子都未包括證明生產(chǎn)粒徑范圍約10-llOnm的均勻微流化納米乳劑的示例性數(shù)據(jù)。C.納米乳化(namoemulsification)主要是小粒子的均勻混合物(即例如粒子群)的形成涉及被稱為"乳化"的物理過程。在本領(lǐng)域中，乳劑在傳統(tǒng)上被定義為"由分散于不混溶液體中的液體(含或不含乳化劑)、通常是由比膠體尺寸大的液滴纟且成的系統(tǒng)，，(jW"e<i//"e尸/ws(9"/z'"e7VfeA'ca/Z)/c"o""^y,^Mem'aw『eZw&r(2005))。因此，隨著本領(lǐng)域開發(fā)出能夠生產(chǎn)粒子直徑越來越小的乳化劑,術(shù)語"微乳劑(microemulsion)"和"納米乳劑(nanoemulsion)，，變得廣為人知。在概念上，微乳劑的直徑比納米乳劑的大1000倍。然而，粒徑分布可能在不受控制的乳化過程中發(fā)生很大的變化，在納米乳劑和微乳劑技術(shù)之間產(chǎn)生重疊。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供預(yù)混合物，該預(yù)混合物包含基本溶于(即例如30mg/ml以上)液體分散介質(zhì)(即例如加熱液體分散介質(zhì))和任選普通乳化劑(包括但不限于磷脂、甘油單脂肪酸酯、甘油二脂肪酸酯或聚山梨酯)。在一個(gè)實(shí)施方案中，通過將預(yù)混合物暴露于高壓連續(xù)湍流以生產(chǎn)納米乳劑，其中壓力至少為25,000PSI。在一個(gè)實(shí)施方案中，高壓';離流包括微流化。在一個(gè)實(shí)施方案中，納米乳劑包含將藥物或營養(yǎng)制品包封起來的粒子。在一個(gè)實(shí)施方案中，納米乳劑包含具有穩(wěn)定粒子的均勻納米乳劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，微流化包括單程暴露(即例如約30秒鐘)。在一個(gè)實(shí)施方案中，均勻的植物甾醇農(nóng)么流化納米乳劑具有改進(jìn)的降低低密度脂蛋白膽固醇的功效?？诜o藥是向任何受治療者提供藥物和營養(yǎng)制品的常用方法。本發(fā)明提供的遞送納米乳劑的方法并不限于口服，還包括例如經(jīng)皮、靜脈內(nèi)、腹膜內(nèi)、肌內(nèi)或皮下給藥途徑。優(yōu)選口服給藥，因?yàn)樵搫┬?即液體制劑或混懸劑)的生產(chǎn)相對便宜，耐受性好。然而，該劑型成分在隨后的胃腸吸收不如可預(yù)測的一樣。對于獲得進(jìn)入受治療者體內(nèi)的藥物和營養(yǎng)制品，劑型必須與消化系統(tǒng)相適應(yīng)。因此，脂基遞藥系統(tǒng)以用作許多遞藥系統(tǒng)的載體而著稱，然而，其功效可能取決于i)脂質(zhì)組成(即例如分子大小和電性)；ii)藥物、營養(yǎng)制品或藥用化妝品的化學(xué)結(jié)構(gòu)(即分子大小和pH電離作用)；和iii)受治療者的總的健康狀況。脂質(zhì)一般分成生理不可吸收的或生理可吸收的。應(yīng)當(dāng)了解的是，胃腸吸收過程與化合物的溶解性質(zhì)無關(guān)。本發(fā)明提供涉及均勻微流化納米乳劑的組合物和方法，所述均勻^:流化納米乳劑包含可吸收或不可吸收的脂質(zhì)從而改進(jìn)其生物利用度。1.不可吸收脂質(zhì)口服給藥后，植物甾醇、甾烷醇和三辟烯醇(即例如谷維素)不被吸收或者難被吸收進(jìn)入血流。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供包含不可吸收脂質(zhì)和任選常用乳化劑的均勻納米乳劑(即例如微流化)的制備方法，所述脂質(zhì)基本溶于液體分散介質(zhì)，所述常用乳化劑例如磷脂、甘油單脂肪酸酯、甘油二脂肪酸酯或聚山梨酯用以配制改進(jìn)的納米乳劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，納米乳劑包含粒徑范圍介于10-110nm之間的粒子，從而改進(jìn)口服給藥。已知使用植物甾醇(例如P-谷甾醇)能降低血液膽固醇水平，因?yàn)橹参镧薮际遣荒芪盏?。胃腸系統(tǒng)中存在的不吸收植物甾醇抑制膽固醇的正常代謝，隨之降低血液膽固醇水平。具體地講，給予20g結(jié)晶植物甾醇，可以降低血漿膽固醇水平大約10%(Pollack等，"Sitosterol(谷甾醇)"，MonographsonAtherosclerosis,第10巻，O丄Pollack和D.Kritchevsky主編，Basel,NewYork,Karger(1981))。此外，不可吸收脂質(zhì)由于無副作用，因此作為營養(yǎng)制品是有優(yōu)勢的。當(dāng)使用傳統(tǒng)藥物系統(tǒng)性降低膽固醇干預(yù)(即例如HMG輔酶A還原酶抑制劑或煙酸)時(shí)，通常觀察到副作用。因?yàn)橹参镧薮嫉母弊饔冒l(fā)生率非常低，所以可以開給大眾，包括幾乎不推薦系統(tǒng)性干預(yù)的兒童。已經(jīng)知道，使用適量的植物甾醇可以降低血液膽固醇水平。本發(fā)明提供對遞送植物甾醇或植物甾烷醇的目前已知方法的改進(jìn)方法。第一種已知方法包括將植物甾醇溶于含有人造奶油的植物油中至植物甾醇的有效水平。當(dāng)通過i)與脂肪酸(例如油酸酯或亞油酸酯)酯交換；ii)在植物油中混勻；或者iii)氫化生產(chǎn)人造奶油，來增加游離甾烷醇或甾醇的脂肪溶解度時(shí)，血漿膽固醇可降低約30%。為了吸取足夠的植物甾醇，這一過程可引起脂肪消耗多達(dá)約18克(Miettinen等，"Useofastanolfattyacidesterforreducingserumcholesterollevel(甾烷醇脂肪酸酯在降低血清膽固醇水平中的用途)"，美國專利第5,5W,(K5號(1996);和Wester等，"Phytosterolcompositions(植物甾醇組合物)"，美國專利第6,5卵，5朋號(2003),這兩個(gè)專利都通過引用結(jié)合到本文)。養(yǎng)胖頭腦清醒的美國人，加上人造奶油的成本高，這對于降低血漿膽固醇的自然療法(naturopathicapproach)來說是不可4矣受的。該方法的缺點(diǎn)是超重或肥胖人士通常膽固醇水平已升高。醫(yī)生當(dāng)然已告誡這樣的受治療者避免額外的膳食脂肪。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供包含植物甾醇的飲料納米乳劑的制備方法。例如，飲料納米乳劑的制備方法可包括高壓連續(xù)湍流。在一個(gè)實(shí)施方案中，高壓連續(xù)湍流包括凝:流化。在另一個(gè)實(shí)施方案中，納米乳劑飲料包含橙汁產(chǎn)品。第二種已知方法包括摻入微米大小的膠束(即直徑數(shù)千納米的微乳)的水分散植物甾醇(即例如不溶于脂肪的甾烷醇)的口服遞藥，隨后可以添力口到々欠料或食品中(Ostlund，Jr.,"Sitostanolformulationtoreducecholesterolabsorptionandmethodforpreparinganduseofsame(降低膽固醇吸收的谷甾醇制劑及其制備方法與用途)"，美國專利第5,932,562號(1999)(通過引用結(jié)合到本文))。當(dāng)將含有植物甾醇的微乳劑給入腸內(nèi)時(shí)，膽固醇吸收降低約37%(Ostlund,Jr.，"Sitostanolformulationtoreducecholesterolabsorptionandmethodforpreparinganduseofsame(降低膽固醇吸收的谷甾醇制劑及其制備方法與用途)"，美國專利第5觀562號(1999);和Spillburg等，"Fat-freefoodssupplementedwithsoystanol-lecithinpowderreducecholesterolabsorptionandLDLcholesterol(添加大豆甾烷醇-卵磷脂粉的脫脂食品降低膽固醇吸收及LDL膽固醇)"，J爿mj;woc.103:577-581(2003))。這種方法的缺點(diǎn)是這些微乳制品的粒徑約數(shù)千納米(即直徑為微米)，因此無法提供最佳功效。本發(fā)明提供納米乳劑技術(shù)，該技術(shù)包括提供粒徑介于10-llOnm之間的特殊制劑和微流化工藝。在一個(gè)實(shí)施方案中，納米粒子具有改進(jìn)的pH和溫度穩(wěn)定性能，從而在整個(gè)胃腸系統(tǒng)中使粒子完整性保持穩(wěn)定。第三種已知方法包括生產(chǎn)水可分散性甾醇制品的植物甾醇的口服遞藥。這些水可分散性產(chǎn)品通常包括乳化劑，包括但不限于單甘油酯和聚山梨酯。已知這些水可分散性產(chǎn)品用粒徑不超過1000nm(平均二358nm)的液體/液體分散體均化。然而，本發(fā)明提供微流化納米乳劑技術(shù)(即例如由連續(xù)湍流高壓工藝所制得)，該技術(shù)改進(jìn)了這些水可分散性植物甾醇成為納米乳劑粒徑約40-60nm的乳化作用。同樣地，通過將甾烷醇/甾醇與高級支鏈烴共熔，然后研磨所得產(chǎn)物來制備水可分散性甾醇/甾烷醇或甾醇/甾烷醇酯組合物的方法也是已^口的(Bruce等,"Methodforproducingdispersiblesterolandstanolcompounds(可分散甾醇和甾烷醇化合物的生產(chǎn)方法)"，美國專利第6，3S7,W/號(2002)(通過引用結(jié)合到本文))。這種研磨方法通常產(chǎn)生的粒徑范圍介于10-150微米之間。產(chǎn)生水可分散甾醇制品的其它已知方法用的是在乳化劑中均化，乳化劑包括但不限于單甘油酯和聚山梨酯。據(jù)報(bào)道，這些均化方法生產(chǎn)的液體/液體分散體的粒徑小于1000nm(平均=358nm)(Stevens等,"Aqueousdispersiblesterolproduct(水可分散性甾醇制品)"，美國專利第6,6W,7朋號(2003)(通過引用結(jié)合到本文))。這種制品當(dāng)添加到橙汁中時(shí)，可以降低LDL膽固醇約12%(Devaraj等，"Plantsterol畫fortifiedorangejuiceeffectivelylowerscholesterollevelsinmildlyhypercholesterolemichealthyindividuals(植物甾醇強(qiáng)化橙汁有效降低輕度高膽固醇血癥健康個(gè)體的膽固醇水平)"，v4rfen'oyc/erT7zrawZFoyc5/。/,24:25-28(2004))。盡管不一定了解發(fā)明機(jī)制，但是我們認(rèn)為，根據(jù)本發(fā)明制備的均勻微流化納米乳劑獲得高得多的表面積/體積之比(即例如高達(dá)6倍)，導(dǎo)致較高的穩(wěn)定性。因此，我們進(jìn)一步認(rèn)為，任何摻入的藥物、營養(yǎng)制品或藥用化妝品提高了功效(即例如植物甾醇降低血漿膽固醇)。我們進(jìn)一步認(rèn)為，本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案提供的含有較小尺寸納米粒子的植物甾醇，當(dāng)與已知的微米尺寸膠束或者微乳相比時(shí)，改善了膳食膽固醇的正常膠束遞送至消化道的破裂狀況。例如，已知預(yù)制的含有植物甾烷醇的微米尺寸膠束在抑制膽固醇吸收時(shí)，其功效比結(jié)晶甾烷醇混懸液高達(dá)3倍(Ostund等，"Sitostanoladministeredinlecithinmicellespotentlyreducescholesterolabsorptioninhumans(給予谷甾醇的卵磷脂膠束有效降低人對膽固醇的吸收)"，/C/f"A^r70:826-831(1999))。2.可吸收脂質(zhì)本發(fā)明還涉及納米乳劑作為可吸收脂質(zhì)的口服遞藥載體的用途，該可吸收脂質(zhì)包括但不限于脂肪酸、類胡蘿卜素、生育酚和其它脂溶性維生素、生育三烯酚和輔酶Q。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供均勻微流化納米乳劑的制備方法，所述均勻微流化納米乳劑包括在液體分散介質(zhì)中基本穩(wěn)定的可吸收脂質(zhì)和任選常用的乳化劑，常用的乳化劑例如磷脂、甘油單脂肪酸酯、甘油二脂肪酸酯或聚山梨酯以配制改進(jìn)的納米乳劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，制備方法包括將預(yù)制混合物暴露于高壓連續(xù)湍流的步驟。在一個(gè)實(shí)施方案中，壓力為至少25,000PSI。在一個(gè)實(shí)施方案中，納米乳劑包含類胡蘿卜素，包括但不限于葉黃素和玉米黃質(zhì)。在一個(gè)實(shí)施方案中，納米乳劑包含粒徑范圍為10-110nm的納米粒子，,人而改進(jìn)生物利用度。在一個(gè)實(shí)施方案中，在口月l、經(jīng)皮、靜脈內(nèi)、腹膜內(nèi)、肌內(nèi)或皮下遞藥后，納米乳劑生物利用度得到改進(jìn)。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供治療或預(yù)防黃斑變性(即65歲以上人群致盲的主要原因)的方法，該方法提供包含至少一種類胡蘿卜素的改進(jìn)的納米乳劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，類胡蘿卜素選自葉黃素或玉米黃質(zhì)。在正常生理?xiàng)l件下，這些類型的化合物難被胃腸系統(tǒng)吸收。因此，預(yù)測脂質(zhì)營養(yǎng)物的吸收變化不定，因此導(dǎo)致脂質(zhì)生物利用度(即例如所吸收劑量的百分比)也是十分變化不定。影響生物利用度的因素包括但不限于食品加工方法、食品基質(zhì)(foodmatrix)和在天然存在的膠束(即例如脂質(zhì)膠束運(yùn)送系統(tǒng))中的生理溶解度。脂溶性營養(yǎng)物可以摻入到含有高脂的植物油中用于分散到脂肪基質(zhì)(即例如微米尺寸膠束)中。膠束使脂溶性營養(yǎng)物增溶，從而允許小腸吸收。例如，當(dāng)植物甾醇以膠束遞送時(shí)，膽固醇吸收抑制增強(qiáng)多達(dá)3倍(Ostlund等，"Sitostanoladministeredinlecithinmicellespotentlyreducescholesterolabsorptioninhumans(給予谷甾酉孚的卵石粦月旨膠束有效降低人對膽固醇的吸收)"，/70:826-831(1999))。同樣，當(dāng)使類胡蘿卜素在膠束中增溶時(shí)，觀察到在細(xì)胞培養(yǎng)物中體外類胡蘿卜素生物利用度提高(Xu等，"Solubilizationandstabilizationofcarotenoidsusingmicelles:deliveryoflycopenetocellsinculture(利用膠束使類胡蘿卜素增溶和穩(wěn)定番茄紅素遞送到培養(yǎng)細(xì)胞內(nèi))"，Zip/A34:1031-1036(1999))。然而，使用膠束的缺點(diǎn)包括4吏用氯化有機(jī)溶劑，這是在食品工業(yè)中應(yīng)當(dāng)避免的做法。另一個(gè)體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)，脂肪酸、維生素和(3-胡蘿卜素等親脂物質(zhì)的納米乳劑可被遞送到細(xì)胞培養(yǎng)基(RPMI-1640)中并被TK-6細(xì)胞攝入(Zuelli等，"Deliveringlipophilicsubstancesintocellsusingnanoemulsions(利用納米乳齊寸將親脂物質(zhì)遞送至細(xì)胞內(nèi))"，美國專利第6,55S,W7號(2003)(通過引用結(jié)合到本文))。II.均勻納米乳劑的藥代動(dòng)力學(xué)特征在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供用高壓連續(xù)湍流法生產(chǎn)的納米乳劑，該納米乳劑當(dāng)與本領(lǐng)域目前已知的常規(guī)納米顆粒組合物和/或納米乳劑相比較時(shí)，具有改進(jìn)的藥代動(dòng)力學(xué)特征。已知納米顆粒比凝:顆粒更有效地遞送和/或釋放藥物(即例如諾氟沙星(norflaxin))和/或蛋白質(zhì)(即例嗦口血清白蛋白)(Jeon等，"Effectofsolventonthepreparationofsurfactant-freepoly(DL-lactide-co-glycolide)nanoparticlesandnorfloxacinreleasecharacteristics('溶劑對制備不含表面活性劑的聚DL-丙交酯-乙交酯共聚物納米顆粒的影響及諾氟沙星的釋放特征)，，，/"f/p/wrm207:99-108(2000);和Panyam等，"Polymerdegradationandinvitroreleaseofamodelproteinfrompoly(DL-lactide-co-glycolide)nano-andmicroparticles(聚合物降解與聚DL-丙交酯-乙交酯共聚物納米顆粒和;微顆粒中沖莫式蛋白的體外釋力欠)"，JCo"ro/7e/e氾e92:173-187(2003》。本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案提供均勻微流化納米乳劑，該均勻微流化納米乳劑當(dāng)與本領(lǐng)域目前已知的常規(guī)納米顆粒組合物和/或納米乳劑相比較時(shí)，具有改進(jìn)的藥代動(dòng)力學(xué)特征。均勻微流化納米乳劑的一個(gè)優(yōu)勢包括粒徑范圍窄(即例如10-110nm)。目前已知的大多數(shù)常規(guī)納米顆粒組合物和/或納米乳劑的粒徑分布較寬，抵銷了較小尺寸顆粒改進(jìn)的功效和生物利用度。本發(fā)明解決了納米乳劑生產(chǎn)中遇到的粒徑變化十分大的問題，提供了較均勻的小尺寸納米乳劑(即例如包含穩(wěn)定顆粒的均勻納米乳劑)。因此，這些不依賴于遞送方式(包括但不限于口服、經(jīng)皮、靜脈內(nèi)、腹膜內(nèi)、肌內(nèi)或皮下等)的均勻納米乳劑，當(dāng)與本領(lǐng)域目前已知的常規(guī)納米顆粒組合物和/或納米乳劑相比較時(shí)，具有改進(jìn)的藥代動(dòng)力學(xué)特征。A.吸收相采用常規(guī)納米顆粒組合物或納米乳劑并不理想，這是由于起效延遲所致。相比之下，本發(fā)明提供的均勻微流化納米乳劑顯示出較快的治療效果。市售的藥物和營養(yǎng)制品為片劑、液體制劑、凝膠膠嚢劑、膠嚢劑等等，一般用于口服給藥。這些組合物的峰值血漿濃度通常發(fā)生在給藥后2-4小時(shí)。如果將本發(fā)明所提供的均勻微流化納米乳劑制成口服劑型，則所摻入的化合物可獲得少于約2小時(shí)的峰值血漿濃度，優(yōu)選少于約1小時(shí)，更優(yōu)選少于約30分鐘，但是最優(yōu)選介于l-15分鐘之間。B.給藥頻率和給藥劑量大多數(shù)藥物和營養(yǎng)制品推薦的總?cè)談┝堪捶謩┙o予。單日劑量可優(yōu)選每天多次給藥為本領(lǐng)域所知。例如，在部分性癲癇發(fā)作成人患者的研究中，日劑量為200mg/天的效果不穩(wěn)定，比400mg/天的效果低。參見Physicians'DeskReference,增刊57，第2502頁(2003)。相比之下，可以較低頻率、較低劑量和以液體分散制劑、散劑、噴霧劑、固體再分散劑型、軟膏劑、乳膏劑等劑型，給予本發(fā)明的某些均勻微流化納米乳劑。用于本發(fā)明劑型類型的實(shí)例包括但不限于任何藥物、營養(yǎng)制品或藥用化妝品的液體分敉劑型、凝膠劑、氣霧劑(經(jīng)肺和經(jīng)鼻)、軟膏劑、乳膏劑、固體劑型等等?？梢允褂幂^小的劑量，因?yàn)楸景l(fā)明實(shí)施方案的粒徑較小，確保了較為充分的吸收。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供治療有效量的均勾微流化納米乳劑，其治療有效量為常規(guī)藥物、營養(yǎng)制品或藥用化妝品制劑治療有效量的1/6、1/5、1/4、1/3或1/2。C.口服給藥可以預(yù)期常規(guī)納米顆?；蚣{米乳劑組合物的液體劑型是體積相對較大、物質(zhì)粘性較高，可能不太被受治療者群體完全接收。而且，粘性溶液劑在胃腸外用藥時(shí)可能有問題，因?yàn)檫@些溶液劑需要緩慢的注射器推力，并可能粘住管壁。此外，水溶性不佳的活性藥物的常規(guī)制劑對于靜脈內(nèi)給藥技術(shù)往往是不安全的，主要與水溶性高的物質(zhì)結(jié)合使用。本發(fā)明所提供的實(shí)施方案通過利用基本溶于液體分散介質(zhì)的藥物、營養(yǎng)制品或藥用化妝品，解決了這個(gè)問題。均勻微流化納米乳劑實(shí)施方案的液體劑型提供了優(yōu)于常規(guī)納米顆粒或納米乳劑的明顯優(yōu)勢。在一個(gè)實(shí)施方案中，均勻微流化納米乳劑包括粘度低。在另一個(gè)實(shí)施方案中，均勻納米乳劑包括質(zhì)地光滑。這些優(yōu)勢包括例如i)更好的受治療者順應(yīng)性，因?yàn)閯┬偷母杏^較稀，易于使用和消化；ii)便于分散，因?yàn)榭梢杂帽踊蜃⑸淦?；iii)配制濃度較高的藥物、營養(yǎng)制品或藥用化妝品的可能性，導(dǎo)致較低的劑量體積，因此受治療者使用的體積較?。缓蚷v)總體配制更容易(easieroverallformulationconcerns)。本發(fā)明所提供的均勻納米乳劑的液體劑型較易于使用，這在考慮青少年受治療者、臨終疾病受治療者和年長受治療者時(shí)尤其重要。這些受治療者群體不能很好地耐受需要相對較大劑量體積的粘性制劑或砂粒質(zhì)制劑。液體口服劑型對于使用片劑有困難的受治療者群體(例如嬰兒和長者)是特別優(yōu)選的。在每毫升濃度大致相同的情況下，本發(fā)明納米顆粒托吡酯液體劑型的粘度與常規(guī)納米顆粒組合物或納米乳劑的液體口服劑型相比，優(yōu)選小于約1/200、小于約1/175、小于約1/150、小于約1/125、小于約1/100、小于約1/75、小于約1/50或小于約1/25。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供不混濁的均勾微流化納米乳劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，混濁是指肉眼可以觀察到的顆粒物質(zhì)的性質(zhì)，或者在使用時(shí)可以感覺到"砂粒質(zhì)感"的性質(zhì)。本發(fā)明實(shí)施方案所提供的納米乳劑可以像水一樣輕易地從容器中倒出或者抽出，而預(yù)期常規(guī)納米顆?；蚣{米乳劑組合物的液體劑型具有明顯的較"粘滯"的特征。D.生物利用度提高在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供相同劑量下，與給予現(xiàn)有的常規(guī)納米顆粒組合物和納米乳劑相比，生物利用度提高，劑量需求較小的均勻微流化納米乳劑。任何藥物、營養(yǎng)制品或藥用化妝品如果在規(guī)定時(shí)間內(nèi)以規(guī)定劑量給予時(shí)，都可能具有不利的副作用。因此，需要較低劑量然而卻可以達(dá)到與用較大劑量所觀察到的相同或更好的治療效果。這種較低的劑量可以用本發(fā)明所提供的均勻微流化納米乳劑來實(shí)現(xiàn)，因?yàn)楸绕鸪Ｒ?guī)納米顆粒組合物和納米乳劑，生物利用度較高，因此較低劑量的藥物和營養(yǎng)制品很可能是獲得所需治療效果所需要的。例如，摻到常規(guī)納米顆?；蚣{米乳劑的藥物、營養(yǎng)制品或藥用化妝品的相對生物利用度可約為85%(即與純?nèi)芤合啾?。在一個(gè)實(shí)施方案中，配制成口服藥物、營養(yǎng)制品或藥用化妝品劑型的均勻微流化納米乳劑的相對生物利用度優(yōu)選約大于85%。在一個(gè)實(shí)施方案中，相對生物利用度大于約90%,或大于約95%,大于約98%。E.藥代動(dòng)力學(xué)特征本發(fā)明還提供均勻微流化納米乳劑的實(shí)施方案，該均勻微流化納米乳劑摻有藥物和/或營養(yǎng)制品，當(dāng)給予哺乳動(dòng)物受治療者時(shí)，具有改進(jìn)的藥代動(dòng)力學(xué)特征。在一個(gè)實(shí)施方案中，改進(jìn)的特征是與常規(guī)納米顆粒組合物和納米乳劑相比較的。本發(fā)明改進(jìn)的藥代動(dòng)力學(xué)(pK)特征可能具有幾種不同類型的特性。在一個(gè)實(shí)施方案中，均勻微流化納米乳劑改進(jìn)的pK特征可以產(chǎn)生與常規(guī)納米顆粒組合物或納米乳劑相同的pK特征，但卻是在較低劑量下產(chǎn)生的。在另一個(gè)實(shí)施方案中，與常規(guī)納米顆粒組合物或納米乳劑相比，改進(jìn)的pK特征需要較低的給藥頻率。在一個(gè)實(shí)施方案中，比起常規(guī)納米顆粒組合物和納米乳劑，改進(jìn)的pK特征顯示活性起效較快和/或藥物吸收量較大(即生物利用度較高)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，改進(jìn)的pK特征允許更有效和/或較快地滴定到受治療者的治療性血漿水平。本發(fā)明提供具有改進(jìn)藥代動(dòng)力學(xué)特征的均勻微流化納米乳劑的一些實(shí)施方案，藥代動(dòng)力學(xué)特征用最大濃度時(shí)間(Tmax)、最大濃度(Cmax)和/或曲線下面積(AUC)特征來表示。在一個(gè)實(shí)施方案中，在給予相同劑量時(shí)，摻入均勻微流化納米乳劑中的藥物、營養(yǎng)制品或藥用化妝品給藥劑量的Tm狀小于常規(guī)納米顆粒組合物和/或納米乳劑的T,。優(yōu)選在給予相同劑量時(shí)，該T,約小于常MJ內(nèi)米顆粒組合物和/或納米乳劑的Tmax的99%、90%、80%、70%、60%、50%、40%、30%、25%、20%、15%或10%。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在給予相同劑量時(shí)，摻入均勻微流化納米乳劑中的藥物、營養(yǎng)制品或藥用化妝品給藥劑量的Cn^大于常規(guī)納米顆粒組合物和/或納米乳劑的Cmax。優(yōu)選在給予相同劑量時(shí)，該Cmax約大于常規(guī)納米顆粒組合物和/或納米乳劑的C咖x的5%、10%、15%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%、110%、120%、130%、140%或150%。在一個(gè)實(shí)施方案中，在給予相同劑量時(shí)，摻入均勻微流化納米乳劑中的藥物、營養(yǎng)制品或藥用化妝品給藥劑量的AUC大于常規(guī)納米顆粒組合物和/或納米乳劑的AUC。優(yōu)選在給予相同劑量時(shí)，該AUC約大于常規(guī)納米顆粒組合物和/或納米乳劑的AUC的5%、10%、15%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%、110%、120%、130%、140%或150%。III.無菌納米乳劑本發(fā)明提供具有抗菌性能的納米乳劑的制備方法。在一個(gè)實(shí)施方案中，該方法包括將預(yù)混合物暴露于高壓連續(xù)湍流的步驟。在一個(gè)實(shí)施方案中，通過微流化制備抗菌納米乳劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，暴露包括約30秒鐘。在另一個(gè)實(shí)施方案中，暴露包括至少25,000PSI的壓力。在另一個(gè)實(shí)施方案中，抗菌納米乳劑包含大豆蛋白。例如將大豆蛋白粉制品加到水中從而形成混懸液。然后，將第一等分混懸液加到第一容器(即例如細(xì)胞培養(yǎng)falcon培養(yǎng)瓶)中，用作對照。將第二等分混懸液進(jìn)行微流化(同上)以生產(chǎn)納米乳劑。按實(shí)施例5將制品微流化。然后將微流化納米乳劑加到第二容器中。將兩個(gè)容器立即放入水箱內(nèi)，觀察數(shù)天。對照混懸液結(jié)塊并長出細(xì)菌。見圖15A和圖15B。相比之下，含有大豆蛋白的微流化納米乳劑沒有結(jié)塊，也沒有長出細(xì)菌。見圖15C和圖15D。盡管不一定了解發(fā)明的機(jī)制，但是我們認(rèn)為微流化作用可以滅菌。我們進(jìn)一步認(rèn)為微流化剪切應(yīng)力導(dǎo)致細(xì)菌細(xì)胞裂解，從而防止進(jìn)一步的細(xì)菌生長。因此，我們認(rèn)為本文所提供的微流化法能生產(chǎn)無微生物的組合物。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供具有用高壓連續(xù)湍流法產(chǎn)生的氧化環(huán)境的納米乳劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，納米乳劑包括均勻微流化納米乳劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，氧化環(huán)境防止細(xì)菌生長。在另一個(gè)實(shí)施方案中，氧化環(huán)境是殺菌的。在另一個(gè)實(shí)施方案中，氧化環(huán)境提供無菌納米乳劑。納米乳劑的氧化環(huán)境可由表面積與體積比增大所產(chǎn)生。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明還提供在抗氧化劑存在下避免通過微流化產(chǎn)生氧化環(huán)境的方法。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗氧化劑減少微流化納米乳劑中活性氧中間體(ROS)的存在。在另一個(gè)實(shí)施方案中，抗氧化劑被納米顆粒包封起來用于隨后釋出給受治療者。通過測定氧化環(huán)境的指示劑，可以定量測定任何納米乳劑內(nèi)的ROS荷載。丙二醛(MDA)是已知的氧化環(huán)境指示劑。表l.根據(jù)丙二醛形成所測定的納米乳劑中的氧化應(yīng)力<table>tableseeoriginaldocumentpage33</column></row><table>從上表l中可以發(fā)現(xiàn)，微流化納米乳劑的制備方法提高M(jìn)DA水平大約13倍。此外，維生素C和/或維生素E的存在防止了在微流化納米乳劑中產(chǎn)生MDA，從而使MDA回復(fù)到內(nèi)穩(wěn)態(tài)的血漿水平。實(shí)驗(yàn)以下實(shí)施例是本發(fā)明所提供的具體實(shí)施方案，并且不是限制性的。實(shí)施例l:植物甾醇微流化納米乳劑的穩(wěn)定制劑本實(shí)施例是微流化納米乳劑的一個(gè)植物甾醇實(shí)施方案。分步過程如下1.加熱4g大豆油2.加入5g大豆卵磷脂，攪拌并加熱至90。C3.加入lg植物甾醇，攪拌并加熱10分鐘4.加入250mg聚山梨酯805.加熱240ml去離子水至70°C6.將步驟4的混合物加到步驟5的混合物中，連續(xù)攪拌并加熱30分鐘7.將步驟6的混合物均化2-4分鐘8.在電熱板上攪拌制劑10分鐘9.用M-110EH設(shè)備于25,000PSI進(jìn)行一次微流化10.用MalvernNanoS儀器進(jìn)行粒徑分析這些微流化植物甾醇納米乳劑的平均粒徑(即峰1/峰2)為39nm。見圖1。植物甾醇微流化納米乳劑的平均粒徑數(shù)據(jù)見下表2。表2:微流化植物甾醇納米乳劑<table>tableseeoriginaldocumentpage34</column></row><table>Z平均:38.91;PDI:0.228;截距(intercept):0.9764。三個(gè)月后，再次測量粒徑。這種微流化植物甾醇納米乳劑的平均粒徑(即峰l)為64.4nm。見圖1A。三個(gè)月后植物甾醇納米乳劑的平均粒徑數(shù)據(jù)見下表3。表3:保存3個(gè)月微流化植物甾醇納米乳劑<table>tableseeoriginaldocumentpage35</column></row><table>Z平均:64.4;PDI:0.196;截距0.969。實(shí)施例2:鱈魚肝油微流化納米乳劑的穩(wěn)定制劑本實(shí)施例是微流化納米乳劑的一個(gè)鱈魚肝油實(shí)施方案，其粒徑穩(wěn)定至少4個(gè)月。分步過程如下1.加熱5g大豆油(65'C)2.加入5g鱈魚肝油，撹拌并加熱至80。C3.加入6g聚山梨酯80，攪拌并加熱20分鐘4.加入200ml去離子水，攪拌并加熱30分鐘5.用M-l10EH設(shè)備于25,000PSI進(jìn)行一次微流化6.用MalvernNanoS儀器進(jìn)行粒徑分析這種鱈魚肝油微流化納米乳劑的平均粒徑(即峰1/峰2)為58nm。在進(jìn)行微流化前，鱈魚肝油混懸液的平均粒徑為2，842nm。這表示通過微流化器一次后，平均粒徑減小50倍。微流化工藝后4個(gè)月，再次測定粒徑，未觀察到有變化。見圖2。4個(gè)月微流化樣品的平均粒徑數(shù)據(jù)見表4。表4:制備后4個(gè)月的微流化鱈魚肝油納米乳劑<table>tableseeoriginaldocumentpage35</column></row><table>Z平均45.15;PDI:0.247;截距0.9707。實(shí)施例3:生育酚微流化納米乳劑的穩(wěn)定制劑本實(shí)施例是微流化納米乳劑的一個(gè)生育酚實(shí)施方案，粒徑保持至少5個(gè)月，分步過程如下1.加熱13.5g大豆油2.加入2g生育酚，攪拌并加熱至90。C3.加熱2g聚山梨酯80的100ml去離子水溶液，加熱至75°C4.將步驟3的混合物加到步驟2的混合物中5.加熱300ml去離子水及6g聚山梨酯80，加熱直到70°C6.將步驟4的混合物加到步驟5的混合物中，繼續(xù)攪拌和加熱7.將步驟6的混合物均化2-4分鐘8.在電熱板上攪拌制劑3-5分鐘9.用M-l10EH設(shè)備于25,000PSI進(jìn)行一次微流化10.用MalvernNanoS儀器進(jìn)行粒徑分析生育酚孩t流化納米乳劑的平均粒徑為64nm。在進(jìn)4于孩么流化前，生育酚混懸液的平均粒徑為1,362nm。這表示通過微流化器一次后，平均粒徑減小21倍。微流化工藝后5個(gè)月，再次測定粒徑，未觀察到有變化。見圖3。5個(gè)月微流化樣品的平均粒徑數(shù)據(jù)見表5。表5:制備后5個(gè)月的微流化生育酚納米乳劑<table>tableseeoriginaldocumentpage36</column></row><table>Z平均:58.07;PDI:0.234;截距0.9697。實(shí)施例4:葉黃素和玉米黃質(zhì)^:流化納米乳劑的制劑本實(shí)施例是微流化納米乳劑的一個(gè)葉黃素/玉米黃質(zhì)實(shí)施方案。分步過程如下1.力口熱5g大豆油2.加入2g卵磷脂3.加熱并攪拌，10分鐘4.力口入125mg葉黃素和125mg玉米黃質(zhì)5.加熱并攪拌，10分鐘6.加熱240ml去離子水，50°C7.將熱水加到混合物中8.攪拌并加熱，直到形成溶液9.用M-l10EH設(shè)備于25,000PSI進(jìn)行一次微流化10.用MalvernNanoS儀器進(jìn)行粒徑分析葉黃素和玉米黃質(zhì)微流化納米乳劑的平均粒徑(即峰1/峰2)為62nm。見圖4。該樣品的平均粒徑凝:據(jù)見表6。表6:孩i流化葉黃素/玉米黃質(zhì)納米乳劑<table>tableseeoriginaldocumentpage37</column></row><table>Z平均:62.26;PDI:0.245;截距0.976。實(shí)施例5:大豆蛋白微流化納米乳劑的制劑本實(shí)施例是^:流化納米乳劑的一個(gè)大豆蛋白實(shí)施方案。分步過程^口下1.力口^！5g大豆'J由2.加入5g液體卯^疇脂3.攪拌并加熱IO分鐘，70°C4.加熱240ml去離子水，65°C5.將熱水加到混合物中6.加入9g大豆蛋白，攪拌并加熱10分鐘7.加入9g大豆蛋白8.攪拌并加熱20分鐘，70°C9.均化1分鐘10.用M-110EH設(shè)備于25,000PSI進(jìn)行10次微流化11.用MalvernNanoS儀器進(jìn)行粒徑分析Vanilla大豆蛋白(CentralSoya公司)微流化納米乳劑的平均粒徑(即峰1/峰2)為55nm。見圖5。樣品的平均粒徑數(shù)據(jù)見表7。表7:微流化大豆蛋白納米乳劑直徑(nm)強(qiáng)度(％)寬度(nm)峰155.1580.3216.45峰22卯.819.6882.82峰3000Z平均:54.97;PDI:0.283;截距0.9819。實(shí)施例6:乳清蛋白微流化納米乳劑的制劑本實(shí)施例是微流化納米乳劑的一個(gè)乳清蛋白實(shí)施方案。分步過程如下1.力口熱5g大豆油2.加入5g大豆卵磷脂3.加入250mg聚山梨酯804.攪4半并加熱IO分鐘，70°C5.加熱240ml去離子水，65。C6.將熱水加到混合物中7.加入10g乳清蛋白8.攪拌并加熱10分鐘9.均化1分鐘10.用M-110EH設(shè)備于25,000PSI進(jìn)行一次微流化11.用MalvernNanoS儀器進(jìn)行粒徑分析乳清蛋白微流化納米乳劑的平均粒徑(即峰1/峰2)為108nm。見圖6。樣品的平均粒徑數(shù)據(jù)見表8。表8:微流化乳清蛋白納米乳劑<table>tableseeoriginaldocumentpage39</column></row><table>Z平均:108.2;PDI:0.263;截距0.948。實(shí)施例7:橙汁、植物甾醇和葉黃素微流化納米乳劑的制劑本實(shí)施例是微流化納米乳劑的一個(gè)橙汁/植物甾醇/葉黃素實(shí)施方案。分步過程如下1.加熱大豆油，80°C2.加入1.5g植物甾醇3.攪拌并加熱，5分鐘4.加入5g聚山梨酯805.加入70mg葉黃素6.攪拌并加熱，10分鐘7.加入240ml橙汁(Tropicana)8.攪拌并加熱，1小時(shí)9.用M-l10EH設(shè)備于25,000PSI進(jìn)行兩次微流化10.用MalvernNanoS儀器進(jìn)行粒徑分析橙汁/植物甾醇/葉黃素微流化納米乳劑的平均粒徑(即峰1/峰2)為46nm。見圖7。樣品的平均粒徑數(shù)據(jù)見表9。表9:微流化橙汁/植物甾醇/葉黃素納米乳劑<table>tableseeoriginaldocumentpage40</column></row><table>Z平均:46.41;PDI:0.322;截距0.9609。實(shí)施例8:DHA魚油/7JC跌流化納米乳劑的穩(wěn)定制劑本實(shí)施例是纟效流化納米乳劑的一個(gè)DHA魚油/水實(shí)施方案，粒徑保持至少2個(gè)月。分步過程如下1.加熱6.4gDHA魚油2.加入6g大豆卵磷脂3.加入250mg聚山梨酯804.加熱240ml去離子水，75°C5.將熱水加到混合物中6.攪拌并加熱，20分鐘7.均化2分鐘8.攪拌并加熱，10分鐘9.用M-110EH設(shè)備于25,000PSI進(jìn)行一次微流化10.用MalvernNanoS儀器進(jìn)行粒徑分析DHA魚油/水微流化納米乳劑的平均粒徑(即峰l)為73nm。微流化工藝后2個(gè)月，再次測定粒徑，未發(fā)現(xiàn)有變化。見圖8。2個(gè)月后微流化樣品的平均粒徑數(shù)據(jù)見表10。表10:穩(wěn)定的微流化DHA魚油/水納米乳劑<table>tableseeoriginaldocumentpage41</column></row><table>Z平均:72.58;PDI:0.205;截距0.9636。實(shí)施例9:DHA魚油/牛奶^t流化納米乳劑的穩(wěn)定制劑本實(shí)施例是一個(gè)未添加任何乳化劑的DHA魚油/牛奶實(shí)施方案，其粒徑保持至少3周。分步過程如下1.加熱1.5gDHA魚油，50°C2.加熱200ml全脂牛奶，50°C3.將兩者混合在一起4.攪拌并加熱，10分鐘5.用M-110EH設(shè)備于25,000PSI進(jìn)行一次微流化6.用MalvernNanoS儀器進(jìn)行粒徑分析DHA魚油/牛奶微流化納米乳劑的平均粒徑(即峰l)為93nm。該納米乳劑制備時(shí)未添加任何乳化劑。微流化工藝后3周，溶液中仍有魚油，再次測定粒徑，未發(fā)現(xiàn)有變化。見圖9。3周后樣史流化樣品的平均粒徑數(shù)據(jù)見表ll。表ll:穩(wěn)定的微流化DHA魚油/牛奶納米乳劑<table>tableseeoriginaldocumentpage41</column></row><table>Z平均:93.11;PDI:0.178;截距0.9341。實(shí)施例10:^:流化納米乳劑的溫度穩(wěn)定性本實(shí)施例證明暴露在熱或冷后，微流化納米乳劑的穩(wěn)定性。本實(shí)驗(yàn)所用制劑包含DHA魚油/牛奶/生育酚。1.將lg維生素C溶于25ml去離子水2.將200ml全脂牛奶加到步驟1中3.使用1.7gDHA魚油，并加入800mgS-生育酚4.將步驟1和步驟2加到步驟3中5.攪拌并加熱IO分鐘，50°C6.用M-l10EH設(shè)備于25,000PSI進(jìn)行一次微流化7.用MalvernNanoS儀器進(jìn)行粒徑分析DHA魚油/牛奶/生育酚微流化納米乳劑的平均粒徑(即峰l)為87nm。見圖10。該納米乳劑制備時(shí)未添加任何乳化劑。最初納米乳劑的平均粒徑數(shù)據(jù)見表12。表12:微流化DHA魚油/牛奶/生育酚最初的納米乳劑<table>tableseeoriginaldocumentpage42</column></row><table>Z平均:87.09;PDI:0.216;截距0.9339。最初的微流化納米乳劑用巴斯德滅菌法在75。C下滅菌30秒鐘。24小時(shí)后，溶液中仍有魚油，與最初的納米乳劑相比，粒徑保持穩(wěn)定。見圖11。經(jīng)巴斯德滅菌法滅菌(簡稱巴氏滅菌)的微流化納米乳劑的平均粒徑數(shù)據(jù)見表13。表13:微流化DHA魚油/牛奶/生育酚巴氏滅菌納米乳劑<table>tableseeoriginaldocumentpage43</column></row><table>Z平均87.18;PDI:0.198;截距0.9281。在-4X:下，對最初的微流化納米乳劑進(jìn)行24小時(shí)凍融測試。24小時(shí)后，溶液中仍有魚油，與最初的納米乳劑相比，粒徑保持穩(wěn)定。見圖12。凍融微流化納米乳劑的平均粒徑數(shù)據(jù)見表14。表14:微流化DHA魚油/牛奶/生育酚凍融納米乳劑<table>tableseeoriginaldocumentpage43</column></row><table>Z平均87.58;PDI:0.198。實(shí)施例ll:膳食番茄紅素生物利用度的改進(jìn)本實(shí)施例證實(shí)，當(dāng)以均勻微流化納米乳劑伺喂番茄紅素時(shí)，相對于混入標(biāo)準(zhǔn)々欠食配方的番茄紅素，番茄紅素的生物利用度得到改進(jìn)。番茄紅素微流化納米乳劑的分步制備法如下1.力卩熱5g大豆油2.加入2g卯磷脂3.加熱并攪拌，10分鐘4.加入125mg番茄紅素5.加熱并攪拌，10分鐘6.加熱240ml去離子水(或葡萄汁)；50°C7.將加熱的水(或葡萄汁)力口到混合物中8.攪拌并加熱，直到形成溶液9.用M-110EH"i殳備于25,000PSI進(jìn)行一次樣i流化10.用MalvernNanoS儀器進(jìn)行粒徑分析番茄紅素微流化納米乳劑的平均粒徑為74nm。在沙鼠中的生物利用度將上述微流化納米乳劑摻入基于顆粒飼料(chow)的飲食中，在4周內(nèi)祠喂沙鼠。對照組祠喂番茄紅素與富含油的基于顆粒飼料的飲食。4周結(jié)束時(shí)，采集兩組沙鼠的血液，得到血漿，經(jīng)HPLC測定血漿番茄紅素水平。圖13表明，對照沙鼠無可4企測到的血漿番茄紅素水平。然而飼喂包含微流化番茄紅素納米乳劑的沙鼠顯示血漿茄紅素水平升高。見圖14。在人體中的生物利用度用葡萄汁代替水來制備微流化番茄紅素納米乳劑，在4天時(shí)間內(nèi)，口服給予兩個(gè)受治療的人(125mg/份，每天兩份)。這種給藥提高血漿番茄紅素水平大約38。/。(It據(jù)未顯示)。實(shí)施例12:微流化納米乳劑的改進(jìn)功效本實(shí)施例提供的數(shù)據(jù)表明，微流化納米乳劑改進(jìn)的功效超過常規(guī)納米乳劑所觀察到的功效。具體地講，本實(shí)施例對3種植物甾醇制劑降低高膽固醇血癥倉鼠血漿低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)水平的能力進(jìn)行了比較。微流化混合的植物甾醇(60%谷甾醇)納米乳劑的分步制備法如下1.力口熱5g大豆油2.加入5g大豆卵磷脂，攪拌并加熱15分鐘3.重復(fù)步驟24.加入15g大豆油，撹拌并力口熱IO分鐘5.加入4g植物甾醇，攪拌并加熱10分鐘6.重復(fù)步驟4四次7.加入lg聚山梨酯80，攪拌并加熱10分鐘8.加熱200mlMinuteMaidHeartwise⑧橙汁(75。C)9.加熱1800mlMinuteMaidHeartwise⑧橙汁(70。C)10.將步驟8加到步驟7中，攪拌并加熱20分鐘(80。C)11.加到步驟10中12.加入lg聚山梨酯80，攪拌并加熱20分鐘(80。C)13.均化2-4分鐘14.在電熱板上攪拌勻漿IO分鐘15.用M-110EH設(shè)備于25,000PSI進(jìn)行一次微流化16.用MalvernNanoS儀器進(jìn)行粒徑分析微流化植物甾醇納米乳劑的平均粒徑為41.95nm。見圖16。將40只倉鼠分成4組，每組10只。第l組飼喂對照高膽固醇血飲食(HCD);第2組飼喂結(jié)晶植物甾醇，30mg/天；第3組飼喂MinuteMaidHeartwise⑧微乳化植物甾醇(Cargill公司)，20mg/天；第4組飼喂微流化植物甾醇納米乳劑，10mg/天。4周后，分析血樣的血漿LDL-C水平。微流化植物甾醇納米乳劑的功效是MinuteMaid1^311界186@微乳化飲食的2倍，是結(jié)晶植物甾醇飲食的3倍。見圖17。數(shù)據(jù)表明，當(dāng)與微米尺寸植物甾醇飲食或結(jié)晶植物甾醇飲食相比時(shí)，實(shí)施例11所述改進(jìn)的生物利用度導(dǎo)致臨床治療得到改進(jìn)。實(shí)施例13:膽固醇納米乳劑不溶性分散介質(zhì)與可溶性^"R介質(zhì)本實(shí)施例提供的數(shù)據(jù)證實(shí)，均勻微流化納米乳劑組合物取決于化合物在液體分散介質(zhì)中基本的溶解性。本實(shí)施例對美國專利第5,510,118號所述微流化技術(shù)與本發(fā)明所提供的一個(gè)實(shí)施方案進(jìn)行比較。選擇可吸收脂質(zhì)膽固醇為試驗(yàn)化合物。I組是'118預(yù)混合物，通過將膽固醇(2g)、水(100ml)和Tween⑧80(0.2g)分散來制備，其中膽固醇不溶于(即至少30mg/ml以下)液體分散介質(zhì)(水)。之后，用M-110EH設(shè)備對這種膽固醇/水/Tweei^80溶液進(jìn)行樣t流化。通過孩i流化器在4,000-20,000PSI范圍內(nèi)進(jìn)行多程(10-15程)微流化，但是因?yàn)楫a(chǎn)熱超過7(TC時(shí)則結(jié)束(比'118專利推薦的30-40。C高得多)。^f敖流化后，發(fā)現(xiàn)大部分的膽固醇沉淀出來。24小時(shí)后，I組納米乳劑中僅含有0.44g膽固醇(即占起始膽固醇重量的22%)。II組是本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案，通過將膽固醇(2g)分散于加熱的大豆油(10g)、大豆卵磷脂(5g)和Tween②80(0.2g)來制備，其中，膽固醇基本溶于(即至少30mg/ml以上)分散介質(zhì)(油)。之后，將這種膽固醇/油/印磷脂/Tween②80加到100ml熱水中，用M-110EH設(shè)備，采用30秒鐘單程，在25,000PSI下進(jìn)行微流化。微流化后，膽固醇的沉淀不十分明顯。24小時(shí)后，II組納米乳劑含有1.66g膽固醇(即占起始膽固醇重量的83%)。數(shù)據(jù)顯示，I組和II組預(yù)混合物制品的粒徑分布幾乎相同。分別見圖18A和圖18B。具體地講，對于這兩種制品，都觀察到700-1000nm單峰范圍內(nèi)的平均粒徑約卯Onm。見表15和表16。表15:膽固醇/Tweei^80/水預(yù)混合物粒徑<table>tableseeoriginaldocumentpage46</column></row><table>然而，在,敖流化后，I組和II組之間粒徑分布的差異非常大。分別見圖19A和圖19B。I組顯示兩個(gè)非常不同和獨(dú)特的峰。見表17。然而，n組則顯示是一個(gè)均勻微流化納米乳劑實(shí)施方案的單峰。見表18。<table>tableseeoriginaldocumentpage47</column></row><table>Z平均:86.8;PDI:0.240;截距0,9455。以上數(shù)據(jù)表明，本發(fā)明一些實(shí)施方案提供生產(chǎn)均勻微流化納米乳劑的優(yōu)于本領(lǐng)域方法的改進(jìn)方法。具體地講，目前清楚的是Bosch等人('118專利)和Cooper等人多項(xiàng)專利(申請公布號'758、'038和'202)沒有提供產(chǎn)生均勻粒徑分布的微流化工藝。實(shí)施例14:納米顆粒組合物與均勻微流化納米乳劑本實(shí)施例介紹了表明碾磨的納米顆粒組合物(例如按Cooper等的美國專利申請公布號制備的納米顆粒組合物)不像本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案所提供的均勻微流化納米乳劑一樣產(chǎn)生均勻粒徑分布。選擇可吸收植物甾醇為試驗(yàn)化合物。I組表示通過將5%(重量/重量)植物甾醇/水溶液與1%(重量/重量)Tween80分散制備成'202預(yù)混合物，其中植物甾醇不溶于(即至少30mg/ml以下)液體分散介質(zhì)(水)。之后在10°C下，植物甾醇/水/Tween80溶液用DYNO-MillKDL(WillyABachofenAG,Machinefabrik,Basel,Switzerland)碾磨1.5-2小時(shí)，采用500pmPolymill500型的碾磨介質(zhì)(即研磨珠)。碾磨后，觀察到大部分的植物甾醇沉淀出來。至少24小時(shí)后，I組納米顆粒制品含有起始植物甾醇重量的1/2以下。II組是本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案，通過將5%(重量/重量)植物甾醇/加熱的大豆油溶液、大豆卵磷脂與1%(重量/重量)Tweer^80分散來制備，其中植物甾醇基本溶于(即至少30mg/ml以上)液體分散介質(zhì)(油)。之后，將植物甾醇/油/卵磷脂/Tween80預(yù)混合物加到100ml熱水中，用M-100EH設(shè)備，采用30秒鐘單程，在25,000PSI下進(jìn)行微流化。微流化后，植物甾醇的沉淀不十分明顯。24小時(shí)后，II組納米乳劑含有起始植物甾醇重量的3/4以上。數(shù)據(jù)顯示，I組和II組預(yù)混合物制品的粒徑分布幾乎相同。例如，對于這兩個(gè)制品，都觀察到700-1000nm單峰范圍內(nèi)的平均粒徑約900nm。見表19和表20。<table>tableseeoriginaldocumentpage48</column></row><table>表20:植物甾醇/油/卵磷脂/Tween<table>tableseeoriginaldocumentpage48</column></row><table>Z平均:1328;PDI:0,427;截距0.6989。然而在加工后，預(yù)期i組和n組之間粒徑分布的差異非常大。例如，I組最可能顯示至少2個(gè)非常不同和獨(dú)特的峰。見表21。然而，II組則僅具有是一個(gè)均勻微流化納米乳劑實(shí)施方案的單峰。見表22。表21:微流化膽固醇/Twee,80/水納米乳劑I組<table>tableseeoriginaldocumentpage49</column></row><table>Z平均:86.8;PDI:0.240;截距0.9455。以上數(shù)據(jù)表明，該納米顆粒組合物不能像本文提供的納米乳劑的一些實(shí)施方案一樣產(chǎn)生均勾的粒徑分布。具體地講，目前清楚的是Cooper等人的多項(xiàng)專利(申請公布號'758、'038和'202)沒有提供產(chǎn)生均勻粒徑分布的碾磨工藝。實(shí)施例15:優(yōu)于常規(guī)納米顆粒組合物的改進(jìn)的生物利用度本實(shí)施例將提供的數(shù)據(jù)顯示，本發(fā)明提供的一個(gè)實(shí)施方案的均勻微流化納米乳劑對比常規(guī)納米顆粒組合物，具有改進(jìn)的植物甾醇生物利用度和/或功效。通過用經(jīng)口管飼法飼喂30只倉鼠litiCi3H-膽固醇，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。然后測定第1天、第2天、第4天和第7天的血漿膽固醇水平。這些數(shù)據(jù)用來計(jì)算7天時(shí)間內(nèi)3H-膽固醇的生物利用度，用曲線下面積(AUC)表示。在血漿放射性水平回復(fù)到背景水平(即約7.5天膽固醇代謝半衰期)后，用下列治療組重復(fù)實(shí)驗(yàn)0=10)。I組標(biāo)準(zhǔn)飲食與植物甾醇相混合。II組標(biāo)準(zhǔn)飲食與按實(shí)施例1制備的均勻微流化植物甾醇納米乳劑相混合。III組標(biāo)準(zhǔn)飲食與按Cooper等人'202申請中所述常規(guī)研磨機(jī)技術(shù)制備的常規(guī)番茄紅素納米顆粒組合物相混合。AUC的測量值可確定每個(gè)制品降低3H-膽固醇吸收進(jìn)入血流的能力，它與每個(gè)制品的生物利用度和/或功效成比例。當(dāng)以均勻微流化納米乳劑給予時(shí)，可觀察到植物甾醇的生物利用度和/或功效較高，因?yàn)閕)均勻微流化納米乳劑的平均粒徑比常規(guī)納米顆粒組合物的小(即例如300nm與50nm);ii)微流化產(chǎn)生比研磨或均化穩(wěn)定的顆粒；和iii)不像研磨或均化所產(chǎn)生的顆粒，微流化產(chǎn)生抗pH顆粒(即抗胃酸條件或小腸堿性條件)。實(shí)施例16:超過常規(guī)納米顆粒組合物的改進(jìn)功效本實(shí)施例提供的數(shù)據(jù)顯示，本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案提供的均勻微流化納米乳劑在降低血漿膽固醇水平方面比起常規(guī)納米顆粒組合物，具有改進(jìn)的功效。這項(xiàng)研究歷時(shí)6周。簡單地講，為了提高和穩(wěn)定血漿膽固醇水平，在試驗(yàn)前2周，飼喂70只倉鼠液體型高膽固醇血飲食。隨后，將倉鼠分成下述7個(gè)試驗(yàn)組(11=10)。每組維持液體型高膽固醇血飲食，并且另祠喂以下成分4周i)納米顆粒組合物(即例如按Cooper等人的'202申請制備)；ii)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案提供的均勻微流化納米乳劑。I組僅高膽固醇血飲食II組高膽固醇血飲食+0.1%(重量/重量)植物甾醇納米顆粒組合物III組高膽固醇血飲食+0.5%(重量/重量)植物甾醇納米顆粒組合物IV組高膽固醇血飲食+1%(重量/重量)植物甾醇納米顆粒組合物V組高膽固醇血飲食+0.1%(重量/重量)植物甾醇均勻微流化納米乳劑VI組高膽固醇血飲食+0.5%(重量/重量)植物甾醇均勻微流化納米乳劑VII組高膽固醇血飲食+1%(重量/重量)植物甾醇均勻微流化納米乳劑在第0、2、3、4、5和6周時(shí)采集血樣，其中血槳膽固醇水平用本領(lǐng)域已知方法測定。觀察到植物甾醇均勻微流化納米乳劑降低血漿膽固醇水平的較高功效，因?yàn)閕)植物甾醇均勻微流化納米乳劑的平均粒徑比常規(guī)納米顆粒組合物的小(即例如300nm與50nm);ii);徵流化產(chǎn)生比研磨或均化穩(wěn)定的顆粒；和iii)不像研磨或均化所產(chǎn)生的顆粒，微流化產(chǎn)生抗pH顆粒(即抗胃酸條件或小腸堿性條件)。實(shí)施例17:微流化單程比較本實(shí)施例提供的數(shù)據(jù)顯示，在相同微流化技術(shù)下，當(dāng)與本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案相比時(shí)，Bosch技術(shù)不產(chǎn)生均勻微流化納米乳劑。按實(shí)施例13制備I組和II組預(yù)混合物。每個(gè)預(yù)混合物于25，000PSI下通過微流化器一次。I組(代表Bosch制劑)顯示，85%顆粒的平均直徑為815nm。見圖20A。II組(代表本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案)顯示，98%顆粒的平均直徑為78nm。見圖20B。這表示平均直徑相差I(lǐng)O倍以上。重要的是，僅15%的Bosch顆粒在100nm的范圍內(nèi)，因此表明在這個(gè)較窄范圍內(nèi)，粒徑分布相差6倍。I組與1I組之間的平均粒徑分布見下表23和下表24。表23:微流化膽固醇/Tweei^80/水納米乳劑單程<table>tableseeoriginaldocumentpage52</column></row><table>權(quán)利要求1.一種包含直徑介于約10納米和約110納米之間的粒子群的納米乳劑，其中所述納米乳劑沒有被直徑大于110納米的粒子污染。2.權(quán)利要求l的納米乳劑，其中所述粒子將化合物包封起來。3.權(quán)利要求2的納米乳劑，其中所述化合物是藥物。4.權(quán)利要求2的納米乳劑，其中所述化合物是營養(yǎng)制品。5.—種包含第一粒子群和第二粒子群的納米乳劑，其中在所述第一粒子群中大部分粒子的直徑介于約10納米和約20納米之間，其中在所述第二粒子群中大部分粒子的直徑介于約40納米和約80納米之間，其中所述納米乳劑沒有^^皮直徑大于110納米的粒子污染。6.權(quán)利要求5的納米乳劑，其中所述粒子將化合物包封起來。7.權(quán)利要求6的納米乳劑，其中所述化合物是藥物。8.權(quán)利要求6的納米乳劑，其中所述化合物是營養(yǎng)制品。9.一種方法，該方法包4舌a)提供i)預(yù)混合物，包含化合物和液體分散介質(zhì)，其中所述化合物在所述介質(zhì)中的溶解度大于30mg/ml;和ii)微流化器，能夠維持至少25,000PSI;b)采用將所述預(yù)混合物單程暴露于所述微流化器以形成直徑范圍約介于10-110nm之間的納米乳粒子群。10.權(quán)利要求1的方法，其中所述液體分散介質(zhì)選自水性介質(zhì)和油基介質(zhì)。11.權(quán)利要求2的方法，其中所述水性介質(zhì)選自水、鹽溶液、林格氏溶液、右旋糖和短鏈醇類。12.權(quán)利要求2的方法，其中所述油基介質(zhì)選自得自植物源和海洋源的々包和及不々包和油、石圭油和礦物油。13.權(quán)利要求l的方法，其中所述化合物選自植物甾醇、鱈魚肝油、生育盼、卵磷脂、葉黃素、玉米黃質(zhì)和大豆蛋白。14.一種方法，該方法包4舌a)提供i)預(yù)混合物，包含化合物、第一抗氧化劑、第二抗氧化劑和水性分散介質(zhì)，其中所述化合物在所述介質(zhì)中的溶解度大于30mg/ml;和iii)微流化器，能夠維持至少25,000PSI;c)采用將所述預(yù)混合物單程暴露于所述微流化器以形成直徑范圍介于約40-110nm之間的納米乳粒子群，其中所述粒徑在至少4個(gè)月內(nèi)保持穩(wěn)定。15.權(quán)利要求14的方法，該方法還包括將所述納米乳粒子群用巴斯德滅菌法進(jìn)行滅菌，其中所述粒徑保持穩(wěn)定。16.權(quán)利要求14的方法，該方法還包括將所述納米乳粒子群冷凍，其中所述粒徑保持穩(wěn)定。17.—種方法，該方法包4舌a)提供i)對所給予的治療有效量的化合物不應(yīng)的患者；ii)納米乳劑，包含包封有所述化合物的粒子群，其中所述粒子的直徑介于約10納米和約110納米之間，其中所述納米乳劑沒有被直徑大于110納米的粒子污染；b)在所述化合物生物利用度得到改進(jìn)且在其中所述化合物是治療有效的條件下，將所述納米乳劑遞送給所述患者。18.權(quán)利要求19的方法，其中所述改進(jìn)的生物利用度包括選自以下的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)T匪降低、C鵬增加和AUC增大。19.權(quán)利要求19的方法，其中所述遞藥包括選自口服、經(jīng)皮、靜脈內(nèi)、腹膜內(nèi)、肌內(nèi)和皮下的方法。20.權(quán)利要求19的方法，其中所述納米乳劑包含植物甾醇。21.權(quán)利要求19的納米乳劑，其中所述納米乳劑包含番茄紅素。22.—種具有抗菌性能的納米乳劑，其中所述納米乳劑包含包封有所述化合物的粒子群，其中所述粒子的直徑介于約IO納米和約110納米之間，其中所述納米乳劑沒有^L直徑大于110納米的粒子污染。23.權(quán)利要求22的納米乳劑，其中所述納米乳劑抵抗細(xì)菌生長至少3個(gè)月。24.權(quán)利要求22的納米乳劑，其中所述抗菌性能包括剪切力引起的細(xì)胞裂解。25.權(quán)利要求22的納米乳劑，其中所述抗菌性能包括氧化環(huán)境。26.權(quán)利要求22的納米乳劑，其中所述納米乳劑是無菌的。27.—種方法，該方法包括a)提供i)預(yù)混合物，包含化合物和液體分散介質(zhì)；和ii)裝置，高壓下能夠產(chǎn)生連續(xù)湍流；b)使用所述裝置產(chǎn)生直徑均一的納米乳粒子群。28.權(quán)利要求27的方法，其中所述分散介質(zhì)選自水性介質(zhì)和油基介質(zhì)。29.權(quán)利要求28的方法，其中所述水性介質(zhì)選自水、鹽溶液、林格氏;容液、右淡二糖和短鏈醇類。30.權(quán)利要求28的方法，其中所述油基介質(zhì)選自得自植物源和海洋源的飽和及不飽和油、石圭油和礦物油。31.權(quán)利要求27的方法，其中所述化合物選自植物甾醇、鱈魚肝油、生育酚、卵磷脂、葉黃素、玉米黃質(zhì)和大豆蛋白。全文摘要本發(fā)明公開了改進(jìn)的納米乳劑，所述納米乳劑包含均勻的、離散程度非常小的納米尺寸直徑的顆粒。這種均勻性導(dǎo)致被摻入的化合物(即藥物或營養(yǎng)制品)的生物利用度得到改進(jìn)，表現(xiàn)在包括但不限于T_max降低、C_max增加和AUC增大等各種不同的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)方面。制備這些均勻納米乳劑的改進(jìn)方法，應(yīng)用了在工藝和力學(xué)上與用來生產(chǎn)納米顆粒組合物的常規(guī)碾磨技術(shù)都不同的微流化法。此外，這種改進(jìn)部分由于將基本可溶性化合物與加熱的分散介質(zhì)相混合的新步驟而產(chǎn)生。這不像現(xiàn)有的將不溶性化合物與未加熱的分散介質(zhì)相混合的納米顆粒組合物方法。此外，觀察到這些納米乳劑是抗菌的，對溫度和pH極端變化均具有穩(wěn)定性。因此，預(yù)期這些納米乳劑比現(xiàn)有納米乳劑的存放期明顯延長。文檔編號A61K9/00GK101384247SQ200680034259公開日2009年3月11日申請日期2006年7月11日優(yōu)先權(quán)日2005年7月18日發(fā)明者R·尼克洛西,T·威爾遜申請人:麻薩諸塞州洛厄爾大學(xué)