專利名稱：：高效埃博霉素的化學(xué)合成的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及稱為埃博霉素(epothilone)的天然產(chǎn)物的合成類似物。更具體地說(shuō)，本發(fā)明涉及高活性埃博霉素化合物，當(dāng)作為抗癌細(xì)胞系的細(xì)胞毒劑測(cè)定時(shí)，其活性超過(guò)埃博霉素EpoA或埃博霉素EpoB的活性。
背景技術(shù)：
：自1996年埃博霉素正式面世[例如，埃博霉素A(化合物l)和埃博霉素B(化合物2),[H6fle等，C/zew.1996，108，1671-1673;麵m.C7z綴嵐捉1996,35,1567-1569.]以來(lái),合成化學(xué)家已經(jīng)從合成和^f奮飾兩個(gè))!見(jiàn)點(diǎn)專注于它們的結(jié)構(gòu)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>1:R=H(埃博霉素A,印oA)2:R-Me(埃博霉素B,EpoB)。這頗為強(qiáng)烈和持久的興趣既不令人驚訝，也不無(wú)價(jià)值，因?yàn)檫@些自然存在的物質(zhì)已經(jīng)證明它們本身是作為抗癌藥物的合成、生物學(xué)有力工具和目前臨床試驗(yàn)有價(jià)值的候選藥物的挑戰(zhàn)性目標(biāo)[a)Okuno等，■/C//".(9"co/.2005,23,3069-3073;b)Altmann，Cwr.尸/^wiDew'g"2005，11,1595-1613;c)Rivkin等，爿"gew.CTzew.2005，117，2898-2910;C/zem.敘M2005，44，2838-2850;d)Kolman,CwmQpz'"./"veW.2004,5,1292-1297;e)Kolman,Cw^r.(9p/"./"veW.Z>w"2004,5，657-667;f)Galmarini等，z7>w^2003，6,1182-1187;g)Biswas等，J」m.C/zem.2002，124,9825-9832]。在本發(fā)明人和合作者的埃博霉素類的結(jié)構(gòu)活性關(guān)系(SAR)研究[Nicolaou等,C7zem.'Comww".2001,1523-1535;Nicolaou等，PwreC7z亂1999，71，989-997;Nicolaou等，C/z亂1998,110，2120-2153;CTzew./"A1998,37,2014-2045;a)Buey等，C/zem.編.2004,11,225-236;Nicolaou等，勘，.C/亂2003,115,3639-3644;~ew.C/2綴'/"f.M2003,42,3515-3520;Nicolaou等，JWra/zec/ra"2002,58，6413-6432;Nicolaou等，《/爿w.C/ze肌Soc.2001，123,9313-9323;Nicolaou等，C/zem.歷o/.2000，7,593-599]定義了窄范圍的結(jié)構(gòu)圖，如果存在的話，它賦予埃博霉素分子生物學(xué)活性并生成幾種有效的埃博霉素，例如，曱硫基埃博霉素B類似物化合物3[Nicolaou等，r"raW腦2002，58,6413-6432]和化合物4[Nicolaou<formula>formulaseeoriginaldocumentpage10</formula>等，j"gew.CTz亂2003,115,3639-3644;Ozern.,五d2003,42:3515-3520]。這一模型或多或少地被最近的基于電子結(jié)晶和核磁共振的微管蛋白-埃博霉素A復(fù)合物的構(gòu)象分析所證實(shí)[Nettles等，5Wence2004，305，866-869;Heinz等，」"gew.C/7ew.2005,117，1324-1327;CTzew.￡d2005，44,1298-1301],該復(fù)合物看來(lái)4是供了大部分的公布的SAR數(shù)據(jù)。如下面所討論的那樣，基于以上模型的新的研究產(chǎn)生了最有效的、天然的或設(shè)計(jì)的至今所報(bào)道的埃博霉素化合物。發(fā)明簡(jiǎn)述本發(fā)明構(gòu)思了埃博霉素化合物。一種所構(gòu)思的化合物在結(jié)構(gòu)上符合下式A-1、A-2、A-3或A-4，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula>A-3A_4其中RA是具有如下結(jié)構(gòu)的芳環(huán)其中各X1、X2和X3獨(dú)立為S、NR1、N、CH或CR2，以至所述5元環(huán)含有至少2個(gè)不是碳的環(huán)原子，或乂2和乂3共同形成稠合到所述5元環(huán)的6元芳環(huán)，它含有至少2個(gè)不是碳的環(huán)原子，R)選自C廣Cr烴基和亞曱基-C廣C8-烴基醚，和R2選自C廣C8-烴基、0-C廣Q-烴基、卣代基、S-C廣CV烴基、亞曱硫基-C,-Cr烴基和亞甲硫基-d-CV?；?。另一個(gè)構(gòu)思的化合物在結(jié)構(gòu)上符合式B-1、B-2、B-3或B-4<formula>formulaseeoriginaldocumentpage12</formula>其中的RB是具有如下結(jié)構(gòu)的芳環(huán)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage12</formula>其中W選自C,-Q-烴基和亞曱基-d-(V烴基醚，和R2選自d-Qr烴基、O-C廣Q-烴基、卣代基、S-C,-CV烴基、亞曱硫基-C廣C8-烴基和亞曱硫基-CrCV?；?。所構(gòu)思的埃博霉素化合物具有藥學(xué)活性，還構(gòu)思含有藥學(xué)有效量的、溶解或分散于藥學(xué)上可接受的稀釋劑的式A-l/A-4或式B-l/B-4化合物的組合物。發(fā)明詳述本發(fā)明構(gòu)思了埃博霉素化合物，其中的2-曱基-4-p塞唑基(thiazyl)取代基被另一個(gè)含氮芳環(huán)取代基取代。在一個(gè)實(shí)施方案中，所考慮的埃博霉素化合物在結(jié)構(gòu)上符合下式A-1、A-2、A-3或A-4，其中所述的5元環(huán)是芳族的并含有至少2個(gè)不是碳的環(huán)原子，各X1、X2和X3獨(dú)立為S、NR1、N、CH或CR2，R'是C廣C8-烴基或亞曱基-C,-Q-烴基醚，和R2選自C,-Q-烴基、O-C廣CV烴基、卣代基、S-d-CV烴基、亞曱硫基-d-Cr烴基和亞曱硫基-C廣Cr?；疤崾?，當(dāng)X2是S和X3是CR2時(shí),R2不是d-Cs-烴基或S-d-C8-烴基，或X2和X3共同形成稠合到所述5元芳環(huán)的6元芳環(huán)。特別優(yōu)選的RA的取代基如下所示<formula>formulaseeoriginaldocumentpage14</formula>另一個(gè)所構(gòu)思的化合物在結(jié)構(gòu)上符合式B-1、B-2、B-3或B-4<formula>formulaseeoriginaldocumentpage14</formula>其中的RB是具有如下結(jié)構(gòu)的芳環(huán)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage14</formula>其中R'選自C廣Cr烴基和亞曱基-C廣Q-烴基醚，和R2選自C廣CV烴基、O-C廣CV烴基、卣代基、S-C廣Cs-烴基、亞曱石克基-C,-CV烴基和亞曱碌u基-C,-C8-?；Ｌ貏e優(yōu)選的RB取代基包括<formula>formulaseeoriginaldocumentpage15</formula>其中Re選自<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>在這些試驗(yàn)中，未發(fā)現(xiàn)氰基埃博霉素化合物21的活性，但它是制備四唑埃博霉素，例如，化合物20的有用的中間體化合物。用于本文的術(shù)語(yǔ)"烴基"作為簡(jiǎn)短的術(shù)語(yǔ)包括僅含碳和氫的脂肪族及脂環(huán)族基團(tuán)或自由基。因此，如包括芳烷基，例如，節(jié)基和苯乙基一樣，應(yīng)包括烷基、鏈烯基和炔基，并包括芳烴，例如，苯基和萘基。預(yù)期的特定烴基取代基中，列舉出所述基團(tuán)；即，Q-Q烷基、曱基或十二碳烯基。示例性烴基含有一個(gè)1-12個(gè)碳原子，優(yōu)選1-約6個(gè)碳原子的鏈。曱基是特別優(yōu)選的烴基。應(yīng)注意，熟練工作者會(huì)明白，鏈烯基或炔基取代基必須具有至少兩個(gè)碳原子。C,-CV烴基氧基或O-C!-Cs-烴基是含有連著氧原子的烴基的醚。同樣地，C,-Cs-烴基硫基或S-d-Cs-烴基是硫醚。亞曱基-d-Cs-烴基醚含有連著所述芳環(huán)和連著烴基醚(-CH2-0-d-Q-烴基)的亞曱基(-CH2-)。同樣地，亞曱石?；?C!-C8-烴基含有連著所述環(huán)和硫醚烴基(-CH2-S-CrCV烴基)的亞曱基。亞曱硫基-C,-C8-?；羞B著所述環(huán)和硫代酰基烴基[-CH2-S-(CO)C,-C7-烴基]的亞曱基。囟代基是選自氟、氯、溴和碘的卣取代基。含雜環(huán)側(cè)鏈區(qū)域選自埃博霉素結(jié)構(gòu)的幾個(gè)區(qū)域，其中可進(jìn)行修飾以潛在地提高分子的活性。以往已經(jīng)確認(rèn)在其特定位置的堿性氮的重要性[Nicolaou等，Ozew.所o/.2000，7,593-599]，該條件被設(shè)定為任何新設(shè)計(jì)的結(jié)構(gòu)要求，而埃博霉素B的其余結(jié)構(gòu)保持完整。這些限制的優(yōu)點(diǎn)在于，例如，原則上可通過(guò)鈀催化的交叉偶聯(lián)反應(yīng)，例如，如下所述的逆合成的Stille反應(yīng)[Nicolaou等，T^ra/zWra"2002,58，6413-6432]，或者通過(guò)降解衍生的高級(jí)中間體(化合物II)和雜環(huán)錫烷(化合物III)的全合成或半合成，制備自本研究呈現(xiàn)的任何潛在的候選藥物(化合物1)。_StiHe偶合_埃博霉素化合物5-21(以下)屬于在結(jié)構(gòu)上符合式A-l的化合物系列，并在上述結(jié)構(gòu)區(qū)域內(nèi)經(jīng)某些另外的原理設(shè)計(jì)。某些親油取代基，例如，曱基和曱硫基基對(duì)微管蛋白結(jié)合和細(xì)胞毒性的有利作用未逃出避我們的關(guān)注，并因而在幾種這些設(shè)計(jì)上引入這類部分(化合物5-20)。我們還要查明在雜環(huán)側(cè)鏈上的其它環(huán)(化合物7,17-19,20)及在那個(gè)鏈上無(wú)環(huán)(化合物21)的作用。最終，我們希望挑戰(zhàn)微管蛋白受體袋(receptorpocket)容納寵大卣素取代基(化合物10、12)的能力。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage18</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage19</formula>1>BGl3'SMej;,CH2CI22),0、、、、CO麵24)MsCIs)Nale)NaBH3CN7)Pd2(dba)3.CHCI3,Cul,AsPh3,cn-BuSrrK藥用組合物可將用于本發(fā)明的埃博霉素化合物配制成藥用組合物。這樣的組合物包含有效量的、溶解或分散于藥學(xué)上可接受的載體或稀釋劑中的埃博霉素。然后，可經(jīng)口、胃腸外、吸入噴霧、直腸或局部給予，呈包含希望的常規(guī)無(wú)毒的藥學(xué)上可接受的載體、輔助劑和賦形劑的劑量單位制劑的所構(gòu)思的組合物。局部給藥也可涉及采用透皮給藥，例如，透皮貼劑或離子電滲療法裝置。用于本文的術(shù)語(yǔ)胃腸外包括皮下注射、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、胸骨內(nèi)注射或輸液技術(shù)。例如，藥物制劑于Hoover,JohnE"Remington藥物科學(xué),Mack出片反7>司，Easton,Pennsylvania;1975和Liberman，H,Aj口Lachman，L.,編庫(kù)辱，藥物劑型,MarcelDecker,NewYork,N.Y.，1980中討論。根據(jù)已知技術(shù)，采用適用的分散或濕潤(rùn)劑和懸浮劑，可配制可注射制劑，例如，滅菌可注射含水或含油混懸劑。滅菌可注射制劑也可為在無(wú)毒的胃腸外可接受稀釋劑或溶劑中的滅菌可注射溶液劑或混懸劑，例如，作為1，3-丁二醇中的溶液。在可接受的賦形劑和溶劑中，可以有水、林格氏液和等滲氯化鈉溶液。此外，無(wú)菌的不揮發(fā)油按常規(guī)用作溶劑或懸浮介質(zhì)。對(duì)于此用途，可采用任何刺激性少的不揮發(fā)油，包括合成的甘油一酯或二酯。此外，脂肪酸，例如，油酸可用于注射劑的制備。可采用二甲基乙酰胺、表面活性劑包括離子和非離子去祐劑、聚乙二醇。溶劑和濕潤(rùn)劑的混合物，例如，上述那些也是有用的?？赏ㄟ^(guò)使藥物與適用的無(wú)刺激性賦形劑，例如，可可脂、合成的甘油一、二或三酯、脂肪酸和聚乙二醇混合，制備用于直腸給藥的栓劑，這些賦形劑常溫下是固體，但在直腸溫度下是液體，從而會(huì)于直腸中熔化并釋放藥物?？诜腆w劑型可包括膠嚢劑、片劑、丸劑、散劑和顆粒劑。在這類固體劑型中，本發(fā)明化合物通常與適合指定給藥途徑的一種或多種輔助劑組合。如果口服，化合物可與乳糖、濕糖、淀粉、鏈烷酸的纖維素酯、纖維素烷基酯、滑石粉、硬脂酸、硬脂酸鎂、氧化鎂、磷酸和硫酸的鈉和4丐鹽、明膠、阿拉伯膠、藻酸鈉、聚乙烯吡咯烷酮和/或聚乙烯醇混合，再制片或制成膠嚢用于常規(guī)給藥。這類膠嚢或片劑制劑。在膠嚢劑、片劑和丸劑的情況下，劑型也可包含緩沖劑，例如，檸檬酸鈉、碳酸鎂或碳酸鈣或碳酸氫鎂或碳酸氬輛。片劑和丸劑又可用腸溶衣制備。埃博霉素可作為共軛物傳遞給抗體或其它藥物，這給予它們更多的選擇。其中藥物被膠嚢化或共價(jià)連接的埃博霉素納米顆粒也可用于它們的給藥，因?yàn)檫@種方式可增加所用埃博霉素的功效和選擇性。對(duì)于治療用途，胃腸外給藥制劑可呈含水或不含水的等滲無(wú)菌注射溶液劑或混懸劑。這些溶液劑和混懸劑可由具有一種或多種用于口服制劑的載體或稀釋劑的滅菌散劑或顆粒劑制備?；衔锟扇芙庥谒?、聚乙二醇、丙二醇、乙醇、玉米油、棉籽油、花生油、芝麻油、千基醇、氯化鈉和/或各種緩沖劑。其它輔助劑和給藥方式廣為制劑領(lǐng)i或所熟知?？诜后w劑型可包括含有常用于本領(lǐng)域的惰性稀釋劑，例如，水的藥學(xué)上可接受的乳劑、溶液劑、混懸劑、糖漿劑和酏劑。這類組合物也可包含輔助劑，例如，濕潤(rùn)劑、乳化劑和懸浮劑和增甜劑、矯味劑和香p未劑。可與載體原料組合生成單一劑型的活性成分的量隨要治療的哺乳動(dòng)物宿主和特定給藥方式而變。特定化合物的合成為合成特定埃博霉素和根據(jù)前述逆合成分析，需要相應(yīng)的雜環(huán)錫烷。如流程1中所述制備這些化合物(化合物26a-b、28、30a-b、32、33、35a-c、37a-b)。流程1錫烷偶聯(lián)劑的合成和條件23:R=OH~]c)廠24:R=OTs—"25a:R=SMe25b:R=SAcJa)b〉Me3Sn26a:R=SMe26b:R=SAca)TsC1(1.5當(dāng)量)，Et3N(3.0當(dāng)量)，4-薩AP(0.1當(dāng)量)，CH2C12，25。C,1小時(shí)，84%;b)硫代乙酸(l.l當(dāng)量)，Et3N(U當(dāng)量)，CH2CI2，0—25°C,1小時(shí)，78%;c)NaSMe(3.0當(dāng)量)，EtOH，25。C，10分鐘，97%;d)(Me3Sn)2(7.0當(dāng)量)，[Pd(PPh3)4](0.1當(dāng)量)，甲苯，110。C,l小時(shí)，25a(26a，95%),25b(26b，63%)。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage22</formula>e)wBuLi(l.O當(dāng)量)，曱基環(huán)己烷，THF，-78°C,IO小時(shí)；然后"Bu3SnCl(1.0當(dāng)量)，-78°C,1小時(shí)，83%。Me、N-Ne)nBuU;nBu3SnCI<formula>formulaseeoriginaldocumentpage23</formula>f)EtMgBr(1.0當(dāng)量)，THF，25。C，1.5小時(shí);然后"Bu3SnCl(1.1當(dāng)量)，25°C,l小時(shí)，29a(30a，74%)，29b(30b，79%)。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage23</formula>g)"BuLi(l.O當(dāng)量)，THF,-78。C，5分鐘；然后(MeS)2(1.0當(dāng)量)，5分鐘;然后"BuLi(l.O當(dāng)量)，15分鐘；然后(MeS》(1.0當(dāng)量)，5分鐘;然后"BuLi(l.O當(dāng)量)，15分鐘;然后"Bu3SnCl(1.0當(dāng)量)，-78°C,1小時(shí)，83%。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage23</formula>h)"Bu3SnCCH(1.5當(dāng)量)，二曱苯，1380C,6小時(shí),34a(35a，41%),34b(35b，76%)，34c(35c,30%)。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage24</formula>i)NaOMe或NaSMe(3.0當(dāng)量)，氾uOK(2.0當(dāng)量)，/PrOH,25。C，15分鐘，(37a,10%)(37b，89%)。Ts=對(duì)曱苯磺?；籈t3N二三乙胺；DMAP^4-二曱基氨基吡啶;Bn=千基；THF=四氫呋喃。經(jīng)已知的文獻(xiàn)程序制備其它化合物(化合物35b[Sakamoto等，1992,33,813-818];36[Kato等，<>g.Ozew.1997，62，6833-684];38-39[Molloy等，乂CTzew.1989,365,61-73];40[Bookser，r"ra/2Wraw2000，41，2805-2809];和41[可經(jīng)市售得到]}。3839鄰41然后通過(guò)各錫烷與乙烯基石與化合物22[Nicolaou等，Ozem.J2000,6，2783-2800]的Stille偶合[Nicolaou等，7^ra/ze^w2002,58,6413-6432],使各雜環(huán)部分連到埃博霉素骨架上，如以下流程2中所示得到目標(biāo)埃博霉素化合物5-21。流程2埃博霉素5-21試劑的合成和條件a)[Pd2(dbaVCHC13](0.2當(dāng)量)，Cul(2.0當(dāng)量)，AsPh3(0.8當(dāng)量)，26a(5，74%)，26b(6,40%)，38(7，55%),30a(10,43%),30b(11,68%)，32(12，76%)，33(13,79%)，35a(14,71%),35b(15,66%),35c(16,60%),36(17,52%),37a(18，39%)，37b(19,53%)，40(20，56%)，(2.0當(dāng)量的各錫烷)，DMF，25。C，3小時(shí)。b)[Pd(PPh3)4](0.2當(dāng)量)，Cul(2.0當(dāng)量)，39(8，51%)，28(9,47%)，41(21,34%)(2.0當(dāng)量的各錫烷)，DMF,25。C,3小時(shí)。未優(yōu)化得率，dba=二亞芐基丙酮；DMF^7V，iV-二甲基甲酰胺。用細(xì)胞毒性試驗(yàn)測(cè)試經(jīng)合成的埃博霉素的生長(zhǎng)抑制性質(zhì)，并與TaxotereTM或TaxoFM和埃博霉素A或埃博霉素B比較。對(duì)藥物壽文感和耐藥的幾種人癌細(xì)胞系的結(jié)果概述于下表IA-IC。表1A所設(shè)計(jì)的埃博霉素5-21的細(xì)胞毒性問(wèn)<table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table>采用亞曱藍(lán)(KB-31和KB-8511)或磺酰羅丹明(sulforhodamine)-B(其它細(xì)胞系)染色法，在72小時(shí)生長(zhǎng)抑制試驗(yàn)中，測(cè)試化合物的抗增殖作用[Nicolaou等，C77e饑歷o/.2000，7，593-599;Skehan等，J!Ato/.Ca"cw/"w.19卯，82，1107-1112]。以nM給出各化合物的ICso值，其代表3-5次獨(dú)立實(shí)驗(yàn)的平均值士平均值的標(biāo)準(zhǔn)誤差?？筎axolTM1A9細(xì)胞系表達(dá)(3270的單一獲得性點(diǎn)突變(Phe—Val)。將母體細(xì)胞系(RRp)的相對(duì)耐藥性計(jì)算為各耐藥細(xì)胞系的IC50值除以母體細(xì)胞系的ICso值。表IB所設(shè)計(jì)的埃博霉素5-21細(xì)胞毒性W<table>tableseeoriginaldocumentpage27</column></row><table>a-d的注釋參見(jiàn)表1A。人表皮樣癌細(xì)胞系。和抗埃博霉素A(lA9/A8)[Giannakakou等，Ato/.^cad5W，2000,97，2904-2卯9]亞系及過(guò)量表達(dá)Pgp-外排泵的突變體(1A9/AD10)。帶有明顯的獲得性P^數(shù)管蛋白突變體的抗TaxolTM和埃博霉素A細(xì)胞系影響藥物-微管蛋白相互作用，并導(dǎo)致削弱的紫杉烷和埃博霉素驅(qū)動(dòng)的微管蛋白聚合。此外，采用一對(duì)藥物敏感的人表皮樣癌母體細(xì)胞系(KB-31)及其抗TaxolPgp-過(guò)表達(dá)亞系(KB-5811),進(jìn)一步研究細(xì)胞毒性。盡管效力低于埃博霉素B，化合物5和6仍表現(xiàn)出對(duì)幾種受試細(xì)胞系的高效力，所述細(xì)胞系對(duì)包含于分子中的結(jié)構(gòu)改變表現(xiàn)出極大的受體耐藥性。苯并噻唑類似物化合物7表現(xiàn)出覆蓋各細(xì)胞系范圍的優(yōu)異的細(xì)胞毒性，比埃博霉素B更加有效。咪唑類似物化合物8和10-13和三唑埃博霉素化合物9的顯著更低的活性，表明7V-曱基咪唑部分難以嵌入微管蛋白受體并轉(zhuǎn)變?yōu)楦邼撃埽衔?3的取代模式和擁擠的性質(zhì)強(qiáng)調(diào)對(duì)堿性氮的特定位置和共軛側(cè)鏈系統(tǒng)的平面性要求[13]。[對(duì)于含有效咪唑的埃博霉素B類似物，參見(jiàn)Altmann等，C7z隱丄成2000，10,2765-2768]。漆唑環(huán)被吡唑部分取代導(dǎo)致優(yōu)異的生物學(xué)活性，此為化合物14-16所證實(shí)。三種化合物(14-16)提供感興趣的SARs。因此，iV-Me取代的吡唑埃博霉素化合物14全面表現(xiàn)出比埃博霉素B更有效的細(xì)胞毒性，其N(xiāo)-Ph配對(duì)物(化合物15)活性稍小，而該化合物帶有額外的SMe取代基(化合物16)，被證明是所有受試化合物中最有效的。事實(shí)上，與天然存在的埃博霉素B相比，較后的埃博霉素(化合物16)對(duì)抗埃博霉素A的1A9親本和1A9/A8細(xì)胞系表現(xiàn)出顯著的17倍的活性增加，甚至對(duì)抗TaxoFM的1A9/PTX10細(xì)胞系表現(xiàn)出給人印象深刻的78倍的效力增加。與埃博霉素B相比，化合物W對(duì)KB細(xì)胞系的作用也因3-5倍的效力增加而令人印象深刻。然而，令人感興趣地是，作為對(duì)PgP-過(guò)量表達(dá)細(xì)胞系A(chǔ)2780/AD10的生長(zhǎng)抑制劑，即使4倍于埃博霉素B的效力增強(qiáng)，化合物16仍不如化合物"有效(20倍效力增加)。對(duì)于埃博霉素B的效力而言，嘌呤埃博霉素化合物1;19表現(xiàn)出橫跨整個(gè)受試細(xì)胞系范圍的相當(dāng)大的效力，因此，表示可被微管蛋白受體容納的空間體積和電子云的邊界進(jìn)一步擴(kuò)張。最終，發(fā)現(xiàn)腈埃博霉素化合物21對(duì)任何受試細(xì)胞系缺乏任何顯著的細(xì)胞毒性，證實(shí)埃博霉素結(jié)構(gòu)的堿性雜環(huán)部分的重要性。4種經(jīng)選擇高效埃博霉素(化合物3、4、7和16)對(duì)前述細(xì)胞系的相對(duì)活性列于下表2。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage30</column></row><table>細(xì)胞系的定義參見(jiàn)表1A-1C。相對(duì)活性(RA埃博霉素B)被定義為在同時(shí)進(jìn)行的生物學(xué)試驗(yàn)中的埃博霉素B的ICso值與受試化合物的ICso值之比。該值表示與同時(shí)確認(rèn)的埃博霉素B相比受試化合物的效力成倍增加。就我們所知，與埃博霉素B和全部合成于這些實(shí)驗(yàn)室的有效的類似物化合物3[Nicolaou等，refra/z^/ra"2002，58，6413-6432]、4、7和14(參見(jiàn)表3)的那些相比，吡唑埃博霉素化合物16的驚人的生物學(xué)概況使得該類似物成為至今所知道的最有效的埃博霉素。在測(cè)試的全部5種癌細(xì)胞系中，化合物16勝過(guò)埃博霉素B，對(duì)卵巢母體細(xì)胞系1A9(16.5倍)、其抗TaxoFM變體1A9/PTX10(78.0倍)及其抗埃博霉素A突變體1A9/A8(16.7倍)表現(xiàn)出超過(guò)天然生成的物質(zhì)的特別顯著的效力增加。已知埃博霉素B(化合物2)和類似物化合物3已經(jīng)作為抗癌藥物進(jìn)入臨床試驗(yàn){值得注意的來(lái)自埃博霉素類的其它臨床候選藥包括被Danishefsky[EpoD/KOS-862,Kolman等，Cwr.Qp/"./"veW.Z>wgs2004，5,657-667;Epo-490，Kolman等，C鮮.(9—./膨sf.Z>wgs2004，5,657-667,和Fludelone,Rivkin等，^"g綴C7z亂2005，117，2898-2910;Oze肌/wf.五d2005，44，2838-2850]、Bristol-MyersSquibb[BMS247550/內(nèi)酰胺埃博霉素B，Okuno等，JC7/".(9"co/.2005,23,3069-3073和BMS-310705/C-20氨基曱基埃博霉素B，Kolman,Cwr.Op/w./"ve"Z>w^2004，5,1292-1297]和ScheringAG[ZK-EPO(ScheringAG出版社發(fā)行)合成的那些}，作為潛在的候選藥物，化合物16值得進(jìn)一步研究?；衔锏膶?shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)A.通用程序除非另有說(shuō)明，在氬氣氛圍下，在無(wú)水條件下用無(wú)水溶劑，進(jìn)行所有反應(yīng)。通過(guò)使可經(jīng)市售得到經(jīng)預(yù)干燥的脫氧制劑穿過(guò)經(jīng)活化的氧化鋁柱得到無(wú)水四氫呋喃(THF)、甲苯、苯、乙醚(Et20)和二氯曱烷(CH2C12)。除非另有說(shuō)明，得率指經(jīng)色譜和光諾(iHNMR)上均勻的材料，除非另有說(shuō)明，采購(gòu)并采用無(wú)需進(jìn)一步純化的最高商品質(zhì)量的試劑。經(jīng)采用紫外光作為目測(cè)試劑、配制對(duì)曱氧基苯曱醛和磷鉬酸的乙醇溶液并加熱作為顯影劑，在0.25mmE.Merck硅膠盤(pán)(60F-254)上進(jìn)行的薄層色譜法(TLC)監(jiān)測(cè)反應(yīng)。將E.Merck硅膠(60,粒徑0.040-0.063mm)和Sigma-AldrichFlorisil(-200篩目)用于快速柱層析法。在0.25mmE.Merck硅膠盤(pán)(^0F-M勺上進(jìn)行制備型薄層層析法(PTLC)。NMR波譜紀(jì)錄于BmkerDRX-600、DRX-500、AMX-500或?qū)懺~說(shuō)明多峰裂數(shù)s=單峰，d=雙重峰，t=三重峰，q=四重峰，m=多重峰，br=寬峰。IR光譜紀(jì)錄于Perkin-Elmer1600系列FT-IR分光計(jì)上。用API100Perkin-ElmerSCIEX單一四極質(zhì)量分光計(jì)在4000V發(fā)射器電壓下進(jìn)行電霧化電離(ESI)質(zhì)譜(MS)實(shí)驗(yàn)。采用MALDI(基體輔助激光解吸電離)或ESI(電霧化電離)，將高分辨質(zhì)譜(HRMS)紀(jì)錄于VGZAB-ZSE質(zhì)量分光計(jì)上。光學(xué)旋轉(zhuǎn)紀(jì)錄于Perkin-Elmer343S走光計(jì)上。B.Stille偶合的通用程序方法A:向乙烯基石典化合物22(10.0mg，18.6|nmol，1.0當(dāng)量)、Cul(7.1mg,37.2,ol,2,0當(dāng)量)、AsPh3(4.6mg，14.9,ol，0.8當(dāng)量)的脫氣DMF(2mL)溶液中加入Pd2(dba)3'CHCl3(3.9mg,3.7pmol,0.2當(dāng)量)。25。C下攪拌所生成的溶液5分鐘，然后經(jīng)注射器逐滴加入錫烷(37.2iamol，2.0當(dāng)量)的脫氣DMF(1mL)溶液。室溫下攪拌反應(yīng)混合物3小時(shí)，用H20(30mL)猝滅，經(jīng)EtOAc(3x15mL)萃取。用鹽水(15mL)洗滌經(jīng)合并的有機(jī)層，干燥(Na2S04)并真空濃縮。經(jīng)快速柱層析法(硅膠)和PTLC純化殘余物，得到希望的埃博霉素類似物。方法B:向乙烯基跌化合物22(10.0mg，18.6|umol，1.0當(dāng)量)和Cul(7.1mg:37.2iamol,2.0當(dāng)量)的脫氣DMF(2mL)溶液加入Pd(PPh3)4(4.3mg，3.7pmol,0.2當(dāng)量)。25。C下攪拌所生成的溶液5分鐘，然后經(jīng)注射器逐滴加入錫烷(37.2|^mol，2.0當(dāng)量)的脫氣DMF(1mL)溶液。室溫下攪拌反應(yīng)混合物3小時(shí)，用H20(30mL)猝滅，經(jīng)EtOAc(3x15mL)萃取。用H2O(20mL)、鹽水(15mL)洗滌經(jīng)合并的有機(jī)層，干燥(Na2S04)并真空濃縮。經(jīng)快速柱層析法(硅膠)和隨后的PTLC純化殘余物，得到希望的埃博霉素類似物。埃博霉素化合物5:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage33</formula>方法A;白色泡沫；74%得率；R嚴(yán)0.38(硅膠，EtOAc:己烷，1:1);[a]D32=-18.0(MeOH,c=1.0);IR(薄膜)Uraax3443br,29S4,1732,1714,1S94,1S82,1454,1384,1250,1051,380,314,732crrf1,4NMR(500MHz,CD2C12)5=7.13(S,1H),6.56(S,1H),5.39(dd,J-2.7,8.0H2,1H),4-19(d,J=9.7Hz,1H),3，9S(s,2H》，3,72(s,1H),3,69(br曰,1H),3,27(dg,J-4.7,6.8Hz,1H),2.79(dd,J=4.4,8.0Hz,1H),2.50(brS,1H),2.49(dd,J=10.3,14.2Hz,1H),2.3S(dd,<J=3.2,14,3Hz,1H),2.16(s,3H〉，2.11(s,3H),2.10-2,05(m,1H),1.93(td,J=8,2,15.3HZ,1H),1.73-1.65(tn,1:U),1.5S-1.3S(m,SH),1.35(s,3H),1.26(s,3H),1.15(d,J=6.9Hz,3H),1.05(s,3H),0,"ppm(d,J=7.0Hz,3H);13CNMR(125MHz，CD2C12)5-219.9,170.1,168.1,152,0,137.5,119.2,117,2,75,6,73,8,72.6,61*4,60.9,52，7,42.7,39.0,36.1,35,0,32,1,31，9,30.3,22.1,22.1,21.1,13.1,16.6,15.3,15.0,13.3ppm;HRMS(ESI-TOF)對(duì)C28H43N06S2+[M+H+]的計(jì)算值554.2604,實(shí)測(cè)值554.2613。埃博霉素化合物6:方法A;無(wú)色油；40%得率；Rf-0.40(硅膠，EtOAc:己烷，1:1);[a]D32=-7.4(DMSO,c=0.40);IR(薄膜)U鵬3423br,2958,2928,173S,14",1380,1251,1135,1095,1054,1008,980,957,884,711cnT1,-工HNMR(500MHz,CD2C12)5=7.03(S,1H),6.54(S,1H),5.33(dd,J=2.5,8.1Hz,1H),4.40(s,2H),4.19(ru,1H),3.72(t,J-3.9Hz,1H),-3.59(m,1H),3.27(td,J-6.8,11.5Hz,1H),2.79(dd,J=4.4,7.8Hz,1H〉，2.49(dd,J-10.3,14.3Hz,1H),2.40(brs,1H》,2.39(日,3H),2.35(dd,J3.2,14.2Hz,1H>,2.03(3,3H),2.0:3-2.04(m,1H》，1.32(td,J-8.2,15.2Hz,1H),1.73■>1.65(m,1H),1.55-(m,SH),1.353H),1.26(S,3H),1,15(d,J=5.8Hz,3H》，l,O!;(曰,3H),0.33ppm(d,J=7.0Hz,3H),.13CNMR(125MHz,CD2C12)5=219.9,193.5,170.1,165,5,152.0,137.7,119,0,117.3,7S.S,73,9,72,6,51*3,S:2.7,42,8,3S,0,35,1,32.0,31.3,30.3,30,1,23,8,:!2,1,22.1,21*0,13.1,16.6,15,0,13*3ppm;HRMS(ESI-TOF)對(duì)C29H43N07S2+[M+H"]的計(jì)算值582,2554,實(shí)測(cè)值582.2557。埃博霉素化合物7:方法A;白色泡沫；55%得率；R^0.37(硅膠，EtOAc:己烷，1:1);[a]D32=-10(DMSO，c-0.32);IR(薄膜)U鵬3441br,2953,2S19,2356,1738,1725,1.714,1682,1650,1454,1379,1248,1143,1056,1002,S'73,882,7S1,730cnT1,'4NMR(500MHz,CDC13〉5=8.01(d,J-8,2Hz,1H),7.89(d,J=8.0Hz,1H),7.51-7.47(m,1H),7.41-7.37(m,1H),6.93(s,1H),5.54(dd,J-3.7,S.OHz,1H),4,20(d,J=9-3Hz,1H),3.97(brs,1H〉，3.80(t,J==4.3Hz,1H),3.38-3.31(m,1H〉，2.83(t,J-6.2Hz,1H),2.61(dd,J=10.2,14.0Hz,1H),2.50(barS,1H),2.46(dd,J-3.5,14.0Hz,1H),2,32(s,3H〉,2.13—2.06(tn,1H),2.05—1.38(m,1H),1.77-1.66(m,1H),1.59-1.32(ro,SH),1.40(s,3H),1.29(s,3H),1.18(d,J=S.8Hz,3H),1.09(s,3H),1.01ppm(d,J6.9Hz,3H);13C側(cè)R(150MHz,CDC13)5-220.7,170.4,164,6,152,4,144.8,134.7,126,5,125,3,122.8,121,4,119*4,75，0,74,5,73,0,Sl,3,53，0,43,2,38,S,36,4,31,7,31.7,30.5,22.8,21.2,21.0,'.20.1,17.1,17.0,14.0ppm;HRMS(ESI-TOF)對(duì)C3。H41N06S+[M+IT]的計(jì)算值544.2727，實(shí)測(cè)值544.2743。埃博霉素化合物8:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage36</formula>方法B;無(wú)色薄膜；51%得率;R^0.32(硅膠，EtOAc:丙酮，9:1);[a]D32=-28(DMSO，c=0.25);IR(薄膜)Umax3438b;r,2368,2327,1732,1714,1633,1682,1470,1451,1383,1283,1250,1145,1054,S'80,739cnf1;^NMR(500MHz,CD2C12)5=7.02(s,1H),S.87(S,1H),"34(s,1H),5.51(dd,J-3.0,7.3Hz,1H),4.16(dd,J-3.0,10.4Hz,1H),3.70(t,J-4.5HZ,1H),3.S3(brS,1H),3,61(S,3H),3.29-3.23(m,1H),2.80(dd,J=7.SHz,1H),2,62(bre,1H),2.47(dd,J-10,4,14.4Hz,1H),2.35(dd,J-3,1,14.4Hz,1H),2.17(S,3H),2.10-1.9S(m,2H),1.71-1.S5(m,1H),1.5S-1.34(m,5H),1,32(s,3H〉，1.26(3,3H),1,14(d,J=6.8HZ,3H),1.03(S,3H),0,39ppm(d,J=7.0Hz,3H);13CNMR(125MHz,CD2C12)5=21.9.8,170.1,l".O,140.6,127,4,120,4,112.S,7S.7,73.9,72.4,61.2,60,9,54.6,42.7,39.1,36.0,32，5,32.1,31.6,30.3,22.1,22.0,21.1,18.8,15,S,14.S,13.2ppm;HRMS(ESI-TOF)對(duì)C27H42N206+[M+tT]的計(jì)算值491.3115，實(shí)測(cè)值491.3120。埃博霉素化合物9:oo方法B;無(wú)色薄膜；47%得率；R尸0.35(硅膠，EtOAc);[a]-23(DMSO,c=0.043);IR(薄膜)u鵬3417br,2367,2320,1732,1634,1682,1470,1455,1384,1258,1147,1055,1008,979,802,cnT"工HNMR(SOOMHz,CD2Cl2》5=7.81(S,1H),6.41(S,1H),5.43(dd,J-3.0,6.8Hz,1H),4.15(ddd,J=3,3,7.1,10,3Hz,1H》，3.84(曰,3H),3.72(dd,J=4.0,8.3Hz,1H),3,33-3,25(m,2H),2,79(dd,J-5.8,S.7Hz,1H),2.51(dd,J10.2,14.SHZ,1H),2.43(dd,J=3.4,1"Hz,1H),2.39(bfd,J-3,3Hz,1H>,2,21(s,3H),2.10_1.97(m,2H),1.72-1.64(m,1H),1.56-1.35(m,6H),1.34(S,3H),1.27(s,3H),1.14(d,J=6.3Hz,3H),1.04(s,3H),0.99ppm(d,J=7.0Hz,3H);13CNMR《125MHz,CD2C12)5-219.6,169.9,150,8,143,8,144,8,103.8,76.1,74.4,72,8,60.9,60.8,54.6,43.2,38.8,35,0,31.S,31.4,30.1,28,9,22.3,22.2,20.5,19,S,IS.7,15.0,13.5ppm;HRMS(ESI-TOF)對(duì)C26H41N306+[M+H"]的計(jì)算值492.3068,實(shí)測(cè)值492.3069。埃博霉素化合物10:方法A;白色泡沫；43%得率；R^0.26(硅膠，EtOAc);[a]D32=-31.5(DMS〇，c=0.20);IR(薄膜)1378,1249,1149,1051,385,732,667cnf11,'工HNMR(500MHz,CsDs)5=6.46(s,1H),6.13(s,1H),5.43(brS,1H),5.26(d,Js5,5Hz,1H),4.72(d,J=10.6Hz,1H),3.8S(s,1H》,3.43(dq,J=3.S,S-8Hz,1H),2.78(brs,1H),2，74(dd,J=5.4,6.8Hz,1H),2.67(s,3H),2'56(dd,J-11.1,14.1Hz,1H),2.25(dd,Je2,7,14.1Hz,1H),(ddd,J-2,7,4.5,15.1Hz,1H),1.88-1,80(m,2H),1,68-1.55(m,2H),1.51(S,3H),1.50-1.40(m,4H),1.3S(s,3H),1.17(日，3H〉，1,16(d,J=5.9Hz,3H),(s,3H》，1.00ppm(d,J=7.0Hz,3H);13CNMR(125.MHz,C6DG)5-220.2,170.1,145.1,128.3,112..3,106*1,75-9,7U,71.6,60.9,54.4,4:2.7,39.7,3S，7,32.2,31,9,30.4,30,2,22.9,22,3,2:2.3,17,3,IS.8,13.4,11.8pptn;HRMS(ESI-TOF)對(duì)C27H41IN206+[M+lT]的計(jì)算值617.2082,實(shí)測(cè)值617.2081。埃博霉素化合物11:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage38</formula>方法A;無(wú)色薄膜；68%得率;R^0.10(硅膠，EtOAc:丙酮，9:1);[a]D=-15.4(CH2Cl2,c=0.13);IR(薄膜)u鵬3472br,32012919,2355,1725,1S843384br,2925,23451724,1718,].685,1S54,1550,137S,1256,1143,1053,979,702,S20cm—1,-&NMR(500MHz,CD2C12)5。7'42(s,1H),S.83(S,1H),6.42(S,1H),5.38-5.33(m,1H),4.2S(dd,J=2.4,10,5Hz,1H),3.70(t,J-4.5Kz,1H),3.68(s,3H),3.61(brs,1H),3.30-3.23(m,1H),2.76(dd,J=3.7,8.3Hz,1H),2.S5(brs,1H),(dd,J=10,G,14.1Hz,1H),2.29(dd,J=2.3,14.3Hz,1H),2.20-2.05(m,1H),1.39(3,3H),1.91-1.83(m,1H),1.74-1.65(m,2H),1.52-1.45(m,1H),1.46-1.30(tn,4H),1.35(s,3H),1.25(s,3H》，1.14(d,J-6.8Hz,3H〉,1.03(S,3H),0，S9ppm(d,J=7.0Hz,3H)"CNMR(150MHz,CD2Cl2)5=220.8,170.6,140.2,137.4,134.7,119.3,118.1,77.0,73.8,72.0,S2,S,61.6,54,2,42,6,33.8,36-7,32,3,31，1,31,1,30,0,22.6,22.4,18,6,17.3,17.1,15,3,13.4ppra;HRMS(ESI-TOF)對(duì)C27H42N206+[M+H+]的計(jì)算值491.3115,實(shí)測(cè)值491.3113。埃博霉素化合物12:方法A;白色泡沫；76%得率；1^=0.61(硅膠，EtOAc:己烷,1:1);[a]D32=-20.6(CH2C12,c=0.32);IR(薄膜)Umax3436br,2919,2849,2355,1731,1684,1461,1384,1249,1220,1143,1067,732,662cm—1;:4NMR(500MHz,CDC13)5-6,14(s,1H),5."(dd,J=3.0,6.5Hz,1H),4.2S(dd,J-3.0,10.0Hz,1H),3.75(t,J-4.5Hz,1H),3.44(S,3H),3.35(dg,J=4.5,6.5Hz,1H),2.85(t,J-S,OHZ,1H),2.5S(d,J=10.0Hz,1H),2.54(d,J-10.0Hs,1H),2.40(dd,J-2.5,14.0Hz,1H),1.78(S,3H),1.75-1.63(m,1H),1..58-1,36(m,SH),1,37(s,3H),1.30(s,3H),1.26(s,3H),(d,J=7,0Hz,3H),1,73(s,3H),0.33ppm(d,J=7.0Hz,3H);13CNMR(125MHz,CD2C12)5-220.8,170.4,143.9,129,8,118.7,113.7,111.6,75.8,74.2,72,4,61,4,61.4,53.3,42，9,39.1,3S,3,3U,31.5,30,4,22.7,22.2,21,7,H,16.8,16-4,13.6ppmf.HRMS(ESI-TOF)對(duì)C27H4()Br2N206+[M+lT]的計(jì)算值647.1331,實(shí)測(cè)值647.1309。埃博霉素化合物13:方法A;無(wú)色薄膜，-79%得率；Rf0.38(硅膠，EtOAc:己烷，1:1);[ot]D32=+13.9(DMSO,c=036);IR(薄膜)U磁3444,br,2356,292S,2353,1732,:L682,1455,1378,1314,1250,114S,1092,1047,97S,8135,821,SS2Citf、工HNMR(500MHz,CDC13〉5=6.55(s,1H),5.45(dd,J-2.7,8.6Hz,1H),4.25(d,J=9.5Hz,1H),3.77(br曰，1H>,3.SS(s,3H),3.49(bars,..1H>,3,29(dg,J-4.1,6.8Hz,1H》,2.82(dd,J-3,8,8.5Hz,1H),2.70(brs,1H),2.65(S,3H),2.53J=10.3,14.4Hz,1H),2.37(dd,J2.9,14.4Hz,1H),2.28(日,3H),2.IS(S,3H),2.23-2.14(m,1H),1.30(td,J-8.6,15,2Hz,1H),1.79-1.70(m,1H),1.68-1,46(m,6H),1.34(E;,3H),1.28(s,3H),1,17(d,J=S.9Hz,3H〉，1.09(s,3H),1.01ppm(d,J=7.0Hz,3H);13CNMR(:L50MHz,CDCl3)5=220.5,170.5,145.6,143.7,135.7,123.8,llS，l,77,7,73力,72.8,62.0,Gl.S,53.1,42.7,39.4,36.2,32,7,32,4,30,3,30.6,22.6,22,2,2,1.3,20,5,19.4,17.5,15.2,15.1,13.3ppm;HRMS(ESI-TOF)對(duì)C29H46N206S2+[M+H+]的計(jì)算值583.2870，實(shí)測(cè)值583,2853。埃博霉素化合物14:方法A;白色固體-14.0(CH2C12,c=0.50)"—Me71%得率;Rf:0.64(硅膠，EtOAc);[a]D32=IR(薄膜)IW3446br,29",293S1732,1S88,15081455,1378,1251,1143,1049,979,761,732,697cnT1,'工HNMR(600MHz,CDCl3)5=7,33(s,1H),6.53(s,1H),6.30(S,1H),5.44(dd,J=2.S,7.2Hz,1H),4.19(d,J-8.0Hz,1H),3.90(S,3H),3.79(t,J-4.2Hz,1H),3.33-3.27(m,1H),2.8工(dd,<J=5.0,7.2Hz,1H),2.55(dd,J=10.2,14,2Hz,1H),2,38(dd,J=2.7,14.1Hz,1H》,2.01(td,J-4,2,15.0Hz,1H),2.04(s,3H),1.32(td,J-7.5,15.0HZ,1H》，1.77—1,67(m,1H),1.58—1.38(m,6H),1.3.6(S,3H),1.27(S,3H),1.17(d,J6.8HZ,3H),1.08(S,3H),1.00ppm(d,J=S.8Hz,3H)713CNMR(125MHz,CSDS:CD3OD,3:1)5-219.8r171.0,143.5,137.2,131.5,118.3,1062,77，2,7G.o.72,1,62.5,62.0,54.0,44,7,39*7,38.1,36,S,33.0,32.5,30,3,23,3,22,4,21.1,13,4,17,8,15.3,14.0ppm;HRMS(ESI-TOF)對(duì)C27H42N206+[M+lT]的計(jì)算值491.3115，實(shí)測(cè)值491.3109。埃博霉素化合物15:方法A;白色固體；66%得率；1^=0.73(硅膠，EtOAc:己烷，1:1);[a]D32=-28.3(CH2C12，c=0.60);IR(薄膜)Umax34S0br,2955,2919,1731,1684,1513,1455,1373,1255,1143,1043,S73,756cm-1;工HNMR(500MHz,CDC13)5=7.90(s,1H),7.68(d,J-7.9HZ,2H),7.45(t,J=7.7Hz,2H),7.29(d,J=7.4Hz,1H),S.SI(s,1H),6,52(s,1H),5,50-5.47(m,1H),4.13(d,J=7.3Hz,1H),3.31,(brs,1H>,3.80(t,J-3.SHz,1H),3.3S-3.30(m,1H>,2，83(t,J=G.3Hz,1H),2.58(dd,J-10.1,14.0Hz,1H),2.50(br日，1H),2.42(dd,J-2.6,14.1Hz,1H),2.14(s,3H),2.12-2-06(m,1H),1.97(dt,J-7.2,14.7Hz,1H),1.79-1.66(m,1H),1.58-1.40(m,6H),1-37(S,3H),1.27(S,3H),1.17(d,J=6.8Hz,3H),1.03(S,3H),1.01ppm(d,J",9Hs,3H);13CNMR(150MH2,CDC13》5220,7,.170.6,150,3,139.9,137.0,129.4,127,4,126,5,l"，O,118.2,108,2,74,4,73,4,61，4,61.2,52.7,43.3,39.0,3S.5,32.0,31.8,30,7,22,S,22.7,21.1,20.6,17.2,15.8,13.9ppm;HRMS(ES工匿TOF)對(duì)C32H44N206+[M+H+]的計(jì)算值553.3272,實(shí)測(cè)值553.3263。埃博霉素化合物16:方法A;白色固體；60%得率；&=0.82(珪膠，EtOAc);[a]D32=-28.3(CH2C12,c-0.53);IR(薄膜)U隨3444br,2365,2931,1738,1732,16M,1S82,1459,1.455,1381,1371,1284,1250,1148,1056,378,736era-1;^NMR(600MHz,CD2C12)5-6,41(s,1H),6.33(S,1H),5.38(dd,J=2.3,8.12HZ,1H),4.20-4.15(m,1H),3.84(s,3H),3.72(dd,J-4,0,7.8Hz,1H),3■S7(d,J=5,6Hz3.29-3.24(tn,l.'H),2.77(dd,iJ-4.3,7.9HZ,1H),2.51(tn:s,1H),2.48(dd,J"-10.3,14,3Hz,1H),2.41(S,3H〉，2.36-2.32(m,1H),2.09—2,03(m,1H),2.01(s,3H),1.S4-1,86(m,1H),1.721，65(m,1H),1.53-1,35(m,6H),1.34(S,3H),1.25(s,3H),1,14(d,6.8Hz,3H),1.04(S,3H),0.99ppm(d,J=7,0Hz,3H),-13CNMR(151MHz,CD2C12)5-220.7.,170.5,148.1,137,2,136.4,118.1,108.3,76.7,74,3,73.2,61-5,SI.2,52.8,43.1,39.0,36,5,32*1,31.9,30，7,22.8,22.6,21.2,20'3,18.8,17.1,15,7,14.2,13.9ppm;HRMS(ESI-TOF)對(duì)C28H44N206S+[M+H"]的計(jì)算值537.2993,實(shí)測(cè)值537.2992。埃博霉素化合物17:Me、方法A;無(wú)色薄膜；52%得率；R^0.34(硅膠，EtOAc);[a]D32=-33.9(CH2Cl2,c=0.12);IR(薄膜)方法A;白色固體；39%得率；Rf二0.23(硅膠，EtOAc);[a]D32=-13.4(CH2Cl2，c=3.5);IR(薄膜)u隨3418br,2928,1732,1688,15",155S,1335,1342,1262,1148,1055,981,906,736cnf"&NMR(500MHz,CD2C12)5=8.07(s,1H>,6.69(s,1H),S.23(<J,J"=5.7Hz,1H》，5.42(dd,J==1.5,8.5Hz,1H),4.36-4.30(nv,1H),3.88(s,3H),3.73(dd,J-4,2,4.SHz,1H),2.81(dd,J=4.2,8.0Hz,1H),2.53(dd,J-10.S,13.9Hz,1H》,2.38(S,3H),2.3,3-2.35(m,1H),2.21-2.12(m,1H),1.58-1.901(tn,1H),1.75-1.67(m,1H),1,4S-1.28(tn,SH),1.41(s,3H),1.27《s,3H),1,17(d,J-"8Hz,3H),1.06(s,3H),1.00ppm(d,J-7.0Hz,3H)/13CNMR(151MHz,CD2C12)5-219.7,170.0,158.5,152.3,149.5,146.7,145.4,128.7,122.8,76.3,73*7,72.3,61,4,Sl,O,52,9,42.4,39,0,36.0,32.1,31*7,30,3,29,8,22,1,21，9,21.3,18,4,16,5,15.5,13.0pprn'.HRMS(ESI-TOF)對(duì)C29H41C1N406+[M+H"]的計(jì)算值577.2787，實(shí)觀寸值577.2789。埃博霉素化合物18:方法A;白色固體；53%得率；&=0.42(石圭膠，EtOAc);[a]-29(CH2C12,c=0.059,);IR(薄膜)IW3401br,2943,1731,1S84,1590,1572,14S1,1390,1243,1073.1055,S7S,726crrf1;工HNMR(500MHz,CDC13)5==7.78(s,1H),6.52(s,1H),5.34(d,J=7.0Hz,1H),4.26(d,J=9.5Hz,1H),4.20(brs,1H》，4.09(s,3H),3.7S(s,3H),3.58(s,1H),3.2S-3.20(ra,1H),2.73(dd,J"",0,7.6HZ,1H),2,67(brS,1H),2.49(dd,J=10.6,13.5Hz,1H),2.31(s,3H),2.30-2.2S(m,1H>,2.09(d,JaIS.3Hz,1H),1.88-1.81(m,1H>,1.71-1.S0(m,1H),1,43-1.33(m,2H〉，1.38-1.24(m,4H),1.32(sf3H),1.20(s,3H),1.09(d,J-S.8Hz,3H),1.00(s,3H》,0.92ppm(d,J"-6.9Hz,3H);13CNMR(150MHz,CDC13)5=220.5,170.5,160-2,158,7,152，4,145,3,142,8,128.3,124.1,76.8,73.8,7:2,8,61*5,54.4,53.4,42.S,39.S,3S.2,32.5,31.9,30,7,30，0,22.7,22.1,21,9,19.1,17.0,16.3,13.4ppm;HRMS(ESI-TOF)對(duì)C3QH44N407+[M+H+]的計(jì)算值573.3283，實(shí)測(cè)值573.3278。埃博霉素化合物19:Umax3444br,2923,1732,155S,14541384,133S,1.259,105S,797,735cnf1;丄HNMR(600膽，CD2C12)6-7.92(s,1H),6.64(s,1H),5.41(d,J=7.4Hz,1H),4.35(dd,J-2.3,10.4H2,1H),4,12(brs,1H),3.81(s,3H),3.73(t,J-4.5Hz,1H),3.33-3.27(m,1H),3.08(brS,1H),2.82(dd,J=3.8,8.2Hz,1H),2.72(S,3H),2.53(dd,J-10.S,14,0Hz,1H),2.40(s,3H),2.44-2.33(m,1H),2.21-2.15(m,1H),1.38-1.30(m,1H),1.76-1.68(m,1H),1.S4-1.47(m,2H),-1.22(m,4H),1.40(S,3H》,1.27(s,3H),1.16(d,J-6,8Hz,3H),1,06(s,3H),1.01ppm(d,J-7.0HZ,3H);13CNMR(150MHz,CD2C12〉5-220.1,170.1,160，3,158.S,148.8,145.3,143.4,128.7,124,0,75.9,73.72，2,SI,8,Gl,5,53.2,42,3,39,3,36.0,32,4,32,3,30,4,29.4,22.2,21.3,21.7,18.1,16，6,15.3,12.8,11.7ppm,'HRMS(ESI-TOF)對(duì)C3。H44N406S+[M+H+]的計(jì)算值589.3054,實(shí)測(cè)值589.3056。埃博霉素化合物20:方法A;白色固體；56%得率；R^0.39(硅膠，EtOAc:己烷，1:1);[a]D32=-23.1(CD2Cl2,c=9.0);IR(薄膜)47U顯3446br,2933,2366,1734,1684,1458,1381,1251,1100,74S,699cnf1;工HNMH(600MHz,CD2C12〉5=7.38-7.30(ra,5H),6.63(S,1H),5.32(s,2H),5.50(dd,J-3.0,6,1Hz,!1H),4.67(s,2H),4.16-4.11(ni,1H>,3.73(s,1H),3.47(d,J-5.9Hz,1H),3.34—3.27(tn,1H),2.80(t,J-S.2Hz,1H),2.56(dd,J-10.1,14.3Hz,1H),2.44(加，J-3.4,14.4Hz,1H),2.35(brS,1H),2.28(S,3H》，2.10-1.97(m,2H),171-1.64(tn,1H),1.71-1.64(m,6H),1.36(S,3H),1.27(S,3H),1.15(d,J=6.8Hz,3H),1.05(s,3H),0.99ppm(d,J-S.9Hz,3H),13CNMR(150MHz,CD2C12)5-219.8,170.0,153,4,144.7,135.6,128.2(2C〉,128.0,127，8(2C),111,2,73.4,75.7,74,5,73.2,71.7,6CK7,60,6,52.2,43,4,38.S,36.0,31.3(2C>,30.0,22,4,22.3,20.2,IS.7(2C),15,8,13,8ppm;HRMS(ESI-TOF)對(duì)C32H46N407+[M+H""]的計(jì)算值599.3439，實(shí)測(cè)值599.3432。埃博霉素化合物21:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage48</formula>方法B;無(wú)色薄膜；34%得率；Rf-0.24(硅膠，EtOAc:己烷，1:1);[a]D32=-15.4(CH2Cl2,c=0.14);IR(薄膜)Uraax3460to,2919,28491731,1684,1443,1378,1255,1143,1073,72Scm—"工HNMR(500MKz,CDC13)5=5.55(s,1H),5.48(t,J-4.0Hz,1H),4.11(dd,J=3,1,10.1Hz,1H),3.76(dd,J-3.4,5.1Hz,1H),3,68(brs,1H),3.37-3.34(m,1H),2.68(t,J=S.2Hz,1H),2.55(dd,J=10.2,14.1Hz,1H),2.47(dd,J-3.5,14.2Hz,1H),2.12(s,.3H),1."-1,34(m,1H),1.70-1.20(m,9H),1.37(s,3H),1.30(s,3H),1.16(d,J=6.9Hz,3H),l.OS(s,3H),0.98pptn(d,<J-S，9Hz,3H》；13CNMR(126MHz,CDC13)5-220.1,170,0,159-3,97,3,'7々，2,73,8,73,6,60,7,60,0,52,4,44.0,38.3,3i5-l,31.0,30.5,29.9,29,7,23,1,22.7,21,4,19.8,18.2,17.3,14.6ppm,'HRMS(ES工-TOF)對(duì)C24H37N06+[M十Na+]的計(jì)算值458.2513,實(shí)測(cè)值458.2504。曱苯磺酸鹽化合物24:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage49</formula>0。C下，向醇化合物23(1.23g,6.34mmol)、對(duì)曱苯磺酰氯(1.81g,9.48mmol，1.0當(dāng)量)和DMAP(10.0mg,82,1，0細(xì)6當(dāng)量)的CH2C12(50mL)溶液中加入NEt3(2.67mL,19.02mmol,2.0當(dāng)量)。0。C下，攪拌反應(yīng)混合物15分鐘，用NH4Cl飽和水溶液0OmL)猝滅，用CH2C12(3x25mL)萃取。用鹽水(30mL)洗滌經(jīng)合并的有機(jī)層，干燥(Na2S04)并真空濃縮。經(jīng)快速柱層析法(硅膠，EtOAc:己烷，l:3)純化殘余物，得到呈白色粉末的曱苯磺酸鹽化合物24(1.86g，84%得率)?；衔?4:R產(chǎn)0.51(硅膠，EtOAc:己烷，1:3);IR(薄膜)Umax3121,1597,14821190,1175,1093,951,814,555,552ctrT"工HNMR(500MHz,CDC13)5=7.83-7-79(m,2H),7.37-7.33(m,2H),7.2S(s,1H),5.28(s,2H),2."ppm(S,3H);13CNMR(100MHz,CD2C12)5=163,5,132,2,130,0,128,1,125.3,IIS,O,66.3,21.7ppm;HRMS(ESI-TOF)對(duì)CnH'oBrNCbS/[M+Na+]的計(jì)算值369.9178,實(shí)測(cè)值369.9176。p塞唑化合物25a:25°C下，攪拌曱苯石黃酸鹽化合物24(260mg，0.75mmol,1.0當(dāng)量)和硫代甲醇鈉(205mg,2.24mmol，3.0當(dāng)量)的無(wú)水EtOH(20mL)溶液1小時(shí)。用飽和NH4C1水溶液(纟0mL)和H20(20mL)猝滅反應(yīng)，用EtOAc(3xl5mL)萃取。用鹽水(20mL)洗滌經(jīng)合并的有機(jī)層，干燥(MgS04)并真空濃縮。在硅膠上預(yù)吸收的殘余物經(jīng)快速柱層析法(硅膠，EtOAc:己烷，l:4)純化，得到呈黃色油的化合物25a(162mg,97%得率)?；衔?5a:Rf-0.56(硅膠，EtOAc:己烷，1:4);IR(薄膜)1433,1404,1255,1204,1114,1074,982,889,834,734cttT1;&NMR(500MHz,CDC13)5-7.18(s,1H〉，3.S3(S,2H),2.12ppm(S,3H)13C鵬R(100MH2,CD2C12)5=170.9,124.1,117.7,35.3,15.7ppm,'HRMS(ESI-TOF)對(duì)C5H6BrNS2+[M+H"]的計(jì)算值223.9198，實(shí)測(cè)值223.9194。虔唑化合物25b:3118,2915,1473500。C下，向曱苯磺酸鹽化合物24(513mg，1.47mmol，1.0當(dāng)量)的CH2C12(40mL)溶液加入NEt3(163mg,1.62mmol，1.1當(dāng)量)和碌b代乙酸(123mg,1.62mmol，1,1當(dāng)量)。經(jīng)1小時(shí)加熱反應(yīng)溶液至25。C。然后，用飽和NH4C1水溶液(30mL)溶液猝滅反應(yīng)，用CH2C12(3x15mL)萃取。用鹽水(20mL)洗滌經(jīng)合并的有機(jī)層，干燥(MgS04)并真空濃縮。經(jīng)快速柱層析法(硅膠，EtOAc:己烷，l:5)純化殘余物，得到呈黃色油的硫代乙酸鹽化合物25b(283mg，78%得率)?；衔?5b:R^0.48(珪膠，EtOAc:己烷，1:4);IR(薄膜)U胸x3443,2919,1S94,1472,1256,1130,1072,955,893,836otf1,.工HNMR(500MHz,CDC13)5=7.15(3,1H),4.41(S/2H),2.40ppm(s,3H);13CNMR(125MHz,CDC13)5=193.9,1S7.9,124.5,117,9,30,4,30,2ppm;HRMS(ESI-TOF》對(duì)C6H6BrNOS2+[M+Na+]的計(jì)算值273.8996,實(shí)測(cè)值273.8968。錫烷化合物26a:經(jīng)1小時(shí)，將溴化物25a(26mg,0.12mmo1，1.0當(dāng)量)、六曱基二錫(hexamethylditin)(266mg,0.81mmol,6.75當(dāng)f)、Pd(PPh3)4(13.4mg,11.6pmol，0.1當(dāng)量)的甲苯(5mL)溶液加熱至110°C。冷卻反應(yīng)至25。C并真空濃縮。經(jīng)快速柱層析法(NEt3經(jīng)預(yù)洗滌的硅膠，EtOAc:己烷，1:10)純化殘余物，得到呈無(wú)色油的錫烷化合物26a(34mg,95%得率)。26a:Rf-0.59(硅膠，EtOAc:己烷，1:5);IR(薄膜)iW23:LS,2353,1455,1384,1072,771,531cm一、工HNMR(400MHz,CDCl3)5-7.33(S,1H),4.07(s,2H),2.163H),0.35ppm(s,9H);13CNMR(150MHz,CDC13)5=169.6,159.4,126,5,34.9,15,7,-8.9ppm;HRMS(ESI-TOF)對(duì)C8HI5NS2Sn+[M+H+]的計(jì)算值309.9741，實(shí)測(cè)值309.9729。錫烷化合物26b:經(jīng)1小時(shí)，將溴化物化合物25a(245mg，0.97mmol,1.0當(dāng)量)、六甲基二錫(2.2g，6.81mmol,7.0當(dāng)量)、Pd(PPh3)4(225mg，0.19mmol，0.2當(dāng)量)的曱苯(7mL)溶液加熱至110。C。將反應(yīng)冷卻至25。C并真空濃縮。經(jīng)快速柱層析法(NEt3經(jīng)預(yù)洗滌的硅膠，EtOAc:己烷，1:10)純化殘余物，得到呈黃色油的錫烷化合物26b(212mg，63%得率)?；衔?6b:Rf-0.70(硅膠，EtOAc:己烷，1:5);IR(薄膜)UW2382,2315,16S4,1455,1354,1133,1073,958,772,622,532cm—1;工HNMR'(400MHz,CDCl3〉5-7.28(s,1H),4.51(s,2H),2,37(s,3H),0.33ppm(曰，9H),'13CNMR(150MHz,CDC13)5-194,1,166.9,159.7,126.7,30.2,30.1,-8.9ppm,'HRMS(ESI-TOF)對(duì)C9H15NOS2Sn+[M+!^]的計(jì)算值337.9690,實(shí)測(cè)值337.9687。錫烷化合物28:/7Bu3Sn'、-78。C下，向"-BuLi(2.15M，THF中，230pL,0,50mmol,1.0當(dāng)量)的THF(5mL)溶液逐滴加入曱基環(huán)己烷(5mL)，隨后逐滴加入1-甲基-l，2,4-三唑化合物27(420mg,0.50mmol，1.0當(dāng)量)的THF(5mL)溶液。-78。C下，攪拌反應(yīng)混合物10小時(shí)，用w-Bu3SnCl(135nL,0.50mmol,1.0當(dāng)量)猝滅。再于惰性氣氛下過(guò)濾鹽，并在減少的壓力(140°C/1mmHg)下蒸餾產(chǎn)物。得到呈白色油的錫烷化合物28(154mg，83%得率)。化合物28:IR(薄膜)2313,1632,1537,1462,1376,1303,1270,1157,1074,994,960,875,698cm-1;工HNMR(400MHz,CSDS)58,19(s,3H》，3.45(曰，3H),1.65-1.45<m,6H),1.36-1-16(m,6H),1.15-1.05(m,6H),0.86ppm(t,J-7-SH2,9H);13CNMR(100MHz,CDC13)5=158.0,153,0,3"7,29.2,27.7,14,0,10.7ppm,-HRMS(ESI-TOF)對(duì)C15H31N3Sn+[M+W]的計(jì)算值374.1613，實(shí)測(cè)值374.1611。械化物化合物29a和29b:根據(jù)文獻(xiàn)程序制備碘化物化合物29a和29b[Lovdy等，//e詢qyc/ay2003,60,1;Carver等，T"raW謂1996,44,1831]。錫烷化合物30a:25°C下，向石典化物化合物29a(400mg,1.20mmol,1.0當(dāng)量)的THF(10mL)溶液加入EtMgBr(3.0M,THF中，400^L，1.20mmol,1.0Umax3425,2954當(dāng)量)。25℃下攪拌1.5小時(shí)后,加入"-Bu3SnCl(325pL，1.20mmol,1.0當(dāng)量)，額外攪拌反應(yīng)混合物6小時(shí)。然后用飽和NH4C1水溶液(20mL)猝滅并用EtOAc(3x15mL)萃取。用鹽水洗滌經(jīng)合并的有機(jī)層(20mL)，干燥(Na2S04)并真空濃縮。經(jīng)快速柱層析法(NEt3經(jīng)預(yù)洗滌的硅膠，EtOAc:己烷，3:7)純化殘余物，得到呈無(wú)色油的錫烷化合物30a(441mg，74%得率)。化合物30a:R尸0.42(硅膠，EtOAc:己烷，6:4);IR(薄膜)2850,1636,1459,1420,1375,122S,1158f1074,941,"4cnf1;^NMR(S00MHz,C6D6)5=7'34(s,1H),3.01(s,3H),1.85-1,51(m,6H),1.55-1.36(m,6H),1.35-1.15(m,6H),1.06ppm(t,J-7.5Hz,9H);"CNMR(125MHz,CSD6)5=142.9,135.0,97.1,34.8,29.6,27.8,14.0,11,5ppm;HRMS(ES工-TOF)對(duì)C16H31I1N2Sn+[M+fT]的計(jì)算值499.0627，實(shí)測(cè)值499.0633。錫烷化合物30b:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage54</formula>25℃下，向石典化物化合物29b(219mg,1.05mmol,1.0當(dāng)量)的THF(5mL)溶液加入EtMgBr(1.1M，THF中，0.96mL,1.05mmol，1.0當(dāng)量)。25。C下攪拌1.5小時(shí)后，加入"-Bu3SnCl(0.29mL,1.05mmol，1.0當(dāng)量)，并額外攪拌18小時(shí)。用飽和NH4Cl水溶液(20mL)猝滅反應(yīng)并用EtOAc(3x15mL)萃取。用鹽水洗滌經(jīng)合并的有機(jī)層(20mL)，千燥(Na2S04)并真空濃縮。經(jīng)快速柱層析法(NEt3經(jīng)預(yù)洗滌的硅膠，EtOAc:己坑，2:l)純化殘余物，得到呈無(wú)色油的錫烷化合物30b(309mg,79%得率)。\W3448,2953,2920/7BU3Sn'化合物30b:Rf=0.30(硅膠，EtOAc:己烷，2:1);IR(薄膜)2852,1518,1417,137S,1218,1180,1102,S80,617cm—1;工HNMR(600MHz,CSDS)5-7.24(s,1H),6.57(S,1H>,2.S8(B,3H),1.83-1.S9(m,6H),1,47—1.39(m,,1.27-1.14(m,SH),0.93ppm(t,J-7.4Hz,9H);13CNMR(125MHz,CSD"5-140.6,140,3,127*9,31,7,29,7,27,8,14.0,10.2ppm;HRMS(ESI-TOF)對(duì)C16H32N2Sn+[M+H"]的計(jì)算值373.1660，實(shí)測(cè)值373.1671。錫烷化合物32:25。C下，向三溴化物化合物31(495mg，1.56mmol，1.0當(dāng)量)的THF(10mL)溶液加入EtMgBr(3M，THF中，520fiL,1.56mmol，1.0當(dāng)量)。5分鐘后,加入"-Bu3SnCl(420^L,1.56mmol，1.0當(dāng)量)并攪拌反應(yīng)混合物1小時(shí)。再用飽和NH4C1水溶液(10mL)猝滅反應(yīng)混合物并用EtOAc(3x10mL)萃取。用鹽水洗滌經(jīng)合并的有機(jī)層(15mL),干燥(Na2S04)并真空濃縮。經(jīng)快速柱層析法(NEt3經(jīng)預(yù)洗滌的硅膠，Et20:己烷，5:95)純化殘余物，得到黃色油的錫烷化合物32(710mg，86。/。得率)。化合物32:Rf二0.6(硅膠，EtOAc:己烷，2:8;IR(薄膜)2955,2925,2870U咖3436,2919,2843,2849,1453,1355,1197,1108,1073,867,6S7CTlT1,'工HNMR(500MHZ,CSDS)5=2.87(s,3H>,1."-1,54(m,6H),1.36-1.24(m,6H),1.12-1.06(m,SH),0.88ppm(t,J=7.5Hz,9H);13CNMR(100MHz,C6DS)5=133,6,127,3,121,1,35,5,29,2,27.5,13,8,11.1ppm;HRMS(ESI-TOF)對(duì)C16H30Br2N2Sn+[M+lT]的計(jì)算值528.9870，實(shí)測(cè)值528.9853。錫烷化合物33:MeMeS〃Bu3SnAN33-78。C下，向三溴化物化合物31(165mg，0.52mmol,1.0當(dāng)量)的THF(5mL)溶液加入"-BuLi(2.15M，THF中，0,24mL,0.52mmol,1.0當(dāng)量)。5分鐘后，于相同溫度下加入(MeS)2(47|aL，0.52mmol，1.0當(dāng)量)并攪拌反應(yīng)混合物5分鐘。加入第二個(gè)等分部分的"-BuLi(2.15M，THF中，0.24mL,0.52mmol，1.0當(dāng)量)。15分鐘后，加入(MeS)2(47pL，0.52mmol,1.0當(dāng)量)并再攪拌反應(yīng)混合物5分鐘。然后加入第三個(gè)等分部分的BuLi(2.15M,THF中，0.24mL，0.52mmol,1.0當(dāng)量)。15分鐘后，加入"-Bu3SnCl(140|aL，0.52mmol,1.0當(dāng)量)并攪拌反應(yīng)混合物1小時(shí)。用飽和NH4C1水溶液(IOmL)猝滅反應(yīng)，并用EtOAc(3x10mL)萃取。用鹽水洗滌經(jīng)合并的有機(jī)層(15mL),干燥(Na2S04)并真空濃縮。經(jīng)快速柱層析法(NEt3經(jīng)預(yù)洗滌的石圭膠，EtOAc:己烷，1:10)純化殘余物，得到呈白色油的錫烷化合物33(200mg，83%得率)。化合物33:Rf=0.75(硅膠，EtOAc:己烷，1:5);IR(薄膜)Umax2954,2923,28592851,1456,1336,1374,1312,1180,1079,728,693,666,600,518cm—1;工HNMR(400MHz,CDC13)5=3.59(S,3H),2.SI(曰，3H),2.17(s,3H),1.S8-1.45(m,SH),1.39-1,27(m,SH〉，1.20-1.00(m,6H),0.88ppra(t,J=7.3Hz,9H》；13CNMR(100MHz,CDC13)5=150.1,147.0,133.3,30.6,29.1,27.4,21,5,15.8,13,7,10.2pptn,'HRMS(ESI-TOF)對(duì)C18H36N2S2Sn+[M+tf]的計(jì)算值465.1415，實(shí)測(cè)值465.1412。Syndone化合物34a:根據(jù)文獻(xiàn)程序，制備Syndone化合物34a、34b和34c[Thoman等，Org.Synth.Coll.Vol.V,962.]。錫烷化合物35a:經(jīng)7小時(shí)，將syndone化合物34a(6.0g,6.0mmol,1.0當(dāng)量)和乙炔基三正丁基錫(2.83g,9.0mmol,1.5當(dāng)量)的混合二曱苯(5mL)溶液加熱至138°C。冷卻反應(yīng)至25。C，用曱苯(20mL)稀釋，并用H20(2x15mL)和鹽水(15mL)洗滌，真空濃縮有機(jī)層。經(jīng)快速柱層析法(NEt3經(jīng)預(yù)洗滌的硅膠，EtOAc:己烷，1:10)純化殘余物，得到呈無(wú)色油錫烷化合物35a(924mg，41%得率)?；衔?5a:1^=0.55(硅膠，EtOAc:己烷，1:5);IR(薄膜)57<formula>formulaseeoriginaldocumentpage58</formula>的計(jì)算值373.1660，實(shí)測(cè)值373.1658。錫烷化合物35c:經(jīng)5小時(shí)，將syndone化合物34c(1.65g，11.3mmol,1.0當(dāng)量)和乙炔基三正丁基錫(5.31g，16.9mmol,1.5當(dāng)量)的二曱苯(30mL)溶液加熱至138°C。冷卻反應(yīng)至25。C,用曱苯(50mL)稀釋，并用H20(2x35mL)和鹽水(35mL)洗滌，真空濃縮有機(jī)層。經(jīng)快速柱層析法(NEt3經(jīng)預(yù)洗滌的硅膠，EtOAc:己烷，l:5)純化殘余物，得到呈無(wú)色油的錫烷化合物35c(1.42g,30%得率)?；衔?5c:Rf=0.53(硅膠，EtOAc:己烷，1:10);IR(薄膜)umax29S5,2924,2870,2852,14S4,1373,1330,1285,1072,357,874,7"cm-"工HNMR(崇MHz,CDCls)5=6.30(s,1H),3.90(s,3H),2,38(S,3H),l.SS-1.44(ni,6H),1.38-1.27(m,SH),1.16-0.95(m,SH〉,0.88pptn(t,J=7.3Hz,3H),13CNMR(100隱，CDC13)5-151.8,135.6,116.8,36.3,29.0,27.2,18.7,13.6,9，8pptn;HRMS(ESI-TOF)對(duì)的計(jì)算值C17H34N2SSn+[M+H"]419.1537，實(shí)測(cè)值419.1532。錫烷化合物37a:Me、義，自3Sn八N八OMe37a25。C下，攪拌氯代噤呤化合物36(1,12g，2.46mmol，1.0當(dāng)量)和/-BuOK(303mg,2.70mmol,1.1當(dāng)量)的MeOH(20mL)溶液10分鐘。真空濃縮反應(yīng)，并用EtOAc(30mL)重構(gòu)成。過(guò)濾固體，并用EtOAc(3xl0mL)洗滌。真空濃縮經(jīng)合并的有機(jī)層。經(jīng)快速柱層析法(NEt3經(jīng)預(yù)洗滌的硅膠，EtOAc:己烷，1:3—l:l)純化殘余物，得到呈無(wú)色油的錫烷化合物37a(113mg,10%得率)?；衔?7a:Rf=0.55(硅膠，EtOAc:己烷，1:1);IR(薄膜)VW2954,2926,2869,2852,、1531,1551,1455,1375,1338,1310,1215,10S9,"8,S17cm-1;工HNMR(400MHz,CDC13〉5=7.78(s,1H),4.13(S,3H)廣3.84(s,3H),1.74-1.50(m,6H),1.40-1.28(m,'6H),1.24-1.05(m,6H),0.86ppm(t,J=7.3Hz,9H);13CNMR(100MHz,CDC13)5-180.2,158.3,151.8,141,3,120,1,53,5,29,7,28,3,27.2,13.7,10,5ppm;HRMS(ESI-TOF)對(duì)C19H34N4OSn+[M+f]的計(jì)算值455.1827,實(shí)測(cè)值455.1826。錫烷化合物37b:25。C下，攪拌氯代嘌呤化合物36(84mg，0.18mmo1，1.0當(dāng)量)、NaSMe(129mg,1.84mmol,10.0當(dāng)量)和f畫(huà)BuOK(21mg，0.18mmol，1.0當(dāng)量)的Z-PrOH(lmL)溶液15分鐘。真空濃縮反應(yīng)，并用EtOAc(30mL)重構(gòu)成。固體經(jīng)過(guò)濾并用EtOAc(3x10mL)洗滌。真空濃縮經(jīng)合并的有機(jī)層。經(jīng)快速柱層析法(Florisif,EtOAc:己烷，1:3—l:l)純化殘余物，得到呈黃色油的錫烷化合物37b(77mg,89%得率)。化合物37b:Rf=0.55(硅膠，EtOAc:己烷1:1);IR(薄膜)1548,14S3,139S,132S,1261,1187,942,861,756,636cm-1;4NMR(500MHz,CDC13)5-7.83(s,1H),3.85(S,3H),2.70(S,3H),1.73-1.54(m,SH),1.41-1.31(m,SH),1.27-1.09(m,SH),0.89ppm(t,J-7.3Hz,9H〉；13CNMR(125MHz,CDC13>5=180,0,158.1,147.9,141.7,130,1,29.6,29.0,27.3,13.7,11.4,10.6，,'HRMS(ESI-TOF)對(duì)C19H34N4SSn+[M+H^的計(jì)算值471.1599，實(shí)測(cè)值471.1596。各專利和論文通過(guò)引用而結(jié)合于本文。冠詞"一"或"一個(gè)"的使用意欲包括一個(gè)或多個(gè)。在前的描述和實(shí)施例意欲作為說(shuō)明，而不作為限制。在本發(fā)明精神和范圍內(nèi)的其它變化是可能的，且其本身易于為本領(lǐng)域的技術(shù)人員理解。Umax2955,2927,285權(quán)利要求1.一種在結(jié)構(gòu)上符合式A-1、A-2、A-3或A-4的化合物其中RA是具有如下結(jié)構(gòu)的芳環(huán)其中所述的5元環(huán)是芳族的并含有至少2個(gè)不是碳的環(huán)原子，各X1、X2和X3獨(dú)立為S、NR1、N、CH或CR2，R1是C1-C8-烴基或亞甲基-C1-C8-烴基醚，和R2選自C1-C8-烴基、O-C1-C8-烴基、鹵代基、S-C1-C8-烴基、亞甲硫基-C1-C8-烴基和亞甲硫基-C1-C8-?；?，前提是，當(dāng)X2是S和X3是CR2時(shí)，R2不是C1-C8-烴基或S-C1-C8-烴基，或X2和X3共同形成稠合到所述5元芳環(huán)的6元芳環(huán)。2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中的X'是CH。3.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中的X'是N。4.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中的Xi是NR1。5.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中的X"是CR2。6.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中的X'是S。7.根據(jù)權(quán)利要求6的化合物，其中的X2和X3共同形成稠合到所述5元環(huán)的6元芳環(huán)。8.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中的X"是S。9.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中的X2是NR1。10.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物:其中的X2是N。11.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物:其中的X2是CR2。12.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物,其中的X3是CR2。13.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物,其中的XS是CH。14.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中的XS是NR1。15.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中的R'是d-(V烴基。16.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物,其中的RZ是CKV烴基。17.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物'其中的W是卣代基。18.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物,其中的RA是'其中的W是卣代基。,其中的RA是<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>19.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其在結(jié)構(gòu)方面符合式A-l。20.—種在結(jié)構(gòu)方面符合式B-1、B-2、B-3或B-4的化合物其中W選自d-C8-烴基和亞曱基-CrCr烴基醚，和R2選自C廣Cr烴基、O-C廣Cr烴基、鹵代基、S-C廣Cr烴基、亞曱硫基-CrCs-烴基和亞曱硫基-C廣CV?；?。21.根據(jù)權(quán)利要求20的化合物，其中的R1是C'-CV烴基。22.根據(jù)權(quán)利要求20的化合物，其中的R"是S-d-Cs-烴基。23.根據(jù)權(quán)利要求20的化合物，其中的W是O-C,-Cr烴基。24.根據(jù)權(quán)利要求20的化合物，其中的R'是卣代基。25.—種在結(jié)構(gòu)方面符合式C-1、C-2、C-3或C-4的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>26.<image>imageseeoriginaldocumentpage6</image>27.<image>imageseeoriginaldocumentpage6</image>28.<image>imageseeoriginaldocumentpage6</image>29.—種組合物，其含有溶解或分散于藥學(xué)上可接受的稀釋劑中的藥學(xué)有效量上的權(quán)利要求1的化合物。30.根據(jù)權(quán)利要求29的組合物，其中的RA是<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>S,如31.—種藥用組合物，其含有以有效量溶解或分散于藥學(xué)上可接:的稀釋劑中的根據(jù)權(quán)利要求19的化合物。32.根據(jù)權(quán)利要求31的組合物,其中的RB是全文摘要本發(fā)明公開(kāi)一種高活性的合成的埃博霉素化合物，當(dāng)作為抗癌細(xì)胞系的細(xì)胞毒藥物被測(cè)定時(shí)，其活性超過(guò)埃博霉素A或埃博霉素B的活性，以及公開(kāi)含有合成埃博霉素的藥用組合物。文檔編號(hào)A61K31/427GK101360494SQ200680051247公開(kāi)日2009年2月4日申請(qǐng)日期2006年11月9日優(yōu)先權(quán)日2005年11月22日發(fā)明者B·普拉特,K·C·尼科勞烏,S·阿塞尼亞迪斯申請(qǐng)人:斯克里普斯研究學(xué)院