專利名稱：：三乙酰穿心蓮內(nèi)酯作為炎性細(xì)胞因子抑制劑的醫(yī)藥用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及三乙酰穿心蓮內(nèi)酯在制備炎性細(xì)胞因子抑制劑中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：炎性細(xì)胞因子主要由巨噬細(xì)胞分泌，包括TNF-a、IL-la、IL-lp、IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、IFN-Y等前炎癥細(xì)胞因子與具有炎性因子特性的一氧化氮(NO)等。其中研究最多的為TNF-a、IL-ip、IL-6、NO。炎性細(xì)胞因子的過量分泌在許多疾病的發(fā)生發(fā)展中起著重要作用。如全身炎性反應(yīng)綜合征(SIRS)、膿毒血癥、膿毒性休克、感染性休克、多器官功能障礙綜合征、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨性關(guān)節(jié)炎、脊柱關(guān)節(jié)病、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、高血壓、冠心病、心肌梗塞、心力衰竭、糖尿病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、狼瘡性腎炎、硬皮病、結(jié)節(jié)病、皮肌炎、白塞氏病、銀屑病、抑郁癥、呼吸道病毒感染、慢性阻塞性肺病、哮喘、胰腺炎、肝硬化、炎癥性腸病、獲得性免疫缺陷綜合征、Castleman氏病、帕金森氏癥、早老性癡呆、血管性頭痛、中樞神經(jīng)損傷、腦梗塞、急性腦出血、腦損傷、腦損傷后感染性并發(fā)癥、流感病毒性腦病、慢性腎功能不全、原發(fā)性腎病綜合征、返流性腎病、腎小球腎炎、失血性休克、阻塞性睡眠呼吸暫停綜合征、心臟粘液瘤、急性髓性白血病、多發(fā)性骨髓瘤、骨髓增生異常綜合征、腫瘤、壞疽性膿皮病、移植物抗宿主病、葡萄膜炎、牙周病、細(xì)菌感染、肥胖等。故炎性細(xì)胞因子抑制劑的開發(fā)已成為醫(yī)藥研究工作者關(guān)注的熱點(diǎn)領(lǐng)域。TNF-a是一種前炎癥細(xì)胞因子，主要由單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞產(chǎn)生，參與多種炎癥反應(yīng)的過程。內(nèi)毒素(LPS)是TNF-a的誘導(dǎo)劑。研究發(fā)現(xiàn)，TNF-a具有殺傷或抑制腫瘤細(xì)胞、提高中性粒細(xì)胞的吞噬能力、增加過氧化物陰離子產(chǎn)生、參與炎癥反應(yīng)、抗感染等生物活性。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，抑制TNF-ct的釋放可用于多種疾病的治療，包括全身炎性反應(yīng)綜合癥、膿毒血癥、膿毒性休克、多器官功能障礙綜合征、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨性關(guān)節(jié)炎、脊柱關(guān)節(jié)病、炎癥性腸病、心力衰竭、糖尿病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、硬皮病、結(jié)節(jié)病、皮肌炎、銀屑病、急性髓性白血病、帕金森氏癥、早老性癡呆、抑郁癥、白塞氏病、慢性阻塞性肺病、哮喘、急性胰腺炎、中樞神經(jīng)損傷、呼吸道病毒感染、多發(fā)性骨髓瘤、骨髓增生異常綜合征、壞疽性膿皮病、移植物抗宿主病、葡萄膜炎、牙周病、肥胖。IL-1P是由單核巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、纖維母細(xì)胞等產(chǎn)生的一種前炎癥細(xì)胞因子。它能刺激T細(xì)胞和B細(xì)胞的增殖和分化、刺激造血以及參與炎癥反應(yīng)。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，IL-ip抑制劑可用于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、全身炎性反應(yīng)綜合征(SIRS)、膿毒血癥、膿毒性休克、感染性休克、多器官功能障礙綜合征、牙周病、心力衰竭、皮肌炎、急性胰腺炎、慢性阻塞性肺病、骨性關(guān)節(jié)炎、細(xì)菌感染、多發(fā)性骨髓瘤、早老性癡呆、骨性關(guān)節(jié)炎、呼吸道病毒感染、哮喘、抑郁癥、硬皮病等。IL-6是由淋巴樣和某些非淋巴樣細(xì)胞產(chǎn)生的一種前炎癥細(xì)胞因子。它具有刺激細(xì)胞生長、促進(jìn)細(xì)胞分化、加速肝細(xì)胞急性期蛋白(acutephaseprotein)的合成、抑制M1髓樣白血病細(xì)胞系的生長，促進(jìn)其成熟和分化等生物活性。IL-6與臨床上多種疾病的發(fā)生有一定的關(guān)系，如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、全身炎性反應(yīng)綜合征(SIRS)、膿毒性休克、感染性休克、多器官功能障礙綜合征、敗血癥、獲得性免疫缺陷綜合征、心臟粘液瘤、Castleman氏病等自身免疫性疾病；急性腦出血、急性腦梗塞、腦損傷、腦損傷后感染性并發(fā)癥、流感病毒性腦病、冠心病、重癥胰腺炎、狼瘡性腎炎、慢性腎功能不全、原發(fā)性腎病綜合征、返流性腎病、失血性休克、阻塞性睡眠呼吸暫停綜合征、腫瘤等慕瀾，魏連波，李學(xué).白介素6的研究進(jìn)展.深圳中西醫(yī)結(jié)合雜志，2003，13(3):185-188;趙有成，南瓊，柯青.膿毒癥患者血清IL-6水平檢測(cè)的臨床評(píng)價(jià).中國醫(yī)師雜志，2006，(5):608-610等。一氧化氮參與機(jī)體許多生理和病理過程，參與巨噬細(xì)胞的細(xì)胞毒和免疫調(diào)節(jié)、松馳血管平滑肌、抑制血小板聚集和傳遞神經(jīng)信息等，同時(shí)在炎癥反應(yīng)中也發(fā)揮復(fù)雜作用。一氧化氮生成過量或不足在許多疾病的發(fā)生中皆起著重要作用。其中一氧化氮生成過量可見于骨性關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、全身炎性反應(yīng)綜合征、膿毒血癥、膿毒性休克、多器官功能障礙綜合征、感染性休克、腦梗塞、高血壓、心肌梗塞、充血性心力衰竭、腎小球腎炎、肝硬化、炎癥性腸病、糖尿病、獲得性免疫缺陷綜合征、血管性頭痛、哮喘、腫瘤余躍.一氧化氮與疾病.北京；科學(xué)出版社。3，14，19一三乙酰穿心蓮內(nèi)酯(簡稱三乙酰穿心蓮內(nèi)酯)為穿心蓮內(nèi)酯經(jīng)結(jié)構(gòu)改造后獲得的化合物，結(jié)構(gòu)式如下CH3COO、CH3COO、、CH3COO—、該化合物在日本專利文獻(xiàn)中有報(bào)道，即JP63088124公開三乙酰穿心蓮內(nèi)酯的結(jié)構(gòu)式、制備方法及其抗腫瘤用途；另中國專利文獻(xiàn)CN1695612亦公開該化合物的結(jié)構(gòu)、制備方法及抗炎、免疫抑制與抗腫瘤作用。但上述文獻(xiàn)對(duì)三乙酰穿心蓮內(nèi)酯抗炎、免疫抑制、抗腫瘤的作用僅公開了該化合物對(duì)蛋清所致大鼠足腫脹動(dòng)物模型的影響、小鼠炭粒廓清實(shí)驗(yàn)、對(duì)DNCB丙酮激發(fā)小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)的影響及體內(nèi)外抗腫瘤的抑瘤活性，而未曾研究與揭示該化合物的抗炎、免疫抑制、抗腫瘤的機(jī)理，亦未曾對(duì)該化合物對(duì)炎性細(xì)胞因子的抑制作用進(jìn)行研究。從中國專利文獻(xiàn)CN1695612公開的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析，三乙酰穿心蓮內(nèi)酯對(duì)蛋清所致大鼠足腫脹動(dòng)物模型的影響、小鼠炭粒廓清實(shí)驗(yàn)、抗腫瘤活性雖較穿心蓮內(nèi)酯強(qiáng)，但活性提高輻度很小，而且對(duì)DNCB丙酮激發(fā)小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)的影響實(shí)驗(yàn)顯示活性沒有提高。從以上分析可見，穿心蓮內(nèi)酯三乙?；院蟾鞣N藥理活性的變化如何尚需進(jìn)行研究方能得知。中國專利文獻(xiàn)CN1666985公開穿心蓮內(nèi)酯及其衍生物體外對(duì)TNF-a、IL-ip的抑制活性，但其公開的化合物通式為3位未曾進(jìn)行結(jié)構(gòu)改變，即為羥基的穿心蓮內(nèi)酯衍生物，而且其中公開的實(shí)施例中幾個(gè)具代表性的穿心蓮內(nèi)酯類化合物抑制TNF-a、IL-ip的活性中以穿心蓮內(nèi)酯為最強(qiáng)，且根據(jù)其公開的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可知，穿心蓮內(nèi)酯抑制TNF-a、IL-lp的活性為其它穿心蓮內(nèi)酯衍生物的數(shù)倍?？梢娫搶＠墨I(xiàn)并未公開三乙酰穿心蓮內(nèi)酯對(duì)炎性細(xì)胞因子的抑制作用。綜上所述可見，即使將上述所有公開的關(guān)于穿心蓮內(nèi)酯及三乙酰穿心蓮內(nèi)酯的內(nèi)容組合，亦無法推測(cè)出三乙酰穿心蓮內(nèi)酯是否具有炎性細(xì)胞因子抑制作用及活性如何。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是研究三乙酰穿心蓮內(nèi)酯對(duì)炎性細(xì)胞因子的抑制活性。其中所述炎性細(xì)胞因子包括TNF-cuIL-la、IL-ip、IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、IL-IO、IFN-y、NO。本發(fā)明提供了三乙酰穿心蓮內(nèi)酯作為炎性細(xì)胞因子抑制劑的應(yīng)用。其中所述炎性細(xì)胞因子包括TNF-a、IL-louIL-1卩、IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、IL-IO、IFN-y、NO。本發(fā)明尤其提供了三乙酰穿心蓮內(nèi)酯在制備TNF-a抑制劑、IL-1P抑制劑、IL-6抑制劑、一氧化氮生成抑制劑中的用途。前面所述的三乙酰穿心蓮內(nèi)酯作為炎性細(xì)胞因子抑制劑可用于治療下列病癥，包括但不限于全身炎性反應(yīng)綜合征(SIRS)、膿毒血癥、膿毒性休克、感染性休克、多器官功能障礙綜合征、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨性關(guān)節(jié)炎、脊柱關(guān)節(jié)病、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、炎癥性腸病、高血壓、冠心病、心肌梗塞、心力衰竭、糖尿病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、狼瘡性腎炎、硬皮病、結(jié)節(jié)病、皮肌炎、白塞氏病、銀屑病、抑郁癥、呼吸道病毒感染、慢性阻塞性肺病、哮喘、胰腺炎、肝硬化、獲得性免疫缺陷綜合征、Castleman氏病、帕金森氏癥、早老性癡呆、血管性頭痛、中樞神經(jīng)損傷、腦梗塞、急性腦出血、腦損傷、腦損傷后感染性并發(fā)癥、流感病毒性腦病、慢性腎功能不全、原發(fā)性腎病綜合征、返流性腎病、腎小球腎炎、失血性休克、阻塞性睡眠呼吸暫停綜合征、心臟粘液瘤、急性髓性白血病、多發(fā)性骨髓瘤、骨髓增生異常綜合征、腫瘤、壞疽性膿皮病、移植物抗宿主病、葡萄膜炎、牙周病、細(xì)菌感染、肥胖。前面所述的三乙酰穿心蓮內(nèi)酯作為TNF-a抑制劑可用于治療下列病癥，包括但不限于全身炎性反應(yīng)綜合癥、膿毒血癥、膿毒性休克、多器官功能障礙綜合征、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨性關(guān)節(jié)炎、脊柱關(guān)節(jié)病、炎癥性腸病、心力衰竭、糖尿病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、硬皮病、結(jié)節(jié)病、皮肌炎、銀屑病、急性髓性白血病、帕金森氏癥、早老性癡呆、抑郁癥、白塞氏病、慢性阻塞性肺病、哮喘、急性胰腺炎、中樞神經(jīng)損傷、呼吸道病毒感染、多發(fā)性骨髓瘤、骨髓增生異常綜合征、壞疽性膿皮病、移植物抗宿主病、葡萄膜炎、牙周病、肥胖。前面所述的三乙酰穿心蓮內(nèi)酯作為IL-ip抑制劑可用于治療下列病癥包括但不限于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、全身炎性反應(yīng)綜合征(SIRS)、膿毒血癥、膿毒性休克、感染性休克、多器官功能障礙綜合征、牙周病、心力衰竭、皮肌炎、急性胰腺炎、慢性阻塞性肺病、骨性關(guān)節(jié)炎、細(xì)菌感染、多發(fā)性骨髓瘤、早老性癡呆、骨性關(guān)節(jié)炎、呼吸道病毒感染、哮喘、抑郁癥、硬皮病等。前面所述的三乙酰穿心蓮內(nèi)酯作為IL-6抑制劑可用于治療下列病癥，包括但不限于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、全身炎性反應(yīng)綜合征(SIRS)、膿毒血癥、膿毒性休克、感染性休克、多器官功能障礙綜合征、獲得性免疫缺陷綜合征、心臟粘液瘤、Castleman氏病等自身免疫性疾?。患毙阅X出血、急性腦梗塞、腦損傷、腦損傷后感染性并發(fā)癥、流感病毒性腦病、冠心病、重癥胰腺炎、狼瘡性腎炎、慢性腎功能不全、原發(fā)性腎病綜合征、返流性腎病、失血性休克、阻塞性睡眠呼吸暫停綜合征、腫瘤。前面所述的三乙酰穿心蓮內(nèi)酯作為一氧化氮生成抑制劑可用于治療下列病癥，包括但不限于骨性關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、全身炎性反應(yīng)綜合癥、膿毒血癥、膿毒性休克、多器官功能障礙綜合征、感染性休克、腦梗塞、高血壓、心肌梗塞、充血性心力衰竭、腎小球腎炎、肝硬化、炎癥性腸病、糖尿病、獲得性免疫缺陷綜合征、血管性頭痛、哮喘、腫瘤。在實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的的過程中，產(chǎn)生以下兩點(diǎn)意想不到的技術(shù)效果1、三乙酰穿心蓮內(nèi)酯體外前炎癥因子抑制活性較穿心蓮內(nèi)酯提高1倍乃至數(shù)倍。2、通過發(fā)明人的大量研究發(fā)現(xiàn)3位或14位乙?；罂纱蟠筇岣叽┬纳弮?nèi)酯類化合物的炎性細(xì)胞因子抑制活性。本發(fā)明所述的三乙酰穿心蓮內(nèi)酯可以單獨(dú)使用或以藥物組合物的形式使用。藥物組合物包括作為活性成分的三乙酰穿心蓮內(nèi)酯及可藥用載體?？伤幱幂d體不會(huì)破壞本化合物的活性。本發(fā)明所述三乙酰穿心蓮內(nèi)酯作為炎性細(xì)胞因子抑制劑的有效劑量范圍為0.003-6mg/kg/日/人。以上用量是根據(jù)體外試驗(yàn)及動(dòng)物藥理實(shí)驗(yàn)結(jié)果推算的，因人體與動(dòng)物的差異性、體內(nèi)外的差異性、疾病的差異性、具體炎性細(xì)胞因子的差異性，故允許臨床實(shí)際用量有所調(diào)整。用法可根據(jù)具體疾病進(jìn)行選擇。下面實(shí)驗(yàn)例是以內(nèi)毒素誘發(fā)兔體內(nèi)炎性細(xì)胞因子異常分泌模型為例，旨在說明三乙酰穿心蓮內(nèi)酯體內(nèi)亦具有抗炎性細(xì)胞因子分泌過多的作用，而非對(duì)給藥途徑的限制。下面給出具體實(shí)施例用以對(duì)本發(fā)明進(jìn)行解釋。具體實(shí)施例方式穿心蓮內(nèi)酯粗品可以購買市售品，如四川廣漢本草植化有限公司；亦可釆用常規(guī)方法提取分離獲得。其余化學(xué)試劑均為市售品(分析純)；油酸、精制蛋黃卵磷脂(供注射用)購自上海東尚實(shí)業(yè)有限公司；中鏈油、大豆油(供注射用):購自鐵嶺北亞藥用油有限公司；甘油(供注射用)購自浙江遂昌惠康藥業(yè)有限公司。制備例1穿心蓮內(nèi)酯的制備取穿心蓮內(nèi)酯粗品20g，72'C溶于450mL甲醇中，靜置24小時(shí)抽濾得白色晶體，干燥得穿心蓮內(nèi)酯。制備例2三乙酰穿心蓮內(nèi)酯的制備lg穿心蓮內(nèi)酯溶于10mLAc2O,加熱回流2小時(shí)，反應(yīng)混合物用乙酸乙酯萃取，有機(jī)層依次用水、飽和NaHC03和飽和食鹽水洗，無水MgS04干燥。經(jīng)硅膠柱層析得三乙酰穿心蓮內(nèi)酯白色固體。分子式為C26H3608?；衔锎_認(rèn)數(shù)據(jù)如下IRv總(cm"):3454,3080,2954,1731,1683，1375,1250，1191,1075，1026,895，606。JH(400MHz,CDC13):S7.00(td，/=6.84，1.48Hz，1H,H-12),5.92(d，J=5.96Hz,1H,H-14),4.90(bs,1H，H隱17a)，4.60(dd，《/=11.68,4.26Hz，1H,H-15a),4.55(dd,J=11.24,6.08Hz,IH,H陽15b),4.53(bs，1H，H隱17b),4.36(d,/=11.80Hz,1H,H隱19a),4.25(dd,J=II.24，1.80Hz，1H，H-3),4.12((!，/=11.80Hz,1H,H-19b)，2.522.37(m，3H),2.12(s,3H),2.05(s,6H),2.00~1.96(m，1H)，1.90~1.86(m,2H),1.80~1.77(m，2H),1.73~1.66(m,1H),1.57~1.47(m,1H)，1.37~1.31(m,2H),1.03(s，3H，CH3-8),0.76(s,3H,CH3-20)。l3C-NMR(100MHz,CDCl3):S170.8,170.4,170.3,168.9，150.0,146.5，124.0,108.8,79.6,71.5,67.7,64.6，55.8,55.2，41.2，38.9,37.8,37.0,25.1,24.6，24.2，22.6,21.1,21.0,20.6,14.4。MS(ESI)附/z(%):499([M+Na]+,100%),477([M+H]+，13%)。制備例33,19-二乙酰穿心蓮內(nèi)酯、14-乙酰穿心蓮內(nèi)酯、14，19-二乙酰穿心蓮內(nèi)酯的制備5g穿心蓮內(nèi)酯加入30mL乙酸攪拌加熱至80'C，反應(yīng)過夜。用乙酸乙酯萃取，有機(jī)層依次用水和飽和食鹽水洗，無水MgS04干燥。柱層析得3，19-二乙酰穿心蓮內(nèi)酯(APll)、14，19-二乙酰穿心蓮內(nèi)酯(AP12)、14-乙酰穿心蓮內(nèi)酯(AP13)。化合物確認(rèn)數(shù)據(jù)如下:分子式C24H3407(434)(400MHz,CDC13):6.97(lH，m,H-12),5.03(lH,cU=5.6Hz,H-14),4.92(1H，s,H-17),4.62(lH,s,H-17)，4.59(lH,dd,^11.2,4.8Hz,H-3),4.47(lH,dd,^10.4，6.0Hz,H-15),4.38(lH,d,^11.6Hz，H-19),4.26(lH,dd,^10.4，2.0Hz，H隱15),4.11(lH,d,^12.0Hz，H-19),2.05(6H,s,CH3CO-)，1.04(3H,s,H-18),0.78(3H,s,H-20)。AP12化合物確認(rèn)數(shù)據(jù)如下分子式C24H3407(434)*H(400MHz,CDC13):7.00(lH,m,H-12)，5.91(lH,cU=6.0Hz，H-14)，4.90(1H，s,H-17)，4.55(lH，dd,JM1.2,6.0Hz，H-15)4.52(lH,s,H-17)，4.35(lH,d，^13.6Hz，H-19)，4.25(lH，dd,聲11.2,1.6Hz,H-15),4.13(lH,d,11.6Hz，H-19)，3.33(lH,dd^12.0，4.0Hz，H-3)，2.13(3H，s，CH3CO-),2.06(3H,s,)，1.16(3H，s,H-l8),0.71(3H,s,H-20)。13C-NMR(100MHz，CDC13):170.9,170.5,169.0,150.3，146.6,124.0,108.8,78.8,71.6,67.8,64.9,55.8,55.3,42.4,39.0,37.8，37.2，27.8,25.2,24.2,22.5,21.0,20.7,14.7。AP13化合物確認(rèn)數(shù)據(jù)如下分子式C22H3206(392)m.p.l69。CIRvSW'):3436，2927，1738,1641，1384,1233，1077，1024,723，621。!H(400MHz,Acetone):6.88(1H,tcU^6.8,1.6Hz，H-12),6.03(lH，d,二6.0Hz，H-14),4.87(lH,d,J二1.2Hz,H-l7),4.59(1H，d,=1.2Hz,H-17)，4.58(1H，cky:l1.2，6.0Hz,H-15),4.26(1H，dd,/=11.0,1.6Hz,H-15),4.11(lH,d,JH0.8Hz,H-19),3.42(lH,m,H-3)，3.28(lH,t,^10.4Hz,H-19),2.08(3H,s,CH3CO-)，1.20(3H,s，H-18),0.70(3H,s，H-20)。MS(ESI)m/z(%):415([M+Na]十,旨/。)，393([M+H〗十，56%)。制備例4三乙酰穿心蓮內(nèi)酯乳劑的制備將三乙酰穿心蓮內(nèi)酯1.0g、蛋黃卵磷脂12g、加入到中鏈油20g和大豆油80g的混合油中，加入油酸0.4g，加熱至6080°C，攪拌使溶解為澄明溶液，得油相；將甘油22.5g溶于80ml水中形成水相，加熱至60-8(TC;把含有三乙酰穿心蓮內(nèi)酯的油相加到水相中用高速攪拌乳化成初乳，所得初乳加水定容至1000ml后，經(jīng)高壓均質(zhì)機(jī)在壓力100Mpa的條件下乳化后，分裝后12rC滅菌15分鐘，即得。所得乳劑為均勻的白色乳液，平均粒徑164nm。制備例5空白乳的制備將蛋黃卵磷脂12g、加入到中鏈油20g和大豆油80g的混合油中，加入油酸0.4、，加熱至608(TC，攪拌使溶解為澄明溶液，得油相；將甘油22.5g溶于80ml水中形成水相，加熱至60-80'C;把油相加到水相中用高速攪拌乳化成初乳，所得初乳加水定容至1000ml后，經(jīng)高壓均質(zhì)機(jī)在壓力100Mpa的條件下乳化后,分裝后12rC滅菌15分鐘，即得。所得乳劑為均勻的白色乳液，平均粒徑176nm。實(shí)驗(yàn)例1三乙酰穿心蓮內(nèi)酯體外TNF-a抑制活性研究1、藥品及儀器脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)購自Sigma公司；小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7購自中科院細(xì)胞庫(ATCC);RPMI1640培養(yǎng)液、青霉素、鏈霉素、胎牛血清購自Gibco公司；其他常用生化試劑均為國產(chǎn)分析純;全自動(dòng)酶標(biāo)儀(美國，Bi0tek);恒溫C02培養(yǎng)箱(美國，Thermo公司)。MouseTNF-aELISA試劑盒為R&D公司產(chǎn)品，由晶美生物工程有限公司分裝。穿心蓮內(nèi)酯、三乙酰穿心蓮內(nèi)酯樣品按制備例l、2制備，并以DMSO溶解并稀釋至合適濃度。2、小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7培養(yǎng)小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7培養(yǎng)于含10%熱滅活(56°C，30min)胎牛血清(FBS)、100U/mL青霉素鈉、100昭/mL鏈霉素的RPMI1640培養(yǎng)液中，37°C、(p(C02)=5%的恒溫培養(yǎng)箱中孵育生長。3、TNF-a釋放量的測(cè)定用RPMI1640培養(yǎng)液將小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7稀釋至5xl05cells/mL，接種于96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中，每孔加入200^L細(xì)胞懸浮液。C02培養(yǎng)箱中培養(yǎng)lh后，每孔加入LPS(ltig/mL)和不同濃度的測(cè)試樣品0.4nL，同時(shí)設(shè)LPS組(不加入被測(cè)試樣品)和空白對(duì)照組(DMSO)，每個(gè)樣品設(shè)3個(gè)平行孔。在37°C、C02恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)6h后吸取培養(yǎng)液上清，按照ELISA試劑盒說明書方法進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制和樣品測(cè)定。4、實(shí)驗(yàn)結(jié)果三乙酰穿心蓮內(nèi)酯與穿心蓮內(nèi)酯皆可顯著抑制LPS誘導(dǎo)的TNF-ct的分泌，前者ICso為后者的5倍以上，兩者的活性皆遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于氫化可的松。詳見下表l。表1各受試物體外TNF-a抑制活性<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>注與模型組比較*P<0.05;**P<0.01;***P<0.001。實(shí)驗(yàn)例2三乙酰穿心蓮內(nèi)酯體外IL-6抑制活性研究1、藥品及儀器脂多糖(lip叩olysaccharide，LPS)購自Sigma公司；小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7購自中科院細(xì)胞庫(ATCC);RPMI1640培養(yǎng)液、青霉素、鏈霉素、胎牛血清購自GibC0公司；其他常用生化試劑均為園產(chǎn)分析純;全自動(dòng)酶標(biāo)儀(美國，Bi0tek);恒溫C02培養(yǎng)箱(美國，Thermo公司)。MouseIL-6ELISA試劑盒為R&D公司產(chǎn)品，由上海森雄公司分裝。穿心蓮內(nèi)酯、三乙酰穿心蓮內(nèi)酯樣品按制備例1、2制備，并以DMSO溶解并稀釋至合適濃度。2、小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7培養(yǎng)小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7培養(yǎng)于含10%熱滅活(56°C，30min)胎牛血清(FBS)、100U/mL青霉素鈉、100pg/mL鏈霉素的RPMI1640培養(yǎng)液中，37°C、cp(C02)=5%的恒溫培養(yǎng)箱中孵育生長。3、IL-6釋放量的測(cè)定用RPMI1640培養(yǎng)液將小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7稀釋至5xl05cells/mL，接種于96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中，每孔加入200^L細(xì)胞懸浮液。C02培養(yǎng)箱中培養(yǎng)lh后，每孔加入LPS(1pg/mL)和不同濃度的測(cè)試樣品0.4pL，同時(shí)設(shè)LPS組(不加入被測(cè)試樣品)和空白對(duì)照組(DMSO)，每個(gè)樣品設(shè)3個(gè)平行孔。在37'C、C02恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)6h后吸取培養(yǎng)液上清，按照ELISA試劑盒說明書方法進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制和樣品測(cè)定。4、實(shí)驗(yàn)結(jié)果三乙酰穿心蓮內(nèi)酯與穿心蓮內(nèi)酯皆可顯著抑制LPS誘導(dǎo)的IL一6的分泌，前者IC5o為后者的2倍，兩者的活性皆遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于氫化可的松。詳見表2。表2各受試物體外IL-6抑制活性<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>注與模型組比較*P<0.05;**P<0.01;***P<0.001。實(shí)驗(yàn)例3三乙酰穿心蓮內(nèi)酯體外NO抑制活性研究1、藥品及儀器脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)、MTT購自Sigma公司;小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7購自中科院細(xì)胞庫(ATCC);RPMI1640培養(yǎng)基、青霉素、鏈霉素、胎牛血清購自Gibco公司；其他常用生化試劑均為國產(chǎn)分析純；全自動(dòng)酶標(biāo)儀(美國，Biotek集團(tuán)生產(chǎn))；恒溫C02培養(yǎng)箱(美國，Thermo公司生產(chǎn))。穿心蓮內(nèi)酯、三乙酰穿心蓮內(nèi)酯、14-乙酰穿心蓮內(nèi)酯、3,19-二乙酰穿心蓮內(nèi)酯、14,19-二乙酰穿心蓮內(nèi)酯樣品按制備例l、2、3制備，并以DMSO溶解用于體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)。2、小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7培養(yǎng)小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7培養(yǎng)于含10%熱滅活(56°C，30min)胎牛血清(FBS)、100U/mL青霉素鈉、100ng/mL鏈霉素的RPMI1640培養(yǎng)基中，37°C、cp(C02)=5%的恒溫培養(yǎng)箱中孵育生長。3、NO釋放量的測(cè)定由于NO極不穩(wěn)定，在細(xì)胞培養(yǎng)上清液內(nèi)很快代謝成亞硝酸基(N02—)，故采用Griess法測(cè)定樣品中NC^的濃度作為衡量NO水平的指標(biāo)。Griess試劑A:w(N-萘乙二胺鹽酸鹽)=0.1%溶于水中；Griess試劑B:w(對(duì)氨基苯磺酰胺)=1。/。溶于cp(H3P04)=5%中，使用前等體積混合試劑A和B。用RPMI1640培養(yǎng)基將小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7稀釋至5xl05cells/mL,接種于96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中，每孔加入200nL細(xì)胞懸浮液。C02培養(yǎng)箱中培養(yǎng)lh后，每孔加入LPS(l嗎/mL)和不同濃度(0.1-200nmol/L)的測(cè)試樣品0.4^L，同時(shí)設(shè)LPS組(不加入被測(cè)試樣品)和空白對(duì)照組(DMSO)，每個(gè)樣品4個(gè)重復(fù)。在37。C、C02恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h后吸取培養(yǎng)液上清100nL至酶標(biāo)板中，加入等體積的Griess試劑，室溫反應(yīng)10min后測(cè)定540nm處的吸光值。用濃度分別為1、5、10、50pmol/L的NaN02繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)NaN02標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算細(xì)胞培養(yǎng)上清液中NC^—的濃度以及對(duì)NO釋放的抑制率，抑制率計(jì)算公式為LPS-[NO2-]LPS+樣品NO釋放抑制率(％)=100x-LPS-[NO"空白4、結(jié)果測(cè)得抑制率后，計(jì)算各樣品的ICso。詳見下表3。表3各受試物體外NO抑制活性<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>從上表可見，三乙酰穿心蓮內(nèi)酯雖較3,19-二乙酰穿心蓮內(nèi)酯僅差14位的乙?；玁O抑制活性卻提高近6倍。14-乙酰穿心蓮內(nèi)酯較穿心蓮內(nèi)酯亦差14位的乙酰基，但NO抑制活性卻提高4倍余?？梢?4位的乙酰化對(duì)穿心蓮內(nèi)酯類化合物的活性影響顯著。三乙酰穿心蓮內(nèi)酯雖較14,19-二乙酰穿心蓮內(nèi)酯僅差3位的乙酰基，但NO抑制活性卻提高近6倍?？梢?位的乙酰化對(duì)穿心蓮內(nèi)酯類化合物的活性影響顯著。由于內(nèi)毒素休克模型為全身炎性反應(yīng)綜合征(SIRS)、膿毒血癥、膿毒性休克、感染性休克、多器官功能障礙綜合征、敗血癥的代表模型，而炎性細(xì)胞因子在上述疾病的發(fā)生發(fā)展過程中起著至關(guān)重要的作用，而且該模型在闡述炎性細(xì)胞因子與炎性細(xì)胞因子相關(guān)性疾病之間的關(guān)系中最具代表性，故下面以兔內(nèi)毒素休克模型為代表，闡述下面幾方面內(nèi)容1、三乙酰穿心蓮內(nèi)酯的體內(nèi)炎性細(xì)胞因子抑制作用；2、三乙酰穿心蓮內(nèi)酯對(duì)全身炎性反應(yīng)綜合征(SIRS)、膿毒血癥、膿毒性休克、感染性休克、多器官功能障礙綜合征、敗血癥的治療作用；3、三乙酰穿心蓮內(nèi)酯作為炎性細(xì)胞因子抑制劑可用以治療
發(fā)明內(nèi)容中所述疾病的依據(jù)。實(shí)驗(yàn)例4三乙酰穿心蓮內(nèi)酯對(duì)兔內(nèi)毒素休克模型的影響(三乙酰穿心蓮內(nèi)酯體內(nèi)對(duì)炎性細(xì)胞因子的抑制作用)1、試驗(yàn)材料l.l受試品和陽性對(duì)照藥三乙酰穿心蓮內(nèi)酯乳劑及空白乳按制備例4、5制備；地塞米松注射液，天津藥業(yè)集團(tuán)新鄭股份有限公司產(chǎn)品。1.2動(dòng)物日本大耳白兔，雌雄兼用，體重2.53.0kg，合格證號(hào)SCXK-(吉)2003-0004,購自長春高新醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究中心。L3試齊U:大腸桿菌內(nèi)毒素(LPS，E.coli0111:B4)，為Sigma公司產(chǎn)品。白細(xì)胞介素-1(3(IL-lp),腫瘤壞死因子(TNF-ct)放免測(cè)定試劑盒，解放軍總醫(yī)院科技開發(fā)中心放免所生產(chǎn)。一氧化氮(NO)檢測(cè)試劑盒，南京建成生物工程研究所產(chǎn)品。1.4儀器BL-820型八導(dǎo)生理記錄儀，成都泰盟科技有限公司出品。WMY-01型數(shù)字溫度計(jì)，上海華辰醫(yī)用儀表有限公司生產(chǎn)。F1-2008P型自動(dòng)Y免疫記數(shù)儀，國營西安二六二廠產(chǎn)品。2、試驗(yàn)方法2.1造模參照文獻(xiàn)方法朱愉，等.細(xì)菌內(nèi)毒素等誘發(fā)的感染性休克.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的疾病模型.天津天津科技翻譯出版社.1997年3月第一版372，兔以40mg/kg(5ml/kg)戊巴比妥鈉腹腔注射(ip)麻醉，分離頸總動(dòng)脈，頸總動(dòng)脈插入連有三通的靜脈插管，通過壓力換能器與八導(dǎo)生理記錄儀連接，用于測(cè)量平均動(dòng)脈血壓(MAP)和采血，密閉系統(tǒng)采用0.3%肝素抗凝。四肢標(biāo)II導(dǎo)聯(lián)連接電極，八導(dǎo)生理記錄儀測(cè)量心率變化。數(shù)字溫度計(jì)測(cè)量肛溫變化。兔耳靜脈注射LPS300pg/kg(lml/kg)后形成兔內(nèi)毒素休克模型。2.2給藥兔注射LPS后立即耳靜脈緩慢推入受試藥物，給藥組分別為地塞米松5mg/kg組；空白乳劑對(duì)照組；三乙酰穿心蓮內(nèi)酯乳劑高中低劑量組(0.25mg/kg、0.5mg/kg、lmg/kg),正常對(duì)照組及模型對(duì)照組給予同體積生理鹽水?？瞻兹閯?duì)照組給予同體積空白乳劑。2.3檢測(cè)-①平均動(dòng)脈壓(MAP)、心率(HR)、肛溫測(cè)量兔于給LPS前及后30min,60min,120min,180min,240min,300min分別以八導(dǎo)生理記錄儀通過壓力換能器測(cè)量MAP，以肢體標(biāo)II導(dǎo)聯(lián)測(cè)量心率，以數(shù)字溫度計(jì)測(cè)量肛溫變化。②血清TNF-a、IL-ip、NO測(cè)量兔于給LPS前及后30min，60min,120min,180min,240min,300min分別于頸總動(dòng)脈采血lml，2500rpm離心得血清，以放免法測(cè)定血清TNF-a及IL-1(3含量，以硝酸還原酶法測(cè)定血清NO含量。3、試驗(yàn)結(jié)果3.1三乙酰穿心蓮內(nèi)酯對(duì)內(nèi)毒素休克兔平均動(dòng)脈壓(MAP)、心率(HR)、肛溫變化的影響兔給予LPS后，模型對(duì)照組與正常對(duì)照組比較，所測(cè)各時(shí)間點(diǎn)MAP均明顯下降，120min時(shí)下降到最低點(diǎn)。地塞米松、三乙酰穿心蓮內(nèi)酯各劑量治療組均可明顯抑制MAP降低；統(tǒng)計(jì)學(xué)分析表明，與模型對(duì)照組比較，地塞米松5mg/kg給藥后60min時(shí)有顯著性差異(PO.05),120min時(shí)有高度顯著性差異(PO.01);與模型對(duì)照組比較，三乙酰穿心蓮內(nèi)酯lmg/kg組給藥后120min時(shí)有高度顯著性差異(PO.01),60min時(shí)有顯著性差異(P〈0.05)'三乙酰穿心蓮內(nèi)酯0.5mg/kg給藥后120min時(shí)有顯著性差異(P<0.05)，三乙酰穿心蓮內(nèi)酯0.25mg/kg給藥后120min時(shí)有顯著性差異(PO.05);三乙酰穿心蓮內(nèi)酯lmg/kg同地塞米松5mg/kg作用強(qiáng)度接近，三乙酰穿心蓮內(nèi)酯0.25mg/kglmg/kg范圍內(nèi)有劑量依賴關(guān)系，結(jié)果見表4。兔給予LPS后，與正常對(duì)照組比較，模型對(duì)照組所測(cè)各時(shí)間點(diǎn)HR均有減慢趨勢(shì)，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，各給藥組與模型對(duì)照組比較無明顯差異，結(jié)果見表4。兔給予LPS后，模型對(duì)照組肛溫持續(xù)下降，與正常對(duì)照組比較，所測(cè)各時(shí)間點(diǎn)均有高度顯著性差異(P<0.01)。與模型對(duì)照組相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)比較，地塞米松5mg/kg給藥后30min120min時(shí)有高度顯著性差異(PO.01);三乙酰穿心蓮內(nèi)酯lmg/kg組給藥后120min時(shí)有高度顯著性差異(PO.01);三乙酰穿心蓮內(nèi)酯0.5mg/kg給藥后60min120min時(shí)有高度顯著性差異(PO.01);三乙酰穿心蓮內(nèi)酯0.25mg/kg給藥后各時(shí)間點(diǎn)作用均不明顯，地塞米松5mg/kg較三乙酰穿心蓮內(nèi)酯lmg/kg起效快但維持時(shí)間短。三乙酰穿心蓮內(nèi)酯在0.25mg/kglmg/kg范圍內(nèi)有劑量依賴關(guān)系，結(jié)果見表4。3.2.三乙酰穿心蓮內(nèi)酯對(duì)內(nèi)毒素休克兔血清TNF-a、IL-1(3、NO含量的影響兔給予LPS后，模型對(duì)照組同正常對(duì)照組比較，所測(cè)各時(shí)間點(diǎn)血清TNF-a、IL-lp、N0含量均明顯升高(PO.01)。其中TNF-a、IL-lp分別在120min和60min時(shí)達(dá)到峰值，NO含量給予LPS后持續(xù)增高。同模型對(duì)照組比較，地塞米松5mg/kg給藥后120min時(shí)可使TNF-a含量明顯降低，30min、120min時(shí)可使IL-lp含量明顯降低，120min可使NO含量明顯降低。三乙酰穿心蓮內(nèi)酯lmg/kg組給藥后30min120min時(shí)可使TNF-a含量明顯降低，30min、120min時(shí)可使IL-1含量明顯降低，60min120min可使NO含量明顯降低。三乙酰穿心蓮內(nèi)酯0.5mg/kg給藥后120min時(shí)可使NO含量明顯降低，對(duì)TNF-a及IL-1作用不明顯。三乙酰穿心蓮內(nèi)酯0.25mg/kg上述作用均不明顯，結(jié)果見表5。4結(jié)論綜上所述，三乙酰穿心蓮內(nèi)酯可明顯改善內(nèi)毒素休克兔的幾個(gè)重要生命指標(biāo)，即體溫、血壓；且可顯著降低內(nèi)毒素休克兔的TNF-a、IL-ip、NO水平。說明三乙酰穿心蓮內(nèi)酯對(duì)內(nèi)毒素休克兔具有治療作用。表4三乙酰穿心蓮內(nèi)酯對(duì)內(nèi)毒素休克兔MAP、HR、肛溫的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>注與正常對(duì)照組比較##P<0.01，與模型對(duì)照組比較*P<0.05，**P<0.01，n=7。表5三乙酰穿心蓮內(nèi)酯對(duì)內(nèi)毒素休克兔血清TNF-a、IL-lp、NO含量的影響<table>complextableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>注與正常對(duì)照組比較##P<0.01,同模型對(duì)照組比較*P<0.05，**P<0.01，x±S，n=7。權(quán)利要求1.3，14，19—三乙酰穿心蓮內(nèi)酯在制備炎性細(xì)胞因子抑制劑中的應(yīng)用。2、權(quán)利要求1所述的3，14，19一三乙酰穿心蓮內(nèi)酯在制備炎性細(xì)胞因子抑制劑中的應(yīng)用，其特征在于，所述炎性細(xì)胞因子為前炎癥細(xì)胞因子。3、權(quán)利要求1所述的3，14，19一三乙酰穿心蓮內(nèi)酯在制備炎性細(xì)胞因子抑制劑中的應(yīng)用，其特征在于，所述炎性細(xì)胞因子為具有炎性特質(zhì)的一氧化氮(NO)。4、權(quán)利要求2所述的3，14,19一三乙酰穿心蓮內(nèi)酯在制備炎性細(xì)胞因子抑制劑中的應(yīng)用，其特征在于，所述前炎癥細(xì)胞因子為TNF-a、IL-la、IL-ip、IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、IL-IO、IFN-y中的任何一種。5、權(quán)利要求1所述的3，14，19一三乙酰穿心蓮內(nèi)酯在制備炎性細(xì)胞因子抑制劑中的應(yīng)用，其特征在于，所述炎性細(xì)胞因子抑制劑可用于治療下述疾病中的任何一種或幾種全身炎性反應(yīng)綜合征(SIRS)、膿毒血癥、膿毒性休克、感染性休克、多器官功能障礙綜合征、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨性關(guān)節(jié)炎、脊柱關(guān)節(jié)病、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、高血壓、冠心病、心肌梗塞、心力衰竭、糖尿病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、狼瘡性腎炎、硬皮病、結(jié)節(jié)病、皮肌炎、白塞氏病、銀屑病、抑郁癥、呼吸道病毒感染、慢性阻塞性肺病、哮喘、胰腺炎、肝硬化、炎癥性腸病、獲得性免疫缺陷綜合征、Castleman氏病、帕金森氏癥、早老性癡呆、血管性頭痛、中樞神經(jīng)損傷、腦梗塞、急性腦出血、腦損傷、腦損傷后感染性并發(fā)癥、流感病毒性腦病、慢性腎功能不全、原發(fā)性腎病綜合征、返流性腎病、腎小球腎炎、失血性休克、阻塞性睡眠呼吸暫停綜合征、心臟粘液瘤、急性髓性白血病、多發(fā)性骨髓瘤、骨髓增生異常綜合征、腫瘤、壞疽性膿皮病、移植物抗宿主病、葡萄膜炎、牙周病、細(xì)菌感染、肥胖。6、權(quán)利要求3所述的3，14，19一三乙酰穿心蓮內(nèi)酯在制備炎性細(xì)胞因子抑制劑中的應(yīng)用，其特征在于，當(dāng)所述炎性細(xì)胞因子為NO時(shí)，3，14，19一三乙酰穿心蓮內(nèi)酯可用于治療下列病癥中的一種或幾種骨性關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、全身炎性反應(yīng)綜合征、膿毒血癥、膿毒性休克、多器官功能障礙綜合征、感染性休克、腦梗塞、高血壓、心肌梗塞、充血性心力衰竭、腎小球腎炎、肝硬化、炎癥性腸病、糖尿病、獲得性免疫缺陷綜合征、血管性頭痛、哮喘、腫瘤。7、權(quán)利要求4所述的3，14，19一三乙酰穿心蓮內(nèi)酯在制備炎性細(xì)胞因子抑制劑中的應(yīng)用，其特征在于，當(dāng)所述前炎癥細(xì)胞因子為TNF-oi時(shí)，3，14，19一三乙酰穿心蓮內(nèi)酯可用于治療下列病癥中的一種或幾種全身炎性反應(yīng)綜合癥、膿毒血癥、膿毒性休克、多器官功能障礙綜合征、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨性關(guān)節(jié)炎、脊柱關(guān)節(jié)病、炎癥性腸病、心力衰竭、糖尿病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、硬皮病、結(jié)節(jié)病、皮肌炎、銀屑病、急性髓性白血病、帕金森氏癥、早老性癡呆、抑郁癥、白塞氏病、慢性阻塞性肺病、哮喘、急性胰腺炎、中樞神經(jīng)損傷、呼吸道病毒感染、多發(fā)性骨髓瘤、骨髓增生異常綜合征、壞疽性膿皮病、移植物抗宿主病、葡萄膜炎、牙周病、肥胖。8、權(quán)利要求4所述的3，14，19—三乙酰穿心蓮內(nèi)酯在制備炎性細(xì)胞因子抑制劑中的應(yīng)用，其特征在于，當(dāng)所述前炎癥細(xì)胞因子為IL-lp時(shí)，3，14，19一三乙酰穿心蓮內(nèi)酯可用于治療下列病癥中的一種或幾種類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、全身炎性反應(yīng)綜合征(SIRS)、膿毒血癥、膿毒性休克、感染性休克、多器官功能障礙綜合征、牙周病、心力衰竭、皮肌炎、急性胰腺炎、慢性阻塞性肺病、骨性關(guān)節(jié)炎、細(xì)菌感染、多發(fā)性骨髓瘤、早老性癡呆、骨性關(guān)節(jié)炎、呼吸道病毒感染、哮喘、抑郁癥、硬皮病。9、權(quán)利要求4所述的3，14，19一三乙酰穿心蓮內(nèi)酯在制備炎性細(xì)胞因子抑制劑中的應(yīng)用，其特征在于，當(dāng)所述前炎癥細(xì)胞因子為IL-6時(shí)，3，14，19_三乙酰穿心蓮內(nèi)酯可用于治療下列病癥中的一種或幾種類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、全身炎性反應(yīng)綜合征(SIRS)、膿毒血癥、膿毒性休克、感染性休克、多器官功能障礙綜合征、獲得性免疫缺陷綜合征、心臟粘液瘤、Castleman氏病、急性腦出血、急性腦梗塞、腦損傷、腦損傷后感染性并發(fā)癥、流感病毒性腦病、冠心病、重癥胰腺炎、狼瘡性腎炎、慢性腎功能不全、原發(fā)性腎病綜合征、返流性腎病、失血性休克、阻塞性睡眠呼吸暫停綜合征、腫瘤。全文摘要本發(fā)明涉及3，14，19-三乙酰穿心蓮內(nèi)酯在制備炎性細(xì)胞因子抑制劑中的應(yīng)用，其中炎性細(xì)胞因子包括TNF-α、IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、IFN-γ、NO中的任何一種。文檔編號(hào)A61P11/00GK101371832SQ200710016490公開日2009年2月25日申請(qǐng)日期2007年8月20日優(yōu)先權(quán)日2007年8月20日發(fā)明者關(guān)玉昆,妍馮,珂劉,巍吳,卉徐,滕厚雷,翟大偉,烽趙,萌邵,飛韓申請(qǐng)人:煙臺(tái)靶點(diǎn)藥物研究有限公司