專利名稱：姜黃素在抗肝纖維化藥物中的應(yīng)用及制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種姜黃素在藥物中的應(yīng)用，具體是姜黃素及其制劑在抗肝纖維化藥物中的用途。
背景技術(shù)：
肝纖維化是大多數(shù)慢性肝病所共有的病理特征，也是慢性肝炎肝硬化等進一步發(fā)展、惡化的重要中間環(huán)節(jié)。主要是在各種損傷因素作用下，肝星狀細胞激活、增殖、合成并分泌大量的細胞外基質(zhì)，降解減少沉積增多，形成肝纖維化。引起肝纖維化的病因很多，在國外，尤其是歐美國家，以酒精中毒占多數(shù)(約50％～80％)，在我國導(dǎo)致肝纖維化的主要原因是感染肝炎病毒。在HBV感染者中，有10％～15％的患者可發(fā)展為慢性HBV感染，其中25％～40％的病例最終發(fā)展為肝硬化乃至肝癌。丙型肝炎病毒感染者更易引起慢性化，約75％～80％的急性丙肝患者轉(zhuǎn)為慢性感染，而慢性HCV感染者20％～25％發(fā)展為肝纖維化、肝硬化。
現(xiàn)有的研究結(jié)果表明，在肝纖維化形成過程中，各種類型的肝損傷，均可激活肝貯脂細胞，并增殖和轉(zhuǎn)化成肌成纖維細胞，進而合成大量的細胞外基質(zhì)，而降解相對不足，過多的基質(zhì)沉質(zhì)在肝內(nèi)而形成肝纖維化。近年來研究證實肝纖維化在未進入肝硬化之前，尚有逆轉(zhuǎn)可能，這為肝纖維化的有效治療帶來新的希望，但臨床仍缺乏高效、無明顯毒副作用的藥物。
當(dāng)前抗肝纖維化藥物研究的熱點主要有兩個方面(1)以現(xiàn)代醫(yī)學(xué)理論為基礎(chǔ)，針對病因和發(fā)病機制的某一環(huán)節(jié)尋找抗肝纖維化藥物，包括鈣通道阻斷劑維拉帕米、抗病毒藥物γ-干擾素、秋水仙堿、維生素A等，這些抗肝纖維化藥物大多數(shù)處于實驗研究階段，用于臨床很少，且療效有限，長期應(yīng)用都有明顯的毒副作用，因而很不理想；(2)國內(nèi)抗肝纖維化藥物研究的特點以祖國醫(yī)學(xué)理論為基礎(chǔ)，以活血化淤、調(diào)理肝脾等法，如復(fù)方丹參滴丸、強肝軟堅湯等。中醫(yī)藥抗肝纖維化無疑顯示出一定潛在價值和優(yōu)勢，但由于生藥產(chǎn)地及成分的復(fù)雜性，故療效欠確實、重現(xiàn)性差。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是開發(fā)一種高效、無明顯毒副作用的抗肝纖維化藥物。
為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明公開了姜黃素在抗肝纖維化藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述抗肝纖維化藥物的主要有效成份為姜黃素，其結(jié)構(gòu)式如下 姜黃素抗肝纖維化藥物還可以含有藥學(xué)可接受的載體，如賦形劑和添加劑、香味劑制成各種劑型，包括散劑、片劑、微丸、膠囊、微囊、顆粒劑、液體制劑。
本發(fā)明的優(yōu)點是姜黃素具有較強的抗肝纖維化作用，且無明顯毒副作用，具有優(yōu)良的的預(yù)防和治療由各種因素引起的肝纖維化癥狀的作用。本發(fā)明的制劑，特別是采用緩釋劑型的制劑，易制成每日服用一次的制劑，具有更少的不良反應(yīng)。且姜黃在我國資源豐富，姜黃素的提取簡單易行。
為了更好的理解本發(fā)明的實質(zhì)，下面將用姜黃素進行的藥理試驗及藥效學(xué)試驗結(jié)果來說明其在制備抗肝纖維化藥物中的應(yīng)用。


圖1為采用DMN誘導(dǎo)大鼠肝纖維化模型組圖片；圖2為用姜黃素200mg/kg治療后肝小葉切片對照組圖片。
具體實施例方式
姜黃素在抗肝纖維化藥物中應(yīng)用時，以姜黃素為藥物組合物的主要有效成份，其結(jié)構(gòu)時如下 給藥劑量可根據(jù)臨床上患者的年齡、體重及病情選擇合適劑量，口服給藥劑量可為成年人200-2000mg/天，一般多為300-500mg/天，優(yōu)選劑量為400mg/天。
姜黃素抗肝纖維化藥物還可以含有藥學(xué)可接受的載體，如賦形劑和添加劑、香味劑制成各種劑型。本發(fā)明的制劑可以是任何可服用的劑型，這些劑型包括片劑、糖衣片劑、薄膜衣片劑、腸溶衣片劑、膠囊劑、硬膠囊劑、軟膠囊劑、口服液、糖漿劑、口含劑、顆粒劑、沖劑、丸劑、散劑、膏劑、丹劑、混懸劑、溶液劑、注射劑、栓劑、軟膏劑、硬膏劑、霜劑、噴霧劑、滴劑、貼劑、緩釋制劑、控釋制劑。優(yōu)選的是口服制劑，這些口服制劑可以是片劑、膠囊劑、口服液、顆粒劑、混懸劑、粉劑、緩釋微丸制劑、丸劑。
本發(fā)明的制劑，其口服給藥的片劑和膠囊通常為一種單位劑量，并含有常用的賦形劑，諸如粘合劑、填充劑、稀釋劑、壓片劑、潤滑劑、崩解劑、著色劑、調(diào)味劑和濕潤劑，可對片劑進行包衣。
適用的填充劑包括纖維素、甘露糖醇、乳糖和其它類似的填充劑。適宜的崩解劑包括淀粉、聚乙烯吡咯烷酮和淀粉衍生物，例如羥基乙酸淀粉鈉。適宜的潤滑劑包括，例如硬脂酸鎂。適宜的藥物可接受的濕潤劑包括十二烷基硫酸鈉。
可通過混合，填充，壓片等常用的方法制備固體口服組合物。進行反復(fù)混合可使活性成分分布在整個使用大量填充劑的那些組合物中。
口服液體制劑的形式例如可以是水性或油性懸浮液、溶液、乳劑、糖漿劑或酏劑，或者可以是一種在使用前可用水或其它適宜的載體復(fù)配的干燥產(chǎn)品。這種液體制劑可含有常規(guī)的添加劑，諸如懸浮劑，例如山梨醇、糖漿、甲基纖維素、明膠、羥乙基纖維素、羧甲基纖維素、硬脂酸鋁凝膠或氫化食用脂肪，乳化劑，例如卵磷脂、脫水山梨醇一油酸酯或阿拉伯膠；非水性載體(它們可以包括食用油)，例如杏仁油、分餾椰子油、諸如甘油的酯的油性酯、丙二醇或乙醇；防腐劑，例如對羥基苯甲酯或?qū)αu基苯甲酸丙酯或山梨酸，并且如果需要，可含有常規(guī)的香味劑或著色劑。
對于注射劑，制備的液體單位劑型含有本發(fā)明的活性成分配方和無菌載體。根據(jù)載體和濃度，可以將此化合物懸浮或者溶解。溶液的制備通常是通過將活性成分溶解在一種載體中，在將其裝入一種適宜的小瓶或安瓿前過濾消毒，然后密封。輔料例如一種局部麻醉劑、防腐劑和緩沖劑也可以溶解在這種載體中。為了提高其穩(wěn)定性，可在裝入小瓶以后將這種組合物冰凍，并在真空下將水除去。
用基本相同的方式制備胃腸外懸浮液，除了是將活性化合物懸浮在載體而不是將其溶解，而且在將其懸浮于無菌載體之前，用環(huán)氧乙烷對其進行消毒。表面活性劑或濕潤劑可包括在此組合物中，以利于這種活性化合物的均勻分布。
本發(fā)明的制劑，在制備成制劑時可選擇性的加入適合的藥物可接受的載體(輔料)，所述藥物可接受的載體選自甘露醇、山梨醇、焦亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、硫代硫酸鈉、鹽酸半胱氨酸、巰基乙酸、蛋氨酸、維生素C、EDTA二鈉、EDTA鈣鈉，一價堿金屬的碳酸鹽、醋酸鹽、磷酸鹽或其水溶液、鹽酸、醋酸、硫酸、磷酸、氨基酸、氯化鈉、氯化鉀、乳酸鈉、木糖醇、麥芽糖、葡萄糖、果糖、右旋糖苷、甘氨酸、淀粉、預(yù)膠化淀粉、蔗糖、乳糖、甘露糖醇、硅衍生物、纖維素及其衍生物、藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯烷酮、甘油、土溫80、瓊脂、碳酸鈣、碳酸氫鈣、表面活性劑、聚乙二醇、環(huán)糊精、β-環(huán)糊精、磷脂類材料、高嶺土、滑石粉、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂等。
本發(fā)明的藥物制劑可以采用以下方法制備片劑將處方量的姜黃素和醫(yī)用淀粉混合，制軟材，制濕顆粒，在80-100度干燥4小時，冷卻后加入硬脂酸鎂，預(yù)膠化淀粉混合，整粒，壓片，包薄膜衣，包裝，即得片劑。
緩釋片劑和緩釋膠囊，如此的緩釋制劑可以通過緩釋微丸制得，緩釋微丸含姜黃素以及制成緩釋制劑所需得高分子化合物及輔料。該緩釋微丸可以制成膠囊，也可以制成片劑。如此，肝纖維化病人可以每日只服一次或兩次。
本發(fā)明優(yōu)選的是微丸制劑，可用以下方法制備將姜黃素過4#篩，按比率和淀粉混合好，以0.6％羧甲基纖維素鈉(溶劑為酒精∶水＝50∶50)為粘合劑，起母和放大。
起母投料量為400g，將噴漿速度調(diào)到30r/min，1min后調(diào)到20r/min，主機轉(zhuǎn)速100～250r/min，鼓風(fēng)21/min，噴氣減壓0.1Mpa。等到出現(xiàn)初始丸核后，馬上停止噴漿和噴氣，主機再滾轉(zhuǎn)2min，停止主機轉(zhuǎn)速，取出丸核，干燥，過篩。將24～80目的初始丸核放大。
放大制備的粒徑在24～40目和40～80目的初始丸核分別拿來放大，粘合劑為0.6％羧甲基纖維素鈉(溶劑為酒精∶水＝50∶50)溶液，放大速度要慢，噴漿速度在15r/min左右，供粉加入速度在25r/min左右，因為物料很容易形成粒子，所以填充劑加入的速度要高于噴漿速度，但是要經(jīng)常觀察微丸大小，主機轉(zhuǎn)速150r/min，鼓風(fēng)21/min，噴氣減壓0.1Mpa，微丸大小差不多時，停止噴漿，主機滾轉(zhuǎn)1min左右取出微丸，干燥。
微丸包衣將干燥的微丸(18～24目)先稱量，放到離心包衣造粒機內(nèi)，然后按比率稱量撲爾敏的量(因為粘合劑的量很少，所以暫時可以忽略不計)，主機轉(zhuǎn)速100r/min，噴漿轉(zhuǎn)速小于5r/min，鼓風(fēng)20左右，進風(fēng)溫度37℃左右。包衣溶液為普通胃溶型包衣粉，包衣液濃度6％，包衣過程時刻監(jiān)視，防止噴漿過多，導(dǎo)致微丸粘連，發(fā)生粘連時將噴漿關(guān)閉，其余不變，過會兒等到微丸干燥時再開噴漿。包衣增重約10％。顏色均勻，過篩，將18～24目微丸干燥。檢測含量后灌裝膠囊。
以下是本發(fā)明藥物制劑實施例，但本發(fā)明的范圍不限于實施例實施例1普通片劑姜黃素400mg將1000倍處方量的姜黃素和500g醫(yī)用淀粉混合，制軟材，制濕顆粒，在80-100度干燥4小時，冷卻后加入50g硬脂酸鎂，50g預(yù)膠化淀粉混合，整粒，壓片，包薄膜衣，包裝，即得1000片劑。
實施例2普通膠囊劑姜黃素400mg將1000倍處方量的姜黃素和500g醫(yī)用淀粉混合，制軟材，制濕顆粒，在80-100度干燥4小時，冷卻后加入50g硬脂酸鎂，50g預(yù)膠化淀粉混合，整粒，裝膠囊，包裝，即得1000粒膠囊。
實施例3口服液姜黃素400mg將1000倍處方量的姜黃素和200g蔗糖混合，加入助溶劑，防腐劑和水到10000ml，混合均勻，灌裝到10ml玻璃安瓶中，滅菌，包裝。得到1000瓶口服液。
實施例4微丸姜黃素微丸處方姜黃素 400g淀粉320g-480g，以400g為好，羧甲基纖維素鈉 適量制成微丸包衣后，套膠囊1000粒。
工藝先將姜黃素過4#篩，按比率和淀粉混合好，以0.6％羧甲基纖維素鈉(溶劑為酒精∶水＝50∶50)為粘合劑，起母和放大。
起母投料量為400g，將噴漿速度調(diào)到30r/min，1min后調(diào)到20r/min，主機轉(zhuǎn)速100～250r/min，鼓風(fēng)21/min，噴氣減壓0.1Mpa。等到出現(xiàn)初始丸核后，馬上停止噴漿和噴氣，主機再滾轉(zhuǎn)2min，停止主機轉(zhuǎn)速，取出丸核，干燥，過篩。將24～80目的初始丸核放大。
放大制備的粒徑在24～40目和40～80目的初始丸核分別拿來放大，粘合劑為0.6％羧甲基纖維素鈉(溶劑為酒精∶水＝50∶50)溶液，放大速度要慢，噴漿速度在15r/min左右，供粉加入速度在25r/min左右，因為物料很容易形成粒子，所以填充劑加入的速度要高于噴漿速度，但是要經(jīng)常觀察微丸大小，主機轉(zhuǎn)速150r/min，鼓風(fēng)21/min，噴氣減壓0.1Mpa，微丸大小差不多時，停止噴漿，主機滾轉(zhuǎn)1min左右取出微丸，干燥。
微丸包衣將干燥的微丸(18～24目)先稱量，放到離心包衣造粒機內(nèi)，然后按比率稱量撲爾敏的量(因為粘合劑的量很少，所以暫時可以忽略不計)，主機轉(zhuǎn)速100r/min，噴漿轉(zhuǎn)速小于5r/min，鼓風(fēng)20左右，進風(fēng)溫度37℃左右。包衣溶液為普通胃溶型包衣粉，包衣液濃度6％，包衣過程時刻監(jiān)視，防止噴漿過多，導(dǎo)致微丸粘連，發(fā)生粘連時將噴漿關(guān)閉，其余不變，過會兒等到微丸干燥時再開噴漿。包衣增重約10％。顏色均勻，過篩，將18～24目微丸干燥。檢測含量后灌裝膠囊。
姜黃素長期毒性實驗分姜黃素高、低2個劑量組，連續(xù)給藥80天，部分動物停藥后繼續(xù)觀察2周。經(jīng)一般狀況觀察及血液生化指標(biāo)檢測，大體解剖及病理學(xué)觀察，結(jié)果顯示姜黃素高劑量組(500mg/kg/天)、低劑量組(100mg/kg/天)各項指標(biāo)與正常對照組比較，均無顯著差異，提示了姜黃素具有較好的安全性。
姜黃素對CCl4誘導(dǎo)的中毒性肝纖維化的治療作用實驗方法雄性SD大鼠60只，隨機分為6組正常對照組、陰性對照組、高中低3個劑量姜黃素組和陽性藥對照組，除正常對照組不注射CCl4外，其余各組皮下注射CCl45ml/kg，后注射20％CCl43ml/kg，2次/周，共12周。造模6周后開始給藥，姜黃素和陽性對照藥均用0.05％羧甲基纖維酸鈉為載體，正常對照組、陰性對照組灌胃給予羧甲基纖維酸鈉10ml/kg/天，姜黃素組灌胃分別給予50、100、200mg/kg/天，陽性對照藥組灌胃給予馬洛替酯90mg/kg/天。造模12周后，取肝組織做病理觀察，取血清測定血液谷丙氨酸轉(zhuǎn)移酶ALT、谷草氨酸轉(zhuǎn)移梅AST含量(南京建成生物有限公司試劑盒)。實驗結(jié)果如下表1姜黃素對CCl4誘導(dǎo)的肝纖維化大鼠的ALT、AST的影響

*與陰性對照組相比，P＜0.05病理學(xué)檢測顯示陰性對照組肝細胞脂質(zhì)變性，主要集中在小葉周邊，并可見假小葉的形成。姜黃素高劑量組肝細胞脂質(zhì)變性，肝小葉形態(tài)好轉(zhuǎn)，周圍形成的纖維間隔較陰性對照組明顯減輕，匯管區(qū)可見少量細胞浸潤。姜黃素中低劑量組與陰性對照組相比改變不顯著。
姜黃素對二甲基亞硝胺(DMN)誘導(dǎo)的大鼠肝纖維化形成的影響實驗方法肝纖維化是肝損傷持續(xù)存在、組織發(fā)生修復(fù)反應(yīng)時因細胞外基質(zhì)合成、降解與沉積不平衡而引起的病理過程，是慢性肝病重要的病理特征，也是進一步向肝硬化發(fā)展的主要中心環(huán)節(jié)。選擇與各種原因所致人類慢性肝病相似的肝纖維化動物模型不僅是深入研究肝纖維化發(fā)病機制的重要基礎(chǔ)，也是臨床篩選防治肝纖維化藥物的有效手段。本發(fā)明采用腹下注射二甲基亞硝胺10mg/kg造成大鼠肝損害和纖維化模型。采用二甲基亞硝胺誘導(dǎo)大鼠肝纖維化，期間給予灌服姜黃素(50，100，200mg/kg)并設(shè)馬洛替酯組(90mg/kg)作對照，給藥4周后，測定血清谷丙氨轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、堿性磷酸酶(AKP)、總蛋白(TP)和白蛋白(ALB)含量及肝勻漿中SOD、MDA、GSH-Px含量并用放射免疫分析法檢測透明質(zhì)酸(HA)、層粘連蛋白(LN)含量；光鏡觀察肝細胞結(jié)構(gòu)和肝纖維化程度。結(jié)果姜黃素預(yù)防給藥，明顯降低肝纖維化大鼠血清ALT、AKP活性，給藥組肝組織內(nèi)SOD、GSH-Px較模型組明顯提高，而MDA較模型組明顯降低；給藥后也可明顯降低血清HA和LN含量。病理學(xué)觀察結(jié)果，姜黃素預(yù)防組大鼠膠原纖維沉積明顯減輕，假小葉結(jié)構(gòu)明顯減少。
結(jié)論姜黃素預(yù)防給藥，可抑制DMN誘導(dǎo)的大鼠肝纖維化形成。
權(quán)利要求
1.姜黃素在抗肝纖維化藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述抗肝纖維化藥物的主要有效成份為姜黃素，其結(jié)構(gòu)式如下 姜黃素
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗肝纖維化藥物，其特征在于還可以含有藥學(xué)可接受的載體，如賦形劑和添加劑、香味劑制成各種劑型，包括散劑、片劑、微丸、膠囊、微囊、顆粒劑、液體制劑。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的抗肝纖維化藥物片劑制備方法，其特征在于包括以下步驟將處方量的姜黃素和醫(yī)用淀粉混合，制軟材，制濕顆粒，在80-100度干燥4小時，冷卻后加入硬脂酸鎂，預(yù)膠化淀粉混合，整粒，壓片，包薄膜衣，包裝，即得片劑。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的抗肝纖維化藥物微丸制劑制備方法，其特征在于包括以下步驟將姜黃素過4#篩，按1∶0.8-1∶1.2比率和淀粉混合好，以0.6％羧甲基纖維素鈉(溶劑為酒精∶水＝50∶50)為粘合劑，進行起母和放大，然后再包衣和灌裝膠囊。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種姜黃素在抗肝纖維化藥物中的應(yīng)用及制備方法。姜黃素為藥物組合物的主要有效成份，還可以含有藥學(xué)可接受的載體，如賦形劑和添加劑、香味劑制成各種劑型，包括散劑、片劑、微丸、膠囊、微囊、顆粒劑、液體制劑。姜黃素具有較強的抗肝纖維化作用，且無明顯毒副作用，具有優(yōu)良的預(yù)防和治療由各種因素引起的肝纖維化癥狀的作用。本發(fā)明的制劑，特別是采用緩釋劑型的制劑，易制成每日服用一次的制劑，具有更少的不良反應(yīng)。且姜黃在我國資源豐富，姜黃素的提取簡單易行。
文檔編號A61K9/48GK101019841SQ20071002024
公開日2007年8月22日 申請日期2007年3月7日 優(yōu)先權(quán)日2007年3月7日
發(fā)明者肖健, 傅紅興, 李校堃, 姚崇舜, 徐恒武 申請人:溫州醫(yī)學(xué)院