專利名稱：抗腫瘤化合物Cu(C₁₀H₁₂NO₂)₂的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明所涉及醫(yī)藥化工領(lǐng)域，特別是一種抗胂瘤化合物Cu(C10H12N02)2。
背景技術(shù)：
癌癥是當前危害人類健康和正常生活的最主要的疾病之一?？拱┧幬锏难芯?開發(fā)一直是科學(xué)家選擇的課題。由于癌癥發(fā)生機制的特殊性和復(fù)雜性，尋找高 選擇性、高效及低毒副作用的抗癌藥物并非易事。
自從20世紀六七十年代順鉑抗癌作用的發(fā)現(xiàn)以來，尋找毒副作用弱，抗癌 效果好的低毒高效金屬配合物作為新型抗腫瘤藥物受到越來越多的科學(xué)家的重 視。探討金屬配合物的抗癌和抗腫瘤活性的研究逐漸成為研究的熱點之一。順 鉑、碳鉑、鎵、銠、錫等的化合物和配合物的抗癌和抗腫瘤活性已得到了廣泛 研究。鄧元等介紹了含鉬化合物及其配合物的抗癌抗腫瘤機理等研究情況。過 渡金屬作為DNA結(jié)構(gòu)和構(gòu)象的探針一直是研究的一大熱點。如張芳等合成了銅 (II )-蘇氨酸-咪唑混配混合物[Cu(Thr)(Im)3]Cl H20，通過電子吸收光譜法和EB 熒光分析法研究了該配合物與魚精DNA的作用，得出其與DNA作用是以弱的 插入作用相結(jié)合。王流芳等研究了桑色素合銅、桑色素合鋅、桑色素合鈷三種 配合物與DNA的作用，前兩者比后者強，可能與前兩者抗腫瘤活性較強有關(guān)。
鐮刀菌酸(Fusaric acid， F夂(310!1131^02)亦稱萎蔫酸，是鐮刀菌萎蔫毒素 (Fusariumwilttoxin)的一種，是引起植物鐮刀菌枯萎病的主要毒素，是導(dǎo)致作物 萎蔫的主要致病因子之一。鐮刀菌酸主要是由鐮刀菌屬(Fiisarium)的一種，特別 是尖孢鐮刀菌(Fusarium oxysponim)所產(chǎn)生的一種寄主非?；远舅?，它作為病 原菌產(chǎn)生的一種次生代謝產(chǎn)物，能引起多種植物的蔞蔫，造成包括番茄、棉花、 香蕉、西瓜、黃瓜等作物的枯萎病，導(dǎo)致植株的萎蔫枯死。
在植物枯蔞病菌的致病機理中，鐮刀菌酸起著極為重要的作用。植物枯萎病 菌可以產(chǎn)生以鐮刀菌酸為主的致萎物質(zhì)，對寄主植物造成毒害作用，主要表現(xiàn)為影響原生質(zhì)透水性，降低細胞保持水分的能力；通過干擾蒸騰代謝過程、 堵塞導(dǎo)管等影響植株蒸騰作用；鰲合許多代謝過程中酶的重金屬離子，影響酶 活性等等。鐮刀菌酸在植物枯萎病的發(fā)生發(fā)展中起著重要的作用，也是導(dǎo)致寄 主植物萎蔫枯死的主要原因之一。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種新的抗腫瘤化合物CU(C1QH12N02)2，該化合物具 有式1結(jié)構(gòu)，由兩分子鐮刀菌酸(Fusaric acid， FA C10HnN02)和一分子Cu"+配位 合成。通過體外抗腫瘤實驗發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明化合物對人肝癌BEL-7402細胞有較好 的抑制作用。
本發(fā)明是一種如式I的化合物
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Cu原子為四配位共面的正方形構(gòu)型，每個鐮刀菌酸陰離子配體通過氮原子和 氧原子和銅相連接， 一個012+與兩個鐮刀菌酸陰離子組成，鐮刀菌酸為二齒配 位。每個Cu"處于對稱中心，并且均與不同的的兩個鐮刀菌酸配體中的氧和原 子配位，而且每個Ci^+和與它配位的兩個氧原子和兩個氮原子處于同一平面， 形成共面的正方形構(gòu)型。
本發(fā)明合 成步驟簡單，選擇性高、抗腫瘤效果好，毒副作用低，是一種較好 的腫瘤抑制劑，具有極大的藥用價值。


圖l是本發(fā)明的結(jié)構(gòu)圖。
具體實施例方式
實施例l溶劑揮發(fā)法合成本發(fā)明化合物
a. 取30mmol鐮刀菌酸提取液，充分攪拌，過濾；
b. 稱量20mmolCuCl2，用5ml蒸餾水溶解，攪拌使完全溶解，過濾；
c. 將上述兩種溶液混合，水浴加熱，攪拌下滴加0.1mol/L的NaOH調(diào)節(jié)混 合溶液pH值；
d. 混合溶液冷卻至室溫，過濾，靜置；
e. 濾液放置一星期后得到本發(fā)明化合物。 實施例2
水熱合成法合成本發(fā)明化合物-
a. 取30mmo1鐮刀菌酸提取液，水浴加熱，攪拌下滴加O.lmolZL的NaOH 調(diào)節(jié)溶液pH值；
b. 稱量20mmol CuCl2，加入到上述溶液中；
c. 將混合溶液加入水熱反應(yīng)釜中，125。C下封閉反應(yīng)48h;
d. 打開水熱反應(yīng)釜，將溶液過濾，得到本發(fā)明化合物。 通過體外抗腫瘤實驗發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明化合物對人肝癌BEL-7402細胞有較好 的抑制作用。
實施例3
體外抗腫瘤實驗
a. 本發(fā)明化合物溶液分別用RPMI-1640培養(yǎng)液配制成濃度為10tunol/L、 50pmol/L、 100^imol/L溶液，4。C保存6天；
b. BEL-7402細胞培養(yǎng)于含10%小牛血清、100kU/L青霉素和100mg/L鏈霉 素的RPMI-1640培養(yǎng)液中，放在5°/。C02飽和濕度細胞培養(yǎng)箱中恒溫培 養(yǎng)-'
c. 取對數(shù)生長期的BEL-7402細胞，用0.25%胰蛋白酶消化，RPMI-1640完 全培養(yǎng)液調(diào)制成5.0x104個/ml細胞懸液，接種于96孔培養(yǎng)板中，每孔接 禾中100 ^ (含5.0x103個細胞);
d. 吸出培養(yǎng)液，加入新培養(yǎng)液90pl及不同濃度的鐮刀菌酸溶液10W，使終 濃度分別為10nmol/L、 50nmol/L、 100抖mol/L;
e. 同時設(shè)置空白及5-Fu陽性對照孔，空白組加入相同體積的培養(yǎng)液，陽性 對照組加入40pmol/L，每一濃度設(shè)8個平行孔；f. 繼續(xù)培養(yǎng)24h、 48h、 72h后，每孔加入MTT(5g/L)20 pl，繼續(xù)培養(yǎng)5h;
g. 吸出孔內(nèi)培養(yǎng)液(盡量完全)，加入DMSO液(100pl/孔)，置37t:微型振 蕩器上搖勻I5min，使結(jié)晶充分溶解；
h. 用ELX800型酶標儀在主波長為570 nm，參比波長為630 nm處測量OD 值，比色以空白孔調(diào)零；
i. 抑制率=(空白組8孔OD值的平均值一實驗組8孔OD值的平均值)/空
白組8孔OD值的平均值X 100%。 實驗結(jié)果如下表所示
鐮刀菌酸銅配合物Cu(Cu)HuN02)2對人肝癌BEL-7402細胞生長抑制率
Concentration__^__^_ 72
(W mol/ml) OD570 IR(%) OD^ IR(%) OD570 IR(%)
Q 907.4土67,4 —945.3±19.2 — 1121.0士61.8 —
5-Fu(10Lig/ml) 465.2土79, 6 * 48.7土8. S 347.5 土63 * * 63.2±3,6 201.1土28. 5 * * * 82.1土4.3
10 S06.8士90.4 11.1±9. 9777.6土4:6. 4 17.4±4. 9 853.4土35.6 23.8±5. 3
50 567.0±64. 37.5士7. 1 548.1士85.5 * 42.0士 9. 0 548.3±55.3 * 5L1士8. 4
100 378,8±11. 8 * * 58.3±1. 3 2S8.4土64. 1 * * 69.5±6. 8 2623土35. 0 " * 76.6土5. 3
Dataare shownasX±s(n=8) *P<0, 05 ， "P<a 01 > "*「J<C.001
從上表可以看出，在相同的時間內(nèi)，本發(fā)明化合物對人肝癌BEL-7402細胞 生長抑制率隨著提取液濃度的增加而升高；在24h和48h時，濃度為100umol/ml 的提取液的抑制率都高于陽性對照組，抑制細胞生長的活性較高。
體外抗腫瘤活性實驗結(jié)果表明本發(fā)明對人肝癌BEL-7402細胞的生長有較 好的抑制活性。
由一個012+與兩個5-丁基吡啶-2-羧酸(鐮刀菌酸)陰離子組成，鐮刀菌酸為二 齒配位。每個012+處于對稱中心，并且均與不同的的兩個鐮刀菌酸配體中的氧和 原子配位，而且每個C^+和與它配位的兩個氧原子和兩個氮原子處于同一平面， 形成共面的正方形構(gòu)型。
權(quán)利要求
1. 一種如式I的化合物
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗腫瘤化合物Cu(C1QH12N02)2，其特征是由兩分子鐮 刀菌酸(Fusaric acid, FA^ d。HnN02)和一分子Cu"配位合成，Cu原子為四配位共 面的正方形構(gòu)型，每個鐮刀菌酸陰離子配體通過氮原子和氧原子和銅相連接， 一個012+與兩個鐮刀菌酸陰離子組成，鐮刀菌酸為二齒配位。每個012+處于對 稱中心，并且均與不同的的兩個鐮刀菌酸配體中的氧和原子配位，而且每個Cu2+ 和與它配位的兩個氧原子和兩個氮原子處于同一平面，形成共面的正方形構(gòu)型。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗腫瘤化合物Cu(C1QH12N02)2，其特征是抗腫瘤化合 物Cu(C1()H12N02)2的溶劑揮發(fā)法合成包括如下步驟a. 取30mmol鐮刀菌酸提取液，充分攪拌，過濾；b. 稱量20mmolCuCl2，用5ml蒸餾水溶解，攪拌使完全溶解，過濾；c. 將上述兩種溶液混合，水浴加熱，攪拌下滴加O.lmol/L的NaOH調(diào)節(jié)混 合溶液pH值；d. 混合溶液冷卻至室溫，過濾，靜置；e. 濾液放置一星期后得到本發(fā)明化合物。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗腫瘤化合物Cu(C1QH12N02)2，其特征是抗腫瘤化合 物Cu(C1()H12N02)2的水熱合成法合成包括如下步驟a. 取30mmol鐮刀菌酸提取液，水浴加熱，攪拌下滴加O.lmol/L的NaOH調(diào)節(jié)溶液pH值；b. 稱量20mmol CuCl2，加入到上述溶液中；c. 將混合溶液加入水熱反應(yīng)釜中，125'C下封閉反應(yīng)48h;打開水熱反應(yīng)釜，將溶液過濾，得到本發(fā)明化合物。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種新的化抗腫瘤合物Cu(C₁₀H₁₂NO₂)₂，該化合物具有式I結(jié)構(gòu)，由兩分子鐮刀菌酸(Fusaric acid，F(xiàn)A，C₁₀H₁₃NO₂)和一分子Cu²⁺配位合成。通過體外抗腫瘤實驗發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明化合物對人肝癌BEL-7402細胞有較好的抑制作用。本發(fā)明合成步驟簡單，選擇性高、抗腫瘤效果好，毒副作用低，是一種較好的腫瘤抑制劑，具有極大的藥用價值。
文檔編號A61P35/00GK101417974SQ200710031060
公開日2009年4月29日 申請日期2007年10月26日 優(yōu)先權(quán)日2007年10月26日
發(fā)明者璐 何, 宋文東, 郭先霞, 顏建斌 申請人:廣東海洋大學(xué)