專利名稱：金槍魚(yú)頭免疫活性物質(zhì)及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物技術(shù)應(yīng)用及魚(yú)類資源綜合利用領(lǐng)域，特別是一種金槍魚(yú)頭 免疫活性物及其制備方法。
背景技術(shù)：
金槍魚(yú)(Tunas)，也稱鮪魚(yú)、吞拿魚(yú)，分布在太平洋、大西洋和印度洋 的廣闊水域，屬大洋性高度洄游魚(yú)類，魚(yú)體大而重，成魚(yú)可達(dá)數(shù)十到上百公斤。 大多數(shù)金槍魚(yú)棲息在100 400米深的海域，其洄游范圍限于鹽度高的外洋，較 少接觸到污染較嚴(yán)重的近海和沿岸水域，其肉質(zhì)受到近海的污染程度非常低， 因此金槍魚(yú)作為一種深海魚(yú)類，素來(lái)以營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高、純天然、無(wú)污染而享譽(yù)國(guó) 際市場(chǎng)并有"海洋黃金"之稱的金槍魚(yú)。金槍魚(yú)是世界遠(yuǎn)洋漁業(yè)的重要資源， 世界金槍魚(yú)年產(chǎn)量近年來(lái)維持在350—400萬(wàn)噸水平，產(chǎn)值達(dá)300億美元，是國(guó)際 水產(chǎn)貿(mào)易中的第三大種類。金槍魚(yú)除少部分冰鮮銷售外，大部分用于罐頭、生 魚(yú)片的加工，在加工過(guò)程中產(chǎn)生的下腳料大約占總重量的50% 70%，這些下腳 料包括魚(yú)頭、內(nèi)臟、鰓、魚(yú)皮等，下腳料中含有大量的蛋白質(zhì)，脂肪、礦物質(zhì)及多種生物活性物質(zhì)，是值得開(kāi)發(fā)利用的資源。目前，a:、缺乏有效的加工利用方法，國(guó)內(nèi)外有很多企業(yè)將金槍魚(yú)下腳料加工成飼料魚(yú)粉，還有不少企業(yè)直接 將其作為廢物處理，既浪費(fèi)資源，又造成環(huán)境污染。如何深度開(kāi)發(fā)這些下腳料 生產(chǎn)高附加值產(chǎn)品，不僅對(duì)于金槍魚(yú)的綜合利用和保護(hù)環(huán)境有重要意義，而且 可以提高金槍魚(yú)的利用率和提高企業(yè)的競(jìng)爭(zhēng)力。海洋生物中不但蛋白質(zhì)含量豐富，而且在長(zhǎng)期特異閉鎖環(huán)境中進(jìn)化的蛋白 質(zhì)組成、結(jié)構(gòu)與功能與陸地動(dòng)植物有較大差異，因此是生產(chǎn)功能性活性物質(zhì)很 好的特定的蛋白質(zhì)資源。日本、歐美等國(guó)把海洋生物中功能性活性物質(zhì)系列產(chǎn) 品的研究與開(kāi)發(fā)作為發(fā)展海洋保健食品和藥物的一個(gè)重要方向。酶水解蛋白質(zhì) 具有反應(yīng)條件溫和、水解過(guò)程易控制、安全性高等優(yōu)點(diǎn)。酶水解魚(yú)蛋白不僅含有豐富的必需氨基酸、小肽、微量元素、維生素等多種小分子營(yíng)養(yǎng)成分，具有 生物利用率高等優(yōu)點(diǎn)，而且也含有牛磺酸、生物活性肽等多種活性成分，具有 顯著的保健功效，能滿足人們對(duì)營(yíng)養(yǎng)與保健的雙重追求。它還可廣泛用作海鮮 調(diào)味料、膨化食品和方便、保健食品的基料，除滿足一般消費(fèi)者家庭需要外， 還適合生長(zhǎng)期的嬰幼兒、病后體質(zhì)虛弱者及高血壓患者作飲食佐料，其產(chǎn)品能 以粉狀、液體和糊狀等多種形態(tài)存在，便于按照不同生理狀態(tài)人群、不同作業(yè) 條件下人群的營(yíng)養(yǎng)特征和市場(chǎng)需求情況，與其它食品物料充分混合在一起，重 新加工成豐富多彩的海洋工程食品，具有很好的發(fā)展前景，市場(chǎng)潛力巨大。免疫功能是人體重要的防御功能，時(shí)刻保護(hù)了機(jī)體不受病菌的侵害，維持 著自身內(nèi)部系統(tǒng)的穩(wěn)定。環(huán)境污染的不斷加劇，現(xiàn)代疾病發(fā)病率的上升，愛(ài)滋 病的危害，使人們對(duì)免疫缺損的嚴(yán)重后果有了更深刻的認(rèn)識(shí)，因此尋找具有良好 免疫調(diào)節(jié)作用的保健食品與藥物越來(lái)越受到世界各國(guó)科學(xué)工作者的關(guān)注。在功 能食品和保健食品中，免疫強(qiáng)化食品是重要組成部分，長(zhǎng)期以來(lái)，增強(qiáng)免疫功 能食品一直受廣大消費(fèi)者歡迎，其銷量一直呈穩(wěn)定增長(zhǎng)勢(shì)頭。尋找具有良好免 疫調(diào)節(jié)作用的活性物質(zhì)，研究開(kāi)發(fā)免疫功能增強(qiáng)食品，對(duì)增強(qiáng)機(jī)體免疫機(jī)能及 有關(guān)病人的體質(zhì)恢復(fù)具有重要意義。發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種金槍魚(yú)頭免疫活性物質(zhì)及其制備方法，用兩種蛋 白酶同時(shí)水解金槍魚(yú)頭蛋白，經(jīng)離心分離、超濾得到富含肽等具有免疫活性的 蛋白水解液，水解液進(jìn)一步可加工成口服液、膠囊、片劑等，同時(shí)還可得到富 含多不飽和脂肪酸的魚(yú)油，達(dá)到變廢為寶、綜合、高效利用金槍魚(yú)頭的目的。為實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的本發(fā)明采取的技術(shù)方案是金槍魚(yú)頭免疫活性物質(zhì)的制 備方法，按以下步驟(1) 前處理金槍魚(yú)頭清洗后，經(jīng)80 90。C水煮10 15分鐘后取肉攪碎；(2) 蛋白酶水解采用中性蛋白酶與木瓜蛋白酶雙酶同時(shí)水解，肉與水按重量比為1:1.5 1 : 2,pH6.8 7. 0，溫度50 55。C,時(shí)間2.5 3小時(shí)，中性蛋白酶1400IU/g原料， 木瓜蛋白酶1100KJ/g,水解結(jié)束后升溫至85 9(TC滅酶10分鐘；(3)油水分離:水解液經(jīng)離心去渣,濾液經(jīng)離心進(jìn)行油水分離，分別得到蛋水解液及魚(yú)油；(4)分級(jí)分離用超濾膜分離蛋白水解液，得到免疫活性物質(zhì)。所述步驟(3)制得的金槍魚(yú)水解蛋白液中加入調(diào)配物，按常規(guī)制得口服液、 膠囊或片劑；所述油相為金槍魚(yú)頭魚(yú)油。一種金槍魚(yú)頭免疫活性物質(zhì)，它是對(duì)金槍魚(yú)頭進(jìn)行中性蛋白酶與木瓜蛋白 酶雙酶同時(shí)水解經(jīng)離心、超濾分離制備所得。該金槍魚(yú)頭免疫活性物質(zhì)，其分子量范圍在12000 3000道爾頓之間。本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)1、 本發(fā)明工藝科學(xué)合理，利用生物酶法水解制備免疫活性物質(zhì)，反應(yīng)過(guò)程 溫和、易于控制，安全性高；2、 本發(fā)明制備的金槍魚(yú)頭免疫活性物質(zhì)明顯促進(jìn)小鼠體液免疫、非特異性 免疫功能，提高或明顯促進(jìn)小鼠細(xì)胞免疫功能；3、 本發(fā)明制備的金槍魚(yú)頭水解蛋白是天然魚(yú)蛋白經(jīng)過(guò)生物酶降解得到的產(chǎn) 物，營(yíng)養(yǎng)豐富，易于吸收，可廣泛用作營(yíng)養(yǎng)保健食品、海鮮調(diào)味料、膨化食品 等，也可作為病人的康復(fù)食品。4、 本發(fā)明制備的魚(yú)油也可進(jìn)一步處理成為富含DHA和EPA保健魚(yú)油，可開(kāi) 發(fā)成具有預(yù)防和治療心血管疾病、健腦益智等功能性產(chǎn)品，具有廣闊的市場(chǎng)前 景。
具體實(shí)施方式
本發(fā)明結(jié)合實(shí)施工藝實(shí)例做進(jìn)一步說(shuō)明-金槍魚(yú)頭解凍清洗后，于帶夾層的貯罐中經(jīng)80-9CTC水煮10-15分鐘，使骨 肉分離。人工將肉等可食部分與骨頭分離，經(jīng)絞肉機(jī)絞碎；在帶攪拌器的反應(yīng) 釜中按照下列條件酶解溫度5(TC，肉水按重量比為l: 2， p朋.8，中性蛋白 酶1400IU/g原料，木瓜蛋白酶1100IU/g原料，同時(shí)加入2種酶，水解2.5小時(shí)， 水解結(jié)束，升溫至85-90'C滅酶10分鐘；水解液經(jīng)三足式離心機(jī)過(guò)濾后，濾液由 離心機(jī)進(jìn)行油水分離，水相即蛋白水解液經(jīng)超濾分級(jí)分離得到免疫活性物質(zhì)， 加入調(diào)配物即制得口服液、膠囊或片劑；油相即為金槍魚(yú)頭魚(yú)油。其中中性蛋 白酶為枯草芽孢桿菌中性蛋白酶。對(duì)金槍魚(yú)頭進(jìn)行中性蛋白酶與木瓜蛋白酶雙酶同時(shí)水解經(jīng)超濾分離所制備的金槍魚(yú)頭免疫活性物質(zhì)，其分子量范圍在12000 3000道爾頓之間。
權(quán)利要求
1、一種金槍魚(yú)頭免疫活性物質(zhì)的制備方法，按以下步驟(1)前處理金槍魚(yú)頭清洗后，經(jīng)80～90℃水煮10～15分鐘后取肉攪碎；(2)蛋白酶水解采用中性蛋白酶與木瓜蛋白酶雙酶同時(shí)水解，肉與水按重量比為1∶1.5～1∶2，pH6.8～7.0，溫度50～55℃，時(shí)間2.5～3小時(shí)，中性蛋白酶1400IU/g原料，木瓜蛋白酶1100IU/g，水解結(jié)束后升溫至85～90℃滅酶10分鐘；(3)油水分離水解液經(jīng)離心去渣，濾液經(jīng)離心進(jìn)行油水分離，分別得到蛋白水解液及魚(yú)油；(4)分級(jí)分離用超濾膜分離蛋白水解液，得到免疫活性物質(zhì)。
2、 據(jù)權(quán)利要求1所述金槍魚(yú)頭免疫活性物質(zhì)的制備方法，其特征在于所 述步驟(3)制得的金槍魚(yú)水解蛋白液中加入調(diào)配物，按常規(guī)制得口服液、膠囊 或片劑；所述油相為金槍魚(yú)頭魚(yú)油。
3、 一種金槍魚(yú)頭免疫活性物質(zhì)，其特征在于是對(duì)金槍魚(yú)進(jìn)行中性蛋白酶與木瓜蛋白酶雙酶同時(shí)水解經(jīng)離心、超濾制備所得。
4、 據(jù)權(quán)利要求3所述金槍魚(yú)頭免疫活性物質(zhì)，其特征在于其分子量范圍 在12000 3000道爾頓之間。
5、 據(jù)權(quán)利要求3或4所述金槍魚(yú)頭免疫活性物質(zhì)，其特征在于明顯促進(jìn) 小鼠體液免疫、非特異性免疫，提高或明顯促進(jìn)小鼠細(xì)胞免疫功能。
全文摘要
一種金槍魚(yú)頭免疫活性物質(zhì)及其制備方法，其方法步驟為前處理清洗，攪碎；蛋白酶水解采用中性蛋白酶與木瓜蛋白酶雙酶同時(shí)水解，油水分離水解液經(jīng)離心去渣，濾液進(jìn)行油水分離，分別得到蛋白水解液及魚(yú)油；分級(jí)分離用超濾膜分離蛋白水解液，得到金槍魚(yú)頭免設(shè)活性物質(zhì)。本發(fā)明用兩種蛋白酶同時(shí)水解金槍魚(yú)頭蛋白，經(jīng)離心分離得到富含肽等具有免疫活性的蛋白水解液，水解液進(jìn)一步可加工成口服液、膠囊、片劑等，同時(shí)還可得到富含多不飽和脂肪酸的魚(yú)油，達(dá)到變廢為寶、綜合、高效利用金槍魚(yú)頭的目的。該金槍魚(yú)頭免疫活性物質(zhì)明顯促進(jìn)小鼠體液免疫、非特異性免疫功能，提高或明顯促進(jìn)小鼠細(xì)胞免疫功能。
文檔編號(hào)A61K9/48GK101249103SQ200710031628
公開(kāi)日2008年8月27日 申請(qǐng)日期2007年11月19日 優(yōu)先權(quán)日2007年11月19日
發(fā)明者劉書(shū)成, 吉宏武, 靜 張, 萍 楊, 洪鵬志, 章超樺, 郝記明 申請(qǐng)人:廣東海洋大學(xué)