專利名稱：當歸和川芎混合物的提取物以及萃取方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及傳統(tǒng)中草藥領(lǐng)域，具體涉及當歸和川芎混合物的提取物以 及萃取方法。
背景技術(shù)：
當歸為傘形科植物當歸j"ge/Zca^"m;^(01iv.)Diels的干燥根。當 歸歸肝、心、脾經(jīng)，藥性甘、辛、溫，具有補血活血，調(diào)經(jīng)止痛，潤腸通 便的作用。用于血虛萎黃，眩暈心悸，月經(jīng)不調(diào)，閉經(jīng)痛經(jīng)，虛寒腹痛， 腸燥便秘，風(fēng)濕痹痛，跌打損傷，癰疽瘡瘍。主產(chǎn)于我國甘肅岷縣。此外， 四川、陜西、云南、湖北等省亦有少量栽培。當歸是傳統(tǒng)中藥，臨床應(yīng)用 廣泛，有效部位及藥理作用明確。近年來，國內(nèi)外學(xué)者采用了植物化學(xué)、 分子生物學(xué)、生物化學(xué)、藥理學(xué)等技術(shù)，開展了當歸的化學(xué)成分及藥理學(xué) 研究，取得長足進展，為當歸的應(yīng)用提供了依據(jù)。
川芎為傘形科植物"gw^cwm c/ma"x/o"gHort.的干燥根莖，具有行氣 活血、祛風(fēng)止痛的功效。為活血化瘀常用中藥。其化學(xué)成分的研究，國內(nèi) 外報道較多。川芎主要成分的藥理學(xué)研究表明阿魏酸為川芎的主要有效成 分之一。
當歸與川芎共同含有的阿魏酸所具有的藥理作用抗氧化和清除自由
基，抗血栓作用，降血脂和改善動脈粥樣硬化作用，抗菌、抗病毒作用，
調(diào)節(jié)免疫，抑制肝貯脂細胞(HSC)增殖和合成膠原作用，抗心肌缺血作用 及抗肝損傷作用。
由于當歸、川芎同屬一科，有著傘形科植物共同的植物分類學(xué)特征， 有著相似的化學(xué)成分，有著相似的功能主治，常在活血和血的處方中同時 出現(xiàn)，常作為藥對來應(yīng)用，且應(yīng)用十分廣泛，2005版藥典所載513首復(fù)方 成方制劑中有49首當歸與川芎同用的處方。
超臨界流體萃取(Supercritical Fluid Extraction, SFE)是一種利用超
臨界流體為流動相來分離物質(zhì)的技術(shù)。C02是超臨界流體技術(shù)中最常用的 溶劑。超臨界C02流體兼有氣、液兩相的雙重特點，既具有與氣體相當?shù)?高擴散系數(shù)和低粘度，又具有與液體相近的密度和對物質(zhì)良好的溶解能 力。改變溫度、壓力，就可以改變流體的極性，將不同極性的成分萃取。 另外，添加適當?shù)膴A帶劑可以大大增加超臨界流體的溶解性和選擇性。
姚蘭、王傳芬、蔣文強在齊魯藥事，2006,25(2):96-98中發(fā)表的論文"超 臨界萃取法提取川芎中阿魏酸的研究及其HPLC測定"中采用超臨界C02 萃取法，以提取液中阿魏酸含量為考察指標，對影響阿魏酸提取工藝的因 素進行了研究，優(yōu)選出川芎中阿魏酸的最佳超臨界萃取條件是萃取罐的 溫度7(TC、萃取壓力35MPa 、萃取時間2h;經(jīng)該工藝得到的阿魏酸的 含量為0.015 0.087%。這是由于阿魏酸有一定的極性，因此采用純的超 臨界C02提取，對阿魏酸的選擇性不高，所以造成提取物中阿魏酸的含量 很低。

發(fā)明內(nèi)容
為解決現(xiàn)有技術(shù)提取方法中阿魏酸的含量很低的問題，本發(fā)明對當歸 與川芎進行了合提與分提的比較研究后，采用將此藥對混合進行超臨界
C02提取，并以提取物中阿魏酸含量為考察指標，對影響阿魏酸提取工藝
的因素進行了研究，優(yōu)選出當歸和川芎混合物中阿魏酸的最佳超臨界萃取
條件，經(jīng)該工藝得到的提取物中阿魏酸的含量可達0.3 0.7%。
本發(fā)明的技術(shù)方案是
提供一種當歸和川芎混合物的提取物，其特征在于，該提取物中阿魏
酸的含量為0.3 0.7%。優(yōu)選地，該提取物中阿魏酸的含量為0.38 0.68%。
本發(fā)明還提供超臨界C02萃取當歸和川芎混合物中的提取物的方法，
所述超臨界C02的萃取條件為萃取溫度為60 80°C，萃取壓力為30 40MPa， C02流速為20 45L/h，萃取時間為1.0 2.0h，分離釜I溫度40 50°C，壓力6 10Mpa，分離釜II溫度30 50°C ，壓力5.0 6.5Mpa，其特 征在于，萃取過程中加入夾帶劑。其特征在于，萃取過程中加入夾帶劑。 所述夾帶劑為甲醇或70% 100%乙醇，用量為50 200ml/100g生藥。 優(yōu)選地，所述夾帶劑為90%乙醇，用量為150ml/100g生藥。
本發(fā)明超臨界C02萃取法的優(yōu)選條件為萃取溫度為70。C，萃取壓力
為35MPa， C(V流速為30L/h，萃取時間為1.5h，夾帶劑為90%乙醇150ml /100g生藥，分離釜I溫度45°C ，壓力8 Mpa，分離釜II溫度40°C ，壓力6Mpa。
單因素試驗考察夾帶劑對阿魏酸的影響
方法采用加入夾帶劑提取阿魏酸的方法，考察六種不同的夾帶劑對 阿魏酸的影響，其他超臨界提取條件為萃取溫度為7(TC，萃取壓力為
35MPa，CO2流速為30L/h，萃取時間為1.5h，分離釜I溫度45°C ，壓力8 Mpa， 分離釜II溫度4(TC，壓力6Mpa。 結(jié)果如下表1所示。
表l不同夾帶劑對阿魏酸的影響
夾帶劑 收率(％)
阿魏酸含: (%)
總有機酸含: (%)
無4.09%0.27%4.54%
甲醇6,75%0.34%5.55%
無水乙醇5.02%0.35%5.卯％
90%乙醇5.22%0.68%6.36%
80%乙醇5.46%0.49%4.36%
乙酸乙酯4.91%0.23%4.17%
結(jié)論90%乙醇對阿魏酸的提取效果最好，所以最好采用90%乙醇作
為提取阿魏酸的夾帶劑。
當歸與川芎中的阿魏酸雖然含量低，但藥理活性強，是當歸與川芎發(fā) 揮補血活血功效的主要有效成分。因此，阿魏酸是評價當歸與川芎超臨界 提取物的重要的評價指標。
本發(fā)明方法所得的提取物中阿魏酸的含量測定方法如下
色譜柱為DiamonsilTM (鉆石)C18， 5(xm (250mmx4.6mm)(迪馬
公司)；流動相為水-甲醇-冰醋酸(65:35:l);波長為313nm;流速為
1.0ml/min;柱溫為40.0。C。
對照品溶液的制備精密稱取阿魏酸對照品10mg，置100ml棕色量
瓶中，用甲醇溶解，超聲，定容，搖勻；精密吸取lml，置10ml棕色容量
瓶中，加甲醇溶解，定容，搖勻，即得,
供試品溶液的制備精密稱取當歸與川芎超臨界提取物100mg，以甲 醇為溶劑，配制成濃度適宜的溶液，定容，搖勻，經(jīng)0.45pm濾膜過濾， 即得供試品溶液。
含量測定方法分別取對照品溶液、供試品溶液20plHPLC進樣，按 下述公式以峰面積外標法計算超臨界提取物中阿魏酸的含量。
阿魏酸％<:標/A *A樣/C配制*100%
本發(fā)明在超臨界提取當歸與川芎的混合藥材的過程中，采用加入適當
的夾帶劑的方法，改變了超臨界C02的極性，更利于阿魏酸的提取。本發(fā)
明高選擇性提取阿魏酸成分，提高了當歸與川芎混合藥材的超臨界提取物 的質(zhì)量。


圖1為實施例1所得的超臨界提取物中阿魏酸的含量測定的高效液相
色譜圖2是阿魏酸對照品的高效液相色譜圖。
具體實施例方式
實施例h
將當歸與川芎的混合藥材(l:l)粉末(40目)200g投入超臨界萃取裝 置的1L的萃取釜中，用超臨界C02進行萃取。采用的夾帶劑為90%乙醇 300ml。萃取條件為萃取釜溫度7(TC，壓力35MPa;分離釜I溫度5(TC， 壓力8MPa;分離釜II溫度4(TC，壓力5.0MPa; (302流速為35L/h;萃取 時間為1.5h，得到超臨界提取物。經(jīng)HPLC測定，得到的提取物中阿魏酸 的含量為0.68%。
實施例2:
將當歸與川芎的混合藥材(1:2)粉末(40目)200g投入超臨界萃取裝 置的1L的萃取釜中，用超臨界C02進行萃取。采用的夾帶劑為80%乙醇 400ml。萃取條件為萃取釜溫度65。C，壓力40MPa;分離釜I溫度45。C， 壓力9MPa;分離釜II溫度3(TC，壓力6.0MPa; CO2流速為40L/h;萃取
時間為l.Oh，得到超臨界提取物。經(jīng)HPLC測定，得到的提取物中阿魏酸 的含量為0.57%。
實施例3:
將當歸與川芎的混合藥材(1:0.5)粉末(40目)200g投入超臨界萃取裝 置的1L的萃取釜中，用超臨界C02進行萃取。采用的夾帶劑為無水乙醇 100ml。萃取條件為萃取釜溫度75。C，壓力30MPa;分離釜I溫度45。C， 壓力7.0MPa;分離釜II溫度35X:，壓力5.0MPa; CO2流速為20L/h;萃取 時間為2.0h，得到超臨界提取物。經(jīng)HPLC測定，得到的提取物中阿魏酸 的含量為0.45%。
實施例4:
將當歸與川芎的混合藥材(1:5)粉末(40目)200g投入超臨界萃取裝 置的lL的萃取釜中，用超臨界CO2進行萃取。采用的夾帶劑為甲醇300ml。 萃取條件為萃取釜溫度80°C ，壓力33MPa;分離釜I溫度45°C ，壓力6MPa; 分離釜II溫度45r，壓力6.5MPa; CO2流速為30L/h;萃取時間為1.5h， 得到超臨界提取物。經(jīng)HPLC測定，得到的提取物中阿魏酸的含量為 0.38%。
實施例5:
將當歸與川芎的混合藥材(1:0.2)粉末(40目)200g投入超臨界萃取裝 置的1L的萃取釜中，用超臨界C02進行萃取。采用的夾帶劑為甲醇300ml。 萃取條件為萃取釜溫度60°C，壓力33MPa;分離釜I溫度40°C，壓力 10MPa;分離釜II溫度50。C，壓力6.0MPa; 〔02流速為45L/h;萃取時間 為1.5h，得到超臨界提取物。經(jīng)HPLC測定，得到的提取物中阿魏酸的含 量為0.42%。
實施例6
將當歸與川芎的混合藥材(1:3)粉末(40目)200g投入超臨界萃取裝 置的1L的萃取釜中，用超臨界C02進行萃取。采用的夾帶劑為無水乙醇200ml。萃取條件為萃取釜溫度7(TC，壓力40MPa;分離釜I溫度45。C， 壓力9MPa;分離釜II溫度40°C，壓力6.0MPa; (302流速為40L/h;萃取 時間為1.0h，得到超臨界提取物。經(jīng)HPLC測定，得到的提取物中阿魏酸 的含量為0.60%。
權(quán)利要求
1. 當歸和川芎混合物的提取物，其特征在于，該提取物中阿魏酸的含量為0.3～0.7％。
2. 如權(quán)利要求1所述的提取物，其特征在于，該提取物中阿魏酸的含 量為0.38 0.68%。
3. 超臨界C02萃取當歸和川芎混合物中的提取物的方法，所述超臨界 C02的萃取條件為萃取溫度為60 8(TC，萃取壓力為30 40MPa， C02 流速為20 45L/h，萃取時間為1.0 2.0h，分離釜I溫度40 5(TC ，壓力6 10 Mpa，分離釜II溫度30 5(TC，壓力5.0 6.5Mpa，其特征在于，萃取 過程中加入夾帶劑。
4. 如權(quán)利要求3所述的萃取方法，其特征在于，所述夾帶劑為甲醇或 70% 100%乙醇。
5. 如權(quán)利要求3所述的萃取方法，其特征在于，所述夾帶劑為90%乙醇。
6. 如權(quán)利要求3所述的萃取方法，其特征在于，所述夾帶劑用量為50 200ml/100g生藥。
7. 如權(quán)利要求6所述的萃取方法，其特征在于，所述夾帶劑用量為 150ml/100g生藥。
全文摘要
本發(fā)明公開一種當歸和川芎混合物的提取物，其特征在于，該提取物中阿魏酸的含量為0.3～0.7％。本發(fā)明同時公開該提取物的萃取方法，采用超臨界CO₂萃取法，條件為萃取溫度為60～80℃，萃取壓力為30～40MPa，CO₂流速為20～45L/h，萃取時間為1.0～2.0h，夾帶劑為甲醇或70％～100％乙醇，用量為50～200ml/100g生藥，分離釜I溫度40～50壓力6～10MPa，分離釜II溫度30～50℃，壓力5.0～6.5MPa。
文檔編號A61K36/185GK101380343SQ20071004568
公開日2009年3月11日 申請日期2007年9月6日 優(yōu)先權(quán)日2007年9月6日
發(fā)明者楊義芳, 玫 許 申請人:上海醫(yī)藥工業(yè)研究院