專利名稱：：N-(2，3，4，5，6-五羥基己基)-l-氨基酸合鉑、其制備方法及應用的制作方法
技術領域：
：本發(fā)明涉及一類低腎毒性合鉑類化合物，尤其涉及N-(2,3，4，5,6-五羥基己基)-L-氨基酸合鉑；本發(fā)明還涉及N-(2，3，4，5,6-五羥基己基)-L-氨基酸合鉑的制備方法及其在抗腫瘤中的應用，屬于生物醫(yī)藥領域。
背景技術：
：腫瘤是多發(fā)病。我國城市腫瘤的死亡率大約為130/10萬,居疾病死因第一位。我國農(nóng)村腫瘤的死亡率大約為105/10萬，居疾病死因第二位。1980年代以來,整體人口老齡化、農(nóng)村人口城市化、環(huán)境污染嚴重化以及吸煙普遍化，腫瘤危害日益加深。發(fā)展腫瘤臨床化療藥物一直是藥物研究的熱點。我國最常見和最危害的腫瘤是肺癌、鼻咽癌、食管癌、胃癌、大腸癌、肝癌、乳腺癌、宮頸癌、白血病及淋巴瘤。順鉑在臨床的適應癥是黑色素瘤、甲狀腺癌、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、睪丸癌、卵巢癌、食道癌、子宮頸癌、子宮內膜癌、膀胱癌、乳腺癌、淋巴瘤、頭頸部癌和白血病。我國最常見和最危害的腫瘤發(fā)病譜與順鉑的抗癌譜基本重疊。此外，順鉑與甲氨喋呤和環(huán)磷酰胺等抗腫瘤藥物既有協(xié)同作用又不交叉耐藥。順鉑自身還有免疫抑制作用。這些優(yōu)點使順鉑成為我國臨床應用最廣的抗癌藥。與其它抗腫瘤藥物一樣，順鉑也有明確毒性。順鉑對腎臟、胃腸道、骨髓、神經(jīng)和耳均有毒性作用，其中以腎臟毒性最甚。初療程，患者腎損傷發(fā)生率為33%。多療程，患者腎損傷發(fā)生率為75%(LippmanAJ，HelsonC,andHelsonL，etal,Clinicaltrailsofcisodiamminedichloroplatinum,CancerChemotherRep,1973,57,191-200;StarkJJ,andHowellSB,Nepherotoxicityofcisplatumn(II)dichlodoiamine,clinpharmacolTher，1978,23,461-465)。順鉑在臨床的常用劑量一般是一個療程50—100mg/m2bsa.，為了減輕副作用，兼用水化和甘露醇利尿措施。即使如此，仍有大約20%患者會產(chǎn)生腎功能損害。嚴重的腎臟毒性限制了順鉑的臨床應用(PowisQandHackerMP,TheToxicityofanticancerdrugs,[B]BergmanPress,NewYork,1990，82-105;UedaH,SugijamaK，andYokotaM，etal，Reductionofcisplatinotoxicityandlethalityandlethalitybysodiummalateinmice,BiolPhammBull,1998,21,34-43)。針對順鉑的腎臟毒性，發(fā)明了卡鉑(l，l-環(huán)丁垸二羧酸根二氨絡鉑)?？ㄣK的適應癥是非小細胞肺癌、小細胞肺癌、卵巢癌、食道癌、子宮頸癌、子宮內膜癌、膀胱癌和頭頸部癌，抗癌譜比順鉑窄(Dimopoulos，M.A;Papadopoulou，M.;Andreopoulou,E;et.al.Favorableoutcomeofovariangermcellmalignanciestreatedwithcisplatinorcarboplatin-basedchemotherapy:aHellenicCooperativeOncologyGroupstudy.GynecolOncol.1998，70,70-4;Montagut，C;Marmol，M;Rey，V;et.al.Activityofchemotherapywithcarboplatinpluspaclitaxelinarecurrentmesonephricadenocarcinomaoftheuterinecorpus.GynecolOncol.2003，90,458-61;Go,R.S;Adjei，A.A，Reviewofthecomparativepharmacologyandclinicalactivityofcisplatinandcarboplatin.JClinOncol.1999,17,409-22)。卡鉑也有明顯腎臟毒性(Agraharkar,M;Nerenstone,S;Palmisano,J;et.al.Carboplatin-relatedhematuriaandacuterenalfailure.AmJKidneyDis.1998，32，E5)。在尋找低毒絡鉑類抗癌藥的過程中，含手性配體的絡鉑類化合物奧沙利鉑(草酸根-(lR,2R-環(huán)己二胺)絡鉑)1996年在法國上市(Graham,M.A.;Lockwood,GF,;Greenslade，D.;et.al.Clinicalpharmacokineticsofoxaliplatin:acriticalreview.Clin.Cancer.Res.2000，6，1205-18)。奧沙利鉑的適應癥是非小細胞肺癌、卵巢癌、乳腺癌和大腸癌，抗癌譜更窄(Cassidy，J.Reviewofoxaliplatin:anactiveplatinumagentincolorectalcancer.IntJClinPract2000,54，399-402;Mani,S.;Manalo，J.;Bregman，D.Novelcombinationswithoxaliplatin.Oncology(Huntingt).2000，14(12Suppl11)，52-8)。奧沙利鉑仍然有明顯腎臟毒性。于是，尋找低腎毒性絡鉑類抗癌藥仍然具有重要臨床價值。
發(fā)明內容本發(fā)明首先所要解決的技術問題是克服現(xiàn)有技術的不足，提供一種低腎毒性絡鉑類抗腫瘤化合物。本發(fā)明首先所要解決的技術問題是通過以下技術方案來實現(xiàn)的一種低腎毒性絡鉑類抗腫瘤化合物(N-(2，3，4，5,6-五羥基己基)-L-氨基酸合鈾),是通式(I)所示的結構其中，R選自氫、CH3、CH(CH3)2、CH2CH(CH3)2、CH(CH3)CH2CH3、CH2C6H5、CH2C6H4-OH-p、CH2OH、CH(OH)CH3、CH2C02H、CH2CH2C02H、剛哚-5-基-CH2、CH2CH2SH、CH2CH2SCH3、CH2CH2CH2NHC(NH)NH2、CH2CONH2、CH2CH2CONH2、咪唑-4-基-012、CH2CH2CH2CH2NH2、環(huán)丁氨-2-基或4-羥基環(huán)丁氨-2-基。本發(fā)明主要依據(jù)以下認識完成了本發(fā)明圖l描述的從順鉑經(jīng)卡鉑到奧沙利鈾的結構演變；圖2描述的N-葡萄糖基氨基酸解除重金屬腎毒性的優(yōu)秀性能(ChaoWang，MingZhao，JianYang,XingweiLi，ShiqiPeng*,Synthesisiandevaluationofpentahydroxylhexyl-L-cysteineanditsdimmeraschelatingagentsforcadmiumorleaddecorporation,ToxicologyandAppliedPharmacology,2004，200，229-236);圖3描述的本發(fā)明人提出的可能的低腎毒合鉑類抗癌結構。本發(fā)明所要解決的另一個技術問題是提供一種制備上述低腎毒性合鉑類抗腫瘤化合物的方法。本發(fā)明所要解決的另一個技術問題是通過以下技術方案來實現(xiàn)的一種制備上述低腎毒性合鉑類抗腫瘤化合物(N-(2，3,4，5，6-五羥基己基)-L-氨基酸合鉑)的方法，包括(1)使D-葡萄糖和L-葡萄糖基氨基酸在NaOH存在下縮合，制備Schiff，s堿(la-u);(2)在NaBH4存在下將Schiff's堿(la-u)還原，得到N-葡萄糖基氨基酸鈉鹽(2a-ii);(3)將N-葡萄糖基氨基酸鈉鹽(2a-u)酸化，得到N-葡萄糖基氨基酸(2，a-u);(4)N-葡萄糖基氨基酸(2'a-u)與K2[PtCl4]配位，得到N-葡萄糖基氨基酸合通式(I)鈾(3a-u)。體外和體內試驗表明，本發(fā)明化合物(3a-u)具有確切的抗腫瘤活性。與順鉑相比，本發(fā)明化合物治療腫瘤時在腫瘤組織中可以達到與順鉬同樣水平的分布，但在腎臟等重要器官中的分布遠低于順鉑在腎臟中的分布，在尿和糞中保持了比順鉑治療高得多的珀水平，促使鉑經(jīng)尿從體內排出，因而不顯示腎毒性?？傮w看，本發(fā)明化合物基本不顯示明顯毒性，可以安全有效的用于腫瘤治療。圖1從順鉑經(jīng)卡鉑到奧沙利鉑的結構演變。圖2可解除重金屬腎毒性的葡萄糖基氨基酸。圖3可能的低腎毒絡鉑類抗癌結構。圖4N-(2，3，4，5，6-五羥基己基)-L-氨基酸合鉑的合成路線圖。在所有的a-u中，R=4UCH3、CH(CH3)2、CH2CH(CH3)2、CH(CH3)CH2CH3、CH2C6H5、CH2C6H4-OH-p、CH2OH、CH(OH)CH3、CH2C02H、CH2CH2C02H、噴哚-5-基-CH2、CH2CH2SH、CH2CH2SCH3、CH2CH2CH2NHC(NH)NH2、CH2CONH2、CH2CH2CONH2、咪唑-4-基-CH2、CH2CH2CH2CH2NH2、環(huán)丁氨-2-基、4-羥基環(huán)丁氨-2-基。為了進一步闡述本發(fā)明，下面給出一系列實施例。這些實施例完全是例證性的，它們僅用來對本發(fā)明進行具體描述，不應當理解為對本發(fā)明的限制。具體實施方式實施例l制備N-(2，3,4,5,6-五羥基己基)-L-天冬氨酸(2，a)將氫氧化鈉固體0.40g(lOmmol)溶于3ml水中，室溫攪拌，待溶液恢復至室溫后，加入天冬氨酸1.33g(lOmmol)，溶解之后，加入D-葡萄糖1.80g(lOmmol)，室溫攪拌，溶液透明澄清之后，向反應體系通入氬氣,在5(TC-6(rC反應5h,溶液顏色變成棕黃色，停止加熱。待溫度恢復至室溫后，將反應物轉移至廣口瓶中，分批加入硼氫化鉀1.62g(30mmol)，反應120h，得到黃色粘稠液體。將反應體系置于冰浴下，滴加濃鹽酸，調節(jié)溶液pH2-2.5，有白色固體析出。抽濾除去白色固體，濾液減壓濃縮除去部分水后，再加入無水乙醇，靜置后抽濾除去析出的白色固體，濾液減壓濃縮。反復重復上述操作，盡量除去析出的白色固體。將此濾液直接上強酸性陽離子交換樹脂柱，先用蒸餾水洗脫，除去未反應的糖組分，再用3X-5X的N-甲基嗎啉水溶液洗脫，收集產(chǎn)物組分，除去產(chǎn)物組分中的水，殘留物重結晶(水-乙醇)，得到白色固體257mg(9%)。Mp:171.3-172.6。C;025°:-9.71°(C，2.06，H2O)。Rf=0.06(氯仿甲醇水=1:1:0.2)。IR(cm"):3569.01，3366,11，3233.11，2894.35，2367.61，1730.45，1617.20，1559.58，1397.39，1175.88，1087.37，826.83，676.25,610.82.!HNMR(500MHZ,D20):3.37(dd，J=3.5Hz，J=13Hz，1H，H!a)，3.28(dd，J=9Hz，J=13Hz,1H，H,b),4.15(m,H2),3.86(dd,J=3Hz，J=5Hz，H3)，3.81(dd,J=3Hz，J=12Hz,1H,H4),3.75(m，1H，H5)，3.65(m,2H，H6),4.03(dd，J=5Hz,J=7Hz，1H，H2')，3.08(dd，J=5Hz，J=18Hz，1H，H3a，)，3.01(dd，J=7Hz,J=18Hz，1H，H3b，)FAB-MS(m/e)298[M+H]..元素分析，計算值(C10H19NO9):C44.40，H6.44，N4.71;實測值C44.58,H6.30，N4.86.實施例2制備N-(2，3,4，5，6-五羥基己基)-L-谷氨酸(2，b)L-天冬氨酸L-谷氨酸按照實施例1的方法從1.47g(10mmol)谷氨酸得到655mg(21%)標題化合物，為無色粉末。Mpl51-153。C，[a]D25=-45.0(C=2.0，H20),IR(KBr)3407,3352，3094,2967，2916,1617,1400，1354,1080,1041,741,675，534.ESI-MS(m/e)312[M+H]+,'H醒R(D20)S=4.12(m，J=4.4Hz1H)，3.82(dd，J=3.3Hz,J=5.0Hz，1H)，3.77(dd，J=3.5Hz，J=12.0Hz,1H),3.72(m，J=3.4Hz1H),3.63(m,J=4.0Hz2H)，3.55(t，J=4,5HzIH)，3.24(dd，J=3.4Hz，J=12.7Hz，IH)，3.11(dd，J=8,7Hz，J=12.8Hz，1H),2.26(d,J=5.0Hz，2H)，2.00(m,J=4.8Hz，2H)。元素分析，計算值(CnH21N09):C42.44，H6.80,N4.50;實測值C42.60，H6.95,N4.38.實施例3.制備N-(2，3,4，5，6-五羥基己基)-L-蘇氨酸(2，c)按照實施例1的方法從3.57g(30mmol)蘇氨酸得到2.07g(24.4。/。)標題化合物，為無色固體。R產(chǎn)0.15(氯仿甲醇水=1:1:0.2)。Mp:195.4-196.6。C;[a]D25°:-28.57°(C，2.10，H2O)oIR(cm勺3421.32，2975.37,2938.80，1612.18，1571.34，1415.43，1385.47，1083.60，1044.63，840.85，757.81，731.36HNMR(500MHZ，D20):3.30(dd，J=3Hz，J=13Hz，1H，H!a)，3.20(dd，J=10Hz，J=13Hz，1H,H,b),4.15(m，1H，H2),3.82(m，1H，H3),3.80(m，1H，H4)，3.75(m，1H，H5),3.64(m，2H,H6)，3.51(d，1H,H2，)，4.09(m，1H,H3')，1.34(d，J=3Hz，IH,H4');FAB-MS(m/e)284[M+1]—.元素分析，計算值(C10H21NO8):C42.40，H7.47，N4.94;實測值C42.57，H7.64，N4.77.實施例4.制備N-(2，3，4，5，6-五羥基己基)-L-酪氨酸(2，d)按照實施例1的方法從1.81g(10mmol)L-酪氨酸得到725mg(21%)標題化合物，為無色粉末。Mp239-240°C，[a]D25=-50.0(C=2.0,H20)，IR(KBr)3307，3353，3085,2968，2916，1605,1560，1458，1400，1354，1080,1041,742,675,534.'HNMR(D20)5=7.02(d，J=7.0Hz,2H),6.78(d，J=7.1Hz，2H)，4.10(m，J=4.7Hz，IH)，3.90(t，J=5.4Hz,IH),3.80(m，J=4.7Hz，IH)，3.78(mJ=3.5Hz,IH)，3.73(m，J=3.5Hz,IH)，3.63(m,J=4.0Hz，2H),3.23(dd，J=3.1Hz，J=13.0Hz，IH)，3.14(dd，J=3.1Hz，J=13.0Hz，IH),3.00(d,J=4.5Hz，2H)。ESI-MS(m/e)346[M+H]+.元素分析，計算值(C15H23N08):C52.17，H6.71,N4.06;實測值C52.33,H6.90,N3.95。實施例5.制備N-(2，3，4，5，6-五羥基己基)-L-絲氨酸(2，e)按照實施例1的方法從3.15g(30mmol)絲氨酸得到1.18g(14.7。/。)標題化合物，為無色固體。Rf-0.22(氯仿甲醇水=1:1:0.2)。Mp:195.4-197.5°C;[a]D25°:-11.94°(C，2.01,H2O)。IR(cm"):3221.93，2941.06，2900.56，1620.90,1564.84，1424.11，1336.53，1093.19，1040.23，705.85;'HNMR(500MHZ,D20):3.36(dd,J=3Hz,J=13Hz，lH，H,a)，3.25(dd，J=10Hz，J=13Hz，1H,H,b)，4.16(m,IH,H2),3.83(dd,J=lHz,J=3Hz，IH,H3),3.80(d,J=3Hz，IH,H4),3.76(m,1H，H5)，3.66(m,2H，H6)，3.85(t,J=2.5Hz，1H，H2，)，楊(dd,J=3.5Hz，J=12.5Hz，IH,H3，)，3.99(dd,J=5Hz，J=12.5Hz，lH，H4，).FAB-MS(m/e)270[M+1]-.元素分析，計算值(C9H19N08):C40.15,H7.11，N5.20;實測值C40.01，H6.98,N5.37.實施例6.制備N-(2，3，4,5,6-五羥基己基)-L-天冬酰胺(2，f)按照實施例1的方法從1.56g(10mmol)L-天冬酰胺得到681mg(23%)標題化合物，為無色粉末。Mp240-241°C,[a]D25=-20.0(C=2.0，H20),IR(KBr)3407，3353，3095,2968,2916，1687,1400，1354,1080,1041,742，675，534.'HNMR(D20)S=4.14(m，J=4.3HzIH),3.83(dd,J=5.1Hz，J=7.2Hz,IH),3.81(dd，J=3.2Hz，J=5.2Hz，IH)，3.79(dd，J=3.3Hz,J=11.7Hz，IH)，3.75(t,J=5.2HzIH)，3.72(m,J=3.5HzIH),3.67(m，J=4.0Hz2H)，3.27(dd,J=3.4Hz，J=12.6Hz，IH)，3.14(dd，J=9.1Hz，J=12.7Hz,IH)，2,58(d，J=5.2Hz,2H).ESI-MS(m/e)297[M+H〗+.元素分析，計算值(C10H2()N2O8):C40.54，H6.80，N9.46;實測值C40.68，H6.95，N9.33。實施例7.制備N-(2，3，4，5，6-五羥基己基)-L-谷氨酰胺(2，g)按照實施例1的方法從1.46g(10mmol)L-谷氨酰胺得到558mg(18%)標題化合物，為無色粉末。Mp251-253。C,[a]D25=-23.0(C=2.0，H20)，IR(KBr)3402，3350，3088，2968,2917，1685，1405，1352，1084，1040，743，698.'HNMR(D20)5=4.10(m,J=4.4Hz,IH)，3.80(dd，J=5.0Hz，J=7.0Hz，IH),3.78(dd，J=3.3Hz，J=5.0Hz，IH)，3.74(dd,J=3.4Hz，J=11.5Hz，IH)，3.71(m，J=3.6HzIH),3.61(m，J=4.1Hz2H)，3.52(t,J-5.1Hz，1H)，3.26(dd，J=3.5Hz,J=12.3Hz,IH),3.12(dd，J=9.0Hz，J=12.5Hz，IH),2.24(t，J=5.0Hz，2H)，2,02(m,J=5.3Hz，IH)，2.00(m，J=5.0Hz，IH).ESI-MS(m/e)311[M+H]+.元素分析，計算值(CnHnNA):C42.58，H7.15,N9.03;實測值C40.68，H6.95，N9.33。實施例8.制備N-(2,3，4,5,6-五羥基己基)-L-甘氨酸(2，h)按照實施例1的方法從2.25g(30mmol)甘氨酸得到U48g(16。/。)標題化合物，為無色固體。R產(chǎn)0.2(氯仿甲醇水=1:1:0.2)。Mp:181.9-182.4°C;[a]D25V17.22°(C，2.09,H2O)。IR(cm勺3531.62,3241.56，2962.72，2897.23，2365.02，1627.40，1560.93，1402.14，1377.90，1060.91，1036.80，848.01，690.87，578.62;'HNMR(500MHZ,D20):3.29(dd,J=3.5Hz,J=13Hz，1H，H,a)，3.21(dd，J=9.5Hz,J=13Hz，1H，H,b),4.13(m,1H，H2)，3.83(m,1H，H3),3.81(m,1H，H4)，3.76(m，1H,H5)，3.66(m，1H，2H，H6);FAB-MS(m/e)240[M+ir.元素分析，計算值(C8H17N07):C40.17，H7.16,N5.86;實測值C40.00,H6.99，N5.71.實施例9.制備N-(2，3，4，5,6-五羥基己基)-L-半胱氨酸(2，i)按照實施例1的方法從4.72g(30mmol)半胱氨酸得到865mg(10.2e/。)標題化合物，為無色固體。R產(chǎn)0.23(氯仿甲醇水=1:1:0.2)。Mp:171-172.l'C;[a]D25°:-8.74°(C，2.06,H2O)。IR(cm"):3274.87，2974.89，2935.68，1606.84，1567.15，1417.26，1391.26，1082.30，1035.79，695.19,631.88;"HNMR(500MHZ，D20):3.35(dd，J=3Hz,J=13Hz，1H，H,a)，3.24(dd，J=9.5Hz，J:13Hz，1H，H'b),4.16(m，1H，H2),3.86(dd，J=3Hz，J=4.5Hz,1H，H3)，3.81(dd，J=3Hz,J=12Hz，1H，H4)，3.76(m，lH，H5)，3.65(m，2H，H6),3.97(t，J=5Hz，lH，H2，)，3.15(dd，J=18Hz,J=5Hz，1H，H3，a)，3.08(dd，J=18Hz，J=5Hz，1H，H3，b);FAB-MS(m/e)285[M+H]-.元素分析，計算值(C9H19N07S):C37.89，H6.71,N4.91;實測值C38.04,H6.55，N4.76.實施例10.制備N-(2，3，4，5，6-五羥基己基)-L-甲硫氨酸(2，j)按照實施例1的方法從4.47gGOmmol)甲硫氨酸得到1.992g(21.1%)標題化合物，為無色固體。R產(chǎn)0.43(氯仿甲醇水=1:l:0.2)。Mp:197.5-198.9。C;[a]D25°:-8.49°(C，2.12，H20)。IR(cm-1):3464.30，3431.33，3291.33，3116.84,2929.67，2340.33，1601.42，1553.70，1433.36，1397.98，1089.19，849.19，691.75;'H窗R(500MHZ,D20):3.28(dd，J=3Hz，J=13Hz,1H，Hia),3.19(dd，J=10Hz,J=13Hz,1H，H山),4.12(m,1H，H2)，3.83(m，2H，H3&H4)，3.76(m,1H，H5),3.65(d，J=6Hz，1H,H6a)，3.63(dd，片1.5Hz，J=4Hz，1H，H6b)，3.81(t，J=3Hz,1H，H2，)，2.65(m,2H，H3,)，2.19(q,J=7Hz,2H，H4，)，2.13(s，3H,H5，)；FAB-MS(m/e)314[M+H]—.元素分析，計算值(C1()H21N07S):C40.12，H7.07，N4.68;實測值C40.00，H6.93，N4.83.實施例11.制備N-(2，3,4，5，6-五羥基己基)-L-丙氨酸(2，k)按照實施例1的方法從0.89g(lOmmol)丙氨酸得到765mg(30。/。)標題化合物，為無色固體。R產(chǎn)0.2(氯仿甲醇水二l:1:0.2)。Mp:201.5-202.1°C;[a〗D25°:-14.00°(C，2.00，H2O)。IR(cm1):3419.57，3273.45，2973.11，2905.13，1621.50，1586.88，1423.75,1399.86，1082.98，1037.97，704.19,667.77;'HNMR(D20)5=4.14(m，J=4.3Hz，IH)，3.84(m，J=5.1Hz，IH)，3.81(m，J二5.0Hz,IH)，3.79(m，J=3.4Hz,1H),3.70(d，J=5.0Hz，2H),3.68(m,J=5.6Hz，IH)，3.30(dd,J=3.4Hz，J=12.7Hz，IH)，3.22(dd,J=9.2Hz,J二12.4Hz,IH)，1.26(d，J=5.6Hz，3H).ESI-MS:254[M+H〗-.元素分析，計算值(C9H19N07):C42.68，H7.56，N5.53;實測值C42.86,H7.72,N5.70.實施例12.制備N-(2,3，4,5，6-五羥基己基)-L-苯丙氨酸(2，1)按照實施例1的方法從1.65g(10mmol)L-苯丙氨酸得到607mg(24%)標題化合物，為無色粉末。Mp205-207°C，[a]D25=-60.0(C=2.0，H20)，IR(KBr)3423，3271，2975，2902，1621,1586，1426,1402，1086，1035，706，665.'HNMR(D20)S=7.22(t，J=7.6Hz,2H)，7.14(d，J=7.4Hz,2H)，7.10(t，J=7.5Hz，IH)，4.16(m,J=4.5Hz,IH)，4.07(m，J=5.3Hz，1H),3.84(m,J=5.2Hz，IH)，3.81(m，J=3.6Hz，1H),3.76(d,J=4.8Hz,IH)，3.66(m,J=5.4Hz，2H)，3.28(dd，J=3.5Hz，J=12.4Hz,IH)，3.16(dd，J=9.0Hz,J=12.1Hz，IH)，2.93(d,J=5.3Hz，2H)。ESI-MS(m/e)330[M+H廣元素分析，計算值(C15H23N07):C54.70，H7.04,N4.25;實測值C54.88,H7.19，N4.09。實施例13.制備N-(2,3,4，5,6-五羥基己基)-L-纈氨酸(2，m)按照實施例1的方法從3.51g(3Omrno1)纈氨酸得到331mg(4。/。)標題化合物，為無色固體。RfN).51(氯仿甲醇水=1:1:0.2)。Mp:216-217。C;[a]D25V3.96°(C，2.02,H2O)。IR(cm"):3338.55,3186.43，2971.56，2939.73，2362.06，1603.39,1551.31，1420.64,1317.92，1080.40，1034.74,825.20，694.80,617.32;^NMR(500MHZ,D20):3.27(dd,J=3Hz，J=13Hz,1H，H,a)，3.17(dd，J=10Hz,J=13Hz,1H,H巾)，4.13(m,1H，H2),3.83(m，1H,H3)，3.82(m,H4),3.74(m,H5)，3.64(m,2H，H6)，3.58(dd,J=4.5Hz,J=16Hz，1H，H2，)，2.26(m，1H，H3，)，1.05(dd，J=7Hz,J=16Hz,6H，H4，)；FAB-MS(m/e)282[M+町.元素分析，計算值(CnH23N07):C46.97，H8.24，N4.98;實測值C46.97,H8.24，N4.98.實施例14.制備N-(2，3，4，5，6-五羥基己基)-L-亮氨酸(2，n)按照實施例1的方法從3.93g(30mmol)亮氨酸得到420mg(5。/。)標題化合物，為無色固體。R產(chǎn)0.62(氯仿甲醇水=1:1:0.2)。Mp:207-208.3。C;[a]D25°:-6.80°(C，2.06，H2O)。IR(cm-1):3364.86，3096.59，2962.29,2923.81,1615.50，1431.86，1373.94，1294.41，1082.86,1043.85,761.35,676.95;'HNMR(500MHZ,D20):3.26(dd，J=3Hz，J=13Hz,1H，H!a)，3.14(dd,J=10Hz,J=13Hz，1H,H,b),4.01(m，1H，H2),3.81(m,1H，H3)，3.80(m，1H，H4)，3.75(m，lH，H5)，3.63(m，2H，H6)，3.68(t，J=6Hz，1H，H2，)，1.72(m，1H，H4，)，1.70(m，2H，H3，),0.95(dd,J=3Hz，J=6Hz,6H,H5，);FAB-MS(m/e)295[M+H]-.元素分析，計算值(C12H25N07):C48.80，H8.53,N4.74;實測值C48.73,H8.39，N4.92.實施例15.制備N-(2，3,4,5,6-五羥基己基)-L-異亮氨酸(2，0)按照實施例1的方法從1.31g(10mmol)L-異亮氨酸得到1239mg(42%)標題化合物，為無色粉末。Mp228-230°C,[a]D25=-12.8(C=2.0,H20)，IR(KBr)3365,3097,2962,2924，1616，1432,1374,1294，1083,1044，761，677.'HNMR(D20)5=4.04(m,J=4.5Hz，IH)，3.83(m,J=4.8Hz,1H),3.80(m,J=3.7Hz,IH)，3.77(m,J=5.1Hz,IH)，3.71(t,J=5.8Hz，IH)，3.65(m，J=5.3Hz，2H),3.55(d，J=4.2Hz，1H)，3.26(dd，J=3.2Hz,J=13.1Hz,1H),3.20(dd，J=9.8Hz,J=12.6Hz,1H)，2.35(m，J=4.2Hz，1H),1.33(m，J=3.7Hz,2H)，1.10(dJ=36Hz，3H),0.92(dd，J=3.2Hz,J=6.3Hz,3H)。ESI-MS(m/e)296[M+H]+.元素分析，計算值(C12H25N07):C48.80，H8.53，N4.74;實測值C48.95，H8.76，N4.56。實施例16.制備N-(2，3,4，5，6-五羥基己基)-L-色氨酸(2，p)按照實施例1的方法從6.12g(30rnrno1)色氨酸得到1.335g(12.iy。)標題化合物，為無色固體。R產(chǎn)0.2(氯仿甲醇水=1:1:0.2)。mp:205.5-207.0'C;[a]D25°:+13.00°(C，2.00，DMSO)。IR(cm"):3407.12，3352.67，3094.81，2967.74，2916.26，1617.46，1399.95，1354.16，1080.33，1041.45，741.58，675.00，534.21;'HNMR(D20)5=7.22(d,J=7.5Hz,1H)，7.20(d,J=7.5Hz,1H)，7.16(t,J=7.8Hz,1H)，7.14(t,J=7.7Hz,1H)，6.92(s，1H),4.16(m，J=4.9Hz，1H)，3.90(t，J=5.0Hz，1H),3.85(m,J=5.2Hz，1H)，3.83(m，J=5.3Hz，1H),3.77(m，J=3.9Hz，1H),3.71(d,J=5.3Hz，2H)，3.27(dd，J=3.6Hz，J=12.9Hz，1H)，3.20(dd,J=9.3Hz，J=12.9Hz，1H)，2.93(d，J=4.9Hz，2H).元素分析，計算值(C17H24N207):C55.43，H6.57,N7.60;實測值C55.25,H6.39，N7.76.FAB-MS(m/e)369[M+H]-。實施例17.制備N-(2,3,4，5，6-五羥基己基)-L-組氨酸(2，q)按照實施例1的方法從1.55g(10mmol)L-組氨酸得到893mg(28%)標題化合物，為無色粉末。Mp232-235°C，[a]D25=-130.0(C=2.0，H20)，IR(KBr)3443,3337，3125，2910，1618，1448，1398,1112，1057，1016,957，620.'H廳R(D20)S=7.46(s，IH)，6.81(s,IH)，4.11(m,J=4.7Hz，IH)，3.91(t，J=5.3Hz，IH)，3.84(m，J=5.1Hz，IH)，3.82(m，J=5.3Hz,IH),3.78(m，J=4.2Hz，IH)，3.66(m，J=5.1Hz，2H)，3.26(dd,J=3.5Hz,J=12.7Hz，IH),3.17(dd，J=9.1Hz,J=12.4Hz，IH),2.88(d,J=5.3Hz，2H).ESI-MS(m/e)320[M+H]+.元素分析，計算值(C12H21N307):C45.14，H6.63,N13.16;實測值C42.46,H7.51，N16.73。實施例18.制備N-(2，3,4，5，6-五羥基己基)-L-賴氨酸(2，r)按照實施例1的方法從1.46g(10mmol)L-賴氨酸得到837mg(27%)標題化合物，為無色粉末。Mp147-148°C，[a]D25=-40.0(02.0，H20),IR(KBr)3567，3370，3231，2921，2884，1728,1610，1558，1455，1175，1057，1023，829792，614.)HNMR(D20)5=4.07(m,J=4.6Hz，1H),3.80(m，J=5.2Hz,IH)，3.78(m，J-5.2Hz,IH)，3.74(m，J=3.8Hz,1H),3.67(m，J=5.0Hz,2H)，3.60(d，J=4.5Hz，IH)，3.27(dd，J=3.6Hz，J=12.6Hz，1H),3.15(dd，J=9.2Hz，J=12.4Hz,IH)，2.70(t,J=4.9Hz，2H),1.68(m,J=4.4Hz,2H)，1.57(m，J=4.9Hz，2H)，1.32(m，J=4.7Hz，2H)。ESI-MS(m/e)311[M+H]+.元素分析，計算值(C12H26N207):C46.44，H8.44,N9.03;實測值C46.27，H8.29，N8.89。實施例19.制備N-(2，3,4，5，6-五羥基己基)-L-精氨酸(2，s)按照實施例1的方法從1.74g(10mmol)L-精氨酸得到946mg(28%)標題化合物，為無色粉末。Mp186-187°C，[a]D25=-65.0(C=2.0，H20),IR(KBr)3437，3150，2925，2882，1642，1510,1396，1078,1026，905.^畫，20)5=4.08(m,J=4.9Hz,IH)，3.82(m,J=5.0Hz,IH)，3.79(m，J=5.1Hz，1H),3.76(m,J=3.9Hz，IH)，3.65(m，J=5.2Hz，2H)，3.60(t,J=4.7Hz，IH)，3.29(dd，J=3.3Hz，J=12.5Hz，IH)，3.18(dd，J=9.0Hz，J=12.6Hz，IH)，2.68(t，J=4.7Hz，2H)，1.66(m，J=4.6Hz,2H),1.56(m,J=4.8Hz，2H)。ESI-MS(m/e)339[M+H]+.元素分析，計算值((121126]\[407):C42.60，H7.75，N16.56;實測值C42.46，H7.51,N16.73。實施例20.制備N-(2，3,4,5，6-五羥基己基)-L-脯氨酸(2，t)按照實施例1的方法從1.15g(10mmol)L-脯氨酸得到586mg(21%)標題化合物，為無色粉末。Mp138-141°C，[a]D25=-70.0(C=2.0，H20)，IR(KBr)3374,2927，2872，1719,1634,1458,1404，1328,1226，1084,932，880.!HNMR(D20)S=4.00(m，J=4.7Hz,1H)，3,77(m，J=5.2Hz，IH)，3.75(m，J=5.0Hz，IH)，3.73(m，J=3.9Hz，1H),3.63(m,J=5.2Hz,2H),3.22(dd,J=3.4Hz:J=12.3Hz,1H),3.14(t，J=4.9Hz，IH)，3.10(dd，J=9.1Hz,J=12.4Hz,IH)，2.32(t，J=4.9Hz，2H),1.82(m,J=5.0Hz，2H)，1.60(m，J=4.9Hz,2H).ESI-MS(m/e)280[M+H〗+.元素分析，計算值(CnH21N07):C47.31,H7.58,N5.02;實測值C47.49,H7.74,N4.84。實施例21.制備N-(2，3,4，5，6-五羥基己基)-L-羥脯氨酸(2，u)按照實施例1的方法從1.31g(10mmol)L-羥脯氨酸得到652mg(22%)標題化合物，為無色粉末。ESI-MS(m/e)296.5[M+H]+;元素分析，計算值(CuH21N08):C44.74,H7.17，N4.74;實測值C44.61，H7.08,N4.89。實施例22.制備N-(2,3，4,5，6-五羥基己基)-L-天冬氨酸合鉑(3a)往10ml水的溶液中加入297mg(lmmo1)N-(2，3,4,5，6-五羥基己基)-L-天冬氨酸和415mg(lmmol)K2[PtCl4]?；旌衔锸覝財嚢柚寥芤撼吻?，然后在90-100°C攪拌回流30分鐘。室溫過濾除去沉淀。減壓除去部分水，加入乙醇重結晶，析出白色晶體，得標題化合物502mg(83.8%)。ESI-MS(m/e)602[M+H]+o實施例23.制備N-(2,3，4,5，6-五羥基己基)-L-谷氨酸合鉑(3b)按照實施例21的方法從311mg(lmmol)N-(2,3,4,5，6-五羥基己基)-L-谷氨酸得到525mg(85."/。)標題化合物，為無色粉末。ESI-MS(m/e)615[M+H]+。實施例24.制備N-(2，3，4，5,6-五羥基己基)-L-蘇氨酸合鉑(3c)按照實施例21的方法從283.3mg(lmmol)N-(2，3，4，5，6-五羥基己基)-L-蘇氨酸得到487mg(83.0。/。)標題化合物，為無色粉末。ESI-MS(m/e)589[M+H]+。實施例25.制備N-(2,3，4，5，6-五羥基己基)-L-酪氨酸合鉑(3d)按照實施例21的方法從345.4mg(lmmol)N-(2，3，4，5，6-五羥基己基)-L-酪氨酸得到458mg(70.6。/。)標題化合物，為無色粉末。ESI-MS(m/e)651[M+H]+。實施例26.制備N-(2，3，4，5,6-五羥基己基)-L-絲氨酸合鉑(3e)按照實施例21的方法從269.3mg(lmmol)N-(2,3，4，5，6-五羥基己基)-L-絲氨酸得到500mg(87.4。/。)標題化合物，為無色粉末。ESI-MS(m/e)574[M+H]+。實施例27.制備N-(2,3,4，5,6-五羥基己基)-L-天冬酰胺合鉑(3f)按照實施例21的方法從296.3mg(lmmol)N-(2,3，4，5,6-五羥基己基)-L-天冬酰胺得到427mg(71.2%)標題化合物，為無色粉末。ESI-MS(m/e)601[M+H]+。實施例28.制備N-(2，3，4,5，6-五羥基己基)-L-谷氨酰胺合鉑(3g)按照實施例21的方法從310.3mg(lmmol)N-(2，3，4，5，6-五羥基己基)-L-谷氨酰胺得到436mg(70.9%)標題化合物，為無色粉末。ESI-MS(m/e)615[M+H〗+。實施例29.制備N-(2，3，4，5，6-五羥基己基)-L-甘氨酸合鉑(3h)按照實施例21的方法從239.2mg(lmmol)N-(2,3，4，5，6-五羥基己基)-L-甘氨酸得到436mg(89.5。/。)標題化合物，為無色粉末。ESI-MS(m/e)544[M+H]+。實施例30.制備N-(2,3,4,5,6-五羥基己基)-L-半胱氨酸合鉑(3i)按照實施例21的方法從285.3mg(lmmol)N-(2，3,4，5,6-五羥基己基)-L-半胱氨酸得至i」51lmg(86.8%)標題化合物，為無色粉末。ESI-MS(m/e)589[M+H]+。實施例31.制備N-(2，3，4，5，6-五羥基己基)-L-甲硫氨酸合鉑(3j)按照實施例21的方法從313.4mg(lmmol)N-(2,3，4,5，6-五羥基己基)-L-甲硫氨酸得至U537mg(87.0%)標題化合物，為無色粉末。ESI-MS(m/e)617[M+H]+。實施例32.制備N-(2，3，4,5，6-五羥基己基)-L-丙氨酸合鉑(3k)按照實施例21的方法從253.3mg(lmmol)N-(2,3，4,5，6-五羥基己基)-L-丙氨酸得到463mg(83.2。/。)標題化合物，為無色粉末。ESI-MS(m/e)557[M+H]+。實施例33.制備N-(2，3，4,5，6-五羥基己基)-L-苯丙氨酸合鉑(31)按照實施例21的方法從329.4mg(lmmol)N-(2，3,4，5，6-五羥基己基)-L-苯丙氨酸得到472mg(74.7%)標題化合物，為無色粉末。ESI-MS(m/e)633[M+H]+。實施例34.制備N-(2,3，4，5,6-五羥基己基)-L-亮氨酸合鉑(3m)按照實施例21的方法從295.3mg(lmmol)N-(2,3,4,5,6-五羥基己基)-L-亮氨酸得到529mg(88.5。/。)標題化合物，為無色粉末。ESI-MS(m/e)599[M+H]+。實施例35.制備N-(2,3，4，5，6-五羥基己基)-L-異亮氨酸合鉑(3n)按照實施例21的方法從295.3mg(lmmol)N-(2，3,4，5,6-五羥基己基)隱L-異亮氨酸得到504mg(84.3%)標題化合物，為無色粉末。ESI-MS(m/e)599[M+H]+。實施例36.制備N-(2，3，4,5,6-五羥基己基)-L-色氨酸合鉑(30)按照實施例21的方法從368.4mg(lmmol)N-(2,3,4，5，6-五羥基己基)-L-色氨酸得到534mg(79.6X)標題化合物，為無色粉末。ESI-MS(m/e)671[M+H]+。實施例37.制備N-(2,3,4,5，6-五羥基己基)-L-纈氨酸合鉑(3p)按照實施例21的方法從281.3mg(lmmol)N-(2，3，4,5，6-五羥基己基)-L-纈氨酸得到466mg(79.8。/。)標題化合物，為無色粉末。ESI-MS(m/e)586[M+H]+。實施例38.制備N-(2,3，4，5，6-五羥基己基)-L-賴氨酸合鉑(3q)按照實施例21的方法從310.3mg(lmmol)N-(2，3，4，5,6-五羥基己基)-L-賴氨酸得到418mg(68.2。/。)標題化合物，為無色粉末。ESI-MS(m/e)615[M+H]+。實施例39.制備N-(2，3，4，5,6-五羥基己基)-L-精氨酸合鉑(3r)按照實施例21的方法從338.4mg(lmmol)N-(2，3，4,5,6-五羥基己基)-L-精氨酸得到465mg(72.5。/。)標題化合物，為無色粉末。ESI-MS(m/e)643[M+H]+。實施例40.制備N-(2,3,4，5,6-五羥基己基)-L-組氨酸合鉑(3s)按照實施例21的方法從319.3mg(lmmol)N-(2,3,4,5,6-五羥基己基)-L-組氨酸得到515mg(82.8y。)標題化合物，為無色粉末。ESI-MS(m/e)622[M+H]+。實施例41.制備N-(2,3,4，5，6-五羥基己基)-L-脯氨酸合鉑(3t)按照實施例21的方法從279.3mg(lmmol)N-(2，3,4,5,6-五羥基己基)-L-脯氨酸得到456mg(78.4。/。)標題化合物，為無色粉末。ESI-MS(m/e)583[M+H]+。實施例42.制備N-(2，3,4,5,6-五羥基己基)-L-羥脯氨酸合鉑(3u)按照實施例21的方法從295.3mg(lmmol)N-(2,3,4，5,6-五羥基己基)-L-羥脯氨酸得到480mg(80.8。/。)標題化合物，為無色粉末。ESI-MS(m/e)602[M+H]+試驗例1本發(fā)明化合物(3a-u)體外抗腫瘤活性試驗l.Hela細胞傳代培養(yǎng)(消化法)培養(yǎng)液、PBS液和胰蛋白酶放入37"C水浴鍋內預熱。往細胞中加入預熱的消化液，37'C消化。吸棄消化液加入培養(yǎng)液，吹打制懸。吸細胞懸液入離心管，1000轉/分鐘離心6-8分鐘。棄上清液，加入新培養(yǎng)液稀釋細胞。將細胞懸液分裝至2-3個培養(yǎng)瓶。細胞在顯微鏡下觀察計數(shù)，傳代細胞密度應該不低于5xl05/ml。用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶，放入CO^音養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細胞2小時后開始貼附在瓶壁上。2.3a-u的細胞毒活性測定將傳代細胞制成細胞懸液，置入96孔培養(yǎng)板內(毎孔100m1，5><104個細胞)分為空白對照組及試驗組(3a-n)。作空白對照的每個孔內加25pl生理鹽水、評價3a-u治療作用的每個孔內加25pl含3a-u的生理鹽水溶液(終濃度為400pg/ml)。每種測定均使用6個平行孔。96孔培養(yǎng)板在孵育箱中孵育48h、2000r/min離心10min、棄上清液、毎孔加20m1MTT、37。C培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4h、2000r/min離心10min、棄上清液、每孔加100pl二甲亞砜、微量振蕩器振蕩8min、自動酶標讀數(shù)儀比色(波長570nm，參考波長630nm)測光密度、計算3a-u對HeLa細胞的抑制率。HeLa細胞的存活率二3a-u組光密度值/空白對照組光密度值xl00。/。，3a-u對HeLa細胞的抑制率^100。/?！婊盥?。結果列入表l。表1.3a-u對Hda細胞增殖的抑制作用<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>n=6,順鉑、K2PCl4fn3a-u的終濃度均為400ug/ml從表1可以看到，在400/ig/ml濃度下，雖然3a-u對HeLa細胞的抑制率低于順鉑，但是除3d外仍然顯示明確的抑制腫瘤作用。試驗例2本發(fā)明化合物(3a-n)的體內抗腫瘤活性和毒性試驗1.制備瘤細胞接種液取腹腔接種S湖腹水瘤第7天的昆明種小鼠一只(購自北京大學醫(yī)學部實驗動物中心)脫頸椎處死，用75%酒精消毒后置于超凈臺內，用小鑷子夾起腹部中線偏右的皮膚并用小剪刀一小口至可見乳白色腹水流出。將吸管由開口處輕輕插入腹腔吸出腹水。吸得的腹水加到裝有約4ml滅菌生理鹽水的15ml的試管中，使體積增至約10ml。用吸管輕輕吹氣，使腹水與生理鹽水混勻。試管加蓋，1000轉/分離心5分鐘。棄去上清液，留下試管底部的乳白色膠狀物。腹水中若混有血液，離心后上清液里會出現(xiàn)一條紅色豎線，可用吸管輕輕吸出棄去。往試管底部的乳白色膠狀物中加滅菌生理鹽水至10ml，用吸管輕輕吹打，使瘤細胞均勻浮起。取lOOpl該懸浮液，加滅菌生理鹽水至10.0ml，混勻，得稀釋100倍的瘤細胞稀釋液，混勻，加蓋，放入冰中。取lO(Hil稀釋100倍的瘤細胞稀釋液置Eppendoff小管中，力口lOOpl0.4%臺盼蘭染液，混勻。取少許該混勻液加至計數(shù)板的計數(shù)池內。于顯微鏡下計算4個大格中被染上藍色的存活瘤細胞個數(shù)。按下式計算原液中存活的瘤細胞數(shù)。原液中存活瘤細胞數(shù)(個/ml)二4個大格中存活4的腫瘤細胞總數(shù)xl0、稀釋倍數(shù)2.接種將原液中存活的瘤細胞稀釋成2.0xl(^個/ml個瘤細胞。在無菌條件下用2%碘酒棉球和75%酒精棉球在昆明種小鼠右側腋下消毒，每只小鼠注入0.2ml瘤細胞液(2.0xl(^個/ml個瘤細胞)，緩緩抽出針頭。用該法給230只昆明種小鼠接種，然后隨機分為23組，放入動物室飼養(yǎng)。3.治療在適宜的容器中將10mg順鉑粉劑用20ml滅菌生理鹽水充分溶解，制成順鉑注射液，使劑量為1.667/miol/kg。準確稱取3a-u,用2.4ml滅菌生理鹽水充分溶解，制成3a-u注射液，使劑量為1.667Mmol/kg。腫瘤接種24小時后，空白對照組小鼠腹腔注射滅菌生理鹽水10ml/kg。順鉑治療組小鼠腹腔注射順鉑注射液，劑量為1.667jumol/kg。3a-u治療組小鼠的腹腔注射3a-u注射液，劑量為1.667pmol/kg。各組小鼠正常飼養(yǎng)、最后一次給藥24hr之后處死。4.抑瘤活性評價最后一次給藥24hr之后，將小鼠脫頸處死，取瘤稱重、按抑瘤率=[(空白組平均瘤重一治療組平均瘤重)/空白組平均瘤重]xl00。"計算抑瘤率。瘤重及抑瘤率列入表2。表2.3a-u的荷318()腹水瘤小鼠的治療作用*<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>*N=10,順鉑(A)劑量二16.7/miol/kg(給藥期間6只死亡)，順鉑(B)劑量3.3/miol/kg(給藥期間2只死亡)，3a-u劑量=16.7/miol/kg;a)與NS組比p〈0.01;b)與NS組比p〈0.05.從表2可以看出，3a-u中有11個化合物可以在保證小鼠存活的前提下產(chǎn)生抗癌作用。5.毒性評價1)治療造成的死亡情況給藥10天，每天給藥1次，順鉑16.7/xmol/kg組有60%荷S180瘤小鼠死亡，其中第八天死亡2只，第九天死亡3只，第十天死亡1只；順鉑3.3/miol/kg組有20%荷S180瘤小鼠死亡，其中第九天死1只，第十天死1只，3a-u16.7/miol/kg組未見S180瘤小鼠死亡。2)治療對排尿、體重及股骨的影響收集第1次給lh后的前3h內的尿，記錄體積。最后一次給藥24hr之后記錄小鼠的體重。最后一次給藥24hr之后，將小鼠脫頸處死，取左股骨稱濕重。結果列入表3。表3.3a-u治療對荷S咖腹水瘤小鼠體重、股骨和尿量的影響*<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>*N=10，順鉑劑量=16.7/xmol/kg(給藥期間6只死亡)，3a-u劑量=16.7jtimol/kg.a)與NS纟且比p<0.001.從表3可以看出，在16.7/imol/kg劑量下雖然順鉑治療使小鼠嚴重消瘦，但是3a-u治療不引起體重降低。在16.7/xmol/kg劑量下順鉑治療使小鼠的排尿量大幅度減少，促使鉑在重要器官堆積。在16.7/miol/kg劑量下3a-u治療使小鼠的排尿量大幅度增高，促使鉑經(jīng)尿從體內排出。3)治療對重要器官的影響最后一次給藥24hr后，將小鼠脫頸處死，稱取腦、心、肝、脾和左腎重量，結果列入表4。表4.3a-u治療對荷S,8。腹水瘤小鼠腦、心、脾和腎的影響*<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>*n=10,順鉑劑量=16.7/miol/kg(給藥期間6只死亡)，3a-u劑量=16.7/miol/kg;a)與NS組比p〈0.001.從表4可以看出，在16.7/miol/kg劑量下順鉑治療使小鼠的腦、心、肝、脾和腎嚴重減重。這種減重只能與順鉑的毒性相關。在16.7;(miol/kg劑量下3a-u治療不引起小鼠的腦、心、肝、脾和腎減重。這種現(xiàn)象說明3a-u對重要器官不造成損害。4)治療造成的鉑分布本發(fā)明以療效好的3b,m,p，q，t為代表，考察治療造成的鉑分布。每次給藥(劑量為16.7/miol/kg)lhr后開始收集小鼠3hr內的尿液作為當天的尿樣本，每次給藥24h后收集小鼠的糞便作為當天的糞便樣本，持續(xù)收集10天。l日l組小鼠的尿和糞便分別作為一個樣本，各自獲得10個樣本。上面獲得的血、腫瘤組織、腦、心、肝、脾、腎及左側股骨(各為10個樣本)在電熱板上用HN03/HCL04(3/1)硝化至出現(xiàn)無色固體。每次給藥lhr后開始收集小鼠3hr內的尿液作為當天的尿樣本，每次給藥24h后收集小鼠的糞便作為當天的糞便樣本，持續(xù)收集10天。1日1組小鼠的尿和糞便分別作為一個樣本，各自獲得IO個樣本。獲得的樣本在電熱板上用HN(VHCL04(3/1)硝化至出現(xiàn)無色固體。固體用高純水溶解、轉移至容量瓶中定容、用VarianspectrAA*220原子吸收分光光度計測定(石墨爐法)鉑含量。測得的血、尿、糞、腎、脾、肝、腦、心、骨和癌組織的鉑含量列入表表5.治療后小鼠體內的鉑分布<table>tableseeoriginaldocumentpage24</column></row><table>*除血鉑以mg鉑/l血液表示外，其余均用Mg鉑/g組織表示。n=10;a)與順鉑組比pO.OOl.從表5可以看出，在16.7Mmol/kg劑量下順鉑治療10天鉑在小鼠的腎、脾、肝、腦、心和骨中堆積，尤其在骨、肝和腎中堆積嚴重。在16.7]wmol/kg劑量下3b,m，p，q,t治療IO天珀在小鼠的腎、脾、腦、心和骨中的堆積比順鉑治療輕很多。除3m外，其余化合物引起珀在小鼠肝中的堆積程度與順鉑相當。特別應當指出的是雖然在重要器官中3b,m，p，q,t治療只造成鉑輕微堆積，但是在腫瘤組織中卻保持了與順鉑治療同樣高的鉑水平，在尿和糞中保持了比順鉑治療高得多的珀水平。這種理想的鉑分布，是本發(fā)明的化合物安全有效的基礎。5)荷S180瘤小鼠對高劑量3u治療的適應性按照上面敘述的方法對小鼠接種腫瘤。準確稱取療效好的3u用2.4ml滅菌生理鹽水充分溶解，制成3u注射液，使劑量為166.7pmol/kg和1.7/miol/kg。接種24小時后，腹腔注射3u注射液，劑量分別為166.7pmol/kg和1.7/xmol/kg，給藥10天。兩種劑量治療小鼠既未出現(xiàn)生活、生長和活動異常，也未發(fā)生死亡。相關數(shù)據(jù)列入表6。表6.166.7/miol/kg和1.7/miol/kg3u治療小鼠的相關數(shù)據(jù)<table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table>總體看，本發(fā)明的3a-u基本不顯示明顯毒性，可以安全有效的用于癌治療。權利要求1.N-(2，3，4，5，6-五羥基己基)-L-氨基酸合鉑化合物，為通式(1)所示的結構id="icf0001"file="A2007100636710002C1.gif"wi="70"he="28"top="47"left="68"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="no"/>其中R選自氫、CH3、CH(CH3)2、CH2CH(CH3)2、CH(CH3)CH2CH3、CH2C6H5、CH2C6H4-OH-p、CH2OH、CH(OH)CH3、CH2CO2H、CH2CH2CO2H、吲哚-5-基-CH2、、CH2CH2SH、CH2CH2SCH3、CH2CH2CH2NHC(NH)NH2、CH2CONH2、CH2CH2CONH2、咪唑-4-基-CH2、CH2CH2CH2CH2NH2、環(huán)丁氨-2-基或4-羥基環(huán)丁氨-2-基。2、一種制備權利要求lN-(2，3,4,5,6-五羥基己基)-L-氨基酸合鉑化合物的方法，包括(1)使D-葡萄糖和L-葡萄糖基氨基酸在NaOH存在下縮合，制備Schiffs堿；(2)在NaBH4存在下將SchifTs堿還原，得到N-葡萄糖基氨基酸鈉鹽；(3)將N-葡萄糖基氨基酸鈉鹽酸化，得到N-葡萄糖基氨基酸；(4)N-葡萄糖基氨基酸與K2[PtCU]配位，得到^(2,3，4，5，6-五羥基己基)丄-氨基酸合鉑。3、一種藥物組合物，其特征在于，由治療上有效量的權利要求l的N-(2，3,4，5，6-五羥基己基)-L-氨基酸合鉑化合物和藥學上可接受的載體組成。4、權利要求l的N-(2，3，4,5，6-五羥基己基)-L-氨基酸合鉑化合物在制備抗腫瘤藥物中的用途。通式(1)全文摘要本發(fā)明公開了一類低腎毒性合鉑類抗腫瘤化合物，還公開該化合物的制備方法及在抗腫瘤中的用途。體外和體內試驗表明，本發(fā)明化合物具有確切的抗腫瘤活性。與順鉑相比，本發(fā)明化合物治療腫瘤時在腫瘤組織中可以達到與順鉑同樣水平的分布，但在腎臟等重要器官中的分布遠低于順鉑在腎臟中的分布，在尿和糞中保持了比順鉑治療高得多的珀水平，促使鉑經(jīng)尿從體內排出，因而不顯示腎毒性，可以安全有效的用于腫瘤治療。文檔編號A61K31/555GK101239990SQ20071006367公開日2008年8月13日申請日期2007年2月7日優(yōu)先權日2007年2月7日發(fā)明者侯寶光,彭師奇,王玉記,明趙申請人:首都醫(yī)科大學