專利名稱：烏司他丁在制備治療和/或保護(hù)多臟器功能損傷的藥物中用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的藥物用途，即烏司他丁用于制備治療和/或保護(hù)多臟器功能損傷方面的用途，特別是對(duì)全身性炎癥反應(yīng)引起的急性肺損傷具有明顯的治療和/或保護(hù)作用。
背景技術(shù)：
人尿胰蛋白酶抑制劑(Urinary Trypsin Inhibitor，UTI；或者ulinastatin，烏司他丁)，是一種從人尿中分離純化的糖蛋白，分子量約為67kD。該蛋白是一種廣譜水解酶抑制劑，可對(duì)胰蛋白酶、α-糜蛋白酶、彈性蛋白酶、透明質(zhì)酸酶、纖溶酶等多種水解酶具有抑制作用。此外，烏司他丁還可穩(wěn)定溶酶體膜，抑制α-TNF、IL-1、IL-6等炎癥介質(zhì)及氧自由基的釋放對(duì)組織器官造成的損傷，同時(shí)UTI分解形成的低分子量成分也具有很強(qiáng)的抑制水解酶的作用；另外還能抑制心肌抑制因子的產(chǎn)生，防止腎血流量降低，改善休克時(shí)的循環(huán)狀態(tài)，從而保護(hù)肝、腎、腦等重要器官的功能，改善機(jī)體免疫狀況，防止急性腎衰、肝衰的出現(xiàn)。
機(jī)體對(duì)病原微生物及其產(chǎn)物致炎性刺激引起的炎癥反應(yīng)不能控制在一個(gè)適當(dāng)水平，出現(xiàn)反應(yīng)失控，促炎性細(xì)胞因子和炎癥介質(zhì)啟動(dòng)級(jí)聯(lián)反應(yīng)，出現(xiàn)放大效應(yīng)，導(dǎo)致劇烈、超常的炎癥反應(yīng)，造成組織破壞和臟器功能受損，從而發(fā)生全身炎癥反應(yīng)綜合征(SIRS)。SIRS可以導(dǎo)致多個(gè)臟器功能不全或衰竭，即多器官功能障礙綜合征(MODS)，甚至引發(fā)多器官功能衰竭(MOF)。MODS時(shí)其體內(nèi)炎癥反應(yīng)系統(tǒng)與抗炎反應(yīng)系統(tǒng)平衡失調(diào)，其中大量炎癥介質(zhì)如TNF-α、IL-Iβ、IL-6、IL-8等均參與此病程過(guò)程，并且這些炎癥介質(zhì)水平均顯著增高。
SIRS與急性肺損傷(ALI)的發(fā)生密切相關(guān)，肺臟是SIRS發(fā)生發(fā)展過(guò)程中最易受損傷的靶器官，ALI是機(jī)體炎癥反應(yīng)在肺部的表現(xiàn)。由于ALI患者不同程度合并有肺外器官功能障礙，導(dǎo)致MODS。在MODS病理發(fā)展過(guò)程中，ALI出現(xiàn)最早，發(fā)生率也最高，因此SIRS是ALI和MODS的共同發(fā)病基礎(chǔ)。
本發(fā)明人進(jìn)行臨床研究和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，烏司他丁對(duì)多臟器功能損傷有明顯的治療和/或保護(hù)作用，特別是對(duì)全身性炎癥反應(yīng)引起的急性肺損傷具有明顯的治療和/或保護(hù)作用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供了烏司他丁用于制備治療和/或保護(hù)多臟器功能損傷的藥物的用途。
本發(fā)明的另一目的是提供了一種用于治療和/或保護(hù)多臟器功能損傷的含有烏司他丁的藥物組合物。
本發(fā)明的再一目的是提供烏司他丁用于制備治療和/或保護(hù)急性肺損傷的藥物的用途。
本發(fā)明的還一個(gè)目的是提供一種用于治療和/或保護(hù)急性肺損傷的含有烏司他丁的藥物組合物。
本發(fā)明的烏司他丁對(duì)多臟器功能損傷具有明顯的治療和/或保護(hù)作用。
本發(fā)明的烏司他丁特別是對(duì)由全身性炎癥反應(yīng)引起的急性肺損傷具有明顯的治療和/或保護(hù)作用。
本發(fā)明的烏司他丁一般以藥物組合物的形式使用，這種組合物含有治療有效量的作為活性成分的烏司他丁和一種或多種制藥可接受的載體或添加劑。含有烏司他丁的藥物組合物通常以靜脈注射途徑給藥，主要?jiǎng)┬桶跛舅龈煞坩槃┖妥⑸湟簞?br> 經(jīng)靜脈注射給藥的滅菌組合物，一般是固體的滅菌組合物形式，即凍干粉針劑。這些組合物還可以含有一種或多種制藥可接受的載體或添加劑，特別是甘露醇、乳糖、水解明膠、氯化鈉或葡萄糖中的一種或其任意混合物，在使用時(shí)可以溶解于滅菌水或其他注射用滅菌介質(zhì)中。
經(jīng)靜脈注射給藥滅菌組合物也可以是水溶液，即注射液劑，這些組合物也可以含有一種或多種制藥可接受的載體或添加劑，特別是注射用水、甘露醇、氯化鈉或葡萄糖中的一種或其任意混合物。
烏司他丁凍干粉針制備方法是取過(guò)濾滅菌烏司他丁水溶液10000萬(wàn)單位，加20克甘露醇溶解，調(diào)節(jié)pH至中性，加注射用水至2000毫升，加氯化鈉調(diào)節(jié)等滲，無(wú)菌過(guò)濾，分裝1000個(gè)西林瓶中，無(wú)菌條件下冷凍干燥，即得。
烏司他丁注射液制備方法是取過(guò)濾滅菌烏司他丁水溶液10000萬(wàn)單位，加20克甘露醇溶解，調(diào)節(jié)pH至中性，加注射用水至2000毫升，加氯化鈉調(diào)節(jié)等滲，無(wú)菌過(guò)濾，分裝1000個(gè)西林瓶中，即得。
在本發(fā)明涉及的烏司他丁在制備治療和/或保護(hù)多臟器功能損傷的藥物的用途中，或在本發(fā)明涉及的烏司他丁在制備治療和/或保護(hù)急性肺損傷的藥物的用途中，烏司他丁的治療劑量根據(jù)病情的嚴(yán)重程度、治療時(shí)間而定，一般靜脈注射給藥每次10-300萬(wàn)單位，每天給藥1-4次。
一般來(lái)說(shuō)，醫(yī)生將根據(jù)病情和被治療主體的各種其他因素來(lái)確定適當(dāng)?shù)膭┝俊?br> 具體實(shí)施例方式
下面用具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明。
實(shí)施例1 烏司他丁對(duì)多臟器功能損傷患者的治療作用實(shí)驗(yàn)對(duì)象和分組符合MODS診斷標(biāo)準(zhǔn)的46例患者，分成烏司他丁治療組(UTI組，23例)和對(duì)照組(對(duì)照組，23例)，兩組臨床資料有可比性。所有入住病例均據(jù)不同病因予相應(yīng)對(duì)癥處理(抗炎、抗休克等)，治療組在對(duì)照組常規(guī)治療的基礎(chǔ)上加用注射用烏司他丁10萬(wàn)U+5％葡萄糖100ml靜脈滴注，每8h一次，連續(xù)用藥1周。
分析項(xiàng)目和指標(biāo)兩組患者均在入院時(shí)、住院第3～7天(因部分病人未到1周已死亡)抽取靜脈血6ml送檢；測(cè)定兩組患者在入院時(shí)、治療第3～7dTNF-α、IL-Iβ、IL-6的含量并對(duì)照。
結(jié)果兩組患者治療前后TNF-α、IL-Iβ、IL-6含量比較，見(jiàn)表1。
表1烏司他丁治療前后TNF-α、IL-Iβ、IL-6含量比較

注治療組治療前后自身比較P＜0.01，對(duì)照組治療前后自身比較P＞0.05，*兩組治療后比較P＜0.01。
從表1可以看出，UTI治療組治療后的TNF-α、IL-Iβ及IL-6水平均明顯降低，與對(duì)照組相比有顯著性差異(P＜0.01)，這表明UTI具有抑制TNF-α、IL-Iβ和IL-6等炎性因子的過(guò)度釋放，減輕應(yīng)激狀態(tài)下炎癥反應(yīng)的作用，使病情盡快向平穩(wěn)過(guò)渡，有利于多臟器功能損傷的治療。
實(shí)施例2 烏司他丁對(duì)多發(fā)傷患者器官功能的保護(hù)作用實(shí)驗(yàn)對(duì)象和分組選取多發(fā)傷患者40例，隨機(jī)分為烏司他丁治療組和對(duì)照組(各20例)。所有病例均符合多發(fā)傷的診斷標(biāo)準(zhǔn)，按損傷嚴(yán)重程度評(píng)分(ISS)值評(píng)定，ISS評(píng)分均＞16分。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，兩組患者在性別、年齡、ISS評(píng)分對(duì)照無(wú)顯著差異(P＞0.05)，具有可比性。治療組在急診治療時(shí)使用烏司他丁30萬(wàn)單位(U)+5％葡萄糖250ml快速靜脈滴注，住院后連續(xù)3天應(yīng)用，用法為UTI10萬(wàn)U+0.9％氯化鈉注射液100ml靜脈滴注，每天3次，對(duì)照組除不用烏司他丁外，其余治療原則相同，即積極處理原發(fā)灶，循環(huán)、呼吸支持，止血、輸液、抗感染、營(yíng)養(yǎng)支持等。
分析項(xiàng)目和指標(biāo)谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)和谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)是臨床上常用的肝功能指標(biāo)，而尿素氮(BUN)和血清肌酐(Scr)是重要的腎功能指標(biāo)，當(dāng)肝腎功能受損時(shí)，上述指標(biāo)均會(huì)明顯升高。入院后第1、3、5天分別抽血檢測(cè)患者的ALT、AST、BUN、Cr含量變化情況，對(duì)患者用藥前后肝腎功能指標(biāo)進(jìn)行比較。
結(jié)果兩組患者不同時(shí)相肝腎功能指標(biāo)(BUN、Cr、ALT、AST)檢測(cè)結(jié)果，見(jiàn)表2。
表2患者給藥前后在不同時(shí)相肝腎功能指標(biāo)變化

注與入院時(shí)比較，*P＜0.05；與對(duì)照組同時(shí)相比較，△P＜0.05表2的數(shù)據(jù)表明，對(duì)照組在住院后血BUN和Scr含量比治療組有明顯升高(P＜0.05)，UTI治療組在相應(yīng)時(shí)段的腎功能損傷明顯降低。對(duì)照組ALT、AST在入院后第1、3、5天與術(shù)前相比均明顯升高(P＜0.05)，表明肝功能已明顯受損。治療組術(shù)后第1天，ALT、AST水平與術(shù)前相比明顯升高(P＜0.05)，第3天已明顯降低；到第5天，ALT、AST水平已基本降低到入院前水平。上述結(jié)果表明烏司他丁具有保護(hù)和改善肝、腎功能的作用，有利于嚴(yán)重創(chuàng)傷或術(shù)后肝、腎功能的早期恢復(fù)。
實(shí)施例3 烏司他丁對(duì)全身性炎癥反應(yīng)引起的急性肺損傷大鼠的治療作用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組與處理選用體重為150-200g健康大鼠，隨機(jī)分為①生理鹽水(NS)對(duì)照組，②單純急性肺損傷(ALI)組，③地塞米松(DM)治療組，④烏司他丁(UTI)治療組。按以下步驟處理大鼠稱重后，腹腔注射2％戊巴比妥鈉40mg/kg麻醉，除①組向大鼠尾靜脈注射生理鹽水2.5ml/kg外，其余各組向大鼠尾靜脈靜注內(nèi)毒素(LPS，脂多糖)5mg/kg，制備急性肺損傷模型。制模30min后①組和②組不給予任何處理，③組尾靜脈注射地塞米松4mg/kg，④組尾靜脈注射烏司他丁50萬(wàn)U/kg。
檢測(cè)指標(biāo)及方法各組均在內(nèi)毒素?fù)p傷后2h放血處死，留取抗凝血以備測(cè)血漿蛋白含量。開(kāi)胸完整取出肺臟，于氣管分叉處上1cm剪斷，用4℃生理鹽水漂洗去除表面血污，濾紙吸干，經(jīng)氣管插入針頭行左側(cè)肺組織灌洗，用4℃生理鹽水分別按3ml，3ml，4ml灌洗3次，總量為10ml，記錄收集的肺泡灌洗液(BALF)液量。BALF經(jīng)雙層紗布過(guò)濾，靜置10min后，從混懸液中取1小滴置血球計(jì)數(shù)板上，顯微鏡下計(jì)數(shù)BALF中除紅細(xì)胞外的細(xì)胞總數(shù)，然后1000r/min離心10min，取上清液部分-20℃凍存待測(cè)蛋白含量；取沉淀細(xì)胞懸液1小滴于玻片上行瑞氏染色，油鏡下計(jì)數(shù)200個(gè)細(xì)胞，得出中性粒細(xì)胞(PMN)分類計(jì)數(shù)，計(jì)算PMN百分比。按雙縮脲法測(cè)定BALF及血漿的蛋白含量，計(jì)算肺泡通透指數(shù)(LPI＝BALF蛋白含量/血漿蛋白含量)。
表3大鼠給藥前后肺損傷指標(biāo)變化


注*與NS組比較，P＜0.05；#與ALI組比較，P＜0.05。
本實(shí)驗(yàn)中通過(guò)大鼠尾靜脈注射LPS成功復(fù)制ALI動(dòng)物模型。中性粒細(xì)胞(PMN)是造成急性肺損傷(ALI)炎癥反應(yīng)的重要效應(yīng)細(xì)胞；LPI是表征肺泡通透性的一個(gè)較好參數(shù)，肺微血管通透性增高將導(dǎo)致肺泡滲出液中富含蛋白質(zhì)。當(dāng)大量PMN粘附于肺血管內(nèi)皮細(xì)胞，在肺內(nèi)聚集并釋放炎癥介質(zhì)。LPS、炎癥介質(zhì)以及繼發(fā)產(chǎn)生的多種毒性物質(zhì)，會(huì)進(jìn)一步損傷肺泡毛細(xì)血管膜，增加通透性，從而導(dǎo)致急性肺損傷的發(fā)生。通過(guò)有效的清除肺內(nèi)的PMN而控制炎癥過(guò)程，可以減輕ALI。
本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，與ALI模型相比，UTI組和DM組均能明顯降低肺泡通透指數(shù)、中性粒細(xì)胞比例和蛋白含量等指標(biāo)(P＜0.05)，表明使用烏司他丁或地塞米松可明顯減少肺組織的炎性介質(zhì)的滲出，減輕和改善急性肺損傷癥狀。
總之，烏司他丁能減輕炎癥反應(yīng)，抑制毛細(xì)血管通透性的增高，從而達(dá)到治療由內(nèi)毒素引起的急性肺損傷的目的。
權(quán)利要求
1.烏司他丁在制備治療和/或保護(hù)多臟器功能損傷的藥物中的用途。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其中所述藥物的給藥量是每天給藥1-4次，每次10-300萬(wàn)單位。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的用途，其中所述藥物是凍干粉針劑或注射液。
4.據(jù)權(quán)利要求3所述的用途，其中所述凍干粉針劑或注射液配以一種或多種制藥可接受的載體或添加劑。
5.據(jù)權(quán)利要求4所述的用途，其中所述的凍干粉針劑的制藥可接受載體或添加劑選自甘露醇、乳糖、水解明膠、氯化鈉或葡萄糖中的一種或其任意混合物；所述注射液的制藥可接受載體或添加劑選自注射用水、甘露醇、氯化鈉或葡萄糖中的一種或其任意混合物。
6.烏司他丁在制備治療和/或保護(hù)急性肺損傷的藥物中的用途。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的用途，其中所述藥物的給藥量是每天給藥1-4次，每次10-300萬(wàn)單位。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的用途，其中所述藥物是凍干粉針劑或注射液。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的用途，其中所述凍干粉針劑或注射液配以一種或多種制藥可接受的載體或添加劑。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的用途，其中所述的凍干粉針劑的制藥可接受載體或添加劑選自甘露醇、乳糖、水解明膠、氯化鈉或葡萄糖中的一種或其任意混合物；所述注射液的制藥可接受載體或添加劑選自注射用水、甘露醇、氯化鈉或葡萄糖中的一種或其任意混合物。
全文摘要
本發(fā)明涉及烏司他丁用于治療和/或保護(hù)多臟器功能損傷的用途及其藥物組合物。本發(fā)明的烏司他丁對(duì)多臟器功能損傷有明顯的治療和/或保護(hù)作用。本發(fā)明是將人尿胰蛋白酶抑制劑(Urinary Trypsin Inhibitor，UTI，烏司他丁)和可藥用輔料按適當(dāng)配比成的藥物組合物，其制劑形式包括凍干粉劑或注射液劑。
文檔編號(hào)A61P11/00GK101024075SQ20071008640
公開(kāi)日2007年8月29日 申請(qǐng)日期2007年3月7日 優(yōu)先權(quán)日2007年3月7日
發(fā)明者傅和亮, 侯永敏, 吳蓉蓉, 王曉巖, 徐娟 申請(qǐng)人:廣東天普生化醫(yī)藥股份有限公司