專利名稱：一種三七止血膠囊及其制備方法和質(zhì)量控制方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種三七止血膠囊及其制備方法和質(zhì)量控制方法。
背景技術(shù)：
中華人民共和國衛(wèi)生部《藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑》第十一冊第9頁三七止血片的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供了本發(fā)明的制劑基本處方。專利文獻(xiàn)CN1857370A、CN1114432C、CN1679786A、CN1876009A對三七止血類制劑已經(jīng)進(jìn)行了一定公開。
三七止血制劑(包括片劑和膠囊等劑型)臨床上用于消化道出血，血尿，便血，吐血，血痢等人體內(nèi)外各種出血；跌打損傷，骨折，外傷出血，瘀血腫痛，創(chuàng)傷口久不愈合，胸腹刺痛，乳腺炎，脈管炎；月經(jīng)不調(diào)，月經(jīng)過多，人流能產(chǎn)后流血不止，功能性子宮出血，痛經(jīng)，附件炎，宮頸糜爛等；還可以用于各種外科手術(shù)術(shù)前、術(shù)后以減少出血。三七止血制劑除了在治療婦科各種出血癥及炎癥外，能夠治療大面積軟組織創(chuàng)傷，跌打腫痛之損傷，瘀血阻滯所致的各種疼痛；抑制人體內(nèi)處各種出血。
三七止血制劑由地錦草和三七配伍組成。
地錦草為大戟科植物地錦Euphorbia humifusa Willd.或斑地錦Euphorbiamaculata L.的干燥全草。夏、秋二季采收，除去雜質(zhì)，曬干。地錦草常皺縮卷曲，根細(xì)小。莖細(xì)，呈叉狀分枝，表面帶紫紅色，光滑無毛或疏生白色細(xì)柔毛；質(zhì)脆，易折斷，斷面黃白色，中空。單葉對生，具淡紅色短柄或幾無柄；葉片多皺縮或已脫落，展平后呈長橢圓形，長5～10mm，寬4～6mm；綠色或帶紫紅色，通常無毛或疏生細(xì)柔毛；先端鈍圓，基部偏斜，邊緣具小鋸齒或呈微波狀。杯狀聚傘花序腋生，細(xì)小。蒴果三棱狀球形，表面光滑。種子細(xì)小，卵形，褐色。無臭，味微澀。
地錦草含有有效成分有莨菪亭、傘形花內(nèi)酯、阿亞品內(nèi)酯、棕櫚酸、全草含棕櫚酸、沒食子酸、沒食子酸甲酸、鞣花酸和短葉蘇木酚等。其中沒食子酸是其中含量較高，且具有凝血止血作用的活性成分。
三七為五加科植物三七Panax notoginseng(Burk.)F.H.Chen的干燥根。秋季花開前采挖，洗凈，分開主根、支根及莖基，干燥。根據(jù)文獻(xiàn)資料報(bào)道，三七也叫田七，因枝分三叉，葉為七片，故稱為三七。三七在春冬兩季采挖，又分為″春七″和″冬七″。
三七屬五加科多年生宿草根人參屬植物，生用有止血強(qiáng)心，散瘀生新、消腫定痛的顯著功能，熟用有活血、補(bǔ)血、強(qiáng)壯補(bǔ)虛的效益。明代著名醫(yī)學(xué)家李時(shí)珍在《本草綱目》中譽(yù)之為″金不換。。清朝前期的醫(yī)學(xué)著作《本草綱目拾遺》中說″人參補(bǔ)氣第一，三七補(bǔ)血第一，味同而功亦等，故稱″北參南七″，為中藥之最珍貴者。
隨著醫(yī)學(xué)科學(xué)研究的發(fā)展，人們對三七的認(rèn)識(shí)逐步加深，發(fā)現(xiàn)人參申最主要的有效成分和補(bǔ)養(yǎng)物質(zhì)是四環(huán)三萜皂苷，而三七的含量比人參的還更高，三七所含黃酮類化合物，有調(diào)節(jié)血壓，擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈，增加冠脈血流量，降低心臟耗氧量，減輕心肌工作負(fù)擔(dān)的作用。經(jīng)過臨床驗(yàn)證，證明三七在治療由冠心病引起的胸悶、心絞痛中有滿意的療效，對降低肥固醇及血脂的功能也很顯著。
三七中最有代表性的活性物質(zhì)是皂苷及皂苷元三七的主要成分為三萜皂苷，是與人參皂苷類似的一類成分。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)三七中的這類成分有人參皂苷Rb1、Rb2、Rb3、Rc、Rd、Re、Rg1、Rg2、Rg320(S)-Rg3、Rh1、F2，20-O-葡萄糖人參皂苷R1，七葉膽甙IX、XVII，三七皂苷，R1、R2、R3、R4、R6、Fa、Fc、Fe等。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于提供一種三七止血膠囊。
本發(fā)明的另一目的在于提供三七止血膠囊的制備方法。
本發(fā)明的另一目的在于提供三七止血膠囊的質(zhì)量控制方法。
具體地說，本發(fā)明所述三七止血膠囊，是由地錦草850-2000重量份、三七50-200重量份和適量藥用輔料制成的膠囊劑，其中將三七粉碎為粒度90-125目的細(xì)粉；優(yōu)選100目的三七細(xì)粉。
三七止血膠囊的制備方法，按照以下方法制備(一)稱量按照地錦草850-2000重量份、三七50-200重量份稱取原料；(二)煎煮和濃縮地錦草加水煎煮2次，第一次加10-12倍量水，煎煮1.5-2.5小時(shí)，第二次加8-12倍量水，煎煮0.5-1.5小時(shí)，合并濾液，濾液濃縮至相對密度為1.35-1.48的稠膏；(三)粉碎取三七，粉碎，過90-125目篩，得三七細(xì)粉；(四)混勻與制粒取上述稠膏、三七細(xì)粉及適量輔料，制粒，烘干，整粒，得到膠囊顆粒；(五)將上述膠囊顆粒填充為膠囊。
上述三七止血膠囊的制備方法中步驟(二)可以優(yōu)選為地錦草加水煎煮2次，第一次加10-12倍量水，煎煮1-2.5小時(shí)，第二次加8-12倍量水，煎煮0.5-1小時(shí)，合并濾液，濾液濃縮至相對密度為1.35-1.40的稠膏。
上述三七止血膠囊的制備方法中步驟(二)中地錦草加水煎煮2次，第一次加12倍量水，煎煮2小時(shí)，第二次加10倍量水，煎煮1小時(shí)，合并濾液，濾液濃縮至相對密度為1.40的稠膏。
本發(fā)明的三七止血膠囊的質(zhì)量控制方法為1.取待測膠囊內(nèi)容物0.5g，加水使溶解，濾過，濾液加無機(jī)酸，置水浴中加熱1小時(shí)，放冷，濾過，濾液用疏水有機(jī)溶劑振搖提取2次，合并有機(jī)溶劑，蒸干，殘?jiān)蛹状际谷芙?，得到供試品溶液?br>
2.另取地錦草對照藥材1g，加水煎煮1小時(shí)，濾過，濾液加無機(jī)酸，置水浴中加熱1小時(shí)，放冷，濾過，濾液用疏水有機(jī)溶劑振搖提取2次，合并有機(jī)溶劑，蒸干，殘?jiān)蛹状际谷芙?，得到對照藥材溶液?br>
3.吸取上述兩種相同體積的溶液，分別點(diǎn)于同一硅膠薄層板上，以氯仿-醋酸丁酯-甲酸-水(4∶4∶1∶1)的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以三氯化鋁試液，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
本發(fā)明三七止血膠囊的質(zhì)量控制方法也可以為1.取待測膠囊內(nèi)容物0.5g，加甲醇，加熱回流，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀谷芙?，用水飽和的正丁醇提?次，合并正丁醇液，用氨試液洗滌2次，棄去氨液，再用正丁醇飽和的水洗滌2次，棄去水液，正丁醇液蒸干，殘?jiān)蛹状际谷芙?，作為供試品溶液?br>
2.另取人參皂苷Rb1、人參皂苷Rg1、三七皂苷R1對照品，加甲醇制成每1ml含0.5毫克的混合溶液，作為對照品溶液。
3.吸取上述相同體積兩種溶液，分別點(diǎn)于同一硅膠薄層板上，以氯仿-甲醇-水(13∶7∶2)10℃以下放置過夜的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
本發(fā)明三七止血膠囊的質(zhì)量控制方法還可以為1.對照品溶液的制備精密稱取沒食子酸對照品適量，加50％甲醇制成每1ml含0.02毫克的溶液。
2.供試品溶液的制備取本品裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物，研細(xì)，混勻，取約0.2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50％甲醇50ml，密塞，稱定重量，放冷，再稱定重量，用50％甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液1ml，置10ml量瓶中，加50％甲醇至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.45μm)濾過，取續(xù)濾液，即得。
3.用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-0.05％磷酸溶液(15∶85)為流動(dòng)相；檢測波長為250-290nm；柱溫為25-35℃。理論板數(shù)按沒食子酸峰計(jì)算不低于3000。測定法分別吸取對照品溶液和供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定。
上述三七止血膠囊的質(zhì)量控制方法中，三七止血膠囊中沒食子酸含量介于14.8到21.2毫克之間。
當(dāng)前日本、韓國、美國以及歐洲等西方發(fā)達(dá)國家研究的天然藥物，大都以傳統(tǒng)工藝為主，采用水提取，把中藥復(fù)方全部活性成分留下。雖然這是保證臨床療效的兩難選擇，但對于遵循中醫(yī)藥君臣佐使理論，提高組方的有效成分，最大限度減少藥物副作用是有積極意義的。中藥的現(xiàn)代化生產(chǎn)工藝并非化學(xué)提取次數(shù)越多越好，而應(yīng)該有更合理的標(biāo)準(zhǔn)，臨床療效應(yīng)成為尺子。為了更加有效保證三七止血制劑的臨床療效的重現(xiàn)性，需要從產(chǎn)品的原料、制備方法和質(zhì)量控制方法方面進(jìn)行全面的優(yōu)化，用科學(xué)的實(shí)證方法保證藥品的療效。
三七止血膠囊，顧名思義，其臨床藥效最直接就是用于出血的治療，本發(fā)明中通過測定對不同工藝、處方下膠囊內(nèi)容物的小鼠凝血時(shí)間的數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)當(dāng)在對比例中三七的粉碎粒度為60目時(shí)，膠囊內(nèi)容物的凝血效果變得不明顯，而且不穩(wěn)定，這提示三七全粉入藥時(shí)應(yīng)該將其粉碎達(dá)到一定粒度時(shí)，效果比較明顯，本發(fā)明中，當(dāng)粉碎粒度為90-150目時(shí)，凝血效果較好。鑒于三七粉碎粒度為150目時(shí)，膠囊內(nèi)容物流動(dòng)性不好，所以粉碎粒度為90-125目較好，其中優(yōu)選100目。
具體實(shí)施方式下面實(shí)施例進(jìn)一步描述本發(fā)明，但所述實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明而不是限制本發(fā)明。
實(shí)施例1處方地錦草850g 三七50g制法以上兩味，三七粉碎成細(xì)粉，過100目篩，地錦草加水煎煮二次，第一次加14倍量水，煎煮2小時(shí)，第二次加12倍量水，煎煮1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮成相對密度為1.41(40℃)的稠膏，加入三七細(xì)粉及適量糊精，混勻，制成顆粒，干燥，灌裝膠囊，制成1000粒，即得。
實(shí)施例2處方地錦草850g 三七50g制法以上兩味，三七粉碎成細(xì)粉，過125目篩，地錦草加水煎煮二次，第一次加10倍量水，煎煮2小時(shí)，第二次加8倍量水，煎煮1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮成相對密度為1.38(40℃)的稠膏，加入三七細(xì)粉及適量淀粉，混勻，制成顆粒，干燥，灌裝膠囊，制成1000粒，即得。
實(shí)施例3處方地錦草850g 三七50g
制法以上兩味，三七粉碎成細(xì)粉，過90目篩，地錦草加水煎煮二次，第一次加14倍量水，煎煮2小時(shí)，第二次加12倍量水，煎煮1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮成相對密度為1.40(40℃)的稠膏，加入三七細(xì)粉及適量糊精，混勻，制成顆粒，干燥，灌裝膠囊，制成1000粒，即得。
實(shí)施例4處方地錦草850g 三七200g制法以上兩味，三七粉碎成細(xì)粉，過100目篩，地錦草加水煎煮二次，第一次加10倍量水，煎煮2小時(shí)，第二次加8倍量水，煎煮1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮成相對密度為1.43(40℃)的稠膏，加入三七細(xì)粉及適量淀粉，混勻，制成顆粒，干燥，灌裝膠囊，制成1000粒，即得。
實(shí)施例5處方地錦草850g 三七200g制法以上兩味，三七粉碎成細(xì)粉，過125目篩，地錦草加水煎煮二次，第一次加14倍量水，煎煮2小時(shí)，第二次加12倍量水，煎煮1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮成相對密度為1.35(40℃)的稠膏，加入三七細(xì)粉及適量糊精，混勻，制成顆粒，干燥，灌裝膠囊，制成1000粒，即得。
實(shí)施例6處方地錦草850g 三七200g制法以上兩味，三七粉碎成細(xì)粉，過90目篩，地錦草加水煎煮二次，第一次加10倍量水，煎煮2小時(shí)，第二次加8倍量水，煎煮1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮成相對密度為1.42(40℃)的稠膏，加入三七細(xì)粉及適量淀粉，混勻，制成顆粒，干燥，灌裝膠囊，制成1000粒，即得。
實(shí)施例7處方地錦草2000g 三七200g制法以上兩味，三七粉碎成細(xì)粉，過100目篩，地錦草加水煎煮二次，第一次加14倍量水，煎煮2小時(shí)，第二次加12倍量水，煎煮1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮成相對密度為1.42(40℃)的稠膏，加入三七細(xì)粉及適量糊精，混勻，制成顆粒，干燥，灌裝膠囊，制成1000粒，即得。
實(shí)施例8處方地錦草2000g 三七200g制法以上兩味，三七粉碎成細(xì)粉，過125目篩，地錦草加水煎煮二次，第一次加10倍量水，煎煮2小時(shí)，第二次加8倍量水，煎煮1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮成相對密度為1.44(40℃)的稠膏，加入三七細(xì)粉及適量淀粉，混勻，制成顆粒，干燥，灌裝膠囊，制成1000粒，即得。
實(shí)施例9處方地錦草2000g 三七200g制法以上兩味，三七粉碎成細(xì)粉，過90目篩，地錦草加水煎煮二次，第一次加10倍量水，煎煮2小時(shí)，第二次加8倍量水，煎煮1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮成相對密度為1.44(40℃)的稠膏，加入三七細(xì)粉及適量淀粉，混勻，制成顆粒，干燥，灌裝膠囊，制成1000粒，即得。
實(shí)施例10處方地錦草1875g 三七93g制法以上兩味，三七粉碎成細(xì)粉，過100目篩，地錦草加水煎煮二次，第一次加14倍量水，煎煮2小時(shí)，第二次加12倍量水，煎煮1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮成相對密度為1.41(40℃)的稠膏，加入三七細(xì)粉及適量糊精，混勻，制成顆粒，干燥，灌裝膠囊，制成1000粒，即得。
實(shí)施例11處方地錦草1875g 三七93g制法以上兩味，三七粉碎成細(xì)粉，過125目篩，地錦草加水煎煮二次，第一次加10倍量水，煎煮2小時(shí)，第二次加8倍量水，煎煮1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮成相對密度為1.38(40℃)的稠膏，加入三七細(xì)粉及適量淀粉，混勻，制成顆粒，干燥，灌裝膠囊，制成1000粒，即得。
實(shí)施例12
處方地錦草1875g 三七93g制法以上兩味，三七粉碎成細(xì)粉，過90目篩，地錦草加水煎煮二次，第一次加12倍量水，煎煮2小時(shí)，第二次加10倍量水，煎煮1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮成相對密度為1.40(40℃)的稠膏，加入三七細(xì)粉及適量淀粉，混勻，制成顆粒，60℃條件下干燥3小時(shí)，灌裝膠囊，制成1000粒，即得。
實(shí)施例13處方地錦草1 875g三七93g制法以上兩味，三七粉碎成細(xì)粉，過125目篩，地錦草加水煎煮二次，第一次加12倍量水，煎煮2小時(shí)，第二次加10倍量水，煎煮1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮成相對密度為1.40(40℃)的稠膏，加入三七細(xì)粉及適量淀粉，混勻，制成顆粒，60℃條件下干燥3小時(shí)，灌裝膠囊，制成1000粒，即得。
實(shí)施例14處方地錦草1875g 三七93g以上兩味，三七粉碎成細(xì)粉，地錦草加水煎煮二次，第一次加10倍量水，煎煮2小時(shí)，第二次加10倍量水，煎煮1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮成相對密度為1.40(40℃)的稠膏，加入三七細(xì)粉及適量淀粉，混勻，制成顆粒，60℃條件下干燥3小時(shí)，灌裝膠囊，制成1000粒，即得。
對比例1處方地錦草850g 三七50g制法以上兩味，三七粉碎成細(xì)粉，過60目篩，地錦草加水煎煮二次，第一次加12倍量水，煎煮2小時(shí)，第二次加10倍量水，煎煮1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮成相對密度為1.35(40℃)的稠膏，加入三七細(xì)粉及適量淀粉，混勻，制成顆粒，干燥，灌裝膠囊，制成1000粒，即得。
對比例2處方地錦草850g 三七50g制法以上兩味，三七粉碎成細(xì)粉，過150目篩，地錦草加水煎煮二次，第一次加10倍量水，煎煮2小時(shí)，第二次加8倍量水，煎煮1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮成相對密度為1.48(40℃)的稠膏，加入三七細(xì)粉及適量淀粉，混勻，制成顆粒，干燥，灌裝膠囊，制成1000粒，即得。
對比例3處方地錦草850g 三七200g制法以上兩味，三七粉碎成細(xì)粉，過60目篩，地錦草加水煎煮二次，第一次加12倍量水，煎煮2小時(shí)，第二次加10倍量水，煎煮1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮成相對密度為1.45(40℃)的稠膏，加入三七細(xì)粉及適量淀粉，混勻，制成顆粒，干燥，灌裝膠囊，制成1000粒，即得。
對比例4處方地錦草850g 三七200g制法以上兩味，三七粉碎成細(xì)粉，過150目篩，地錦草加水煎煮二次，第一次加10倍量水，煎煮2小時(shí)，第二次加8倍量水，煎煮1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮成相對密度為1.45(40℃)的稠膏，加入三七細(xì)粉及適量淀粉，混勻，制成顆粒，干燥，灌裝膠囊，制成1000粒，即得。
對比例5處方地錦草2000g 三七50g制法以上兩味，三七粉碎成細(xì)粉，過60目篩，地錦草加水煎煮二次，第一次加12倍量水，煎煮2小時(shí)，第二次加10倍量水，煎煮1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮成相對密度為1.40(40℃)的稠膏，加入三七細(xì)粉及適量淀粉，混勻，制成顆粒，干燥，灌裝膠囊，制成1000粒，即得。
對比例6處方地錦草2000g 三七50g制法以上兩味，三七粉碎成細(xì)粉，過150目篩，地錦草加水煎煮二次，第一次加10倍量水，煎煮2小時(shí)，第二次加8倍量水，煎煮1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮成相對密度為1.44(40℃)的稠膏，加入三七細(xì)粉及適量淀粉，混勻，制成顆粒，干燥，灌裝膠囊，制成1000粒，即得。
對比例7
處方地錦草2000g 三七200g制法以上兩味，三七粉碎成細(xì)粉，過60目篩，地錦草加水煎煮二次，第一次加12倍量水，煎煮2小時(shí)，第二次加10倍量水，煎煮1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮成相對密度為1.40(40℃)的稠膏，加入三七細(xì)粉及適量淀粉，混勻，制成顆粒，干燥，灌裝膠囊，制成1000粒，即得。
對比例8處方地錦草2000g 三七200g制法以上兩味，三七粉碎成細(xì)粉，過150目篩，地錦草加水煎煮二次，第一次加10倍量水，煎煮2小時(shí)，第二次加8倍量水，煎煮1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮成相對密度為1.40(40℃)的稠膏，加入三七細(xì)粉及適量淀粉，混勻，制成顆粒，干燥，灌裝膠囊，制成1000粒，即得。
對比例9處方地錦草1875g 三七93g制法以上兩味，三七粉碎成細(xì)粉，過60目篩，地錦草加水煎煮二次，第一次加12倍量水，煎煮2小時(shí)，第二次加10倍量水，煎煮1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮成相對密度為1.35(40℃)的稠膏，加入三七細(xì)粉及適量淀粉，混勻，制成顆粒，干燥，灌裝膠囊，制成1000粒，即得。
對比例10處方地錦草1875g 三七93g制法以上兩味，三七粉碎成細(xì)粉，過150目篩，地錦草加水煎煮二次，第一次加10倍量水，煎煮2小時(shí)，第二次加8倍量水，煎煮1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮成相對密度為1.48(40℃)的稠膏，加入三七細(xì)粉及適量淀粉，混勻，制成顆粒，干燥，灌裝膠囊，制成1000粒，即得。
實(shí)驗(yàn)例1-本發(fā)明中三七粉碎粒度的優(yōu)化實(shí)驗(yàn)預(yù)實(shí)驗(yàn)表明三七粉碎粒度目數(shù)小于60目時(shí)，不利于藥品的制粒(顆粒粒度極不均勻)和有效成分的溶出，所以實(shí)施例中的粉碎粒度在60目以上。
休止角(angle of repose)是粒子在粉體堆積層的自由斜面上滑動(dòng)時(shí)受到重力和粒子間摩擦力的作用，當(dāng)這些力達(dá)到平衡時(shí)處于靜止?fàn)顟B(tài)。休止角是此時(shí)粉體堆積層的自由斜面與水平面所形成的最大角。休止角是檢驗(yàn)粉體流動(dòng)性好壞的最簡便的方法。休止角越小，說明摩擦力越小，流動(dòng)性越好，一般認(rèn)為休止角θ≤30°時(shí)流動(dòng)性好，休止角30°≤θ≤40°時(shí)可以基本滿足生產(chǎn)過程中流動(dòng)性的需求，當(dāng)θ＞40°將不利于膠囊顆粒的灌裝，這會(huì)引發(fā)灌裝不均勻的現(xiàn)象。
本發(fā)明采用固定漏斗法(奚念朱主編《藥劑學(xué)》第三版248頁-249頁)測定實(shí)施例1-20的灌裝前顆粒(中間體)的休止角；實(shí)施例1-20裝量差異測試采用(奚念朱主編《藥劑學(xué)》第三版頁，326頁)所述方法，數(shù)據(jù)如表1。
表1本發(fā)明中膠囊內(nèi)容物顆粒的休止角和膠囊的裝量差異數(shù)據(jù)
如上表所示實(shí)施例1-20的測試表明，當(dāng)三七粉碎粒度介于90-125目時(shí)，其休止角降低到30°以下，這有利于膠囊裝量的穩(wěn)定，從實(shí)際灌裝的差異也可以說明這一點(diǎn)。而當(dāng)三七粉碎粒度達(dá)到150目時(shí)，膠囊劑中顆粒的休止角增大，裝量差異較大這都不利于膠囊劑的生產(chǎn)，而當(dāng)三七粉碎粒度為60目-125目時(shí)，其休止角降低到30°以下，膠囊裝量也比較穩(wěn)定。
實(shí)驗(yàn)例2-本發(fā)明中地錦草提取時(shí)加水比例的優(yōu)化1.評價(jià)指標(biāo)的測定方法地錦草主含黃酮類化學(xué)成分和沒食子酸等有效成分。研究表明，地錦草有較好的止血作用。浸膏得率在一定的程度上能夠反映提取效果的優(yōu)劣，對制劑的成型、服用劑量的確定具有參考價(jià)值，所以選擇提取液中沒食子酸的含量和浸膏得率為指標(biāo)成分，通過試驗(yàn)確定二次煎煮的加水量。
浸膏得率測定照中國藥典2000年版一部附錄X A浸出物測定法，精密量取提取液20ml，置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3小時(shí)，移置干燥器中，冷卻30分鐘，迅速精密稱定重量，以干燥品計(jì)算供試品中水溶性浸出物的含量。按下列公式計(jì)算浸膏得率。結(jié)果見表2、3。
浸膏得率(％)＝浸膏重量/20ml藥液相當(dāng)于藥材量×100％。
沒食子酸含量測定照高效液相色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI D)測定。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-0.05％磷酸溶液(15∶85)為流動(dòng)相；檢測波長為271nm；柱溫為25℃。理論板數(shù)按沒食子酸峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。對照品溶液的制備精密稱取沒食子酸對照品適量，加50％甲醇制成每1ml含0.02毫克的溶液，即得。供試品溶液的制備精密量取定容到刻度的浸漬液2m1，置10ml棕色量瓶中，加水稀釋到刻度，搖勻，濾過，即得。
測定法分別吸取對照品溶液和供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，即得。結(jié)果見表1、2。
2.第一次加水量的確定取地錦草藥材125g，5份，第一次加水量分別為藥材量的8，10，12，14，16倍，煎煮2小時(shí)，濾過，濾液另存?zhèn)溆?，測定濾液中沒食子酸的含量和浸膏得率，結(jié)果見表2。
表2確定第一次加水量的因素
由表1可知，加水16倍量時(shí)，沒食子酸含量最高，但加10、12、14倍量水時(shí)沒食子酸量相近，但與8倍量水相差較大，由于沒食子酸為處方中的有效成分，故以沒食子酸含量為主要考察指標(biāo)，為了減少藥物成分受熱時(shí)間，節(jié)約能源，考慮還需繼續(xù)加水煎煮，選擇第一次加水量的最佳條件為10-12倍量水，優(yōu)選12倍量水。
3.第二次加水量的確定取地錦草藥材125g，四份，在第一次加水量確定的條件下，煎煮2小時(shí)，濾過，濾液棄去，煎煮第二次，加水量分別為藥材量的6、8、10、12、14倍，煎煮1小時(shí)，濾過，濾液另存?zhèn)溆?，測定濾液中沒食子酸的含量和浸膏得率，結(jié)果見表3。
表3確定第二次加水量的因素
由表2可知，確定第一次加水量為12倍水，來考察第二次加水量，加水量為14倍水時(shí)沒食子酸的含量最高，但浸膏得率也是最高，但是與8-12倍量水水煎煮液的浸膏得率和沒食子酸含量無差別，與6倍量水比較，相差較大。綜合考慮，考慮到節(jié)約用水和能源，此第二次加水量選擇8-12倍為宜，優(yōu)選10倍。
綜上所述，該提取工藝中二次煎煮的加水量的最優(yōu)選比例分別為第一次加水量為12倍水，第二次加水量為10倍水。
實(shí)驗(yàn)例3-本發(fā)明薄層色譜的定性鑒別方法取(實(shí)施例1-14)膠囊內(nèi)容物各0.5g，加水20ml使溶解，濾過，濾液加鹽酸3ml，置水浴中加熱1小時(shí)，放冷，濾過，濾液用醋酸乙酯振搖提取2次，每次20ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。
另取地錦草對照藥材1g，加水煎煮1小時(shí)，濾過，濾液濃縮至約20ml，加鹽酸3ml，同法制備對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-醋酸丁酯-甲酸-水(4∶4∶1∶1)的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以三氯化鋁試液，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
實(shí)驗(yàn)例4-本發(fā)明薄層色譜的定性鑒別方法取(實(shí)施例1-14)膠囊內(nèi)容物各0.5g，加水20ml使溶解，濾過，濾液加鹽酸6ml，置水浴中加熱1小時(shí)，放冷，濾過，濾液用正丁醇振搖提取2次，每次15ml，合并正丁醇液，蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，作為供試品溶液。
另取地錦草對照藥材1g，加水煎煮1小時(shí)，濾過，濾液濃縮至約20ml，加鹽酸6ml，同法制備對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-醋酸丁酯-甲酸-水(4∶4∶1∶0.5)的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以三氯化鋁試液，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
實(shí)驗(yàn)例5-本發(fā)明薄層色譜的定性鑒別方法取(實(shí)施例1-14)內(nèi)容物各0.5g，加甲醇50ml，加熱回流2小時(shí)，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，用水飽和的正丁醇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，用氨試液洗滌2次，每次20ml，棄去氨液，再用正丁醇飽和的水洗滌2次，每次20ml，棄去水液，正丁醇液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取人參皂苷Rb1、人參皂苷Rg1、三七皂苷R1對照品，加甲醇制成每1ml含0.5毫克的混合溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-水(13∶7∶2)10℃以下放置過夜的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
實(shí)驗(yàn)例6-本發(fā)明薄層色譜的定性鑒別方法取(實(shí)施例1-14)內(nèi)容物各0.5g，加乙醇50ml，加熱回流2小時(shí)，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，用乙酸乙酯提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，用氨試液洗滌2次，每次20ml，棄去氨液，再用正丁醇飽和的水洗滌2次，每次20ml，棄去水液，正丁醇液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取人參皂苷Rb1、人參皂苷Rg1、三七皂苷R1對照品，加甲醇制成每1ml含0.5毫克的混合溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-水(7∶3∶1)10℃以下放置過夜的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
實(shí)驗(yàn)例7-本發(fā)明高效液相色譜的定性和定量分析方法照高效液相色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI D)測定。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-0.05％磷酸溶液(15∶85)為流動(dòng)相；檢測波長為250-290nm；柱溫為25-35℃。理論板數(shù)按沒食子酸峰計(jì)算不低于3000。
對照品溶液的制備精密稱取沒食子酸對照品適量，加50％甲醇制成每1ml含0.02毫克的溶液，即得。
供試品溶液的制備取本品裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物，研細(xì)，混勻，取約0.2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50％甲醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用50％甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液1ml，置10ml量瓶中，加50％甲醇至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.45μm)濾過，取續(xù)濾液，即得。
測定法分別吸取對照品溶液(實(shí)施例1-14)和供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
實(shí)驗(yàn)例8-本發(fā)明高效液相色譜的定性和定量分析方法照高效液相色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI D)測定。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-0.05％磷酸溶液(20∶80)為流動(dòng)相；檢測波長為250-280nm；柱溫為25-30℃。理論板數(shù)按沒食子酸峰計(jì)算不低于3000。
對照品溶液的制備精密稱取沒食子酸對照品適量，加50％甲醇制成每1ml含0.02毫克的溶液，即得。
供試品溶液的制備取本品裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物，研細(xì)，混勻，取約0.2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50％甲醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用50％甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液1ml，置10ml量瓶中，加50％甲醇至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.45μm)濾過，取續(xù)濾液，即得。
測定法分別吸取對照品溶液(實(shí)施例1-14)和供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
實(shí)驗(yàn)例9-本發(fā)明膠囊中沒食子酸含量限定的確定測定取本品10批，按正文中供試品溶液的制備方法操作，并按實(shí)驗(yàn)例7中色譜條件測定沒食子酸的含量，結(jié)果見表4。
表4樣品測定結(jié)果(n＝3)
根據(jù)上述5批樣品的測定結(jié)果，每粒沒食子酸平均含量為21.2毫克，考慮藥材來源、操作過程等因素的差異，因此，以平均含量的70％為下限，規(guī)定本品每粒膠囊含沒食子酸(C7H605)計(jì)，不得少于14.8毫克，即每粒膠囊含以沒食子酸含量介于14.8-21.2毫克之間。
實(shí)驗(yàn)例10-本發(fā)明實(shí)驗(yàn)效果目的觀察本發(fā)明膠囊內(nèi)容物對凝血時(shí)間的影響。
原理血液離體后，VII因子被異物(玻面接觸)所活化，在血小板因子及鈣離子的參與下，經(jīng)過一系列反應(yīng)生成纖維蛋白而凝血。
器材注射器、內(nèi)徑1毫米、長10厘米的試管、載玻片、毛細(xì)玻管(內(nèi)徑1毫米、長10厘米)、灌胃針頭、大頭針、秒表、眼科彎鑷、棉花、鼠籠。
試劑生理鹽水、本發(fā)明膠囊水相混旋液(1.25克/毫升)、苦味酸。
動(dòng)物小白鼠18-22g。
方法(一)毛細(xì)玻管法取小白鼠80只，隨機(jī)分為16組，苦味酸標(biāo)記。給藥組灌胃本發(fā)明膠囊水相混旋液0.4毫升/20克，60分鐘后，用玻璃毛細(xì)管插入小鼠內(nèi)眥球后靜脈叢，深約4-5毫米。自血液流進(jìn)管內(nèi)開始計(jì)時(shí)。血液注滿后取出毛細(xì)管平放于桌上。每隔30秒，折斷兩端毛細(xì)管約0.5厘米，并緩慢向左右拉開，觀察折斷處是否有血凝絲至血凝絲出現(xiàn)為止，所歷時(shí)間即為血凝時(shí)間?？瞻讓φ战M灌胃同等體積生理鹽水，測定并記錄其凝血時(shí)間。
表5本發(fā)明對小鼠凝血時(shí)間的影響(毛細(xì)玻管法)
注與空白對照組比較**P＜0.001*P＜0.01(二)玻片法小鼠分組，標(biāo)記及給藥方法和劑量同上。給藥后60分鐘，用眼科彎鑷迅速摘去小鼠一側(cè)眼球，即有血液流出。于載玻片的兩端各滴一滴血，血滴直徑約5毫米，立即用秒表計(jì)時(shí)。每隔30秒用清潔大頭針自血滴邊緣向里輕輕拔動(dòng)一次，并觀察有無血絲挑起。從采血開始至挑起血絲止，所歷時(shí)間即凝血時(shí)間。另一滴血供后復(fù)驗(yàn)。記錄凝血時(shí)間?？瞻讓φ战M方法平行操作。
表6本發(fā)明對小鼠凝血時(shí)間的影響(玻片法)
注與空白對照組比較**P＜0.001*P＜0.01三七止血膠囊，顧名思義，其臨床藥效最直接就是用于出血的治療，本發(fā)明中通過測定對不同工藝、處方下膠囊內(nèi)容物的小鼠凝血時(shí)間的數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)當(dāng)在對比例中三七的粉碎粒度為60目時(shí)，膠囊內(nèi)容物的凝血效果變得不明顯，而且不穩(wěn)定，這提示三七全粉入藥時(shí)應(yīng)該將其粉碎達(dá)到一定粒度時(shí)，效果比較明顯，本發(fā)明中，當(dāng)粉碎粒度為90-150目時(shí)，凝血效果較好。鑒于三七粉碎粒度為150目時(shí)，膠囊內(nèi)容物流動(dòng)性不好，所以粉碎粒度為90-125目較好，其中優(yōu)選100目。
權(quán)利要求
1.一種三七止血膠囊，是由地錦草850-2000重量份、三七50-200重量份和適量藥用輔料制成的膠囊劑，其特征在于將三七粉碎為粒度90-125目的細(xì)粉。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述三七止血膠囊，其特征在于三七粉碎為粒度100目的細(xì)粉。
3.權(quán)利要求1-2所述三七止血膠囊的制備方法，其特征在于按照以下步驟制備(一)稱量按照上述用量稱取地錦草和三七；(二)煎煮和濃縮地錦草加水煎煮2次，第一次加10-12倍量水，煎煮1.5-2.5小時(shí)，第二次加8-12倍量水，煎煮0.5-1.5小時(shí)，合并濾液，濾液濃縮至相對密度為1.35-1.48的稠膏；(三)粉碎取三七，粉碎，過90-125目篩，得三七細(xì)粉；(四)混勻與制粒取上述稠膏、三七細(xì)粉及適量輔料，制粒，烘干，整粒，得到膠囊顆粒；(五)將上述膠囊顆粒填充為膠囊。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述三七止血膠囊的制備方法，其特征在于所述步驟(二)中地錦草加水煎煮2次，第一次加10-12倍量水，煎煮1-2.5小時(shí)，第二次加8-12倍量水，煎煮0.5-1小時(shí)，合并濾液，濾液濃縮至相對密度為1.35-1.40的稠膏。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述三七止血膠囊的制備方法，其特征在于所述步驟(二)中地錦草加水煎煮2次，第一次加12倍量水，煎煮2小時(shí)，第二次加10倍量水，煎煮1小時(shí)，合并濾液，濾液濃縮至相對密度為1.40的稠膏。
6.權(quán)利要求1-2所述三七止血膠囊的質(zhì)量控制方法，其特征在于按照以下步驟進(jìn)行(一)取待測膠囊內(nèi)容物0.5g，加水使溶解，濾過，濾液加無機(jī)酸，置水浴中加熱1小時(shí)，放冷，濾過，濾液用疏水有機(jī)溶劑振搖提取2次，合并有機(jī)溶劑，蒸干，殘?jiān)蛹状际谷芙猓玫焦┰嚻啡芤海?二)另取地錦草對照藥材1g，加水煎煮1小時(shí)，濾過，濾液加無機(jī)酸，置水浴中加熱1小時(shí)，放冷，濾過，濾液用疏水有機(jī)溶劑振搖提取2次，合并有機(jī)溶劑，蒸干，殘?jiān)蛹状际谷芙猓玫綄φ账幉娜芤海?三)吸取上述兩種相同體積的溶液，分別點(diǎn)于同一硅膠薄層板上，以氯仿-醋酸丁酯-甲酸-水(4∶4∶1∶1)的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以三氯化鋁試液，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
7.權(quán)利要求1-2所述三七止血膠囊的質(zhì)量控制方法，其特征在于按照以下步驟進(jìn)行(一)取待測膠囊內(nèi)容物0.5g，加甲醇，加熱回流，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀谷芙?，用水飽和的正丁醇提?次，合并正丁醇液，用氨試液洗滌2次，棄去氨液，再用正丁醇飽和的水洗滌2次，棄去水液，正丁醇液蒸干，殘?jiān)蛹状际谷芙?，作為供試品溶液?二)另取人參皂苷Rb1、人參皂苷Rg1、三七皂苷R1對照品，加甲醇制成每1ml含0.5毫克的混合溶液，作為對照品溶液；(三)吸取上述相同體積兩種溶液，分別點(diǎn)于同一硅膠薄層板上，以氯仿-甲醇-水(13∶7∶2)10℃以下放置過夜的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
8.權(quán)利要求1-2所述三七止血膠囊的質(zhì)量控制方法，其特征在于按照以下步驟進(jìn)行(一)對照品溶液的制備精密稱取沒食子酸對照品適量，加50％甲醇制成每1ml含0.02毫克的溶液，即得；(二)供試品溶液的制備取本品裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物，研細(xì)，混勻，取約0.2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50％甲醇50ml，密塞，稱定重量，放冷，再稱定重量，用50％甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液1ml，置10ml量瓶中，加50％甲醇至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.45μm)濾過，取續(xù)濾液，即得；(三)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-0.05％磷酸溶液(15-30∶70-85)為流動(dòng)相；檢測波長為250-290nm；柱溫為25-35℃；理論板數(shù)按沒食子酸峰計(jì)算不低于3000；測定法分別吸取對照品溶液和供試品溶液注入液相色譜儀，測定。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述三七止血膠囊的質(zhì)量控制方法，其特征在于所述三七止血膠囊中沒食子酸含量介于14.8到21.2毫克之間。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種三七止血膠囊及其制備方法和質(zhì)量控制方法，本發(fā)明所述的三七止血膠囊是地錦草、三七和藥用輔料組成，本發(fā)明的藥物采用科學(xué)優(yōu)化的優(yōu)化工藝，通過對工藝和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的改進(jìn)。發(fā)明中采用地錦草850－2000重量份、三七50－200重量份和適量藥用輔料制成的膠囊劑，將三七粉碎為粒度90－125目的細(xì)粉。本發(fā)明的膠囊具有療效好、適用人群廣、使用方便的優(yōu)點(diǎn)，可以行瘀止血，消腫，定痛。用于吐血，衄血，血痢血崩，產(chǎn)后流血不止，月經(jīng)過多及外傷出血。
文檔編號A61P7/04GK101019915SQ20071009006
公開日2007年8月22日 申請日期2007年3月27日 優(yōu)先權(quán)日2007年3月27日
發(fā)明者楊文龍 申請人:楊文龍