專利名稱：[(2－n－丙基－4－甲基－1H－苯并咪唑)－6－基]甲酰胺－1－基]甲基聯(lián)苯類化合物 ...的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術領域，是一類具有血管緊張素II AT1受體抑制活性的化學結構新穎的[(2-n-丙基-4-甲基-1H-苯并咪唑)-6-甲酰胺-1-基]甲基聯(lián)苯類化合物及其合成方法作為治療心腦血管疾病的藥物。
背景技術：
心血管疾病發(fā)病率高，并發(fā)癥多而重，嚴重威脅人類健康。非肽類血管緊張素AT1受體拮抗劑(ARB)是作用于腎素-血管緊張素系統(tǒng)(RAS)的一類新型抗高血壓藥，與血管緊張素轉化酶抑制劑(ACEI)相比，降壓作用更顯著，更有選擇性的阻斷RAS，且副作用小，已被列為六大類抗高血壓藥物之一。
腎素-血管緊張素系統(tǒng)對調節(jié)人體血壓、體液平衡和電介質平衡方面具有重要的作用，它激活血漿內血管緊張素原生成無升壓活性的血管緊張素I(AI，十肽)。AI在血管緊張素轉化酶(ACE)作用下，轉變?yōu)檠芫o張素II(AII，八肽)。AII有收縮血管，促進醛固酮分泌的作用，它是高血壓的主要誘因之一，在高血壓病的生理病理中起著重要作用。血管緊張素II受體有四種亞型，即AT1、AT2、AT3、AT4。以AT1和AT2為主，AT1受體幾乎介導血管緊張素II受體的所有病理生理功能。AT2受體亞型目前知道甚少，據認為可能與胚胎發(fā)育過程中細胞增殖和分化有關。血管緊張素II受體拮抗劑作為針對RAS系統(tǒng)抗高血壓新藥，已表現出親和力強、選擇性高、口服有效、半衰期長、耐受性好等優(yōu)點，作用直接，副作用小。自1994年DuPount/Merck公司研發(fā)的第一個非肽類血管緊張素II受體拮抗劑氯沙坦鉀在瑞典上市以來，到目前為止相繼有纈沙坦、坎地沙坦、替米沙坦等8個單方制劑和3個復方制劑批準上市。已進入臨床及臨床前階段的藥物有50多個，它們大多是以氯沙坦為先導化合物，進行結構修飾和改造而獲得的AT1受體拮抗劑。血管緊張素II受體拮抗劑在臨床上的作用包括抗高血壓、抗心力衰竭、抗血栓形成、保護心、腦、腎和血管，另外還具有逆轉左心室肥大的作用。最新的研究結果表明，ARB還具有抑制腫瘤生長因子TGF-β的作用。由于ARB降壓效果顯著，尤其是對心血管疾病的獨特療效，ARB已成為世界衛(wèi)生組織WHO指定的降壓藥之一。

發(fā)明內容
本發(fā)明以已上市的氯沙坦為先導化合物進行結構修飾和改造，設計合成化學結構新穎的[(2-n-丙基-4-甲基-1H-苯并咪唑)-6-基]甲酰胺-1-基]甲基聯(lián)苯類化合物。結構通式如下
式中R1＝苯乙胺基，N-甲基哌嗪，R2＝羧基，羧酸鈉鹽，羧酸鉀鹽。
本發(fā)明化合物制備方法如下1、合成路線 2、操作步驟在N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中加入化合物A和B，低溫條件下加入叔丁醇鉀得到化合物C。
化合物C和氫氧化鈉(NaOH)在甲醇溶液中水解得到化合物D。
本發(fā)明可以用于制備治療心腦血管疾病的各類藥物。
本發(fā)明的優(yōu)點是本發(fā)明化合物化學結構新穎，其血管緊張素II AT1受體抑制活性優(yōu)于已上市藥物氯沙坦，可以用于制備治療心腦血管疾病的各類藥物及其制劑。
具體實施例方式
下面結合實施例對本發(fā)明作進一步說明，但本發(fā)明并不只限于下面的例子。
實施例1中間體4’-{[N-(β-苯乙基)-[(2-n-丙基-4-甲基-1H-苯并咪唑)-6-基]甲酰胺-1-基]甲基}聯(lián)苯2-羧酸甲酯的制備向50ml單口燒瓶中加入20ml N，N-二甲基甲酰胺(DMF)，N-(β-苯乙基)-[(2-n-丙基-4-甲基-1H-苯并咪唑)-6-基]甲酰胺(0.7g，2.18mmol)，于冰水浴條件下加入叔丁醇鉀(0.26g，2.3mmol)，攪拌30分鐘后，加入4’-溴甲基聯(lián)苯-2-甲酸甲酯(0.7g，2.30mmol)，室溫下反應14小時，倒入100ml冷水中，攪拌后用50ml×3乙酸乙酯萃取，合并有機相，100ml×3水洗有機相，無水MgSO4干燥，減壓蒸餾除去乙酸乙酯，殘留物用柱色譜分離，洗脫劑為乙酸乙酯，得到白色固體0.85g(1.53mmol)，產率72.0％，熔點138～140℃；IR(KBr)3284，3026，2982，1731，1629，1539，1290，1086，832，752，697cm-1；1H NMR(CDCl3)δH1.06(t，J＝7.37Hz，3H)，1.86(m，J＝7.40Hz，2H)，2.73(s，3H)，2.96(m，J＝8.03Hz，4H)，3.66(s，3H)，3.75(m，J＝6.69Hz，2H)，5.44(s，2H)，6.31(s，1H)，7.07～7.88(m，15H)。
實施例2條件同實施例1，制備中間體4’-{[N-(N-甲基哌嗪)-[(2-n-丙基-4-甲基-1H-苯并咪唑)-6-基]甲酰胺-1-基]甲基}聯(lián)苯2-羧酸甲酯?；衔镂锢沓禐榘咨腆w，熔點151～153℃，產率74.6％；IR(KBr)3059，2933，2794，2234，1727，1629，1510，1453，1294，1147，1089，910，762，730；1H NMR(CDCl3)δH0.97(t，J＝7.32Hz，3H)，1.78(m，J＝7.36Hz，2H)，2.23(s，3H)，2.36(s，4H)，2.65(s，3H)，2.84(t，J＝8.00Hz，2H)，3.44(s，4H)，3.57(s，3H)，5.34(s，2H)，7.00～7.78(m，10H)。
實施例3化合物4’-{[N-(β-苯乙基)-[(2-n-丙基-4-甲基-1H-苯并咪唑)-6-基]甲酰胺-1-基]甲基}聯(lián)苯2-甲酸的制備在50ml的單口燒瓶中加入4’-{[N-(β-苯乙基)-[(2-n-丙基-4-甲基-1H-苯并咪唑)-6-基]甲酰胺-1-基]甲基}聯(lián)苯2-羧酸甲酯(0.6g，1.1mmol)，40ml甲醇，20ml2mol/L的氫氧化鈉溶液，回流反應4小時，減壓蒸餾除去甲醇，剩余液體過濾，冷卻，用2mol/L的冷鹽酸調節(jié)至pH 6，析出白色固體，過濾，水洗，干燥得到白色固體重0.4g(0.9mmol)，產率68.9％，熔點284～286℃。IR(KBr)3288，3028，2948，2858，2357，1739，1631，1533，1443，1291，1285，700；1H NMR(DMSO)δH0.94(t，J＝7.26Hz，3H)，1.76(m，J＝7.40Hz，2H)，2.56(s，3H)，2.83(t，J＝7.22Hz，4H)，3.47(t，J＝6.45Hz，2H)，5.56(s，2H)，7.09～7.11(d，J＝8.2Hz，2H)，7.18～7.55(m，11H)，7.69～7.62(dd，J＝7.70Hz，1H)，7.88(s，1H)，8.48(d，J＝5.56Hz，1H)，12.7(s，1H)；MS(EI)，m/z531(M+＝1)；元素分析C34H33N3O3計算值(％)C，76.83；H，6.21；N，7.91；實測值(％)C，76.71；H，6.30；N，7.85。
實施例4條件同實施例3，制備化合物4’-{[N-(N-甲基哌嗪)-[(2-n-丙基-4-甲基-1H-苯并咪唑)-6-基]甲酰胺-1-基]甲基}聯(lián)苯2-甲酸?；衔镂锢沓禐榘咨腆w，熔點252～254℃，產率74.1％；IR(KBr)2966，2921，2876，2365，1658，1622，1470，1398，1264，772；1HNMR(DMSO)δH0.96(t，J＝7.32Hz，3H)，1.76(m，J＝7.54Hz，2H)，2.17(s，3H)，2.29(s，4H)，2.50(s，3H)，2.87(t，J＝7.48Hz，2H)，3.44(m，4H)，5.55(s，2H)，7.00(s，1H)，7.10～7.12(d，J＝8.17Hz，2H)，7.28～7.32(t，J＝8.34Hz，4H)，7.40～7.43(t，J＝7.60Hz，1H)，7.50～7.54(t，J＝7.52Hz，1H)，7.67(d，J＝7.56Hz，1H)；MS(EI)，m/z510(M+＝1)；元素分析C31H34N4O3計算值(％)C，72.94；H，6.66；N，10.98；實測值(％)C，72.81；H，6.76；N，11.10。
實施例5化合物4’-{[N-(β-苯乙基)-[(2-n-丙基-4-甲基-1H-苯并咪唑)-6-基]甲酰胺-1-基]甲基}聯(lián)苯2-羧酸鈉鹽的制備在25ml的單口燒瓶中加入化合物4’-{[N-(β-苯乙基)-[(2-n-丙基-4-甲基-1H-苯并咪唑)-6-基]甲酰胺-1-基]甲基}聯(lián)苯2-甲酸0.4g(0.9mmol)，10ml水，攪拌直到化合物溶解，加入NaOH 36mg，攪拌30分鐘，減壓蒸餾除去水分，得到4’-{[N-(β-苯乙基)-[(2-n-丙基-4-甲基-1H-苯并咪唑)-6-基]甲酰胺-1-基]甲基}聯(lián)苯2-羧酸鈉鹽0.4g(0.9mmol)，白色固體，產率97％。
實施例6條件同實施例5，制備化合物4’-{[N-(N-甲基哌嗪)-[(2-n-丙基-4-甲基-1H-苯并咪唑)-6-基]甲酰胺-1-基]甲基}聯(lián)苯2-羧酸鈉鹽，白色固體，產率97％。
實施例7化合物4’-{[N-(β-苯乙基)-[(2-n-丙基-4-甲基-1H-苯并咪唑)-6-基]甲酰胺-1-基]甲基}聯(lián)苯2-羧酸鉀鹽的制備在25ml的單口燒瓶中加入化合物4’-{[N-(β-苯乙基)-[(2-n-丙基-4-甲基-1H-苯并咪唑)-6-基]甲酰胺-1-基]甲基}聯(lián)苯2-甲酸0.4g(0.9mmol)，10ml水，攪拌直到化合物溶解，加入KaOH 51mg，攪拌30分鐘，減壓蒸餾除去水分，得到4’-{[N-(β-苯乙基)-[(2-n-丙基-4-甲基-1H-苯并咪唑)-6-基]甲酰胺-1-基]甲基}聯(lián)苯2-羧酸鉀鹽0.4g(0.9mmol)，白色固體，產率97％。
實施例8條件同實施例7，制備化合物4 ’-{[N-(N-甲基哌嗪)-[(2-n-丙基-4-甲基-1H-苯并咪唑)-6-基]甲酰胺-1-基]甲基}聯(lián)苯2-羧酸鉀鹽，白色固體，產率97％。
血管緊張素II AT1受體抑制活性測定[125I]-Sar1，IIe8-血管緊張素II 結合實驗實驗是在總體積為250μl的試管中進行的，試管排列在microtitre plate format上。溫孵的混合液中包括50μl[125I]-SI血管緊張素II，(80～200pm，70,000～180,000c.p.m)；25μl的取代藥物或血管緊張素II來確定非特異性結合(1μM)；溫孵的緩沖液結合血管平滑肌細胞(RASM)細胞膜的實驗在下列緩沖液中進行50mM Tris HCl pH 7.4、4.5mM MgCl2、0.1％小牛血清蛋白、1mM PMSF，0.24 TI unites cm-1抑肽酶和0.1mg ml-11，10-菲咯啉。結合鼠腎上腺皮質(RAC)細胞膜的實驗在下列緩沖液中進行50mM Tris HCl pH 7.4、4.5mM MgCl2、0.22％小牛血清蛋白。在某些情況下小牛血清蛋白的濃度可改為0.07％或0.01％。結合實驗時首先將100μl膜溶液(7～12μg protein)在溫孵的緩沖液中稀釋以引發(fā)反應。試管溫孵在37℃(RASM細胞膜)或22℃(RAC細胞膜)2小時，并不斷震蕩(Easyshaker，SLT-Labinstruments，A-5082 Grodig，Austria)。結合的和游離的放射性配基同時通過Tomtec細胞收集器和與其相連的濾紙過濾，濾紙事先在0.1％的聚乙烯亞胺(PEI)潤濕1小時以降低非特異性結合。使用預洗滌循環(huán)中洗掉過量的PEI，細胞膜在4℃被過濾，使用150mM NaCl，50mM Tris HCl pH 7.4洗滌濾紙。將濾紙取下并微波加熱，膜的那一面向上，微波開到最大功率3×2min。干燥的濾紙放入樣品管中，浸漬的薄片用核海高技術有限公司r計數測量儀計數，計數結果通過Sigma-plot軟件計算出化合物半抑制濃度(IC50值)。
化合物4’-{[N-(β-苯乙基)-[(2-n-丙基-4-甲基-1H-苯并咪唑)-6-基]甲酰胺-1-基]甲基}聯(lián)苯2-甲酸IC500.0676nmol/L化合物4’-{[N-(N-甲基哌嗪)-[(2-n-丙基-4-甲基-1H-苯并咪唑)-6-基]甲酰胺-1-基]甲基}聯(lián)苯2-甲酸IC500.117nmol/L本發(fā)明化學結構新穎的[(2-n-丙基-4-甲基-1H-苯并咪唑)-6-基]甲酰胺-1-基]甲基聯(lián)苯類化合物是一類具有血管緊張素II AT1受體抑制活性的化合物，本發(fā)明為深入研究和開發(fā)新的治療心腦血管疾病的藥物打下良好基礎。
權利要求
1.[(2-n-丙基-4-甲基-1H-苯并咪唑)-6-基]甲酰胺-1-基]甲基聯(lián)苯類化合物、合成方法及用途，其特征在于結構通式如下 式中R1＝苯乙胺基，N-甲基哌嗪，R2＝羧基，羧酸鈉鹽，羧酸鉀鹽。
2.按權利要求1所述的[(2-n-丙基-4-甲基-1H-苯并咪唑)-6-基]甲酰胺-1-基]甲基聯(lián)苯類化合物、合成方法及用途，其特征在于1)、合成路線 2)、操作步驟在N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中加入化合物A和B，低溫條件下加入叔丁醇鉀得到化合物C?；衔顲和氫氧化鈉(NaOH)在甲醇溶液中水解得到化合物D。
3.按權利要求1中的[(2-n-丙基-4-甲基-1H-苯并咪唑)-6-基]甲酰胺-1-基]甲基聯(lián)苯類化合物、合成方法及用途，其特征在于用于制備治療心腦血管疾病的各類藥物。
全文摘要
本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術領域，是具有血管緊張素II AT1受體抑制活性的化學結構新穎的[(2－n－丙基－4－甲基－1H－苯并咪唑)－6－基]甲酰胺－1－基]甲基聯(lián)苯類化合物及其合成方法用于血管緊張素II受體拮抗劑。R
文檔編號A61P9/00GK101037414SQ20071009850
公開日2007年9月19日 申請日期2007年4月19日 優(yōu)先權日2007年4月19日
發(fā)明者周智明, 薛為哲, 余偉發(fā) 申請人:北京理工大學