專利名稱：預(yù)防及治療缺乳、少乳、婦科疾病的中藥制劑、其制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種治療缺乳、少乳及預(yù)防和治療婦科疾病的中藥制劑、其制備方法和用途，特別是一種治療婦女產(chǎn)后缺乳、少乳、治療乳腺增生病/征、子宮肌瘤以及預(yù)防和治療乳腺癌的中藥制劑，及其制備方法和用途。
背景技術(shù)：
母乳是嬰兒理想的營(yíng)養(yǎng)品，其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高于任何代乳品，母乳在營(yíng)養(yǎng)學(xué)、免疫學(xué)和心理學(xué)等方面都具有特殊的功能，對(duì)嬰兒健康成長(zhǎng)起著極重要的作用，母乳喂養(yǎng)較人工喂養(yǎng)有許多優(yōu)點(diǎn)，且對(duì)產(chǎn)婦的產(chǎn)后恢復(fù)有良好作用，并可預(yù)防乳腺癌。遺憾的是臨床上出現(xiàn)許多產(chǎn)婦分娩后少有或無乳汁的情況，給母乳喂養(yǎng)帶來了極大的困難?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)則認(rèn)為產(chǎn)婦分娩后，雌激素(E2)突然下降，對(duì)垂體泌乳素(PRL)的抑制作用解除，乳腺開始泌乳，使乳汁排出。據(jù)此，已經(jīng)開發(fā)了多種產(chǎn)后催乳的中藥。其中，本發(fā)明的發(fā)明人發(fā)明的，申請(qǐng)?zhí)枮?21294135、CN01127576.6的中國(guó)專利中公開的中藥制劑，催乳效果明顯，但其存在著服用量大，制劑內(nèi)用糖量多，服用不方便的缺點(diǎn)。
乳腺增生癥又稱“乳腺結(jié)構(gòu)不良”，在病理上表現(xiàn)為小葉導(dǎo)管和腺泡增多，間質(zhì)結(jié)締組織增生等而形成一系列病理改變，導(dǎo)致乳腺內(nèi)部供血變化。為成年婦女常見病、多發(fā)病，近年認(rèn)為，乳腺增生癥是乳腺癌發(fā)病的重要因素之一，尤其是乳腺增生癥非典型增生階段，為乳腺癌的癌前病變。目前，治療乳腺增生的中醫(yī)中藥有乳僻消、乳塊消、乳安片、百消丹、逍遙丸、小金丹等。西藥有5％碘化鉀、溴隱停、丹那唑。但中藥存在著服藥周期長(zhǎng)，效果不佳的缺陷，西藥的副作用較大。
子宮肌瘤(uterine myoma)醫(yī)學(xué)上被稱為子宮平滑肌瘤，是女性生殖器官中最常見的良性腫瘤，也是人體中常見的腫瘤之一。子宮肌瘤主要由子宮平滑肌細(xì)胞增生而形成。其中有少量結(jié)締組織纖維僅作為一種支持組織而存在。子宮肌瘤的臨床表現(xiàn)常隨肌瘤生長(zhǎng)的部位，大小，生長(zhǎng)速度，有無繼發(fā)變性及合并癥等而異?，F(xiàn)有的中藥的服藥期長(zhǎng)，療效慢，治療子宮肌瘤的藥物主要是西藥。雖然有若干項(xiàng)中國(guó)專利申請(qǐng)涉及治療子宮肌瘤的中藥制劑，但市場(chǎng)上使用較多的僅有修正藥業(yè)、吉林首席藥業(yè)等生產(chǎn)的婦康片。
乳腺癌(mammary carcinoma)是人類最常見的一種惡性腫瘤，也是女性主要惡性腫瘤之一。女性的乳房組織與女性的內(nèi)分泌、雌激素有直接關(guān)連。男性患乳腺癌的機(jī)會(huì)只有女性患者的百分之一。女性乳房的發(fā)育是受雌激素的影響。已經(jīng)證實(shí)雌酮與雌二醇對(duì)乳腺癌有影響。乳房的惡性腫瘤絕大多數(shù)系源于乳腺的上皮組織(乳癌)，少數(shù)可源自乳房的各種非上皮組織(各種肉瘤)，偶可見到混合性的癌肉瘤。研究表明，絕經(jīng)前和絕經(jīng)后雌激素是刺激發(fā)生乳腺癌的明顯因素。此外，遺傳因素、飲食因素、外界理化因素以及某些乳房良性疾病與乳癌的發(fā)生有一定關(guān)系。
人民衛(wèi)生出版社出版的高等醫(yī)藥院校教材“婦產(chǎn)科學(xué)”第三版第282頁指出子宮肌瘤確切的發(fā)病因素尚不明，……提示子宮肌瘤的生長(zhǎng)和發(fā)生與雌激素有關(guān)，雌激素能使肌細(xì)胞增生肥大……所以子宮肌瘤的發(fā)生可能是該部位的組織選擇性的保留有濃度較高的雌激素，也可能是肌瘤局部的代謝能力不足，以致雌二醇濃度過高……沈陽出版社出版的中國(guó)醫(yī)學(xué)家經(jīng)驗(yàn)文庫的“臨床普通外科學(xué)”的第415頁指出，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明，用較大劑量的雌激素可引起乳腺發(fā)生囊性改變，……”，該文同時(shí)指出，乳腺病“甚至被認(rèn)為是癌(乳腺癌，本案發(fā)明人注)變得危險(xiǎn)因素之一”。北京人民軍醫(yī)出版社出版的臨床常見病癥診療叢書“乳腺疾病的診斷與治療”第97頁指出，乳腺增生可能與……部分乳腺組織對(duì)雌激素作用過分敏感有關(guān)……有學(xué)者認(rèn)為是一種癌變得前期病變。
國(guó)家科學(xué)技術(shù)學(xué)術(shù)著作出版基金資助的北京科學(xué)技術(shù)文獻(xiàn)出版社出版的“臨床生殖內(nèi)分泌學(xué)(女性與男性)”的第527頁指出哺乳并閉經(jīng)的婦女其循環(huán)的雌二醇水平……與正常周期婦女……相比明顯的低?！痛贫紶顟B(tài)可產(chǎn)生一些癥狀……某些依賴于雌二醇的婦科疾病，如……子宮肌瘤是有利的。
通過上面的研究表明，本發(fā)明所述的缺乳少乳、乳腺增生癥、子宮肌瘤以及乳腺癌產(chǎn)生的機(jī)理在低雌激素的狀態(tài)下是可以得到緩解的，又及，CN02129413.5的提取方法，難以將藥物的有效成分充分提取，而且得到的藥物雖然指出了可以將所述配方用于各種劑型，但是，其沒有具體提及片劑，因此，本發(fā)明所述的中藥制劑在催乳方面主要是針對(duì)片劑的驗(yàn)證和實(shí)驗(yàn)，對(duì)于其它適應(yīng)癥則不局限于此，有鑒于此，特提出本發(fā)明。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種治療婦女產(chǎn)后缺乳、少乳，預(yù)防及治療乳腺增生病/征、子宮肌瘤或乳腺癌的中藥制劑，該中藥具有療效明確、服藥周期相對(duì)較短、副作用小、服用方便的優(yōu)點(diǎn)。
本發(fā)明的另一目的在于提供通過服用本發(fā)明所述的中藥，適宜的降低雌激素水平，以便達(dá)到治療和改善缺乳、少乳，乳腺增生病/征或子宮肌瘤以及防治乳腺癌的藥物的用途。
本發(fā)明的第三個(gè)目的在于提供上述中藥的制備方法，該方法通過水提和醇提，有效提取了各中藥藥材中的有效成分并制備成適宜給藥的各種劑型。
本發(fā)明所述的中藥，至少包括黃芪100-487重量份黨參100-487重量份白術(shù)50-196重量份當(dāng)歸50-196重量份川芎49-146重量份，
所述中藥通過如下工藝制備①將黃芪、黨參加水煎煮至少兩次，將濾液濃縮得到水煮稠膏，②將白術(shù)、當(dāng)歸、川芎加60％--90％的乙醇回流提取至少兩次，提取液經(jīng)濃縮得到提取稠膏，③將水煮稠膏1-5重量份和提取稠膏1-5重量份混合得混合稠膏，然后加入輔料制成各種制劑。
其中，黃芪的主要成分為黃芪甲苷、黃酮及黃芪多糖，均為活性成分，除黃酮外均能溶于水及中度醇，可采用水提。黨參具有補(bǔ)中益氣，健脾益肺的作用，含有黨參苷、菊糖、果糖等一般水溶性成分，也可采用水作溶媒。
白術(shù)主要含揮發(fā)油，揮發(fā)油中主含蒼術(shù)酮、蒼術(shù)醇等，均易溶于醇難溶于水中。當(dāng)歸主含揮發(fā)油，油中成分能增加血流量，改善外周循環(huán)。川芎含川芎嗪、藁本內(nèi)酯、阿魏酸等均為理氣活血的主要成分，除阿魏酸能溶于水又能溶于醇外，其它均只能溶于醇。因此，選用醇作溶媒來提取此三種中藥中的有效成份，能夠較現(xiàn)有技術(shù)更充分地提取出有效成分。
本發(fā)明的中藥還包括柴胡60-146重量份王不留行(炒)60-146重量份所述的水煮稠膏為將黃芪、黨參、柴胡、王不留行加水煎煮至少兩次，將濾液濃縮得到稠膏。
其中，王不留行具有行血、通行、下乳的作用，此成分在水及醇中均能溶解，故可使用水作溶媒來提取。
進(jìn)一步，本發(fā)明的中藥還包括漏蘆50-146重量份萱草根49-98重量份所述的水煮稠膏為將黃芪、黨參、柴胡、王不留行、漏蘆、萱草根加水煎煮至少兩次，將濾液濃縮得到。
其中，漏蘆具有清熱解毒，消腫下乳的作用。含有脫皮甾酮，此成分在水及中度醇中均能溶解。萱草具有清熱解毒，利尿消腫的作用，含天門冬素、甾類等。故可采用水作溶媒來提取上述兩種中藥中的有效成分。
優(yōu)選本發(fā)明的中藥包括黃芪146-250重量份黨參146-300重量份白術(shù)98-130重量份當(dāng)歸120-160重量份川芎60-98重量份柴胡60-146重量份王不留行(炒)60-146重量份漏蘆50-146重量份萱草根49-98重量份。
更優(yōu)選黃芪146重量份黨參146重量份白術(shù)98重量份當(dāng)歸146重量份川芎98重量份柴胡98重量份王不留行(炒)98重量份漏蘆98重量份萱草根73重量份。
其特征在于所述中藥是通過如下工藝制備的(1)將黃芪、黨參、柴胡、王不留行、漏蘆、萱草根加水煎煮至少兩次，將濾液濃縮得到水煮稠膏；(2)將白術(shù)、當(dāng)歸、川芎加60％--90％的乙醇回流提取至少兩次，提取液經(jīng)濃縮得到提取稠膏；(3)將1-5重量份水煮稠膏和1-5重量份醇提取稠膏混合得混合稠膏，然后加入輔料制成各種劑型的制劑。
本發(fā)明的中藥的制備過程中還包括將稠膏干燥得到干膏，再按照常規(guī)中藥制劑的制備方法加入輔料制成適宜給藥的各種制劑劑型。
其中，在加水煎煮時(shí)水的加入量為藥材量的3-8倍，在乙醇提取過程中乙醇的加入量為藥材量的2-8倍，時(shí)間均為0.5-3小時(shí)，煎液和提取液過濾后減壓濃縮。
優(yōu)選的，在加水煎煮時(shí)水的加入量為藥材量的4-6倍，在乙醇提取過程中乙醇的加入量為藥材量的3-5倍，時(shí)間均為0.5-1.5小時(shí)，煎液和提取液過濾后減壓濃縮，濃縮條件為50-80℃，0.07-0.09Mpa，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.20-1.30g/ml的稠膏。
加水煎煮后合并煎液，過濾，濾液減壓濃縮至相對(duì)密度為1.10-1.40g/ml的稠膏。
在醇提后合并提取液，過濾，濾液減壓濃縮至相對(duì)密度為1.10-1.40g/ml的稠膏。
減壓濃縮也可以在加熱的條件下進(jìn)行，優(yōu)選的濃縮條件為40-90℃，0.05-0.1Mpa。
醇提中，濃縮前可對(duì)乙醇進(jìn)行回收，回收乙醇優(yōu)選在減壓條件下進(jìn)行，更優(yōu)選在加熱下回收乙醇，條件為40-90℃，0.05-0.1Mpa，最優(yōu)選為在50-80℃，0.07-0.09Mpa條件下減壓回收乙醇。
干燥可以采用現(xiàn)有的干燥技術(shù)，如真空干燥、通風(fēng)干燥或加熱干燥。優(yōu)選為真空干燥。
本發(fā)明所得到的上述稠膏或干膏可以按照常規(guī)中藥制劑的制備方法制成顆粒劑、膠囊、口服液、片劑等劑型。
本發(fā)明的制劑優(yōu)選片劑，在用稠膏制備片劑時(shí)，由于本發(fā)明為全浸膏片，粘度較大，制粒困難。試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)壓片后硬度大，崩解時(shí)限很難達(dá)到要求，因此需加入稀釋劑降低藥粉的粘度；同時(shí)加入適量潤(rùn)滑劑，增加藥粉的流動(dòng)性，從而減少崩解時(shí)間。
在單獨(dú)加入稀釋劑的條件下，片劑的片面硬度達(dá)不到包薄膜衣的要求；加入適量粘合劑如羧甲基纖維素鈉，實(shí)驗(yàn)證明由于其粘性大，壓片后硬度雖然增加了，達(dá)到了包薄膜衣的要求，但崩解時(shí)間超標(biāo)，所以需加入適量的崩解劑。這樣，制粒壓片后，基片的硬度符合包薄膜衣的條件，且包衣后崩解時(shí)間達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)要求。
綜上所述，選擇適量稀釋劑、崩解劑和潤(rùn)滑劑作為輔料。
所述片劑包括如下成分混合稠膏3-10重量份稀釋劑或吸收劑1-10重量份崩解劑4-16重量份潤(rùn)滑劑0.1-1重量份其中的混合稠膏為水煮稠膏1-5重量份、醇提取稠膏1-5重量份混合所得的混合物，所述片劑的制備方法為將上述混合稠膏與稀釋劑或吸收劑混合、干燥、粉碎、過篩，加入崩解劑并充分混合后制粒、整粒，加入潤(rùn)滑劑，混勻后壓成片重為0.65g的片劑基片。
片劑也可以采用混合干膏制備，采用混合干膏制備時(shí)，所述片劑中包括混合干膏1-8重量份，其他成分、含量及制備方法與上述配方相同。
片劑制備中所用的稀釋劑或吸收劑優(yōu)選為淀粉、糊精、糖粉或乳糖，崩解劑優(yōu)選為微晶纖維素或干燥淀粉等，潤(rùn)滑劑優(yōu)選為硬脂酸鎂、滑石粉等。
片劑的制備過程中，優(yōu)選在40-70℃下減壓干燥，粉碎后過60-150目篩。更優(yōu)選為，片劑在55-65℃下減壓干燥，粉碎后過90-110目篩。
如果需要，本發(fā)明的片劑還可以進(jìn)一步在其表面包衣，包衣可以采用現(xiàn)有技術(shù)中通用的成分及方法進(jìn)行，優(yōu)選采用歐巴代，用量為2-12重量份。
上述重量份可以是錢、克、千克、公斤、噸等計(jì)量單位。
CN02129413.5中的制備方法為水提，雖然水提消除了醇沉給生產(chǎn)工藝帶來的成本增加及不安全因素，但由于白術(shù)中的主要成分為揮發(fā)油-蒼術(shù)酮、蒼術(shù)醇；當(dāng)歸中的主要成分阿魏酸在中度醇中的溶解性大于水中的溶解性；川芎中的主要成分川芎嗪、藁本內(nèi)酯、阿魏酸中，除阿魏酸外，其他都只能溶于醇，因此，僅用水提的工藝制備，不能夠?qū)⒅兴幵幹械挠行С煞殖浞痔崛?。本發(fā)明在大量實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，通過對(duì)比證明，黃芪、黨參、柴胡、王不留行、漏蘆、萱草根中的有效成分大都溶于水，采用水提和醇提的工藝其差別并不明顯，因此，黃芪、黨參、柴胡、王不留行、漏蘆、萱草根仍然采取水提的方法。本發(fā)明采用中度醇提取白術(shù)、當(dāng)歸、川芎中的有效成分，并簡(jiǎn)化了原水提工藝條件，有效提取了中藥原藥中的有效成分，改變了制劑中的成分，提高了藥效。通過對(duì)樣品的質(zhì)量檢測(cè)和加速穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明，制劑的穩(wěn)定性良好。
下面結(jié)合具體實(shí)施例詳細(xì)描述本發(fā)明，所述實(shí)施例用于理解和描述本發(fā)明，而不是限制本發(fā)明。
具體實(shí)施例方式
下面是本發(fā)明各種中藥制劑的制備方法，所得制劑通用名為乳欣片。
實(shí)施例1將黃芪100克，黨參487克，柴胡100克，王不留行(炒)85克，漏蘆130克，萱草根98克加水3公斤煎煮1小時(shí)，煎煮4次。煎煮后合并煎液，過濾，濾液減壓濃縮至相對(duì)密度為1.10g/ml的稠膏，冷卻至室溫備用。
將白術(shù)120克，當(dāng)歸100克，川芎110克加60％乙醇0.99公斤回流提取3小時(shí)，共提取2次。提取后合并提取液，過濾，濾液于0.05Mpa，90℃下減壓回收乙醇、減壓濃縮至相對(duì)密度為1.10g/ml的稠膏，冷卻至室溫備用。
將上述兩種稠膏按1∶5重量比例混合，取所得混合稠膏3公斤與稀釋劑3公斤混合，于70℃下減壓干燥、粉碎過60目篩，加入崩解劑16公斤并充分混合后制粒、整粒，加入潤(rùn)滑劑0.5公斤，混勻后壓制成片重為0.65g的基片，取歐巴代10公斤，包衣即得片劑。
實(shí)施例2將黃芪166克，黨參300克，柴胡60克，王不留行(炒)73克，漏蘆102克，萱草根80克加水3.9公斤煎煮0.5小時(shí)，煎煮3次。煎煮后合并煎液，過濾，濾液減壓濃縮至相對(duì)密度為1.30g/ml的稠膏，冷卻至室溫備用。
將白術(shù)196克，當(dāng)歸50克，川芎100克加90％乙醇1.73公斤回流提取1小時(shí)，共提取3次。提取后合并提取液，過濾，濾液回收乙醇后減壓濃縮至相對(duì)密度為1.30g/ml的稠膏，冷卻至室溫備用。回收乙醇為在0.06Mpa，70℃下減壓。
將上述兩種稠膏按2∶3重量比例混合，取所得混合稠膏5公斤與稀釋劑10公斤混合，于40℃下減壓干燥、粉碎過90目篩，加入崩解劑4公斤并充分混合后制粒、整粒，加入潤(rùn)滑劑0.3公斤，混勻后壓制成片重為0.65g的基片，包衣即得片劑。
實(shí)施例3將黃芪250克，黨參100克，柴胡146克，王不留行(炒)73克，漏蘆50克，萱草根49克加水5.76公斤煎煮2小時(shí)，煎煮2次。煎煮后合并煎液，過濾，濾液減壓濃縮至相對(duì)密度為1.50g/ml的稠膏，冷卻至室溫備用。
將白術(shù)130克，當(dāng)歸120克，川芎146克加70％乙醇3.168公斤回流提取0.5小時(shí)，共提取4次。提取后合并提取液，過濾，濾液減壓濃縮至相對(duì)密度為1.50g/ml的稠膏，冷卻至室溫備用。并于0.1Mpa，40℃下減壓回收乙醇。
將上述兩種稠膏5∶1重量比例混合，采用實(shí)施例1的方式制備成片劑。
實(shí)施例4將黃芪300克，黨參195克，柴胡120克，王不留行(炒)60克，漏蘆146克，萱草根80克加水7.2公斤煎煮2小時(shí)，煎煮2次。煎煮后合并煎液，過濾，濾液減壓濃縮至相對(duì)密度為1.250g/ml的稠膏，冷卻至室溫備用。
將白術(shù)150克，當(dāng)歸196克，川芎49克加70％乙醇3.16公斤回流提取0.5小時(shí)，共提取4次。提取后合并提取液，過濾，濾液減壓濃縮至相對(duì)密度為1.250g/ml的稠膏，冷卻至室溫備用。并于0.1Mpa，40℃下減壓回收乙醇。
參照實(shí)施例1的方法制為片劑。
實(shí)施例5將黃芪400克，黨參200克，柴胡60克，王不留行(炒)146克，漏蘆120克，萱草根55克加水5.89公斤煎煮3小時(shí)，煎煮2次。煎煮后合并煎液，過濾，濾液減壓濃縮至相對(duì)密度為1.30g/ml的稠膏，冷卻至室溫備用。
將白術(shù)50克，當(dāng)歸160克，川芎60克加80％乙醇1.62公斤回流提取2小時(shí)，共提取2次。提取后合并提取液，過濾，濾液減壓濃縮至相對(duì)密度為1.30g/ml的稠膏，冷卻至室溫備用。并于0.08Mpa，60℃下減壓回收乙醇。
將上述兩種稠膏按3∶4重量比例混合，取所得混合稠膏7公斤與稀釋劑8公斤混合，于65℃下減壓干燥、粉碎過100目篩，加入崩解劑8公斤并充分混合后制粒、整粒，加入潤(rùn)滑劑0.1公斤，混勻后壓制成片重為0.65g的基片，取歐巴代4公斤，包衣即得片劑。
實(shí)施例6將黃芪146克，黨參146克，柴胡98克，王不留行(炒)98克，漏蘆98克，萱草根73克加水1.98公斤煎煮1小時(shí)，煎煮4次。煎煮后合并煎液，過濾，濾液減壓濃縮至相對(duì)密度為1.40g/ml的稠膏，冷卻至室溫備用。
將白術(shù)98克，當(dāng)歸146克，川芎98克加60％乙醇1.03公斤回流提取3小時(shí)，共提取2次。提取后合并提取液，過濾，濾液減壓濃縮至相對(duì)密度為1.40g/ml的稠膏，冷卻至室溫備用。并于0.05Mpa，90℃下減壓回收乙醇。
將上述兩種稠膏按1∶1重量比例混合，取所得混合稠膏9公斤與稀釋劑5公斤混合，于50℃下減壓干燥、粉碎過150目篩，加入崩解劑14公斤并充分混合后制粒、整粒，加入潤(rùn)滑劑0.8公斤，混勻后壓制成片重為0.65g的基片，取歐巴代12公斤，包衣即得片劑。
實(shí)施例7將黃芪487克，黨參400克加水4.44公斤煎煮0.5小時(shí)，煎煮3次。煎煮后合并煎液，過濾，濾液減壓濃縮至相對(duì)密度為1.150g/ml的稠膏，冷卻至室溫備用。
將白術(shù)110克，當(dāng)歸98克，川芎90克加90％乙醇1.49公斤回流提取1小時(shí)，共提取3次。提取后合并提取液，過濾，濾液減壓濃縮至相對(duì)密度為1.150g/ml的稠膏，冷卻至室溫備用。并于0.06Mpa，70℃下減壓回收乙醇。
參照實(shí)施例1的方法，按照常規(guī)方法制備片劑。
實(shí)施例8將黃芪487克，黨參146克加水5.06公斤煎煮2小時(shí)，煎煮2次。煎煮后合并煎液，過濾，濾液減壓濃縮至相對(duì)密度為1.20g/ml的稠膏，冷卻至室溫備用。
將白術(shù)120克，當(dāng)歸98克，川芎100克加70％乙醇2.544公斤回流提取0.5小時(shí)，共提取4次。提取后合并提取液，過濾，濾液減壓濃縮至相對(duì)密度為1.20g/ml的稠膏，冷卻至室溫備用。并于0.1Mpa，40℃下減壓回收乙醇。
參照實(shí)施例2的方法制為片劑。
實(shí)施例9將黃芪400克，黨參487克加水5.06公斤煎煮2小時(shí)，煎煮2次。煎煮后合并煎液，過濾，濾液減壓濃縮至相對(duì)密度為1.33g/ml的稠膏，冷卻至室溫備用。
將白術(shù)98克，當(dāng)歸196克，川芎146克加70％乙醇2.544公斤回流提取0.5小時(shí)，共提取4次。提取后合并提取液，過濾，濾液減壓濃縮至相對(duì)密度為1.33g/ml的稠膏，冷卻至室溫備用。并于0.1Mpa，40℃下減壓回收乙醇。
參照實(shí)施例5的方法制為片劑。
實(shí)施例10將黃芪160克，黨參200克，柴胡60克，王不留行(炒)100克加水3.12公斤煎煮3小時(shí)，煎煮2次。煎煮后合并煎液，過濾，濾液減壓濃縮至相對(duì)密度為1.35g/ml的稠膏，冷卻至室溫備用。
將白術(shù)100克，當(dāng)歸100克，川芎90克加80％乙醇2.03公斤回流提取2小時(shí)，共提取2次。提取后合并提取液，過濾，于0.08Mpa，60℃下減壓回收乙醇，并減壓濃縮至相對(duì)密度為1.35g/ml的稠膏，冷卻至室溫備用。
參照實(shí)施例5的方法制為片劑。
實(shí)施例11將黃芪146克、黨參146克、柴胡98克、王不留行(炒)98克、漏蘆98克、萱草根73克加水3.30公斤煎煮0.5小時(shí)，煎煮3次。煎煮后合并煎液，過濾，濾液減壓濃縮至相對(duì)密度為1.35g/ml的稠膏，冷卻至室溫備用。
將白術(shù)98克、當(dāng)歸146克、川芎98克加90％乙醇0.684公斤回流提取1小時(shí)，共提取3次。提取后合并提取液，過濾，濾液減壓濃縮至相對(duì)密度為1.35g/ml的稠膏，冷卻至室溫備用。并于0.06Mpa，70℃下減壓回收乙醇。
參照實(shí)施例6的方法制為片劑。
實(shí)施例12按照實(shí)施例6的方法制備兩種稠膏，再按照中藥制劑的一般方法分別制備顆粒劑、口服液、膠囊等其它中藥常用劑型。
實(shí)驗(yàn)例1片劑催乳藥效學(xué)和顆粒劑相比本實(shí)驗(yàn)例通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究本發(fā)明中藥片劑的催乳藥效學(xué)。
本實(shí)驗(yàn)例以及以下可能用到的用來做對(duì)比實(shí)驗(yàn)的催乳顆粒，是按照中國(guó)專利申請(qǐng)CN02129413.5制備的。
本研究以懷孕大鼠為受試對(duì)象，待產(chǎn)仔后連續(xù)給予本發(fā)明實(shí)施例6所得乳欣片，(劑量為2.4、0.8、0.3g/kg，分別相當(dāng)于生藥20.5、6.8、2.6g/kg)和上市對(duì)照藥催乳顆粒(6.6g/kg，相當(dāng)于生藥6.6g/kg)11天，觀察對(duì)大鼠泌乳量、血清激素水平的影響。
結(jié)果表明，本發(fā)明中藥對(duì)大鼠具有明顯的催乳作用，而且其中以中劑量給藥為佳。本發(fā)明的中藥對(duì)血清雌二醇水平有明顯降低作用，對(duì)泌乳素水平有升高作用，激素水平的變化進(jìn)一步說明本發(fā)明中藥催乳的作用與激素水平調(diào)控有關(guān)。實(shí)驗(yàn)證明，本發(fā)明中藥中劑量組催乳效果優(yōu)于催乳顆粒，且片劑服用比顆粒劑更方便。
1、試驗(yàn)?zāi)康囊源笫鬄槭茉噷?duì)象，觀察產(chǎn)后大鼠經(jīng)口灌胃給予本發(fā)明中藥對(duì)其泌乳量的影響，為臨床用于治療產(chǎn)婦泌乳缺乏提供參考。
2、供試品本實(shí)施例6所制得的本發(fā)明中藥片劑。
陽性對(duì)照藥催乳顆粒，每袋20g，按照中國(guó)專利申請(qǐng)CN02129413.5制備。
3、試驗(yàn)系統(tǒng)及選擇理由選擇大鼠作為動(dòng)物模型。因?yàn)樵搫?dòng)物模型成熟、背景資料豐富，有利于與催乳顆粒藥效學(xué)結(jié)果進(jìn)行比較。
4、試驗(yàn)動(dòng)物的種系數(shù)量年齡性別體重范圍及來源和等級(jí)。
品種受孕15天左右的懷孕大鼠品系wistar等級(jí)清潔級(jí)供給源山東大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，動(dòng)物合格證號(hào)魯動(dòng)質(zhì)[20021024]購(gòu)入數(shù)量70只使用數(shù)量60只購(gòu)入時(shí)周齡12周齡，體重300-340g5、試驗(yàn)動(dòng)物的識(shí)別方法檢疫期采用涂抹法標(biāo)記動(dòng)物編號(hào)。正式試驗(yàn)采用染色標(biāo)記法，并在盒具上標(biāo)明試驗(yàn)編號(hào)、試驗(yàn)名稱、供試品名稱、給藥量、動(dòng)物編號(hào)、分組及性別。
6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)管理的環(huán)境條件6.1環(huán)境條件飼養(yǎng)室屏障動(dòng)物室溫度設(shè)定22±2℃濕度設(shè)定50％±10％換氣次數(shù)≥14次/小時(shí)照明時(shí)間12小時(shí)(上午8點(diǎn)開燈-下午8點(diǎn)關(guān)燈)6.2飼養(yǎng)條件籠具鼠盒(長(zhǎng)×寬×高＝350×220×180mm)放置動(dòng)物數(shù)1只(窩)/盒籠具交換2次/周糞便處理方法墊料更換，每天1次7、飼料名稱或代號(hào)名稱(批號(hào))鈷60放射性滅菌大鼠顆粒飼料生產(chǎn)者山東大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心地址濟(jì)南市文化西路44號(hào)滅菌時(shí)的滅菌方法鈷60輻射雜質(zhì)的限度及分析飼料供應(yīng)商提供，確定在規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)范圍之內(nèi)。
給料方法自由攝取飼料污染物含量的確認(rèn)飼料提供商提供，確定在規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)范圍之內(nèi)。
飲水自來水(高壓蒸汽滅菌)供水方法由動(dòng)物飲水瓶自由攝取水中污染物確認(rèn)確定在水質(zhì)規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)范圍之內(nèi)除喂飼標(biāo)準(zhǔn)飼料外，另加雞蛋半個(gè)/鼠·天。
8、供試品配制8.1供試品本發(fā)明實(shí)施例6中藥片劑8.2溶劑蒸餾水8.3配制方法每1000片用顆粒粉碎機(jī)粉碎混勻后裝瓶備用，配制時(shí)根據(jù)每片重0.67g(輔料0.084g)，相當(dāng)于生藥5.005g計(jì)算，用電子天平定量稱取本發(fā)明中藥粉末，加蒸餾水充分混勻配成混懸液。
8.4配制頻率每天配制1次8.5混合物的標(biāo)簽標(biāo)有試驗(yàn)編號(hào)、供試品名稱、配制濃度、配制時(shí)間、配制人、使用時(shí)間。
9、供試品的給藥途徑、方法、劑量、頻率和用藥期限以及選擇理由9.1給藥途徑經(jīng)口灌胃給予本發(fā)明中藥9.2給藥途徑的選擇理由與人給藥途徑一致9.3給藥方法灌胃給藥9.4給藥次數(shù)、給藥時(shí)間及設(shè)定理由懷孕大鼠產(chǎn)后次日開始給藥，每天給藥1次，于am9-10時(shí)，連續(xù)11天。
9.5給藥體積給藥容量為2ml/100g體重9.6給藥量設(shè)計(jì)及分組根據(jù)預(yù)試及“催乳顆?！敝饕幮W(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，確定給藥劑量。將待分娩的70只大鼠隨機(jī)分成5組，留每窩產(chǎn)仔8-10只仔鼠的鼠為實(shí)驗(yàn)鼠，產(chǎn)后次日給藥。
本發(fā)明實(shí)施例5中藥給藥組3個(gè)劑量組，高劑量組(2.4g/kg)、中劑量組(0.8g/kg)、低劑量組(0.3g/kg)；分別相當(dāng)于生藥20.5、6.8、2.6g/kg。
催乳顆粒組催乳顆粒，6.6g/kg(相當(dāng)于生藥6.6g/kg)；相當(dāng)于本發(fā)明中藥中劑量組。
輔料對(duì)照組片劑的輔料10、觀察指標(biāo)10.1仔鼠體重及泌乳量變化每天上午8時(shí)把母鼠與仔鼠分開，順序稱每窩仔鼠體重，記錄在卡上，每窩仔鼠后一天減去前一天的重量差除這一窩的仔鼠數(shù)得每天每仔鼠凈增體重，再求取10窩仔鼠凈增體重的平均值(表1)；2小時(shí)后再稱每窩仔鼠體重，記錄在卡上，分籠時(shí)每窩仔鼠重量減去分籠2小時(shí)后每窩仔鼠重量之差除這一窩的仔鼠數(shù)得平均值，反映仔鼠吃飽與饑餓時(shí)的乳量，再求取10窩仔鼠的總平均值(表2)；然后把母鼠與仔鼠合籠，哺乳2小時(shí)后再稱仔鼠體重，記錄在卡上，合籠后每窩仔鼠重量減去合籠前重量除這一窩仔鼠數(shù)得平均值，再求取10窩仔鼠的總平均值，反映仔鼠饑餓與哺乳后的乳量(表3)。
10.2對(duì)母鼠激素水平的影響給藥11天后頸靜脈抽血2ml，分離血清，采用雙抗放免試劑盒測(cè)血清雌二醇、孕酮和泌乳素水平。
11、結(jié)果11.1本發(fā)明中藥對(duì)母鼠泌乳量的影響本發(fā)明中藥對(duì)母鼠泌乳量的測(cè)定結(jié)果見表1、2、3。
表1是各組仔鼠每天凈增體重的平均值，本發(fā)明中藥給藥組各組仔鼠凈增體重均高于空白對(duì)照組，但經(jīng)方差分析差異無顯著性。
表2是分籠時(shí)與分籠2小時(shí)后各組仔鼠的體重差值，中劑量組(B)仔鼠體重增長(zhǎng)最明顯，第1、3、9天均有顯著差異(P＜0.05)，其次是高劑量組，其它各組都類似。
表3是合籠時(shí)與合籠2小時(shí)后各組仔鼠的體重差值，即饑餓2小時(shí)再哺乳時(shí)，各組差異很明顯(方差分析P值均小于0.01)，以中劑量組(B)仔鼠饑餓再哺乳仔鼠體重增長(zhǎng)最快，其次是高劑量組，其它各組都類似。
以上數(shù)據(jù)表明母鼠灌服本發(fā)明中藥后仔鼠的體重增長(zhǎng)比空白對(duì)照組明顯，仔鼠體重的增長(zhǎng)與母鼠泌乳量的多少直接有關(guān)，因此間接地反映了給藥組對(duì)母鼠增乳有較好的效果，尤其表現(xiàn)在饑餓后再哺乳時(shí)本發(fā)明中藥催乳效果更明顯；同時(shí)表中也反映了大劑量本發(fā)明中藥的仔鼠增重并不比中劑組好，仔鼠增重效果以中劑量組最好，大、中劑量組比小劑量組為好，說明本發(fā)明中藥的催乳作用有一個(gè)合適的劑量。
11.2本發(fā)明中藥對(duì)母鼠血清中激素水平影響乳汁的分泌受內(nèi)分泌激素的調(diào)控，雌二醇對(duì)乳汁分泌起抑制作用，而泌乳素則促進(jìn)乳汁的分泌。放射免疫藥盒測(cè)得激素結(jié)果表明(表4)，四個(gè)給藥組雌二醇水平都低于輔料對(duì)照組，且本發(fā)明中藥各組、催乳顆粒對(duì)照組與輔料對(duì)照組差分析比較，差異都有顯著意義(P＜0.001)；泌乳素水平以中劑量為最高，其余依次為高劑量組、催乳顆粒對(duì)照組和低劑量組，且本發(fā)明中藥中劑量組與催乳顆粒組相比，差異顯著(P＜0.01)。
11.3與催乳顆粒療效比較催乳顆粒給藥劑量為6.6g/kg，相當(dāng)于生藥6.6g/kg；本發(fā)明中藥片劑中劑量組給藥量為0.8g/kg，相當(dāng)于生藥6.8g/kg；結(jié)果顯示，本發(fā)明中藥中劑量給藥對(duì)泌乳量刺激作用比相同劑量的催乳顆粒要強(qiáng)(表1、2、3)；本發(fā)明中藥中劑量組給藥后雌二醇激素水平明顯低于催乳顆粒，而泌乳素水平高于催乳顆粒組(表4)。該結(jié)果證實(shí)本發(fā)明中藥片對(duì)懷孕大鼠確有催乳作用，且催乳作用比催乳顆粒要強(qiáng)；因制劑劑型的改變，可減少服用量，使用更方便。
12、結(jié)論與評(píng)價(jià)以懷孕大鼠為受試對(duì)象，待產(chǎn)仔后給予中藥制劑本發(fā)明中藥(片劑，劑量為2.4、0.8、0.3g/kg；分別相當(dāng)于生藥20.5、6.8、2.6g/kg)和對(duì)照藥催乳顆粒(6g/kg，相當(dāng)于生藥6g/kg)，觀察對(duì)大鼠泌乳量、血清內(nèi)分泌激素水平的影響。結(jié)果表明，本發(fā)明中藥對(duì)大鼠具有明顯的催乳作用，其中以中劑量給藥為佳；對(duì)血清雌二醇水平有降低作用，對(duì)泌乳素水平有升高作用。激素水平變化進(jìn)一步說明本發(fā)明中藥催乳作用與激素水平調(diào)控有關(guān)；本發(fā)明中藥中劑量組催乳效果優(yōu)于催乳顆粒，且片劑服用比顆粒劑更方便。
表1.各組仔鼠每天凈增體重(g/只，±S)

A本發(fā)明中藥2.4g/kg組 B本發(fā)明中藥0.8g/kg組 C本發(fā)明中藥0.3g/kg組 D催乳顆粒組 E輔料對(duì)照組表2.各組仔鼠分籠時(shí)與分籠2小時(shí)后體重變化平均值(g/只，±S)


A本發(fā)明中藥2.4g/kg組 B本發(fā)明中藥0.8g/kg組 C本發(fā)明中藥0.3g/kg組 D催乳顆粒組 E輔料對(duì)照組表3.各組仔鼠合籠時(shí)與合籠2小時(shí)后體重變化平均值(g/只，±S)

A本發(fā)明中藥2.4g/kg組 B本發(fā)明中藥0.8g/kg組 C本發(fā)明中藥0.3g/kg組 D催乳顆粒組 E輔料對(duì)照組表4實(shí)驗(yàn)各組給藥結(jié)束時(shí)大鼠血清激素水平變化(n＝10，±S)

A本發(fā)明中藥2.4g/kg組 B本發(fā)明中藥0.8g/kg組 C本發(fā)明中藥0.3g/kg組 D催乳顆粒組 E輔料對(duì)照組對(duì)本發(fā)明其它實(shí)施例的片劑以及其它劑型分別進(jìn)行試驗(yàn)，得到基本相似的結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)例2 催乳臨床效果和安全性本實(shí)驗(yàn)例通過臨床實(shí)驗(yàn)研究本發(fā)明中藥治療產(chǎn)婦產(chǎn)后缺乳、少乳的臨床效果和安全性。
一、藥品及用法(一)試驗(yàn)組藥物本發(fā)明實(shí)施例6的中藥乳欣片劑。
規(guī)格每次劑量為2.4g/kg，分別相當(dāng)于生藥20.5g/kg，產(chǎn)后72小時(shí)開始用藥，每日三次，溫開水沖服，4天為一療程。
(二)藥物對(duì)照組藥物催乳顆粒來源按照中國(guó)專利申請(qǐng)CN02129413.5制備的。
規(guī)格顆粒劑，每包15克，產(chǎn)后72小時(shí)開始用藥每次2包，一日三次，溫開水沖服，4天為一療程二、觀察項(xiàng)目及指標(biāo)(一)用藥前1.臨床觀察常規(guī)詢問病史，妊娠及分娩期經(jīng)過，作體格檢查，著重注意乳房和子宮復(fù)舊情況，中醫(yī)辨證。
2.實(shí)驗(yàn)室檢查①素水平測(cè)定PRL(泌乳素)E2(雌二醇)；抽血前1小時(shí)內(nèi)禁止吸吮②血尿常規(guī)③肝腎功能指標(biāo)ALT(谷丙轉(zhuǎn)氨酶)BUN(尿素氮)Cr(血肌酐)④心電圖(一)用藥后每日檢查乳房充盈情況，乳汁量，子宮復(fù)舊，飲食，大便及舌脈象等指標(biāo)，用藥后不良反應(yīng)，用藥4天后，重復(fù)用藥前檢查內(nèi)容，抽血測(cè)PRL，E2前1小時(shí)內(nèi)禁哺乳。
三、療效和安全性評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)(一)療效判定1.以用藥4天后較用藥前乳汁分泌量增分情況作為療效判斷標(biāo)準(zhǔn)。
(1)顯效乳汁量積分升高2分或2分以上，能滿足嬰兒食用吃飽，不需加用牛奶者，有的尚能剩余乳汁。
(2)有效乳汁量積分升高1分，基本能滿足嬰兒食用，有的尚需時(shí)而添加牛奶，但每次不超過20ml。
(3)無效無變化，基本上需要人工喂乳，每次加奶＞20ml。
2.乳房充盈程度乳房充盈程度不一定與乳汁量的變化呈一致性，故其增分作為療效的參考評(píng)價(jià)。
附乳汁分泌量和乳房充盈程度不同分4個(gè)分級(jí)0分＝極少量乳汁分泌；乳房空虛1分＝有很少量乳汁；乳房輕度充盈2分＝有中等量乳汁；乳房中度充盈3分＝乳汁多量；乳房脹滿3.兩組新生兒體重變化比較兩組在用藥4天后新生兒體重比用藥前增加情況(哺乳前測(cè))。
4.兩組新生兒在每次哺乳前后體重變化的比較。
5.用藥4天后兩組哺乳前一次吸乳汁量的比較。
6.癥狀和體征改善判斷標(biāo)準(zhǔn)。
(1)顯效主要癥狀和體重積分平均減少2分或癥狀體征完全消失。
(2)有效主要癥狀和體征積分平均減少1分，但尚未完全消失。
(3)無效主要癥狀和體征積分無變化。
(4)惡化主要癥狀和體征積分平均增加1分或1分以上。
(二)安全性1.用藥前后生命體征血壓、脈搏、呼吸等變化。
2.子宮復(fù)歸和惡露情況。
3.全身性副反應(yīng)，如惡心、嘔吐、腹痛、腹瀉、頭疼、頭暈、過敏等表現(xiàn)。
4.化驗(yàn)室各項(xiàng)指標(biāo)和心電圖變化。
四、數(shù)據(jù)收集和統(tǒng)計(jì)方法研究方案、表格、病歷和隨機(jī)表均統(tǒng)一設(shè)計(jì)，資料統(tǒng)一收集進(jìn)行計(jì)算機(jī)數(shù)據(jù)處理，用SAS軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)、配對(duì)t檢驗(yàn)、秩和檢驗(yàn)和CPD檢驗(yàn)。
結(jié)果一、兩組對(duì)象資料1.年齡、妊娠、孕周、身高和體重資料比較見表5
表5、兩組對(duì)象年齡、妊次、孕周、身高和體重資料比較

從表5數(shù)據(jù)看出，兩組對(duì)象無論是年齡、妊次、孕周、身高和體重均較接近，無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，故兩組資料具有可比性。
2.分娩方式見表6表6、兩組對(duì)象分娩情況比較

兩組分娩方式之間均無顯著差異3.新生兒體重和Apgar評(píng)分見表7表7、兩組新生兒體重及Apgar評(píng)分比較

兩組新生兒體重之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)，出生5分鐘時(shí)，Apgar評(píng)分均在8分或8分以上，無一例發(fā)生明顯新生兒窒息。故分娩3天后，全部新生兒均為母乳喂養(yǎng)。
4.兩組開服藥時(shí)間比較試驗(yàn)組開始服藥時(shí)間為產(chǎn)后74.11±5.22h，對(duì)照組為產(chǎn)后73.31±4.28h，兩組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＝0.5015)，均符合方案規(guī)定。
二、治療效果1.兩組乳汁量增分和乳房充盈程度的比較見表8-9表8、兩組用藥后的乳汁量增分和療效比較

兩組乳汁量增分?jǐn)?shù)據(jù)經(jīng)CPD分析，P值＜0.01，試驗(yàn)組優(yōu)于對(duì)照組。
試驗(yàn)組顯效為86％，對(duì)照組為59％，兩組之間有顯著差異P＜0.01。
表9、兩組用藥后乳房充盈程度增分情況

表9乳房充盈程度和表8乳汁量增分基本上一致，CPD分析結(jié)果P＜0.01，試驗(yàn)組也優(yōu)于對(duì)照組。
2.新生兒體重變化見表10表10、兩組用藥后新生兒體重增加的比較

a:b c:d P值均＜0.001e:f P值＜0.01表10結(jié)果說明兩組用藥后新生兒體重均顯著大于用藥前。但試驗(yàn)組新生兒體重增加顯著大于對(duì)照組。
3.哺乳前后新生兒體重見表11表11、用藥后兩組新生兒哺乳前后體重的變化比較

試驗(yàn)組哺乳后新生兒體重增加為38±8.6g，對(duì)照組28±6.4g，試驗(yàn)組多于對(duì)照組。
4.用藥4天后哺乳前一次吸空乳汁量(吸乳機(jī)為瑞士AMEDA公司Egnell KG95/60型)，試驗(yàn)組有30例，對(duì)照組有10例，在用藥4天后，任意選擇一次在哺乳前人工吸出乳汁，計(jì)算吸出乳汁量，試驗(yàn)組為65.3±6.4ml，對(duì)照組為52.5±7.4ml。試驗(yàn)組多于對(duì)照組。
5.癥狀和體重改善情況見表12表12、兩組癥狀和體重積分改善情況比較

兩組在癥狀和體重積分的改善情況很相似。其中癥狀和體重完全消失，舌象和脈象恢復(fù)正常者，試驗(yàn)組254例，對(duì)照組78例。兩組間無明顯差異(P＞0.05)。
三、安全性1.生命指征用藥前后，試驗(yàn)組和對(duì)照組在血壓、脈搏、呼吸等生命指征均未出現(xiàn)有臨床意義的異常變化。
2.子宮復(fù)舊和惡露情況兩組對(duì)象的子宮復(fù)舊情況均為正常復(fù)舊，子宮底高度每天下降均在1-2cm范圍內(nèi)，無一例復(fù)舊不良。在用藥前的惡露均為正常產(chǎn)后3天的血性惡露，用藥后均逐漸轉(zhuǎn)變經(jīng)漿性惡露，無1例出現(xiàn)異常惡露。
3.副反應(yīng)兩組對(duì)象服藥后無1例有惡心、嘔吐胃腸反應(yīng)等副反應(yīng)，無1例過敏。兩種藥物的接受性均良好。
4.化驗(yàn)室指標(biāo)見表13表13、兩組用藥前后實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)的變化

兩組在用藥后，各次化驗(yàn)指標(biāo)均在正常生理范圍內(nèi)波動(dòng)，未出現(xiàn)有臨床意義的異常。
尿常規(guī)，兩組對(duì)象均為產(chǎn)后，故有惡露的干擾，試驗(yàn)組5例和對(duì)照組3例用藥后有微量的尿蛋白和少許RBC，均未見有管型。
5.心電圖變化兩組對(duì)象在用藥前和用藥后未出現(xiàn)有臨床意義的異常。
四、用藥前后血生乳素(PRL)和雌二醇(E2)水平的變化見表14表14、兩組用藥前后血PRL和E2的變化

A:b c；d e:f g:h I:j k:l p＝0.0001無論試驗(yàn)組或?qū)φ战M在用藥后血PRL和E2水平均有顯著下降P＜0.001。
用藥后血PRL下降在兩組之間無明顯差異(P＞0.05)，而血E2下降則試驗(yàn)組明顯大于對(duì)照組P＜0.01，血PRL/E2比值試驗(yàn)組也明顯高于對(duì)照組P＜0.01。
對(duì)本發(fā)明其它實(shí)施例的片劑以及其它劑型分別進(jìn)行試驗(yàn)，得到基本相似的結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)例3 鼠乳腺增生研究本實(shí)驗(yàn)例為本發(fā)明中藥治療大鼠乳腺增生病/癥的實(shí)驗(yàn)研究。
本研究通過對(duì)中藥本發(fā)明中藥治療大鼠乳腺增生病/癥(模型)療效進(jìn)行研究，為臨床治療應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。將模型大鼠50只，分為本發(fā)明中藥治療組(高、中、低3個(gè)劑量組)、陽性對(duì)照藥乳塊消治療組和模型空白對(duì)照組，每組10只，與陰性空白對(duì)照組，正常大鼠10只；血清激素測(cè)定雌二醇、泌乳素、孕酮水平；病理學(xué)檢察本發(fā)明中藥治療組與模型空白對(duì)照組在乳腺小葉數(shù)、乳腺腺泡數(shù)、腺泡腔直徑等指標(biāo)的變化情況；比較本發(fā)明中藥各治療組與乳塊消治療組的療效差異。
結(jié)果表明，本發(fā)明中藥治療后對(duì)血清激素水平有一定調(diào)節(jié)作用，乳腺小葉數(shù)、乳腺腺泡數(shù)、腺泡腔直徑等指標(biāo)經(jīng)用本發(fā)明中藥治療后療效顯著(P＜0.01)，本發(fā)明中藥治療組療效優(yōu)于乳塊消治療組(P＜0.01)。即本發(fā)明中藥治療大鼠乳腺增生病/癥療效顯著，且優(yōu)于乳塊消。
1、目的研究中藥本發(fā)明中藥治療大鼠乳腺增生病/癥的效果，為臨床治療乳腺增生病/征的應(yīng)用提供科學(xué)的依據(jù)。
2、材料2.1藥物2.1.1實(shí)驗(yàn)用藥本發(fā)明實(shí)施例6所制得的乳欣片2.12陽性對(duì)照藥乳塊消，片劑，每片0.35g，北京中醫(yī)藥大學(xué)藥廠生產(chǎn)2.13大鼠乳腺增生病/癥模型制備用藥苯甲酸雌二醇0.2mg/ml；黃體酮20mg/ml，上海通用藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)。
2.2動(dòng)物選擇雌性成年未孕Wistar大鼠，體重180-200g，共80只，山東大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物合格證號(hào)為魯動(dòng)質(zhì)[20021024]。
2.3試劑盒雌二醇、孕酮、泌乳素(雙抗法)放免測(cè)定試劑盒，天津德普生物技術(shù)和醫(yī)學(xué)產(chǎn)品有限公司生產(chǎn)。
2.4病理診斷儀器萊卡切片機(jī)、脫水機(jī)，Olympus顯微鏡，萊卡攝像及圖像處理系統(tǒng)。
3、實(shí)驗(yàn)方法3.1乳腺增生病/癥動(dòng)物模型的制備根據(jù)《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的疾病模型》文中(P392，1997，天津科技譯文出版公司)大鼠乳腺增生病模型制備。
雌性Wistar大鼠70只，肌肉注射苯甲酸雌二醇0.5mg/kg體重，每天1次，連續(xù)25天；繼而改用肌肉注射黃體酮4mg/kg體重，每天1次，連續(xù)5天。
3.2分組與給藥將確診為乳腺增生病/癥的大鼠于停止給予黃體酮24小時(shí)后隨機(jī)分為6組，每組10只。本發(fā)明實(shí)施例3中藥治療組給藥劑量分別為1.6g/kg·天、0.8g/kg·天、0.4g/kg·天(相當(dāng)于生藥13.7、6.8、3.4g/kg·天，其中0.8g/kg·天相當(dāng)于催乳顆粒給藥量70g/kg·天)；陽性對(duì)照組乳塊消，3.0g/kg·天；模型空白對(duì)照組灌服等容量輔料混懸液；以及陰性空白對(duì)照組正常大鼠10只，灌服等容量輔料混懸液。本發(fā)明中藥片及乳塊消片粉碎后用蒸餾水制成混懸液灌服，連續(xù)灌胃給藥2周。
3.3療效觀察3.3.1血清激素水平檢測(cè)末次給藥24小時(shí)后，動(dòng)物用戊巴比妥鈉麻醉后處死，采血制備血清；采用放免藥盒測(cè)血清雌二醇、泌乳素、孕酮水平。
3.3.2病理觀察末次給藥24小時(shí)后將動(dòng)物用戊巴比妥鈉麻醉后處死，肉眼檢查乳房情況后，取每只動(dòng)物第二對(duì)乳房活檢，20％福爾馬林固定，石蠟切片，HE染色，光鏡檢查，并對(duì)乳腺組織作圖像處理。
(1)模型組病理要求小葉明顯增大幾乎融合，間質(zhì)較少，腺泡明顯增多、增大、擴(kuò)張，腺管變形呈多形性。乳腺導(dǎo)管管腔，腺泡腔擴(kuò)張明顯，乳腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞排列紊亂，上皮增生明顯可呈不規(guī)則狀突起，管腔中可見脫落的上皮細(xì)胞及其分泌物，小葉體積增大，分葉增多，小葉腺數(shù)平均5-8個(gè)葉，導(dǎo)管上皮細(xì)胞層數(shù)明顯增多，間質(zhì)纖維組織增生明顯。
(2)乳腺增生分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)0級(jí)乳腺小葉不增生，腺體數(shù)量極少，腺胞不擴(kuò)張，處于靜止期狀態(tài)。
I級(jí)乳腺小葉輕度增生，個(gè)別腺泡輕度增生或?qū)Ч茌p度擴(kuò)張，腺泡及導(dǎo)管內(nèi)有少量分泌物存在。
II級(jí)乳腺小葉大部分增生，腺泡及導(dǎo)管內(nèi)分泌物較少，部分腺泡或?qū)Ч苋蕴幱谳p度擴(kuò)張狀態(tài)但無明顯囊泡形成，腺泡上皮增生但無明顯乳頭狀突起。
III級(jí)乳腺小葉明顯增生，數(shù)量增加，腺泡或?qū)Ч芴幱跇O度擴(kuò)張狀態(tài)，部分呈囊泡狀，腺管上皮增生，增生的上皮突入管腔呈乳頭狀，層次增多，腺泡內(nèi)及導(dǎo)管內(nèi)有分泌物存在。
(3)療效評(píng)定乳腺增生分級(jí)為I級(jí)(含I級(jí))以下判為有效。
3.4數(shù)據(jù)分析根據(jù)治療結(jié)果，統(tǒng)計(jì)本發(fā)明中藥治療組、乳塊消治療組、模型組的血清激素水平、乳腺組織病理變化，并經(jīng)圖像處理系統(tǒng)計(jì)算腺體小葉數(shù)、腺泡數(shù)及腺泡泡腔直徑，比較本發(fā)明中藥治療組與模型空白對(duì)照組及與乳塊消治療組的療效，并作顯著性檢驗(yàn)。
4、結(jié)果與討論4.1給藥后各組血清激素水平變化4.1.1血清雌二醇(E2)變化E2(125I)雙抗放免測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線，r＝0.9986，NSB/T(％)＝1.972％；模型空白對(duì)照組大鼠血清E2水平明顯低于其它各組，給予本發(fā)明中藥(中、低劑量組)治療后E2向正常方向恢復(fù)，但方差分析各組無明顯差異(表16)。此現(xiàn)象表明，在模型制備過程中給予大量雌孕激素造成動(dòng)物體內(nèi)雌孕激素代謝紊亂，但給予適量本發(fā)明中藥治療后有一定調(diào)節(jié)作用。
4.1.2血清孕酮(PrG)變化孕酮(125I)雙抗放免測(cè)定其標(biāo)準(zhǔn)曲線，r＝0.9993，NSB/T(％)＝2.653％；模型空白對(duì)照組大鼠血清PrG水平明顯低于陰性空白對(duì)照組，亦明顯低于本發(fā)明中藥、乳塊消各治療組；本發(fā)明中藥、乳塊消治療組PrG水平明顯低于陰性空白對(duì)照組(表1，P＜0.01)；本發(fā)明中藥治療組明顯調(diào)高血清PrG并似有劑量效應(yīng)關(guān)系趨勢(shì)。本發(fā)明中藥各劑量組高于乳塊消組F＜0.05)。
4.1.3血清泌乳素變化泌乳素(125I)雙抗放免測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線，r＝0.9985，NSB/T(％)＝2.666％；模型空白對(duì)照組泌乳素明顯高于其它各組(P＜0.01)，各治療組血清泌乳素水平高于陰性空白對(duì)照組(P＜0.01，表15)。
總之，因在模型制備過程中給大鼠注射了大量E2、PrG，造成大鼠內(nèi)分泌嚴(yán)重紊亂，給予本發(fā)明中藥治療后有一定調(diào)節(jié)作用，但變化不規(guī)律。
4.2乳腺病理改變4.2.1陰性空白對(duì)照組乳頭部被復(fù)鱗狀上皮，表面不平，乳腺管的開口部也被復(fù)鱗狀上皮。乳頭部的輸乳管被復(fù)柱狀上皮，有皺襞，間質(zhì)內(nèi)可見成束的平滑肌。乳腺小葉由小導(dǎo)管及腺泡組成，小葉清晰，小葉內(nèi)間質(zhì)疏松。導(dǎo)管上皮細(xì)胞排列規(guī)則，導(dǎo)管璧較薄，小葉體積較小、分葉少，小葉數(shù)多為1-3個(gè)葉，導(dǎo)管上皮細(xì)胞層數(shù)較少。
4.2.2模型空白對(duì)照組小葉明顯增大幾乎融合，間質(zhì)較少，腺泡明顯增多、增大，擴(kuò)張、導(dǎo)管變形呈多形性。模型組乳腺導(dǎo)管管腔、腺泡腔擴(kuò)張明顯，乳腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞排列紊亂，上皮增生明顯可呈不規(guī)則狀突起，管腔中可見脫落的上皮細(xì)胞及其分泌物，小葉體積增大，分葉增多，小葉腺泡數(shù)平均5-8個(gè)，導(dǎo)管上皮細(xì)胞層數(shù)明顯增多，間質(zhì)纖維組織增生明顯。導(dǎo)管增生、腺泡增生、囊性增生和混合型出現(xiàn)率較高。
4.2.3本發(fā)明中藥治療組高劑量組大鼠乳腺小葉數(shù)及導(dǎo)管上皮細(xì)胞層數(shù)減少，與模型空白組比較明顯減輕，比乳塊消組抑制乳腺增生程度要強(qiáng)；中劑量組小葉數(shù)及導(dǎo)管上皮細(xì)胞層數(shù)減少，與模型空白組比較明顯減輕，比乳塊消組抑制乳腺增生程度更強(qiáng)；低劑量組小葉數(shù)及導(dǎo)管上皮細(xì)胞層數(shù)減少，與模型空白組比較明顯減輕，與乳塊消組比較有一定程度的減輕。
4.2.4乳塊消組小葉數(shù)及導(dǎo)管上皮細(xì)胞層數(shù)減少，與模型空白組比較有減輕作用。
將上述病理改變按乳腺增生分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)計(jì)數(shù)(表16)及組織細(xì)胞變化經(jīng)圖像處理后(表17)表明，模型空白對(duì)照組大鼠乳腺增生明顯，大部分達(dá)III級(jí)增生，各治療組明顯比模型組減輕，本發(fā)明中藥中劑量組較乳塊消組亦明顯減輕(P＜0.05)；各治療組乳腺小葉數(shù)、腺泡數(shù)及腺泡腔直徑明顯比模型對(duì)照組減輕；按療效標(biāo)準(zhǔn)統(tǒng)計(jì)處理表明，本發(fā)明中藥各治療組療效皆在70％以上，且明顯優(yōu)于乳塊消組(表18)。
表15、實(shí)驗(yàn)各組給藥結(jié)束時(shí)大鼠血清激素水平變化(n＝10，±S)

表16、大鼠乳腺病理增生分級(jí)

表17.實(shí)驗(yàn)各組大鼠乳腺組織細(xì)胞變化


表18、本發(fā)明中藥各治療組及乳塊消組療效比較

X2檢驗(yàn)，4組間比較，P＜0.05；結(jié)論本發(fā)明中藥各劑量組療效無差異；本發(fā)明中藥各劑量組療效優(yōu)于乳塊消組。
對(duì)本發(fā)明其它實(shí)施例的片劑以及其它劑型分別進(jìn)行試驗(yàn)，得到基本相似的結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)例4 子宮肌瘤研究本實(shí)驗(yàn)例為本發(fā)明中藥片劑對(duì)治療子宮肌瘤的實(shí)驗(yàn)研究。
1實(shí)驗(yàn)材料動(dòng)物雌性健康成年未孕豚鼠、體重350g～400g；健康Wistar大白鼠、體重180g～220g，雌雄兼用；昆明種小白鼠、體重18g～22g，雌雄各半；以上動(dòng)物由中國(guó)藥品生物制品檢定所實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。藥品與試劑本發(fā)明實(shí)施例6所制得的乳欣片，對(duì)照組桂枝茯苓丸(山西省臨汾中藥廠生產(chǎn)，批號(hào)040502)；苯甲酸雌二醇注射液(1mg/ml，上海第九制藥廠生產(chǎn)，批號(hào)040603)；黃體酮注射液(10mg/ml，天津氨基酸公司生產(chǎn)，批號(hào)040506)；阿斯匹林腸溶片(0.5g/片，天津中美史克制藥有限公司生產(chǎn)，批號(hào)040501)。
2方法與結(jié)果2.1抗子宮平滑肌瘤樣增生作用的研究將60只豚鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組、模型組、桂枝茯苓丸組、乳欣片高劑量組和低劑量組，每組12只動(dòng)物。參照李氏法制作子宮平滑肌瘤樣增生模型。造模方法為肌內(nèi)注射苯甲酸雌二醇，0.2mg/只，每周3次，連續(xù)3個(gè)月后，加黃體酮1.5mg/只肌注，2次/周，連續(xù)1個(gè)月。在造模同時(shí)，模型組每日灌喂生理鹽水2ml/只，桂枝茯苓丸組每日灌喂桂枝茯苓丸1g/只(約相當(dāng)于60kg體重成人常規(guī)用量的25倍)，乳欣片高劑量組和低劑量組，每日分別灌喂乳欣片1g/只、0.5g/只(約相當(dāng)于60kg體重成人常規(guī)量的25倍、12.5倍)?？瞻讓?duì)照組常規(guī)飼養(yǎng)，并每日灌喂生理鹽水2ml。4個(gè)月后，所有動(dòng)物稱重，擊頭處死，剖腹觀察子宮大體形態(tài)，沿子宮膀胱連接處剪取子宮，稱重，計(jì)算子宮系數(shù)(子宮重/100g體重)，量取子宮頸以上及分角子宮根部橫徑，然后固定于10％中性福爾馬林，子宮分角以上相同部位橫切取材0.3mm，石蠟包埋，HE染色，光鏡觀察子宮組織形態(tài)，每張切片選取5個(gè)部位在10×10倍鏡下顯微測(cè)微尺測(cè)量平滑肌厚度，取平均值。數(shù)據(jù)采用MINITAB SOFTEARE統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析Q檢驗(yàn)處理。結(jié)果如下2.1.1乳欣片對(duì)子宮重量的影響見表19a。模型組子宮重量增加，與對(duì)照組相比，有極顯著性差異(P＜0.01)，乳欣高劑量組子宮重量較模型組顯著減輕(P＜0.05)，乳欣片低劑量組，桂枝茯苓丸組子宮較模型組有減輕趨勢(shì)，但統(tǒng)計(jì)分析無顯著差異(P＞0.05)。
表19a 子宮重量比較(x±s)

注**與對(duì)照組比較P＜0.01；*與模型組比較P＜0.05。下同。
2.1.2乳欣片對(duì)子宮橫徑變化的影響見表19b。模型組兩處子宮橫徑較空白組增粗、差異有非常顯著意義(P＜0.01)，而治療組橫徑均小于模型組，差異有顯著意義(P＜0.05)。
表19b 子宮橫徑比較(cm，x±s)

2.1.3乳欣片對(duì)子宮組織形態(tài)學(xué)的影響鏡下觀察，造模組分角子宮根部平滑肌層明顯呈不均勻增厚，且平滑肌細(xì)胞排列系亂，其中有7只平滑肌排列呈卷云狀或編織狀，病變近似瘤樣增生；乳欣片高劑量組和低劑量組及桂枝茯苓丸組分角子宮平滑肌層薄于造模組，排列規(guī)整，乳欣片低劑量組和桂枝茯苓丸組分別有個(gè)別區(qū)域出現(xiàn)瘤樣增生病變。
2.1.4乳欣片對(duì)子宮平滑肌厚度化影響見表19c。模型組子宮平滑肌較空白對(duì)照組明顯增厚(P＜0.01)，桂枝茯苓丸和乳欣片高劑量組和低劑量組子宮平滑肌厚度較模型組薄(P＜0.05)。
表19c子宮平滑肌厚度比較


觀察本發(fā)明中藥組乳欣片對(duì)雌、孕激素誘發(fā)的豚鼠子宮平滑肌瘤的作用。灌胃給藥，連續(xù)灌服120天，結(jié)果發(fā)現(xiàn)本發(fā)明中藥乳欣片能抑制雌、孕激素誘發(fā)的豚鼠子宮平滑肌瘤樣增生、減輕增重子宮的重量及其平滑肌層增厚等病理現(xiàn)象。以低、中、高系列劑量灌胃給藥具有基本相同的作用。
2.2止血作用的研究2.2.1乳欣片對(duì)小鼠斷尾出血的影響取小鼠60只，雌雄各半，隨機(jī)分為空白組(生理鹽水1ml/只)、桂枝茯苓丸組(10g/kg)、實(shí)施例8的乳欣低、高劑量組(5g/kg、10g/kg)，每組15只。每日灌胃給藥1次，連續(xù)3天，于最后一次給藥后2小時(shí)，分別以利剪將小鼠尾尖0.5cm處橫斷，待血液自行流出時(shí)，每隔15sec用濾紙吸去血滴1次，直至血液自然停止，比較各組出血時(shí)間(見表19d)。結(jié)果表明與空白組相比較，乳欣可顯著縮短小鼠尾出血時(shí)間(P＜0.05)，桂枝茯苓丸具有使小鼠出血時(shí)間縮短的趨勢(shì)，但差異不顯著(P＞0.05)。
2.2.2乳欣片對(duì)小鼠凝血的影響取小鼠60只，隨機(jī)分為4組，每組雌雄各半，分組及給藥同2.2.1；最后一次給藥2小時(shí)后，采用毛細(xì)血管法測(cè)凝血時(shí)間取長(zhǎng)5cm，內(nèi)徑1mm玻管插入小鼠內(nèi)毗靜脈叢取血，滿后每隔15sec折斷玻管一段，檢查有無血凝絲出現(xiàn)，計(jì)算從采血到出現(xiàn)血凝絲時(shí)間，為凝血時(shí)間。比較各組凝血時(shí)間(見表4)。結(jié)果表明用藥組和對(duì)照組比較，凝血時(shí)間無顯著性差異。
表19d 乳欣片對(duì)出凝血時(shí)間的影響(min，x±s)

*與對(duì)照組比P＜0.05。
2.3抗炎作用的研究2.3.1乳欣片對(duì)二甲苯引起小鼠耳腫的影響方法與結(jié)果取小鼠50只，隨機(jī)分為5組(每組雌雄各半)，空白對(duì)照組(生理鹽水1ml/只)；阿斯匹林組(0.2g/kg)，桂枝茯苓丸組(10g/kg)，實(shí)施例8的乳欣片組(5g/kg、10g/kg)，每日灌胃給藥1次，連續(xù)3日，最后1次給藥后30分鐘，將二甲苯滴于小鼠右耳背15鐘后處死動(dòng)物，用5mm打孔器沿左右耳廓相同部位打孔取材，分別稱重，以兩耳片重差代表腫脹程度，比較各組腫脹程度并求出抑制率(MinitabSoftware統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行單因素方差分析和Q檢驗(yàn))。結(jié)果見表19e，用藥組與空白組比較，阿斯匹林、乳欣片高、低劑組均可使二甲苯所致的小鼠耳腫顯著減輕(P＞0.05)，桂枝茯苓丸組變化無顯著意義(P＜0.05)。
表19e 乳欣片對(duì)二甲苯引起小鼠耳腫的影響


本發(fā)明同時(shí)觀察了本發(fā)明中藥乳欣片(實(shí)施例6)對(duì)小鼠毛細(xì)血管通透性、對(duì)二甲苯誘發(fā)小鼠耳廓水腫以及對(duì)雞蛋清引起大鼠的足踞腫脹的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，冶療本發(fā)明中藥乳欣片能降低小鼠毛細(xì)血管通透性，減少滲出；對(duì)二甲苯誘發(fā)的小鼠耳廓腫脹及蛋清導(dǎo)致的大鼠足踞腫脹均有明顯的抑制作用，本發(fā)明中藥的抗炎作用隨劑量加大而增強(qiáng)。
2.3對(duì)雌激素所致小鼠子宮增重的影響用sc雌二醇的方法，制備小鼠子宮增重模型。本發(fā)明實(shí)施例11的中藥乳欣片以低、中、高系列劑量給昆明種雌性小鼠ig(灌胃給藥)給藥，連續(xù)灌服10天，實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)冶療本發(fā)明中藥中劑量組(13.569生藥/kg)和高劑量組(27.129生藥/kg)小鼠的子宮系數(shù)比模型對(duì)照組明顯降低。表明冶療本發(fā)明中藥對(duì)雌激素引起的小鼠子宮增重有一定程度的抑制。
2.3對(duì)大鼠離體子宮平滑肌的影響本實(shí)驗(yàn)通過大鼠離體子宮收縮試驗(yàn)，觀察中藥復(fù)方制劑宮瘤消顆粒對(duì)子宮平滑肌的影響。結(jié)果表明，本發(fā)明實(shí)施例6的中藥乳欣片低劑量組(終濃度為12.5mg生藥/ml)對(duì)正常子宮平滑肌的收縮幅度、頻率和活動(dòng)力均無明顯影響。中劑量組(25mg生藥/mI)和高劑量組(50mg生藥/ml)對(duì)正常子宮平滑肌收縮的幅度、頻率和活動(dòng)力均表現(xiàn)一定的抑制作用。對(duì)于催產(chǎn)素引起的子宮收縮狀態(tài)，本發(fā)明中藥中劑量組即表現(xiàn)明顯的抑制作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示，本發(fā)明中藥低劑量對(duì)正常子宮無明顯影響，較高劑量時(shí)對(duì)子宮平滑肌呈抑制作用。本發(fā)明中藥的作用與子宮所處的機(jī)能狀態(tài)有一定關(guān)系，當(dāng)子宮平滑肌處于收縮狀態(tài)時(shí)，較低劑量即可呈現(xiàn)抑制作用。
3討論現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為子宮肌瘤的生長(zhǎng)和發(fā)生與雌激素有關(guān)，子宮肌瘤組織中雌激素受體和雌二醇的含量較正常肌組織高，故本實(shí)驗(yàn)觀察了乳欣對(duì)苯甲酸雌二醇并黃體酮誘發(fā)的豚鼠子宮平滑肌瘤樣增生的影響，以證實(shí)該藥有無抗子宮平滑肌瘤樣增生作用；由于粘膜下、肌壁間肌瘤，影響子宮內(nèi)膜，干擾月經(jīng)周期，臨床表現(xiàn)月經(jīng)量過多，經(jīng)期延長(zhǎng)或不規(guī)則出血，持續(xù)淋漓不凈等，故進(jìn)行了止血與凝血兩項(xiàng)實(shí)驗(yàn)，以觀察本品對(duì)出凝血的影響。由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出，乳欣片對(duì)雌激素誘發(fā)的豚鼠子宮平滑肌瘤樣增生有顯著的抑制作用；可顯著縮短小鼠出血時(shí)間，而對(duì)凝血時(shí)間無顯著影響；對(duì)二甲苯所致小鼠炎癥有明顯的抑制作用。乳欣片治療子宮肌瘤的臨床效果有待進(jìn)一步觀察。
對(duì)本發(fā)明其它實(shí)施例的片劑以及其它劑型分別進(jìn)行類似試驗(yàn)，得到基本相似的結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)例5 乳腺癌研究本實(shí)驗(yàn)例通過研究本發(fā)明所述的中藥對(duì)人乳腺癌細(xì)胞株MCF27裸鼠移植瘤的抑制作用及其對(duì)細(xì)胞增殖的影響，從而驗(yàn)證本發(fā)明所述中藥對(duì)治療或預(yù)防乳腺癌的作用。
1材料與方法1.1材料來源未交配雌性Balb/c-n/n裸小鼠，鼠齡4～6周，體重10-20g，共40只，購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心；人乳腺癌細(xì)胞株MCF27購(gòu)自武漢典型動(dòng)物保藏中心；試驗(yàn)用藥為本發(fā)明所述的中藥，按照實(shí)施例6的方式制備；多柔比星為陽性對(duì)照藥，由浙江海正制藥股份有限公司生產(chǎn)；丙二醇(分析純)為重慶東方試劑廠生產(chǎn)；抗Ki267單克隆抗體(鼠抗人，即用型)和SP試劑盒(通用型)購(gòu)自福州邁新生物技術(shù)開發(fā)公司。
1.2實(shí)驗(yàn)方法1.2.1MCF27裸鼠移植瘤的復(fù)制 將MCF27細(xì)胞株培養(yǎng)于含10％小牛血清的RPM1 1640培養(yǎng)液中，并按16U/100mL加入精制胰島素。待傳代至足夠數(shù)量后，取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞用0.25％的胰酶消化成1.0×10-7mL-1的細(xì)胞懸液，于裸小鼠右側(cè)第1乳腺部位皮下注射，0.2mL/只。
1.2.2實(shí)驗(yàn)分組 腫瘤細(xì)胞接種后28d，有36只可見接種部位移植瘤生長(zhǎng)，4只未成瘤。將移植瘤接種成功的裸鼠隨機(jī)分組。I組(溶劑對(duì)照組)給予20％內(nèi)二醇，0.1mL/d，腹腔注射，1次/d，連續(xù)15d；II組(本發(fā)明所述中藥)給予本發(fā)明實(shí)施例1所述中藥乳欣50mg/(kg·d)溶于0.1mL20％丙二醇中，腹腔注射，1次/d，連用15d；III組(多柔比星組)給予多柔比星5.23mg/(kg·d)溶于0.1mL生理鹽水，腹腔注射，d1、d8、d15；給予20％丙二醇0.1mL/d，腹腔注射，1次/d，連用15d；IV組(聯(lián)合用藥組)給予多柔比星5.33mg/(kg·d)溶于0.1mL生理鹽水，腹腔注射，d1、d8、d15；給予本發(fā)明所述中藥50mg/(kg·d)溶于0.1mL 20％丙二醇中，腹腔注射，1次/d，連用15d。
1.2.3移植瘤生長(zhǎng)情況及藥物抑瘤作用觀察 用藥前及用藥后每3d測(cè)量一次移植瘤最小徑(a)和最大徑(b)，計(jì)算移植瘤體積(V＝a2*b/2)，并據(jù)此繪制移植瘤生長(zhǎng)曲線。藥物處理結(jié)束后1d，脫頸椎處死裸鼠，觀察記錄各組裸鼠乳腺包塊形態(tài)大小，將每個(gè)腫塊剝出稱重，計(jì)算抑瘤率。
抑瘤率(％)＝(1-實(shí)驗(yàn)組瘤重/對(duì)照組瘤重)×100％1.2.4組織學(xué)及電鏡觀察 取新鮮的移植瘤組織，10％甲醛固定，石蠟包埋，切片(5μm)，HE染色。4℃4％戊二醛預(yù)固定，1％鋨酸固定，浸透包埋，半薄切片，光鏡定位，超薄切片，染色，以Hitachi2600透射電鏡觀察。
1.2.5免疫組化檢測(cè)Ki267的表達(dá) 按福州邁新生物技術(shù)開發(fā)公司提供的SP法進(jìn)行免疫組化的檢測(cè)。結(jié)果判斷Ki267以細(xì)胞核內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性。判斷標(biāo)準(zhǔn)400倍鏡下5個(gè)視野中各計(jì)100個(gè)腫瘤細(xì)胞的陽性百分?jǐn)?shù)，取其均值作為Ki267標(biāo)記指數(shù)(Ki267 LI)。
1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 10.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行分析，各項(xiàng)數(shù)據(jù)均以x±s表示，用方差分析進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)。
2結(jié)果2.1移植瘤生長(zhǎng)情況接種MCF27乳腺瘤細(xì)胞株后10d，于接種處可見微小突起，以后逐漸明顯，40只裸鼠中有36只先后出現(xiàn)腫塊，接種成功率90％。接種28d后36只裸鼠移植瘤長(zhǎng)徑長(zhǎng)至0.8cm左右，再分組給予不同的藥物處理。藥物處理后，各組移植瘤繼續(xù)生長(zhǎng)增大，但對(duì)照組移植瘤生長(zhǎng)明顯快于其它3組(表20)。
表20 移植瘤生長(zhǎng)體積(mm3)

2.2藥物的抑瘤作用I組移植瘤質(zhì)量明顯高于II、III、IV組。II、III、IV組抑瘤率分別為36.46％、53.88％和41.49％。IV組抑瘤率高于II組抑瘤率，差異無顯著意義，P＞0.05，提示本發(fā)明所述中藥可抑制移植瘤的生長(zhǎng)，但在此劑量水平及用藥時(shí)間上，聯(lián)合用藥無明顯協(xié)同作用(表21)。
表21各組裸鼠移植瘤質(zhì)量比較

(SPSS 10.AVONA分析，II、III、IV組與I組比較有顯著差異，P＜0.01，II、III、IV組之間無顯著性差異，P＞0.05)2.3移植瘤組織病理學(xué)觀察2.3.1巨檢 移植瘤呈圓形、橢圓形或分葉狀生長(zhǎng)，質(zhì)地硬，切面灰白，大部分與周圍組織分界清楚。對(duì)照組可見胸壁浸潤(rùn)，其中1只還發(fā)現(xiàn)腋窩腫大淋巴結(jié)1枚。
2.3.2光鏡 移植瘤細(xì)胞形狀不規(guī)則，大小不一，核大，濃染，核異形性明顯，可見病理性核分裂相，核質(zhì)比例明顯增大。各組內(nèi)均可見組織壞死區(qū)，對(duì)照組相對(duì)較少。對(duì)照組發(fā)現(xiàn)的腋窩腫大淋巴結(jié)經(jīng)病理證實(shí)為淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌。
2.3.3電鏡 移植瘤細(xì)胞形態(tài)大小不一，核大不規(guī)則，核質(zhì)比例增大。對(duì)照組瘤細(xì)胞形態(tài)不規(guī)則，排列紊亂，核仁大，有的細(xì)胞可見2個(gè)核仁。本發(fā)明中藥組可見局灶性壞死區(qū)，核仁連集，常染色質(zhì)多，細(xì)胞器少，可見腺樣分化及內(nèi)包涵物，并可見凋亡現(xiàn)象。多柔比星組局灶性壞死區(qū)明顯，核仁大小不一，有的可見雙核仁，核仁邊集明顯，可見核膜破裂，部分粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、線粒體腫脹，細(xì)胞器部分崩解。
2.4移植瘤組織Ki-67免疫組化檢測(cè)結(jié)果移植瘤組織中Ki-67陽性表達(dá)主要位于細(xì)胞核。對(duì)照組表達(dá)率高于本發(fā)明中藥組、多柔比星組及聯(lián)合用藥組，聯(lián)合用藥組低于單用本發(fā)明中藥組(表22)。
表22 各組裸鼠移植瘤組織抗Ki-67免疫組化結(jié)果比較

(SPSS10.0AWONA分析，II、III、IV組與I組比較有顯著差異，P＜0.01，II、III組與IV之間比較有顯著差異，P＜0.01，II、III組之間無顯著性差異，P＞0.053討論本實(shí)驗(yàn)通過復(fù)制人乳腺癌細(xì)胞株MCF27裸鼠移植瘤，觀察本發(fā)明中藥的抗癌作用，對(duì)照組瘤重明顯高于本發(fā)明中藥組、多柔比星組多聯(lián)合用藥組，P＜0.01，表明本發(fā)明中藥及聯(lián)合用藥均可明顯抑制移植瘤的生長(zhǎng)。本實(shí)驗(yàn)用的MCF27細(xì)胞株不是耐多柔比星的細(xì)胞株，因此沒有體現(xiàn)出聯(lián)合用藥的協(xié)同作用。
盡管MCF27細(xì)胞株不是高侵襲性的細(xì)胞株，但我們?nèi)匀挥^察到對(duì)照組裸鼠有胸壁浸潤(rùn)的現(xiàn)象，其中1只尚有腑窩腫大淋巴結(jié)，經(jīng)病理證實(shí)系淋能結(jié)轉(zhuǎn)移癌，而其他各藥組均未發(fā)現(xiàn)此現(xiàn)象，反映本發(fā)明所述中藥及聯(lián)合用藥對(duì)移植瘤生長(zhǎng)、浸潤(rùn)甚至轉(zhuǎn)移有抑制作用。Ki-67存在于細(xì)胞周期的G1后期、S、G2和M期，而不存在于靜止的G0期細(xì)胞，是應(yīng)用最廣泛的增殖標(biāo)記之一。它在G1后期開始出現(xiàn)，在S期和G2期逐漸升高，M期達(dá)到高峰，有絲分裂結(jié)束后，迅速降解消失。Ki267指數(shù)與腫瘤良、惡性程度有關(guān)，與腫瘤的惡性程度呈正相關(guān)。而且Pierga等提出，Ki-67表達(dá)情況可用為鑒別良惡性腫瘤的一個(gè)指標(biāo)，或作為判斷腫瘤侵襲能力的一種標(biāo)志。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果Ki-67指數(shù)對(duì)照組最高，本發(fā)明中藥組次之，均高于聯(lián)合用藥組，P＜0.01，表明本發(fā)明所述中藥有抑制移植瘤細(xì)胞增殖的作用，而且可協(xié)同多柔比星提高其抗增殖作用。
對(duì)本發(fā)明其它實(shí)施例的片劑以及其它劑型分別進(jìn)行試驗(yàn)，得到基本相似的結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)例6 毒理研究本實(shí)驗(yàn)例涉及本發(fā)明藥物的毒理學(xué)研究。
以小鼠為受試動(dòng)物，采用最大給藥劑量法，對(duì)中藥本發(fā)明中藥單次經(jīng)口灌胃給藥毒性進(jìn)行觀察。本發(fā)明實(shí)施例2中藥乳欣片給藥劑量30g/kg(相當(dāng)于生藥256.2g/kg體重)，20只動(dòng)物，雌雄各半；經(jīng)口灌胃給藥，給藥1天，上午、下午各1次，連續(xù)觀察14天。
給藥后對(duì)小鼠的一般癥狀、體重等進(jìn)行觀察。本發(fā)明中藥給藥后30min內(nèi)、1-4h時(shí)及此后14天內(nèi)均未見明顯中毒癥狀，觀察14天后體重增加無降低。結(jié)果表明，本發(fā)明中藥單次給藥的最大給藥劑量大于30g/kg，本發(fā)明中藥用藥不會(huì)產(chǎn)生急性毒性反應(yīng)。
本發(fā)明中藥重復(fù)給藥毒性很低，大劑量給藥時(shí)可引起一過性肝功能、血清CHOL改變，血液學(xué)、血清生化指標(biāo)無異常變化，大體解剖、臟器系數(shù)及病理組織學(xué)檢查未見異常。初步推定本發(fā)明中藥作用靶器官為肝臟，但改變屬可逆性。本發(fā)明中藥大鼠經(jīng)口給藥安全劑量在4-8g/kg，相當(dāng)于人生藥給藥量為34.2-68.3g/kg，折算為人生藥用量的6-12倍，比催乳顆粒用藥更安全。
綜上表明，本發(fā)明中藥用藥無急性毒性反應(yīng)，重復(fù)用藥安全。
對(duì)本發(fā)明其它實(shí)施例的片劑以及其它劑型分別進(jìn)行試驗(yàn)，得到基本相似的結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)例7 穩(wěn)定性試驗(yàn)本實(shí)驗(yàn)例涉及本發(fā)明藥物的初步穩(wěn)定試驗(yàn)。
1.方法取樣品置溫度37-40℃，相對(duì)濕度75％的恒溫恒濕箱中定期檢查各項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行加速試驗(yàn)。
每月觀察一次，觀察外觀，崩解時(shí)間，并對(duì)成分進(jìn)行鑒別和含量測(cè)定，連續(xù)觀察六個(gè)月。
2.結(jié)果本發(fā)明實(shí)施例1-13的中藥制劑中各項(xiàng)指標(biāo)在六個(gè)月的加速試驗(yàn)中結(jié)果如下外觀 無變化，崩解時(shí)間 31-40min，鑒別 陽性，黃芪甲苷含量 無明顯波動(dòng)，阿魏酸含量無明顯波動(dòng)細(xì)菌總數(shù)個(gè)/克 ＜50，霉菌總數(shù)個(gè)/克 ＜50，大腸桿菌活螨 未檢出。
3.結(jié)論本制劑經(jīng)加速穩(wěn)定性試驗(yàn)六個(gè)月指標(biāo)無明顯改變，上述結(jié)果說明本發(fā)明的催乳藥物穩(wěn)定性良好。
同樣的試驗(yàn)表明，本發(fā)明其它實(shí)施例的制劑穩(wěn)定性良好。
實(shí)驗(yàn)例8乳腺增生病70例的臨床研究乳腺增生病是臨床最常見的乳房疾病之一，部分類型與乳腺癌的發(fā)生密切相關(guān)。本發(fā)明中藥制劑乳欣片用于治乳腺增生病具有健脾益氣、養(yǎng)血柔肝、活血通絡(luò)、軟堅(jiān)散結(jié)的作用。現(xiàn)報(bào)告如下。
1資料與方法1.1診斷標(biāo)準(zhǔn) 自覺乳房脹痛，多有周期性脹痛特點(diǎn)，脹痛程度不一，一側(cè)或雙側(cè)乳房?jī)?nèi)可捫及多個(gè)散在大小不等的結(jié)節(jié)狀腫塊，質(zhì)韌而不硬，邊界不清，但與皮膚和基底不相連，可推動(dòng)，多數(shù)有輕壓痛。
1.2臨床資料 70例均為門診女性患者，年齡在16～65歲，平均36.5歲；病程最短2個(gè)月，最長(zhǎng)20年，平均8.5年。多以雙乳多發(fā)性的乳腺結(jié)節(jié)、乳房脹痛等癥狀就診。
1.3治療方法 70例乳腺增生患者均口服乳欣片，1次3片，1日3次，飯后服用，經(jīng)期停服。3個(gè)月為1個(gè)療程，每月來院復(fù)診1次。
2治療效果2.1療效標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)中華全國(guó)中醫(yī)學(xué)會(huì)外科學(xué)會(huì)乳腺病專題組制定的療效評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)判定。治愈乳房結(jié)節(jié)消失，乳痛消失；顯效乳房結(jié)節(jié)變軟，直徑縮小1/2以上，乳痛消失；有效乳房結(jié)節(jié)變軟，直徑縮小不足1/2，乳痛減輕；無效乳房結(jié)節(jié)無縮小，乳痛無緩解。
2.2結(jié)果70例患者均遵醫(yī)囑服藥，未同時(shí)服用其他藥物。結(jié)果見表23。
表23 療效與服用療程

從表24可看出服藥時(shí)間越長(zhǎng)，療效越好，總有效率越高。這與中藥本身特點(diǎn)有關(guān)，雖起效慢，但能標(biāo)本同治；療效與患者病程長(zhǎng)短亦有關(guān)，病程較長(zhǎng)者，相對(duì)療程亦長(zhǎng)。在整個(gè)服藥期間，未見明顯不良反應(yīng)。
3討論乳腺增生以中青年女子多見，為婦女常見病、多發(fā)病，易惡變。它的發(fā)生與卵巢功能失調(diào)有密切關(guān)系，正常的乳腺組織隨著月經(jīng)周期性激素的變化(主要是雌激素及孕激素)周而復(fù)始地進(jìn)行增生-復(fù)舊-增生的循環(huán)過程。若因各種原因，該生理過程被打亂，進(jìn)而體內(nèi)內(nèi)分泌紊亂，卵巢功能失調(diào)，雌激素分泌過多，致使雌激素長(zhǎng)期刺激乳腺組織，導(dǎo)致正常乳腺組織過度增生而復(fù)舊不全，因而發(fā)生乳腺增生病。本發(fā)明的乳欣片能夠通過健脾益氣、養(yǎng)血柔肝、活血通絡(luò)、軟堅(jiān)散結(jié)，對(duì)乳腺增生有標(biāo)本兼治之功效，未見明顯不良反應(yīng)。同時(shí)，還具有抗慢性增生性炎癥的作用，可抑制纖維結(jié)締組織增生，因而有消腫散結(jié)的作用。我們認(rèn)為，乳欣片不失為一種可供乳腺增生患者選擇的較佳藥物。
臨床試驗(yàn)表明，本發(fā)明其它實(shí)施例的乳欣片也具有基本的效果。
實(shí)驗(yàn)例9子宮肌瘤的臨床研究對(duì)確診為子宮肌瘤(uterine myoma)的患者服用本發(fā)明的實(shí)施例6的中藥乳欣片，月經(jīng)后第七天開始服用，每次3片，每日3次，2-3周為一個(gè)療程，可以連續(xù)服用2-3個(gè)療程，其藥效較婦康片組提高30％。
對(duì)本發(fā)明其它實(shí)施例的片劑以及其它劑型分別進(jìn)行試驗(yàn)，得到基本相似的結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)例10乳腺癌62例的臨床研究一、病例選擇62例病人，均經(jīng)各大醫(yī)院確診為乳腺癌患者，全部為女性，年齡最小者35歲，最大者66歲。
二、治療方法對(duì)確診為乳腺癌的患者，服用本發(fā)明實(shí)施例6的中藥乳欣片，月經(jīng)后第七天開始服用，每次3片，每日3次。每40天為一個(gè)療程，連續(xù)服用2個(gè)療程后停藥休息一周，詳細(xì)觀察病情變化進(jìn)行檢查。然后進(jìn)行第三個(gè)療程治療，在服藥期間停服其它藥品。
三、療效標(biāo)準(zhǔn)臨床治愈腫瘤完全消失，維持時(shí)間在6個(gè)月至一年，無復(fù)發(fā)征象。
臨床顯效腫瘤縮小1/2以上，維持時(shí)間在1個(gè)月以上者。
臨床有效腫瘤縮小不足1/2，維持時(shí)間在1個(gè)月以上者。
臨床無效腫瘤無變化，或短期內(nèi)有效后又繼續(xù)增大者。
四、療效觀察結(jié)果表24 療效結(jié)果

從表25可以看出，本發(fā)明選用天然中草藥為原料，其組方配伍得當(dāng)，劑量準(zhǔn)確，標(biāo)本兼治，療效獨(dú)特，并且對(duì)人體無毒無害，無副作用，服用方便，總有效率達(dá)92％。
對(duì)本發(fā)明其它實(shí)施例的片劑以及其它劑型分別進(jìn)行試驗(yàn)，得到基本相似的結(jié)果。
權(quán)利要求
1.一種預(yù)防及治療缺乳、少乳、婦科疾病的中藥制劑，其特征在于，所述制劑的配方中包括黃芪100-487重量份黨參100-487重量份白術(shù)50-196重量份當(dāng)歸50-196重量份川芎49-146重量份，漏蘆50-146重量份萱草根49-98重量份柴胡49-146重量份王不留行(炒)60-146重量份所述中藥通過如下工藝制備①黃芪、黨參、柴胡、王不留行、漏蘆、萱草根加水煎煮至少兩次，將濾液濃縮得到水煮稠膏，②將白術(shù)、當(dāng)歸、川芎加60％--90％的乙醇回流提取至少兩次，提取液經(jīng)濃縮得到提取稠膏，③將水煮稠膏1-5重量份和提取稠膏1-5重量份混合得混合稠膏，然后加入輔料制成各種制劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的中藥制劑，其特征在于，所述制劑的配方中包括黃芪146-250重量份黨參146-300重量份白術(shù)98-130重量份當(dāng)歸120-160重量份川芎60-98重量份柴胡60-146重量份王不留行(炒)60-146重量份漏蘆50-146重量份萱草根49-98重量份。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的中藥制劑，其特征在于，所述制劑的配方中包括黃芪146重量份黨參146重量份白術(shù)98重量份當(dāng)歸146重量份川芎98重量份柴胡98重量份王不留行(炒)98重量份漏蘆98重量份萱草根73重量份。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任何一項(xiàng)所述的中藥制劑，其特征在于所述的制備過程中還包括將稠膏干燥得到干膏，再按照常規(guī)中藥制劑的制備方法加入輔料制成適宜給藥的各種制劑劑型。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2或3或4所述的中藥制劑，其特征在于所述中藥制劑為片劑，所述的片劑包括如下成分混合稠膏3-10重量份稀釋劑或吸收劑1-10重量份崩解劑4-16重量份潤(rùn)滑劑0.1-1重量份或者在用混合干膏制備片劑時(shí)，所述的片劑中包括混合干膏1-8重量份。
6.一種預(yù)防及治療缺乳、少乳、婦科疾病的中藥制劑的制備方法，其特征在于，所述制劑的配方中包括黃芪100-487重量份黨參100-487重量份白術(shù)50-196重量份當(dāng)歸50-196重量份川芎49-146重量份，漏蘆50-146重量份萱草根49-98重量份柴胡49-146重量份王不留行(炒)60-146重量份所述中藥通過如下工藝制備①黃芪、黨參、柴胡、王不留行、漏蘆、萱草根加水煎煮至少兩次，將濾液濃縮得到水煎稠膏，②將白術(shù)、當(dāng)歸、川芎加60％--90％的乙醇回流提取至少兩次，提取液經(jīng)濃縮得到提取稠膏，③將水煮稠膏1-5重量份和提取稠膏1-5重量份混合得混合稠膏，然后加入輔料制成各種制劑。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的中藥制劑的制備方法，其特征在于所述的制備過程中還包括將稠膏干燥得到干膏，再按照常規(guī)中藥制劑的制備方法加入輔料制成適宜給藥的各種制劑劑型。
8.根據(jù)權(quán)利要求6或7所述的中藥制劑的制備方法，其特征在于，在加水煎煮時(shí)水的加入量為藥材量的3-8倍，在乙醇提取過程中乙醇的加入量為藥材量的2-8倍，時(shí)間均為0.5-3小時(shí)，煎液和提取液過濾后減壓濃縮；優(yōu)選在加水煎煮時(shí)水的加入量為藥材量的4-6倍，在乙醇提取過程中乙醇的加入量為藥材量的3-5倍，時(shí)間均為0.5-1.5小時(shí)，煎液和提取液過濾后減壓濃縮，濃縮條件為50-80℃，0.07-0.09Mpa，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.20-1.30g/ml的稠膏。優(yōu)選加水煎煮后合并煎液，過濾，濾液減壓濃縮至相對(duì)密度為1.10-1.40g/ml的水煮稠膏。優(yōu)選在醇提后合并提取液，過濾，濾液減壓濃縮至相對(duì)密度為1.10-1.40g/ml的提取稠膏。減壓濃縮也可以在加熱的條件下進(jìn)行，優(yōu)選的濃縮條件為40-90℃，0.05-0.1Mpa。
9.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種中藥制劑，其特征在于，片劑中所用的稀釋劑或吸收劑為淀粉、糊精、糖粉或乳糖，崩解劑為微晶纖維素或干燥淀粉，潤(rùn)滑劑為硬脂酸鎂或滑石粉。
10.權(quán)利要求1-5任何一項(xiàng)所述的一種中藥制劑在制備治療婦女產(chǎn)后缺乳、少乳和治療或預(yù)防婦科疾病特別是治療或預(yù)防乳腺增生病/征、子宮肌瘤以及乳腺癌的藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種治療缺乳、少乳、乳腺增生病/征、子宮肌瘤和防治乳腺癌的中藥、其制備方法及其用途，是將黃芪100－487重量份、黨參100－487重量份加3－8倍水煎煮0.5－3小時(shí)至少兩次后，將濾液濃縮得到水煮稠膏；將白術(shù)50－196重量份、當(dāng)歸50－196重量份、川芎49－146重量份加60％－90％的乙醇回流提取至少兩次后，提取液經(jīng)濃縮得到提取稠膏。將所得到的稠膏混合成混合稠膏后，按照常規(guī)中藥制劑的制備方法加入輔料制成顆粒劑、膠囊、口服液、片劑等劑型；本發(fā)明的藥物還可含有柴胡49－146重量份、王不留行(炒)73－146重量份；也可進(jìn)一步含有漏蘆82－146重量份、萱草根49－98重量份；本發(fā)明的中藥具有益氣養(yǎng)血、通絡(luò)下乳；健脾益氣、養(yǎng)血柔肝、活血通絡(luò)、軟堅(jiān)散結(jié)，治療缺乳、乳腺增生病/征、子宮肌瘤和防治乳腺癌的功效。
文檔編號(hào)A61K9/20GK101073643SQ20071010708
公開日2007年11月21日 申請(qǐng)日期2007年5月18日 優(yōu)先權(quán)日2006年5月19日
發(fā)明者高尚先 申請(qǐng)人:高尚先