專利名稱：一種穩(wěn)定的藥物脂質(zhì)復(fù)合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，確切的說是一種穩(wěn)定的藥物脂質(zhì)復(fù)合物及其制備 方法。
背景技術(shù)：
難溶性藥物非腸道給藥時因不溶于水，常需將藥物制成水溶性鹽或采用非 水溶媒、復(fù)合溶媒、表面活性劑來增加藥物的溶解度，這些方法雖然能解決藥物 的溶解性問題，但通常不能使藥物的刺激性、毒性降低,反而使其增加，臨床應(yīng) 用時會引起血管刺激等嚴重副作用，并且使用時有諸多限制高濃度用量時有 疼痛感，用其它靜脈注射液稀釋又產(chǎn)生藥物沉淀;注射速度過快，藥物會在血管 中沉淀。為使這些藥物能安全的通過靜脈注射使用，并意圖降低藥物的毒、副作用， 即解決藥物的穩(wěn)定性及注射用藥的刺激性， 一般將藥物制成脂質(zhì)體、微球、聚合 物微粒等制劑，但是這些藥用載體仍然有一些缺陷微球適合化學(xué)栓塞及局部注射，但不適于注射用藥；脂質(zhì)體、可用于多種給藥途徑和制劑，當(dāng)它作為抗癌藥物載體時可使藥物選擇性地殺傷癌細胞，提高療效，但由于磷脂雙分子膜的不 穩(wěn)定性，導(dǎo)致藥物包裹率很低，不適于高劑量藥物，且長期放置容易聚集和滲漏， 對于一些臨床用量較高的藥物，如大環(huán)內(nèi)酯類抗生素，有一定的工藝困難且難以大批量生產(chǎn)而限制了其應(yīng)用；新近出現(xiàn)的以高熔點脂質(zhì)材料的為載體的固體脂質(zhì) 納米粒彌補了脂質(zhì)體的膜不穩(wěn)定性，但制備過程需要高溫、高剪切力等劇烈條件， 使其應(yīng)用受到了限制。中國專利CN1253018A和CN1579546均采用生物可降解的 PLGA(乳酸-羥基乙酸共聚物)等高分子材料為載體制備聚合物納米粒，但仍存在 藥物包裹率低及藥物在聚合物材料中的不穩(wěn)定和粒度難以控制等問題。顯然，這些缺陷極大地限制了這類藥物的注射劑在臨床上的使用。因此，開發(fā)一種能增加其于水溶液中穩(wěn)定性、降低藥物對血管壁的刺激性、成本比較低廉 的制劑學(xué)方法，在臨床上具有重要意義。在前期專利CN1552339研究中，通過對部分大環(huán)內(nèi)酯類抗生素制備膽固醇衍 生物復(fù)合物來實現(xiàn)降低血管刺激性的目的，進一步研究發(fā)現(xiàn)利用以上方法制備的 藥物脂質(zhì)復(fù)合物不夠穩(wěn)定，產(chǎn)品經(jīng)稀釋之后，很快會有部分藥物游離出來，使用 時產(chǎn)生血管刺激。進一步研究發(fā)現(xiàn)，將藥物制備成膽固醇衍生物磷脂復(fù)合物后， 穩(wěn)定性增強，更適于臨床使用，使用時對血管幾乎無刺激性。本專利為前期專利 CN1552339的延續(xù)。發(fā)明內(nèi)容一些藥物如克拉霉素、阿奇霉素、羅紅霉素、地紅霉素、泰利霉素、萬古霉 素、去甲萬古霉素、達托霉素、米諾環(huán)素、特拉萬辛(telavancin)、兩性霉素 B、制霉菌素、大觀霉素、青蒿素、雙氫青蒿素、伊曲康唑、特比萘芬、阿霉素、 長春瑞賓、紫杉醇、多烯紫杉醇、水飛薊素、水飛薊賓，這些藥物本身不溶于水， 為制成適于注射使用的液體制劑，通常是將藥物與酸或堿成鹽，進而溶于水中； 或使用有機溶劑來增加藥物在水中的溶解度。但是，這些藥物通常又存在血管刺 激、腎毒性等問題，無法通過增溶來解決，本發(fā)明目的是為了克服上述已有技術(shù) 存在的缺陷，提供一種穩(wěn)定的脂質(zhì)復(fù)合物及其制備方法。該復(fù)合物是藥物與兩性 分子膽固醇的衍生物和磷脂類通過分子間相互作用形成復(fù)合物，該復(fù)合物以顆 粒的形式均勻而穩(wěn)定地分散于水中，該分散體系可以稀釋、濃縮、凍干以及凍干 后再溶解和稀釋，均呈現(xiàn)穩(wěn)定、均勻的分散特征；該復(fù)合物的制備是通過將藥物 與膽固醇的衍生物和磷脂類共同溶解于同一溶劑體系中，使藥物分子與膽固醇的 衍生物和磷脂類分子充分作用，形成復(fù)合物，然后將此溶液滴加入水或緩沖液中 形成復(fù)合物顆粒，或除去溶劑后，再將復(fù)合物分散于水或緩沖液中。為了便于保 存，這些復(fù)合物制劑可使用凍干或噴霧干燥等方法制成固體制劑保存。膽固醇是一親脂性分子，將膽固醇分子衍生后可形成一親水性基團而成為兩 性分子，其兩性化方法是將分子中的羥基衍生成鹽，通?？芍瞥闪蛩猁}、磷酸鹽 及磺酸鹽等。膽固醇衍生物具有無毒、無刺激性、在體液中存在的特點。在水中 一些藥物分子與兩性化的膽固醇分子通過親脂性部分的疏水力以及可能也通過 親水性部分的極性親和力，而形成按照一定分子摩爾數(shù)比的多分子復(fù)合物；磷脂是由一親水的頭部和兩個疏水的尾部組成，頭部由磷酸骨架與水溶性分子如膽 堿、絲氨酸等酯化而成，可以溶于水，向下延伸的兩條尾部是脂肪酸鏈，每條由 10-20個炭原子和0-6個雙鍵組成，不溶于水，磷脂的兩親性及鏈式結(jié)構(gòu)可與藥物 膽固醇衍生物復(fù)合物的親水和疏水部分結(jié)合產(chǎn)生交聯(lián)作用，增加其穩(wěn)定性，減少 藥物的滲漏。所形成的這種復(fù)合物以膠體的形式均勻而穩(wěn)定地分散于水中，可提 高藥物的穩(wěn)定性，增加藥物的溶解度，降低藥物的刺激性。在藥物與膽固醇衍生物形成的復(fù)合物中加入磷脂類成份，可以使形成的復(fù)合 物更加穩(wěn)定，這些磷脂直接參與或在復(fù)合物顆粒表面形成膜來保護復(fù)合物。對于 一些不能與磷脂類直接形成復(fù)合物的藥物，通過膽固醇衍生物即可形成脂質(zhì)復(fù)合 物，同時保證了復(fù)合物的穩(wěn)定性，也避免了膽固醇衍生物濃度高導(dǎo)致的溶血。對 于一些藥物如大環(huán)內(nèi)酯類，雖然可以與膽固醇衍生物形成復(fù)合物，但由于形成的 復(fù)合物在體液中不夠穩(wěn)定，且使膽固醇衍生物在體液中濃度增加，形成過飽和， 易導(dǎo)致溶血，同時克服血管刺激作用不夠強，通過加入磷脂形成復(fù)合物可解決這 些問題。膽固醇衍生物中膽固醇硫酸鈉、膽固醇磷酸鈉、膽固醇磺酸鈉是比較安 全且可用于制備復(fù)合物的衍生物，磷脂類中蛋黃卵磷脂、大豆卵磷脂、二硬酯酰 膽堿、二棕櫚酰膽堿、磷脂酰甘油、磷脂酸、磷脂酰肌醇，為常用于制備脂質(zhì)體 及脂質(zhì)復(fù)合物的材料。在制備藥物與膽固醇衍生物和磷脂類的復(fù)合物時，藥物與 膽固醇衍生物須在一定比例范圍內(nèi)方可形成復(fù)合物，通常比例為膽固醇衍生物和 藥物分子的摩爾比為1:5 20:1，其中優(yōu)選的比例為1:3 3:1。超出此比例較難 形成，對于磷脂類的加入量也應(yīng)選擇合適的比例，磷脂加入的量少，不足以增加 復(fù)合物穩(wěn)定性，加入過多成本高，也會析出，實驗證實比例應(yīng)為磷脂分子與藥物 分子的摩爾比例為0. 1:1 20:1，其中優(yōu)選的比例為0. 1:1 3:1，對于克拉霉素 在藥物膽固醇硫酸鈉卵磷脂比例為0. 5g:0. 4g:lg時形成的復(fù)合物較穩(wěn)定。在制 備這些復(fù)合物時，藥物、磷脂類、膽固醇衍生物需溶解于同一溶劑體系時，方可 形成復(fù)合物，由于三者通常不能同時溶于同一溶劑，如膽固醇硫酸鈉易溶于 DMSO，而卵磷脂易溶于乙醇，故需分別溶解或選擇混合溶劑，溶劑應(yīng)選DMSO、 DMF、四氫呋喃、甲醇、乙醇的一種或幾種混合。將溶解于同一溶劑體系的藥物 與脂質(zhì)體滴入緩沖液中，以復(fù)合物形式析出，或直接除去溶劑形成復(fù)合物，進一 步分散于緩沖液中。制備時，最好選用緩沖液，尤其是P服、H7.5的中性緩沖液作為復(fù)合物的分散體系。對于克拉霉素等大環(huán)內(nèi)酯類抗生素及一些臨床使用劑量高的抗生素如萬古 霉素、米諾環(huán)素、兩性霉素和一些抗癌藥如長春瑞濱等，由于劑量大等原因，使 用脂質(zhì)體較困難，單獨使用磷脂類又較難形成復(fù)合物，選膽固醇衍生物與磷脂類 共同使用制備復(fù)合物具有明顯的臨床意義。所制備的復(fù)合物可以以液體形式存在，但最好是采用凍干制成凍干制劑，這 樣可以使制成的制劑更加穩(wěn)定，易于保存。為臨床需要及制劑要求，可在制劑中 加入凍干支撐劑等輔料，以滿足制劑及臨床需要。


圖1是實施例8的兩種藥物復(fù)合物釋放度曲線 具體實施方案下面給出本發(fā)明的穩(wěn)定的脂質(zhì)復(fù)合物的部份實施例，這些實施例不限制本發(fā) 明范圍。實施例1:配方膽固醇酰硫酸鈉 0.35g(約0.71mmo1)克拉霉素 0. 5g (約0. 66mmo1)蛋黃卵磷脂 0. 75g (約0. 96mmo1)分別按配方量稱取膽固醇硫酸鈉與克拉霉素置100ml的燒杯中，加入二甲基 亞砜15ml， 45'C水浴保溫，不斷攪拌使溶解；另按配方量稱取蛋黃卵磷脂置50ml 燒杯中，加入乙醇12ml，不斷攪拌使溶解，45。C水浴保溫。將磷脂的乙醇溶液 緩緩倒入上述二甲基亞砜溶液中，輕輕攪拌使混合均勻，于45'C水浴保溫備用。用注射器吸取上述藥物溶液，以5ml/min的速度pH7.2tris緩沖液中，直至所有 的藥物溶液注入完畢即得克拉霉素脂質(zhì)復(fù)合物混懸液。注入過程中，緩沖液應(yīng)輕 輕攪拌以加速有機溶劑的擴散。將上述藥物復(fù)合物混懸液中的有機溶劑和少量的游離藥物除去，濃縮。在此 過程中加入適量乳糖，使最終的藥物復(fù)合物混懸液中乳糖的濃度為lg/10ml。最 終藥物濃度為15mg/ml，收率85°/。上下。將此藥物復(fù)合物混懸液經(jīng)0. 22陶濾膜過 濾除菌，冷凍干燥,得藥物復(fù)合物凍干品，加注射用水復(fù)溶得(約0. 71腿01)略帶 藍色乳光的藥物復(fù)合物混懸液,經(jīng)馬爾文激光粒度儀測定，平均粒徑105nm，粒徑 分布均勻。實施例2:配方:膽固醇酰硫酸鈉膽固醇酰磷酸鈉蛋黃卵磷脂 大豆磷脂0. 2g(約0. 41腸1) 0. 15g(約0. 291腿o1) 0. 5g(約0. 67,1) 0. 5g(約0. 64mmo1) 0. 25g(約0. 32腸1)分別按配方量稱取膽固醇硫酸鈉、膽固醇磷酸鈉、克拉霉素置100ml的燒 杯中，加入二甲基亞砜15ml， 45。C水浴保溫，不斷攪拌使溶解；另按配方量稱 取蛋黃卵磷脂和大豆磷脂置50ml燒杯中，加入乙醇12ml，不斷攪拌使溶解，45 'C水浴保溫。將磷脂的乙醇溶液緩緩倒入上述二甲基亞砜溶液中，輕輕攪拌使混 合均勻，于45。C水浴保溫備用。用注射器吸取上述藥物溶液，以5ml/min的速 度注入pH7. 2緩沖液中，直至所有的藥物溶液注入完畢即得克拉霉素脂質(zhì)復(fù)合物 混懸液。注入過程中，緩沖液應(yīng)輕輕攪拌以加速有機溶劑的擴散。將上述藥物復(fù)合物混懸液中的有機溶劑和少量的游離藥物除去，濃縮。在此過程中加入適量乳糖，使最終的藥物復(fù)合物混懸液中乳糖的濃度為lg/10ml。最 終藥物濃度為15mg/ml,收率85%上下。將此藥物復(fù)合物混懸液經(jīng)0. 22Mm濾膜過 濾滅菌,冷凍干燥，得藥物復(fù)合物凍干品，加注射用水復(fù)溶得略帶藍色乳光的藥物 復(fù)合物混懸液，經(jīng)馬爾文激光粒度儀測定,平均粒徑101nm，粒徑分布均勻。實施例3:配方兩性霉素B 0. 5g (約0. 54mmo1)膽固醇磷酸鈉 0.3g(約0.58mmo1)蛋黃卵磷脂 0. 5g (約0. 64mmo1)按配方量稱取兩性霉素B和膽固醇磷酸鈉置100ml的燒杯中，加入二甲基亞 砜15ml,于45'C水浴保溫，不斷攪拌使溶解；另按配方量稱取蛋黃卵磷脂溶于 10ml微熱的乙醇中，緩緩加入上述藥物的二甲基亞砜溶液中，攪拌使混合均勻。 45。C水浴保溫備用。用注射器吸取上述藥物溶液，緩緩注入pH7.2的緩沖液中， 此過程應(yīng)緩慢攪拌以加速有機相的擴散。藥物溶液注入完畢即得兩性霉素B脂質(zhì) 復(fù)合物混懸液，將有機溶劑和少量的游離藥物除去，濃縮。最終藥物濃度為 10mg/ml的略帶藍色乳光的混懸液。經(jīng)馬爾文激光粒度儀測定,藥物復(fù)合物微粒 的平均粒徑為112nm，粒徑分布均勻。實施例4:配方兩性霉素B 0. 5g (約0. 54mrao1)膽固醇硫酸鈉 0. 26g(約0. 53誦o1)蛋黃卵磷脂 2g(約2.5mmo1)按配方量稱取兩性霉素B和膽固醇硫酸鈉置100ml的燒杯中，加入15ml 二甲 基亞砜，于45'C水浴保溫，不斷攪拌使溶解；另按配方量稱取蛋黃卵磷脂置50ml 燒杯中，加30ml乙醇使溶解，于45。C水浴保溫。將上述二甲基亞砜溶液緩緩加入 磷脂的乙醇溶液中，攪拌使混合均勻，用注射器吸取上述藥物溶液以5ml/min的 速度注入pH7. 2的緩沖液中，注入完畢即得藥物復(fù)合物混懸液，將有機溶劑和少 量的游離藥物除去,濃縮。加入乳糖適量,使最終乳糖濃度為lg/10ml，藥物濃度 為10mg/min。將此藥物復(fù)合物混懸液經(jīng)0. 22陶濾膜過濾除菌，冷凍干燥得兩性 霉素B凍干品。加注射用水復(fù)溶得淡白色乳光的藥物復(fù)合物混懸液，經(jīng)馬爾文激 光粒度儀測定，藥物復(fù)合物微粒的平均粒徑為127nm，粒徑分布均勻。實施例5:配方羅紅霉素 0. 5g(約0. 59mmo1)膽固醇硫酸鈉 1. 5g(約3. lmmol)磷脂酰膽堿 0. 2g (約0. 64mmo1)按配方量稱取羅紅霉素和膽固醇硫酸鈉置100ml燒杯中，加DMS050ml，于45 。C水浴放置,不斷攪拌使溶解。另按配方量稱取磷脂酰膽堿溶于少量乙醇中，于 45'C水浴保溫并與上述藥物的甲醇溶液混合均勻。將此溶液，在pH7. 2的緩沖液 分散，得顆粒大小平均值為95nm的藥物復(fù)合物懸浮液，除去有機溶劑。加入適量 乳糖，冷凍干燥，形成白色塊狀凍干品，使用時加入注射用水復(fù)溶。實施例6:配方膽固醇磺酸鈉 0.3g(約0.61mrao1)蛋黃卵磷脂 2g(約2.5mmo1)紫杉醇 0. 5g(約0. 58mmol)按配方量稱取膽固醇硫酸鈉和紫杉醇置100ml燒杯中，加入甲醇適量，水浴 加熱，不斷攪拌使溶解；另按配方量稱取二硬脂酰膽堿，加入適量的乙醇，水浴 保溫備用。將上述兩種溶液混合均勻，在pH7. 2的緩沖液中分散制得平均粒徑為 llOnm的藥物復(fù)合物混懸液。加入適量乳糖，冷凍干燥即得紫杉醇復(fù)合物凍干品。實施例7:將0. 5g膽固醇硫酸鈉，0. 6g青蒿素和0. 2g磷脂酰膽堿加熱溶于乙醇中， 減壓除去乙醇，所得固體在pH7.5的緩沖液中分散，制成含藥濃度為10rag/ml. 平均粒徑為106nm的均勻分散體，加入乳糖適量，冷凍干燥。實施例8:穩(wěn)定性試驗分別取克拉霉素膽固醇硫酸鈉復(fù)合物(克拉霉素與膽固醇硫酸鈉的摩爾比為 1: 1)混懸液和克拉霉素膽固醇硫酸鈉磷脂復(fù)合物混懸液(實施例l)適量，以 葡萄糖輸液為釋放介質(zhì)，槳法，溫度為37。C士 0. 5°C,轉(zhuǎn)速為5 0 r/min.分別于 15 min， 30 min, lh, 2h, 4h, 8h， 12， 24， 36， 48， 60， 72h取樣0.5mL (同 時補加0. 5mL釋放介質(zhì))置超濾膜中，于3000r/min條件下離心10min。取續(xù)濾 液20W進液相色譜儀。計算不同時間點藥物的累積百分釋放量。結(jié)果見說明書附圖l由圖1可見，克拉霉素膽固醇硫酸鈉磷脂復(fù)合物與克拉霉素膽固醇硫酸鈉復(fù) 合物相比，藥物滲漏減慢，穩(wěn)定性增強。實施例9:大鼠腳掌刺激性試驗取大鼠40只，分為4組，每組10只，雌雄各半，分別腳掌注射10mg/mL克拉霉 素膽固醇硫酸鈉(克拉霉素與膽固醇硫酸鈉的摩爾比為l: 1)復(fù)合物混懸液、 10mg/mL克拉霉素膽固醇硫酸鈉蛋黃卵磷脂復(fù)合物混懸液(實施例l) 、 lOmg/mL 乳糖酸克拉霉素注射液、0.9X氯化鈉溶液0.05mL。記錄各組大鼠10分鐘內(nèi)舔腳掌的平均次數(shù)和平均總時間，結(jié)果如下表所示大鼠腳掌刺激性試驗結(jié)果試驗組平均次數(shù)總時間(s)乳糖酸克拉霉素25223克拉霉素膽固醇硫酸鈉復(fù)合物1282克拉霉素膽固醇硫酸鹽蛋黃卵磷736脂復(fù)合物0.9%氯化鈉421結(jié)果表明，克拉霉素膽固醇硫酸鈉磷脂復(fù)合物與克拉霉素膽固醇硫酸鈉復(fù)合物相比，刺激性降低，基本與0.9%氯化鈉相當(dāng)。說明磷脂增加了克拉霉素膽固 醇硫酸鈉的穩(wěn)定性，避免了因藥物滲漏而導(dǎo)致的配方刺激性的產(chǎn)生。
權(quán)利要求
1.一種穩(wěn)定的藥物脂質(zhì)復(fù)合物，其特征在于將在生理條件下不溶或微溶于水的藥物分子與膽固醇衍生物和磷脂類的兩性分子形成脂質(zhì)復(fù)合物，使用時該復(fù)合物以微粒形式穩(wěn)定、均勻地分散于水或緩沖液中。
2. 如權(quán)利要求1所述的穩(wěn)定的藥物脂質(zhì)復(fù)合物，兩性分子中膽固醇衍生物包括 膽固醇硫酸鈉、膽固醇磷酸鈉、膽固醇磺酸鈉中的一種或兩種以上混合使用； 磷脂類包括蛋黃卵磷脂、大豆磷脂、二硬酯酰膽堿、二棕櫚酰膽堿、磷脂酰甘 油、磷脂酸、磷脂酰肌醇的一種或兩種以上混合使用。
3. 如權(quán)利要求1所述的穩(wěn)定的藥物脂質(zhì)復(fù)合物，膽固醇衍生物和藥物分子的摩 爾比為1: 5 10:1;磷脂分子與藥物分子的摩爾比例為0， 1: l 10:1 。
4. 如權(quán)利要求1所述的穩(wěn)定的藥物脂質(zhì)復(fù)合物，其中藥物為克拉霉素、阿奇霉 素、羅紅霉素、地紅霉素、泰利霉素、萬古霉素、去甲萬古霉素、達托霉素、 米諾環(huán)素、特拉萬辛、兩性霉素B、制霉菌素、大觀霉素、青蒿素、雙氫青蒿 素、伊曲康唑、特比萘芬、阿霉素、長春瑞賓、紫杉醇、多烯紫杉醇、水飛薊 素、水飛薊賓的一種。
5. 如權(quán)利要求1所述的穩(wěn)定的藥物脂質(zhì)復(fù)合物，可以根據(jù)需要和許可程度制成 不同規(guī)格、形態(tài)的制劑；這些形態(tài)的制劑包括但不限制于液體制劑、冰凍保存 制劑、不同濃度的濃縮或稀釋制劑、干燥成粉末制劑。
6. 如權(quán)利要求1所述的穩(wěn)定的藥物脂質(zhì)復(fù)合物，可以根據(jù)具體制劑的需要加入 一種或幾種藥物輔料。
全文摘要
一種穩(wěn)定的藥物脂質(zhì)復(fù)合物，將在生理條件下不溶或微溶于水的藥物分子與膽固醇衍生物和磷脂類的兩性分子形成脂質(zhì)復(fù)合物，進一步制成藥物制劑。
文檔編號A61K9/127GK101322690SQ20071011087
公開日2008年12月17日 申請日期2007年6月12日 優(yōu)先權(quán)日2007年6月12日
發(fā)明者關(guān)世俠, 李海剛 申請人:廣州瑞濟生物技術(shù)有限公司