專利名稱：一種復合藥物血管支架及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)療器械領(lǐng)域，涉及一種新型復合藥物血管支架及其制備方法。
背景技術(shù)：
自1987年，希格沃特(Sigwart)等首次將血管內(nèi)金屬支架用于冠狀動 脈以來，為治療血管堵塞性疾病提供了良好的途徑，然而血管支架內(nèi)再狹窄 一直是影響經(jīng)皮冠狀動脈介入治療(PCI)療效的主要原因。血管支架內(nèi)再狹 窄主要機制為血管內(nèi)膜的增生和血管內(nèi)皮化的延遲，因此，防治支架內(nèi)再狹 窄主要是促進血管內(nèi)皮的快速修復，抑制平滑肌細胞的過度增殖。藥物洗脫支架的廣泛應(yīng)用大大減少了血管支架內(nèi)再狹窄的發(fā)生，藥物洗 脫支架雖然能夠有效抑制平滑肌細胞的增殖，減少和預(yù)防內(nèi)膜增生，但是延 遲了血管內(nèi)皮的修復；CD34抗體工程支架雖然能夠在血管內(nèi)根據(jù)抗原-抗體 結(jié)合理論捕獲內(nèi)皮祖細胞，在血管支架表面快速內(nèi)皮化，但是忽視對平滑肌 細胞的特異性抑制。因此，制備能夠快速內(nèi)皮化而不影響平滑肌細胞增殖， 甚至能夠一定程度上抑制平滑肌細胞增殖的藥物支架對于進一步降低血栓 形成和支架內(nèi)再狹窄的發(fā)病率具有重要的意義。發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于解決上述問題而提供一種復合藥物血管支架及其制 備方法，在帶孔洞的血管支架內(nèi)表面固定能夠特異捕獲內(nèi)皮祖細胞抗體，這 種抗體通過識別內(nèi)皮祖細胞上特異抗原的方式更多捕捉內(nèi)皮祖細胞(EPCs)，能夠在支架置入后快速分化成內(nèi)皮細胞，促進內(nèi)皮的修復，并增加支架內(nèi)表 面的生物相容性；在支架外表面涂覆抑制平滑肌細胞增殖藥物，可通過抑制 平滑肌細胞的增殖有效降低血栓的形成和支架內(nèi)再狹窄的發(fā)病率。本發(fā)明采用的技術(shù)方案 一種復合藥物血管支架，包括支架本體、活性 藥物，其支架本體為帶孔洞的具有良好生物相容性的醫(yī)用材料，選用不銹鋼、 鈷基合金、鈦合金、鎳鈦合金或聚乳酸生物高分子材料；活性藥物包括特異 捕獲內(nèi)皮祖細胞抗體藥物、抗平滑肌細胞增殖藥物，所述的帶有孔洞的支架 本體內(nèi)表面固定有特異捕獲內(nèi)皮祖細胞抗體藥物，外表面涂覆有抗平滑肌細胞增殖藥物。一種復合藥物血管支架的制備方法，首先通過化學或物理方法對支架本 體制備大量的孔洞，或在支架表面形成一層帶孔洞的涂層，然后在帶孔洞的 支架本體的外表面包埋、固定和涂布一種或多種抗平滑肌細胞增殖藥物，最 后在帶孔洞的支架本體內(nèi)表面包埋、固定特異捕獲內(nèi)皮祖細胞抗體藥物。所述的抗平滑肌細胞增殖藥物直接溶解在有機溶劑中或借助不可生物 降解高分子材料、可降解生物高分子材料的聚合物噴涂于支架本體外表面。所述的特異捕獲內(nèi)皮祖細胞抗體藥物濃度為0. 1 20ug/mL，溶解在 0.01 0.5 M的磷酸鹽緩沖液或者碳酸鹽緩沖液中，并固定在支架本體內(nèi)表 面的孔洞中。所述的制備方法主要包括①支架本體表面的預(yù)處理、②制備孔洞、③支 架本體表面的后處理、 藥物的配制、⑤外表面涂覆、⑥內(nèi)表面固定、⑦低 溫干燥工藝步驟，其中.-①支架本體表面的預(yù)處理選用不銹鋼裸支架，使用濃度為99.5%的丙 酮分析純?nèi)芤?，或濃度?5%的醫(yī)用乙醇溶劑，利用頻率為28 100khz超聲 波清洗支架本體材料，清洗5 15min,去除本體材料表面的雜質(zhì)，將清洗后 的本體材料放置在干燥機中，溫度設(shè)定在30 40°C，干燥30 60min后取出i)制備孔洞采用酸溶液腐蝕致孔是將支架本體材料浸泡在0 10(TC溫 度的腐蝕液中，所述的腐蝕液優(yōu)選濃度為1 38%的鹽酸，或含有1 38% 的鹽酸混合1 98%的硫酸成分的鹽酸混酸溶液，腐蝕時間根據(jù)濃度、溫度不 同控制在lmin 480h后形成單尺寸納米級孔洞；再采用陽極氧化或微弧氧 化、微弧氮化相結(jié)合的方法，通過陽極脈沖設(shè)備進行陽極氧化制備多尺寸的 納米級復合孔洞，其電解液優(yōu)選濃度為1 38%的鹽酸溶液或濃度為1 98 %硫酸溶液，時間1 20min，電流0. 01 0. 1A，頻率25 3000赫茲;③ 支架本體表面的后處理將上述處理好的本體材料先使用濃度為99. 5%的丙酮分析純?nèi)芤海俳?jīng)蒸餾水利用頻率為28 100khz超聲波清洗本 體材料5 15min;最后將清洗后的本體材料放置在干燥機中，溫度設(shè)定在 30 40°C，干燥30 60min后取出備用；或用蒸餾水配制濃度為1 38%的 鹽酸溶液，將本體材料浸泡在配好的溶液中，放置在真空干燥箱中，在20 IO(TC干燥0. 5 72小時固化；④ 藥物的配制配制含量為重量百分比0. 01-10%的抗平滑肌細胞增殖藥物，可選用a、 配制活性藥物將抗平滑肌細胞增殖藥物直接溶解在有機溶劑中，并充分溶解；所述的活性藥物與有機溶液的重量百分比為1: 10 1: 10000;b、 配制聚合物分散液抗平滑肌細胞增殖藥物溶解在0. 1-5%的不可生物降解的高分子材料四氫呋喃溶液中，如聚甲基丙烯酸丁酯四氫呋喃溶液，或溶解在0. 5-10%的可生物降解的高分子材料四氫呋喃溶液中，如聚乳酸-聚羥基乙酸共聚物四氫呋喃溶液或者聚乳酸四氫呋喃溶液；⑤ 外表面涂覆將本體材料安裝在噴涂機上，采用球囊保護支架本體內(nèi) 表面，然后將上述配制好的活性藥物或聚合物分散液均勻的涂覆在支架本體的外表面；再將帶有涂層的支架本體放于真空干燥箱中，在20 10(TC干燥 0. 5 72小時固化；上述①支架本體表面的預(yù)處理、③支架本體表面的后處理、⑤外表面涂 覆步驟可多次重復，或只重復⑤外表面涂覆步驟，重復涂覆活性藥物或不同 組分的聚合物分散液，直至達到載藥量；⑥ 內(nèi)表面固定小心取下保護性球囊，將帶涂層的支架本體浸涂在含有濃度為0. 1 20ii g/mL的特異捕獲內(nèi)皮祖細胞抗體藥物的0. 01 0. 5 M的磷 酸鹽或者碳酸鹽溶液中5min 2h;⑦ 低溫干燥將支架本體從特異捕獲內(nèi)皮祖細胞抗體藥物溶液中取出， 低溫-20 —60。C干燥1 5h。所述的特異捕獲內(nèi)皮祖細胞抗體藥物包括CD31抗體、CD133抗體、CD34 抗體、CD45抗體和血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)，選用其中任一種或任幾種。所述的抗平滑肌細胞增殖藥物包括西羅莫司，他克莫司，艾羅莫司，免 疫抑制劑ABT-578，地塞米松，咪唑立賓，雷帕霉素，紫杉醇及其衍生物，放 線菌素，長春新堿及其衍生物，他汀類藥物，2-氯去氧腺苷，核酶，巴馬司 他，溴氯哌喹酮，C-蛋白酶抑制劑，普羅布可，雌二醇類等活性藥物2，可 選用其中任一種或任幾種。所述的可生物降解高分子材料或不可生物降解高分子材料的聚合物，包 括丙交酯、乙交酯、e-己內(nèi)酯的均聚物和兩者之間或三者的共聚物、纖維素類、聚乙烯吡咯酮、聚乙烯醇、阿拉伯膠、海藻酸鈉、白明膠、聚甲基丙 烯酸甲酯、聚甲基丙烯酸丁酯、乙烯-乙烯醇共聚物或乙烯-醋酸乙烯共聚物 中的一種或一種以上。所述的帶有孔洞的支架本體內(nèi)表面固定特異捕獲內(nèi)皮祖細胞抗體藥物， 在支架本體外表面將雷帕霉素抗平滑肌細胞增殖藥物直接溶于有機溶劑直 接噴涂，其工藝步驟①支架本體表面的預(yù)處理、②制備孔洞、③支架本體表面的后處理工藝 步驟同前所述；④藥物的配制將0. 2g雷帕霉素加入10ml四氫呋喃溶液中； (D外表面涂覆用球囊保護帶有孔洞的支架本體內(nèi)表面，并將上述配制 的藥物室溫條件下分散均勻，然后噴涂于支架本體外表面，空氣中固化 60min;重復⑤外表面涂覆步驟，直到載藥量達到1.4 2.2ug/mm2;將支架 本體置于真空烘箱中干燥；⑥內(nèi)表面固定將濃度為0. 1 20p g/mL的特異捕獲內(nèi)皮祖細胞抗體藥 物溶解在0. 01 0. 5 M的磷酸鹽緩沖溶液中，磷酸鹽溶液配比重量百分比為 磷酸二氫鉀1. 36g，加0. lmol/L氫氧化鈉溶液79ml，其余為水稀釋至200ml即得，將涂覆后的支架本體浸在所述的抗體溶液中5min 2小時；⑦ 低溫干燥將支架本體從上述特異捕獲內(nèi)皮祖細胞抗體藥物溶液中取 出，低溫-20 一60"C凍干；⑧ 有效性實驗對本發(fā)明的復合藥物支架的安全性和有效性實驗是在中華小雄豬模型中進行，實驗結(jié)果包括由內(nèi)皮化觀察、冠脈造影定量分析(QCA)和組織形態(tài)學測得的新生內(nèi)膜面積的改變。所述的帶有孔洞的支架本體內(nèi)表面固定特異捕獲內(nèi)皮祖細胞抗體藥物， 在外表面借助可生物降解高分子材料涂布抗平滑肌細胞增殖藥物，是將雷帕霉素溶于含有聚乳酸(PLA)的有機溶劑中噴涂，其工藝步驟①支架本體 表面的預(yù)處理、②制備孔洞、③支架本體表面的后處理工藝步驟同前所述；④ 藥物的配制將0. lg聚乳酸(PLA)加入10ml四氫呋喃溶液中，再 加入0. 5g雷帕霉素，配制成含雷帕霉素的聚乳酸四氫呋喃溶液；⑤ 外表面涂覆用球囊保護帶有孔洞的支架本體內(nèi)表面，并將上述配制 的藥物室溫條件下混合分散均勻，然后將包裹有上述藥物的聚合物分散液均 勻地涂覆于支架本體的外表面，空氣中固化30min;重復上述操作直到載藥層 重量達到1. 4 2. g/mm2;再將帶有涂層的支架本體置于真空烘箱中干燥;⑥ 內(nèi)表面固定將濃度為0. 1 20u g/mL的特異捕獲內(nèi)皮祖細胞抗體藥 物溶解在0. 01 0. 5 M的磷酸鹽緩沖溶液中，磷酸鹽溶液配比重量百分比為 磷酸二氫鉀1. 36g,加0. lmol/L氫氧化鈉溶液79ml，其余為水稀釋至200ml 即得，將涂覆后的支架本體浸在所述的抗體溶液中5min 2小時；⑦ 低溫干燥將支架本體從上述特異捕獲內(nèi)皮祖細胞抗體藥物溶液中取 出，低溫-20 一6(TC凍干；⑧ 有效性實驗對本發(fā)明的復合藥物支架的安全性和有效性實驗是在中華小雄豬模型中進行，實驗結(jié)果包括由內(nèi)皮化觀察、冠脈造影定量分析(QCA)和組織形態(tài)學測得的新生內(nèi)膜面積的改變。本發(fā)明具有如下積極有益的效果1. 采用在支架本體制備納米級孔洞，通過控制孔洞深度和尺寸固定能 夠特異捕獲內(nèi)皮祖細胞抗體和有效控制抗平滑肌增殖藥物的釋放，這種納米 級孔洞對器械本體的機械性能沒有影響，已經(jīng)通過動物試驗證明其安全性和 有效性均不低于甚至略高于現(xiàn)有聚合物藥物洗脫器械；2. 在帶孔洞的血管支架內(nèi)表面固定能夠特異捕獲內(nèi)皮祖細胞抗體，這 種抗體通過識別內(nèi)皮祖細胞上特異抗原的方式更多捕捉內(nèi)皮祖細胞(EPCs)，促進內(nèi)皮祖細胞在支架表面的快速分化和增殖，使支架表面快速內(nèi)皮化，并 增加支架內(nèi)表面的生物相容性；3. 將特異捕獲內(nèi)皮祖細胞抗體固定在形成有金屬孔洞的支架內(nèi)表面， 利用孔洞的尺寸和深度有效固定抗體，這種固定方法不僅具有很高的牢固 度，而且能夠很好保持支架表面抗體的活性；4. 在同一支架內(nèi)表面固定夠特異捕獲內(nèi)皮祖細胞抗體，外表面涂布有效抑制平滑肌細胞增殖活性藥物的一種或幾種，有效抑制血管平滑肌細胞增 殖與遷移；動物試驗表明本發(fā)明可選擇性的吸附內(nèi)皮祖細胞和血管內(nèi)皮細 胞，支架可在l天內(nèi)快速修復內(nèi)皮，并能夠持續(xù)有效降低新生內(nèi)膜的形成， 有效防治支架內(nèi)再狹窄，避免遲發(fā)性血栓的風險。


圖1為本發(fā)明復合藥物血管支架結(jié)構(gòu)示意圖的橫截面剖視圖； 圖2為本發(fā)明的帶孔洞的支架本體俯視圖。
具體實施方式
參閱圖1、圖2所示， 一種復合藥物血管支架，主要包括支架本體1、活性藥物2等；其支架本體l由具有良好生物相容性的醫(yī)用材料制造，可選用不銹鋼、鈷基合金、鈦合金、鎳鈦合金等金屬材料，所述的活性藥物2包 括特異捕獲內(nèi)皮祖細胞抗體藥物201、抗平滑肌細胞增殖藥物202。本發(fā)明 是在帶孔洞101的支架本體1內(nèi)表面固定特異捕獲內(nèi)皮祖細胞抗體藥物201， 在支架本體1的外表面涂覆有抗平滑肌細胞增殖藥物202。一種復合藥物血管支架的制備方法，首先通過化學或物理，如腐蝕、陽 極氧化、微弧氧化、微弧氮化等方法或這些方法的結(jié)合對支架本體1制備大 量的孔洞IOI，或在支架表面形成一層帶孔洞101的涂層，支架本體由具有 良好生物相容性的醫(yī)用材料制造，可選用不銹鋼、鈷基合金、釹合金、鎳鈦 合金等金屬材料，也可選用聚乳酸的生物高分子材料；然后采用特殊工藝保 護支架內(nèi)表面，預(yù)留出支架內(nèi)表面的孔洞以便固定特異捕獲內(nèi)皮祖細胞抗 體，同時在支架本體1的外表面包埋、固定和涂布治療有效量的一種或多種 抗平滑肌細胞增殖藥物202，所述的抗平滑肌細胞增殖藥物202可直接溶解 在有機溶劑中或借助不可生物降解高分子材料、可降解生物高分子材料的聚 合物噴涂于支架本體1外表面；最后采用不同的涂布工藝在帶孔洞101的支 架本體l內(nèi)表面包埋、固定特異捕獲內(nèi)皮祖細胞抗體藥物201，所述的特異 捕獲內(nèi)皮祖細胞抗體藥物201包括CD31抗體、CD133抗體、CD34抗體、CD45 抗體和血管內(nèi)皮生長因子(VEGF),可選用其中任一種或任幾種；所述的特 異捕獲內(nèi)皮祖細胞抗體藥物201濃度為0. 1 20 u g/mL,可溶解在0. 01 0. 5 M的磷酸鹽緩沖液或者碳酸鹽緩沖液中，并固定在支架本體l內(nèi)表面的孔洞 101中。所述的支架本體1外表面涂覆的抗平滑肌細胞增殖藥物202包括西羅莫 司，他克莫司，艾羅莫司，免疫抑制劑ABT-578，地塞米松，咪唑立賓，雷 帕霉素，紫杉醇及其衍生物，放線菌素，長春新堿及其衍生物，他汀類藥物， 2-氯去氧腺苷，核酶，巴馬司他，溴氯哌喹酮，C-蛋白酶抑制劑，普羅布可，雌二醇類等活性藥物2，可選用其中任一種或任幾種。所述的可生物降解高分子材料或不可生物降解高分子材料的聚合物，包括丙交酯、乙交酯、e-己內(nèi)酯的均聚物和兩者之間或三者的共聚物、纖維 素類、聚乙烯吡咯酮、聚乙烯醇、阿拉伯膠、海藻酸鈉、白明膠、聚甲基丙 烯酸甲酯、聚甲基丙烯酸丁酯、乙烯-乙烯醇共聚物或乙烯-醋酸乙烯共聚物 中的一種或一種以上。所述的制備方法主要包括①支架本體表面的預(yù)處理、②制備孔洞、③支 架本體表面的后處理、④藥物的配制、⑤外表面涂覆、⑥內(nèi)表面固定、⑦低溫干燥等工藝步驟，其中①支架本體表面的預(yù)處理選用不銹鋼裸支架，使用濃度為99.5%的丙 酮分析純?nèi)芤?，或濃度?5%的醫(yī)用乙醇溶劑，利用頻率為28 100khz超聲 波清洗支架本體材料，清洗5 15min，去除本體材料表面的雜質(zhì)，將清洗后 的本體材料放置在干燥機中，溫度設(shè)定在30 40°C，干燥30 60min后取出i)制備孔洞采用酸溶液腐蝕致孔是將支架本體材料浸泡在0 10(TC溫 度的腐蝕液中，所述的腐蝕液優(yōu)選濃度為1 38%的鹽酸，或含有1 38% 的鹽酸混合1 98%的硫酸成分的鹽酸混酸溶液，腐蝕時間根據(jù)濃度、溫度不 同控制在lmin 480h后形成單尺寸納米級孔洞；再采用陽極氧化或微弧氧 化、微弧氮化相結(jié)合的方法，通過陽極脈沖設(shè)備進行陽極氧化制備多尺寸的 納米級復合孔洞，其電解液優(yōu)選濃度為1 38%的鹽酸溶液或濃度為1 98 %硫酸溶液，時間1 20min，電流0. 01 0. 1A，頻率25 3000赫茲;③ 支架本體表面的后處理將上述處理好的本體材料先使用濃度為 99. 5%的丙酮分析純?nèi)芤海俳?jīng)蒸餾水利用頻率為28 100khz超聲波清洗本 體材料5 15min;最后將清洗后的本體材料放置在干燥機中，溫度設(shè)定在 30 40°C，干燥30 60min后取出備用；或用蒸餾水配制濃度為1 38%的 鹽酸溶液，將本體材料浸泡在配好的溶液中，放置在真空干燥箱中，在20 IO(TC干燥0. 5 72小時固化；④ 藥物的配制配制含量為重量百分比0. 01-10%的抗平滑肌細胞增殖藥 物202，可選用a、 配制活性藥物將抗平滑肌細胞增殖藥物202直接溶解在有機溶劑中，并充分溶解；所述的活性藥物與有機溶液的重量百分比為1: 10 1: 10000;b、 配制聚合物分散液抗平滑肌細胞增殖藥物202溶解在0. 1-5%的不 可生物降解的高分子材料四氫呋喃溶液中，如聚甲基丙烯酸丁酯四氫呋喃溶 液，或溶解在0.5_10%的可生物降解的高分子材料四氫呋喃溶液中，如聚乳 酸-聚羥基乙酸共聚物四氫呋喃溶液或者聚乳酸四氫呋喃溶液；⑤ 外表面涂覆將本體材料安裝在噴涂機上，采用球囊保護支架本體1 內(nèi)表面，然后將上述配制好的活性藥物或聚合物分散液均勻的涂覆在支架本體1的外表面;再將帶有涂層的支架本體1放于真空干燥箱中，在20 100°C 干燥0.5 72小時固化；上述①支架本體表面的預(yù)處理、(D支架本體表面的后處理、⑤外表面涂 覆步驟可多次重復，或只重復⑤外表面涂覆步驟，重復涂覆活性藥物或不同 組分的聚合物分散液，直至達到載藥量；⑥ 內(nèi)表面固定小心取下保護性球囊，將帶涂層的支架本體1浸涂在含 有濃度為0. 1 20ii g/mL的特異捕獲內(nèi)皮祖細胞抗體藥物201的0. 01 0. 5 M的磷酸鹽或者碳酸鹽溶液中5min 2h;⑦ 低溫干燥將支架本體1從特異捕獲內(nèi)皮祖細胞抗體藥物201溶液中 取出，低溫-20 一60。C干燥l 5h。以下給出較佳實施例 實施例1本實施例為在帶有孔洞101的支架本體1內(nèi)表面固定特異捕獲內(nèi)皮祖細 胞抗體藥物201 ，在支架本體1外表面將雷帕霉素抗平滑肌細胞增殖藥物202 直接溶于有機溶劑直接噴涂，其工藝步驟①支架本體表面的預(yù)處理、②制備孔洞、③支架本體表面的后處理工藝 步驟同前所述；④ 藥物的配制將0. 2g雷帕霉素加入10ml四氫呋喃溶液中；⑤ 外表面涂覆用球囊保護帶有孔洞的支架本體1內(nèi)表面，并將上述配制的藥物室溫條件下分散均勻，然后噴涂于支架本體1外表面，空氣中固化60min;重復⑤外表面涂覆步驟，直到載藥量達到1.4 2.2ug/mm2;將支架 本體1置于真空烘箱中干燥；⑥ 內(nèi)表面固定將濃度為0. 1 20p g/mL的特異捕獲內(nèi)皮祖細胞抗體藥 物201溶解在0. 01 0. 5 M的磷酸鹽緩沖溶液中，磷酸鹽溶液配比重量百分 比為磷酸二氫鉀1.36g，加0.1mol/L氫氧化鈉溶液79ml，其余為水稀釋 至200ml即得，將涂覆后的支架本體1浸在所述的抗體溶液中5min 2小時；⑦ 低溫干燥將支架本體1從上述特異捕獲內(nèi)皮祖細胞抗體藥物201溶 液中取出，^—6(TC凍干；⑧ 有效性實驗對本發(fā)明的新型復合藥物支架的安全性和有效性實驗是在中華小雄豬模型中進行，實驗結(jié)果包括由內(nèi)皮化觀察、冠脈造影定量分析(QCA)和組織形態(tài)學測得的新生內(nèi)膜面積的改變；在豬模型中，與雷帕霉 素藥物涂層的支架相比，新型復合藥物支架在支架置入后30天新生內(nèi)膜面 積明顯減少，同時支架內(nèi)表面在7天內(nèi)內(nèi)皮化完全。由此可見，在豬模型中 新型復合藥物支架不僅能夠持續(xù)降低新生內(nèi)膜形成，防止再狹窄；并且能夠 在支架表面快速內(nèi)皮化，減少血栓形成。 實施例2本實施例為在帶有孔洞101的支架本體1內(nèi)表面固定特異捕獲內(nèi)皮祖細 胞抗體藥物201，在外表面借助可生物降解高分子材料涂布抗平滑肌細胞增殖藥物202，是將雷帕霉素溶于含有聚乳酸(PLA)的有機溶劑中噴涂，其工藝步驟①支架本體表面的預(yù)處理、②制備孔洞、③支架本體表面的后處理工藝步驟同前所述；④ 藥物的配制將O. lg聚乳酸(PLA)加入10ml四氫呋喃溶液中，再 加入0. 5g雷帕霉素，配制成含雷帕霉素的聚乳酸四氫呋喃溶液；⑤ 外表面涂覆用球囊保護帶有孔洞的支架本體1內(nèi)表面，并將上述配 制的藥物室溫條件下混合分散均勻，然后將包裹有上述藥物的聚合物分散液 均勻地涂覆于支架本體1的外表面，空氣中固化30min;重復上述操作直到載 藥層重量達到1.4 2.5ug/mm2;再將帶有涂層的支架本體1置于真空烘箱 中干燥；⑥ 內(nèi)表面固定將濃度為0. 1 20li g/mL的特異捕獲內(nèi)皮祖細胞抗體藥 物201溶解在0. 01 0. 5 M的磷酸鹽緩沖溶液中，磷酸鹽溶液配比重量百分 比為磷酸二氫鉀1.36g，加O. lmol/L氫氧化鈉溶液79ml，其余為水稀釋 至200ml即得，將涂覆后的支架本體1浸在所述的抗體溶液中5min 2小時；所述的⑦低溫干燥、⑧有效性實驗同實施例1。
權(quán)利要求
1.一種復合藥物血管支架，包括支架本體、活性藥物，其支架本體為帶孔洞的具有良好生物相容性的醫(yī)用材料，選用不銹鋼、鈷基合金、鈦合金、鎳鈦合金或聚乳酸生物高分子材料；活性藥物包括特異捕獲內(nèi)皮祖細胞抗體藥物、抗平滑肌細胞增殖藥物，其特征在于所述的帶有孔洞(101)的支架本體(1)內(nèi)表面固定有特異捕獲內(nèi)皮祖細胞抗體藥物(201)，外表面涂覆有抗平滑肌細胞增殖藥物(202)。
2. —種復合藥物血管支架的制備方法，首先通過化學或物理方法對支 架本體(1)制備大量的孔洞(101)，或在支架表面形成一層帶孔洞(101) 的涂層，其特征在于然后在帶孔洞(101)的支架本體(1)的外表面包埋、 固定和涂布一種或多種抗平滑肌細胞增殖藥物(202)，最后在帶孔洞(101) 的支架本體(1)內(nèi)表面包埋、固定特異捕獲內(nèi)皮祖細胞抗體藥物(201)。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種復合藥物血管支架的制備方法，其特征 在于所述的抗平滑肌細胞增殖藥物(202)直接溶解在有機溶劑中或借助不 可生物降解高分子材料、可降解生物高分子材料的聚合物噴涂于支架本體(1)外表面。
4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種復合藥物血管支架的制備方法，其特征 在于所述的特異捕獲內(nèi)皮祖細胞抗體藥物(201)濃度為0. 1 20u g/mL，溶 解在0. 01 0. 5 M的磷酸鹽緩沖液或者碳酸鹽緩沖液中，并固定在支架本體(1)內(nèi)表面的孔洞(101)中。
5. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種復合藥物血管支架的制備方法，其特征 在于所述的制備方法主要包括①支架本體表面的預(yù)處理、②制備孔洞、③支 架本體表面的后處理、④藥物的配制、⑤外表面涂覆、⑥內(nèi)表面固定、⑦低溫干燥工藝步驟，其中-①支架本體表面的預(yù)處理選用不銹鋼裸支架，使用濃度為99.5%的丙 酮分析純?nèi)芤?，或濃度?5%的醫(yī)用乙醇溶劑，利用頻率為28 100khz超聲 波清洗支架本體材料，清洗5 15min，去除本體材料表面的雜質(zhì)，將清洗后 的本體材料放置在干燥機中，溫度設(shè)定在30 40°C，干燥30 60min后取出i)制備孔洞采用酸溶液腐蝕致孔是將支架本體材料浸泡在0 10(TC溫 度的腐蝕液中，所述的腐蝕液優(yōu)選濃度為1 38%的鹽酸，或含有1 38% 的鹽酸混合1 98%的硫酸成分的鹽酸混酸溶液，腐蝕時間根據(jù)濃度、溫度不 同控制在lmin 480h后形成單尺寸納米級孔洞；再采用陽極氧化或微弧氧 化、微弧氮化相結(jié)合的方法，通過陽極脈沖設(shè)備進行陽極氧化制備多尺寸的 納米級復合孔洞，其電解液優(yōu)選濃度為1 38%的鹽酸溶液或濃度為1 98%硫酸溶液，時間1 20min，電流0. 01 0. 1A，頻率25 3000赫茲;③ 支架本體表面的后處理將上述處理好的本體材料先使用濃度為 99. 5%的丙酮分析純?nèi)芤?，再?jīng)蒸餾水利用頻率為28 100khz超聲波清洗本 體材料5 15min;最后將清洗后的本體材料放置在干燥機中，溫度設(shè)定在 30 40°C，干燥30 60min后取出備用；或用蒸餾水配制濃度為1 38%的 鹽酸溶液，將本體材料浸泡在配好的溶液中，放置在真空干燥箱中，在20 IOO'C干燥0. 5 72小時固化；④ 藥物的配制配制含量為重量百分比0. 01-10%的抗平滑肌細胞增殖藥 物(202)，可選用a、 配制活性藥物將抗平滑肌細胞增殖藥物(202)直接溶解在有機溶 劑中，并充分溶解；所述的活性藥物與有機溶液的重量百分比為1: 10 1:10000;b、 配制聚合物分散液抗平滑肌細胞增殖藥物(202)溶解在0.1-5% 的不可生物降解的高分子材料四氫呋喃溶液中，如聚甲基丙烯酸丁酯四氫呋 喃溶液，或溶解在O. 5-10%的可生物降解的高分子材料四氫呋喃溶液中，如 聚乳酸-聚羥基乙酸共聚物四氫呋喃溶液或者聚乳酸四氫呋喃溶液；⑤ 外表面涂覆將本體材料安裝在噴涂機上，釆用球囊保護支架本體(l) 內(nèi)表面，然后將上述配制好的活性藥物或聚合物分散液均勻的涂覆在支架本 體(l)的外表面；再將帶有涂層的支架本體(l)放于真空干燥箱中，在20 IO(TC干燥0. 5 72小時固化；上述①支架本體表面的預(yù)處理、③支架本體表面的后處理、⑤外表面涂 覆步驟可多次重復，或只重復⑤外表面涂覆步驟，重復涂覆活性藥物或不同 組分的聚合物分散液，直至達到載藥量；⑥ 內(nèi)表面固定小心取下保護性球囊，將帶涂層的支架本體(1)浸涂 在含有濃度為0.1 20ug/mL的特異捕獲內(nèi)皮祖細胞抗體藥物(201)的 0. 01 0. 5 M的磷酸鹽或者碳酸鹽溶液中5min 2h;⑦ 低溫干燥將支架本體(1)從特異捕獲內(nèi)皮祖細胞抗體藥物(201) 溶液中取出，低溫-20 一6(TC干燥l 5h。
6. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種復合藥物血管支架的制備方法，其特征 在于所述的特異捕獲內(nèi)皮祖細胞抗體藥物(201)包括CD31抗體、CD133抗 體、CD34抗體、CD45抗體和血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)，選用其中任一種 或任幾種。
7. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種復合藥物血管支架的制備方法，其特征 在于所述的抗平滑肌細胞增殖藥物(202)包括西羅莫司，他克莫司，艾羅 莫司，免疫抑制劑ABT-578，地塞米松，咪唑立賓，雷帕霉素，紫杉醇及其 衍生物，放線菌素，長春新堿及其衍生物，他汀類藥物，2-氯去氧腺苷，核 酶，巴馬司他，溴氯哌喹酮，C-蛋白酶抑制劑，普羅布可，雌二醇類等活性 藥物2，可選用其中任一種或任幾種。
8. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種復合藥物血管支架的制備方法，其特征 在于所述的可生物降解高分子材料或不可生物降解高分子材料的聚合物，包 括丙交酯、乙交酯、e-己內(nèi)酯的均聚物和兩者之間或三者的共聚物、纖維素類、聚乙烯吡咯酮、聚乙烯醇、阿拉伯膠、海藻酸鈉、白明膠、聚甲基丙 烯酸甲酯、聚甲基丙烯酸丁酯、乙烯-乙烯醇共聚物或乙烯-醋酸乙烯共聚物 中的一種或一種以上。
9. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種復合藥物血管支架的制備方法，其特征 在于所述的帶有孔洞(101)的支架本體(1)內(nèi)表面固定特異捕獲內(nèi)皮祖細 胞抗體藥物(201)，在支架本體(1)外表面將雷帕霉素抗平滑肌細胞增殖 藥物(202)直接溶于有機溶劑直接噴涂，其工藝步驟①支架本體表面的預(yù)處理、②制備孔洞、③支架本體表面的后處理工藝 步驟同前所述；④ 藥物的配制將0. 2g雷帕霉素加入10ml四氫呋喃溶液中；⑤ 外表面涂覆用球囊保護帶有孔洞的支架本體(1)內(nèi)表面，并將上述配制的藥物室溫條件下分散均勻，然后噴涂于支架本體(1)外表面，空氣中固化60min;重復⑤外表面涂覆步驟，直到載藥量達到1. 4 2. 2 u g/mm2; 將支架本體(1)置于真空烘箱中干燥；⑥ 內(nèi)表面固定將濃度為0. 1 20u g/mL的特異捕獲內(nèi)皮祖細胞抗體藥 物(201)溶解在0.01 0.5 M的磷酸鹽緩沖溶液中，磷酸鹽溶液配比重量 百分比為磷酸二氫鉀1.36g，加O. lmol/L氫氧化鈉溶液79ml，其余為水 稀釋至200ml即得，將涂覆后的支架本體(l)浸在所述的抗體溶液中5min 2小時；⑦ 低溫干燥將支架本體(1)從上述特異捕獲內(nèi)皮祖細胞抗體藥物(201) 溶液中取出，低溫-20 一6(TC凍干；⑧ 有效性實驗對本發(fā)明的復合藥物支架的安全性和有效性實驗是在中華小雄豬模型中進行，實驗結(jié)果包括由內(nèi)皮化觀察、冠脈造影定量分析(QCA)和組織形態(tài)學測得的新生內(nèi)膜面積的改變。
10. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種復合藥物血管支架的制備方法，其特征 在于所述的帶有孔洞(101)的支架本體(1)內(nèi)表面固定特異捕獲內(nèi)皮袓細 胞抗體藥物(201)，在外表面借助可生物降解高分子材料涂布抗平滑肌細 胞增殖藥物(202)，是將雷帕霉素溶于含有聚乳酸(PLA)的有機溶劑中噴 涂，其工藝步驟①支架本體表面的預(yù)處理、②制備孔洞、③支架本體表面 的后處理工藝步驟同前所述；④藥物的配制將O. lg聚乳酸(PLA)加入10ml四氫呋喃溶液中，再 加入0. 5g雷帕霉素，配制成含雷帕霉素的聚乳酸四氫呋喃溶液；(D外表面涂覆用球囊保護帶有孔洞的支架本體(1)內(nèi)表面，并將上 述配制的藥物室溫條件下混合分散均勻，然后將包裹有上述藥物的聚合物分 散液均勻地涂覆于支架本體(1)的外表面，空氣中固化30min;重復上述操作直到載藥層重量達到1.4 2.5ug/mm2;再將帶有涂層的支架本體(1)置 于真空烘箱中干燥；⑥ 內(nèi)表面固定將濃度為0. 1 20u g/mL的特異捕獲內(nèi)皮祖細胞抗體藥 物(201)溶解在0.01 0.5 M的磷酸鹽緩沖溶液中，磷酸鹽溶液配比重量 百分比為磷酸二氫鉀1.36g，加O. lmol/L氫氧化鈉溶液79ml，其余為水 稀釋至200ml即得，將涂覆后的支架本體(l)浸在所述的抗體溶液中5min 2小時；⑦ 低溫干燥:將支架本體(1)從上述特異捕獲內(nèi)皮祖細胞抗體藥物(201) 溶液中取出，低溫-20 一60'C凍干；⑧ 有效性實驗對本發(fā)明的復合藥物支架的安全性和有效性實驗是在中華小雄豬模型中進行，實驗結(jié)果包括由內(nèi)皮化觀察、冠脈造影定量分析(QCA)和組織形態(tài)學測得的新生內(nèi)膜面積的改變。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種復合藥物血管支架及其制備方法。包括支架本體、活性藥物，其支架本體為帶孔洞的具有良好生物相容性的醫(yī)用材料，選用不銹鋼、鈷基合金、鈦合金、鎳鈦合金或聚乳酸生物高分子材料；活性藥物包括特異捕獲內(nèi)皮祖細胞抗體藥物、抗平滑肌細胞增殖藥物，所述的帶有孔洞的支架本體內(nèi)表面固定有特異捕獲內(nèi)皮祖細胞抗體藥物，外表面涂覆有抗平滑肌細胞增殖藥物；其制備方法包括①支架本體表面的預(yù)處理、②制備孔洞、③支架本體表面的后處理、④藥物的配制、⑤外表面涂覆、⑥內(nèi)表面固定、⑦低溫干燥工藝步驟；能夠選擇性的吸附內(nèi)皮祖細胞，促進內(nèi)皮的修復；并能夠有效抑制血管平滑肌細胞增殖與遷移，持續(xù)有效降低新生內(nèi)膜的形成，有效防治支架內(nèi)再狹窄，避免遲發(fā)性血栓的風險。
文檔編號A61L31/02GK101327343SQ20071011127
公開日2008年12月24日 申請日期2007年6月20日 優(yōu)先權(quán)日2007年6月20日
發(fā)明者余占江, 蒲忠杰 申請人:樂普(北京)醫(yī)療器械股份有限公司