專利名稱：一種醫(yī)用創(chuàng)面止血愈創(chuàng)劑及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種醫(yī)療用品，特別是涉及一種醫(yī)用創(chuàng)面止血愈創(chuàng)劑及其應(yīng)用。
技術(shù)背景醫(yī)用創(chuàng)面止血愈創(chuàng)劑在醫(yī)療領(lǐng)域具有許多用途，包括人體和動(dòng)物體手術(shù)創(chuàng)面的封閉止血、 生理活性組織創(chuàng)面的封閉修復(fù)、生理活性組織間的粘合等。纖維蛋白膠是一種醫(yī)用創(chuàng)面止血 劑，是從人和動(dòng)物血漿中提取的蛋白生物制品，主要應(yīng)用于手術(shù)創(chuàng)面止血、促進(jìn)傷口愈合、 封閉缺損組織等，已在中國(guó)、歐美、日本等世界許多國(guó)家的外科領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用，其療效 己經(jīng)得到了肯定。但來(lái)源于異體的人或動(dòng)物血清制成的纖維蛋白膠可能激發(fā)免疫副反應(yīng)，并 存在使病人感染血液病毒的危險(xiǎn)，因此其臨床使用的安全性受到廣泛關(guān)注。同時(shí)纖維蛋白膠 不是以化學(xué)鍵與組織結(jié)合，粘接強(qiáng)度較低。因此急需開發(fā)生物相容性好、粘接強(qiáng)度高、可生 物降解的醫(yī)用創(chuàng)面止血愈創(chuàng)劑，特別是急需開發(fā)以天然生物來(lái)源的無(wú)免疫原性生物大分子為 材料的醫(yī)用創(chuàng)面止血愈創(chuàng)劑。天然生物多糖具有良好的生物相容性，在體內(nèi)可生物降解吸收， 不產(chǎn)生免疫反應(yīng)，因此以天然生物多糖作為創(chuàng)面止血愈創(chuàng)劑的原材料是首選方案，但目前尚 未見到此類報(bào)道。發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種醫(yī)用創(chuàng)面止血愈創(chuàng)劑及其應(yīng)用，以滿足現(xiàn)有技術(shù)的上述需求。 一種醫(yī)用創(chuàng)面止血愈創(chuàng)劑，其特征是它由兩部分水溶液組成， 一部分是含雙醛基的氧化 多糖水溶液，另一部分是水溶性殼聚糖水溶液；所述的含雙醛基的氧化多糖是含雙醛基的氧 化羥乙基纖維素、含雙醛基的氧化羥丙基纖維素、含雙醛基的氧化羧甲基纖維素鈉鹽或鉀鹽、 含雙醛基的氧化殼聚糖、含雙醛基的氧化羥乙基殼聚糖、含雙醛基的氧化羥丙基殼聚糖、含 雙醛基的氧化羧甲基殼聚糖鈉鹽或鉀鹽、含雙醛基的氧化羥乙基甲殼素、含雙醛基的氧化羥 丙基甲殼素、含雙醛基的氧化羧甲基甲殼素鈉鹽或鉀鹽、含雙醛基的氧化透明質(zhì)酸鈉鹽或鉀 鹽，或含雙醛基的氧化海藻酸鈉鹽或鉀鹽中的一種；所述的水溶性殼聚糖是羧甲基殼聚糖鈉 鹽或鉀鹽、羥乙基殼聚糖、羥丙基殼聚糖中的一種。上述醫(yī)用創(chuàng)面止血愈創(chuàng)劑在制備創(chuàng)面封閉或創(chuàng)面止血的藥物或醫(yī)療器械中的應(yīng)用。 上述醫(yī)用創(chuàng)面止血愈創(chuàng)劑在制備促進(jìn)創(chuàng)面愈合的藥物或醫(yī)療器械中的應(yīng)用。 上述醫(yī)用創(chuàng)面止血愈創(chuàng)劑在制備預(yù)防手術(shù)后組織粘連的藥物或醫(yī)療器械中的應(yīng)用。 本發(fā)明的醫(yī)用創(chuàng)面止血愈創(chuàng)劑的創(chuàng)面止血和封閉機(jī)理是含雙醛基的氧化多糖中的雙醛 基與水溶性殼聚糖中的氨基之間發(fā)生化學(xué)共價(jià)鍵合反應(yīng)，從而起到創(chuàng)面封閉和止血作用，同 時(shí)由于含雙醛基的氧化多糖和水溶性殼聚糖的生物相容性好，不會(huì)引起組織免疫反應(yīng)，在體 內(nèi)降解后對(duì)機(jī)體不產(chǎn)生副作用，因此本發(fā)明的醫(yī)用創(chuàng)面止血愈創(chuàng)劑在人體和動(dòng)物體的體內(nèi)、 體表具有廣泛的應(yīng)用。
具體實(shí)施方式
本發(fā)明的醫(yī)用創(chuàng)面止血愈創(chuàng)劑由兩種水溶液所組成，一種是含雙醛基的氧化多糖水溶液， 另 一種是水溶性殼聚糖水溶液。一、含雙醛基的氧化多糖的制備1、 含雙醛基的氧化羧甲基纖維素的制備稱取羧甲基纖維素粉2.2§，加入250ml玻璃三 角瓶中，加水97.8g，于電動(dòng)攪拌器上攪拌溶解，得羧甲基纖維素水溶液。該水溶液用5%(重 量百分比，下同)的醋酸溶液調(diào)pH值至pH5.0，加入氧化劑NalO4固體0.25g，封口，黑紙 包裹避光，于室溫條件下攪拌氧化反應(yīng)30h。反應(yīng)畢，攪拌下加入4倍體積的95%的乙醇水 溶液，沉淀，沉淀物抽濾，用95%的乙醇水溶液洗漆脫鹽6次，無(wú)水乙醇脫水，真空干燥， 制得含雙醛基的氧化羧甲基纖維素淺黃色粉1.95g，其雙醛基百分含量為10.5% (雙醛基百分 含量是指多糖分子中含雙醛基的糖單元占多糖分子總糖單元的百分?jǐn)?shù)，下同)。2、 含雙酸基的氧化海藻酸鈉的制備稱取海藻酸鈉粉2.0g，加入250ml玻璃三角瓶中， 加水98.0g，于電動(dòng)攪拌器上攪拌溶解，得海藻酸鈉水溶液。該水溶液用lmol/L的鹽酸水溶 液調(diào)pH值至pH5.5，加入氧化劑KIO4固體0.27g，封口，黑紙包裹避光，于4'C條件下攪拌 氧化反應(yīng)36h。反應(yīng)畢，將反應(yīng)液體裝入截留分子量為8000道爾頓的透析帶中，避光、4°C 條件下于裝有2L蒸餾水的5L燒杯中透析30h，其中每6h更換蒸餾水一次。透析結(jié)束后，將 透析袋內(nèi)的液體放入冷凍干燥機(jī)內(nèi)，進(jìn)行冷凍干燥20h,制得含雙醛基的氧化海藻酸鈉淡黃 色粉狀制品1.78g，其雙醛基百分含量為11.2%。本發(fā)明所述的含雙醛基的氧化多糖可分別由羥乙基纖維素、羥丙基纖維素、羧甲基纖維 素(鈉鹽或鉀鹽)、殼聚糖、羥乙基殼聚糖、羥丙基殼聚糖、羧甲基殼聚糖(鈉鹽或鉀鹽)、 羥乙基甲殼素、羥丙基甲殼素、羧甲基甲殼素(鈉鹽或鉀鹽)、透明質(zhì)酸(鈉鹽或鉀鹽)或海 藻酸(鈉鹽或鉀鹽)，經(jīng)氧化劑氧化后，在分子中形成雙醛基而制得，所制得的含雙醛基的氧 化多糖分別是含雙醛基的氧化羥乙基纖維素、含雙醛基的氧化羥丙基纖維素、含雙醛基的氧 化羧甲基纖維素(鈉鹽或鉀鹽)、含雙醛基的氧化殼聚糖、含雙醛基的氧化羥乙基殼聚糖、含 雙醛基的氧化羥丙基殼聚糖、含雙醛基的氧化羧甲基殼聚糖(鈉鹽或鉀鹽)、含雙醛基的氧化 羥乙基甲殼素、含雙醛基的氧化羥丙基甲殼素、含雙醛基的氧化羧甲基甲殼素(鈉鹽或鉀鹽)、 含雙醛基的氧化透明質(zhì)酸(鈉鹽或鉀鹽)或含雙醛基的氧化海藻酸(鈉鹽或鉀鹽)。氧化反應(yīng) 所使用的氧化劑可以是高碘酸鹽、次氯酸鹽、臭氧或過(guò)氧化物，氧化反應(yīng)中多糖和氧化劑的加入量是根據(jù)氧化多糖中雙醛基含量要求而定，通常多糖與氧化劑的摩爾比為l : (0.01 1)， 反應(yīng)溫度可以是4卩 室溫，反應(yīng)時(shí)間為2 72h。本發(fā)明所述的含雙醛基的氧化多糖是指氧 化多糖中含雙醛基的糖單元占多糖分子總糖單元的百分?jǐn)?shù)為5°/。 100%。 二、醫(yī)用創(chuàng)面止血愈創(chuàng)劑的制備含雙醛基的氧化多糖水溶液的制備稱取制得的含雙醛基的氧化海藻酸鈉(雙醛基含量 為11.2%)粉l.Og，置于100ml的玻璃燒杯中，加入無(wú)菌生理鹽水溶劑50ml，攪拌下溶解， 將所得溶液用孔徑為0.22um的微孔濾膜過(guò)濾，得重量百分比濃度為2.0%的無(wú)菌含雙醛基的 氧化海藻酸鈉水溶液，將該水溶液40ml分別裝入5ml規(guī)格的無(wú)菌雙聯(lián)注射器的一個(gè)注射管中， 得含雙醛基的氧化海藻酸鈉水溶液，即含雙醛基的氧化多糖水溶液。水溶性殼聚糖水溶液的制備稱取水溶性殼聚糖羥丙基殼聚糖粉(青島博益特生物材料 有限公司醫(yī)用級(jí)原料產(chǎn)品)l.Og，置于100ml的玻璃燒杯中，加入無(wú)菌生理鹽水溶劑50ml， 攪拌下溶解，將所得溶液用孔徑為0.22um的微孔濾膜過(guò)濾，得重量百分濃度為2%的無(wú)菌羥 丙基殼聚糖水溶液，將該水溶液分別裝入5ml規(guī)格的雙聯(lián)注射器的另一個(gè)注射管中，即得水 溶性殼聚糖水溶液。無(wú)菌條件下裝上雙聯(lián)注射器的注射針頭，并進(jìn)行無(wú)菌包裝，制得醫(yī)用創(chuàng)面止血愈創(chuàng)劑。 該醫(yī)用創(chuàng)面止血愈創(chuàng)劑由兩種水溶液組成， 一種是含雙醛基的氧化多糖水溶液，另一種是水 溶性殼聚糖水溶液，該兩種水溶液共同組成醫(yī)用創(chuàng)面止血愈創(chuàng)劑。使用該醫(yī)用創(chuàng)面止血愈創(chuàng) 劑時(shí)，推動(dòng)雙聯(lián)注射器的注射柄，將氧化多糖的水溶液和水溶性殼聚糖的水溶液一同推出， 兩種水溶液在推出過(guò)程中混合并到達(dá)創(chuàng)面，氧化多糖的雙醛基與水溶性殼聚糖的氨基發(fā)生反 應(yīng)并交聯(lián)固化，起到創(chuàng)面封閉止血的作用。將剩余的含雙醛基的氧化海藻酸鈉水溶液10ml分別裝入5ml規(guī)格的單管無(wú)菌注射器的注 射管中，無(wú)菌條件下裝上注射針頭，并進(jìn)行無(wú)菌包裝，得單劑含雙醛基的氧化海藻酸鈉溶液, 用于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究。本發(fā)明的醫(yī)用創(chuàng)面止血愈創(chuàng)劑的制備中，所述的含雙醛基的氧化多糖可以是含雙醛基的 氧化羥乙基纖維素、含雙醛基的氧化羥丙基纖維素、含雙醛基的氧化羧甲基纖維素(鈉鹽或 鉀鹽)、含雙醛基的氧化殼聚糖、含雙醛基的氧化羥乙基殼聚糖、含雙醛基的氧化羥丙基殼聚 糖、含雙醛基的氧化羧甲基殼聚糖(鈉鹽或鉀鹽)、含雙醛基的氧化羥乙基甲殼素、含雙醛基 的氧化羥丙基甲殼素、含雙醛基的氧化羧甲基甲殼素(鈉鹽或鉀鹽)、含雙醛基的氧化透明質(zhì) 酸(鈉鹽或鉀鹽)或含雙醛基的氧化海藻酸(鈉鹽或鉀鹽)中的一種，上述氧化多糖分子中 含雙醛基的糖單元占多糖分子總糖單元的百分?jǐn)?shù)為5% 100%;所述的水溶性殼聚糖可以是羧 甲基殼聚糖(鈉鹽或鉀鹽)、羥乙基殼聚糖、羥丙基殼聚糖中的任意一種；所述的水溶液的溶 劑可以是蒸餾水、注射用水、生理鹽水、林格氏液中的一種。含雙醛基的氧化多糖水溶液中 的含雙醛基的氧化多糖的重量百分比濃度為0. 5%-20%,水溶性殼聚糖水溶液中水溶性殼聚糖 的重量百分比濃度為0. 5%-20%。醫(yī)用創(chuàng)面止血愈創(chuàng)劑的含雙醛基的氧化多糖水溶液和水溶性殼聚糖水溶液也可以分別裝 入兩個(gè)小瓶中或其它兩種容器中，使用時(shí)快速混合，并立即將混合溶液施在創(chuàng)面上；或者將含雙醛基的氧化多糖粉和水溶性殼聚糖粉按一定劑量分別裝入一定規(guī)格的兩個(gè)小瓶中，使用 前加入溶劑溶解，兩者混合使用，均能達(dá)到同樣的交聯(lián)固化效果，達(dá)到創(chuàng)面止血的效果。 三、動(dòng)物組織器官缺損創(chuàng)面封閉止血實(shí)驗(yàn)取Wistar大鼠20只，雌雄兼半，體重250 300g，隨機(jī)分為兩組第l組(施用本發(fā) 明的單劑含雙醛基的氧化海藻酸鈉溶液)和第2組(施用本發(fā)明的醫(yī)用創(chuàng)面止血愈創(chuàng)劑)，每 組10只。全部大鼠分別按30mg/Kg體重的劑量腹腔注射重量百分濃度為2%戊巴比妥鈉水溶 液麻醉，將大鼠腹部朝上固定在手術(shù)架上，用剃須刀將大鼠的兩后腿內(nèi)側(cè)去毛，用新潔爾滅 棉球進(jìn)行去毛皮膚的消毒。消毒后用手術(shù)刀在大鼠的兩后腿內(nèi)側(cè)的去毛部位分別切約30mm 長(zhǎng)、3mm深的切口，有血液流出。第1組在大鼠切口部位用注射器推出單劑含雙醛基的氧化 海藻酸鈉溶液0.5ml，覆蓋切口創(chuàng)面，約12分鐘單劑含雙醛基的氧化海藻酸鈉溶液凝固形成 凝膠，血流止住，用手術(shù)鑷子輕輕觸及形成的凝膠，凝膠硬度低，創(chuàng)面封閉不夠牢固。第2 組在大鼠切口部位用雙聯(lián)注射器推出醫(yī)用創(chuàng)面止血愈創(chuàng)劑0.5ml，覆蓋切口創(chuàng)面，約1分鐘 醫(yī)用創(chuàng)面止血愈創(chuàng)劑凝固形成凝膠，血流止住，用手術(shù)鑷子輕輕觸及形成的凝膠，凝膠硬度 較大，粘合牢固。術(shù)后大鼠正常飼養(yǎng)，大鼠創(chuàng)面在5 6天愈合。本試驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明的 醫(yī)用創(chuàng)面止血愈創(chuàng)劑比單劑含雙醛基的氧化海藻酸鈉溶液凝固時(shí)間短，在創(chuàng)面封閉止血作用 上效果更好，時(shí)間更短。以Wistar大鼠為試驗(yàn)動(dòng)物，制作肝組織缺損模型，評(píng)價(jià)本發(fā)明的醫(yī)用創(chuàng)面止血愈創(chuàng)劑和 商品纖維蛋白膠對(duì)肝組織缺損創(chuàng)面的封閉止血作用。試驗(yàn)選擇體重為250 300g的大鼠20只， 均為雄性，隨機(jī)分為對(duì)照組(使用商品纖維蛋白膠封閉劑)、試驗(yàn)組(使用本發(fā)明的醫(yī)用創(chuàng)面 止血愈創(chuàng)劑)，每組10只大鼠。全部動(dòng)物均采用腹腔注射2%的戊巴比妥鈉水溶液進(jìn)行麻醉， 劑量為30mg/Kg。在各組大鼠腹部正中切長(zhǎng)約3cm的切口，打開腹腔，無(wú)菌條件下游離出肝 臟左葉，用手術(shù)組織鉗于肝臟中偏下部夾取5mmX5mmX2mm大小的肝組織塊，造成肝組 織缺損，自組織切下計(jì)出血時(shí)間5秒鐘，用醫(yī)用棉紗布吸血，并立即推注創(chuàng)面止血?jiǎng)?，封閉 肝缺損創(chuàng)面。對(duì)照組推注纖維蛋白膠0.3ml，試驗(yàn)組推注本發(fā)明的醫(yī)用創(chuàng)面止血愈創(chuàng)劑0.3ml， 觀察創(chuàng)面2分鐘，纖維蛋白膠和本發(fā)明的醫(yī)用創(chuàng)面止血愈創(chuàng)劑均能在1分鐘內(nèi)凝固，滲血止 住，本發(fā)明的醫(yī)用創(chuàng)面止血愈創(chuàng)劑與創(chuàng)面粘合牢固，牢固度優(yōu)于纖維蛋白膠。手術(shù)大鼠關(guān)腹， 正常飼養(yǎng)，于術(shù)后2周處死實(shí)驗(yàn)大鼠，開腹檢查肝組織缺損創(chuàng)面愈合情況，試驗(yàn)組大鼠肝創(chuàng) 面愈合，表面光滑，對(duì)照組大鼠肝創(chuàng)面愈合，創(chuàng)面有粘連。試驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明的醫(yī)用創(chuàng) 面止血愈創(chuàng)劑具有顯著的創(chuàng)面封閉作用、止血作用、促進(jìn)創(chuàng)面愈合作用，同時(shí)具有預(yù)防組織 粘連作用。動(dòng)物試驗(yàn)表明，本發(fā)明的醫(yī)用創(chuàng)面止血愈創(chuàng)劑在創(chuàng)面封閉時(shí)間和止血時(shí)間方面優(yōu)于單劑 含雙醛基的氧化海藻酸鈉溶液；醫(yī)用創(chuàng)面止血愈創(chuàng)劑與商品纖維蛋白膠相比，具有更優(yōu)越顯 著的創(chuàng)面封閉作用、止血作用、促進(jìn)創(chuàng)面愈合作用和預(yù)防組織粘連作用。因此本發(fā)明的醫(yī)用 創(chuàng)面止血愈創(chuàng)劑可在制備創(chuàng)面封閉或創(chuàng)面止血的藥物或醫(yī)療器械中應(yīng)用，也可在制備促進(jìn)創(chuàng) 面愈合或預(yù)防手術(shù)后組織粘連的藥物或醫(yī)療器械應(yīng)用，作為藥物或醫(yī)療器械進(jìn)行開發(fā)。由于本發(fā)明所選用的含雙醛基的氧化多糖和水溶性殼聚糖的生物相容性好，不引起組織 免疫反應(yīng)，在體內(nèi)降解后最終被降解吸收，不產(chǎn)生副作用，因此本發(fā)明的醫(yī)用創(chuàng)面止血愈創(chuàng) 劑制備成藥物或醫(yī)療器械，在人體和動(dòng)物體的體內(nèi)、體表應(yīng)用，具有廣泛的應(yīng)用前景。
權(quán)利要求
1、一種醫(yī)用創(chuàng)面止血愈創(chuàng)劑，其特征是它由兩部分水溶液組成，一部分是含雙醛基的氧化多糖水溶液，另一部分是水溶性殼聚糖水溶液；所述的含雙醛基的氧化多糖是含雙醛基的氧化羥乙基纖維素、含雙醛基的氧化羥丙基纖維素、含雙醛基的氧化羧甲基纖維素鈉鹽或鉀鹽、含雙醛基的氧化殼聚糖、含雙醛基的氧化羥乙基殼聚糖、含雙醛基的氧化羥丙基殼聚糖、含雙醛基的氧化羧甲基殼聚糖鈉鹽或鉀鹽、含雙醛基的氧化羥乙基甲殼素、含雙醛基的氧化羥丙基甲殼素、含雙醛基的氧化羧甲基甲殼素鈉鹽或鉀鹽、含雙醛基的氧化透明質(zhì)酸鈉鹽或鉀鹽，或含雙醛基的氧化海藻酸鈉鹽或鉀鹽中的一種；所述的水溶性殼聚糖是羧甲基殼聚糖鈉鹽或鉀鹽、羥乙基殼聚糖、羥丙基殼聚糖中的一種。
2、 如權(quán)利要求1所述的醫(yī)用創(chuàng)面止血愈創(chuàng)劑，其特征是所述的含雙醛基的氧化多糖分子 中含雙醛基的糖單元占多糖分子總糖單元的百分?jǐn)?shù)大于5%。
3、 如權(quán)利要求1所述的醫(yī)用創(chuàng)面止血愈創(chuàng)劑，其特征是所述的含雙醛基的氧化多糖水溶 液中含雙醛基的氧化多糖的重量百分比濃度為0.5%-20%。
4、 如權(quán)利要求l所述的醫(yī)用創(chuàng)面止血愈創(chuàng)劑，其特征是所述的水溶性殼聚糖水溶液中水 溶性殼聚糖的重量百分比濃度為0. 5%-20%。
5、 如權(quán)利要求1所述的醫(yī)用創(chuàng)面止血愈創(chuàng)劑，其特征是所述的水溶液的溶劑是蒸餾水、 注射用水、生理鹽水、林格氏液中的一種。
6、 權(quán)利要求1所述的醫(yī)用創(chuàng)面止血愈創(chuàng)劑在制備創(chuàng)面封閉或創(chuàng)面止血的藥物或醫(yī)療器械 中的應(yīng)用。
7、 權(quán)利要求1所述的醫(yī)用創(chuàng)面止血愈創(chuàng)劑在制備促進(jìn)創(chuàng)面愈合的藥物或醫(yī)療器械中的應(yīng)用。
8、 權(quán)利要求1所述的醫(yī)用創(chuàng)面止血愈創(chuàng)劑在制備預(yù)防手術(shù)后組織粘連的藥物或醫(yī)療器械 中的應(yīng)用。
全文摘要
一種醫(yī)用創(chuàng)面止血愈創(chuàng)劑，其特征是它由兩部分水溶液組成，一部分是含雙醛基的氧化多糖水溶液，另一部分是水溶性殼聚糖水溶液。上述醫(yī)用創(chuàng)面止血愈創(chuàng)劑可以應(yīng)用于制備創(chuàng)面封閉或創(chuàng)面止血的藥物或醫(yī)療器械，應(yīng)用于制備促進(jìn)創(chuàng)面愈合、預(yù)防手術(shù)后組織粘連的藥物或醫(yī)療器械。本發(fā)明的醫(yī)用創(chuàng)面止血愈創(chuàng)劑的在創(chuàng)面封閉、止血、促進(jìn)創(chuàng)面愈合、預(yù)防手術(shù)后組織粘連等方面具有顯著效果，同時(shí)生物相容性好，不引起組織免疫反應(yīng)，多糖在體內(nèi)降解后對(duì)機(jī)體不產(chǎn)生副作用，因此安全性好。
文檔編號(hào)A61L15/16GK101209354SQ20071011640
公開日2008年7月2日 申請(qǐng)日期2007年12月25日 優(yōu)先權(quán)日2007年12月25日
發(fā)明者劉萬(wàn)順, 韓寶芹, 顧其勝 申請(qǐng)人:青島博益特生物材料有限公司