專利名稱：具有抗炎和抗感染作用的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種具有抗炎抗菌作用的藥物組合物，具體涉及穿心蓮內(nèi)酯類化合物與鐵屎米酮類化合物在抗炎抗菌方面具有協(xié)同作用。
背景技術(shù)：
穿心蓮(Andrographis paniculata(Burm.f.)Nees)為爵床科植物，具有清熱解毒、涼血消腫等功效，臨床上多用于治療上呼吸道感染、急性菌痢、胃腸炎、感冒發(fā)熱等疾病。其主要有效成分為一組內(nèi)酯類化合物，稱為穿心蓮總內(nèi)酯，其中穿心蓮內(nèi)酯(Andrographolide，又稱穿心蓮乙素)、脫水穿心蓮內(nèi)酯(14-Deoxy-11，12-didehydro-andrographolide，又稱穿心蓮丁素)為穿心蓮總內(nèi)酯中含量最高的單體成份。
穿心蓮內(nèi)酯 脫水穿心蓮內(nèi)酯苦木(Picrasma quassioides(D.Don)Benn.)為苦木科苦木屬植物。具有清熱燥濕、解毒殺蟲、抗菌消炎之功效，可治療胃腸炎、膽道感染、急性化膿性感染等疾病。中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所70年代對其進行了比較深入的藥物資源學(xué)、化學(xué)成分、藥理毒理學(xué)、制劑學(xué)等方面的研究，得出生物堿是其主要的有效成分并制備了總生物堿的針劑，臨床證明該生物堿制劑對呼吸系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)的各種炎癥均具有較好的療效?？嗄局械纳飰A可分為三類，分別為鐵屎米酮類生物堿、咔巴啉類生物堿和二聚體類生物堿，其中以鐵屎米酮類生物堿中的4，5-二甲氧基鐵屎米酮(4，5-dimethoxycantin-6-one)和4-甲氧基-5-羥基鐵屎米酮(4-methoxy-5-hydroxycanthin-6-one)含量最高。
4，5-二甲氧基鐵屎米酮4-甲氧基-5-羥基鐵屎米酮目前上市藥品中有將穿心蓮與苦木藥材配伍應(yīng)用制成蓮膽消炎片用于治療呼吸系統(tǒng)感染、腸道感染等疾病。將穿心蓮內(nèi)酯衍生物亞硫酸氫鈉穿心蓮內(nèi)酯與苦木提取物配伍制成蓮膽注射液用于治療呼吸系統(tǒng)感染、腸道感染、皮膚感染等疾病。但將穿心蓮內(nèi)酯類化合物和鐵屎米酮類化合物或苦木總生物堿的配伍應(yīng)用卻未見報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種具有抗炎抗菌作用的藥物組合物，該藥物組合物是由中藥的有效成分組合而成，具有有效成分清楚、含量高、質(zhì)量可控、療效確切的特點，較穿心蓮內(nèi)酯類化合物和鐵屎米酮類化合物或苦木總生物堿單一應(yīng)用具有更好的抗炎抗菌效果，即具有協(xié)同作用。
本發(fā)明提供一種用于制備抗炎抗菌藥物的藥物組合物，它由下述通式化合物(I)和通式化合物(II)以重量比為40∶1-1∶1組成 其中，R代表
其中X代表甲基或氫。
含通式化合物(I)和通式化合物(II)的藥物組合物，其中當R代表上述基團A時，所述化合物為穿心蓮內(nèi)酯，當X代表甲基時，所述化合物為4，5-二甲氧基鐵屎米酮，所述穿心蓮內(nèi)酯和4，5-二甲氧基鐵屎米酮以重量比為40∶1-1∶1組成；當X代表氫時，所述化合物為4-甲氧基-5-羥基鐵屎米酮，所述穿心蓮內(nèi)酯和4-甲氧基-5-羥基鐵屎米酮以重量比為40∶1-1∶1組成。
含通式化合物(I)和通式化合物(II)的藥物組合物，其中當R代表上述基團B時，所述化合物為脫水穿心蓮內(nèi)酯，當X代表甲基時，所述化合物為4，5-二甲氧基鐵屎米酮，所述脫水穿心蓮內(nèi)酯和4，5-二甲氧基鐵屎米酮以重量比為40∶1-1∶1組成；當X代表氫時，所述化合物為4-甲氧基-5-羥基鐵屎米酮，所述脫水穿心蓮內(nèi)酯和4-甲氧基-5-羥基鐵屎米酮以重量比為40∶1-1∶1組成。
本發(fā)明提供一種用于制備抗炎抗菌藥物的藥物組合物，它是由下述通式化合物(I)和苦木總生物堿以重量比為10∶1-1∶10組成。
其中，R代表 含通式化合物(I)和苦木總生物堿的藥物組合物，其中所述苦木總生物堿中4，5-二甲氧基鐵屎米酮、4-甲氧基-5-羥基鐵屎米酮二者總含量按重量/重量計不低于50％。
含通式化合物(I)和苦木總生物堿的藥物組合物，其中當R代表上述基團A時，所述化合物為穿心蓮內(nèi)酯，穿心蓮內(nèi)酯和苦木總生物堿以重量比為10∶1-1∶10組成；其中當R代表上述基團B時，所述化合物為脫水穿心蓮內(nèi)酯，脫水穿心蓮內(nèi)酯和苦木總生物堿以重量比為10∶1-1∶10組成。
上述任一所述的組合物在制備治療抗炎抗菌藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明的另一目的是提供上述任一組合物可以與藥學(xué)上可接受的藥用輔料組合，并按相應(yīng)的制藥方法，即可制成臨床適用的任何一種藥劑，例如片劑、膠囊劑、顆粒劑等口服制劑，注射劑，噴霧劑、滴鼻劑、凝膠劑、霜劑等外用制劑等。
本發(fā)明上述任一組合物抗炎的有效劑量范圍是250mg-1100mg/日/人。用法口服。以上用法用量是根據(jù)小鼠藥理實驗結(jié)果推算的，因人體與動物的差異性，故允許臨床實際用量有所調(diào)整。
下面給出具體實施方式
對本發(fā)明作進一步說明，但不限于此。
具體實施例方式本發(fā)明所述的穿心蓮內(nèi)酯可以采用市售品(具有相應(yīng)提取設(shè)備的廠家均可以生產(chǎn)，如四川廣漢本草植化有限公司)，亦可以由穿心蓮或穿心蓮總內(nèi)酯提取分離后得到。
制備例1穿心蓮總內(nèi)酯的制備100g穿心蓮全草，粉碎后加入1000ml60％的乙醇溶液浸提2次，每次2小時。合并浸提液，回收乙醇后以等體積69-90℃的石油醚萃取兩次，余液加入等體積20％的乙醇溶液，過濾，濾液上大孔吸附樹脂，以水沖洗3個柱床體積后，以95％乙醇洗脫，回收洗脫液，真空干燥，即得穿心蓮總內(nèi)酯。
制備例2穿心蓮內(nèi)酯的制備取上述制備例1所述穿心蓮總內(nèi)酯10g，溶于無水乙醇，100～120目柱層析硅膠1∶1拌樣。取200-300目柱層析硅膠200g，濕法裝柱；以氯仿-甲醇(50∶1)洗脫，TLC檢測，收集含有穿心蓮內(nèi)酯的部分，回收溶劑，所得粉末以氯仿重結(jié)晶得穿心蓮內(nèi)酯1.1g，HPLC外標法測得含量98.7％，呈白色粉末。
制備例3脫水穿心蓮內(nèi)酯的制備取上述制備例1所述穿心蓮總內(nèi)酯10g，溶于無水乙醇，100～120目柱層析硅膠1∶1拌樣。取200-300目柱層析硅膠200g，濕法裝柱；以氯仿-甲醇(50∶1)洗脫，TLC檢測，收集含有脫水穿心蓮內(nèi)酯的部分，回收溶劑，所得粉末以氯仿重結(jié)晶得脫水穿心蓮內(nèi)酯0.5g，HPLC外標法測得含量98.2％，呈白色粉末。
制備例4苦木總生物堿的制備1kg苦木藥材經(jīng)粉碎后以10升75％乙醇加熱提取2次，每次2小時，合并提取液，60℃下真空回收乙醇，以濃氨水調(diào)pH值至11，以等體積乙酸乙酯萃取2次，合并萃取液，回收乙酸乙酯，以0.5％鹽酸溶解剩余物，再重復(fù)以上濃氨水調(diào)pH值——乙酸乙酯萃取步驟，最后得總生物堿17.1g，高效液相(HPLC)法測定，4，5-二甲氧基鐵屎米酮、4-甲氧基-5-羥基鐵屎米酮二者總含量按重量/重量計為56％(w/w)。
制備例54，5-二甲氧基鐵屎米酮和4-甲氧基-5-羥基鐵屎米酮的制備600g柱層析硅膠(200-300目)以氯仿濕法裝柱，取10g總生物堿溶于無水乙醇中，以15g柱層析硅膠(100-120目)拌樣，上樣后以氯仿甲醇梯度洗脫(起始溶劑為氯仿)，250ml收集一次，TLC檢查，合并相同項，反復(fù)硅膠柱層析，可得4，5-二甲氧基鐵屎米酮2.1g，HPLC歸一化檢查純度98.7％，理化性質(zhì)如下黃色針晶(丙酮)，mp 145～146℃，碘化鉍鉀反應(yīng)呈陽性。IR vmaxKBrcm-11670，1635，1270，1110，1090。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ3.96(3H，s，C5-OCH3)，4.35(3H，s，C4-OCH3)，7.54(1H，td，J＝8.0，0.8Hz，H-10)，7.72(1H，td，J＝8.0，0.8Hz，H-9)，8.23(1H，d，J＝5.0Hz，H-1)，8.30(1H，d，J＝8.0Hz，H-11)，8.44(1H，d，J＝8.0Hz，H-8)，8.79(1H，d，J＝5.0Hz，H-2)；可得4-甲氧基-5-羥基鐵屎米酮1.7g，HPLC歸一化檢查純度98.2％，理化性質(zhì)如下黃色針晶(丙酮)，mp 224～225℃，碘化鉍鉀反應(yīng)呈陽性。IR vmaxKBrcm-13270，1670，1635，1270，1100。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ4.24(3H，s，C4-OCH3)，7.54(1H，td，J＝8.0，0.8Hz，H-10)，7.73(1H，td，J＝8.0，0.8Hz，H-9)，8.10(1H，d，J＝5.0Hz，H-1)，8.27(1H，d，J＝8.0Hz，H-11)，8.45(1H，d，J＝8.0Hz，H-8)，8.75(1H，d，J＝5.0Hz，H-2)。
制備例6穿心蓮內(nèi)酯與苦木總生物堿組合物片劑的制備稱取穿心蓮內(nèi)酯91克，苦木總生物堿9g，混勻，過80目篩，加入淀粉100g作為稀釋劑組成制劑配方，混勻，噴入75％乙醇為粘合劑制軟材，用24目篩制粒，干燥后整粒，加入硬脂酸鎂5g為潤滑劑，混勻，壓片，包衣，制成1000片，每片重0.2g。
制備例7脫水穿心蓮內(nèi)酯與苦木總生物堿組合物膠囊劑的制備稱取脫水穿心蓮內(nèi)酯9克，苦木總生物堿91g，混勻，過80目篩，加入微晶纖維素100g作為稀釋劑組成制劑配方，混勻，噴入75％乙醇為粘合劑制軟材，用24目篩制粒，干燥后整粒，裝膠囊，制成1000粒，每粒內(nèi)容物重0.2g。
制備例8穿心蓮內(nèi)酯與4，5-二甲氧基鐵屎米酮組合物片劑的制備稱取穿心蓮內(nèi)酯50克，4，5-二甲氧基鐵屎米酮50g，混勻，過80目篩，加入淀粉100g作為稀釋劑組成制劑配方，混勻，噴入75％乙醇為粘合劑制軟材，用24目篩制粒，干燥后整粒，加入硬脂酸鎂5g為潤滑劑，混勻，壓片，包衣，制成1000片，每片重0.2g。
制備例9脫水穿心蓮內(nèi)酯與4，5-二甲氧基鐵屎米酮組合物膠囊劑的制備稱取脫水穿心蓮內(nèi)酯97.6克，4，5-二甲氧基鐵屎米酮2.4g，混勻，過80目篩，加入微晶纖維素100g作為稀釋劑組成制劑配方，混勻，噴入75％乙醇為粘合劑制軟材，用24目篩制粒，干燥后整粒，裝膠囊，制成1000粒，每粒內(nèi)容物重0.2g。
制備例10穿心蓮內(nèi)酯與4-甲氧基-5-羥基鐵屎米酮組合物片劑的制備稱取穿心蓮內(nèi)酯91克，4-甲氧基-5-羥基鐵屎米酮9g，混勻，過80目篩，加入淀粉100g作為稀釋劑組成制劑配方，混勻，噴入75％乙醇為粘合劑制軟材，用24目篩制粒，干燥后整粒，加入硬脂酸鎂5g為潤滑劑，混勻，壓片，包衣，制成1000片，每片重0.2g。
制備例11脫水穿心蓮內(nèi)酯與4-甲氧基-5-羥基鐵屎米酮組合物膠囊劑的制備稱取脫水穿心蓮內(nèi)酯91克，4-甲氧基-5-羥基鐵屎米酮9g，混勻，過80目篩，加入微晶纖維素100g作為稀釋劑組成制劑配方，混勻，噴入75％乙醇為粘合劑制軟材，用24目篩制粒，干燥后整粒，裝膠囊，制成1000粒，每粒內(nèi)容物重0.2g。
下述實驗例中所用材料及動物情況如下穿心蓮內(nèi)酯、脫水穿心蓮內(nèi)酯、4，5-二甲氧基鐵屎米酮和4-甲氧基-5-羥基鐵屎米酮、苦木總生物堿分別按制備例2、3、4、5制備。各組合物即將按制備例制備的成份，按比例混合即可。
地塞米松批號0601146，鄭州羚銳制藥有限公司生產(chǎn)。
羧甲基纖維素鈉(簡稱CMC)批號F 20041221，國藥集團化學(xué)試劑有限公司生產(chǎn)。
二甲苯杭州中山化學(xué)有限公司生產(chǎn)。
昆明種小鼠，昆明醫(yī)學(xué)院實驗動物中心提供。
實驗例1不同劑量穿心蓮內(nèi)酯、4，5-二甲氧基鐵屎米酮及二者組合物對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響1、動物分組將健康昆明種小鼠(體重20±2g)隨機分為穿心蓮內(nèi)酯小劑量組(40mg/kg)、穿心蓮內(nèi)酯中劑量組(60mg/kg)、穿心蓮內(nèi)酯大劑量組(120mg/kg)、4，5-二甲氧基鐵屎米酮小劑量組(10mg/kg)、4，5-二甲氧基鐵屎米酮中劑量組(50mg/kg)、4，5-二甲氧基鐵屎米酮大劑量組(100mg/kg)、組合物小劑量組50mg/kg，穿心蓮內(nèi)酯(40mg/kg)+4，5-二甲氧基鐵屎米酮(10mg/kg)、組合物大劑量組220mg/kg，穿心蓮內(nèi)酯(120mg/kg)+4，5-二甲氧基鐵屎米酮(100mg/kg)；以上各組動物給藥方式為將受試藥物用CMC混懸后灌胃給藥三天；模型對照組CMC灌胃給藥三天；陽性對照組地塞米松2mg/kg尾靜脈給藥1次。
2、方法末次給藥后40min，將50μl二甲苯涂于小鼠右耳廓兩面致炎，左耳作為對照，致炎后1h斷頸處死動力，沿耳廓基線剪下兩耳，用直徑9mm的打孔器分別在同一部位打下耳片，即時稱重，計算各組腫脹度及抑制率。腫脹度(mg)＝左耳耳片重(mg)-右耳耳片重(mg) 2、結(jié)果40mg/kg穿心蓮內(nèi)酯與10mg/kg4，5-二甲氧基鐵屎米酮組未能改善二甲苯所致小鼠耳腫脹；60mg/kg穿心蓮內(nèi)酯與50mg/kg4，5-二甲氧基鐵屎米酮組均在一定程度上改善二甲苯所致小鼠耳腫脹。
組合物小劑量組50mg/kg，穿心蓮內(nèi)酯(40mg/kg)+4，5-二甲氧基鐵屎米酮(10mg/kg)非常顯著地改善小鼠耳腫脹，與模型組比較p＜0.01，而且與60mg/kg穿心蓮內(nèi)酯與50mg/kg4，5-二甲氧基鐵屎米酮組比較亦有顯著性差異(p＜0.05)。提示組合物中穿心蓮內(nèi)酯與4，5-二甲氧基鐵屎米酮具有協(xié)同作用。
組合物大劑量組220mg/kg，穿心蓮內(nèi)酯(120mg/kg)+4，5-二甲氧基鐵屎米酮(100mg/kg)極其顯著地改善小鼠耳腫脹，與模型組比較p＜0.001。
詳見表1。
表1試驗藥物對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響

注與模型組比較*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001；與4，5-二甲氧基鐵屎米酮中劑量組比較△p＜0.05；與穿心蓮內(nèi)酯中劑量組比較#p＜0.05。
實驗例2不同配比穿心蓮內(nèi)酯、4，5-二甲氧基鐵屎米酮二者組合物對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響1、方法同實驗例1。
2、動物分組及結(jié)果不同配比的藥物組合物(100mg/kg)對小鼠耳腫脹均具有顯著的抑制作用。詳見表2、表3。
表2組合物配比情況表

表3不同配比組合物對耳腫脹影響

注與模型組比較*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001；與組合物A1組比較△p＜0.05；與組合物E1組比較#p＜0.05。
實驗例3不同劑量穿心蓮內(nèi)酯、4-甲氧基-5-羥基鐵屎米酮及二者組合物對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響1、方法同實驗例1。
2、動物分組將健康昆明種小鼠隨機分為穿心蓮內(nèi)酯小劑量組(40mg/kg)、穿心蓮內(nèi)酯中劑量組(60mg/kg)、穿心蓮內(nèi)酯大劑量組(120mg/kg)、4-甲氧基-5-羥基鐵屎米酮小劑量組(10mg/kg)、4-甲氧基-5-羥基鐵屎米酮中劑量組(50mg/kg)、4-甲氧基-5-羥基鐵屎米酮大劑量組(100mg/kg)、組合物小劑量組50mg/kg，穿心蓮內(nèi)酯(40mg/kg)+4-甲氧基-5-羥基鐵屎米酮(10mg/kg)、組合物大劑量組220mg/kg，穿心蓮內(nèi)酯(120mg/kg)+4-甲氧基-5-羥基鐵屎米酮(100mg/kg)，以上各組動物給藥方式為將受試藥物用CMC混懸后灌胃給藥三天；模型對照組CMC灌胃給藥三天；陽性對照組地塞米松2mg/kg尾靜脈給藥1次。
3、結(jié)果40mg/kg穿心蓮內(nèi)酯與10mg/kg4-甲氧基-5-羥基鐵屎米酮組未能改善二甲苯所致小鼠耳腫脹；60mg/kg穿心蓮內(nèi)酯與50mg/kg4-甲氧基-5-羥基鐵屎米酮組均在一定程度上改善二甲苯所致小鼠耳腫脹。
組合物小劑量組50mg/kg，穿心蓮內(nèi)酯(40mg/kg)+4-甲氧基-5-羥基鐵屎米酮(10mg/kg)非常顯著地改善小鼠耳腫脹，與模型組比較p＜0.01，而且與60mg/kg穿心蓮內(nèi)酯與50mg/kg4-甲氧基-5-羥基鐵屎米酮組比較亦有顯著性差異(p＜0.05)。提示組合物中穿心蓮內(nèi)酯與4-甲氧基-5-羥基鐵屎米酮具有協(xié)同作用。
組合物大劑量組220mg/kg，穿心蓮內(nèi)酯(120mg/kg)+4-甲氧基-5-羥基鐵屎米酮(100mg/kg)極其顯著地改善小鼠耳腫脹，與模型組比較p＜0.001。
詳見表4。
表4試驗藥物對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響

注與模型組比較*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001；與4-甲氧基-5-羥基鐵屎米酮小劑量組中劑量組比較△p＜0.05；與穿心蓮內(nèi)酯中劑量組比較#p＜0.05。
實驗例4不同配比穿心蓮內(nèi)酯、4-甲氧基-5-羥基鐵屎米酮二者組合物對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響1、方法同實驗例1。
2、動物分組及結(jié)果不同配比的藥物組合物(100mg/kg)對小鼠耳腫脹均具有顯著的抑制作用。詳見表5、表6。
表5組合物配比情況表

表6不同配比組合物對耳腫脹影響

注與模型組比較*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001；與組合物A2組比較△p＜0.05；與組合物E2組比較#p＜0.05。
實驗例5不同劑量穿心蓮內(nèi)酯、苦木總生物堿及二者組合物對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響1、方法同實驗例1。
2、動物分組將健康昆明種小鼠(體重20±2g)隨機分為穿心蓮內(nèi)酯小劑量組(40mg/kg)、穿心蓮內(nèi)酯中劑量組(60mg/kg)、穿心蓮內(nèi)酯大劑量組(120mg/kg)、苦木總生物堿小劑量組(10mg/kg)、苦木總生物堿中劑量組(50mg/kg)、苦木總生物堿大劑量組(100mg/kg)、組合物小劑量組50mg/kg，穿心蓮內(nèi)酯(40mg/kg)+苦木總生物堿(10mg/kg)、組合物大劑量組220mg/kg，穿心蓮內(nèi)酯(120mg/kg)+苦木總生物堿(100mg/kg)，以上各組動物給藥方式為將受試藥物用CMC混懸后灌胃給藥三天；模型對照組CMC灌胃給藥三天；陽性對照組地塞米松2mg/kg尾靜脈給藥1次。
3、結(jié)果40mg/kg穿心蓮內(nèi)酯與10mg/kg苦木總生物堿組未能改善二甲苯所致小鼠耳腫脹；60mg/kg穿心蓮內(nèi)酯與50mg/kg苦木總生物堿組均在一定程度上改善二甲苯所致小鼠耳腫脹。
組合物小劑量組50mg/kg，穿心蓮內(nèi)酯(40mg/kg)+苦木總生物堿(10mg/kg)非常顯著地改善小鼠耳腫脹，與模型組比較p＜0.01，而且與60mg/kg穿心蓮內(nèi)酯與50mg/kg苦木總生物堿組比較亦有顯著性差異(p＜0.05)。提示組合物中穿心蓮內(nèi)酯與苦木總生物堿具有協(xié)同作用。
組合物大劑量組220mg/kg，穿心蓮內(nèi)酯(120mg/kg)+苦木總生物堿(100mg/kg)極其顯著地改善小鼠耳腫脹，與模型組比較p＜0.001。
詳見表7。
表7試驗藥物對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響

注與模型組比較*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001；與苦木總生物堿中劑量組比較△p＜0.05；與穿心蓮內(nèi)酯中劑量組比較#p＜0.05。
實驗例6不同配比穿心蓮內(nèi)酯、苦木總生物堿二者組合物對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響1、方法同實驗例1。
2、動物分組及結(jié)果不同配比的藥物組合物(100mg/kg)對小鼠耳腫脹均具有顯著的抑制作用。詳見表8、表9。
表8組合物配比情況表

表9不同配比組合物對耳腫脹影響

注與模型組比較*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001；與組合物A3組比較△p＜0.05；與組合物E3組比較#p＜0.05。
實驗例7不同劑量脫水穿心蓮內(nèi)酯、4，5-二甲氧基鐵屎米酮及二者組合物對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響1、方法同實驗例1。
2、動物分組將健康昆明種小鼠(體重20±2g)隨機分為脫水穿心蓮內(nèi)酯小劑量組(40mg/kg)、脫水穿心蓮內(nèi)酯中劑量組(60mg/kg)、脫水穿心蓮內(nèi)酯大劑量組(120mg/kg)、4，5-二甲氧基鐵屎米酮小劑量組(10mg/kg)、4，5-二甲氧基鐵屎米酮中劑量組(50mg/kg)、4，5-二甲氧基鐵屎米酮大劑量組(100mg/kg)、組合物小劑量組50mg/kg，脫水穿心蓮內(nèi)酯(40mg/kg)+4，5-二甲氧基鐵屎米酮(10mg/kg)、組合物大劑量組220mg/kg，脫水穿心蓮內(nèi)酯(120mg/kg)+4，5-二甲氧基鐵屎米酮(100mg/kg)，以上各組動物給藥方式為將受試藥物用CMC混懸后灌胃給藥三天；模型對照組CMC灌胃給藥三天；陽性對照組地塞米松2mg/kg尾靜脈給藥1次。
3、結(jié)果40mg/kg脫水穿心蓮內(nèi)酯與10mg/kg4，5-二甲氧基鐵屎米酮組未能改善二甲苯所致小鼠耳腫脹；60mg/kg脫水穿心蓮內(nèi)酯與50mg/kg4，5-二甲氧基鐵屎米酮組均在一定程度上改善二甲苯所致小鼠耳腫脹。
組合物小劑量組50mg/kg，脫水穿心蓮內(nèi)酯(40mg/kg)+4，5-二甲氧基鐵屎米酮(10mg/kg)非常顯著地改善小鼠耳腫脹，與模型組比較p＜0.01，而且與60mg/kg脫水穿心蓮內(nèi)酯與50mg/kg4，5-二甲氧基鐵屎米酮組比較亦有顯著性差異(p＜0.05)。提示組合物中脫水穿心蓮內(nèi)酯與4，5-二甲氧基鐵屎米酮具有協(xié)同作用。
組合物大劑量組220mg/kg，脫水穿心蓮內(nèi)酯(120mg/kg)+4，5-二甲氧基鐵屎米酮(100mg/kg)極其顯著地改善小鼠耳腫脹，與模型組比較p＜0.001。
詳見表10。
表10試驗藥物對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響

注與模型組比較*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001；與4，5-二甲氧基鐵屎米酮中劑量組比較△p＜0.05；與脫水穿心蓮內(nèi)酯中劑量組比較#p＜0.05。
實驗例8不同配比脫水穿心蓮內(nèi)酯、4，5-二甲氧基鐵屎米酮二者組合物對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響1、方法同實驗例1。
2、動物分組及結(jié)果不同配比的藥物組合物(100mg/kg)對小鼠耳腫脹均具有顯著的抑制作用。詳見表11、表12。
表11組合物配比情況表

表12不同配比組合物對耳腫脹影響

注與模型組比較*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001；與組合物A4組比較△p＜0.05；與組合物E4組比較#p＜0.05。
實驗例9不同劑量脫水穿心蓮內(nèi)酯、4-甲氧基-5-羥基鐵屎米酮及二者組合物對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響1、方法同實驗例1。
2、動物分組將健康昆明種小鼠(體重20±2g)隨機分為脫水穿心蓮內(nèi)酯小劑量組(40mg/kg)、脫水穿心蓮內(nèi)酯中劑量組(60mg/kg)、脫水穿心蓮內(nèi)酯大劑量組(120mg/kg)、4-甲氧基-5-羥基鐵屎米酮小劑量組(10mg/kg)、4-甲氧基-5-羥基鐵屎米酮中劑量組(50mg/kg)、4-甲氧基-5-羥基鐵屎米酮大劑量組(100mg/kg)、組合物小劑量組50mg/kg，脫水穿心蓮內(nèi)酯(40mg/kg)+4-甲氧基-5-羥基鐵屎米酮(10mg/kg)、組合物大劑量組220mg/kg，脫水穿心蓮內(nèi)酯(120mg/kg)+4-甲氧基-5-羥基鐵屎米酮(100mg/kg)，以上各組動物給藥方式為將受試藥物用CMC混懸后灌胃給藥三天；模型對照組CMC灌胃給藥三天；陽性對照組地塞米松2mg/kg尾靜脈給藥1次。
3、結(jié)果40mg/kg脫水穿心蓮內(nèi)酯與10mg/kg4-甲氧基-5-羥基鐵屎米酮組未能改善二甲苯所致小鼠耳腫脹；60mg/kg脫水穿心蓮內(nèi)酯與50mg/kg4-甲氧基-5-羥基鐵屎米酮組均在一定程度上改善二甲苯所致小鼠耳腫脹。
組合物小劑量組50mg/kg，脫水穿心蓮內(nèi)酯(40mg/kg)+4-甲氧基-5-羥基鐵屎米酮(10mg/kg)非常顯著地改善小鼠耳腫脹，與模型組比較p＜0.01，而且與60mg/kg脫水穿心蓮內(nèi)酯與50mg/kg4-甲氧基-5-羥基鐵屎米酮組比較亦有顯著性差異(p＜0.05)。提示組合物中脫水穿心蓮內(nèi)酯與4-甲氧基-5-羥基鐵屎米酮具有協(xié)同作用。
組合物大劑量組220mg/kg，脫水穿心蓮內(nèi)酯(120mg/kg)+4-甲氧基-5-羥基鐵屎米酮(100mg/kg)極其顯著地改善小鼠耳腫脹，與模型組比較p＜0.001。
詳見表13。
表13試驗藥物對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響

注與模型組比較*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001；與4-甲氧基-5-羥基鐵屎米酮小劑量組中劑量組比較△p＜0.05；與脫水穿心蓮內(nèi)酯中劑量組比較#p＜0.05。
實驗例10不同配比脫水穿心蓮內(nèi)酯、4-甲氧基-5-羥基鐵屎米酮二者組合物對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響1、方法同實驗例1。
2、動物分組及結(jié)果不同配比的藥物組合物(100mg/kg)對小鼠耳腫脹均具有顯著的抑制作用。詳見表14、表15。
表14組合物配比情況表

表15不同配比組合物對耳腫脹影響

注與模型組比較*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001；與組合物A5組比較△p＜0.05；與組合物E5組比較#p＜0.05。
實驗例11不同劑量脫水穿心蓮內(nèi)酯、苦木總生物堿及二者組合物對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響1、方法同實驗例1。
2、動物分組取健康昆明種小鼠(體重20±2g)隨機分為脫水穿心蓮內(nèi)酯小劑量組(40mg/kg)、脫水穿心蓮內(nèi)酯中劑量組(60mg/kg)、脫水穿心蓮內(nèi)酯大劑量組(120mg/kg)、苦木總生物堿小劑量組(10mg/kg)、苦木總生物堿中劑量組(50mg/kg)、苦木總生物堿大劑量組(100mg/kg)、組合物小劑量組50mg/kg，脫水穿心蓮內(nèi)酯(40mg/kg)+苦木總生物堿(10mg/kg)、組合物大劑量組220mg/kg，脫水穿心蓮內(nèi)酯(120mg/kg)+苦木總生物堿(100mg/kg)，以上各組動物給藥方式為將受試藥物用CMC混懸后灌胃給藥三天；模型對照組CMC灌胃給藥三天；陽性對照組地塞米松2mg/kg尾靜脈給藥1次。
3、結(jié)果40mg/kg脫水穿心蓮內(nèi)酯與10mg/kg苦木總生物堿組未能改善二甲苯所致小鼠耳腫脹；60mg/kg脫水穿心蓮內(nèi)酯與50mg/kg苦木總生物堿組均在一定程度上改善二甲苯所致小鼠耳腫脹。
組合物小劑量組50mg/kg，脫水穿心蓮內(nèi)酯(40mg/kg)+苦木總生物堿(10mg/kg)非常顯著地改善小鼠耳腫脹，與模型組比較p＜0.01，而且與60mg/kg脫水穿心蓮內(nèi)酯與50mg/kg苦木總生物堿組比較亦有顯著性差異(p＜0.05)。提示組合物中脫水穿心蓮內(nèi)酯與苦木總生物堿具有協(xié)同作用。
組合物大劑量組220mg/kg，脫水穿心蓮內(nèi)酯(120mg/kg)+苦木總生物堿(100mg/kg)極其顯著地改善小鼠耳腫脹，與模型組比較p＜0.001。
詳見表16。
表16試驗藥物對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響

注與模型組比較*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001；與苦木總生物堿中劑量組比較△p＜0.05；與脫水穿心蓮內(nèi)酯中劑量組比較#p＜0.05。
實驗例12不同配比脫水穿心蓮內(nèi)酯、苦木總生物堿二者組合物對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響1、方法同實驗例1。
2、動物分組及結(jié)果不同配比的藥物組合物(100mg/kg)對小鼠耳腫脹均具有顯著的抑制作用。詳見表17、表18。
表17組合物配比情況表

表18不同配比組合物對耳腫脹影響

注與模型組比較*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001；與組合物A6組比較△p＜0.05；與組合物E6組比較#p＜0.05。
實驗例13體外抑菌作用1方法采用平板打孔法分別檢測穿心蓮內(nèi)酯、脫水穿心蓮內(nèi)酯、苦木總生物堿、4，5-二甲氧基鐵屎米酮、4-甲氧基-5-羥基鐵屎米酮各成分及組合物C1-C6(具體分別見表2、表5、表8、表11、表14、表17對組合物C1-C6的定義)對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、綠膿桿菌、溶血性鏈球菌、肺炎鏈球菌抑菌效果，測得MIC，計算FIC指數(shù)(Fractional inhibitory concentration index)，用FIC指數(shù)比較其協(xié)同增效作用。
FIC指數(shù)＝MICa藥合用后/MICa單用+MICb藥合用后/MICb單用FIC指數(shù)＜1協(xié)同作用≥1相加作用2無關(guān)作用＞2拮抗作用2結(jié)果結(jié)果顯示穿心蓮內(nèi)酯與苦木總生物堿或4，5-二甲氧基鐵屎米酮或4-甲氧基-5-羥基鐵屎米酮配伍對所試菌株均顯示出明顯的協(xié)同抗菌作用。脫水穿心蓮內(nèi)酯與苦木總生物堿或4，5-二甲氧基鐵屎米酮或4-甲氧基-5-羥基鐵屎米酮配伍對所試菌株均顯示出明顯的協(xié)同抗菌作用。FIC指數(shù)皆＜1。詳見表19。
表19各試驗藥物的體外抗菌活性(mg/ml)

權(quán)利要求
1.一種用于制備抗炎抗菌藥物的藥物組合物，它由下述通式化合物(I)和通式化合物(II)以重量比為40∶1-1∶1組成 其中，R代表 其中X代表甲基或氫。
2.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其中當R代表上述基團A時，所述化合物為穿心蓮內(nèi)酯，當X代表甲基時，所述化合物為4，5-二甲氧基鐵屎米酮，所述穿心蓮內(nèi)酯和4，5-二甲氧基鐵屎米酮以重量比為40∶1-1∶1組成。
3.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其中當R代表上述基團A時，所述化合物為穿心蓮內(nèi)酯，當X代表氫時，所述化合物為4-甲氧基-5-羥基鐵屎米酮，所述穿心蓮內(nèi)酯和4-甲氧基-5-羥基鐵屎米酮以重量比為40∶1-1∶1組成。
4.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其中當R代表上述基團B時，所述化合物為脫水穿心蓮內(nèi)酯，當X代表甲基時，所述化合物為4，5-二甲氧基鐵屎米酮，所述脫水穿心蓮內(nèi)酯和4，5-二甲氧基鐵屎米酮以重量比為40∶1-1∶1組成。
5.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其中當R代表上述基團B時，所述化合物為脫水穿心蓮內(nèi)酯，當X代表氫時，所述化合物為4-甲氧基-5-羥基鐵屎米酮，所述脫水穿心蓮內(nèi)酯和4-甲氧基-5-羥基鐵屎米酮以重量比為40∶1-1∶1組成。
6.一種用于制備抗炎抗菌藥物的藥物組合物，它是由下述通式化合物(I)和苦木總生物堿以重量比為10∶1-1∶10組成。 其中，R代表
7.如權(quán)利要求6所述的藥物組合物，其特征在于，所述苦木總生物堿中4，5-二甲氧基鐵屎米酮、4-甲氧基-5-羥基鐵屎米酮二者總含量按重量/重量計不低于50％。
8.如權(quán)利要求6所述的藥物組合物，其中當R代表上述基團A時，所述化合物為穿心蓮內(nèi)酯，穿心蓮內(nèi)酯和苦木總生物堿以重量比為10∶1-1∶10組成。
9.如權(quán)利要求6所述的藥物組合物，其中當R代表上述基團B時，所述化合物為脫水穿心蓮內(nèi)酯，脫水穿心蓮內(nèi)酯和苦木總生物堿以重量比為10∶1-1∶10組成。
10.如權(quán)利要求1-9任一所述的組合物在制備治療抗炎抗菌藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種具有抗炎抗菌作用的藥物組合物，該組合物由含一定比例的穿心蓮內(nèi)酯類化合物和鐵屎米酮類化合物組成。該組合物有效成分清楚，含量高，療效確切，較穿心蓮內(nèi)酯類化合物和鐵屎米酮類化合物單一應(yīng)用具有更好的抗炎抗菌效果。
文檔編號A61K31/365GK101036647SQ20071013564
公開日2007年9月19日 申請日期2007年3月7日 優(yōu)先權(quán)日2006年3月13日
發(fā)明者吳巍, 邵萌, 翟大偉, 劉軍鋒, 滕厚雷 申請人:海南盛科天然藥物研究院有限公司