專利名稱：一種從天然植物中提取治療惡性腫瘤產(chǎn)品的生產(chǎn)工藝的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及從天然藥用植物中提取有效成分制備成藥方面的技術，確切地談屬于精細有 機化工提取技術。商品名稱毅愛隆膠囊、散劑、顆粒劑、片劑、注射劑。英文名稱The productive technology for extracting a product treating malignant tumor from natural plants其中一種有效成分中文名20 (s)-人參皂甙-Rh2;英文名20 (S) -ginsenoside-Rh2; 化學名3p-0-達瑪-24-烯-吡喃葡萄糖甙。
背景技術：
國外現(xiàn)有技術是這樣記載的癌癥是威脅患者生命的主要病癥之一，目前治療癌癥的主要手段是放化療，但放化療在殺 死腫瘤細胞的同時也大量殺死正常細胞。因而引起許多毒副反應，如白細胞、血小板急劇減 少，病人抗病能力下降，其他正常器官功能大受影響，從而引起惡心、嘔吐、厭食、脫發(fā)、 潰瘍、炎癥等多種并發(fā)癥。在醫(yī)院里，許多患者沒有被病魔打倒卻被放化療引起的并發(fā)癥奪 取了生命。尤其是被迫中斷放化療的患者，由于患者抗病力較以前大大下降，病魔會以更快 的速度蔓延全身，威脅患者的生命。本著綜合治療、聯(lián)合用藥的原則，中西結合，在放化療 前、中、后的一段時間內(nèi)服用一些既抑制腫瘤生長、擴散，又能減輕放化療毒副反應的藥物， 取得更好的殺死腫瘤細胞的效果。人參有抗腫瘤、抗衰老、抗輻射等多種生物學活性。人參皂甙被公認是一類主要的有效成分，迄今已確定結構的至少在40種以上。人參皂甙-Rh2的 體內(nèi)、體外實驗已證實具有抑制癌細胞的繁殖與生長的作用。臨床前試驗研究顯示，該藥對 肺癌細胞、Morris肝癌細胞、小鼠的B16黑色素瘤細胞具有較明顯的特異性抑瘤作用。其作 用機理被認為是再分化誘導作用；既人參皂甙-Rh2并非直接殺傷癌細胞，而是使癌細胞在其 增殖過程中產(chǎn)生再分化。從而使癌細胞不能再增殖而停止在一定的繁殖期中，誘導其逆轉(zhuǎn)為 正常細胞。相反，與20 (S)-人參皂甙-Rh2分子結構相似的Rhl不但不抑制B16瘤細胞的生 長，反而明顯促進黑色素合成，且呈濃度依賴性關第。Rhl屬原人參三醇配基的皂甙，P-D-葡萄糖基結合在原人參三醇的C6位上，僅糖基結合位置之差異，其抑瘤作用大為不同'這說 明了分子構效關系的重要意義。因此廣大藥學工作者正在尋求大量生產(chǎn)Rh2的制備方法，這 對于研制一種高效低毒的抗癌天然藥物，以克服化學合成抗癌藥物的毒性，為癌癥病人解除痛苦具有重要意義。發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的公開一種先進、安全、方法簡單、收益率為35%以上的制取20 (S)-人參 皂甙-Rh,及混合物的生產(chǎn)工藝。本發(fā)明的目的是通過如下方案來實現(xiàn)。 本發(fā)明的技術構思分為四個部分 A精細有機化工提取有效成分 原料為人參、西洋參、三七、西洋參莖葉皂甙。 通式(1)式中R,、 R2、 R3分別為不同糖鏈。(1)式中-0R^H時，為原人參二醇系列皂甙，R^H時，為原人參三醇系列皂甙。 將(1)式的皂甙在強堿催化下在高沸點有機溶劑中水解，得20 (S)-人參皂甙混合物通 式(2);通式(2)式中R=glu-,A=H時為20 (S)-人參皂甙-Rh2; R=H， A-glu-0-時為20 (S) -人參皂 甙-Rh1; R=glu-glu， A=H時為20 (S)-人參皂甙-Rh3; R=A=H，為20 (S)-原人參二kl; R=H, A=0H 時，為20 (S)-原人參三醇。
將(2)式所示混合物用硅膠柱層析法，以氯仿-甲醇-乙酸乙酯-水(2: 2: 4: 1，下層)洗 脫，得(3)式化合物
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(3)式化合物為20 (S)-人參皂甙-Rh2。
B物理化學溫度的定位
發(fā)明者經(jīng)反復實驗，發(fā)現(xiàn)反應中的難度是溫度，溫度高反應速度快，而一般的溶劑，達 到沸點溫度，再無法提高溫度， 一般采用高壓釜進行高溫、高壓水反應。本發(fā)明采用高沸點 有機溶劑，在普通的容器中進行(1)式所示三萜皂甙堿性水解制備20 (S)-人參皂甙-Rh2 及其混合物。該法先進、安全、方法簡單、收率高、成本低，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
C回收率及藥物有效成分回收部分
1、 取人參皂甙100g，甘油600ml、氫氧化鈉100g于燒杯中，攪勻，沙浴加熱230。C最適 宜溫度)，恒溫加熱30min (最適宜加熱時間)，停止加熱，放置，待溫度降至約150。C，在強 烈攪拌下滴加水5000ml，水解產(chǎn)物自溶液中形成灰白色沉淀析出，過濾，水洗至中性，過濾 后將產(chǎn)物溶于500ml無水乙醇，過濾，回收溶劑，得20 (S)-人參皂甙混合物35g，收率35呢。
2、 20 (S)-人參皂甙混合物lOg，溶于30ml無水乙醇中，加硅膠15g，攪勻，沸水浴蒸干，研細、過200目篩，上硅膠H柱，用氯仿-甲醇-乙酸乙酯-水(2: 2: 4: 1，下層)洗脫，硅膠G板TIX檢測，噴10%硫酸，105。C加熱數(shù)分鐘，顯紫色斑點，回收溶劑，甲醇/水重結 晶，得20 (S)-人參皂甙-Rh21.2g，收率3% (以皂甙計算)。
D制備工藝
A組成原料為人參、西洋參、三七、西洋參莖葉皂甙。 (1) R,、 R2、 R3分別為不同糖鏈。(1)式中^OR3-H時，為原人參二醇系列皂甙，R產(chǎn)H時，為原人參三醇系列 皂甙。將(1)式的皂甙在強堿催化下在高沸點有機溶劑中水解，得20 (s)-人參皂 甙-處2組合物。通式(2)式中R-glu-， A-H時為20 (s)-人參皂甙-Rh2; R=H, A-glu-O-時為 20 (s)-人參皂甙-Rhi; R-glu-glu-, A-H時為20 (s)-人參皂甙-Rg3: R=A=H, 為20 (s)-原人參二醇R=H， A《H時，為20 (s)-原人參三醇。將(2)式所示化合物用硅膠柱層析法，以氯仿-甲醇-乙酸乙酯-水(2: 2: 4; 1，下層)洗脫，得(3)式化合物 B最佳實施方案發(fā)明者經(jīng)反復實驗，發(fā)現(xiàn)反應中的難點是溫度，溫度高反應速度快， 而一般的溶劑，達到沸點溫度，再無法提高溫度， 一般采用高壓釜進行高溫、高壓水解反應。 本發(fā)明采用高沸點有機溶劑，在普通的容器中進行(1)式所示三萜皂甙堿性水解制備20 (S) -人參皂甙-Rh2及其混合物。
具體實施方式
1、 取人參皂甙100g，甘油600ml、氫氧化鈉100g于燒杯中，攪勻，沙浴加熱230°C 最適宜溫度，恒溫加熱30min (最適宜加熱時間)，停止加熱，放置，待溫度降至約150°C， 在強烈攪拌下滴加水5000ml，水解產(chǎn)物自溶液中形成灰白色沉淀析出，過濾，水洗至中性， 過濾后將產(chǎn)物溶于500ml無水乙醇，過濾，回收溶劑，得20 (S)-人參皂甙混合物35g，收 率35%。2、 取20 (S)-人參皂甙混合物10g溶于30ml無水乙醇中，加硅膠15g，攪勻，沸水浴蒸干，研細、過200目篩，上硅膠H柱，用氯仿-甲醇-乙酸乙酯-水(2: 2: 4: 1，下層)洗脫，硅膠G板TLC檢測，噴10%硫酸，105。C。C加熱數(shù)分鐘，顯紫色斑點，回收溶劑，甲醇 /水重結晶，得20 (S)-人參皂甙-Rh2l. 2g,收率3% (以皂甙計算)。3、 20 (S)-人參皂甙Rh2生產(chǎn)工藝C實例
將從人參、西洋參、三七、西洋參莖葉中所得(1)式所示三萜皂甙為原料， 用強堿催化，在高沸點有機溶劑中水解。強堿是指甲醇鈉、甲醇鉀、氫氧化鈉、氫氧化鉀。高沸點有機溶劑是指正丁 醇、"丙二醇、丙三醇、二甘醇、聚乙二醇等。將(1)式所示三萜皂甙溶于髙沸點有機溶劑中，加強堿催化，溫度在50~400 'C,加熱l 4h,停止加熱，在攪拌下滴加水，水解產(chǎn)物形成固體自溶液中析出， 過濾，水洗至中性后減壓過濾，將濾后固體溶于無水乙醇中，過濾，回收溶劑， 得20 (s)-人參皂甙-處2組合物。 通式(2)式中R=gIu-， A=H時為20 (s)-人參皂甙-處2; R=H， A-gIu-O-時為 20 (s)-人參皂甙-Rh,; R=glu-glu-, A-H時為20 (s)-人參皂甙-1^3; R=A=H, 為20 (s)-原人參二醇；R=H, AK)H時，為20 (s)-原人參三醇。 4、 20 (s)-人參皂甙-11112生產(chǎn)工藝將(2)式所示化合物用硅膠柱層析法，以氯仿-甲醇-乙酸乙酯-7jC (2: 2: 4: 1，下層)洗脫，得(3)式化合物(3)(3)式為20 (s)-人參皂甙-Rh: 5、利用20 (s)-人參皂甙-11112組合物制成的制劑(顆粒劑，片劑，膠囊， 注射劑)本發(fā)明的積極效果提供先進、安全、方法簡單、收率高、成本低、適合工業(yè)化生產(chǎn)的制備20 (s)-人參皂甙-^2及組合物的生產(chǎn)工藝。20 (s)-人參皂甙-處2作為有效抗癌活性物質(zhì)，使20 (s)-人參皂武-1^2及 組合物的生產(chǎn)工藝實現(xiàn)工業(yè)化，對于開發(fā)新的抗癌藥物具有十分重要的意義 本發(fā)明的創(chuàng)造性通過實審時提供毒理、藥理動物實驗數(shù)據(jù)來實現(xiàn)。
權利要求
1. 一種從天然植物中提取20(S)-人參皂甙混合物的生產(chǎn)工藝，其特征在于以從人參、西洋參、三七、西洋參莖葉中所得式(l)所示的三萜皂甙為原料，將其在強堿催化下在高沸點有機溶劑中水解，得式(2)所示的20 (S)-人參皂武混合物；強堿選自甲醇鈉、甲醇鉀、氫氧化鈉或氫氧化鉀；高沸點有機溶劑選自正丁醇、丙二醇、丙三醇、二甘 醇或聚乙二醇；式(1)中R卜R2、 R3分別為不同糖鏈；ORfH時，為原人參二醇系列皂甙；R「H時，為原人參三醇系列皂甙；式(2)中l(wèi)^glu-， A^時為20 (S)-人參皂甙-Rh2; R=H， A=glu-o-時，為20 (S)-人參皂甙-Rh1; R=glu-glu-， A=H時為20 (S) -人參皂甙-Rg3; R=A=H時，為20 (S)-原 人參二醇；R=H， A=OH ，為20 (S)-原人參三醇。
2. 根據(jù)權利要求1所述的生產(chǎn)工藝，其特征在于三萜皂甙溶于高沸點有機溶劑中，加強堿催 化，溫度在50-400。C,加熱卜4h，停止加熱，在攪拌下滴加水，水解產(chǎn)物形成固體自溶液中 析出，過濾，水洗至中性后減壓過濾，將濾后固體溶于無水乙醇中，過濾，回收溶劑得20(S) -人參皂甙混合物。
3. 根據(jù)權利要求1或2所述的生產(chǎn)工藝，其特征在于取人參皂甙100g、丙三醇600ml、氫氧 化鈉100g于燒杯中，攪勻，沙浴加熱230。C，恒溫加熱30min，停止加熱，放置，待溫度降 至約150°C，在強烈攪拌下滴加水5000ml，水解產(chǎn)物自溶液中形成灰白色沉淀析出，過濾， 水洗至中性，過濾后將產(chǎn)物溶于500ml無水乙醇，過濾，回收溶劑，得20 (S)-人參皂甙混 合物35g。式(l)式(2)
全文摘要
本發(fā)明涉及從天然藥用植物中提取有效成分制備成藥方面的技術，具體是涉及從天然植物中提取20(S)-人參皂甙混合物的制備工藝。
文檔編號A61K31/7028GK101121743SQ200710140569
公開日2008年2月13日 申請日期2000年11月15日 優(yōu)先權日2000年11月15日
發(fā)明者宋春祥, 宋長春 申請人:山東綠葉天然藥物研究開發(fā)有限公司