專利名稱：：治療急性白血病的浙貝藥物組合物及其新用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種藥物組合物，特別是涉及一種治療急性白血病及其難治性急性白血病藥物組合物。技術(shù)背景白血病(acuteleukemia,AL)是造血組織常見的惡性腫瘤性疾病。其主要特征是白細胞異常增殖，病變部位累及骨髓、肝、脾、淋巴結(jié)，亦可累及其他組織器官。因增生的白血病細胞具有惡性腫瘤的生物學特征，亦稱為"血癌"。白血病自然發(fā)展過程并不可逆，治療無效或未治療的白血病患者多由白血病細胞惡性增殖導致相關(guān)嚴重并發(fā)癥而死亡。據(jù)有關(guān)資料顯示，白血病發(fā)生率約為3-4/10萬，占惡性腫瘤總發(fā)病率的5%。我國每年新增白血病患者40000多例。其中，20000多例患者是兒童。因白血病發(fā)病率在年輕人與兒童中不但占腫瘤發(fā)病率的首位，且近些年來死亡率在逐漸上升。所以，被列為我國十大高發(fā)性腫瘤之一。有資料表明，在白血病總發(fā)病中急性白血病明顯多于慢性病例。所以，開展急性白血病的基礎(chǔ)與臨床研究，設(shè)法提高臨床療效是當前醫(yī)患共同關(guān)注的熱點問題。當前，在急性白血病綜合治療方案中，化療亦然是其最重要的治療措施，年齡〈50歲并有供體的骨髓移植患者化療也是移植前處理必不可少的治療方法。近些年來，隨著新藥、新化療方案以及生物、靶向治療措施的臨床應用，的確給患者提供了更多的治療選擇，使治療受益率得到了明顯提高，特別是ALL患者可獲得長期存活的機會。但從臨床治療角度分析，并非所有的急性白血病患者對抗癌藥物具有良好的治療反應。有文獻表明，成人AL初治病例約有30%左右對化療方案缺乏敏感；CR后仍有60%左右最終復發(fā)而對化療方案產(chǎn)生抵抗；甚至部分病例在造血干細胞移植后依然復發(fā)并經(jīng)抗癌治療無效。這部分病例屬白血病難治類型。難治性急性白血病最明顯的特征是對抗癌藥物反應程度差，誘導緩解率低，生存期短，因而是急性白血病治療中的難題。對難治性急性白血病治療目前尚缺乏有效的應對措施，反復輪換化療方案、加大抗癌藥物劑量是臨床常用方法。但上述治療方式并未能給患者帶來良好的治療受益率，反而會因過度治療產(chǎn)生嚴重的毒性反應，使機體正常組織受到傷害、生活質(zhì)量下降而使疾病治療趨向更加復雜化，也使治療相關(guān)的醫(yī)療成本明顯增加，給患者和社會帶來了嚴重的經(jīng)濟負擔和重大損失。因此，尋求提高難治性急性白血病臨床療效的方法具有重要的臨床實用價值。難治性急性白血病發(fā)病機制①細胞遺傳學異常白血病診治已將遺傳學、分子生物學作為重要手段?，F(xiàn)代研究表明，難治性白血病與遺傳學特點密切相關(guān)。核型異常賦予疾病更兇險的性質(zhì)，對治療更加抵抗且難以達到CR和長期生存。染色體異常分為結(jié)構(gòu)和數(shù)目的異常，前者包括染色體的易位、缺失、倒置、重復和插入等；后者包括超二倍體、亞單倍體、單一染色體改變的非整倍體及嵌合體等。在ALL和AML的染色體異常中，部分改變發(fā)生概率較高。例如在ALL中，最常見的是超二倍體、t(9;22)、t(4;11)和del(6q);其次是t(8;14)、t(l;19)和del(9p)。在AML中，+8、t(8;21)、t(15;17)、和inv(16)是最為常見；其次是del(5q)、-7和llq23。此外，Ph陽性則是CML的最主要生物學特征。目前有大量的文獻資料表明，染色體異常與難治性白血病診斷以及預后密切相關(guān)。②免疫學異常自WHO提出急性白血病的細胞形態(tài)學、免疫學、遺傳學(MIC)分型以來，免疫表型在急性白血病診斷、治療策略制定、預后、微小殘留病檢測以及發(fā)病機制研究中地位有明顯提高。AML只有3個亞型可以通過免疫表型確診，為M。、M6、M7]。有學者認為白血病細胞強烈表達CD34，CD7,CD,3的CR率低，預后較差；而強烈表達CD33，CD1Q，CD19，CD^則CR率較高，預后較好[25]。但也有部分學者提出免疫表型的表達不能提示預后[26]。多數(shù)學者的觀點認為，F(xiàn)AB分型中M4、M5、M7以及免疫分型中CDu、CD14、CD19、cdm高表達者CR率低。0034是干/祖細胞表面分化抗原，與AML的低CR率和CR時間短顯著相關(guān)。ALL免疫表型分析可以判斷細胞來源，根據(jù)其來源分為T、B淋巴細胞白血病。在B細胞中MIC提出B-ALL的四分法，即:I型B-ALL(CD19+、TDT+、CDIO-、CIg-、Sig-)、II型CommonALL(CD19+、TDT+、CD10+、CIg-、Sig-)、III型Pre-B-ALL(CD19+、TDT+、CD10+、Cig+、Sig-)、IV型B-ALL(CD19+、TDT-、CD10-、CIg-、Sig+)。而n型m型預后較好，i型iv型預后差。另外對一些特殊白血病，如hcl(混合性白血病)、毛細胞白血病，免疫表型分析也有指導價值。③多藥耐藥多藥耐藥(MDR)是急性白血病難治的主要原因。MDR最早于1970年由Biedler和Riehm提出，一是指白血病細胞除對一種藥物耐藥外，也對其他結(jié)構(gòu)各異、作用機理完全不同的多種化療藥物產(chǎn)生交叉耐藥；二是指該耐藥機理受多方面因素調(diào)控。白血病多藥耐藥性可分為內(nèi)在性(原發(fā)性)和獲得性兩種類型。內(nèi)在性多藥耐藥是指白血病細胞固有對化療藥物不敏感；獲得性多藥耐藥是指白血病細胞在初始階段對化療藥物敏感，但經(jīng)過幾個療程化療后，不僅對該藥物產(chǎn)生耐藥，而且對結(jié)構(gòu)和作用機理不同的多種藥物也產(chǎn)生耐藥。據(jù)有關(guān)資料認為，有15%30%的病例屬原發(fā)性耐藥；60%80%的病例屬繼發(fā)耐藥。關(guān)于白血病多藥耐藥發(fā)生機制，目前認為主要有以下幾種細胞膜蛋白異常多藥耐藥基因1(MDR1)編碼的P-糖蛋白(Pgp)高表達被認為是產(chǎn)生MDR最主要的原因。當白血病細胞長期接觸抗癌藥物時，MDK基因被誘導擴增，并大量表達Pgp。有研究表明，Pgp具有"藥泵功能"，當抗癌藥物再次與Pgp結(jié)合時，其ATP結(jié)合點上連接的ATP水解后釋放的能量能使抗癌藥物轉(zhuǎn)移到細胞外，使細胞內(nèi)的藥物濃度始終維持在較低水平。Pgp在白血病細胞及正常組織中均有表達，在白血病細胞中高表達是為了降低白血病細胞內(nèi)抗癌藥物濃度；而在正常組織中表達是為了阻止有毒物質(zhì)進入正常組織或細胞內(nèi)，保護正常組織或細胞免受毒物傷害]。除Pgp夕卜，與MDR相關(guān)的其他膜蛋白還有多藥耐藥相關(guān)蛋白(MRP)、乳腺癌耐藥蛋白(BCRP)、肺耐藥相關(guān)蛋白(LRP)等，其耐藥機制與Pgp相似。酶表達異常在MDR細胞中尚有胞質(zhì)、胞核中蛋白質(zhì)(肽)的變化。如蛋白激酶C(PKC)活性的增強可導致MDR、拓撲異構(gòu)酶(TopoII)數(shù)量及活性的下降。由上述機制導致的耐藥被稱為非典型多藥耐藥，其特點是藥物在細胞內(nèi)積聚與留滯時間沒有變化，無PgP的過度表達，膜活性藥物不逆轉(zhuǎn)其耐藥性。但也有人認為，TopoII可與Pgp機制共見于典型的MDR中、谷胱甘肽(GSH)是機體中含量較高的一種含巰基三肽，主要功能為防止氧化劑對巰基的破壞與保護細胞膜中含巰基蛋白質(zhì)和含巰基酶不被氧化。在谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶(GST)催化下，GSH與化學藥物結(jié)合，從而降低化學藥物的細胞毒作用。細胞凋亡與相關(guān)基因異常有研究證明，細胞凋亡相關(guān)基因，如Bcl-2、BCR-ABL、c-myc、NF-kB、erbB2/neu、突變p53等的過度表達與白血病細胞的耐藥性有一定關(guān)系；且研究發(fā)現(xiàn)細胞凋亡相關(guān)基因為腫瘤耐藥的靶分子，可與其他途徑共同介導MDR。其他機制有報道認為MDR與腫瘤新生血管形成以及腫瘤壞死因子(TNF)、白介素-2(IL-2)等細胞因子有關(guān)系。此外，激素受體量和親和力改變、DNA損傷修復能力增強也可導致白血病細胞多藥耐藥性發(fā)生。難治性急性白血病治療①使用非交叉耐藥的化療方案難治和復發(fā)性白血病往往對一線治療藥物耐藥，應考慮換用或加用原方案未用過的新抗癌藥物，或加大化療藥物劑量。難治性ALL主要包括HD-MTX、HD-CTX、HD-Ara-C等聯(lián)合方案。難治性AML治療包括以阿糖胞苷(Ara-C)為基礎(chǔ)的聯(lián)合化療方案和以非Ara-C為基礎(chǔ)的聯(lián)合化療方案。大劑量藥物主要是阿糖胞苷，單用或加用二線藥物，如米托蒽醌(MTZ)，足葉乙甙(VP16)，氟達拉賓(Fludarabine)，左旋門冬酰胺酶(L-ASP)，拓撲替康(Topotecan)等。有研究表明，中等(lg/m2，Q12h)或大劑量(3g/m2，Q12h)Ara-C，一般CR率25%70%，多數(shù)報道CR率在40%50%，中位生存期<10個月，但早期死亡率高，總生存期反而縮短。大劑量Ara-C除血液學毒性增加外，可出現(xiàn)中樞神經(jīng)毒性，在老年患者尤應注意。②造血生長因子和化療藥物序貫應用有文獻報道采用氟達拉賓聯(lián)合Ara-C和G-CSF組成的FLAG方案治療復發(fā)性成人ALL12例，結(jié)果除l例死亡，l例耐藥外，其余10例全部達到完全緩解(83%),但完全緩解期并不理想，中位數(shù)25.5周。氟達拉賓、Ara-C、G-CSF聯(lián)合應用對難治性AML也有較為理想的臨床療效，但毒副作用有嚴重的骨髓抑制而需輸注紅細胞和血小板；此外，尚有藥物熱、惡心、嘔吐等副作用。③造血干細胞移植根據(jù)造血干細胞來源分為骨髓移植(BMT)或外周血干細胞移植(PBSCT)。根據(jù)供者來源又分為同基因、異基因和自體移植。鑒于急性白血病的復發(fā)率很高，如有合適供者，AML應爭取在CR1，ALL在CR2行異基因移植。難治性或復發(fā)性白血病采用傳統(tǒng)化療方案難于成為長期生存者，應力爭行異基因移植。④生物免疫治療急性白血病細胞通過各種機制逃逸機體的免疫監(jiān)視，而免疫治療則是通過各種方法調(diào)動機體自身的免疫反應以清除白血病細胞。對于難治及復發(fā)性急性白血病，還可在聯(lián)合化療的同時應用白細胞介素2(IL-2)或白細胞介素3(IL-3)以提高緩解率，降低緩解后的再復發(fā)。目前還沒有一種理想的治療藥物或方法在臨床被廣泛推廣應用，其主要原因有如下幾方面①現(xiàn)有逆轉(zhuǎn)劑大多為"代用品"，即老藥新用，逆轉(zhuǎn)耐藥往往不是其主要功能，臨床使用禁忌癥多，毒副作用大；②生物制劑在體內(nèi)不穩(wěn)定，難以作用到耙點細胞，且毒副反應多；③臨床耐藥往往是多種機制同時參與，只對單一機制起作用的逆轉(zhuǎn)劑難以發(fā)揮治療效應。因此，國內(nèi)外學者正致力于尋找高效、低毒、功能專一性強，且作用靶點廣泛的白血病多藥耐藥逆轉(zhuǎn)劑。中醫(yī)藥是我國的寶貴財富，在幾千年臨床實踐中為保障中華民族繁衍與昌盛發(fā)揮了至關(guān)重要作用。長期臨床實踐證明，中藥配合或輔助化療治療白血病，能夠明顯改善患者臨床癥狀，提高緩解率與生存質(zhì)量，延長生存期。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明目的在于提供一種治療難治性急性白血病的藥物組合物；本發(fā)明目的在于提供浙貝在制備治療難治性急性白血病藥物中的應用；本發(fā)明目的在于提供浙貝在制備圍化療期中輔助治療難治性急性白血病藥物中的應用；本發(fā)明目的在于提供浙貝在制備治療急性淋巴細胞白血病藥物中的應用；本發(fā)明目的在于提供浙貝在制備治療急性髓細胞性白血病藥物中的應用；本發(fā)明目的在于提供浙貝在制備治療難治性急性白血病藥物中的應用；本發(fā)明目的在于提供浙貝藥物組合物在制備圍化療期中輔助治療難治性急性白血病藥物中的應用；本發(fā)明目的在于提供浙貝藥物組合物在制備治療急性淋巴細胞白血病藥物中的應用；本發(fā)明目的在于提供浙貝藥物組合物在制備治療急性髓細胞性白血病藥物中的應用；本發(fā)明的技術(shù)方案為浙貝在制備治療難治性急性白血病藥物中的應用；浙貝在制備治療急性淋巴細胞白血病藥物中的應用；浙貝在制備治療急性髓細胞性白血病藥物中的應用；浙貝在制備圍化療期中輔助治療難治性急性白血病藥物中的應用；浙貝在制備圍化療期中輔助VDCP治療難治性急性白血病藥物中的應用;浙貝在制備圍化療期中輔助VAMP治療難治性急性白血病藥物中的應用；浙貝在制備圍化療期中輔助VDLP治療難治性急性白血病藥物中的應用；浙貝在制備圍化療期中輔助VAMP/L4治療難治性急性白血病藥物中的應用；浙貝在制備圍化療期中輔助DA治療難治性急性白血病藥物中的應用；浙貝在制備圍化療期中輔助HA治療難治性急性白血病藥物中的應用；浙貝在制備圍化療期中輔助HAE治療難治性急性白血病藥物中的應用；浙貝在制備治療難治性急性白血病藥物中的應用，其中具體是降低患者骨髓白血病細胞；浙貝在制備治療難治性急性白血病藥物中的應用，其中具體是降低外周血白血病細胞數(shù)值；浙貝在制備治療男性患難治性急性白血病藥物中的應用；本發(fā)明藥物組合物的原料藥組成及配比如下(按重量份)浙貝母5—20重量份，漢防己5—20重量份，川芎2—12重量份；本發(fā)明所述的浙貝藥物組合物，浙貝母5—20重量份，漢防己5—20重量份，川芎2—12重量份，可以按照現(xiàn)有技術(shù)進行提取，如水煎煮3-5次，每次1-2小時，合并煎液，濃縮，按常規(guī)工藝加入輔料制成片劑、膠囊、口服液、滴丸、噴霧劑、顆粒劑等臨床可接受的劑型；所述輔料包括溶劑、崩解劑、矯味劑、防腐劑、著色劑、粘合劑、潤滑劑、基質(zhì)等。本發(fā)明所述的浙貝藥物組合物，可以采用提取物投料的方式，即浙貝母5—20重量份，漢防己5—20重量份，川芎2—12重量份，單味藥單獨進行提取，然后再組合，按常規(guī)工藝加入輔料制成片劑、膠囊、口服液、顆粒劑等臨床可接受的劑型；所述輔料包括溶劑、崩解劑、矯味劑、防腐劑、著色劑、粘合劑、潤滑劑、基質(zhì)等。浙貝藥物組合物在制備治療難治性急性白血病藥物中的應用，其中浙貝藥物組合物浙由如下重量份的藥物制成的浙貝母5—20重量份，漢防己5一20重量份，川考2—12重量份；浙貝藥物組合物在制備治療急性淋巴細胞白血病藥物中的應用；浙貝藥物組合物在制備治療急性髓細胞性白血病藥物中的應用；浙貝藥物組合物在制備圍化療期中輔助治療難治性急性白血病藥物中的應用；浙貝藥物組合物在制備輔助長春新堿治療難治性急性白血病藥物中的應用；浙貝藥物組合物在制備輔助環(huán)磷酰胺治療難治性急性白血病藥物中的應用；浙貝藥物組合物在制備圍化療期中輔助VDCP治療難治性急性白血病藥物中的應用；浙貝藥物組合物在制備圍化療期中輔助VAMP治療難治性急性白血病藥物中的應用；浙貝藥物組合物在制備圍化療期中輔助VDLP治療難治性急性白血病藥物中的應用；浙貝藥物組合物在制備圍化療期中輔助V鮮/L4治療難治性急性白血病藥物中的應用；浙貝藥物組合物在制備圍化療期中輔助DA治療難治性急性白血病藥物中的應用；浙貝藥物組合物在制備圍化療期中輔助HA治療難治性急性白血病藥物中的應用；浙貝藥物組合物在制備圍化療期中輔助HAE治療難治性急性白血病藥物中的應用；浙貝藥物組合物在制備治療難治性急性白血病藥物中的應用，其中具體是降低患者骨髓白血病細胞；浙貝藥物組合物在制備治療難治性急性白血病藥物中的應用，其中具體是降低外周血白血病數(shù)值；浙貝藥物組合物在制備治療男性患難治性急性白血病藥物中的應用；本發(fā)明所述的浙貝單味藥可以按照現(xiàn)有技術(shù)進行提取，按常規(guī)工藝加入輔料制成片劑、膠囊、口服液、顆粒劑等臨床可接受的劑型；所述輔料包括溶劑、崩解劑、矯味劑、防腐劑、著色劑、粘合劑、潤滑劑、基質(zhì)等。浙貝母、川芎、漢防己三味中藥組成。浙貝母，苦，寒。歸肺、心經(jīng)。具有"化痰止咳，清熱散結(jié)"功效。浙貝開泄力大，清火散結(jié)力強，除了能止咳化痰之外，長于治瘰疬、癭瘤、瘡癰等癥?！侗窘?jīng)》記載貝母主治"傷寒煩熱，淋瀝邪氣，疝痂，喉痹乳難，金瘡風痙"?！侗静莘暝酚涊d"浙產(chǎn)者治疝瘕、喉痹、乳難、金瘡、風痙，一切癰瘍"。兩者所列病癥皆以實證為主，且甄權(quán)曰"貝母主項下瘤癭疾"。因浙貝具有化痰消瘰、清火散結(jié)功效，在方中為君藥。川芎，辛、溫。歸肝、膽、心包經(jīng)。具有"活血行氣，祛風止痛"功效。臨床可用于血行不暢，血脈瘀阻引起的血瘀證候，在方中為臣藥，與君藥配伍以發(fā)揮行氣、化痰、活血、止痛效果。防己，苦、辛、寒，歸膀胱、腎、脾經(jīng)。功效祛風濕，止痛，利水。該藥祛濕、利水可配合浙貝阻截生痰之源；止痛可配合臣藥消除瘀滯、舒緩疼痛。方中三藥相互配合，相互為用，可發(fā)揮"化痰活血、行氣解郁"功效。根據(jù)臨床研究(下述浙貝顆粒(由單藥浙貝母提取)、復方浙貝配方顆粒(以下簡稱配方顆粒)(由浙貝母12克，漢防己12克，川芎6克組成復方后提取)、復方浙貝顆粒配方(以下簡稱顆粒配方)(由貝母12克，漢防己12克，川芎6克分別提取后組方)，提取工藝按常規(guī))按急性白血病臨床療效評定標準評定臨床療效，結(jié)果顯示，配方顆粒完全緩解率、部分緩解率、總有效率分別為42.0%、38.0%、80.0%;顆粒配方分別為42.3%、31.0%、73.0%;浙貝顆粒分別為36.1%、41.7%、77.8%;安慰劑分別為25.8%、27.3%、53.0%。四組病例整體療效比較，經(jīng)Z檢驗，有統(tǒng)計學意義(K0.05)。對其結(jié)果進一步分析可以看出，配方顆粒、顆粒配方、浙貝顆粒三組分別與安慰劑組比較，有統(tǒng)計學意義(/M).002、0.011、0.01)，治療三組療效明顯優(yōu)于安慰劑；配方顆粒與顆粒配方、配方顆粒與浙貝顆粒以及顆粒配方與浙貝顆粒組間臨床療效比較，無統(tǒng)計學意義(/M).654、0.480、0.836)。臨床研究結(jié)果提示，浙貝顆粒以及以浙貝為君藥組成的復方不同提取方法制備的顆粒臨床療效相似。但從受試三組病例臨床總有效率的絕對百分數(shù)分析，似乎可以看出，有配方顆粒優(yōu)于浙貝顆粒，浙貝顆粒優(yōu)于顆粒配方的療效趨勢。這一結(jié)論為新藥研發(fā)提供了重要臨床依據(jù)。對骨髓白血病細胞影響治療前受試各組骨髓白血病細胞數(shù)比較，經(jīng),檢驗，無統(tǒng)計學意義(尸〉ftQW。治療結(jié)束后，配方顆粒、顆粒配方、浙貝顆粒分別與安慰劑比較，經(jīng),檢驗，有統(tǒng)計學意義(代0.05);配方顆粒分別與顆粒配方、浙貝顆粒、安慰劑比較，經(jīng)尸檢驗，有統(tǒng)計學意義(/^=0.03、0.02、0.005)。降低骨髓白血病細胞意味受試藥物能增加化療藥物對白血病細胞的殺傷效應。因配方顆粒能明顯降低患者骨髓白血病細胞數(shù)，因而可以獲得較好的臨床療效。但對療效機制有待進一步研究。對外周血象的影響治療前受試各組外周血象之Hgb、RBC、WBC、PLT比較，經(jīng),檢驗，無統(tǒng)計學意義(》0.05)。治療2周后各組病例外周血象(Hgb、RBC、WBC、PLT)比較，經(jīng),檢驗(,=1.005、0.195、1.108、0.123)，無統(tǒng)計學意義(/M).391、0.899、0.346、0.946)。療程結(jié)束后各組病例的Hgb、RBC、PLT比較，經(jīng),檢驗(F=0.898、0.148、0.182)，無統(tǒng)計學意義(/M).442、0.931、0.909)。但WBC計數(shù)各組間比較，經(jīng)F檢驗(F=2.836)，有統(tǒng)計學意義(/M).039)。其中，配方顆粒、浙貝顆粒分別與安慰劑比較，經(jīng)尸檢驗，有統(tǒng)計學意義(/^0.02、0.009)。外周血WBC增高是急性白血病臨床特點之一，而藥物顯效的最終結(jié)局是用外周WBC下降，骨髓白血病細胞減少。從臨床研究結(jié)果分析，配方顆粒、浙貝顆粒優(yōu)于顆粒配方、安慰劑臨床緩解率的直接證據(jù)除降低骨髓白血病細胞外，也降低外周血WBC。按照臨床實際，在急性白血病圍化療期抗癌藥物在發(fā)揮效應的同時，會使外周血WBC明顯降低。多數(shù)結(jié)局是賴以細胞刺激因子的臨床應用。但從統(tǒng)計數(shù)據(jù)可以看出，上述兩種受試藥物并沒有使患者外周血WBC降至最低水平。這一結(jié)局說明，配方顆粒、浙貝顆粒在發(fā)揮療效的同時，對骨髓有一定的保護效能。下述實驗例用于進一步說明本發(fā)明實驗例1浙貝顆粒、配方顆粒、顆粒配方的臨床總療效1設(shè)計方案、1.1研究原則參照國家食品藥品監(jiān)督管理局《藥品臨床試驗管理規(guī)范》(GCP)將符合入選與排除病例標準的患者隨機分組，并在圍化療期內(nèi)進行14天的雙盲期治療。研究者將在給藥后第14天、化療結(jié)束時對受試者進行訪視，并提供對浙貝顆粒、復方浙貝配方顆粒與復方浙貝顆粒配方有效性和安全性進行評估的各種數(shù)據(jù)，并記錄在病例報告表(CRF)上。1.2樣本量計算樣本數(shù)量計算是依據(jù)該課題前期預臨床試驗結(jié)果估算，即對難治性急性白血病(多藥耐藥性白血病)患者采用單純化療方案的有效率(完全緩解率+部分緩解率)約為35.0%，而化療聯(lián)合浙貝母顆粒及其配方治療有效率(完全緩解率+部分緩解率)約為58.6%，在統(tǒng)計學把握度為90%，第I類錯誤概率為0.05,按組間l:l設(shè)計，治療組與對照組比較，具有統(tǒng)計學意義。需的樣本量為每組90例。1.3藥品編盲與管理1.3.1藥品編盲隨機化方法采用SAS軟件，由計算機產(chǎn)生隨機排列表進行分組，以保證組間均衡性。設(shè)定兩次揭盲，第一次揭盲是在盲態(tài)核查數(shù)據(jù)鎖定后，由保存盲底的工作人員將治療組別以指定的相應字母(如A、B、C、D)后交由統(tǒng)計分析之用。第二次揭盲是在統(tǒng)計分析及臨床研究總結(jié)草稿完成后，由保存盲底工作人員宣布A、B、C、D各組治療藥物。1.3.2藥物發(fā)放藥物制備將完全符合雙盲要求。所有受試藥品將根據(jù)每位受試者臨床用藥量進行包裝，受試藥物按療程一次性發(fā)放，受試藥包裝中含有A或B或C或D藥各48袋，可供患者14天用藥加2天備份。2技術(shù)路線2.1病例選擇標準2.1.1急性白血病診斷標準參照1987年全國血液病學術(shù)會議有關(guān)內(nèi)容擬定①發(fā)病較急，發(fā)熱，貧血，出血呈進行性加重，常伴有胸骨壓痛、淋巴結(jié)及肝脾腫大；②血紅蛋白和血小板急劇下降，外周血中常見白血病細胞，可超過30%以上;③骨髓增生極度活躍，以白血病細胞為主，原始細胞+早(幼)細胞可》30%;紅系及巨核細胞減少；④應用細胞形態(tài)學、細胞化學、免疫學檢查可確定白血病類型(AML、ALL)。各臨床亞型診斷標準參見張之南主編《血液病診斷與療效標準》。2.1.2難治性白血病(耐藥性)診斷標準參考1999年10月第二屆全國難治性白血病研討會福州會議關(guān)于難治性急性白血病診斷標準的建議(草案)修定①經(jīng)標準化療2個療程未獲完全緩解；②臨床完全緩解后經(jīng)正規(guī)強化、鞏固治療過程中復發(fā)；③由慢性急性變或由骨髓異常增生綜合征(RAEB或RAEBT型)轉(zhuǎn)化的急性白血病，經(jīng)標準1個化療療程未緩解；④雜合(混合)白血病或兼有2個或2個以上異?？乖磉_，經(jīng)標準1個化療療程未緩解；⑤初診時外周血白細胞計數(shù)〉100.0X107L。2.1.3入選病例標準凡符合下列條件者可作為入選病例①符合急性白血病診斷標準與難治性白血病診斷標準中的任何l項；②自愿受試，并簽署知情同意書；③未參加其它臨床試驗。2.1.4排除病例標準凡符合下列條件之一者可作為排除病例①合并有心、腦、肝、腎疾??；②精神?。?D青光眼；④妊娠、哺乳期婦女；⑤已知對該藥過敏；⑥年齡小于10歲，大于75歲；⑦參加其它臨床研究。2.1.5剔除病例標準有下列條件之一者為剔除病例①未按規(guī)定用藥，無法判定臨床療效；②臨床資料不全，影響療效與安全性評估；③病例入組后發(fā)現(xiàn)不符合入組標準。2.1.6中止和撤除病例標準中止和撤除病例標準如下①不能堅持治療；②臨床研究過程中出現(xiàn)嚴重不良反應或嚴重并發(fā)癥；③病情加重，需要采取積極措施治療。3.1治療方法3.1.1化療方案①ALL可選擇VDCP、VAMP、VDLP、VAMP+L4種化療方案。②AML選擇DA、HA、HAE3種化療方案。ALL化療常用化療方案方案藥物用法用量VDCPVDLPVAMPVAMP+LVCR(長春新堿)臓(柔紅霉素)CTX(環(huán)磷酰胺)Pred(強的松)VCRDNRLasp(左旋麥門冬酰胺酶)PredVCRAra-C(阿糖胞苷)MTX(甲氨蝶呤)PredVCRAra-CMTXLaspDXM(地塞米松)2mg，靜脈注射，第1,8,15，22日30mg40rag/ra2，靜脈滴注，第1，8，15,22日650mg/m2,靜脈滴注，第1日40mg60mg/m2，口服，第128日28天為一療程，療效結(jié)束評估血象、骨髓象，適當休息后，進行下一療程2rag，靜脈注射，第1,8，15,22日3040rag/m2，靜脈滴注，第1,8,15，22日6000U/m2,靜脈滴注，第1728日40mg60mg，口服，第128日28天為一療程，療效結(jié)束評估血象、骨髓象，并適當休息后，進行下一療程2mg，靜脈注射，第l日200mg500mg，靜脈滴注，第1~5日1000mg3000mg，靜脈滴注，第1曰40mg60mg/ni2，口服，第17日療程結(jié)束后，間歇1014天，評估血象、骨髓象，進行下一療程2mg,靜脈注射，第l日200mg500mg,靜脈滴注，第15日1000mg3000mg，靜脈滴注，第l日10000U，靜脈滴注，第2,4，6，8日10mg，靜脈注射，第110日療程結(jié)束后，間歇1014天，評估血象、骨髓象后，進行下一療程ANLL常用化療方案方案藥物用法用量DAHAHAE鵬Ara-CHT(高三尖衫酯堿)Ara-CHTAra-CVP-16(足葉乙武)40mg/m2,靜脈滴注，第13日100rag150mg/ra2，靜脈滴注，第15日或17日療程結(jié)束后，間歇714天，評估血象、骨髓象后，進行下一療程2rag4mg/ra2，靜脈滴注，第15日100mg150mg/m2，靜脈滴注，第15或17日2mg4mg/m2,靜脈滴注，第15日100mg150mg/m2,靜脈滴注，第15日或17日100mg,靜脈滴注，第15日療程結(jié)束后，間歇714天，評估血象、骨髓象后，進行下一療程3.1.2受試藥物浙貝顆粒(由單藥浙貝母提取)、復方浙貝配方顆粒(由浙貝母12克，漢防己12克，川芎6克組成復方后提取)、復方浙貝顆粒配方(由貝母12克，漢防己12克，川芎6克分別提取后組方)；受試藥為顆粒飲片，安慰劑(麥芽提取)亦為顆粒飲片。受試藥、安慰劑原料藥購置、顆粒制備、包裝、編盲等均由首創(chuàng)大地藥業(yè)有限公司(現(xiàn)更名為未名天人藥物有限公司)完成。3.1.3給藥方法在使用化療方案的同時，于化療開始前3天加用不同受試藥物，受試藥物劑量與服用方法如下①浙貝顆粒每次1袋(相當生藥量10克)，每日3次；②復方浙貝配方顆粒每次1袋(相當三味生藥量IO克)，每日3次；③復方浙貝顆粒配方每次1袋(相當三味生藥量10克)，每日3次；④安慰劑組每次1袋(相當麥芽量10克)，每日3次。3.1.4研究周期:每組病例連續(xù)給藥14天，以標準化療療程為治療周期。若一個療程無效，該份病例經(jīng)洗脫期后可再次入選，作為另一病例進行入組觀察。3.2觀測指標與療效標準3.2.1觀察指標以"臨床緩解率(依據(jù)骨髓象判定)"、受試藥不良反應(包括生命體征、血象、尿便常規(guī)、心電圖、肝腎功能)為重點觀察指標。對有條件的單位要求檢測Pgp、MRP、LRP表達幅度或陽性率。3.2.2療效標準根據(jù)1987年11月在江蘇蘇州召開的全國白血病化學治療討論會標準擬定療效評定標準。(1)完全緩解(CR):①骨髓象原始粒細胞I+II型(原單+幼單細胞或原淋+幼淋細胞)《5%，紅細胞及巨核細胞系正常。其中，M2b型一原粒I型+11型《5%，中性中幼粒細胞比例在正常范圍；M4型一原粒I、11型+原單及幼單細胞《5%;Me型一原粒I、11型《5%，原紅+幼紅及紅系細胞比例基本正常；M逸一粒、紅兩系比例基本正常，原巨+幼巨細胞基本消失。②血象Hb》100g/L(男)或90g/L(女)，中性粒細胞絕對值》1.5X10VL，血小板》100X107L，外周血分類中無白血病細胞。③臨床表現(xiàn)臨床無白血病細胞浸潤所致的癥狀和體征，生活正?；蚪咏！?2)部分緩解(PR):骨髓原粒細胞I+II型(原單+幼單或原淋+幼淋)>5%且《20%，或臨床表現(xiàn)、血象兩項中有l(wèi)項未達完全緩解標準者。(3)未緩解(NR):骨髓象、血象及臨床表現(xiàn)3項均未達上述標準。3.3統(tǒng)計處理統(tǒng)計分析將采用SAS6.12統(tǒng)計分析軟件進行計算。4.1入組病例資料4.1.1病例來源依據(jù)臨床研究方案中制定的病例納入標準，入選病例295例。其中，脫落病例15例，280例具有較為完整的統(tǒng)計學數(shù)據(jù)。其中，配方顆粒71例、顆粒配方71例、浙貝顆粒72例、安慰劑66例。4.1.2人口學資料各組病例年齡、性別資料見表l-2。_表l.年齡比較卩^)__配方顆粒顆粒配方浙貝顆粒_安慰劑_f尸均值(標準誤)41.45(18.67)39,52(18.87)41.31(18.79)37.94(18.55)0.5380.656最/j^^:ft^^_10~80_1075_1280_1276_表l各組年齡比較，經(jīng),檢驗，無統(tǒng)計學意義(尸,ftO)，具有可比性。表2.性別情況比較組另ij例數(shù)男性女性男女配方顆粒7140(56.3%)31(43.7%)1.290:1顆粒配方7150(70.4%)21(29.6%)2.381:1浙貝顆粒7241(56.9%)31(43.1%)1.323:1安慰劑組6639(59.1%)27(40.9%)1.444:13.8780.275從表2可以看出，各組病例中男性均多于女性。但組間比較，經(jīng)x2檢驗，無統(tǒng)計學意義(》0.05)，具有可比性。4.1.3其他人口學資料①身高配方顆粒、顆粒配方、浙貝顆粒、安慰齊!J患者身高分別為163.65±10.56cm、165.19±13.30cm、164.12±10.47cm、164.00±9.04cm，經(jīng)方差分析，無統(tǒng)計學意義(F二O.245，》0.05)。②體重配方顆粒、顆粒配方、浙貝顆粒、安慰劑患者體重分別59.73土11.67Kg、61.83±14.81Kg、62.42±10.71Kg、59.78±12.13Kg，經(jīng)方差分析，無統(tǒng)計學意義(,=0.859，P〉0.05)。③血壓配方顆粒、顆粒配方、浙貝顆粒、安慰劑患者高低血壓分別為114.45士11.61mmHg、116.24±13.15mmHg、116.21±13.25mmHg、114.44±13.60mmHg與71.37±8.28mmHg、73.55±9.84mmHg、72,11±7.83mmHg、71.15土7.46mmHg。經(jīng)方差分析，高低壓均無統(tǒng)計學意義(,=0.441，P〉0.05;,=1.158，P〉0.05)，具有可比性。體溫配方顆粒、顆粒配方、浙貝顆粒、安慰劑患者體溫分別為37.07士0.72°C、37.07土0.79。C、36.92±0.63°C、36.99±0.60。C，經(jīng)方差分析，無統(tǒng)計學意義(,二0.777，》0.05)。⑤心率配方顆粒、顆粒配方、浙貝顆粒、安慰劑患者心率分別為88.31±9.62次/分、87.46±11.34次/分、85.41±8.61次/分、85.80±9.29次/分，經(jīng)方差分析，無統(tǒng)計學意義(尸=1.381，/M).05)。4.1.4病情基線資料分型、病程、化療療程、疾病分類、骨髓白血病細胞數(shù)、外周血象等病情資料見表3-8。表3.臨床分型比較組另lj亂ALLMDS—亂CML—AMLMM其它x2尸配方顆粒32(45.1%)23(32.4%)3(4.2%)5(7.1%)4(5.6%)4(5.6%)顆粒配方33(46.5%)23(32.4%)4(5.6%)7(9.9%)2(2.8%)2(2.8%)17.1870.3卩8浙貝顆粒36(50.0%)26(36,1%)3(4.2%)2(2.8%)5(36.9%)0(0%)安慰劑組36(54.5%)15(22.7%)6(9.1%)5(7.7%)1(1.5%)3(4.5%)從表3可以看出，各組病例AML占大多數(shù)，其次是ALL，而其他類型所占比例較少。各組病例臨床分型情況比較，經(jīng)f檢驗，無統(tǒng)計學意義(ZM).05)，具有可比性。表4.病程比較組另lj<6個月》6個月》12個月配方顆粒41(57.7%)18(25.4%)12(16.9%)顆粒配方43(60.6%)13(18.3%)15(21.1%)浙貝顆粒21(29.2%)26(36,1%)25(34.7%)安慰劑組27(40,9%)21(31.8%)18(27.3%)19.6480.003表4病程資料比較，經(jīng)502檢驗，有統(tǒng)計學意義(K0.05)。進一步進行組間比較，配方顆粒與浙貝顆粒比，有統(tǒng)計學意義(/^0.002);顆粒配方與浙貝顆粒比，有統(tǒng)計學意義(/b0.001);其余各組間比較，無統(tǒng)計學意義(》0.05)。上述結(jié)果提示，配方顆粒、顆粒配方、安慰劑入組病例以病程<6個月為主；浙貝顆粒以》6個月為主。_表5.既往化療療程_組另j_《2療程_<6療程_》6療程_^_^配方顆粒32(45.1%)14(19.7%)顆粒配方37(52.1%)17(23.9%)浙貝顆粒10(13.9%)31(43.1%)安慰劑組29(43.9%)12(18.2%)表5各組病例既往化療療程資料比較，經(jīng)f檢驗，有統(tǒng)計學意義(尺O.001)。進一步行組間比較，配方顆粒與浙貝顆粒比，有統(tǒng)計學意義(~0.000);顆粒配方與浙貝顆粒比較，有統(tǒng)計學意義(/^0.000);浙貝顆粒與安慰劑比，有統(tǒng)計學意義(/^O.OOO)。配方顆粒、顆粒配方安慰劑入組病例以《2個療程化療為主；浙貝顆粒以<6個化療療程為主。表6.白血病分類情況組另ljNR2復發(fā)轉(zhuǎn)化ALMDR'WBC>100X109/L配方顆粒29(40.8%)23(32.4%)8(11.3%)3(4.20%)8(11.3%)顆粒配方32(45.1%)21(29.6%)5(7.00W6(8.50%)7(9.則浙貝顆粒38(52.8%)21(29.2%)3(4.20%)2(2.80%)8(11.1%)安慰劑組24(36.4%)22(33.3%)3(4.50%)12(18.2%)5(7.60%)從表6可以看出，入組的病例以化療兩個療程未緩解及治療后復發(fā)病例為主。各組間白血病分類型比較，經(jīng)502檢驗(5C2=0.754)，無統(tǒng)計學意義(K0.05)。表明入組時各組病例白血病分類基本相似。表7.骨髓原始+早(幼)細胞數(shù)(^±"組另ij骨髓原始+早(幼)細胞數(shù)(%)^尸配方顆粒55.23±28.73顆粒配方浙貝顆粒54.83±31.2749.45±27.49o'564o'639安慰劑組53.50±27.89表7顯示各組間骨，瞳原+早(幼)細胞數(shù)比較，經(jīng)F檢驗，無統(tǒng)計學意義(/^>0.05),具有可比性。表8.外周血象比較卩±0組別Hgb(g/dL)RBC(X109)WBC(X109)PLT(X109)配方顆粒8.14土2.322.66±0.8138.53±54.2683.72±75.13顆粒配方7.78±2.782.55±0.8422.90±44.5190.39±84.61浙貝顆粒8.50±2.762.71±0.8719.96±33.59104.28±98.58安慰劑組8.19±2.742.68±0.8522.78±35.2697.60±113.2225(35.2%)17(23.9%)31(43.1%)25(37.9%)30.5950.000表8顯示各組間Hgb、RBC、WBC、PLT比較，經(jīng)F檢驗，/^0.873、0.477、2.743、2.743，無統(tǒng)計學意義(AO.05)，具有可比性。4.2治療資料4.2.1化療方案在執(zhí)行過程中由于各臨床單位用藥習慣不同，化療方案差別較大，相對較分散。其中，AML應用較多的化療方案有DA、HA、MAE等；部分病例采用ACM+Ara-C、MIT單藥、Ara-C單藥、VCAD、HA+DNR等化療方案。ALL多應用VDCP、VACP、VAMP、VCMP方案。4.2.2合并用藥合并用藥有效記錄共43例，其中，配方顆粒組12例，顆粒配方組ll例，浙貝顆粒組15例，安慰劑組組5例。用藥情況包括保肝藥、止吐藥、升白藥、止血藥、抗感染藥物等臨床方案允許的藥物。但部分單位合并用藥情況記錄不完整，對保肝藥物、止吐藥物等使用合并用藥未予記錄；部分單位記錄不準確，將化療用藥記在合并用藥處，導致最終有效記錄較少，不能全面反映入組病例合并用藥情況。4.3臨床總療效依據(jù)臨床方案制定的臨床療效標準，各組病例臨床總療效與有效性比較見表9-10。表9..總療效比較(n，%)組另IJ例數(shù)完全緩解(CR)部分緩解(PR)未緩解(NR)Z尸配方顆粒7130(42.3%)27(38.0%)14(19.7%)顆粒配方7130(42.3%)22(31.0%)19(26.8%)11.560.009浙貝顆粒7226(36.1%)30(41.7%)16(22.2%)安慰劑組6617(25.8%)18(27.3%)31(47.0%)從表9可以看出，各組病例整體療效比較，經(jīng)Z檢驗，有統(tǒng)計學意義(代0.05)。對其結(jié)果進一步分析顯示配方顆粒、顆粒配方、浙貝顆粒三組分別與安慰劑比較，有統(tǒng)計學意義(/M).002、0.011、0.01)。說明治療三組臨床療效明顯優(yōu)于安慰劑組；配方顆粒與顆粒配方、配方顆粒與浙貝顆粒、顆粒配方與浙貝顆粒組間療效比較，無統(tǒng)計學意義(/M).654、0.480、0.836)。上述結(jié)果提示，配方顆粒、顆粒配方、浙貝顆粒三組臨床療效相似。表IO.有效性比較(n，％)<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>注有效-CR+PR，無效二NR表10經(jīng)f檢驗，有統(tǒng)計學意義(代O.Ol)。對各組間有效性進一步比較顯示配方顆粒、顆粒配方、浙貝顆粒三組分別與安慰劑組比較，具有統(tǒng)計學意義(ZM).OOl、0.014、0.002)，表明治療三組臨床有效性明顯優(yōu)于安慰劑組；配方顆粒與顆粒配方、配方顆粒與浙貝顆粒、顆粒配方與浙貝顆粒組間有效性比較，無統(tǒng)計學意義(/M).320、0.713、0.528)。從臨床有效性分析也表明，配方顆粒、顆粒配方、浙貝顆粒三組臨床療效相似。但從有效性絕對值分析，看出有配方顆粒優(yōu)于浙貝顆粒，浙貝顆粒優(yōu)于顆粒配方的療效趨勢。實驗例2浙貝顆粒、配方顆粒、顆粒配方對白血病細胞影響(設(shè)計方案、技術(shù)路線、治療方法、觀測指標與療效標準、統(tǒng)計處理、入組病例資料、治療資料同實驗例l)治療結(jié)束后骨髓原始+早(幼)細胞數(shù)以及治療前、后原始+早(幼)細胞差值(療前減療后)比較見表11-12。表ll.骨髓原始+早(幼)細胞數(shù)值比較(％)<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>從表ll可以看出，骨髓原始+早(幼)細胞數(shù)值，經(jīng)F檢驗，有統(tǒng)計學意義(K0.05)。進一步分析結(jié)果，配方顆粒分別與浙貝顆粒、安慰劑比較，有統(tǒng)計學意義(^=0.02、0.005)。上述結(jié)果說明，配方顆粒輔助化療能有效的降低患者骨髓白血病細胞數(shù)是臨床獲得最佳療效的關(guān)鍵。表12.骨髓原始+早(幼)細胞差值分析(％)組另IJ例數(shù)X±5尸配方顆粒6642.20±34.18顆粒配方5332.59±37.422.9830.032浙貝顆粒6326.10±30.34安慰劑組5927.41±34.00從表12可以看出，治療前后骨髓原始+早(幼)細胞差值比較，經(jīng),檢驗，有統(tǒng)計學意義(代0.05)。其中，配方顆粒分別與浙貝顆粒、安慰劑比較，有統(tǒng)計學意義(~0.008、/^0.016)。上述結(jié)果與表12基本一致。說明配方顆粒降低患者骨髓白血病細胞幅度較大，具有明顯的療效優(yōu)勢。實驗例3浙貝顆粒、配方顆粒、顆粒配方對外周血象影響(設(shè)計方案、技術(shù)路線、治療方法、觀測指標與療效標準、統(tǒng)計處理、入組病例資料、治療資料同實驗例l)對治療2周后各組病例血象(Hgb、RBC、WBC、PLT)統(tǒng)計，結(jié)果見表13-16。表13.治療2周后外周血象分析(i土O組另ljHgb(g/dl)rbc(xio'7l)wbc(X107L)plt(X107L)配方顆粒7.25±2.172.48±0.785.56±8.97066.92±58.72顆粒配方7.59±2.012.54±0.716.34±15.0965.16±59.01浙貝顆粒7.72±1.842.54±0.703.68±4.93072.28±81.97安慰劑組7.89±2.432.58±0.698.14±20.1669.37±73.39治療2周后各組病例外周血象分析顯示Hgb、RBC、WBC、PLT數(shù)值經(jīng)尸檢驗(,=1.005、0.195、1.108、0.123)，無統(tǒng)計學意義(/M).391、0.899、0.346、0.946)。從治療兩周時間段很難看出配方顆粒、顆粒配方、浙貝顆粒與安慰劑之間在影響患者外周血象方面優(yōu)勢。表14.治療2周前后外周血象差值比較(^土0組另ljHgb(g/dl)rbc(xio'7l)WBC(xio7l)PLT(x107L)配方顆粒0.90±2.240.11±0.9035.05±53.8414.27±76.47顆粒配方0.22±2.200.02±0.6415.15±37.0926.87±63.84浙貝顆粒0.74±2.300.09±0.6215.80±34.1433.30±98.18安慰劑組0.38±1.830.14±0.6014.60±35.0031.83±111.84治療2周前后各組病例外周血象差值分析顯示①Hgb、RBC、PLT數(shù)值經(jīng),檢驗，無統(tǒng)計學意義(/^0.272、0.821、0.623);②WBC數(shù)值經(jīng)F^^邀，有統(tǒng)計學意義(/^0.013)。進一步比較顯示，配方顆粒與顆粒配方、浙貝顆粒、安慰劑比較，有統(tǒng)計學意義(7^0.034、0.045、0.035)。表15.療程結(jié)束后外周血象分析(i士O組另ljHgb(g/dl)rbc((xio7l)wbc(xio7l)plt(X107U配方顆粒7.78±2.282.70±0.785.25±7.67094.90±76.85顆粒配方8.02±2.322.67±0.748.27±16.5689.97±75.49浙貝顆粒8.22±2.252,66±0.754.41±6.08084.31±70.31安慰劑組8.38±2.282.74±0.7112.03±28.4293.47±131.4療程結(jié)束后各組病例間Hgb、RBC、PLT數(shù)值比較，經(jīng)尸^^激F二0.898、0.148、0.182)，無統(tǒng)計學意義(/M).442、0.931、0.909);WBC經(jīng),澄發(fā)(F=2.836)，有統(tǒng)計學意義(ZM).039)。其中，配方顆粒、浙貝顆粒分別與安慰劑比較，有統(tǒng)計學意義(/^0.02、0.009)。表16.治療前后外周血象差值比較(^±0組另ljHgb(g/dl)RBC(X1012/l)WBC(X107L)plt(x107l)配方顆粒0.36±2.64-0.11±0.933.29±54.67-11.74±76.29顆粒配方—0.24±2.70-0.13±0.7614.63±43.00-0.53±87.28浙貝顆粒0.28±3.000.Ol士O.8215.55±33.7220.24±99.19安慰劑組—0.17±2.32-0.05±0.7311.08±41.345.49±131.40治療前后各組間Hgb、RBC、PLT差值比較，經(jīng)尸檢驗，無統(tǒng)計學意義(尸=0.439、0.784、0.307);WBC計數(shù)各組間比較，經(jīng)f檢驗，有統(tǒng)計學意義(/^0.014)。配方顆粒分別與顆粒配方、浙貝顆粒、安慰劑比較，有統(tǒng)計學意義(7^0.032、0.045、0.010)。英文縮略語5-adc5-Aza-deoxycytidine5-氮脫氧胞苷ABCATP-bindingcassetteATP結(jié)合盒ADMAdriamycin阿霉素ALAcuteLeukemia急性白血病ALLAcuteLymphocyticLeukemia急性淋巴細胞白血病AMSAAmsacrine安丫啶亂AcuteMyeloidLeukemia急性髓細胞性白血病ANLLAcuteNon-lymphocyticLeukemia急性非淋巴細胞白血病Ars-CCytosinearabinoside阿糖胞苷BCRPBreastcancerresistanceprotein乳腺癌耐藥蛋白BgBasicgroup堿基CATChloramphenicolacetyl-transferase氯霉素乙酰轉(zhuǎn)移酶CBPCarboplatin卡鉑CLLChronicLymphocyticLeukemia慢性淋巴細胞白血病CMLChronicmyelogenousLeukemia慢性粒細胞白血病CRCompleteRemissionCRFCaseReportFormCsACyclosporinACTXCyclophosphamideDAGDiglycerideDDPcisplatin-diamminedichloroplatinumDFSDiseasefreesurvivalDNRDaunorubicinDXMDexamethasoneEUSAEnzyme-linkedImmunosorbentassayFABFrench-American-BritishCo-operativegroupsFluFludarabineGCPGoodClinicalPracticeG-CSFGranulocytecolonystimulatingfactorGSHGlutathioneGSTGlutathione-S-transferaseHHTHemohairingtonineHIF-lHypoxiainduciblefactor-1HREHypoxicResponsiveElementHSPHeatShockProteinIFNInterferonIL-2Interlukin-2LRPLungresistance—relatedproteinM7MDRMultidrugResistanceMDSMyelodysplasticsyndromeMICMMorphologyimmunologycytogeneticsmolecularbiologyMMCMitomycinMTp53Mutantp53MTZMitoxantroneMRPMultidrugResistance-associatedProtainMTXMethotrexateMVPNBFNucleotidebindingfoldsNF-HNF-kBnuclearfactorkB完全緩解病例報告表環(huán)孢素A環(huán)磷酰胺二酰甘油順鉑無病生存率柔紅霉素地塞米松酶聯(lián)免疫吸附試驗法美英協(xié)作組氟達拉賓藥品臨床試驗管理規(guī)范粒細胞集落刺激因子谷胱甘肽谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶高三尖杉酯堿缺氧誘導因子-l缺氧反應元件熱休克蛋白干擾素白細胞介素-2肺耐藥相關(guān)蛋白急性粒細胞白血病未分化型急性粒細胞白血病部分分化型急性顆粒增多的早幼粒細胞白血病急性粒-單核細胞白血病急性單核細胞白血病急性紅白血病急性巨核細胞白血病多藥耐藥骨髓增生異常綜合征細胞形態(tài)學、免疫學、遺傳學、分分子生物學絲裂霉素突變型P53米托蒽醌多藥耐藥相關(guān)蛋白甲氨喋呤鼠主要穹窿蛋白結(jié)合核苷酸的蛋白折疊區(qū)域神經(jīng)絲三聯(lián)體重鏈蛋白細胞核因子kBNONitrogenMonoxidum一氧化氮鵬NitricoxideSynthase一氧化氮合酶NRNoneRemission未緩解PgpPermeabilityglycoproteinP-糖蛋白PKCProteinKinaseC蛋白激酶cPRPartiaRemission部分緩解MLRefractoryacuteleukemia難治性急性白血病RT-PCRReverseTranscription-polymeraseChainRaction逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應SWOG西南腫瘤組TAXtaxol紫杉醇TMDTrsnsniembrsnedomain跨膜區(qū)域TNFTumorNecrosisFsctor腫瘤壞死因子TopoTopoisomferase拓撲酶TPAphorbolester佛波酯TPTT0p0tec3n拓撲替康TSAtrichostain曲古抑菌素VCRVincristine長春新堿VDSVindesine長春地辛VEGFVascularEndothelialGrowthFactor血管內(nèi)皮生長因子VP-16Etoposide依托泊甙，足葉乙甙WTp53Wildtypep53野生型P53下述實施例均能夠?qū)崿F(xiàn)上述實驗所述的效果具體實施方式實施例1:浙貝母片劑制備方法是將浙貝母堿醇和水或者水或者酸水的提取物混合均勻，并加相應輔料制成片劑。實施例2:浙貝母膠囊制備方法是將浙貝母堿醇和水或者水或者酸水的提取物混合均勻，并加相應輔料制成膠囊劑。實施例3:浙貝母口服液制備方法是將浙貝母堿醇和水或者水或者酸水的提取物混合均勻，并加相應輔料制成口服液。實施例4:復方浙貝顆粒由浙貝母120克，漢防己130克，川芎70克制備方法是將浙貝母、川芎、漢防己加3-4倍量水煎煮3次，每次l小時，合并煎液，濃縮，干燥，制粒，加入常規(guī)輔料制成顆粒劑。實施例5:復方浙貝片劑由浙貝母120克，漢防己120克，川芎60克制備方法是將浙貝母、川芎、漢防己加3-4倍量水煎煮3次，每次l小時，合并煎液，濃縮，干燥，加入常規(guī)輔料制成100片。實施例6:復方浙貝膠囊制備方法是將浙貝母、川芎、漢防己堿醇和水或者水或者酸水的提取物混合均勻，并加相應輔料制成膠囊劑。實施例7:復方浙貝口服液制備方法是將浙貝母、川芎、漢防己堿醇和水或者水或者酸水的提取物混合均勻，并加相應輔料制成口服液。實施例8:復方浙貝顆粒劑制備方法是將浙貝母、川芎、漢方己堿醇和水或者水或者酸水的提取物混合均勻，并加相應輔料制成顆粒劑。權(quán)利要求1.一種治療急性白血病及其難治性急性白血病的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物的原料藥組成為貝母5-20重量份，漢防己5-20重量份，川芎2-12重量份。2.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物中的原料藥組成為貝母12重量份，漢防己12重量份，川芎6重量份。3.如權(quán)利要求1或2所述的藥物組合物制備方法，其特征在于該方法為按常規(guī)工藝制成片劑、膠囊、口服液或顆粒劑中的任何一種。4.如權(quán)利要求1或2所述的藥物組合物在制備治療急性淋巴細胞白血病藥物中的應用。5.如權(quán)利要求1或2所述的藥物組合物在制備治療急性髓細胞性白血病藥物中的應用。6.如權(quán)利要求1或2所述的藥物組合物在制備圍化療期中輔助治療難治性急性白血病藥物中的應用。7.如權(quán)利要求1或2所述的藥物組合物浙貝藥物組合物在制備輔助長春新堿治療難治性急性白血病藥物中的應用。8.如權(quán)利要求1或2所述的藥物組合物在制備輔助環(huán)磷酰胺治療難治性急性白血病藥物中的應用。9.如權(quán)利要求1或2所述的藥物組合物在制備治療難治性急性白血病中降低患者骨髓白血病細胞藥物中的應用。10.如權(quán)利要求1或2所述的藥物組合物在制備治療難治性急性白血病中降低外周血白血病細胞數(shù)值藥物中的應用。全文摘要本發(fā)明公開了一種治療急性白血病及其難治性急性白血病藥物，該藥物組合物的原料藥組成為貝母5-20重量份，漢防己5-20重量份，川芎2-12重量份。浙貝組合物輔助化療提高難治性急性白血病臨床療效方面的應用；本發(fā)明通過大量實驗，以臨床緩解率為臨床療效評價指標，以心、肝、腎功能等為安全性指標檢測指標，結(jié)果證明，浙貝組合物在輔助化療提高難治性急性白血病臨床療效方面具有較好臨床療效，也具有較好臨床用藥安全性。文檔編號A61K9/20GK101125175SQ20071014339公開日2008年2月20日申請日期2007年8月23日優(yōu)先權(quán)日2007年7月24日發(fā)明者麗侯,苗姜,李冬云,陳信義申請人:北京中醫(yī)藥大學東直門醫(yī)院